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Procedimento Operacional Padro DOSAGEM DA PROTEINRIA

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PROTEINRIA-PP
FUNDAMENTO Em meio cido, as protenas reagem com o vermelho de pirogalol e o molibdato formando um complexo colorido, cuja absorbncia medida em 600 nm, diretamente proporcional concentrao de protenas na amostra analisada. APLICAO CLNICA A dosagem de Protenas na Urina empregada principalmente para avaliar doenas renais. Sua determinao no lquor auxilia na abordagem laboratorial de doenas neurolgicas. AMOSTRA Preparo do Paciente Instruir o paciente como coletar corretamente a urina de 24 horas. Amostras utilizadas Urina e Lquor. Coletar a urina, medir o volume e conserv-la entre 2-8C. Estabilidade e armazenamento da amostra Na urina, o analito estvel por 8 dias entre 2-8 C. Amostras de lquor so estveis 4 dias entre 2-8C. Volume ideal utilizado para anlise (Definir o volume ideal a ser encaminhado para anlise). Volume mnimo utilizado para anlise (Definir o volume mnimo a ser encaminhado para anlise). Critrios para rejeio da amostra No usar amostras de lquor com presena de sangue. Fazer referncia ao manual ou POP de coleta, separao e distribuio de material. REAGENTE UTILIZADO PROTEINRIA-PP CAT. 498 MS 80022230078

GOLD ANALISA DIAGNSTICA LTDA CNPJ 03.142.794/0001-16 Av. Nossa Senhora de Ftima, 2363 Belo Horizonte MG Brasil Farmacutico Responsvel: Homero Jackson de Jesus Lopes CRF MG - 2010 Componentes do kit Conservar entre 2-8C. 1- Padro - Contm Albumina bovina 50 mg/dL. O Padro rastrevel ao Standard Reference Material SRM 927 do National Institute of Standards and Technology NIST. 2- Reagente de Cor Contm Tampo pH 2,3, vermelho de pirogalol 60 mol/L, molibdato sdico 40 mol/L, succinato 50 mmol/L, lauril sulfato de sdio 1 g/L. Estabilidade Os reagentes so estveis at o vencimento da data de validade impressa no rtulo do produto e na caixa quando conservados na temperatura recomendada, bem vedados e se evite a contaminao durante o uso. Sinais de deteriorao 1- Presena de partculas e turbidez indicam deteriorao dos reagentes. 2- A absorbncia do Reagente de Cor medida contra gua em 600 nm dever ser inferior a 0,290 e superior a 0,170. Precaues e Cuidados Especiais 1- Aplicar os cuidados habituais de segurana na manipulao dos reagentes e amostra biolgica. 2- Recomendamos o uso das Boas Prticas de Laboratrios Clnicos para a execuo do teste. 3- De acordo com as instrues de biossegurana, todas as amostras deve m ser manuseadas como materiais potencialmente infectantes. 4- Aconselhamos no pipetar diretamente do frasco do Reagente de Cor (2) para evitar contaminao.

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5- Descartar os reagentes e as amostras de acordo com as resolues normativas locais, estaduais e federais de preservao do meio ambiente. EQUIPAMENTOS Procedimento Tcnico Manual Espectrofotmetro (leitura em 600 nm 20 nm); Tubos e Pipetas; Banho-maria ou termostatizador; Cronmetro. Procedimento Tcnico Automatizado Citar nome, modelo e o local onde se encontra o equipamento; Fazer referncia ao manual ou POP para utilizao do mesmo. Procedimento Tcnico Alternativo Citar o equipamento alternativo e os procedimentos para medio dos ensaios. Indicar as possveis diferenas quando os procedimentos manuais substiturem os procedimentos automatizados. Procedimento em Analisadores Automticos Mencionar o manual ou POP para utilizao do equipamento analtico. Anexar o guia de aplicao dos reagentes para o sistema automtico. Interferncias A hematria produz resultados falsamente elevados. A presena de detergentes na vidraria pode alterar significativamente os resultados. PROCEDIMENTO Procedimento Manual A- Condies de Reao Leitura: Comprimento de onda 600 nm (580 a 620 nm) Medida: Acertar zero de absorbncia com o tubo Branco Tipo de reao: Ponto final. B-Tcnica de Anlise Ateno: Centrifugar as amostras para obteno de melhores resultados. 1- Identificar os tubos de ensaio e pipetar: Tubos gua destilada Amostra Padro (1) Branco 50 L Teste 50 L Padro 50 L

Reagente de Cor (2) 1000 L 1000 L 1000 L 2- Homogeneizar e incubar os tubos durante 5 minutos a 37C. 3- Ler a absorbncia do Padro (Ap) e do Teste (At) zerando o aparelho com o Branco em 600 nm. 4- A cor estvel durante 30 minutos. CLCULOS Ver Linearidade. Concentrao do Padro = CP CP = 50 mg/dL. Absorbncia do Padro = AP Concentrao do Teste = CT Absorbncia do Teste = AT Exemplo Se AP = 0,412 Se AT = 0,466 CP = 50 mg/dL FC = CP AP = 50 0,412 = 121 CT = FC AT = 121 0,466 = 56, 4 mg/dL = 56 mg/dL

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Proteinria em mg/ 24horas Se volume urinrio de 24 horas = 1300 mL mg/ 24 horas = mg/dL Volume urinrio de 24h em mL 100 mg/24 horas = 56 1300 = 728 mg/24h 100 Proteinria = 728 mg/24h 2- Dosagem no Lquor Dosar as protenas do lquor empregando o mesmo procedimento da urina. Exemplo Se AP = 0,412 Se AT = 0,225 CP = 50 mg/dL FC = CP AP = 50 0,412 = 121 CT = FC AT = 121 0,225 = 27 mg/dL Protenas no lquor = 27 mg/dL Ateno Esta tcnica de dosagem adequada para fotmetros cujo volume mnimo de soluo para leitura igual ou menor do que 1000 L. O analista sempre deve fazer uma verificao da necessidade de ajuste do volume para o fotmetro empregado no seu laboratrio. Os volumes de amostra e de reagente podem ser modificados proporcionalmente, sem alterar o desempenho do teste e os clculos. Em caso de reduo dos volumes necessrio observar o volume mnimo de leitura fotomtrica. Volumes da amostra menores do que 10 L so crticos em aplicaes manuais e devem ser usados com cautela porque aumentam a impreciso da medio. RESULTADOS No aplicvel. CONTROLE DA QUALIDADE Materiais Identificar os materiais de controle interno e externo da qualidade, citando fabricante e nmero de catlogo. Referenciar POP para limpeza e secagem dos materiais utilizados. Controle Interno Descrever a calibrao peridica de pipetas, equipamentos utilizados, controle de temperatura ambiente e geladeiras para armazenamento dos kits. Citar a utilizao de soros controles (nvel normal cdigo --------- e patolgico cdigo -------) nas anlises realizadas juntamente com a freqncia da utilizao dos mesmos. Descrever o procedimento de verificao de novos lotes de controles e reagentes. Citar POP para controle interno. Controle Externo Descrever os procedimentos utilizados nas avaliaes de qualidade feitas por programas de comparao entre laboratrios ou outros controles de qualidade: PNCQ-SBAC e/ou PELM-SBPC Gerenciamento dos dados obtidos no Controle Interno e Externo Definir como os dados de controle so arquivados e gerenciados. Fazer referncia ao manual ou POP de garantia da qualidade. VALORES DE REFERNCIA Urina Crianas e adultos Urina de 24 horas: at 150 mg/24horas Amostra aleatria: at 15 mg/dL

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Lquor Adultos: 15 a 45 mg/dL Crianas e adolescentes At 30 dias: 0 a 153 mg/dL De 31 a 90 dias: 15 a 93 mg/dL At 2 anos: 15 a 48 mg/dL Acima de 2 anos: 15 a 45 mg/dL Estes valores devem ser usados como uma orientao. recomendado que cada laboratrio estabelea seus prprios valores de referncia. SIGNIFICADO CLNICO Esta dosagem utilizada na avaliao de enfermidades renais. A eliminao de protenas pela urina um indcio de disfuno renal. Na sndrome nefrtica h um comprometimento renal em nvel de glomrulo, onde ser observada uma alterao capilar glomerular. A sndrome nefrtica causada por doenas sistmicas, neoplasias, distrbios circulatrios, drogas etc, onde ser observada uma alterao na membrana filtrante glomerular e uma fuso e perda dos processos podais, espessamento da membrana basal que ter como conseqncia hipermeabilidade (passagem excessiva de protenas-proteinria). LINEARIDADE A reao linear at 100 mg/dL. Para valores maiores diluir a amostra com NaCI 150mmol/L(0,85%) e repetir a determinao. Multiplicar o resultado obtido pelo fator de diluio. LIMITAES DO MTODO Os resultados devero ser usados em conjunto com informaes disponveis da avaliao clnica e outros procedimentos diagnsticos. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS 1- Burtis CA, Ashwood ER. Tietz Fundamento de Qumica Clnica, 4a Ed - Guanabara Koogan; 1998. 2- Gornall AG, Bardawill CS, David MM. J Biol Chem 1949; 177:751. 3- Kaplan A, Szabo LL, Opheim KE. Clinical Chemistry: Interpretation and Techniques, Philadelphia: Lea & Febiger 1988:145-166. 4- Orsonneau JL et al. Clin Chem 1989; 35:2233-2236. 5- Tietz NW. Fundamentals of Clinical Chemistry. W.B. Saunders Co., Philadelphia, 1970. 6- Watanabe N et al. Clin Chem 1986; 32:1551-1544 7- Weichselbaun TE. Am J Clin Path 1946;10:49. 8- PROTEINRIA-PP, Instrues de Uso, Gold Analisa Diagnstica. Nome Elaborado por: Aprovado por: Implantado por: Substitui POP: Revisado por: Revisado por: Revisado por: Desativado por: Razo: Nmero Cpias
Reviso 04/11 Liberado Fernanda

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Data ___/___/___ ___/___/___ ___/___/___ ___/___/___ ___/___/___ ___/___/___ ___/___/___

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