Fosforilao oxidativa

Introduo

Culminao do metabolismo energtico nos organismos

aerbios

Todos passos oxidativos degradao de carboidratos,

lipdeos e aa convergem para este passo final da
respirao

Energia da oxidao propulsiona a sntese de ATP

Eucariotos mitocndria

Envolve a reduo de O2 H2O

Eltrons doados NADH e FADH2

Fotofosforilao Cloroplastos

Envolve a oxidao da H2O O2

NADP+ aceptor final de eltrons

Apesar de diferentes mecanismos eficientes de

converso de energia metablica mecanisticamente

Introduo

Corrente entendimento processo de sntese de ATP

1961 Peter Mitchel

Diferena transmembranar concentrao de

prtons reservatrio para energia extrada das
reaes biolgicas de oxidao

Teoria quimiosmtica permite:

Fosforilao oxidativa

Fotofosforilao

Converso de energia de transporte movimento

flagelar de bactrias

Fotofosforilao e fosforilao oxidativa

Envolvem fluxo de eltrons atravs de uma cadeia de

careadores membranares

Energia do fluxo de eltrons acoplado a o

transporte de prtons formao de um gradiente

Fluxo de prtons gradiente energia para sntese

Reaes de transferncia de eltrons

na mitocndria

1948 Albert Lehninger e Eugene Kennedy

Oxidao fosforilativa mitocndria

Eltrons so direcionados para

aceptores universais

Oxidao fosforilativa inicia com a entrada de

eltrons na cadeia respiratria

Quais so tais aceptores?

Flavoprotenas FADH2 ou FMNH2

Eltrons so direcionados para

aceptores universais

Eltrons passam atravs de uma srie

de carreadores ligados a membrana

Cadeia respiratria consiste de uma srie de

carreadores de eltrons

Protenas transmembranas capazes de receber e

doar eltrons

Existem 3 tipos de transferncias de eltrons

Transferncia direta de e- Fe3+ Fe2+

Transferncia com H+

Transferncia com on :H-

Eltrons passam atravs de uma srie

de carreadores ligados a membrana

Molculas carreadoras de eltrons

Ubiquinona - Q

Eltrons passam atravs de uma srie

de carreadores ligados a membrana

Dois tipos de protenas que contm ferro

Citocromos contm heme como grupo prosttico

Eltrons passam atravs de uma srie

de carreadores ligados a membrana

Dois tipos de protenas que contm ferro

Protenas ferro-enxofre

Carreadores de eltrons funcionam em

complexos multienzimticos

Carreadores organizados em complexos

supramoleculares embebidos na membrana

Podem sem fisicamente separados

Carreadores de eltrons funcionam em

complexos multienzimticos

Complexo 1: NADH para ubiquinona

NADH desidrogenase

42 cadeias polipeptdicas

Incluindo uma flavoprotena (FMN) e 6 centros Fe-S

Catalisa duas reaes reduo da ubiquinona +

bombeamento de prtons

Complexo 1 bomba de prtons movida pela energia

da transferncia de eltrons

Complexo 2: sucinato para ubiquinona

Succinato desidrogenase FADH2

nica enzima do TCA ligada membrana

Complexo 2: sucinato para ubiquinona

Outros substratos para desidrogenases mitocondriais

transferem eltrons para Q sem passar pelo complexo 1

oxidao acil-CoA desidrogenase

Glicerol-3P glicerol-3P desidrogenase

Complexo 3: ubiquinona para citocromo C

Transferncias de eltrons QH2 Citocromo C

QH2 oxidado a Q e duas molculas de citocromo C

so reduzidas

Complexo 3: ubiquinona para citocromo C

Reduz 2 citocromos

4 H+ so translocados para o espao intermembrana

Complexo 4: citocromo C para O2

Citocromo oxidase

Transporta eltrons do citocromo c para o O2

reduzindo-o H2O

Complexo 4: citocromo C para O2

Transloca 4 H+

2H+ para cada molcula de H2O

A energia da transferncia de eltros

eficientemente conservada em um gradiente
prtons
Cada par de eltrons de
transferidos
para O2

4 H+ pelo complexo 1

4 H+ pelo complexo 3

2 H+ pelo complexo 4

Energia inerente diferena na concentrao de H+

Fora prton-motriz fonte de energia para sntese de

ATP

Apresenta dois componentes energia potencial

qumica + energia do potencial eltrico

Mitocndrias de vegetais apresenta

mecanismo alternativo para oxidar o NADH

Escuro ou pouca luz mitocndria fornece ATP para clula

Presena de luz NADH produzido fotorespirao

Reoxidao do NADH

NADH transfere os eltrons para Q direto para O2

sem passar pelos complexos 3 e 4

Oxidase alternativa

Energia dissipada em forma de calor

Sntese de ATP

Como o gradiente de prtons convertido em ATP?

Energia da transferncia de eltrons fornece energia

suficiente para sntese

Mas qual o mecanismo que acopla o fluxo de prtons com

a fosforilao?

Modelo quimiosmtico.

Sntese de ATP

A sntese de ATP e a transferncia de eltrons so

processos acoplados.

Porque?

Sntese de ATP

A sintese de ATP ocorre

sem a presena de um
substrato oxidvel

Porque?

ATP sintase apresenta dois domnios

funcionais

Domnios F0 e F1

Realiza a sntese de ATP acompanhada por um fluxo de

prtons

F0 domnio transmembrana responsvel pelo transporte

de prtons

F1 domnio perifrico de membrana responsvel pela

sntese de ATP

Experimentos com vesculas formadas por membranas

internas de mitocndria

O gradiente de prtons libera ATP da

superfcie da enzima

Ausncia de gradiente de prtons

ATP sintase equilibra ADP + P ATP + H2O

Sntese continuada de ATP a enzima deve ciclar entre a

forma que liga-se fortemente ao ATP e a forma que libera
ATP

Cada subunidade pode assumir trs

conformaes diferentes

F1 formado por 9 subunidade 33

Cada subunidade apresenta um stio cataltico para

sntese de ATP

Estudos cristalogrficos

Cada subunidade pode assumir trs

conformaes diferentes

As diferenas conformacionais relacionadas com

diferena em stios de ligao a ATP/ADP

Catlise rotacional a chave para a mudana

de ligao na sntese de ATP

Baseado na estrutura e na cintica da reao Paulo Boyer

props o modelo da catlise rotacional

Onde os 3 stios ativos mudam de conformao

catalisando a sntese de ATP

Mudana conformacional depende da passagem de

prtons

A passagem induz a rotao do da subunindade

Catlise rotacional a chave para a mudana

de ligao na sntese de ATP

Fora prton-motriz energiza o transporte

ativo

Sistema de lanadeiras indiretamente oxida o

NADH citoslico

Sistema de lanadeiras indiretamente oxida o

NADH citoslico

Regulao da oxidao fosforilativa

Regulada pela taxa ATP/ADP

A taxa de oxidao dos combustveis

celulares regulata com tanta sensibilidade
e preciso que a taxa ATP/ADP varia muito
pouco na maioria dos tecidos mesmo
durante variaes extremas de demanda
energtica

Mitocndria com transporte desacoplado gera

calor na gordura marrom

Gordura marrom
encontrada em recm
nascidos de mamferos

Animais que hibernam