PROTEÍNAS

RECOMBINANTES
 O QUE SÃO?

“ São proteínas produzidas

artificialmente a partir de
genes clonados. Isto é,
advêm da técnica de DNA
recombinante.

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Algumas enzimas envolvidas no processo

Enzimas Função
Tipo II (endonuclease de restrição) Cortam os DNAs em sequências de
bases específicas.
DNA ligase Juntam duas moléculas de DNA ou
fragmentos.
Taq DNA polimerase Adiciona os nucleotídeos na
extremidade 3´ da cadeia de DNA.
Transcriptase reversa Produz uma molécula de DNA
através de uma molécula de RNA.

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 Vectores de clonagem

▰ Capaz de transportar uma sequência de DNA estranha dando

origem a um DNA híbrido ou recombinante. Tipos de vectores de clonagem
• Plasmídeos (pBR322)
▰ Capacidade de se auto-replicar.
• Fasmídeos ou fagemídeos
▰ Conter pelo menos um gene que confira resistência a • Cosmídeos
antibióticos. • Bacteriófagos λ
▰ Possuir locais de restrição únicos, polylinker. •YACs, BACs e PACs
▰ Fácil de purificar.

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 Transformação

▰ Ocorre quando uma célula incorpora e exprime um fragmento de

material genético.

▰ Para a introdução do DNA recombinante podem ser utilizados

vários métodos:

• Células competentes;
• Electroporação;
• Bombardeamento de DNA revestido de Tungsténio;
• Microinjecção;
• Transfecção.
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 Algumas aplicações gerais
▰ Terapia génica
Possibilidade de introdução de um gene num organismo e
consequente correcção de doenças genéticas.
▰ Melhoramento animal e vegetal
Plantas resistentes a pragas e a
diferentes meios nutritivos.
Animais de maiores dimensões,
mais férteis e carne com maior qualidade.
▰ Criação de modelos animais
Ideais para o estudo da estrutura, função e regulação de um gene, além de
facilitar a compreensão da fisiopatologia da doença. 7
 Exemplos de Proteínas Recombinantes

• Hormona de crescimento humano – a administração desta hormona

durante a infância permite a correcção dos casos de nanismo.
• Anticoagulantes – activadores de tecido plasminogénio que por sua vez
activam a plasmina, enzima que dissolve os trombos (evita ataques
cardíacos).
• Dismútase do superóxido – previne danificação de tecidos
quando este é exposto à falta de oxigénio.
• Anticorpos monoclonais – são usados em testes
diagnósticos; transporte direccionado
(drogas, toxinas, componentes radioactivos
utilizados na terapia cancerígena), assim
como outras aplicações. 8
Produção de insulina

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REFERÊNCIAS

▰ "The Cell. A Molecular approach."- 3nd ed.

G.M. Cooper, AMS Press, U.S.A. 2004.
▰ "Molecular Biology of the Cell." - 4 nd ed.,
Alberts, Bray, Lewis, Raff, Roberts and
Watson, Garland Publishing, Inc. New York,
2002.
▰ Nelson D.L., Cox M.M.: Lehningher Principles
of Biochemistry (4th Ed.). W.H. Freeman and
Company, New York. 2005.
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