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m
o
l
e
s
g
-
1
h
-
1
)
0
2
4
6
8
Km
0,5 Vmax
Vmax
26,47
9,37
A
Nitrato (M)
0 20 40 60 80 100
v
(
m
o
l
e
s
g
-
1
h
-
1
)
0
5
10
15
20
25
Km
0,5 Vmax
Vmax
21,68
25,25
B
Figura 3. Isoterma de absoro de nitrato - v (velocidade de absoro - moles g
-1
h
-1
) e
concentrao de nitrato (M) - para volumes contendo seis plntulas (A) e nove
plntulas (B).
Nota-se, pois uma expressiva diferena na velocidade de absoro do nitrato
quando ocorre o aumento da massa das razes (Figura 3). Isso pode est relacionado a
atividade diferenciada das protenas carregadoras, pois estas apresentam comportamento
de absoro variada, embora apresentem mesmas concentraes. Esse fato pode tambm
est relacionado ao fator correspondente entre o volume das razes, bem como a
possibilidade de algum estresse causado por danos mecnicos no sistema radicular, ou
outra parte do vegetal de tal forma que induziu menor afinidade de ligao entre os
stios das protenas e, sobretudo menor velocidade de absoro.
Esse fator pode ser comparativo a um mesmo grupo de 6 plntulas de milho que
quando avaliado a cintica de absoro de ons (dados no mostrados), observou-se que
o Vmax atingiu valores de 26,61 mol.g
-1
h
-1
, com Km relativamente semelhante (27,08
mol.L
-1
).
Alves et al. (1998) caracterizaram gentipos de milho quanto a cintica de
absoro de nitrato e observaram que o valor mdio de absoro foi de 30,98 moles g
-
1
h
-1
, no entanto a aplicao de alumnio em soluo reduziu essa taxa de absoro a
32
13,57 moles g
-1
h
-1
. Destacando-se o efeito do estresse causado pela toxidez de
alumnio.
Para Horn et al. (2006), o influxo mximo (Vmax) de nitrato em gentipos
diferentes de milho foi de 63 moles g
-1
h
-1
, apresentando Km variante de 5 a 17
mol.L
-1
, podendo-se inferir que diferenas morfolgicas afetam tambm a absoro de
ons.
Hole et al. (1990) afirma que a velocidade de absoro de nitrato por razes de
milho depende provavelmente da atividade do transportador, bem como a velocidade
mxima (Vmax) pode estar relacionado com o maior volume de protenas
transportadoras, ou atravs da maior sntese das protenas por unidade de peso das
razes.
A principal forma de absoro de nitrato ocorre a partir da transportadores de
alta e baixa afinidade. Alguns desses transportadores j fazem parte da constituio da
membrana e outros so induzidos pela concentrao de nitrato na parte area, que
favorecem o aumento de expresso gnica dos transportadores de alta afinidade (Santos,
2006).
Existem trs transportadores de absoro de nitrato que apresentam diferenas
entre suas propriedades cinticas. Um sistema de transporte de baixa afinidade (LATS
Low Affinity Transport System), sob concentraes em soluo de 1 mmol L
-1
, e dois
sistemas de alta afinidade (HATS High Affinity Transport System) que esto
subdivididos de acordo com a concentrao externa do nitrato, podendo ser estes
constituintes da membrana plasmtica (cHATS) e os induzidos por concentraes de
nitrato em soluo muito baixas (iHATS). Os cHATS possuem maior afinidade (Km em
torno de 6 a 20 M) quando comparado ao iHATS (Km entre13-79 M). (Aslam et al.,
1992; King et al., 1993; Forde, 2000).
Dessa forma, analisando as caractersticas de tais transportadores, pode haver
ocorrido atuao das protenas HATS, pois estas apresentam-se com maior atividade em
baixas concentraes de Nitrato, no se podendo afirmar com exatido sobre a atuao
de qual transportador est em maior atuao, tendo em vista que a massa de razes de 6
e 9 plntulas partiram de um mesmo volume e concentrao inicial de nitrato.
33
4 CONCLUSES
Diante do exposto pode-se concluir que a absoro de nitrato ajustou-se ao
modelo proposto por Michaelis-Menten (1913), e como implicao prtica obteve-se os
valores de parmetros cinticos de absoro (Vmax, Cmin e Km) e a isoterma de
absoro de nitrato.
O volume de razes em soluo influenciou diretamente na velocidade mxima
de absoro de nitrato em soluo. Embora que baixos valores de Vmax em soluo
contendo 6 plntulas podem tambm estar relacionados com danos causados nas razes
ou em parte area da planta.
5 REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
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34
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Taiz, L.; Zeiger, E. Fisiologia Vegetal. Artmed: Porto Alegre, 2013, 954 p.
35
ANEXO 2
1 - CURVA PADRO DE KNO
3
A curva padro de KNO
3
foi preparada a partir de uma soluo de 100 mL
contendo 10 mM, em que foram retirados os padres nas concentraes de: 12,5; 25;
50; 75 e 100 M. Lidos em espectrofotmetro a uma absorbncia de 210 nm.
Os valores de absorbncia foram tratados estatisticamente atravs da equao de
regresso (Figura).
Figura - Curva padro de concentrao de KNO
3
em funo de valores de absorbncia
a 210 nm.
36
2 ABSORO DO NITRATO (TCNICA DO ESGOTAMENTO)
Figura Retirada de alquota de 2 mL da soluo de KNO3 (A); Leitura de alquota em
cubeta de quartzo por meio de espectrofometria (B e C).