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1. INTRODUO
O mtodo de Kato-Katz utiliza microscopia tica para exames parasitolgicos de fezes na
determinao qualitativa e quantitativa de ovo de helmintos. metodologia consiste em! uma tela que
concentra o material a ser examinado" alm de reter os detritos que dificultariam ou impediriam a
visualizao dos ovos de helmintos# uma lam$nula a ser pr-colorida em soluo diafanizadora e
fixadora para permitir a conservao dos ovos e tornar o esfregao transparente# uma placa perfurada
especialmente desenhada" que faz com que sempre a mesma quantidade de fezes se%a examinada"
permitindo excelente padronizao e o&servao de amostra suficiente de material. 'reparado
facilmente" o esfregao de fezes pode ser examinado aps curto espao de tempo (aproximadamente
1 hora)" ou guardado durante v*rios dias ou mesmo meses + temperatura am&iente" em condi,es de
la&oratrio.
O diagnstico parasitolgico deve ser realizado de maneira apropriada" com sensi&ilidade
para a deteco dos parasitas intestinais" uma vez que dele depender* o tratamento espec$fico.
pesar da exist-ncia de in.meros mtodos" quantitativos e qualitativos" propostos para o
exame parasitolgico de fezes" todos t-m sido o&%eto de cr$ticas as mais variadas" quer pela
complexidade e &aixa sensi&ilidade" quer pelo elevado custo de execuo" restringindo suas
utiliza,es na rotina la&oratorial de exame de fezes.
'or outro lado" a Organizao /undial da 0a.de" recomenda so&re a necessidade de
utilizao de mtodos quantitativos em inquritos epidemiolgicos.

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2. AMOSTRAS FECAIS
2.1 Exame macroscpico
s amostras de fezes no preservadas devem ser examinadas macroscopicamente para
determinar a consist-ncia" o odor" a cor" a presena ou aus-ncia de sangue" de muco" de proglotes e
de vermes adultos ou outras condi,es anormais. 2onsequentemente" o exame macroscpico deve
sempre anteceder o exame microscpico. O material fecal varia quanto a sua consist-ncia" e
geralmente classificado em fezes formadas" semiformadas" pastosas ou l$quidas diarreicas.
Os trofozo$tas so usualmente encontrados nas fezes l$quidas" nas pastosas ou nas
mucosanguinolentas" enquanto que os cistos so diagnosticados nas fezes formadas ou
semiformadas. Ovos e larvas de helmintos podem estar presentes em todos os tipos de amostras
fecais# entretanto" eles podem ser mais dificilmente encontrados em espcimes l$quidos e" se
presentes" em pequeno n.mero. s formas mveis de protozo*rios se degeneram mais rapidamente
do que as formas c$sticas# por esta razo" de extrema import3ncia que o estudo de espcimes
fecais se%a realizado o mais r*pido poss$vel. consist-ncia das fezes no interfere na distri&uio dos
ovos e das larvas de helmintos" apesar de nas amostras l$quidas haver uma distri&uio relativa do
n.mero de ovos" devido ao fator de diluio. s fezes devem ser distri&u$das no la&oratrio quanto a
sua consist-ncia. O material fecal l$quido ou pastoso deve ser examinado primeiro" sendo seguido
pelos espcimes semiformados e formados. 4egistrar a presena de sangue e muco nas amostras
fecais" os quais podem indicar manifesta,es patolgicas do trato gastrointestinal. O sangue oculto
nas fezes pode estar relacionado com uma infeco parasit*ria" ou ser um resultado de outras
condi,es anormais (567. 1).
ingesto de diferentes produtos qu$micos" medicamentos ou alimentos pode atri&uir +s
fezes colora,es variadas. O exame macroscpico pode ser realizado pela simples o&servao ou
pela tamizao" as quais" em muitos casos" so suficientes para esta&elecer um diagnstico final.
2.2 Simples Oser!a"#o
8xaminar e revolver todo o material fecal com &asto de vidro. notar todas as caracter$sticas
o&servadas e coletar os vermes adultos ou progltides de t-nias de%etadas.
Fi$%ra 1. Dis&ri%i"#o 'e cis&os e &ro(o)oi&as em rela"#o * co+sis&,+cia 'o ma&erial
(ecal.
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2.- Tamisa"#o
8mulsionar as fezes com *gua. 2oar a emulso atravs de peneira met*lica. 8ste
procedimento deve ser realizado em uma pia" servindo-se de um %ato de *gua corrente. :ermes
adultos como o Ascaris lumbricoides e Enterobius vermicularis so encontrados frequentemente
misturados ou na superf$cie das fezes" como tam&m as progltides de tenias. Outros helmintos
como o Trichiuris trichiura" ancilostom$deos e Hyminolepis nana so depositados no &olo fecal aps o
in$cio do tratamento. 5requentemente podero ser encontrados helmintos adultos nas amostras fecais
e aus-ncia dos ovos. 8sses processos macroscpicos so vanta%osos para a demonstrao e coleta
de pequenos helmintos" de proglotes e de esclices.
2.. Exame Microscpico
O exame de esfregao a fresco pelos mtodos diretos o mtodo mais f*cil e" talvez" o mais
usado na rotina do la&oratrio" permitindo visualizar os est*gios de diagnstico dos protozo*rios
(trofozo$tas e cistos) e dos helmintos (ovos" larvas e pequenos adultos). 'ara uma diagnose a&soluta
necess*rio o&servar o parasita em um de seus est*gios de evoluo. O simples exame
microscpico " em muitos casos" suficientemente para o diagnstico. 8ntretanto" para a o&teno de
melhores resultados ser* necess*rio o uso de tcnicas de concentrao" ou se%a" processos
mec3nicos e;ou &iolgicos.
2./ Exame Dire&o a Fresco
O exame direto a fresco um procedimento simples e eficiente para o estudo das fezes"
permitindo o&servar as formas trofozo$ticas vivas dos protozo*rios. 8ste procedimento coprolgico
%amais deve ser omitido. s prepara,es a fresco so o&tidas diretamente dos espcimes fecais e
requerem o m$nimo de material (1 mg) para cada mtodo de exame . <odos os est*gios de
diagnstico dos organismos" pelo uso de diferentes solu,es" podem ser determinados e
identificados. Os esfregaos com fezes frescas e no fixadas so rotineiramente preparados com as
solu,es salina a =">?@ e de iodo. 8ntretanto" se o n.mero de organismos for pequeno" o exame de
pequena quantidade de fezes usadas para a preparao de esfregaos a fresco pode ser insuficiente
para revelar a presena de parasitas. Os esfregaos devero ser sistem*tica e completamente
examinados atravs da o&%etiva do microscpio de pequeno aumento (1=x) e com pequena
intensidade de luz. confirmao dos parasitas deve ser realizada com a o&%etiva de grande aumento
(A=x).
2.0 Escol1a 'o M2&o'o
valiar consist-ncia" ensino" pesquisa
A
2usto; 4isco B Cenef$cio
Desempenho (0ensi&ilidade" especificidade)
Orientao /dica
-. MATERIA3 FORNECIDO
'laca 'erfurada
8sp*tula
<ela
0oluo aquosa de verde de malaquita a 9@)
Eam$nula
'apel celofane
2ronFmetro ou relgio#
Euvas Descart*veis#
4ecipiente seguro para descarte de material &iolgico#
Gipoclorito de sdio para desinfeco#
/icroscpio tico#
E3mina de vidro#
2oletor de fezes#
'laca de 'etri.
?
.. 4ROCEDIMENTO DO TESTE5 M6TODO MODIFICADO DE 7ATO87AT9 :7ATO;1<0=> 7AT9;
C?A@ES E 4E33EARINO; 1<B2C
1. 0egregar a quantidade de lam$nulas necess*ria para os testes e colocar em uma placa de
'etri. 2olocar a soluo diafanizadora na placa de 'etri de forma a deixar as lam$nulas em&e&idas na
soluo. 4epousar o preparo por 1A horas. o utilizar as lam$nulas" retirar o excesso da soluo.
1. 4etirar uma amostra de fezes" com aux$lio da esp*tula e colocar so&re um papel
a&sorvente.
9. Depositar so&re as fezes a tela" comprimindo-as com o aux$lio da esp*tula" o que far* com
que parte das fezes passe atravs das malhas.
A. Hsar o outro lado da esp*tula para recolher as fezes que passarem pela malha" e depositar
no orif$cio da placa perfurada" que %* dever* estar so&re uma l3mina de vidro.
?. 2omprimir as fezes no orif$cio da placa perfurada" at que este se preencha.
I. 'assar a lateral da esp*tula" so&re a placa perfurada para retirar o excesso de fezes.
Descartar a esp*tula e a tela.
J. Eevantar" inclinando inicialmente uma das extremidades da placa perfurada e retir*-la de
modo a ficar so&re a l3mina de vidro um cilindro de material fecal. Descartar a placa perfurada.
>. 4etirar uma lam$nula do preparo e colocar so&re o cilindro de fezes.
K. ps a colocao da lam$nula so&re o cilindro de fezes" inverter a preparao so&re a
superf$cie lisa e fazer presso com o polegar so&re a l3mina de vidro na regio onde se encontra o
cilindro de fezes" de modo que o material se espalhe uniformemente entre a l3mina de vidro e a
lam$nula.
8vitar que as fezes extravasem.
1=. Deixar a preparao em repouso por I= minutos.
11. Eevar a preparao ao microscpio para o&servao e contagem dos ovos dos helmintos.
0chistosoma mansoni" <richuris trichiura" 0chistosoma %aponicum
scaris lum&ricoides ncilostom$deos 8ntero&ius vermiculares
..1 3ei&%ra e I+&erpre&a"#o
'ara a leitura e interpretao dos resultados" utilizar o microscpio tico.
5ocalizar a l3mina e o&servar. 'ara a o&teno de resultados qualitativos" comparar os ovos
encontrados. 'ara o&teno de resultados quantitativos" contar todos os ovos encontrados na
preparao de cada uma das espcies de helmitos e" com aux$lio da ta&ela em anexo" determinar o
n.mero total de ovos por grama de fezes.
I
Lota! 'ara a identificao dos ovos de ncilostomideos" a preparao deve ser examinada no
m*ximo at quatro horas aps sua execuo. 'ara os outros helmintos" a conservao excelente
at mais de um ano aps a preparao.
..2 Des!a+&a$e+s M2&o'o 7a&o87a&) +o 'ia$+s&ico 'a esD%is&ossomose
criatividade &rasileira a servio da sa.de p.&lica! pesquisadores do 6nstituto
OsMaldo 2ruz (6O2) da 5iocruz desenvolveram um mtodo simples" r*pido" &arato e eficaz
para o&ter o diagnstico da esquistossomose" parasitose end-mica em 11 estados e
respons*vel por 1=I mil casos no pa$s em 1==I. O pro%eto fruto de uma parceria do 6O2" no
4io de Naneiro" com a unidade da 5iocruz em /inas. La primeira avaliao experimental" o
procedimento que tem patente registrada como modelo de utilidade mostrou efic*cia e
sensi&ilidade superiores + tcnica atualmente recomendada pela Organizao /undial da
0a.de (O/0)" conhecida como mtodo de Kato-Katz.
Castante simples" o aparato composto por uma caixa de madeira" um frasco de vidro
com um pequeno &alo coletor e um diminuto funil adaptado. O dispositivo uma modificao
do chamado mtodo de ecloso miracidiana" procedimento amplamente utilizado em pa$ses
como a 2hina para o diagnstico da esquistossomose" que tem por princ$pio a atrao de
larvas do parasito (chamadas mirac$dios) por uma fonte luminosa. vantagem do novo
mtodo concentrar as larvas em um pequeno volume de *gua limpa" aumentando a
sensi&ilidade e a efic*cia.
princ$pio" os dois procedimentos so semelhantes. 'ara realizar o mtodo de
ecloso miracidiana" &asta colocar a amostra de fezes misturada com *gua de forma
homeg-nea no interior do frasco de vidro" preench--lo com *gua limpa e posicion*-lo prximo
a uma fonte de luz. o entrar em contato com a *gua limpa" as larvas dos ovos eliminados nas
J
fezes eclodem e so atra$das pela luminosidade" numa din3mica similar ao que acontece na
natureza. ps a ecloso" as larvas tendem a permanecer na superf$cie do recipiente e podem
ento ser facilmente identificadas.
tcnica desenvolvida pelo 6O2 inova ao adaptar um pequeno &alo coletor e um
diminuto funil de conteno ao frasco de vidro e ao incluir a caixa de madeira ao
procedimento! depois de ser preenchido com a amostra de fezes homogeneizada em *gua" o
recipiente colocado na caixa de madeira" deixando + mostra apenas o pequeno &alo" que
iluminado pela l3mpada ou pela luz do sol enquanto o restante da amostra permanece no
escuro. 8ssa din3mica faz com que as larvas atra$das pela luz concentrem-se na regio
iluminada" preenchida com *gua limpa e livre de impurezas encontradas no recipiente maior.
concentrao das larvas em *gua limpa no pequeno &alo coletor facilita a identificao do
parasito" que pode ser rapidamente reconhecido por microscopia ptica.
OO diagnstico da esquistossomose pode ser realizado por diversas formas. O que
fizemos foi aprimorar o mtodo de ecloso miracidiana. concentrao de larvas no recipiente
+ parte permite que os mirac$dios se%am identificados mais rapidamente" em apenas dez
minutos" por meio de uma lupa comum ou com um microscpio simples. maior limitao do
mtodo inovador a necessidade de amostras de fezes frescas" uma vez que as larvas
precisam passar pelo processo de ecloso durante o procedimento" para que possam nadar
at o recipiente menorP" descreve o &ilogo rnon Dias Nur&erg" que desenvolve o pro%eto"
idealizado ainda na iniciao cient$fica" no Ea&oratrio de 'atologia do 6O2 durante o
mestrado em &iologia celular e molecular do 6nstituto.
Os res%l&a'os o&i'os em laora&rio i+'icam maior se+siili'a'e 'a +o!a
me&o'olo$ia em rela"#o ao proce'ime+&o recome+'a'o pela OMS; o m2&o'o 'e 7a&o8
7a&); D%e co+sis&e +a i'e+&i(ica"#o 'e o!os 'o parasi&o a&ra!2s 'e mi+%ciosa a+Elise
em microscpio 'e l%) por pro(issio+al especiali)a'o. FA a+Elise 'e lGmi+as pelo
m2&o'o 'e 7a&o87a&) 2 &raal1osa e 'emora'a. Um pro(issio+al em &rei+a'o le!a cerca
'e '%as 1oras para exami+ar aproxima'ame+&e 12 lGmi+as; e+D%a+&o o +o!o
'isposi&i!o permi&e D%e %m !ol%me 'e amos&ras correspo+'e+&e a -0 lGmi+as 'e 7a&o8
7a&) seHa a+alisa'o em ape+as 'e) mi+%&os; com l%pa com%m o% 'e microscpio 'e l%)
simplesI; compara Ar+o+.
lm disso" o novo aparato pode ser reutilizado. efici-ncia foi confirmada tam&m
pela an*lise minuciosa" por microscpio" dos sedimentos encontrados no fundo do recipiente
maior" aps a identificao das larvas! nenhum mirac$dio e somente um ovo" morto" foi
encontrado" confirmando o forte comportamento de atrao dos mirac$dios + fonte de luz. O
dispositivo" produzido pelo Ea&oratrio de 'atologia do 6O2 em parceria com a Diretoria de
dministrao do 2ampus da 5iocruz (Dirac)" aproveita o prprio ciclo de vida do Schistosoma
mansoni" agente etiolgico da esquistossomose no Crasil.
OQuando os ovos contidos nas fezes infectadas depositadas em rios e lagos entram
em contato com a *gua" min.sculas larvas chamadas mirac$dios eclodem. 8ssas larvas
nadam em direo + luz e podem penetrar em caramu%os do g-nero Ciomphalaria" tam&m
>
atra$dos pela luminosidade. ps o tempo de incu&ao no caramu%o" o mirac$dio d* origem a
outras larvas" chamadas cerc*rias" que t-m a capacidade de infectar o homemP" esclarece
rnon. Lo dispositivo desenvolvido pelo 6O2" a luz de uma simples l3mpada R ou at mesmo
do sol" em dias quentes R que induz o deslocamento dos mirac$dios para o recipiente menor"
adaptado ao frasco de vidro.
O expectativa que o novo mtodo auxilie no diagnstico da esquistossomose"
so&retudo em casos de &aixa carga parasit*ria ou em avalia,es realizadas aps o
tratamento. Lesses casos" o n.mero de parasitos contidos na amostra de fezes tende a
diminuir consideravelmente e o diagnstico torna-se mais dif$cil. o concentrar os mirac$dios
num recipiente + parte" o novo aparato facilita a identificao do parasito e otimiza o processo
de diagnsticoP" rnon comemora. OOs resultados finais dependem ainda de uma avaliao em
campo" %* em andamentoP" pondera. O tra&alho" orientado pelos pesquisadores Genrique
Eenzi" do Ea&oratrio de 'atologia do 6O2" e 'aulo /arcos 2oelho" do Ea&oratrio de
8squistossomose da 5iocruz /inas " foi pu&licado na revista Memrias do Instituto Oswaldo
Cruz.
K
/. CONC3USO
O mtodo de Kato-Katz deve ser preferido por ser mais sens$vel que am&os" revelando um
maior n.mero de casos positivos" mais f*cil de ser executado e examinado" mais &arato e ainda por
fornecer dados quantitativos e qualitativos.
1=
0. REFERJNCIAS KIK3IOARLFICAS
http!;;MMM.crfpa.org.&r;Loticias;0etem&ro@1=1==>;1A=Knot19?I.htm
http!;;MMM.fmt.am.gov.&r;areas;parasitologia;copro.htm
http!;;MMM.proto.ufsc.&r;doMnloads;protocolos;fezes.pdf
http!;;MMM.fiocruz.&r;&io;media;&ulas;reativos;C/-CHE-=A9-=1-4-1K=I?J.pdf
http!;;MMM.proead.unit.&r;professor;%oseSmelquiades;arquivos;textos;presentacao@1=-
@1='arasitologia.pdf