DIAGNSTICO PR-NATAL E PR-IMPLANTAO

GENTICA HUMANA

DIAGNSTICO PR-NATAL
Fornece informaes ao casal para que eles tomem as decises necessrias como:
Levar gravidez termo Preparar-se para um parto difcil e os cuidados especiais necessrios ao recm-nascido Tranquilizar e reduzir a ansiedade Terminalizao da gestao ~98% casos: resultado normal

Abortos devido ao DPN: 2%

DPN no exclui todos os defeitos fetais possveis

distrbio especfico.

DPN Multidisciplinar:
obstetrcia e ultra-sonografia, gentica clnica (avaliao, diagnstico e informao), Exames laboratoriais (citogentica, bioqumica e anlise do DNA) Aconselhamento Gentico antes e aps o exame (riscos e limitaes, consentimento, repeties, exames adicionais)

INDICAES DO DIAGNSTICO PR-NATAL

1. Idade materna avanada 2. Feto ou criana anterior malformada 3. Presena de anormalidade cromossmica estrutural em um dos pais 4. Histria familiar de algum defeito gentico especfico 5. Risco de um defeito do tubo neural (DTN): 6. Doena materna associada com malformaes congnitas 7. Consanguinidade entre os cnjuges

8. Exposio a teratgenos antes ou durante a gravidez

9. Abortos espontneos recorrentes 10. Idade paterna avanada

Procedimentos para obteno de tecido fetal

A) Mtodos no invasivos
Ultra-sonografia CAVC

B) Mtodos invasivos
Amniocentese Ecocardiografia Cordocentese

Dopplerfluxometria
Cardiotocografia Perfil biofsico Marcadores bioqumico

Embrioscopia
Fetoscopia Punes: cutnea, cardaca e Heptica

TCNICAS NO-INVASIVAS MARCADORES BIOQUMICOS

Triagem Tripla no Soro Materno: Alfa-fetoproteina (AFP):protena fetal (saco
vitelnico e fgado)

Beta-gonadotrofina corinica (-hCG):

produzido pelos trofoblastos Estriol (uE3): produzido pelo feto (gl. Adrenal e metabolizado pela placenta)
Triagem Tripla associada com idade materna avanada
FETO COM CROMOSSOMOPATIA

FETO COM SNDROME DOWN

Estriol no-conjugado Gonadotrofina corinica humana (HCG) Idade materna + AFPSM + estriol no-conjugado + HCG

gestaes com alto risco de anormalidade cromossmica

TCNICAS NO INVASIVAS
Ultra-Sonografia
Ian Donald (1950) emisso de ondas sonoras ou eletromagnticas de baixa

intensidade e alta frequncia.

Abdome da mulher grvida

transdutor emite e recebe o som por sinais

acsticos

convertidos em sinais eltricos

amplificados e visualizados em um monitor

INDICAES
Sangramentos Distrbios de crescimento fetal Gestaes mltiplas Anlise direta da anatomia interna e externa

Apresentao e posio
Vitalidade Quantidade de lquido amnitico

Idade gestacional e fetal

Localizao da placenta Morfologia fetal (11a semana)

 DISTRBIOS MONOGNICOS

Displasias esquelticas
Doena renal policstica DISTRBIOS MULTIFATORIAIS Cardiopatias congnitas DTNs (anencefalia, espinha bfida) fenda labial e palatina ANOMALIAS INDICADORAS DE SNDROMES Fcies anormal

Genitlia anormal
Higroma cstico Polidactilia

1o trimestre

8 meses

Onfalocele

Fenda labial

TRANSLUCNCIA NUCAL: Marcador Ultrassonogrfico

Translucncia subcutnea entre a pele e o tecido mole que recobre a coluna cervical 10 - 14 semanas TN (acmulo de lquido) cromossomopatia 2,5 mm: diferencia mulheres com risco maior 2,5 - 3,9 mm: 3 vezes 4,0 - 4,9: 18 vezes acima de 5,0 mm: 13% aborto

S. Down, S. Noomam, higroma cstico e cardiopatias

Translucncia nucal

MTODOS INVASIVOS

AMNIOCENTESE
Serr et al (1955): determinao do sexo por exame da cromatina X (lquido
amnitico) precoce: 10a a 14a semana Perodo tradicional: 16a - 18a semana

Coleta de uma amostra do lquido amnitico (clulas fetais) via transabdominal com uma seringa (10-20 ml) sobrenadante: dosagem de AFP e outras doenas metablicas sedimento: cultura: caritipo e/ou extrao de DNA

Coleta de lquido amnitico guiada por ultrassom, aps anestesia local ou no

Clulas descamadas da bexiga,

vias respiratrias, pele, boca

Resultado: 2- 3 semanas Riscos:

0,2 - 0,5% de induzir aborto

0,1% deformidade de membros Complicaes

aspirao de sangue materno

Imunizao por Rh da me (Rh-) acidentes de puno Infeco materna perda de lquido (raro) diagnstico mais tardio

ALFA-FETOPROTENA do Lquido Amnitico

rastreamento de fetos com DTN aberto AFP

95% dos bebs com DTNs nascem em famlias sem histria conhecida
espinha bfida e anencefalias so detectadas (99%) Perodo: 15a a 18a semana AFPSM (16-18 semanas) : maior que 2,5 influncia de outros fatores (morte fetal, gmeos)

AFPSM S. Down ou outros defeitos cromossmicos

Coleta de amostras das vilosidades corinicas (CAVC)

tecido do trofoblasto (estruturas digitiformes) da rea vilosa do crio (placenta)

via transcervical ou transabdominal (monitorizao ultrassonogrfica)

perodo varivel 8a - 12 semana Complicaes:

- sangramento ou aborto (1%)

- risco de defeitos de reduo de membros - sucesso da anlise cromossmica menor - CAVC falha amniocentese subsequente

Bipsia de vilo corial

-cateter acoplado a seringa com meio de cultura -aspirao de ~50mg de vilo corial -cultura de curta durao (24h) -resultado em 1-3 dias

Vantagem em relao amniocentese: culturas de curta durao INDICAES: doenas metablicas extrao DNA caritipo Desvantagem: -medio da AFP no pode ser realizada -mosaicismo placentrio (1-2%)

CORDOCENTESE

amostra de sangue fetal do cordo umbilical (linfcitos) perodo: a partir da 18 semana Aplicaes: presena de alguma anormalidade fetal detectada pela ultra-sonografia

falha nas culturas de amniocentese e vilo corial

cultura de clulas de lnfcitos curta durao (2-3 dias) extrao de DNA Hemoglobinopatias e doenas hematolgicas

-Colheita de 1 6 ml de sangue veia umbilical

-Risco: 0,5 - 1% -Complicao: hemorragia no stio de puno

ABORTO SELETIVO

Quando uma anomalia fetal deve ser considerada grave a ponto de justificar a interrupao da gestao? E as doenas de manifestao tardia e progressiva?

EXAMES LABORATORIAIS A PARTIR DE MATERIAL COLETADO CARITIPO culturas de curta durao (48-72 horas) resultado ~2 s CITOGENTICA MOLECULAR - FISH ncleos interfsicos aneuploidias (13, 18, 21, X e Y)

Normal

Trissomia do 21

Triplo X

ANLISE DO DNA
marcadores especficos

deteco direta da mutao

Exemplos:
Distrofia Muscular Duchenne delees de genes ou rearranjos Anemia falciforme, Hemofilia A mutaes puntiformes doena de Tay-Sachs ou Fibrose cstica mutaes especficas.

97- 98%

DIAGNSTICO GENTICO PR-CONCEPO E PR-IMPLANTAO

PR-CONCEPO

anlise do corpsculo polar (1 e 2), que no esto envolvidos no desenvolvimento do embrio, podendo ser removidos para anlise. No detecta aneuploidias paternas e anomalias aps a fertilizao: poliploidia, haploidia ou mosaicismo.

DIAGNSTICO GENTICO PR-IMPLANTAO

Anlise gentica de 1-2 blastmeros, removidos por micromanipulao, em estgio de 8 clulas (3 dia de desenvolvimento) obtidas por fertilizao in vitro (FIV). No causa prejuzo ao desenvolvimento do embrio (clulas totipotentes) CLULA BIOPSIADA
TESTES MOLECULARES:PCR Doenas ligadas ao X DMD Fibrose cstica Talassemia beta Doena de Tay-Sachs Hemofilia Sndrome do X frgil Doena de Huntington Retinite pigmentosa Sndrome de Marfan Anemia de Fanconi FISH: Mulheres > 35 anos Clula fixada em lmina e submetida tcnica FISH (XY, 13, 16, 18 e 21 simultaneamente) Eficincia = 90% Sondas especficas para casais com translocaes Identificao dos 46 cromossomos - SKY PERSPECTIVA: DNA de uma nica clula ser amplificado e hibridado contra um chips com centenas de marcadores (qualquer desequilbrio cromossmico ou subcromossmico)

DIAGNSTICO GENTICO PR-IMPLANTAO

A partir de uma nica clula (blastmero) de um embrio possvel fazer o diagnstico gentico para algumas dezenas de doenas de origem gentica. Vantagem: evitar a implantao de embrio invivel. Questo tica: seleo da vida em fase cada vez mais precoce.

DIAGNSTICO PR-IMPLANTAO
Bipsias embrionrias: 6-8 clulas FISH e PCR Indicaes:
Oligozoospermia; Mosaicismo gonadal; Idade materna avanada; Mutaes gnicas; Rearranjos estruturais; Abortos anteriores de causa desconhecida

Blastocisto no estgio de 6 clulas

Embrio triplide

~50% dos embries aps FIV apresentam anomalias cromossmicas -4,9% presena de malformaes congnitas -PGD aumenta a taxa de implantao

ACONSELHAMENTO GENTICO

CONSULTA GENTICA: American Society of Human Genetic (1975) um processo de comunicao que lida com problemas humanos associados ocorrncia de risco de um distrbio gentico em uma famlia. Este processo envolve uma tentativa por uma ou mais pessoas apropriadamente treinadas de ajudar a pessoa ou famlia a:

1.Compreender os fatos mdicos: diagnstico, progresso da doena e conduta disponvel 2.Modo de herana e o risco de recorrncia em parentes 3.Comprender as alternativas para se lidar com o risco de recorrncia

4.Fazer as melhores adaptaes possveis ao distrbio em um membro afetado da famlia e/ou ao risco de recorrncia deste distrbio

NORMAS E RESPONSABILIDADES

1. Privacidade e confidncia das informaes dadas e recebidas 2. Os procedimentos devem ter o consentimento do consulente, inclusive fotos, pesquisas, etc 3. Respeitar a herana cultural, social e religiosa 4. Usar linguagem acessvel 5. Informar e no recomendar 6. Falar a verdade, exceto nos casos onde possa trazer danos irreparveis 7. Responder ao que foi e ao que deveria ter sido perguntado 8. Diminuir a ansiedade, culpa e raiva, auxiliando na aceitao do problema 9. Fazer com que as informaes sejam bem compreendidas, no rejeitadas ou esquecidas