619

Bioatividade de leos essenciais no controle de Botrytis cinerea isolado de morangueiro

LORENZETTI, E.R.1,2*; MONTEIRO, F.P.1; SOUZA, P.E.1; SOUZA, R.J.1; SCALICE, H.K.1; DIOGO JR, R.1; PIRES, M.S.O.1 1 UFLA Universidade Federal de Lavras. Campus Universitrio. Caixa Postal 3037, 37200-000 Lavras - MG. 2 Instituto Federal de Educao, Cincia e Tecnologia Sudeste de Minas Gerais Cmpus Rio Pomba. Av. Dr Jos Sebastio da Paixo s/n Bairro Lindo Vale 36180-000, Rio Pomba MG. Email para correspondncia: elorenzetti@gmail.com

RESUMO: Objetivou-se avaliar o uso de leos essenciais sobre isolados de Botrytis cinerea, causador do mofo cinzento em morangueiro. Foram testados leos essenciais de capim-limo, palmarosa, citronela, cravo, canela, menta, lavanda, tangerina, eucalipto, melaleuca, alecrim e laranja, todos estes analisados em cromatgrafo a gs acoplado a detector de massas, para identificao dos principais componentes dos leos. Foram avaliados o crescimento micelial, produo e germinao de condios de B. cinerea, com a incorporao do leo no meio de cultura. Realizou-se ainda uma avaliao de volteis e a eficincia de leos em isolado resistente a fungicida. Para cada teste, diferentes leos apresentaram eficincia, contudo capim limo, palmarosa, canela e menta demonstraram os melhores efeitos em todos os testes realizados. Todos os tratamentos a base de leos demonstraram efeito semelhante a um fungicida recomendado para a cultura, a base de tiofanato metlico. Dois tratamentos mostraram-se efetivos no caso de isolado resistente (leo de capim limo e de canela). leos essenciais mostram-se como opo promissora para o desenvolvimento de possveis produtos fitossanitrios para o manejo de doenas em plantas. Palavras-Chave: Fragaria x ananassa Duch. Ex. Rozier, agricultura orgnica, resistncia a fungicidas, controle biolgico, leos essenciais, Botrytis cinerea. ABSTRACT: Essential oils bioactivity in strawberry grey mould control. This study aimed evaluates essential oils in Botrytis cinerea isolates growth, which causes gray mould on strawberry. Were tested essential oils of lemon grass, palmrose, citronella, clove, cinnamon, mint, lavender, tangerine, eucalyptus, tea tree, rosemary and orange. The oils were analyzed in gas chromatograph attached to mass detector for identifying the mainly oils components. Were evaluated mycelial growth, conidia production and conidia germination of B. cinerea, with oil incorporation in culture medium. Were conducted an evaluation of oils volatile components and the efficiency of oils in fungicide-resistant isolate. For each test, different oils showed efficiency, however lemongrass, palmarosa, cinnamon and mint showed the best effects in all tests. All treatments demonstrated similar effects to recommended fungicide for the culture, which had methyl thiophanate. Two treatments (lemon grass and cinnamon oils), were effective against resistant isolate. Essential oils are shown as promising option for development of possible product for plant disease management. Keywords: Fragaria x ananassa Duch. Ex. Rozier, organic agriculture, fungicide resistance, biological control, essential oil, Botrytis cinerea.

INTRODUO A produo mundial de morango, em 2009, foi de 4.178.152 toneladas em uma rea de 254.523 ha (FAO, 2011). Para o Brasil existem poucas informaes disponveis quanto produo. Contudo,
Recebido para publicao: agosto de 2011 Aceito para publicao: dezembro de 2011

estima-se que a produo nacional esteja em torno de 105 mil toneladas, em 4 mil hectares. Minas Gerais o maior produtor nacional de morangos, segundo o Instituto Brasileiro de Frutos (IBRAF), com cerca de

Rev. Bras. Pl. Med., Botucatu, v.13, especial, p.619-627, 2011.

620

40 mil toneladas/ano, o equivalente a 40% da produo nacional, seguido por So Paulo com 29 mil tonelada/ano e depois, Rio Grande do Sul, Santa Catarina, Paran, Esprito Santo e Rio de Janeiro, respectivamente (Antunes, 2010). O Sul de Minas Gerais destaca-se, contando com os principais municpios produtores, Pouso Alegre com uma rea de 300 ha, Estiva, com 250 ha e Bom Repouso, 240 ha (Carvalho, 2006). Alm da questo econmica para a regio, no contexto social a cultura apresenta notvel importncia, por ser basicamente uma atividade ligada agricultura familiar. Torna-se, assim, fonte de emprego e renda para famlias inteiras nas regies produtoras (Camargo Filho & Camargo, 2009). Um dos grandes problemas relacionado cultura seu manejo, principalmente pela presena significativa de doenas fngicas, associada ao reduzido nmero de produtos registrados. Destas doenas o mofo cinzento, causado pelo fungo Botrytis cynerea, destaca-se por acometer o morango desde o campo at a ps-colheita (Simon et al., 2005). Para o controle destas doenas, as aplicaes de fungicidas so feitas, na maioria das vezes, de maneira incorreta e excessiva, ocasionando problemas de contaminao, alm de resistncia de fungos a determinados princpios ativos (Ghini & Kimati, 2002). Com o aumento da demanda por produtos rastreveis e de maior qualidade, consequentemente com maior valor agregado, novas tecnologias so necessrias para que o manejo fitossanitrio possa ser feito de uma forma menos agressiva, tanto em termos ambientais quanto econmicos e sociais (Dayan et al., 2009). Em cultivos orgnicos, uma tendncia em expanso, novos produtos so desejados para atender as necessidades impostas pelas atuais normas de controle fitossanitrio. Contudo, o avano da agricultura orgnica esbarra na falta de subsdios advindos de pesquisas mais elaboradas no manejo dessas doenas. Assim, o emprego de produtos alternativos mostra-se como uma opo vivel, dentre estes produtos enquadram-se os leos essenciais de plantas medicinais e aromticas (Stangarlin, 2007). Estes leos apresentam constituintes complexos e variveis, como hidrocarbonetos terpnicos, lcoois simples e terpnicos, aldedos, cetonas, fenis, steres, teres, xidos, perxidos, furanos, cidos orgnicos, lactonas, cumarinas e compostos de enxofre, dentre os quais se destacam os de baixo peso molecular, como os monoterpenos e sesquiterpenos (Simes & Spitzer, 2000). Vrios so os trabalhos demonstrando a efetividade da ao de leos essenciais no controle de doenas de plantas. Ranashinge et al. (2002) testando o leo essencial de cravo comprovaram sua

ao antifngica contra fungos de ps-colheita isolados de banana, Lasiodiplodia theobromae, Colletotrichium musae e Fusarium proliferatum. Anaruma et al. (2010) testando 28 leos essenciais, constataram a atividade de 15 deles contra Colletotrichum gloeosporioides (Penz.) Sacc., agente da antracnose em maracuj-amarelo (Passiflora edulis Sims f. flavicarpa Deg). Dos leos testados, o de capim-limo apresentou desempenho semelhante aos fungicidas. leos ricos em eugenol, como o caso do leo de cravo, mostraram-se eficientes no controle de diversos patgenos ps-colheita de frutas, dentre eles Botrytis cinerea, isolado de uva (Combrinck et al., 2011). leos essenciais de plantas da famlia Lamiaeceae, organo (Origanum syriacum L. var. bevanii), lavanda (Lavandula stoechas L. var. stoechas) e alecrim (Rosmarinus officinalis L.), demonstraram efeito no controle de B. cinerea em tomateiro, sendo o leo de organo o mais eficiente (Soylu et al, 2010). Considerando a importncia da cultura do morango e a necessidade do estabelecimento de formas de controle alternativas, objetivou-se avaliar o uso de leos essenciais de plantas medicinais e aromticas no controle de mofo cinzento do morangueiro.

MATERIAL E MTODO O trabalho foi realizado no laboratrio de Epidemiologia e Controle de Doenas de Plantas do Departamento de Fitopatologia (DFP) e na Central de Anlise e Prospeco Qumica do Departamento de Qumica (DQI), ambos localizados na Universidade Federal de Lavras (UFLA), em Lavras MG. Obteno dos leos essenciais e identificao de componentes qumicos Os leos essenciais empregados nos experimentos foram, segundo a famlia botnica ao qual pertencem: Famlia Lamiaceae - alecrim (Rosmarinus officinalis), menta (Mentha pipertita), lavandim (Lavandula hybrida); Famlia Lauraceae tea tree (Melaleuca alternifolia); Famlia Myrtaceae canela (Cinnamomum zeilanicum), cravo (Syzigium aromaticum), eucalipto (Corymbia citriodora); Famlia Poaceae - citronela (Cymbopogon nardus), capim limo (Cymbopogon citratus) e palmarosa (Cymbopogon martini) e Famlia Rutaceae - laranja doce (Citrus sinensis var. dulcis), tangerina (Citrus nobilis var. tangerinae). Todos os leos foram adquiridos da empresa Florananda Indstria e Comrcio de Cosmticos e Produtos Naturais, localizada no municpio de Ja, Estado de So Paulo. A anlise f itoqumica dos leos para identif icao dos componentes foi f eita em cromatgrafo a gs acoplado a detector de massas (GCMS-QP2010 Plus, Shimadzu). O cromatgrafo

Rev. Bras. Pl. Med., Botucatu, v.13, especial, p.619-627, 2011.

621

gasoso utilizou o hlio ultrapuro como gs de arraste com fluxo de 1,8mL.min-1, temperatura do injetor em 220C, modo de injeo Split de 1:15, injeo manual, tempo de corrida estabelecido em 70 minutos, em coluna Equily-5 (30 m x 0,25 mm x 0,25 m), com forno da coluna, a 60C, por 2 minutos, aquecimento a 3C.min-1 at 240C, permanecendo em 240C por 15 minutos. O espectrmetro de massas utilizou a interface GC-MS, a 250C, com fonte de ons a 200C e modo de ionizao por impacto de eltrons a 70eV. Os componentes dos leos essenciais foram identificados mediante comparao dos ndices de similaridade de espectro de massa (reas relativas em porcentagem) apresentados com os dados disponveis na biblioteca do prprio cromatgrafo (FFNSC 1.2). Obteno dos isolados de B. cinerea Os isolados patognicos de B. cinerea foram obtidos a partir de isolamento direto de estruturas fngicas de pseudofrutos de morangueiro infectados, coletados em rea experimental do Setor de Olericultura Departamento de Agricultura (DAG) da UFLA e em rea de cultivo comercial no municpio de Tocos do Moji - MG. Para o isolamento, estruturas fngicas presentes nos pseudofrutos coletados foram transferidas para placas de Petri contendo meio de cultura BDA (Batata Dextrose e gar) com o auxlio de microscpio esteroscpio. Seis isolados purif icados f oram mantidos em cmaras de crescimento do tipo BOD, a 23 C e sob fotoperodo de 12 horas. Para avaliao da patogenicidade, pseudof rutos de morangueiro prev iamente higienizados em gua corrente e desinfestados com hipoclorito de sdio a 2% (NaClO 2%) e gua destilada foram inoculados, atravs de suspenso de esporos, com os isolados obtidos e mantidos em temperatura ambiente em recipientes plsticos, semelhantes aos utilizados para comercializao. Posteriormente foi observada a presena e severidade de sintomas das doenas causadas pelos patgenos. Dos isolados obtidos, um mostrou-se resistente a fungicida base de tiofanato metlico, sendo empregado em um dos experimentos. Dentre os outros isolados escolheuse um com patogenicidade alta para a realizao dos demais experimentos. Bioatividade de leos essenciais no crescimento micelial, produo de condios e germinao de condios de B. cinerea Para os testes de crescimento micelial dos patgenos, foram empregados os leos essenciais de capim-limo, palmarosa, citronela, cravo, canela, menta, lavanda, tangerina, eucalipto, melaleuca, alecrim e laranja; nas concentraes de 125 e 1000ppm. Estas concentraes foram escolhidas baseadas em experimentos anteriores, sendo 125ppm

a menor concentrao que apresentou algum efeito e 1000ppm uma concentrao efetiva para controle do patgeno em questo. Os leos essenciais foram incorporados ao meio de cultura BDA fundente (50C) juntamente com o agente surfactante Tween 20 (0,05mL). Como tratamento testemunha, foi utilizada uma placa de Petri contendo apenas o meio de cultura. E para efeito de comparao, adotou-se um padro qumico considerado eficiente no combate dos patgenos, representado por um fungicida a base de tiofanato metlico, includo ao meio de cultura na dose 1000ppm. Na avaliao do crescimento micelial, colocou-se um disco de 9 mm de dimetro do miclio da cultura pura do patgeno no centro de cada placa. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com trs repeties por tratamento, sendo cada unidade experimental composta por uma placa de Petri. As placas foram acondicionadas em cmara de crescimento do tipo BOD 23C. Realizouse a medio do dimetro das colnias, em posio ortogonal a cada 24 horas at que o tratamento atingisse o dimetro total da placa de Petri. Os valores obtidos foram utilizados para o clculo do ndice de Velocidade de Crescimento Micelial, atravs da equao: , na qual: IVCM= ndice de Velocidade de Crescimento Micelial, D= dimetro mdio atual da colnia, Da= dimetro mdio da colnia do dia anterior, N= nmero de dias aps a inoculao. A produo de condios foi avaliada aps o total crescimento do patgeno nas placas de Petri. Em cada placa adicionou-se 20mL da soluo gua destilada e Tween 20 autoclavados. A superfcie da colnia foi raspada com auxlio de Ala de Drigalski. Os esporos de cada placa foram filtrados em gaze e acondicionados em bquer. Para cada suspenso de esporos, quatro alquotas de 0,1 mL f oram transferidas, separadamente, para uma lmina de hemacitmetro, na qual foi realizada a contagem de esporos atravs do emprego de microscpio ptico. Os dados mdios de quatro contagens foram considerados segundo a quantidade de condios produzidos na rea total de cada placa de Petri. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com quatro repeties por tratamento, e a unidade experimental composta por uma contagem efetuada no hemacitmetro. A taxa de germinao foi avaliada realizando a contagem de esporos germinados do patgeno. Os leos essenciais na concentrao 1000ppm foram misturados ao agente dispersante Tween 20 (0,05mL) e incorporados ao meio de cultura gar-gua em

Rev. Bras. Pl. Med., Botucatu, v.13, especial, p.619-627, 2011.

622

placas de Petri. Paralelamente, uma suspenso de esporos do patgeno foi elaborada e disposta em gotas sobre o meio de cultura. Estes esporos foram obtidos atravs de raspagem de colnia do patgeno crescida em placa de Petri por sete dias, sendo os esporos transferidos para um bquer contendo gua destilada estril. Na inoculao, foram utilizadas gotas de 20L da suspenso de condios, dispostas sobre o meio de cultura. Aps a inoculao, as placas permaneceram em temperatura de 23C por 24 horas, sendo ento avaliadas. Realizou-se a contagem de 50 condios, por repetio, com auxlio de microscpio ptico para a avaliao da porcentagem de germinao. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com quatro repeties por tratamento. Bioatividade de componentes volteis de leos essenciais no crescimento micelial, produo de condios e germinao de condios de B. cinerea Os mesmos leos essenciais (capim-limo, palmarosa, citronela, cravo, canela, menta, lavanda, tangerina, eucalipto, melaleuca, alecrim e laranja) foram dispostos sobre papis de filtro (0,5cm de dimetro) em trs pontos equidistantes sobre o meio de cultura BDA vertido previamente em placas de Petri. Em cada ponto colocou-se uma alquota de 5L, totalizando 15L por placa de Petri. Aps a aplicao dos leos essenciais, no centro de cada placa foi inserido um disco de 9 mm de dimetro do miclio da cultura pura do patgeno. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com trs repeties por tratamento, sendo cada unidade experimental composta por uma placa de Petri. As placas foram acondicionadas em cmara de crescimento do tipo BOD 23C. Mediuse o dimetro das colnias, em posio ortogonal a cada 24 horas at que o tratamento atingisse o dimetro total da placa de Petri. Os valores obtidos foram utilizados para o clculo do ndice de Velocidade de Crescimento Micelial. Anlises estatsticas Os valores obtidos nos tratamentos foram submetidos anlise de varincia e transformados quando necessrio, sendo submetidos ao teste de Duncan (pd0,05) atravs do programa computacional SAS (SAS INSTITUTE, 2002). Bioatividade dos leos essenciais de capim limo e canela no crescimento micelial de isolado resistente de B. cinerea A partir dos resultados anteriores, selecionouse dois leos essenciais (capim-limo e canela) eficientes na reduo do crescimento micelial do patgeno (B. cinerea) para a avaliao em isolado

resistente ao princpio ativo tiofanato metlico obtido no municpio de Tocos do Moji MG. O experimento seguiu a mesma metodologia, no qual os leos foram incorporados ao meio de cultura. Contudo, foram testadas as concentraes de 125, 250, 500 e 1000ppm para os dois leos. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com trs repeties por tratamento, sendo cada unidade experimental composta por uma placa de Petri. Os valores obtidos nos tratamentos foram submetidos anlise de regresso atravs do programa computacional SAS (SAS INSTITUTE, 2002).

RESULTADO E DISCUSSO Os leos essenciais foram selecionados com base na literatura especializada. Nestes leos detectou-se mais de 50 compostos, dos quais os cinco principais de cada leo so apresentados na tabela 1. Alguns leos (cravo, canela e tangerina) apresentaram componente majoritrio. O efeito fungisttico e fungicida apresentados pelos leos em estudo podem estar relacionado presena de componentes majoritrios. leos essenciais podem conter componentes qumicos em diferentes concentraes, geralmente um composto majoritrio e outros em menor quantidade (Simes & Spitzer, 2000). Componentes majoritrios, como o citral e o eugenol, mostram efeito f ungicida semelhante a leos que possuem em sua composio tais compostos (Combrinck et al., 2011). A partir das anlises dos leos essenciais, neste estudo, com exceo de tangerina e laranja doce, os leos que apresentaram destaque para componentes majoritrios apresentaram maior atividade. Tangerina e laranja doce, cujo constituinte majoritrio foi o limoneno, no demonstraram controle para os patgenos testados. Confirmando que o limoneno, no apresenta boa atividade fungicida ou fungisttica em alguns patossistemas mesmo como composto purificado (Rozwalka, 2010; Combrinck et al., 2011). A ef iccia de outros leos que no apresentaram componente majoritrio, como o caso de citronela, deve-se ao efeito sinergstico entre os componentes do leo essencial, levando a efetividade no controle de microorganismos (Combrinck et al., 2011). Capim limo e palmarosa pertencentes mesma famlia botnica Poaceae apresentam monoterpenides semelhantes em sua composio, demonstrando controle de B. cinerea. Considerando estes monoterpenides como componentes majoritrios destas espcies, o geraniol e citral, possvel que a ao fungicida apresentada esteja relacionada estes constituintes qumicos.

Rev. Bras. Pl. Med., Botucatu, v.13, especial, p.619-627, 2011.

623

TABELA 1. Porcentagem de rea de componentes majoritrios de leos essenciais, separados segundo famlia botnica, identificados em cromatgrafo a gs acoplado a detector de massas (GCMS-QP2010 Plus, Shimadzu). UFLA Lavras MG, 2011.

No primeiro ensaio, a menor concentrao (125ppm) dos leos essenciais, incorporados ao meio de cultura, mostrou-se pouco eficiente, contudo demonstrando os primeiros efeitos para os leos promissores (Figura 1). Na concentrao de 125ppm, canela, cravo, palmarosa e capim limo, leos ricos em eugenol, geraniol e citral (combinao de neral e geranial), apresentaram melhor efeito em relao testemunha, com 41, 31, 27 e 17% de controle respectivamente comparado testemunha. Na maior dose (1000ppm), capim limo e palmarosa apresentaram efeito fungicida (100% de controle), impedindo o crescimento do patgeno. Menta, eucalipto, canela e citronela apresentaram controle satisfatrio do crescimento micelial, apresentando controle de 96, 91, 84 e 79% respectivamente em relao testemunha. A dose do fungicida a base de tiofanato metlico empregado (1000ppm) apresentou 100% de controle equiparando-se aos leos de capim limo e palmarosa e no sendo considerada nas anlises. Em relao produo de condios de B. cinerea sobre ao de leos essenciais, capim limo, palmarosa, menta, eucalipto, cravo, canela inibiram completamente a esporulao do fungo (Tabela 2). Apesar de apresentar crescimento micelial, exceto para capim limo e palmarosa, o patgeno no produziu esporos no perodo avaliado. O aumento no tempo para produo de estruturas reprodutivas (esporos) favorvel para o controle de doenas (Agrios, 2005). Wilson et al. (1997) avaliaram a ao antifngica de 345 extratos de plantas e 49 leos essenciais sobre Botrytis cinerea. Dentre os leos testados, palmarosa (Cymbopogon martini), tomilho (Thymus zygis), canela (Cinnamomum zeylanicum) e cravo-da-ndia (Syzygium aromaticum) apresentaram melhores resultados na inibio do fungo. Estes resultados corroboram aos obtidos no presente trabalho para o leo de palmarosa e de canela.

O leo de cravo mostrou ao antifngica contra fungos isolados de banana, Lasiodiplodia theobromae, Colletotrichium musae e Fusarium proliferatum (Ranashinge et al, 2002). Neste trabalho, o leo de cravo mostrou-se eficaz na reduo da germinao de condios, e, semelhante canela tem como constituinte majoritrio o eugenol. O leo de capim limo tambm possui importantes registros quanto ao fungicida. Nguefack et al. (2004) avaliando o efeito do leo essencial de capim limo no crescimento micelial de f ungos, observ aram a reduo de 64% do desenvolvimento de Fusarium moniliforme na concentrao de 200 ppm, Aspergilus flavus em 48% e Aspergilus fumigatus em 77% na concentrao de 500 ppm, alm de inibio total em 300 ppm para F. moniliforme e 1200 ppm para A. flavus e A. fumigatus. leos essenciais de canela, capim-limo, cravo, eucalipto, melaleuca e menta apresentaram controle eficiente de Alternaria solani, agente etiolgico da pinta-preta do tomateiro, tanto em condies in vitro como em condies de campo (Abreu, 2006). Com exceo do leo de melaleuca, todos apresentaram eficincia no controle do mofo cinzento. Em trabalho com patgenos de ps-colheita em citrus, o leo essencial de menta na concentrao de 1.000 mg.L-1, inibiu em 36,8% e 59,44% o crescimento micelial de Penicillium italicum e Alternaria citri respectivamente (Azizi et al., 2008). Quanto aos componentes volteis, avaliados atravs da aplicao dos leos essenciais nos papis de filtro, sem contato direto do leo com o patgeno, capim limo apresentou 100% de inibio do crescimento micelial de B. cinerea (Figura 2). Canela, melaleuca, menta, eucalipto, cravo e palmarosa apresentaram de 80 a 59% de controle em relao testemunha. Outros trabalhos empregando componentes volteis no controle de patgenos demonstraram o

Rev. Bras. Pl. Med., Botucatu, v.13, especial, p.619-627, 2011.

624

FIGURA 1. ndice de Velocidade de Crescimento Micelial de B. cinerea sob ao de leos essenciais em duas concentraes. UFLA Lavras MG, 2011. Barras para cada efeito, com letras minsculas distintas diferem pelo teste de Duncan (p<0,05). TABELA 2. Produo e porcentagem de germinao de condios de B. cinerea sob ao de leos essenciais. UFLA Lavras MG, 2011.UFLA Lavras MG, 2011.
Tratamento Canela Capim Limo Cravo Eucalipto Menta Palmarosa Citronela Laranja Tangerina Testemunha Alecrim Melaleuca Lavanda Produo de Condios (x10 6)1 0 f 0 f 0 f 0 f 0 f 0 f 88,5 e 100,75 de 105,5 de 113,75 d 137,5 c 175,75 b 377,5 a
*

Germinao (%)2 0 c 0 c 0 c 0,5 c 0 c 0,5 c 1,5 c 98,5 ab 100 a 100 a 97 b 1,5 c 97 b

* Mdias seguidas de letras minsculas distintas nas colunas diferem pelo teste de Duncan (p<0,05). 1 Dados transformados para arc sen x/100 2 Dados transformados para x Rev. Bras. Pl. Med., Botucatu, v.13, especial, p.619-627, 2011.

625

FIGURA 2. ndice de Velocidade de Crescimento Micelial de B. cinerea sob ao de componentes volteis de leos essenciais. UFLA Lavras MG, 2011. Barras para cada efeito, com letras minsculas distintas diferem pelo teste de Duncan (p<0,05).

efeito fungicida de leos essenciais. Componentes volteis presentes nos leos essenciais de de tomilho, organo e capim-limo mostraram inibio total do crescimento de Botrytis cinerea e Alternaria arborescens (Plotto et al., 2003). Os compostos volteis trans-2-hexenal, carvacrol, trans-cinamaldedo e citral (componente do leo de capim limo) apresentam expressiva atividade antifngica sobre o crescimento micelial, germinao e esporulao de Penicillium expansum (Neri et al., 2006). Componentes volteis do leo essencial de capim limo proporcionaram reduo significativa no desenvolvimento das colnias de Colletotrichum coccodes, Botrytis cinerea, Cladosporium herbarum, Rhizopus stolonifer e Aspergillus Nger, entre 25 e 500 ppm (Tzortzakis & Economakis, 2007). Quanto ao isolado resistente, os leos essenciais testados mostraram eficincia segundo a dose empregada. Na dose de 1000ppm ambos os leos demonstraram 100% de controle, inibindo o crescimento do patgeno, apesar de canela no ter apresentado os mesmos resultados para o outro

isolado, evidenciando novamente diferenas com relao ao isolado (Figura 3). B. cinerea apresenta alto risco de adquirir resistncia a fungicidas (Myresiotis et al., 2007), sendo um srio problema em reas produtoras. Alm da questo da resistncia de isolados, outro problema a falta de princpios ativos registrados para uma rotao de agroqumicos (apenas dois qumicos e dois biolgicos Agrofit, 2011). Assim, os leos essenciais constituem nova alternativa para o manejo de doenas nos casos de resistncia a fungicidas (Chang et al., 2008). Alm disso, geralmente, os leos essenciais possuem baixa toxicidade para mamferos, so biodegradveis, no persistentes no ambiente, apresentam relativo baixo custo de produo, alm de apresentarem atividade inseticida e fungicida (Isman, 2000). Os leos essenciais de canela, capim limo, palmarosa e menta mostram-se como os mais promissores para estudos f uturos para este patossistema. Destes, canela possui como constituinte majoritrio o eugenol, capim limo o

Rev. Bras. Pl. Med., Botucatu, v.13, especial, p.619-627, 2011.

626

FIGURA 3. ndice de Velocidade de Crescimento Micelial de B. cinerea sob ao dos leos essenciais de canela (A) e capim limo (B) em diferentes concentraes. UFLA Lavras MG, 2011. citral, palmarosa o geraniol e menta o mentol. A identificao de componentes oriundos do metabolismo secundrio de plantas, presentes nos leos essenciais, que exercem efeito no controle de doenas, torna-se uma ferramenta auxiliar a indstria qumica quanto prospeco de novos produtos. Igualmente, com o avano da agricultura orgnica e as exigncias do mercado consumidor por produtos oriundos de prticas agrcolas menos agressivas, os leos essenciais podem atender esta demanda, fornecendo subsdios para o manejo de doenas quando necessrio.
E ABASTECIMENTO. Sistema de Agrotxicos Fitossanitrios, 2011 Disponvel em: < http:// a g r o f i t . a g r i c u l t u r a . g o v. b r / a g r o f i t _ c o n s / principal_agrofit_cons>. Acesso em: 28 ago. 2011. ANARUMA, N. D. et al. Control of Colletotrichum gloeosporioides (Penz.) Sacc. in yellow passion fruit using Cymbopogon citratus essential oil. Brazilian Journal of Microbiology, v. 41, n. 1, p. 66-73, 2010. ANTUNES, L. E. C. Panorama da produo de morango no Brasil. Revista Campo & Negcios HF. Ano VII, v. 69, n.91 p, 2010. AZIZI, M. et al. Inhibitory effect of some medicinal plants essential oils on postharvest fungal disease of citrus fruits. In: International Horticultural Congress, 27., 2006, Belgium. Anais... Belgium: Acta Horticulturae, 2008. p. 279-286. CAMARGO FILHO, W.P.; CAMARGO, F.P. Anlise da produo de morango dos Estados de So Paulo e Minas Gerais e do mercado da Ceagesp. Informaes Econmicas, v.39, n.5, p. 42-50, 2009. CHANG, H.T. et al. Antifungal activity of essential oil and its constituents from Calocedrus macrolepis var. formosana Florin leaf against plant pathogenic fungi. Bioresource Technology, v.99, art. 14, p. 6266-70, 2008. COMBRINCK, S.; REGNIER, T.; KAMATOU,G.P.P. In vitro activity of eighteen essential oils and some maj or components against common postharvest fungal pathogens of fruit. Industrial Crops and Products, v.33, p. 344-9, 2011. DAYAN, F.E.; CANTRELL, C.L.; DUKE, S.O. Natural products in crop protection. Bioorganic & Medicinal Chemistry, v.17, n.12, p.4022-342, 2009. DUARTE FILHO, J. Cultivares de morango. In: CARVALHO, S. P. (Coord.). Boletim do morango: cultivo convencional, segurana alimentar e cultivo orgnico, Belo Horizonte: FAEMG, 2006, p. 15-22. FAO. Dados agrcolas de FAOSTAT, Disponvel em http:/

AGRADECIMENTO Ao Cnpq, Capes, Fapemig pela concesso de bolsas de estudo para os autores. A Central de Anlise e Prospeco Qumica do Departamento de Qumica da Universidade Federal de Lavras (UFLA) pela disponibilizao da estrutura, pessoal e dos equipamentos para realizao das anlises fitoqumicas dos leos essenciais.

REFERNCIA
ABREU, CLM. Controle de Alternaria solani em tomateiro (Lycopersicun esculentum) com leos essenciais. 2006. 71f. Tese (Doutorado em Agronomia Horticultura) Departamento de Produo Vegetal, UNESP - Faculdade Cincias Agronmicas, Botucatu. AGRIOS, G.N. Plant Pathology. 5. ed. London, UK: Elvesier Academic Press. 2005. 530 p. AGROFIT - MINISTRIO DA AGRICULTURA, PECURIA

Rev. Bras. Pl. Med., Botucatu, v.13, especial, p.619-627, 2011.

627 / f ao st at . f ao . o rg / si t e/ 5 6 7 / D esk t o p D ef au lt . a sp x? PageID=567#ancor Acesso em: 25 ago. 2011. GHINI, R.; KIMATI, H. Resistncia de fungos a fungicidas. Jaguarina: Embrapa Meio Ambiente, 2002. 78 p. ISMAN, M.B. Plant essential oils for pestand disease management. Crop Protection, v.19, 2000, p.603-8. MYRESIOTIS, C.K.; KARAOGLANIDIS, G.S.; TZAVELLAKLONARI, K. Resistance of Botrytis cinerea isolates from vegetable crops to anilinopyrimidine, phenylpyrrole, hydroxyanilide, benzimidazole, and dicarboximide fungicides. Plant Disease, v.91, n.4, p. 40713, 2007. NERI, F.; MARI, M.; BRIGATI, S. Control of Penicillium expansum by plant volatile compounds. Plant Pathology, v. 55, n. 1, p. 100-5, 2006. NGUEFACK, J. et al. Evaluation of five essential oils from aromatic plants of Cameroon for controlling food spoilage and mycotoxin producing fungi. International Journal of Food Microbiology, v. 94, n.3, p. 329-34, 2004. PLOTTO, A.; ROBERTS, D.D.; ROBERTS, R.G. Evaluation of plant essential oils as natural postharvest disease control of tomato (Lycopersicon esculentum). Acta Horticulturae, v. 628, p. 737-45, 2003. RANASINGHE, L.; JAYAWARDENA, B.; ABEYWICKRAMA, K. Fungicidal activity of essential oils of Cinnamomum zeylanicum (L.) and Syzygium aromaticum (L.) Merr et L.M.Perry against crown rot and anthracnose pathogens isolated from banana. Letters in Applied Microbiology, v. 35, n.3, p. 20811, 2002. ROZW ALKA, L.C. leos essenciais: ao sobre Colletotrichum gloeosporioides e Colletotrichum musae, associados ou no pelcula de fcula de mandioca no controle da antracnose em goiaba. 2010, 198f. Tese (Doutorado em Agronomia Fitopatologia) Departamento de Fitopatologia, Universidade Federal de Lavras, Lavras. SAS INSTITUTE. SAS/STAT: users guide. version 9.0, Cary, 2002. SIMES, C. M. O.; SPITZER, V. leos volteis. In: SIMES. C. M. O. et al. Farmacognosia : da planta ao medicamento. 2. ed. Porto Alegre: Universidade Federal do Rio Grande do Sul e Universidade Federal de Santa Catarina, 2000. p. 394-412. SIMON, N.; MENEGUZZO, A.; CALGARO, A. Doenas causadas por fungos e bactrias In: SANHUEZA, R.M.V. et al. Sistema de produo de morango para mesa na regio da serra gacha e encosta superior do Nordeste. Bento Gonalves: Embrapa Uva e Vinho. (Sistema de Produo, 6). Disponvel em: http:// w w w . c n p u v. e m b r a p a . b r / p u b l i c a / s p r o d / MesaSerraGaucha/. Acesso em: 20 de julho de 2011. SOYLU, E.M.;KURT, S.; SOYLU, S. In vitro and in vivo antifungal activities of the essential oils of various plants against tomato grey mould disease agent Botrytis cinerea, International Journal of Food Microbiology, v. 143, p. 183-9, 2010. STANGARLIN, J. R. Uso de extratos e leos essenciais no controle de doenas de plantas - Fitopatologia Brasileira, v. 32 suplemento, p. 94 6, 2007. TZORTZAKIS N. G.; ECONOMAKIS, C. D. Antifungal activity of lemongrass (Cympopogon citratus L.) essential oil against key postharvest pathogens. Innovative Food Science e Emerging Technologies, v. 8, n. 2, p. 253- 8, 2007. WILSON, C. L. et al. Rapid evaluation of plant extracts and essential oils of antifungal activity against Botrytis cinerea, Plant Disease, v. 81, n.2, p. 204-210, 1997.

Rev. Bras. Pl. Med., Botucatu, v.13, especial, p.619-627, 2011.