Boas Prticas Laboratoriais

Preparo de solues

Disciplina de Reumatologia
2011

http://www.ruf.rice.edu/~bioslabs/schedules/Talks/Solutions_dilutions/BIOEDmixtures.htm

O que fazer antes do preparo

Vc sabe quais so os reagentes?

Todos os reagentes esto disponveis?
Quanto vc vai preparar?
Soluo estoque ou de uso?
Vai usar algum produto txico? Veja no
rtulo
Que gua vc vai usar?
Onde vai guardar sua soluo?

Solues
Estoque ex. tampes concentrados
PBS, TBS, TAE, NaCl sempre colocar
nome e concentrao do reagente, pH,
quem fez e data
Soluo de uso quantidade suficiente
para a reao
Alquotas substncias sensveis a
congelamento/descongelamento

Preparo de solues
Solvente universal gua
As solues podem ser:
peso/volume (g/v ou w/v) x gramas de soluto
em um dado volume final de soluo (ex 1g em
100ml = soluo 1%),
volume/volume (v/v) x ml de soluto em x em
um dado volume final de soluo (lquidos),
peso/peso x gramas de soluto em 100 gramas
de soluo (uso em gradiente)

Molaridade (M)
A molaridade de uma soluo indica quantos
moles da substncia existem em 1 litro de
soluo.
O mol o peso molecular (PM) expresso em
gramas e seu valor encontrado no rtulo do
frasco.

Massa em gramas
M=

PM x volume de soluo (L)

Voc sabia?
1 mol equivale ao peso de
6.022140781023 molculas do composto
Esse o nmero de tomos de 12C
presentes em 12g desse istopo de
carbono
Esse nmero conhecido como a
constante de Avogadro

Ajuda dos universitrios

http://www.graphpad.com/quickcalcs/molarityform.cfm

Chemical and radiochemical data

Create and convert molar solutions

Mass from volume &

concentration

Concentration:
Formula Weight:
Volume:

millimolar
milliliter

Preparar a soluo a partir de reagente slido:

Qual o peso (ou massa) molecular do reagente? Veja no
frasco MW, mol wt, MMs, PM
Qual o volume de soluo voc vai preparar em litros, V.
Qual a molaridade da soluo, M.
Calcule as gramas (g) de soluto necessrias usando a
equao:
g = MW x M x V
Exemplo: Preparar 800 mL de NaCl 2 M (MW = 58.45 g/mol).
g NaCl = 58.45 g/mol x 2 mol/L x 0.8 L
g NaCl = 93.52 g NaCl
Dissolva 93.52 g de NaCl em 400 mL de gua destilada e ento
adicione mais gua at completar o volume de 800 mL.

Exemplo
Preparar 200 mL de soluo 0,4M de NaCl

PM de NaCl=58,43g/mol
Soluo 1M de NaCl - 58,43g em 1L
g=58,43g/mol x 0,4mol/L x 0,2L
g=4,674g

Molaridade a partir de soluo em %

Determine a molaridade de HCl 37,2% (peso)
(densidade 1,19 g/mL. MW 36,4 g/mol).
Calcule a massa de 1L da soluo = 1000 mL x
1,19 g/mL = 1190 g
Calcule quanto dessa massa de HCl = 1190 g
x 0,372 = 442,68 g
Calcule quantos moles correspondem a essa
massa = 442,68 g/36,4 g/mol = 12,1 moles
Portanto a molaridade 12,1 M

Normalidade (N)
N o n de equivalentes grama (Eq) de soluto
por litro de soluo. O n de Eq o mol dividido
pela valncia (n de H+ ou de OH-).
Ex: uma soluo 1M de H2SO4 tem 1 mol por
litro (peso molecular=98g). Como so 2 H+, o
Eq do H2SO4 98/2=49g. Como temos 98g do
soluto, e o Eq 49g temos 2 Eq por litro e a
soluo 2N.
Como regra, a Normalidade a Molaridade
multiplicada pela valncia.

Grau de pureza
ACS grade
Mais alta qualidade possvel (often equals or
exceeds the latest purity standards set by the
American Chemical Society (ACS).
Reagent grade
Pureza geralmente semelhante ao grau ACS.
Adequado para trabalho analtico e para
laboratrios em geral.
USP grade
Pureza suficiente para passar nos testes da
U.S. Pharmacopoeia (USP).

Diluies
Para diluir uma soluo acrescentamos apenas solvente,
a quantidade de soluto no alterada
adicionar solvente

Soluo inicial

Diluies
A partir de uma soluo estoque mais
concentrada pode-se obter uma soluo mais
diluda empregando a frmula abaixo:
Ci x Vi = Cf x Vf

Ci = concentrao inicial (estoque)

Vi= volume da soluo inicial (estoque)
Cf = concentrao final desejada
Vf = volume final desejado

Diluies
Diluio 1:2 (ex.diluir soro em PBS)
1 parte do soluto (soro) + 1 parte de
solvente (PBS) o volume final o dobro
do inicial
Diluio 1:10
1 parte do soluto + 9 partes do solvente
O volume final dez vezes o volume
inicial

Ateno
Em muitos protocolos encontramos:
Prepare uma soluo 100mM de cloreto
de clcio pH 7,5 (11,09 g de CaCl2 em 1L
de gua, acertar pH com HCl 1N)
Quanta gua devo colocar para dissolver
o cloreto de clcio?
S tenho CaCl2.2 H2O quanto devo pesar?

Acertando o pH
Cuidados ao acertar o pH
O pHmetro est calibrado?
Sei calibrar?
Cuidados com os padres de pH
Qual cido ou base usar?
Tenho as solues de cido ou base que vou
usar? No?
Sei preparar?

Dicas
Tris, Trizma-base, Tris-Cl o que significam?
Como diluir um cido ou base concentrados?

Acessrios

Sites teis

http://www.flinnsci.com/sections/safety
/chemicalSafety/L1051-1065_HS_SOLUTION_
PREP.pdf
http://www.carolina.com/category/teacher+
resources/instructions+and+buying+guides/
chemistry+instruction+manuals/solution+pr
eparation+manual.do