4.

Solventes

4.1. Classificao de solventes, interaes especficas soluto/solvente (De acordo com Solvents and solvent effects in organic chemistry de Christian Reichardt, 2003)

Solues so fases lquidas homogneas que consistem de mais de uma substncia em quantidades variveis. Por convenincia uma das substncias
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denominada solvente, podendo ser ele mesmo uma mistura, e a outra chamada de soluto. Normalmente o soluto apresenta-se em menor quantidade. Um solvente no deve ser considerado um meio macroscpico contnuo caracterizado somente por suas constantes fsicas como densidade, constante dieltrica, ndice de refrao, etc., mas um meio discontnuo que consiste de molculas individuais mutuamente interagentes. Dependendo da extenso das interaes intermoleculares, h solventes com estrutura interna pronunciada, como a gua, e outros em que a interao entre as molculas do solvente pequena, como hidrocarbonetos. Devido a diferenas fsicas e qumicas entre os numerosos solventes orgnicos e inorgnicos, difcil organiz-los em um esquema nico. Vrias abordagens so usadas. Classificam-se os solventes: de acordo com a constituio qumica, utilizando-se as propriedades fsicas, em termos do comportamento cido-base, em termos de interaes especficas soluto-solvente, utilizando mtodos estatsticos multivariados Aqui, vamos descrever brevemente a classificao baseada em Parker, em termos de interaes especficas.

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Parker dividiu os solventes em dois grupos de acordo com suas interaes especficas com nions e ctions, nomeando-os solventes aprticos dipolares e solventes prticos. A distino recai principalmente na dipolaridade das molculas dos solventes e na sua capacidade de formar ligaes de hidrognio. apropriado acrescentar a estes dois grupos um terceiro, o de solventes aprticos apolares. Solventes prticos contm tomos de hidrognio ligados a elementos eletronegativos (F-H, -O-H, -N-H, etc.) e so, portanto, doadores de ligaes de hidrognio. Com exceo do cido actico (e seus homlogos), as permissividades relativas so geralmente maiores que 15, e os valores ETN (escala emprica de solventes que utiliza o solvatocromismo como indicador de polaridade, ver seo 4.3.1 neste captulo) esto entre 0.5 e 1.0; indicando que esses solventes so fortemente polares. Nessa classe de solventes encontram-se: gua, amnia, lcoois, cidos carboxlicos, e amidas primrias.
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Solventes aprticos dipolares, no so doadores de ligaes de hidrognio, mas possuem alta permissividade relativa ( r > 15), maiores momentos de dipolo ( > 8.3 10-30 C.m = 2.5 D) e valores de ETN intermedirios de 0.3 a 0.5. Apesar de no serem doadores de ligao de hidrognio, pois suas ligaes C-H no so suficientemente polarizadas, eles so geralmente doadores de pares de eltrons e por isso solvatam ctions, devido presena de pares solitrios de eltrons. Entre os mais importantes solventes aprticos dipolares esto, por exemplo: acetona, acetonitrila, N,N-dimetilformamida e dimetilsulfxido, os quais utilizamos em nosso estudo. Um solvente aprtico apolar caracterizado por uma baixa permissividade relativa ( r < 15), um baixo momento de dipolo ( < 8.3 10-30 C.m = 2.5 D), um baixo valor ETN (ETN ca. 0...0.3); e a inabilidade para agir como um doador de ligao de hidrognio. Tais solventes somente interagem fracamente com o soluto, pois somente foras no especficas direcionais, de induo e de disperso podem operar. Neste grupo esto os hidrocarbonetos alifticos e aromticos, seus derivados halognicos, aminas tercirias, e dissulfeto de carbono. Devemos enfatizar que esta classificao de solventes no rgida. Existem vrios solventes que no podem ser colocados em nenhum desses grupos, por exemplo: teres, steres carboxlicos, aminas primrias e secundrias, e N-amidas

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monosubstitudas como N-metilacetamida. A escolha de r = 15 como fronteira arbitrria, mas prtica, pois nos solventes com menores valores de r , ocorrem associaes de ons, e os ons solvatados livres no podem ser observados. Esta diviso de solventes em trs classes tem, principalmente, valor heurstico. Sua utilidade devido ao fato de dar especial ateno para os solventes aprticos dipolares, com sua extraordinria capacidade de solvatao especfica de ons. Solventes prticos so particularmente bons solvatadores de nions, devido a sua habilidade de fazer ligao de hidrognio. Esta tendncia torna-se mais pronunciada para as densidades de carga mais elevadas dos nions a serem solvatados. Deve-se atentar que nas solvataes mais fortes a reatividade nucleoflica dos nions ir decrescer. Em contraste, nos solventes aprticos dipolares, a solvatao dos nions ocorre, principalmente, por foras on-dipolo e on-dipolo induzido. As ltimas
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so importantes para nions maiores, mais fracos, com baixa densidade de cargas, em solventes aprticos dipolares mais fracos. A observao de que solventes prticos so muito melhores solvatadores de nions que solventes aprticos dipolares, e que o inverso verdade para solvatao de ctions, leva a regras de valores extremos para a seleo de solventes para reaes especficas.

4.1.1. Algumas consideraes sobre interaes intermoleculares (De acordo com Intermolecular and surfaces forces de Jacob N. Israelachvili, 1998)

Somente com a elucidao da estrutura eletrnica de tomos e molculas e o desenvolvimento da teoria quntica que foi possvel entender a origem das foras intermoleculares e derivar expresses para seus potenciais de interao. Na sua origem todas as foras intermoleculares so essencialmente eletrostticas. Isso est estabelecido no teorema de Hellman-Feynman: uma vez que a distribuio espacial da nuvem eletrnica pode ser determinada pela soluo da equao de Schrodinger, as foras intermoleculares podem ser calculadas diretamente com os

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fundamentos de eletrosttica clssica. Este teorema simplifica bastante as bases da natureza das foras intermoleculares. Para duas cargas temos a familiar fora de Coulomb, enquanto que para cargas em movimento temos foras

eletromagnticas, e para flutuaes complexas na distribuio de cargas que ocorrem em torno de tomos, ns obtemos as vrias ligaes interatmicas e intermoleculares familiares fsica, qumica e biologia. Isso parece maravilhosamente simples. Infelizmente, solues exatas da equao de Schrodinger no so fceis de obter. Na verdade, elas so muito difceis de resolver exatamente. Por esta razo, til classificar as interaes intermoleculares em diferentes categorias, apesar de todas elas terem a mesma origem fundamental. Ento, comumente encontramos termos como ligaes inicas, ligaes metlicas, foras de van der Waals, interaes hidrofbicas, ligaes de hidrognio e foras de solvatao como resultado dessa classificao, frequentemente acompanhada por outras divises, como interaes fortes e fracas
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ou foras de curto alcance e de longo alcance. Estas distines podem ser muito teis, mas tambm podem levar a confuses, por exemplo: quando a mesma interao contada duas vezes ou quando duas interaes normalmente distintas so fortemente acopladas. No nvel molecular mais bsico, ns temos o potencial de interao w(r) entre duas molculas ou partculas. O potencial de interao w(r) relacionado fora entre duas molculas ou partculas por F = dw(r)/dr. Desde que a derivada de w(r) em relao a distncia r d a fora, e como a fora pode realizar trabalho, w(r) frequentemente designado como energia livre ou energia disponvel. Considerando as foras entre duas molculas ou partculas em lquidos, surgem vrios efeitos que no esto presentes quando as interaes ocorrem no espao livre. Isto devido a uma interao em um meio sempre envolver muitas molculas do solvente, isto , so essencialmente interaes de muitos corpos. (i) Para duas molculas do soluto em um solvente, seu potencial de interao w(r) inclui no somente a energia direta da interao soluto-soluto, mas tambm algumas modificaes nas energias de interao soluto-solvente e solvente-solvente medida que as duas molculas do soluto aproximam-se uma da outra. Uma molcula do soluto dissolvida pode aproximar-se de outra somente deslocando molculas do solvente ao longo do seu caminho. A fora lquida, ento, tambm depende da atrao entre as molculas do soluto e do solvente.

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Portanto, enquanto duas molculas podem atrair-se no espao livre, elas podem repelir-se em um meio se o trabalho que deve ser feito para deslocar o solvente exceder o ganho pela aproximao das molculas do soluto. (ii) As molculas do soluto frequentemente perturbam a ordem local ou estrutura das molculas do solvente. Se a energia livre associada com esta perturbao varia com a distncia entre as duas molculas dissolvidas, produz-se uma solvatao adicional ou fora estrutural entre elas. (iii) Interaes soluto-solvente podem mudar as propriedades das molculas dissolvidas, tal como os seus momentos de dipolo e suas cargas (grau de ionizao). As propriedades das molculas dissolvidas podem, portanto, ser diferentes em diferentes meios. (iv) Finalmente, quando uma molcula individual introduzida em um meio condensado, ns no devemos esquecer a energia gasta para quebrar ligaes e formar a cavidade para acomodar a molcula.
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Estes efeitos so obviamente interrelacionados e so coletivamente relacionados aos efeitos do solvente ou efeitos do meio. Eles podem manifestar-se em diferentes graus, dependendo da natureza e intensidade das interaes solutosoluto, soluto-solvente e solvente-solvente. motivo de investigao as vrias formas funcionais de w(r) para os diferentes tipos de foras, e a influncia dos efeitos de solvente nos potenciais de interao intermoleculares e interpartculas. Foras intermoleculares podem ser simplificadamente classificadas em trs categorias. Primeira, aquelas de origem puramente eletrosttica, surgindo a partir da fora coulombiana entre cargas. As interaes entre cargas, dipolos permanentes, quadrupolos, etc., caem nesta categoria. Segunda, existem foras de polarizao que surgem dos momentos de dipolo induzidos nos tomos e molculas, pelos campos eltricos das cargas e dipolos permanentes prximos. Todas as interaes em um meio solvente envolvem efeitos de polarizao. Terceira, existem foras que so de natureza quntica. Tais foras do origem s ligaes covalentes ou qumicas (incluindo interaes de transferncias de carga) e s interaes estricas repulsivas ou interaes de troca (devido ao princpio de excluso de Pauli) que equilibra as foras atrativas a distncias muito curtas. Estas trs categorias no devem ser consideradas rgidas nem exaustivas: para certos tipos de foras, por exemplo, foras de van der Waals, uma classificao no ambqua no possvel, enquanto algumas interaes

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intermoleculares (por exemplo, foras magnticas) nem sero mencionadas, pois para os sistemas que consideramos elas so sempre muito fracas.

4.2. Solventes e seus efeitos em cromforos e fluorforos (De acordo com Principles of fluorescence spectroscopy de Joseph R. Lakowicz, 2006)

A polaridade do solvente e o meio gerado por ele tem efeitos importantes sobre as propriedades de emisso de fluorforos. Os efeitos da polaridade do solvente so a origem do deslocamento de Stokes, que uma das primeiras observaes em fluorescncia. Uma utilizao comum dos efeitos de solventes a determinao da polaridade de stios por meio de sondas ligadas a
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macromolculas. Isso realizado pela comparao do espectro de emisso e/ou rendimento quntico quando o fluorforo est ligado macromolcula ou dissolvido em solventes de polaridades diferentes. Os efeitos de solvente e o meio por ele gerado sobre os espectros de fluorescncia so complexos, e so devidos a vrios fatores alm da polaridade do solvente. Os fatores que afetam o espectro de emisso de fluorescncia e o rendimento quntico incluem: Polaridade do solvente e viscosidade; Taxa da relaxao do solvente; Mudanas conformacionais na sonda; Rigidez da vizinhana; Transferncia de carga interna; Transferncia de prtons e reaes de estado excitado; Interaes sonda-sonda; Mudanas nas taxas de decaimento radiativo e no-radiativo

Estes vrios efeitos do muitas oportunidades para sondar o ambiente local em torno do fluorforo. No entanto, pode ser difcil saber qual efeito dominante

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em um sistema experimental particular, e normalmente temos mais de um efeito agindo sobre o fluorforo. Quando consideramos os efeitos do ambiente, a polaridade do solvente geralmente o primeiro efeito a se pensar. Entretanto, os efeitos do ambiente so complexos e a polaridade do solvente no pode ser descrita usando uma teoria simples. A equao de Lippert-Mataga explica parcialmente os efeitos da polaridade de solvente, mas no leva em conta outros efeitos, como as ligaes de hidrognio no fluorforo ou transferncia interna de cargas que depende da polaridade do solvente. 4.2.1. Efeitos gerais de solvente As emisses de fluorforos geralmente ocorrem em comprimentos de onda que so maiores que aqueles em que ocorreu a absoro. Esta perda de energia
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devida a uma variedade de processos dinmicos que ocorrem aps a absoro da luz (Figura 4.1).

Figura 4.1.

Diagrama de Jablonski para fluorescncia com relaxao de solventes

(modificado de Lakowicz, 2006).

O fluorforo tipicamente excitado para o primeiro estado singleto (S1), geralmente para um nvel vibracional excitado em S1. O excesso de energia vibracional rapidamente perdido para o solvente. Se o fluorforo excitado para o segundo estado singleto (S2), h rapidamente o decaimento para o estado S1 em

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tempos da ordem de 10-12 s devido converso interna e relaxao vibracional. Os efeitos de solvente desviam a emisso para energias ainda mais baixas devido estabiliazao do estado excitado pelas molculas polares do solvente. Tipicamente o fluorforo tem um momento de dipolo grande no estado excitado (E) em comparao com o do estado fundamental (G). Aps a excitao os dipolos do solvente podem reorientar-se ou relaxar-se em torno de E, o que diminui a energia do estado excitado. medida que a polaridade do solvente aumenta este efeito torna-se maior, resultando na emisso em energias menores ou comprimentos de onda maiores. Em geral, somente fluorforos polares mostram maior suscetibilidade em relao polaridade do solvente. Molculas no-polares, como os hidrocarbonetos aromticos no substitudos, so muito menos sensveis polaridade do solvente. Tempos de vida de fluorescncia (1-10 ns) so geralmente muito maiores do que o tempo necessrio para a relaxao do solvente. Para solventes fluidos em
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temperatura ambiente, a relaxao do solvente ocorre em 10-100 ps. Por esta razo, os espectros de emisso de fluorforos so representativos do estado relaxado do solvente. A Figura 4.1 revela porque o espectro de absoro menos sensvel polaridade do solvente do que o espectro de emisso. A absoro de luz ocorre em, aproximadamente, 10-15 s, um tempo muito curto para a movimentao do fluorforo ou do solvente. Os espectros de absoro so menos sensveis polaridade do solvente porque a molcula est exposta ao mesmo ambiente nos estados fundamental e excitado. De modo diverso, o estado emissivo do fluorforo est exposto ao ambiente relaxado, que contm as molculas do solvente orientadas em torno do momento de dipolo do estado excitado. A polaridade do solvente pode ter um efeito dramtico no espectro de emisso. Como exemplo, a Figura 4.2 mostra uma fotografia da emisso de DNS (4-dimetilamino-4-nitroestilbeno) em solventes com polaridade crescente. Os espectros de emisso so mostrados abaixo da fotografia, associados ao desvio nas cores, do azul mais escuro (mx=450 nm) em hexano para a cor laranja em acetato de etila (mx=600 nm), e vermelho em n-butanol (mx=700 nm).

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Figura 4.2.
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Fotografia e espectros de emisso de DNS em solventes de polaridade

crescente. H, hexano; CH, ciclohexano; T, tolueno; EA, acetato de etila; Bu, n-butanol (Lakowicz, 2006).

4.2.2. Outros mecanismos para deslocamentos espectrais Apesar da interpretao dos espectros de emisso dependentes de solvente parecer simples, isso um assunto muito complexo. A complexidade devido a uma variedade de interaes que podem resultar em desvios espectrais. Em um nvel mais simples, os espectros de emisso dependentes de solvente so interpretados em termos da teoria para efeitos gerais de solventes, dada pela equao de Lippert-Mataga (ver seo 4.4 neste captulo), que descreve o desvio de Stokes em termos das mudanas no momento de dipolo que ocorrem aps a excitao, e a energia de um dipolo em solventes de constantes dieltricas () e ndices de refrao (n) diferentes. Estes efeitos gerais de solvente ocorrem sempre que um fluorforo dissolvido em um solvente, e so independentes das propriedades qumicas do fluorforo e do solvente. A teoria para os efeitos gerais de solventes frequentemente inadequada para explicar em detalhes o comportamento de fluorforos em uma variedade de ambientes. Isso porque fluorforos frequentemente mostram interaes mltiplas com seus ambientes locais, que podem deslocar o espectro em quantidades

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comparveis aos efeitos gerais de solventes. Por exemplo, o anel indol exibe uma emisso estruturada no solvente no-polar ciclohexano (Figura 4.3). Este espectro uma imagem especular do espectro de absoro. Adio de pequenas quantidades de etanol (1 a 5%) resulta na perda da emisso estruturada. Estas quantidades de etanol so muito pequenas para alterar significativamente a polaridade do solvente e causar um deslocamento espectral devido a um efeito geral de solvente. O deslocamento espectral visto na presena de pequenas quantidades de etanol devido a ligaes de hidrognio do etanol com o nitrognio imino do anel indol.

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Figura 4.3.

Espectros de emisso do indol em ciclohexano, etanol e suas misturas a

20 C (modificado de Lakowicz, 2006).

Tais efeitos especficos de solventes ocorrem em muitos fluorforos, e devem ser considerados na interpretao dos espectros de emisso. O diagrama de Jablonski para efeitos de solvente deve tambm refletir a possibilidade de interaes especficas entre fluorforo e solvente, que podem diminuir a energia do estado excitado (Figura 4.4).

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Figura 4.4.

Efeitos do ambiente sobre a energia do estado excitado. As setas

tracejadas indicam que o fluorforo pode ser fluorescente ou no, nos diferentes estados (modificado de Lakowicz, 2006).

Alm das interaes especficas solvente-fluorforo, muitos fluorforos podem formar um estado de transferncia interna de cargas (ICT), ou um estado
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de transferncia interna de cargas com rotao (TICT). Por exemplo, suponhamos um fluorforo que contenha um grupo doador de eltrons e um grupo aceitador de eltrons, tais grupos poderiam ser o grupo amina e o grupo carbonil, respectivamente, mas muitos outros grupos so conhecidos. Aps a excitao pode existir um aumento na separao de cargas no fluorforo. Se o solvente polar, ento as espcies com separao de cargas (o estado ICT) podem tornar-se o estado de mais baixa energia (Figura 4.4). Em um solvente no-polar as espcies sem separao de cargas, chamadas de estados excitados localmente (LE), podem ter a energia mais baixa. Ento, o papel da polaridade do solvente no somente diminuir a energia do estado excitado devido a efeitos gerais de solvente, mas tambm governar qual estado tem a energia mais baixa. Em alguns casos a formao de estados ICT requer a rotao de grupos do fluorforo para formar estados TICT. A formao de estados ICT no est contemplada na teoria dos efeitos gerais de solvente. Adicionalmente, um fluorforo pode exibir um grande deslocamento espectral devido formao de excmeros (dmeros no estado excitado) ou exciplexos (complexos no estado excitado). Os fluorforos podem ser fluorescentes ou no nestes diferentes estados. O rendimento quntico pode alterar-se devido a mudanas nas taxas de decaimento no-radiativo (knr) ou devido a mudanas conformacionais no fluorforo.

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Em resumo, nenhuma teoria simples pode ser usada para uma interpretao quantitativa dos efeitos do ambiente sobre a fluorescncia. A interpretao desses efeitos no deve se basear somente em consideraes sobre polaridade, mas tambm sobre a estrutura do fluorforo e os tipos de interaes qumicas que podem acontecer com outras molculas da vizinhana. As tendncias observadas com a polaridade dos solventes seguem a teoria para efeitos gerais de solventes, que podem dar a impresso que a polaridade dos solventes o nico fator a ser considerado. Na realidade, mltiplos fatores afetam a emisso de um dado fluorforo. 4.2.3. Efeitos especficos de solvente Foram descritas nos itens acima as interaes gerais entre fluorforos e solventes, determinadas pela polarizabilidade eletrnica do solvente (que
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descrita por seu ndice de refrao) e a polarizabilidade molecular (que inclui a reorientao dos dipolos do solvente e funo da constante dieltrica). Diferentemente destas, as interaes especficas so produzidas por uma ou vrias molculas da vizinhana, e so determinadas por propriedades qumicas especficas dos fluorforos e dos solventes. Efeitos especficos podem ser originados de ligaes de hidrognio, solvatao preferencial, comportamento qumico de cidos e bases, ou interaes de transferncia de cargas, para nomear alguns. Os deslocamentos espectrais causados por tais interaes especficas podem ser substanciais e, se no forem reconhecidos, limitam uma interpretao detalhada dos espectros de emisso. Interaes especficas entre fluorforo e solvente podem ser frequentemente identificadas pela anlise dos espectros de emisso em uma variedade de solventes. Um exemplo de efeitos especficos de solvente dado pelo 2acetilantraceno (2-AA) e seus derivados. Os espectros de emisso do 2-AA em hexano contendo pequenas quantidades de metanol so mostrados na Figura 4.5.

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Figura 4.5.

Espectros de fluorescncia de 2-acetilantraceno em mistura de metanol

-3

e hexano a 20C. Concentraes de metanol em mol dm : (0) 0; (1) 0.03; (2) 0.05; (3) 0.075; (4) 0.12; (5) 0.2 e (6) 0.34 (modificado de Lakowicz, 2006).

Estas concentraes baixas de metanol resultam em uma perda da emisso

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estruturada, que substituda por emisso desestruturada em comprimento de onda maior. medida que a polaridade do solvente aumentada tem-se um deslocamento gradual dos espectros de emisso para comprimentos de onda maiores. Estes espectros sugerem que a emisso de 2-AA sensvel tanto a efeitos especficos de solvente como a efeitos gerais de solventes em solventes mais polares. A presena de efeitos especficos de solvente pode ser vista na dependncia do mximo de emisso em relao porcentagem do solvente polar (Figura 4.6). Em hexano, o mximo de emisso de 2-AA desloca-se gradualmente medida que a porcentagem de dioxano aumentada para 100%. Estes desvios induzidos pelo dioxano so provavelmente um resultado de efeitos gerais de solvente. Em contraste, a maioria dos desvios causados pelo metanol foi produzida por somente 1-2% de metanol. Esta quantidade de lcool pequena demais para afetar o ndice de refrao ou a constante dieltrica do solvente, portanto este desvio um resultado de efeitos especficos de solvente.

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Figura 4.6.

Efeito da composio do solvente sobre o mximo de emisso de 2-1

acetilantraceno. 1 kK = 1000 cm (modificado de Lakowicz, 2006).

Interaes especficas entre fluorforo e solvente podem ocorrer tanto no estado fundamental como no estado excitado. Se a interao ocorre somente no
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estado excitado, ento a adio de um solvente polar no afetar os espectros de absoro. Se a interao ocorre no estado fundamental, ento alguma modificao no espectro de absoro esperada. No caso do 2-AA, os espectros de absoro mostram perda de estrutura vibracional e um desvio para o vermelho aps a adio de metanol (ver Figura 4.7). Isto sugere que o 2-AA e o lcool j esto ligados por pontes de hidrognio no estado fundamental. Uma ausncia de modificaes nos espectros de absoro indica que no ocorrem interaes no estado fundamental. Se efeitos especficos estiverem presentes em um fluorforo ligado a uma macromolcula, a interpretao do espectro de emisso pode ser complexa. Por exemplo, uma molcula como a de 2-acetilantraceno, quando ligada a um stio hifrofbico em uma protena, pode exibir um espectro de emisso comparvel ao visto em gua quando apenas uma molcula de gua estiver prxima ao grupo carbonil, impedindo atribuir hidrofobicidade a este stio.

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Figura 4.7.

Espectros de absoro de 2-acetilantraceno em hexano puro (0) e

-3

misturas de metanol e hexano. As concentraes de metanol em mol dm so 0.2 (1) e metanol puro (2). O espectro 3 (pontilhado) refere-se ao complexo ligado ao hidrognio (Lakowicz, 2006).
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4.3. Escalas empricas de polaridade de solvente baseadas em desvios solvatocrmicos (De acordo com Molecular Fluorescence de Bernard Valeur, 2005)

Compostos so chamados solvatocrmicos quando a localizao de seus espectros de absoro (e emisso) depende da polaridade do solvente. Um desvio batocrmico (para o vermelho) e um desvio hipsocrmico (para o azul) com aumento da polaridade do solvente referem-se ao solvatocromismo positivo e negativo, respectivamente. Estes desvios solvatocrmicos de compostos apropriados em solventes de polaridades diversas podem ser usados na construo de escalas empricas de polaridade (Reichardt, 1988; Buncel e Rajagopal, 1990).

4.3.1. Abordagem com um nico parmetro Kosower em 1958 foi o primeiro a usar o solvatocromismo como uma sonda de polaridade de solvente. A relevante escala Z baseada no desvio solvatocrmico de 4-metoxicarbonil-1-etilpiridinium iodide (1). Mais tarde,

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Dimroth e Reichardt sugeriram usar corantes betain, cujo solvatocromismo negativo extraordinariamente grande. Em particular, 2,6-difenil-4-(2,4,6-trifenil1-piridino)-fenolato (3) e seus derivados mais lipoflicos (3) (solveis at em hidrocarbonos) so a base da escala ET(30). Esse composto era o corante betain n 30 no trabalho original dos autores, o que explica a notao ET(30) (Figura 4.8).

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Figura 4.8.

Molculas utilizadas em escalas empricas de solventes: (1) 4-

metoxicarbonil-1-etilpiridinium iodide; (2) piridinium-N-fenxido e (3) 2,6-difenil-4-(2,4,6trifenil-1-piridino)-fenolato.

Estes compostos podem ser considerados como zwiterinicos no estado fundamental. Sobre excitao, ocorre transferncia de eltrons do tomo de oxignio para o centro do sistema aromtico. O momento de dipolo por volta de 15D no estado fundamental ao passo que praticamente zero no estado excitado. O valor ET(30) para um solvente simplesmente definido como a energia de transio para a banda de absoro de maior comprimento de onda do corante betain (2) piridinium-N-fenxido dissolvido medido em kcal mol-1 (Figura 4.8). A energia de transio dada por: ET = hcN a = 2,859 103 ; onde h a constante de Planck, c a velocidade da luz, o comprimento de onda correspondente a transio (expresso em cm-1) e N a o nmero de Avogadro. Uma extensiva lista dos valores de ET(30) esta disponvel (Reichardt, 2003): eles variam de 30.9 no nheptano a 63.1 na gua. Ateno deve ser dada ao efeito adicional de ligao de hidrognio em solventes prticos como alcois. frequentemente observado que correlaes de propriedades dependentes de solventes (especialmente posies e intensidades de

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bandas de absoro e emisso) com a escala ET(30) frequentemente seguem duas linhas distintas, uma para solventes aprticos e outra para solventes prticos. Alm disso, em muitas pesquisas usando sondas diferentes das betainas, o parmetro ET(30) tem sido usado para caracterizar a polaridade do solvente. Entretanto, uma escala de polaridade baseada em uma classe particular de molculas aplica-se, em princpio, somente a molculas que se assemelham. A sensibilidade dos corantes betain em relao polaridade do solvente excepcionalmente alta, mas infelizmente eles no so fluorescentes. Corantes fluorescentes sensveis a polaridade oferecem vantagens distintas, especialmente em estudos biolgicos, por isso a importncia de se construir sondas fluorescentes. importante salientar novamente que h muitos parmetros subjacentes ao conceito de polaridade, e que a validade de escalas empricas de polaridade baseadas em um nico parmetro questionvel.
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4.3.2. Abordagem com mltiplos parmetros Uma abordagem com mltiplos parmetros prefervel e a escala * de Kamlet e Taft (Kamlet et al., 1977) merece reconhecimento especial porque tem tido sucesso ao ser aplicada a posies ou intensidades de absoro mxima em IR, NMR, ESR e em espectros de absoro UV-visvel e de fluorescncia, e muitos outros parmetros fsicos ou qumicos (taxa de reao, constante de equilbrio, etc.). Tais observveis so representados por XYZ e suas variaes como uma funo da polaridade do solvente, podendo ser expresso pela equao: XYZ = XYZ0 + s* + a + b Onde * uma medida dos efeitos da polaridade/polarizabilidade do solvente; a escala um ndice da acidez (doador de pontes de hidrognio) do solvente e a escala um ndice da basicidade (receptor de pontes de hidrognio) do solvente. Os coeficientes s, a e b descrevem a sensibilidade de cada contribuio individual no processo. A vantagem do tratamento de Kamlet-Taft separar o papel quantitativo de propriedades tais como ligaes de hidrognio. notvel que a escala * foi estabelecida a partir do comportamento mdio

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espectral de numerosos solutos, o que oferece uma vantagem especial, pois se leva em conta as interaes especficas e no-especficas (Valeur, 2005). As duas mais populares escalas de solventes para correlao multilinear so as de Kamlet-Taft (comentada acima) e de Cataln. Para a escala de Cataln os parmetros so representados por SA para a acidez, SB para a basicidade e SPP para a polaridade/polarizabilidade, ento a regresso multilinear pode ser descrita como: y = y0 + aSASA + bSBSB+ cSPPSPP Onde y a propriedade fotofsica (como mximo de absoro, emisso ou desvio de Stokes, em cm-1) e y0 refere-se propriedade fotofsica intrnseca do cromforo/fluorforo na ausncia dos solventes (i. e. no vcuo). Atravs da regresso multilinear dos dados fotofsicos, os coeficientes y0, aSA, bSB, cSPP (Cataln) ou XYZ0, a, b, s (Kamlet-Taft) podem ser obtidos simultaneamente. Ento a contribuio da respectiva propriedade dos solventes,
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isto , a acidez (SA ou ), a basicidade (SB ou ) ou a polaridade/polarizabilidade (SPP ou *), para a propriedade fotofsica do cromforo/fluorforo pode ser estimada. Deste modo a regresso multilinear til para revelar a origem da sensibilidade ao solvente do composto solvatocrmico/solvatofluorocrmico (Han et al., 2008). 4.4. Teoria dos desvios solvatocrmicos Se a relaxao do solvente (ou ambiente) completa, equaes para desvios solvatocrmicos produzidos por interaes dipolo-dipolo podem ser derivadas utilizando-se modelos simples de dipolos centrais esfricos rodeados por esferas isotropicamente polarizveis e assumindo momentos de dipolos iguais em estados de Franck-Condon e estados relaxados. Os desvios solvatocrmicos (expressos em nmeros de onda) so dados pelas seguintes equaes para absoro e emisso, respectivamente:

a = f =

r r r 2f g .( e g ) + const. 3 4 0 hca r r r 2f e .( g e ) + const. 3 4 0 hca

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Onde h a constante de Planck, c a velocidade da luz, a o raio da cavidade na qual reside o soluto e f a polarizabilidade de orientao definida como: f = f ( ) f (n 2 ) =

1 n2 1 2 + 1 2n 2 + 1

f varia de 0.001 em ciclohexano a 0.320 em gua. Subtraindo as equaes anteriores para a absoro e emisso, chegamos equao de Lippert-Mataga:
= a f = 2f ( e g ) 2 + const. 3 4 0 hca

Esta expresso do desvio de Stokes depende somente da magnitude absoluta do momento de dipolo da carga transferida ge = e - g e no do ngulo entre os dipolos. A validade da equao de Lippert-Mataga pode ser checada pelo uso de vrios solventes e pela construo do grfico como uma funo de f (grfico de Lippert). Uma variao linear no sempre observada porque somente
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interaes dipolo-dipolo foram levadas em conta e a polarizabilidade do soluto foi negligenciada. Em uma abordagem similar, MacRae incluiu a polarizabilidade do soluto, que foi aproximada para a3/2. A equao de Lippert-Mataga ainda vlida, mas f foi substitudo por g =

1 n2 1 . + 2 n2 + 2

Escolhendo solventes sem capacidade de doar ou aceitar ligaes de hidrognio, um comportamento linear frequentemente observado, o que nos permite determinar o aumento no momento de dipolo ge aps a excitao, possibilitando estimar de forma correta o raio da cavidade. A incerteza surge da previso da cavidade de Onsager e da aproximao da forma esfrica desta cavidade. Uma forma elipside mais apropriada para molculas alongadas. Apesar dessas incertezas, a relao de Lippert-Mataga muito utilizada para estimar raios moleculares e raios de cavidade. Suppan (1983) derivou outra equao til a partir das equaes de absoro e emisso anteriores, assumindo que g e e so colineares e desconsiderando o raio da cavidade e a forma da funo polaridade do solvente. Esta equao envolve as diferenas nos desvios solvatocrmicos na absoro e emisso entre dois solventes 1 e 2:

( ) ( ) ( ) ( )
f 1 a 1

f 2

a 2

e g

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A equao anterior e a equao de Lippert-Mataga possibilitam um meio de determinar os momentos de dipolo excitado junto com os ngulos dos vetores dipolos, mas eles so vlidos somente se: (i) os momentos de dipolo nos estados Franck-Condon e relaxado forem iguais; (ii) o raio da cavidade no se modifica aps a excitao; (iii) os desvios de solvente forem medidos em solventes de mesmo ndice de refrao, mas de constantes dieltricas diferentes. Quando o estado emissivo um estado de transferncia de carga que no atingido por excitao direta (por exemplo, que resulta de transferncia de eltrons em uma molcula doador-ponte-receptor), as teorias descritas acima no podem ser aplicadas porque o espectro de absoro do estado de transferncia de carga no conhecido. A teoria de Weller para exciplexes ento mais apropriada e somente leva em conta o desvio do espectro de fluorescncia, que dado por:
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f =
Onde f ' =

2f ' e 2 + const. 3 4 0 hca

n2 1 1 2 2 + 1 4n + 2

Quando um estado de transferncia de carga intramolecular com rotao (TICT) formado no estado excitado, a geometria molecular e a distribuio de cargas tm que ser levadas em conta. Desprezando o momento de dipolo do estado fundamental em relao ao do estado excitado e aproximando a polarizabilidade do soluto para a3/2, a seguinte frmula foi obtida (Rettig, 1982):

f =
Onde f ' ' =

2f ' ' e 2 + const. 3 4 0 hca

1 n2 1 + 2 2n 2 + 4

As aproximaes feitas nas teorias dos desvios solvatocrmicos, em conjunto com as incertezas sobre o tamanho e a forma do raio da cavidade, explicam porque a determinao dos momentos de dipolo do estado excitado no to acurada.

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4.5. Transferncia intramolecular de cargas fotoinduzidas (ICT) e rotao interna A excitao de um fluorforo induz a translao de um eltron de um orbital para outro. Se o orbital inicial e o final so separados no espao, a transio eletrnica acompanhada por uma mudana quase instantnea no momento de dipolo do fluorforo. Quando este possui um grupo doador de eltrons (por exemplo, -NH2, -NMe2, -CH3O) conjugado a um grupo aceitador de eltrons (por exemplo, >C=O, -CN), o aumento no momento de dipolo pode ser muito grande. Consequentemente o estado excitado alcanado na excitao (chamado estado de Franck-Condon ou estado excitado local) no est em equilbrio com as molculas do solvente na vizinhana se este for polar. Em um meio que seja suficientemente fluido, as molculas do solvente giram durante o tempo de vida do estado excitado at que a estrutura de solvatao esteja em equilbrio termodinmico com o
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fluorforo. Um estado de transferncia de carga intramolecular (ICT) relaxado ento alcanado. Esta relaxao do solvente explica o aumento no desvio para o vermelho do espectro de fluorescncia medida que a polaridade do solvente aumenta (Figura 4.9).

Figura 4.9.

Relaxao do solvente em torno de uma sonda que tem um momento de

dipolo pequeno no estado fundamental e um momento de dipolo grande no estado excitado (Valeur, 2005).

Alm disso, quando um receptor de ctions ligado a um fluorforo com transferncia intramolecular de carga, o ction ligado a esse receptor pode interagir com o grupo doador ou com o grupo receptor de eltrons, ento o estado

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ICT perturbado; e as consequentes mudanas nas propriedades fotofsicas do fluorforo podem ser usadas como sensores de ctions. A relaxao em direo a um estado ICT pode ser acompanhada por uma rotao interna no fluorforo. Algumas molculas apresentam esse fenmeno, exibindo duas bandas fluorescentes em solventes polares. Um exemplo de grande interesse 4-N,N-dimetilamino-benzonitrilo (DMABN). No estado fundamental a molcula quase planar, que corresponde ao mximo de conjugao entre o grupo dimetilamino e o anel fenil. De acordo com o princpio de Franck-Condon, o estado excitado local (LE) ainda planar, mas a relaxao do solvente ocorre concomitantemente com a rotao do grupo dimetilamino, at que ele esteja torcido a um ngulo reto e a conjugao seja perdida. Isso resulta no estado TICT (Twisted intramolecular charge transfer), estabilizado pelas molculas do solvente polar, e existindo uma separao total de cargas entre o grupo dimetilamino e a metade cianofenil.
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Uma banda de emisso correspondente a emisso do estado TICT observada em comprimentos de onda maiores (banda anmala) (Figura 4.10); em adio a banda de fluorescncia devido emisso do estado LE (banda normal).

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Figura 4.10.

Diagrama de energia potencial de DMABN; a reao coordenada contm

a relaxao do solvente e a rotao do grupo dimetilamino. Espectro de fluorescncia temperatura ambiente em hexano e tetrahidrofurano (adaptado de Lippert et al., 1987; em Valeur, 2005).

4.6. Inverso dos estados n-* e -* induzida por polaridade Uma mudana na habilidade de um solvente formar pontes de hidrognio pode afetar a natureza (n-* vs -*) do estado singleto de mais baixa energia. Alguns compostos carbonil aromticos frequentemente possuem estados -* e n* baixos, com pouco espaamento, ou seja, muito prximos. Inverso desses dois estados pode ser observada quando a polaridade e a capacidade de fazer pontes de hidrognio do solvente aumentam, porque o estado n-* desvia para uma maior energia, enquanto o estado -* desvia para uma menor energia. Isso resulta em

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um aumento do rendimento quntico de fluorescncia porque a emisso radiativa a partir de estados n-* conhecidamente menos eficiente do que a partir de estados -*. A outra consequncia o desvio para o vermelho do espectro de fluorescncia (Figura 4.11).

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Figura 4.11. (Valeur, 2005).

Os efeitos da inverso dos estados n-* e -* induzida por polaridade

Pireno-1-carboxaldedo e 7-alkoxycoumarins pertencem a esta classe de sondas de polaridade.

O rendimento quntico de fluorescncia de pirenecarboxaldedo muito baixo em solventes no polares, tal como no n-hexano (< 0.001), mas drasticamente aumentado em solventes polares (0.15 no metanol). A fluorescncia emitida a partir do estado n-* em solventes no polares. Quando a polaridade do solvente aumenta, o estado -*, que se encontra um pouco acima do estado n*, trazido para baixo pela relaxao do solvente durante o tempo de vida do estado excitado, e assim torna-se o estado emissivo (Valeur, 2005).