http://www.prn.

org/images/uploads/human_hepatitis_c_virus_hcv_model

Vrus da Hepatite C
Biologia molecular, epidemiologia
e doena
Liliana Brito n31842
Mariana Oliveira n32205
Rita Belo n31464
Rute Morais n31483

Vrus da Hepatite C (HCV)

Grupo: Grupo IV (ssRNA +)

http://www.pei.de/SharedDocs/Bilder/EN/forschung-en/figures/molecular-virology-hbvfig4,property=default.jpg

Famlia: Flaviviridae

Gnero: Hepacivirus
Espcie: Vrus da Hepatite C
Tropismo: Hepatcitos (Fgado)

Ciclo Replicativo do Vrus

HCV

Origem do vrus HCV

A origem do vrus HCV permanece
desconhecida
Algumas consideraes
possveis
:

Estudos baseados
em evidncias moleculares evolutivas de vrus
HCV da sia e frica sugerem que o primeiro vrus surgiu h mais
de 1000 anos
O vrus poder ter sido introduzido na populao humana devido
ao contacto prximo com os animais domsticos (Canine
Hepacivirus - CHV) ou outras espcies de mamferos no primatas
Perpectiva futura: Investigar a presena de vrus
Zoonose
homlogos de HCV noutras espcies de mamferos

Origem do vrus HCV

Fonte:

A- Organizao
estrutural e
funcional do
genoma do CHV
B- Anlise
comparativa das
sequncias de aa
(Maior
semelhana do
CHV com o HCV)
C Alinhamento
mltiplo de
sequncias de aa
e predio dos
locais de corte da
poliprotena do
CHV
D Funo das
diferentes
protenas de CHV

Origem do vrus HCV

Anlise filogentica comparativa com base

em regies conservadas da helicase (NS3) e
da RdRp (NS5B)

Anlise comparativa das

5UTRs
(Maior similaridade da 5UTR do
Fonte:

Maior similaridade do CHV com 7 gentipos de

HCV avaliados, sendo integrado no gnero
ESTIMATIVA:Hepacivirus
Ancestral comum entre
o CHV e o HCV existiu h 500-1000
anos

s.wordpress.com/
cv1.jpg

Epidemiologia do Vrus
HCV
Epidemiologia
Cincia que estuda de forma quantitativa (dados estatsticos, principalmente)
a distribuio dos fenmenos de sade e doena tendo em considerao os
seus factores condicionantes e relevantes, na populao humana

Como factores-alvo de estudo temos:

Modo de transmisso e factores de risco

Prevalncia

Incidncia e diagnstico

Distribuio genotpica

Modo de Transmisso
e Factores de risco
A principal forma de transmisso a via parentrica,
mas so possveis outras formas

Uso de drogas intravenosas (modo de transmisso mais

frequente)

Transmisso sexual
Transmisso familiar
Transmisso vertical perinatal
Transmisso percutnea

Prevalncia da Hepatite C em adultos e a distribuio genotpica

na sia, Austrlia e Egipto

Prevalncia da Hepatite C em adultos e a distribuio genotpica

na Europa, Canad e Israel

Prevalncia da Hepatite C em adultos e a distribuio genotpica

na Amrica Latina

Consideraes gerais
Prevalncia global aproximadamente de 2%
A prevalncia difere, geralmente, entre:
Os gneros (masculino e feminino)
As reas geogrficas em causa
Faixas etrias distintas

Distribuio genotpica global

G1 distribudo em todo o mundo

G2 presente na sia e na zona Mediterrnica
G3 Particularmente, presente na Europa (indicativo de uma
transmisso pelo uso de drogas injectveis)
G4 - Presente no Mdio Oriente
G5 - No Sul de frica
G6 No Sudeste Asitico

Consideraes gerais
Existem diferentes estudos e sistemas de controlo e vigilncia da
infeco pelo HCV
Reproduo de resultados epidemiolgicos distintos
Limitaes dos estudos:
Qualidade afecta a prevalncia
O tamanho das amostras varia muito (alguns consideram um
grande nmero de indivduos da populao, outros consideram
subgrupos grupos de risco ).
Algumas amostras possuem mais homens que mulheres
preciso contornar as limitaes associadas, evitar a
transmisso pelo HCV, aumentar a taxa de diagnstico
Educao adicional
Desenvolver programas de vigilncia mais fidedignos e

Caractersticas Clnicas
Hepatite C Aguda
Perodo de incubao: entre 2 a 26 semanas (uma mdia de 7
semanas)

Maioria assintomtica
Resolve-se espontaneamente em cerca de 15-30% dos pacientes
Sintomas associados (quando existentes):
Mal-estar
Nuseas
Dores no abdmen
Urina de cor escura
Ictercia

Evidncias bioqumicas: nveis de alanina transaminase (ALT)

elevados

Problemas associados:
Corpos acidfilos
Esteatose

Caractersticas Clnicas
Hepatite C Crnica
o resultado da persistncia da infeco
Sintomas associados: aumento do cansao
Evidncias bioqumicas:
Viremia continuada e constante
Anticorpos dirigidos contra mltiplas protenas virais
Nveis de ALT moderadamente elevados
Evidncias histolgicas:
Agregados linfides
Graus variveis de necrose
Problemas associados:
Esteatose
Cirrose - Fibrose progressiva
Carcinoma Hepatocelular

Caractersticas Clnicas

http://upload.wikimedia.org/wikipe
dia/commons/2/22/Ground_glass_h
epatocytes_high_mag_2.jpg

Hepatcitos
normais

Esteatos
http://1.bp.blogspot.com/_EWCsr7adwPU/SU
e
EBPRcQeSI/AAAAAAAABI4/SNDuKpTg1W8/s

Cirro
http://pt.wikipedia.org/wiki/Cirrose_hep
se
%C3%A1tica

Carcinoma
http://www.microscopyu.com/staticgalle
hepatocelular

ry/pathology/images/hepatocellularcarci

Caractersticas Clnicas
Manifestaes extra-hepticas da infeco
crnica por HCV

Crioglobulinemia mista essencial ou

de tipo II (MC)
1. Lichen
Perturbaes linfoproliferativas:
planus
Linfoma non-Hodgkin (NHL)
Manifestaes Dermatolgicas:
Porfiria cutnea tarda
Lichen planus
Manifestaes endocrinolgicas:
Tiride: Tireoidite de Hashimoto, Hipotiroidismo
Diabetes Mellitus (DM)
Manifestaes reumticas:
3.
Artralgias e/ou artrites
Artrite
Fibrose pulmonar idioptica
1. http://bookbing.org/wp-content/uploads/lichen-planus.jpg
2. http://www.theaidsreader.com/image/image_gallery?
img_id=1362109&t=1230673347542

2. Porfiria
cutnea
tarda

Diagnstico
Marcadores sorolgicos e virolgicos
clinicamente utilizados

Imunoanlis
e para antiHCV +
Tcnica de
Anticorpos IgG (anti-HCV) marcadores de infeco
imuno-blot
por HCV passada ou presente
(RIBA)
Testes de
HCV RNA indicador da replicao corrente docidos
HCV
nucleicos
(NATs)
HCV gentipo

Diagnstico
Interpretao dos resultados das anlises de
diagnstico
para
HCV
1 Imunoanlise
para
anti-HCV

Resultado
Negativo

Resultado
Positivo
2 Teste de cidos
nucleicos para HCV RNA

Nunca infectado
com HCV
Resultado
Positivo
Confirmao da
infeco activa por

Resultado
Negativo
Necessidade do teste
suplementar para anti-HCV

Patognese
Interaces Hospedeiro
Vrus

Patognese
Eliminam as
clulas infectadas
por citotoxicidade
directa:
libertao de
grnulos com
perforina e
proteases
(granzimas);
produo de IFN

Interaces Hospedeiro
Vrus

Patognese
Activao directa
de macrfagos,
clulas B e
clulas T CD8 +;
secreo de
citocinas que
inibem a
replicao viral
sem morte da
clula infectada

Interaces Hospedeiro
Vrus

Patognese
Produo de
anticorpos que
reconhecem as
protenas virais
do invlucro

Interaces Hospedeiro
Vrus

Patognese
Induo da
morte nas
clulas alvo
infectadas ;
secreo de
citocinas que
inibem a
replicao viral
sem morte da
clula infectada

Interaces Hospedeiro
Vrus

Patognese
Estratgia de
evaso face
resposta
imunitria inata

Interaces Hospedeiro
Vrus

Patognese
Alterao na
sequncia das
protenas do
invlucro
especialmente a
glicoprotena E2

Interaces Hospedeiro
Vrus

Patognese
Escape
mutacional
resposta
imunitria
adaptativa do
tipo humoral

Interaces Hospedeiro
Vrus

Patognese
Escape
mutacional
resposta
imunitria
adaptativa do
tipo celular

Interaces Hospedeiro
Vrus

Patognese
Evaso viral:
incapacidade
funcional das
clulas T; clulas
imunes de
regulao

Interaces Hospedeiro
Vrus

Patognese
Respostas imunitrias na infeco por HCV
Inata

Adaptativa

Actividade das clulas NK que

reconhecem os hepatcitos
infectados

1. Do tipo Humoral
. Produo de anticorpos que
reconhecem as protenas virais do
invlucro pelas clulas B

Aco dos macrfagos hepticos

(Kupffer cells)

. Clulas B activadas pelas clulas T

CD4+

Activao do gene do interfero

tipo I:
Interfero (IFN-)
Interfero (IFN-)

2. Do tipo Celular
. Clulas T CD4+ que reconhecem os
epitopos virais apresentados pelas
molculas MHC classe II
. Clulas T CD8+ que reconhecem os
epitopos virais apresentados pelas

Patognese
Estratgias de evaso viral para o HCV
Face resposta imunitria
inata
Prejudica a via de sinalizao do interfero tipo I:
Protenas do HCV NS3/4A bloqueiam a:
Activao do gene RIG-1
Traduo de IRF-3
Protena core do HCV interfere com a via JAK/STAT:
Produo do inibidor da sinalizao (SOCS-3)
Aumento da degradao de STAT-1
Inibio da activao e translocao de STAT-1
Protena NS5A resistente ao IFN:
Induz IL-8, citocina que inibe as aces antivirais do IFN
Glicoprotena E2:
Inibe a actividade das clulas NK citotoxicidade e produo de IFN

Patognese
Estratgias de evaso viral para o HCV
Face resposta imunitria
adaptativa

Escape mutacional:
Alteraes mutacionais na
partcula viral:
- Falta de actividade de proofreading da
RdRp
- Elevada taxa de replicao viral
- Alteraes na sequncia da protena
E2 escape aos anticorpos produzidos
pelas clulas B
Diminuio da afinidade de ligao
entre epitopo e molcula MHC
(substituies de aa variao viral nos
epitopos das clulas T )
Decrscimo do reconhecimento
pelos TCRs

Incapacidade funcional das clulas

T:
Exausto das clulas T:
- Estimulao crnica de antignios
- Consequncias:
1. Afecta a:
Capacidade proliferativa
Citotoxicidade
Habilidade para secreo de
citocinas
2. Reduo da frequncia

Objectivo da Teraputica:
SVR
(Sustained virologic response = Resposta virolgica
sustentada)
Ausncia de RNA de HCV detectvel no sangue aps 24
semanas (6 meses) de se ter verificado o fim do tratamento
anti-viral para a infeco crnica provocada pelo HCV
SVR j foi observada em:
Receptores de transplante de fgado infectado pelo HCV
Hemoflicos
Cirrticos
Co-infectados com HIV
Crianas
<
Percentagem de reincidncia da infeco aps definida
a SVR =
1%
Durabilidade da SVR com mnimas taxas de reincidncia
Equivalente definio de cura da infeco provocada pelo HCV se
existir longevidade da SVR aps o tratamento anti-viral eficiente
45 a 52% de SVR
Gentipos 1 e 4
Tratamento teraputico corrente em pacientes
com infeco crnica provocada pelo HCV:75 a 90% de SVR Gentipos 2 e 3

Benefcios da SVR
(Sustained virologic response = Resposta virolgica
sustentada)
Resposta duradoura
Melhoramento histolgico do fgado
Diminuio da mortalidade por complicaes hepticas
Menor frequncia de aparecimento de carcinoma
hepatocelular
Menor risco de descompensao do fgado
Diminuio da resistncia insulina
Menor alterao dos nveis de glucose em jejum
Menor incidncia de Diabetes Mellitus tipo 2

Teraputica anti-viral
Todos os pacientes com infeco crnica
provocada por HCV so alvos de
tratamento
Interfero (IFN ) recombinante

No
passado

Citocina que leva resposta imunitria inata

Induo e Activao do
estado antiviral

Ribavirina (RBV)
Anlogo sinttico de guanosina com um amplo espectro
antiviral
peguilado
(PEG-INF)
Refora Interfero
a resposta virolgica
sustentada
obtida
Interfero
covalentemente
com o tratamento
de IFN ligado a
polietilenoglicol

Actualmen
te

PEG-IFN 2a
Ribavirina (RBV)
PEG-IFN 2b

Teraputica anti-viral
Desvantag

o tratamento no economicamente
ens:
acessvel

a administrao de interfero apresenta efeitos

adversos:
Leucopenia
Trombocitopenia
Neutropenia

Tratam
ento
descon
tnuo
em 20
% dos
infecta
dos

Depresso
Fadiga
Sintomas semelhantes aos da gripe

Teraputica anti-viral
especfica
Specifically targeted antiviral therapy for
HCV (STAT-C)
Teraputica dirigida s
protenas do HCV:
1. Inibidores da aco protease de
NS3/4: inibe a enzima e bloqueia a Boceprevi
r
replicao do HCV
Exemplos: Boceprevir, Telaprevir
(VX-950)
Telaprevir
2. Inibidores da aco da RNA
polimerase dependente de RNA
(NS5B)
3. Inibidores da aco helicase da
NS3
Exemplos: Derivados de acridona,
(BIP)2B
4. Inibidores da entrada do HCV

Debio 025

Teraputica anti-viral
especfica
Specifically targeted antiviral therapy for
HCV (STAT-C)
Inibidores da aco da RNA polimerase dependente
de RNA (NS5B)
1. Anlogos de nuclesidos e nuclesidos tri-fosfatados
Ligam-se ao centro activo da enzima e competem com o substrato
natural (NTPs)
IDX184
2'-metilguanosina

Teraputica anti-viral
especfica
Specifically targeted antiviral therapy for
HCV (STAT-C)
2. No-nuclesidos - inibidores
alostricos
Domnio Thumb da RdRp:
1.Benzimidazis e Indoles

Ligam-se a 1 dos 4 locais

alostricos (distantes do motivo
conservado GDD presente no
centro activo da enzima )

2.Tiofenos, Fenilalaninas,
Hidroxipiranonas e
Piranoindoles
Domnio Palm da RdRp:
3.Benzotiadiazinas e
Acilpirrolidinas
4.Benzofuranos

http://img.medscape.com/slide/migrated/editorial/cmecircle/2007/7401/images/s

Teraputica anti-viral
especfica
Specifically targeted antiviral therapy for
HCV (STAT-C)
3. Anlogos de Pirofosfatos
(PPi)
Domnio ncora interaces
com os dois ies metlicos
presentes no centro activo
Domnio especfico
interaces adicionais com outras
regies da enzima

A vacina to desejada
No existe nenhuma vacina disponvel contra o vrus HCV

MAS
Esta tida como um objectivo real!
Necessidade de uma:
Vacina profilctica prevenir e/ou atenuar a infeco por
HCV
Exige uma mudana nas prticas sociais e culturais

Vacina teraputica aumentar as taxas de SVR e cura em

pacientes infectados com o vrus HCV

Visa prometer uma reduo na durao da terapia corrente
e dos seus efeitos

A vacina to desejada

Condies ideais para o sucesso da vacina contra o

HCV:

Devem estar direccionadas para regies relativamente

conservadas entre os diferentes tipos e subtipos de HCV

Induzir uma resposta imunitria robusta e funcional por parte

das clulas T e, tambm, uma resposta humoral

Devem levar erradio do vrus do fgado sem induzir a

imunopatologia do fgado

Vacinas: abordagens
experimentais
Tipos de vacinas:

Vacinas de protenas recombinantes:

Protenas recombinantes do invlucro viral

Protenas recombinantes da nucleocpside
Vacinas peptdicas

Vacinas de DNA

Vacinas de vectores virais

Vacina profilctica:
Preveno
Alvo: Glicoprotenas do invlucro viral (E1 e E2)

Induo da produo de anticorpos especficos para os determinantes

antignicos do vrus HCV

Objectivo: Impedir a entrada do vrus HCV nas clulas e o

desenvolvimento da infeco primria
PROBLEMA!!! regies hipervariveis das
glicoprotenas do invlucro entre indivduos e no mesmo
indivduo
nica vacina profilctica
testada
(Novartis, Fase I, 2010)

Heterodmero
E1/E2
recombinante

Adjuvante MF59C

Vacinas teraputicas
Vantagens das vacinas com protenas recombinantes:
Apresentam baixa toxicidade vacinas bem toleradas
Induzem a sntese de anticorpos neutralizantes
A vacina contra o HBV baseada neste mecanismo

VACINAS DE PROTENAS RECOMBINANTES

Componentes
Gli
co
pr
ot
e
na
do
in
v
lu
cr
o
vir

Fase de
estudo

Fase I
(2003)

Bem tolerada
No houve alteraes nos nveis de RNA de HCV
Resposta especfica das clulas T (50 em 54)
Resposta humoral correlacionada com o
melhoramento da histologia do fgado (24) e
reduo dos nveis de alanina transaminase (ATL)

E1 HCV
+
adjuvante alum
(Innogenetics /
GenImmune)

Observaes aps o tratamento

Fase II
(2008)

Bem tolerada
Resposta imunitria humoral e celular especfica
No houve melhoramento da histologia do
fgado aps o tratamento

Adaptado de .

Vacinas teraputicas
VACINAS DE PROTENAS RECOMBINANTES
Componentes
GI-5005
Pr
ot Protena de fuso da
e nucleocpside+NS3
em leveduras
na
transfectadas
da
(Globeimmune)
N
uc
ISCOMATRIX
le
Protena da
Nucleocpside +
oc
p adjuvante composto
por saponina,
si
colesterol e
de
Desvantagem
das
vacinas
fosfolpidos
(CSL
Ltd)

Fase
de
estudo

Observaes aps o tratamento

17% de SVR obtido

Fase II
(2009)

com a combinao da
vacina com o tratamento com PEG-IFN e
ribavirina face aos 5% de SVR obtida com o
tratamento com PEG-INF e ribavirina

Ainda no foram reportadas respostas

imunolgicas

Fase I
(2009)

Bem tolerada
Produo de anticorpos

especfcos para a

protena da nucleocpside

Resposta especfica das clulas

citotxicas
apenas
detectada
em
infectados

com protenas recombinantes:

geralmente so induzidas fracas respostas por parte das clulas T

Adaptado de .

T
2

Vacinas teraputicas
Vantagens das vacinas peptdicas:
Apresentam baixa toxicidade vacinas bem
toleradas
Induzem resposta imunitria celular e
VACINAS PEPTDICAS
humoral

Componentes
P
pti
do
s
Si
nt
ti
co
s

IC41
Pptidos da
nucleocpside
, NS3 e NS4
(restrito para
indviduos
HLA-A2)
+
adjuvante
poli-L-arginina
(Intercell)

Fase de
estudo

Observaes aps o tratamento

Bem tolerada
67% dos infectados apresentaram uma resposta fraca
das clulas T
Diminuio transiente do nvel de RNA de HCV que
demonstraram uma elevada secreo de IFN pelas
clulas T (3 em 60)

Fase II
(2008)

Bem tolerada
Combinada com o tratamento com PEG-IFN e

ribavirina proporcionou resposta das clulas T em 73%

dos infectados e diminuio dos nveis do RNA de HCV

Bem tolerada
Uma mais forte resposta das clulas T

comparada
com a resposta da vacina que era administrada
mensalmente
Adaptado de .
Diminuio dos nveis de RNA de HCV aps 4 meses

Vacinas teraputicas
VACINAS PEPTDICAS
Componentes
Pptidos
derivados de
E1, E2, NS3 e
NS5A (HLAA24+)
+ adjuvante
de Freund

P
pti
do
s
(Karume
Si
University)
nt
ti
Pptido
co
derivado da
s
protena da
nucleocpside

Fase
de
estudo

Fase I
(2007)

Fase I
(2009)

Observaes aps o tratamento

Bem tolerada
Maioritariamente foi desenvolvida uma resposta
especfica das clulas T

Reduo dos nveis de ATL (5 em 12)

Reduo dos nveis de RNA de HCV (3 em 12)
Bem tolerada
Induo da resposta especfica pelas clulas T
citotxicas (15 em 25)

de ATL em >30%
(7 em
Melhoramento nos nveisAdaptado
de .

Vacinas teraputicas
VACINAS PEPTDICAS
Componentes

Fase
de
estudo

Observaes aps o tratamento

Clulas
Bem tolerada
dendrticas
Resposta especfica pelas clulas T transiente e
autlogas
com
P
fraca
Fase I
epitopos
HLA-A2
pti
(2010) Inexistncia da diminuio da carga viral
do
Inexistncia de anticorpos anti-protena da
s (Instituto Burnet
nucleocpside
e outros)
Si
nt
Virossoma
ti
contendo
co
pptidos de
No foram reportados resultados
------s
NS3
Desvantagens das vacinas peptdicas:
(Pevion Biotech)limitada devido presena de poucos eptopos
Imunogenicidade
Necessidade de adequao da vacina ao tipo de HLA do paciente
Necessidade da escolha apropriada do tipo de pptidos

Adaptado de .

Vacinas teraputicas
VACINAS GENTICAS (DE DNA)
Componentes
CICGB-230
Plasmdeo a expressar
antignios estruturais:
Protena da
nucleocpside, E1 e E2 +
Protena recombinante
da nucleocpside
(Universidade de Montreal)

Fase
de
estudo

Observaes aps o tratamento

Bem tolerada
Fraca resposta especfica pelas clulas T (11
Fase I
(2009)

em 15) (Controvrsia)
Fraca resposta humoral (6 em 15)
(Controvrsia)
Apenas 1 infectado diminuiu os nveis de
RNA de HCV (1 em 15)
Autores reportaram um melhoramento
histolgico do fgado com reduo da fibrose

ChronVac-C
Bem tolerada
Plasmdeo a expressar
Reduo dos nveis de RNA de HCV em
Fase
antignios no estruturais:
pacientes com uma maior dose da vacina (4
I/IIa
NS3 e NS4a +
em 6) com correspondente resposta especfica
(2009)
Vantagens
das vacinas de DNA:
pelas clulas T (3 em 4)
electroporao
Vacina bem tolerada
No foram observados efeitos adversos
(Tripep)
Apresenta uma larga gama de epitopos

Vacinas teraputicas
VACINAS BASEADAS EM VECTORES VIRAIS
Componentes

Fase
de
estudo

Ad6 e AdCh3
Vector de Adenovirus
expressando as
protenas NS do vrus
HCV
(Universidade de Oxford e
Okairos)

Fase I
(2009)

Observaes aps o tratamento

Bem tolerada
Elevada imunogenicidade

TG4040
Reduo dos nveis de RNA de HCV
Vector MVA (estirpe de
associado com resposta especfica das clulas
poxvrus atenuada)
T CD8+ (6 em 15)
Fase
I
Vantagens
das vacinas
expressando
as baseadas em vectores virais:
(2009)
Apresentao
de uma
gama
de epitopos
virais em
comparao
com as
protenas NS3,
NS4larga
e
futuras
desta vacina:
Fase
Perspectivas
vacinas peptdicas;
NS5B
II - combinao da vacina com a terapia do
Induo de respostas especficas das clulas
T com
e reduo
do pico de HCV durante a
PEG-IFN
ribavirina
(Transgene)
infeco primria
Adaptado
Desvantagens das vacinas baseadas em vectores
virais: de .

Perspectivas futuras
Novos ensaios das vacinas em estudo acoplados com outras
terapias adjuvantes (por exemplo: PEG-INF/RBV e compostos
anti-virais especficos)
Desenvolvimento e a aplicao em ensaios de novas vacinas
Vacinas baseadas em virus-like particles (VPL) que foram bem
sucedidas para a Hepatite B
Estudo de novos frmacos anti-virais especficos que consigam
ultrapassar ou ser menos susceptveis s mutaes de
resistncia
Estudo de molculas que induzam a resposta imunitria inata
e permitam a ligao com a resposta adaptativa

Bibliografia