Anemia Infecciosa Eqina (AIE)

Introduo
A Anemia Infecciosa Eqina (AIE) uma doena viral que atinge todos os
membros da famlia dos Eqdeos. Todas as raas e idades so suscetveis, porm,
animais subnutridos, parasitados e debilitados tm maior predisposio. A AIE
causada por um vrus da famlia Retroviridae sub-famlia Lentivirinae, e est
relacionado ao vrus da imunodeficincia humana, bovina e felina e tambm com o
vrus da artrite-encefalite caprina e o vrus ovino Maedi/Visna.
Ocorrncia
O vrus da AIE tem distribuio mundial especialmente em regies midas e
pantanosas onde existe uma grande quantidade de vetores. A doena foi
reconhecida e descrita pela primeira vez em 1843 na Frana e desde ento tem sido
reportada em todos os continentes. conhecida nos EUA desde 1896. Uma vez que
a doena acomete somente membros da famlia dos eqdeos, o animal infectado
o nico reservatrio da doena.
A taxa de morbidade varia de pas para pas (EUA = 1,5% a 2%; Canad = 6%;
Alemanha = 1,6%; Argentina = 15% a 25%), mas pode chegar a 100% em
fazendas endemicamente infectadas onde h uma densa populao do vetor e do
hospedeiro. No Brasil, estima-se que no Pantanal a prevalncia chega a 40%.
Sinais Clnicos
Os sinais clnicos da doena so bastante variveis e podem produzir 3 diferentes
sndromes: aguda, crnica e inaparente (carreador). Uma vez infectados, os
animais persistem como carreadores do vrus pelo resto da vida.
Os sinais clnicos da forma aguda so no-especficos podendo ocorrer uma febre
inicial de curta durao (menos de 24 horas). Como resultado, os proprietrios ou
veterinrios podem no observar este sintoma inicial e este animal pode estar
aparentemente saudvel e ter contato com os demais animais. Normalmente, esta
forma no comum aps a transmisso natural por tabandeos, pois a quantidade
de vrus transmitida por estes insetos geralmente baixa.
Outros sintomas podem aparecer como:
Febre - a temperatura de um animal infectado pode subir repentinamente para
40,5
o
C ou mesmo para 42
o
C. Depois poder retornar ao normal por um perodo
indeterminado at o incio de um outro episdio.
Petquias hemorrgicas - aparecem nas mucosas, principalmente na lngua e
cojuntiva.
Depresso, Anorexia e Perda de Peso
Edema - principalmente no abdome, pernas e prepcio.
Anemia - no comum em infeces agudas, exceto em casos muitos severos.
Taquicardia e arritmia devido a miocardite.


Animais que sobrevivem ao episdio inicial podem progredir para a forma
crnica. Neste caso, os animais apresentam a doena clssica, com os sinais clnicos
caractersticos de anemia, edema e perda de peso.
Sucessivos episdios clnicos ocorrem na forma crnica e so devidos a novos
mutantes do vrus gerados no animal infectado. Estes mutantes aparecem por
causa de mudana nos genes que codificam para determinantes de superfcie que
so crticos (principalmente gp90 e gp45). As modificaes estruturais resultantes
permitem ao vrus mutante multiplicar-se mesmo na presena de altos nveis de
anticorpos e outros componentes imunes produzidos cotnra a primeira linhagem.
O animal com a doena crnica letrgico e anorxico, tem baixo hematcrito e
demonstra persistente decrscimo no nmero de plaquetas coincidente com a febre
induzida pelo vrus.
Os ciclos recorrentes aparecem inicialmente a cada 2 semanas, e conforme a
doena progride, o tempo entre os episdios clnicos aumenta para alguns meses.
Aproximadamente 90% das recorrncias ocorre dentro de um ano de infeco.
Passado o primeiro ano, os sobreviventes persistem como carreadores inaparentes.
A forma inaparente aparece na maioria dos animais positivos em testes
sorolgicos. no h aparecimento de nenhuma anormalidade clnica resultante da
infeco. O soro desses animais contm anticorpos contra o vrus e o prprio vrus,
porm em concentrao dramaticamente menor do que em animais com sinais da
doena e so reservatrios da infeco por perodos extensos. Como todos os
animais infectados so considerados carreadores do vrus por toda a vida, e como
se tornam positivos em relao presena de anticorpos, todos os animais testados
e com resultados positivos so considerados com o mesmo potencial de transmisso
do vrus, embora possa existir diferenas enormes no contedo de vrus no sangue
de cada animal positivo. Esta deciso devido ao fato de que qualquer animal
infectado poder desenvolver sinais clnicos de AIE quando tratado com drogas
imunossupressoras ou quando submetido a stress.
Em termos gerais, existe um risco baixo de se adquirir a infeco de um animal
com a doena inaparente.
Transmisso
O principal meio de transmisso do vrus atravs de insetos hematfagos. Muitas
espcies parecem estar implicadas, incluindo os tabandeos (Tabanus spp e
Hybomitra spp, Chrysops flavidus), mosca de estbulo (Stomoxys calcitrans),
borrachudos (Simulinium vittatum), mosquitos (Psorophora columbiae, Aedes
vexans e Anopheles spp) e possivelmente Culicoides spp. A transmisso por estes
artrpodos so puramente mecnicas e no biolgicas (no ocorre replicao do
vrus no artrpodo). A ocorrncia da transmisso depende de vrios fatores:
1) O ttulo do vrus no sangue do hospedeiro: Uma vez o hospedeiro infectado,
est infectado para toda a vida. Muitas vezes, aps a infeco inicial, haver
episdios recorrentes em que os sinais clnicos como febre sero aparentes.
durante estes episdios de febre que se verifica o pico da viremia e a transmisso
ocorre com maior probabilidade.
2) Caractersticas de estrutura e comportamento do vetor: Quanto maior a
quantidade de sangue transferida, maior a probabilidade da infeco ocorrer.
por esta razo que os tabandeos so os vetores mais importantes: eles so os
artrpodos com maior capacidade de ingesto de sangue. Outras variveis a
considerar so: a dor causada pelo vetor, o local da picada e a persistncia do
vetor. Para que a transmisso ocorra, o vetor deve iniciar a ingesto em um animal
infectado, interromper e continuar a se alimentar em um animal no-infectado. O
vrus se mantm infectivo no vetor por at 4 horas. Os mosquitos, que causam
pouco desconforto e se alimentam de sangue de vasos mais superficiais,
normalmente completam sua alimentao em um s hospedeiro, no tendo
importncia na transmisso. J os tabandeos causam maior desconforto e so
expulsos do animal antes de completarem a refeio.
3) Densidade populacional do vetor: Quanto maior a populao de vetores perto
de um hospedeiro infectado, maior a probabilidade de transmisso. As populaes
de vetores so sazonais, portanto, existe uma maior chance de infeco no vero e
outono, quando as densidades dos vetores atingem seu pico.
4) Caractersticas comportamentais do hospedeiro: Existem relatos de que
potros tm menos probabilidade de adquirir a infeco, se comparado com
adultos. Uma explicao para isso seria que os tabandeos so mais fortemente
atrados por animais maiores e mais escuros. Um fato interessante que animais
com a forma crnica da infeco esto freqentemente deprimidos e permitem que
os tabandeos completem sua alimentao enquanto que animais comm a infeco
aguda so mais ativos e defensivos, expulsando o inseto. Neste caso, mais
provvel que ocorra a transmisso.

5) Populao e densidade do hospedeiro: Uma vez que o tabandeo tenha sido
expulso de um animal, ele vai tentar terminar a ingesto de sangue no mesmo
animal ou em um animal prximo. Se a densidade populacional dos hospedeiros
baixa, a transmisso mais difcil de ocorrer.

OUTRAS FORMAS DE TRANSMISSO
O vrus est presente em todas as secrees e excrees (incluindo colostro, leite,
saliva, urina e smen) do animal infectado. A transmisso do vrus requer a
transferncia de clulas sangneas de um animal infectado para um animal no-
infectado e pode ocorrer tambm de outras maneiras que no atravs de um vetor.
A infeco transplacentria pode ocorrer e mais provvel de ocorrer se a gua
est apresentando sinais clnicos da doena durante a gestao. Neste caso, a gua
pode abortar ou o potro poder adquirir a infeco atravs da ingesto de colostro
ou leite contendo leuccitos infectados com o vrus, embora o trato gastrointestinal
no seja a porta principal de entrada do vrus.
A transmisso iatrognica tambm comum. O vrus da AIE pode permanecer
infectivo em agulhas contaminadas por at 4 dias. Pode ser transmitido tambm
por equipamento cirrgico, sondas e todos os instrumentos utilizados na lida com
os animais e que possa carrear o sangue infectado.

Tabandeo transmissor do vrus da AI E

Diagnstico

IMUNODIFUSO
Atualmente, o nico meio seguro de se diagnosticar a infeco atravs de um
exame de sangue. A tcnica utilizada a Imunodifuso em gel de gar (IDGA).
Desde 1970 est4e teste, que detecta a presena de anticorpos contra uma protena
do vrus, tem sido usado e reconhecido internacionalmente como o teste sorolgico
- gold para o diagnstico da AIE. Trata-se de uma prova qualitativa, isto ,
identifica o animal portador e no-portador. Sua especificidade alta devido ao
fato de que as reaes inespecficas podero ser identificadas pela formao de
linhas de "no-identidade". Por isto, o mtodo escolhido para certificar animais
como livres da doena para exportao, transporte e eventos. Uma vez que o vrus
sofre alta variao antignica, resultando em mutantes comm diferentes antgenos,
o antgeno escolhido na prova de Imunodifuso a protena principal do core
viral: a p26. Esta protena mostrou ser altamente conservada em diferentes
variantes isoladas.




O TESTE




O teste bastante simples. Em uma placa ou lmina contendo gar solidificado so
feitas 7 cavidades (1 central e 6 circundando-a). Na cavidade central colocado o
antgeno (p26) enquanto nas demais alternam-se soro controle positivo e soro teste.
Durante a incubao (48hs), ocorre a difuso do antgeno da cavidade central e de
anticorpos se presentes, das cavidades externas. Se no soro teste existe anticorpos
contra o antgeno p26, forma-se uma linha de precipitao no encontro desses
anticorpos com a p26. a presena desta linha que determina se a amostra
positiva ou negativa. Como existem as 3 cavidades com o soro positivo padro,
haver formao de linhas de precipitao entre as cavidades contendo este soro e
a cavidade contendo o antgeno p26. Quando um animal positivo e no seu soro
existem anticorpos, haver a formao de uma linha de precipitao entre este
soro e o antgeno (p26) que ser contnua linha formada entre o antgeno e o soro
padro positivo.
Em algumas situaes, pode ser difcil determinar se o teste negativo ou positivo.
No caso de no haver anticorpos suficientes para a formao de uma linha visvel,
poder ocorrer um resultado falso negativo. Este teste no conseguee detectar
animais positivos durante os primeiros 5 a 7 dias dos episdios clnicos, e este
animal vir a dar um resultado positivo somente 15 a 25 dias aps a inoculao do
vrus.
Em outros casos, potros nascidos de guas infectadas tambm tero resultado
positivo, mesmo que no estejam infectados. Isto ocorre quando os potros mamam
o colostro contendo anticorpos contra o vrus da AIE e estes anticorpos reagem
com o antgeno no teste formando as linhas de precipitao. Se os potros forem
retestados mais tarde e tiverem o resultado negativo, podero ser considerados
livres da infeco.
O Controle da AIE
O controle da AIE compreende minimizar ou eliminar o contato dos animais com
secrees, excrees e sangue de animais infectados. Isto pode ser bastante eficaz se
houver um rgido controle dos animais utilizando o teste de Imunodifuso e
separando os animais positivos dos negativos. Uma vez feita esta separao, deve-
se retestar os animais negativos aps 30 a 60 dias at que no apaream mais casos
positivos. Uma vez identificados e separados os positivos, esses animais devem ser
mantidos a uma distncia segura dos negativos. O teste de Imunodifuso deve ser
feito de maneira constante e permanente em fazendas, haras, sociedades hpicas,
jquei clubes etc.
ALGUMAS MEDIDAS DE CONTROLE
1) S adquira ou permita a entrada de animais que apresentem o teste negativo
para o exame da AIE. Mesmo com este exame, realize um novo teste logo aps a
aquisio do mesmo e aps 30 dias, pois o animal pode estar na fase inicial da
doena, quando o teste ainda no identifica-o como positivo.
2) Antes de introduzir um animal na propriedade, mantenha-o em quarentena
pelo prazo de 30 dias at a realizao de outro exame de AIE.
3) Realizar o controle do plantel a cada 3 meses em haras, fazendas de criao e
a cada 30 dias em sociedades hpicas.
4) Utilizar somente agulhas e seringas descartveis. Esterilizar todo o
instrumento cirrgico e qualquer outro material que possa ter entrado em contato
com o sangue de um cavalo.
5) Controlar a populao de moscas atravs da limpeza de dejetos, desinfeco
das instalaes e armadilhas para moscas.

O TESTE VALLE
O kit de diagnstico para a AIE desenvolvido pela Valle um kit de
Imunodifuso. A grande diferena entre este kit e outros existentes est na
tecnologia de produo do antgeno desenvolvido por engenharia gentica. Esta
tecnologia consistiu no isolamento do material gentico do vrus responsvel pela
expresso da protena chave para o diagnstico da doena (p26). Este material
gentico isolado foi inserido em uma bactria, que atuou como uma carreadora do
gene que passou a produzir grandes quantidades dessa protena p26 do vrus da
AIE. Esta protena produzida foi submetida a etapaas de purificao resultando
em um produto de altssima qualidade, eliminando-se totalmente a ocorrncia de
linhas de precipitao inespecficas.
O teste se baseia na migrao dos antgenos e anticorpos em gel de gar em
direes opostas resultando na formao de linhas de precipitao visveis. Cavalos
infectados mesmo com vrus de diferentes linhagens possuem anticorpos
precipitantes contra o maior antgeno grupo-especfico, a protena p26.
Leitura
A primeira linha de precipitao que deve ser observada aquela formada entre os
poos contendo o soro padro e o antgeno. A ocorrncia desta linha de
precipitao imprescindvel para a leitura da prova. Se a linha no ntida, o
teste deve ser repetido e no se faz a leitura dos soros suspeitos, uma vez que o
padro positivo no apresentou reao.
Resultados
Uma vez constatada a linha de precipitao entre os poos contendo o antgeno e o
soro padro, deve-se proceder leitura dos soros testes.
Observar as seguintes caractersticas das reaes:
REAO NEGATIVA:
no ocorre linha de precipitao entre os poos contendo o antgeno e o soro
teste.
as linhas de precipitao entre os poos cotnedo o antgeno e o soro padro so
retas e prolongam-se at a cavidade contendo o soro teste sem encurvar-se:


REAO POSITIVA:
ocorre uma linha de precipitao entre os poos contendo o antgeno e o soro
teste e esta linha contnua com a linha formada entre o antgeno e o soro padro:


REAO POSITIVA FRACA:
as linhas de precipitao entre os poos contendo o antgeno e o soro padro
encurvam-se em direo ao poo contendo o soro teste.
ocorre ou no a formao de uma linha muito fraca entre os poos contendo o
antgeno e o soro teste.

Interpretao
a. qualquer cavalo adulto que reaja prova de Imunodifuso pode ser considerado
infectado pelo vrus AIE.
b. um soro recolhido durante o perodo de incubao da AIE poder fornecer um
resultado fraco-positivo. A retestagem aps 2 ou 3 semanas produzir uma reao
mais forte.
c. soros de potros que mamam em guas infectadas podem fornecer resultados
positivos devido aos anticorpos presentes no colostro.

Precaues
1. o produto deve ser armazenado temperatura de 2
o
C a 8
o
C. Se os reagentes no
forem utilizados no prazo de 15 dias, devem ser aliquotados e congelados. No
deixar o produto em temperatura ambiente por perodos prolongados.
2. tratar todos os reagentes e amostras como capazes de transmitir o vrus AIE.
Esterilizar todo o material utilizado aps realizar o teste.
3. no utilizar reagentes com data j vencida.
4. se os controles positivos do kit no apresentarem reao, no use o kit.
5. como em qualquer trabalho laboratorial, recomenda-se o uso de luvas durante a
manipulao dos reagentes e durante todo o teste.

Concluso
No existe tratamento para a AIE. No existe vacina para prevenir a AIE. A
identificao do animal portador o ponto chave para o controle da doena. Ao
realizar o teste de diagnstico da doena, voc estar contribuindo para o controle
da enfermidade. Evitar que a doena se espalhe responsabilidade de todos.