RADICAIS LIVRES

Radicais Livres
 São substâncias altamente reativas,
produzidas em condições
fisiológicas e patológicas, que
apresentam em sua última camada
eletrônica, orbitais com elétrons
não pareados
Radicais livres
 RADICAIS LIVRES
Como se formam os radicais livres ?
H2O
VIA NORMAL
4H + 4e+ -

O2 1 e- GANHO DE ELÉTRON
GANHO DE ENERGIA

O-2 SUPERÓXIDO

2H+ 1e-

H2O2 PERÓXIDO

OXIGÊNIO PURO (O2*)

.
OH HIDROXILA
 RADICAIS LIVRES
FÓRMULA DENOMINAÇÃO ESTABILIDADE

O2 oxigênio molecular estável

1 O 2 -_ íon superóxido instável

2 HOOH peróxido de hidrogênio o menos instável

.
3 OH radical hidroxila muito instável

4 O* oxigênio atômico o mais instável

5 ONOO- peroxinitrito muito instável

 Superóxido
O superóxido pode ser formado in vivo
por várias vias:
1- Cadeia respiratória
95 a 98% do oxigênio H2O (4 e- 2 H2O)
2 a 5% geram RL – processos fisiológicos- fagocitose
Se 1 e- escapar dos transpostadores -RL
2- Retículo endoplasmático
 Superóxido
O superóxido pode ser formado in vivo por
várias vias:
 3- Oxidação de catecolaminas
 4- Oxidação de flavoproteínas
 5- Redução de hidroquinonas
 6- Redução de tetrahidropterinas
 7- Produção de prostaglandinas
 8- Xantina oxidase- produção de Ac. Ùrico
 9- Radiações ionizantes.
 RADICAIS LIVRES
Há uma síntese fisiológica de radicais livres ?

H2O

H.O. H.O.
O -2
O -2
O2
NADPH
NADP

Leucócitos em fagocitose – isolamento em bolsa para destruir invasor

Prostaglandin synthesis
 RADICAIS LIVRES
Há uma síntese fisiológica de radicais livres ?

+ FOSFOLIPASE A2

ÁCIDO ARAQUIDÔNICO

CICLOOXIGENASE O-2

PROSTAGLANDINAS
 SUPERÓXIDO
 Retículo endoplasmático

 Citrocromo P-450- está envolvido com a

oxidação de grande variedade de substratos,
utilizando o O2. Nesses casos ocorre
produção de O2-, a partir do oxigênio
molecular.
 RADICAIS LIVRES
Há uma síntese fisiológica de radicais livres ?

glicose

95% O2
5%
H2O
O-2
+ ATP

Cadeia respiratória
 Superóxido
O2- ocorre como produto do
metabolismo normal e é
rapidamente dismutado a H2O2.
Se não for irá induzir
peroxidação lipídica.
 H 2 O2
 Erroneamente denominada de RL.
 É um oxidante forte.
 Induz oxidação de -SH de proteínas essenciais ao
centro ativo de várias enzimas, induzindo a
formação de –S-S- pontes dissulfeto.
 Inativa gliceraldeido 3-fosfato desidrogenase da
via glicolítica.↓ATP
 Promove oxidação de cetoácidos
 Induz síntese de heat shock proteins
HSP)
 OH*
 Gerado quando o tecido é exposto a
radiação ionizante.
 Extremamente instável
 Interage com bases púricas e pirimídicas.
 Modifica DNA nuclear
 Modifica DNA mitocondrial
 Ataca fosfolípides de membrana, gerando
hidroperóxidos.
RADICAIS LIVRES

RH + .OH R. + H2O

+.OH . + H2 O
 Óxido Nítrico (NO)

 Arginina + O2 NOS L-citrulina + NO

NADPH
 Óxido Nítrico (NO)
O óxido nítrico é um gás instável.
 No endotélio produz vasodilatação e por
essa razão foi chamada de Endothelium
Derived Relaxing factor (EDRF).
 Somente a partir de 1988 o NO foi
incluído nas substância tóxicas,
sintetizado durante a ativação de
macrófagos e por ação de citocinas.
 Óxido Nítrico (NO)
 No SNC o NO é considerado mensageiro
retrógrado, gerado através da ativação
do receptor NMDA do glutamato.
 O NO é produzido pela Óxido Nítrico
Sintetase.
 O Glu ativa o NMDA que induz influxo
de Ca++. O Ca++ se liga a calmodulina que
ativará a NOS
Óxido Nítrico sintase (NOS)
3 isoformas
 NOS neuronal (NOSn ou I)
 NOS induzida (NOSi ou II)
 NOS endotelial (NOSe ou III)
 As NOSn e NOSe e são conhecidas como
isoformas constitutivas.
 A NOSi tem sua transcrição estimulada.
 ONOO-
Potente indutor de
peroxidação lipídica.
Importante na transformação
de substâncias biológicas em
RL.
Oxida –SH de proteínas
 GERAÇÃODOPEROXIDONITRITO

NO+ O - ONOO-
2

1OXIDAÇÃODE–SHDEPROTEÍNAS

PLASMÁTICAS.
Enzimas envolvidas na
remoção de RL
 Mecanismos de defesa

glicose

O2- H2O2 H2O

SOD catalase

Cadeia respiratória
 Mecanismos de defesa
1- Preventivos:
CAT, SOD ,GPx
2- Interceptadores:
α-tocoferol, ascorbato,β caroteno
3- Sistema de reparo:
Endonucleases, glicosilases,
fosfolipases e proteases
 CATALASE (CAT)
 Baixa concentração no SN
 Fígado e eritrócitos
 4 Subunidades protéicas
 Cada subunidade 1 grupo heme
(protoporfirina III e Fe++
 NADPH atua como cofator
 CATALASE (CAT)

 2H2O2 2H2O + O2
 PEROXIDASES- GPx e GR
 GPx- glutationa peroxidase
 GR- glutationa redutase
 Se++ no centro ativo
 Remove H2O2 usando a glutationa.

 GLUTATIONA- tripeptídeo
Glu-Cis-Gli
 (GSH forma reduzida)
 (GSSG) forma oxidada)
Glu-Cis-Gli Glutationa reduzida
SH

Glu-Cis-Gli
S Glutationa oxidada
S
Glu-Cis-Gli
 Glutationa peroxidase

GPx
H2O2+2GSH GSSH+2H2O
 Glutationa Redutase

 GSSG+NADPH+H+ 2GSH+NADP+
 Superóxido Dismutase (SOD)
metaloenzimas
 CuZn-SOD – citoplasmática
 Mn-SOD- mitocôndria

SOD
O2_ H2O2
 Interceptadores
α tocoferol- Vitamina E
 Potente removedor de RL na membrana
 Doa um próton para transformar o RL em
fosfolipídeos.

 Ascorbato- Vitamina C
 Potente anti-oxidante - se oxida para reduzir o RL.
 Ação dos Radicais Livres
 Membrana- duplas ligações dos ácidos graxos
insaturados são atacadas- formando ligações
cruzadas – diminui a fluidez.
(HIDROPERÓXIDOS)
 Proteínas – grupos –SH formam pontes
dissulfeto
 DNA- Ligações cruzadas entre bases
nitrogenadas alterando transcrição e tradução.
 Distúrbios de circulação
isquemia
Proteínas DNA e RNA
RL
Enzimas
membrana
Síntese de NT
↓ rendimento
Permebilidade
Energético endotélio prostaciclinas
mitocôndria

edema
Agreg. plaquetas

ATPase ↓ATP Distúrbios

Condução elétrica microtrombos
 Neuron injury

Glu release

Increased extracellular
Glu concentration

Excitation of nearby neurons Opening of NMDA-gated channels

Ca2+ uptake by neurons

Activation of Ca2+ - dependent Type-I NOS

Increased NO production
ONOO-
Inhibition of mitochondrial electron flow
Intracellular
peroxynitrite
Increased O2-. production