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SUBSTRATOS PARA DETECO DE Pyricularia grisea E RESTRIO DA GERMINAO DE SEMENTES DE TRIGO in vitro

1Departamento

Gomes1, D. P.; Fortunato, L. de J.; Marques1, E. R.; Rocha1, V. S.; Pereira2, O. L.; Souza1, M. A.

de Fitotecnia; 2Departamento de Fitopatologia.- Universidade Federal de Viosa, 36571-000, Viosa, MG, Brasil. agroneide@hotmail.com APOIO: FAPEMIG

INTRODUO O teste de sanidade de sementes tem como objetivo determinar a condio sanitria de um lote de sementes, fornecendo informaes para programas de certificao, servios de vigilncia vegetal, tratamento de sementes, melhoramento de plantas, etc. (HENNING, 1994; MACHADO, 2000; MACHADO et al., 2003). A germinao rpida de certas espcies, principalmente poceas, durante o perodo de incubao em substrato de papel filtro (blotter test), prejudica a avaliao dos fungos presentes nas sementes, e, pode comprometer a validade dos resultados devido a possveis contaminaes secundrias entre as sementes e o exterior do recipiente (MACHADO et al., 2003). Assim, para inibir a germinao de espcies como o trigo, por exemplo, so utilizados mtodos como o papel de filtro com congelamento (MACHADO, 1988). Entretanto, esse mtodo, em testes de sanidade de sementes de trigo, pode ainda permitir a germinao da espcie, dificultando a deteco de patgenos. Seria interessante, portanto, o estudo de outros mtodos com a finalidade de detectar patgenos, dentre eles, o fungo Pyricularia grisea, agente causal da brusone, uma das principais doenas doenas da cultura, e que tambm, tais mtodos no propiciem a germinao das sementes durante a incubao, como, por exemplo, atravs do uso da restrio hdrica. OBJETIVO Avaliar o comportamento de 10 substratos na deteco de fungos e de Pyricularia grisea, bem como na germinao de sementes de trigo. MATERIAL & MTODOS O experimento foi conduzido no Laboratrio de Patologia de Sementes (DFP) da Universidade Federal de Viosa - MG. Foi utilizado um lote de sementes de trigo com incidncia de fungos e de P. grisea previamente conhecidas. Antes da instalao dos testes, as sementes foram previamente desinfestadas com hipoclorito de sdio a 1 % por trs minutos. Foram avaliados os seguintes substratos como mtodos de deteco de fungos nas sementes: papel de filtro com congelamento (testemunha) (conforme MACHADO, 1988); meio de aveia-gar (aveia, 60; gar, 12gL-1), meio de farinha integral de trigo (conforme CRUZ et al., 2009), meio BDA (batata-dextrose-gar), com e sem restrio hdrica (acrescidos de manitol a -1,0 MPa); e o substrato papel de filtro embebido em 4 restritores hdricos (polietilenoglicol (PEG), manitol, NaCl e sacarose) a -1,5 MPa, num total 11 tratamentos. As solues de PEG, manitol, NaCl e sacarose, nos potenciais osmticos utilizados, foram preparadas utilizando-se a frmula proposta por Vant Hoff citado por SALISBURY & ROSS (1991). Na preparao dos tratamentos que envolveram o emprego dos meios de aveia, farinha integral de trigo e BDA osmoticamente modificados, foram adicionados a esses uma soluo de manitol a -1,0 MPa e vertidos em placas de Petri de 9 cm de dimetro. Em seguida, foram distribudas dez sementes por placa, utilizando-se duas placas por repetio. J nos tratamentos que utilizaram como substrato o papel filtro, foram utilizadas trs folhas de papel de filtro esterilizadas e umedecidas com cada soluto/substncia no potencial osmtico de -1,5 MPa e distribudas em caixas plsticas tipo gerbox. Para cada tratamento (soluto), vinte sementes foram distribudas, uniformemente, sobre o substrato de papel umedecido. No tratamento testemunha foi utilizada a metodologia proposta por Machado (1988). Os tratamentos foram colocados em cmara BOD a 25C e mantidos por 7 dias, sob fotoperodo de 12 horas. Aps o perodo de incubao, foram feitas as seguintes avaliaes: incidncia de Pyricularia grisea, sementes contaminadas e germinao. O experimento foi instalado em delineamento inteiramente casualizado, com 10 tratamentos e 1 testemunha, com 10 repeties por tratamento. Os dados de % foram transformados pela funo arcsen (x/100)1/2 e submetidos ANOVA. Para a comparao de mdias, foi aplicado o teste de Tukey a 5 %. . RESULTADOS
Tabela 1. Incidncia de P. grisea, porcentagem de sementes contaminadas (Incidncia geral) e germinao de um lote de sementes de trigo em diferentes substratos . Incidncia Sementes Germinao Substratos de P. grisea contaminadas (%)

Testemunha Meio BDA Meio BDA + Manitol Meio de Aveia Meio de Farinha de Trigo Meio de Aveia + Manitol Meio de Farinha de Trigo + Manitol Papel filtro embebido em PEG Papel filtro embebido em Manitol Papel filtro embebido em NaCl Papel filtro embebido em Sacarose

30 a 10 cd 17 abc 25 ab 33 a 13 bc 32 a 3d 24 abc 17 abc 16 abc

98 ab 100 a 100 a 100 a 100 a 100 a 100 a 77 c 93 ab 89 b 96 ab

100 a 100 a 51 b 100 a 100 a 6c 4 cd 1d 36 b 32 b 55 b CONCLUSO

O meio de trigo com restrio hdrica (manitol a -1,0 MPa) pode ser uma boa alternativa como substrato para testes de sanidade de sementes da cultura. REFERNCIAS
CRUZ, M. F. A.; PRESTES, A. M.; MACIEL, J. L. N. Esporulao de Pyricularia grisea em diferentes meios de cultura e regimes de luz. Cincia Rural, v.39, n.5, 2009. HENNING, A. A. Patologia de Sementes. Londrina: EMBRAPA - CNPSo, 1994. 43p. (EMBRAPA - CNPSo / Documento 90). MACHADO, J. da C. Patologia de sementes: fundamentos e aplicaes. Braslia: Ministrio da Educao, ESAL: FAEPE, 1988. 107p. MACHADO, J. da C. Tratamento de sementes no controle de doenas. Lavras: LAPS/UFLA/FAEPE, 2000. 138p. MACHADO, J. da C.; OLIVEIRA, J. A. de.; VIEIRA, M. das G. G. C.; ALVES, M. de C. Controle da germinao de sementes de soja em testes de sanidade pelo uso da restrio hdrica. Revista Brasileira de Sementes, v. 25, n. 2, p.77-81, 2003. SALISBURY, F.B.; ROSS, C.W. Plant Physiology. 4 ed., Belmont. Wadsworth, 1991. 682p.