TRANSPLANTE DE CLULAS TRONCO

DE MEDULA SSEA EM MODELO EXPERIMENTAL DE

XI Salo de
Iniciao Cientfica
PUCRS

ATAXIA CEREBELAR EM RATOS

Fabiano Carvalho de Brito1,2, Mariana Marczyk Santos2, Daniel Marinowic2, Dr. Jaderson Costa da
Costa2 (orientador)
1

Faculdade de Cincias Biolgicas; 2 Instituto de Pesquisas Biomdicas (IPB) Instituto do Crebro

(INSCER); Pontifcia Universidade Catlica do Rio Grande do Sul

Introduo
O cerebelo o orgo responsvel pelo controle do tnus muscular, pela coordenao dos
movimentos, pelo equilbrio, pela postura, e tambm possui um importante papel na aquisio
de habilidades motoras. A clula de Purkinje, elemento dominante do processo de informao
cerebelar, responsvel pela integrao neuronal de todas informaes recebidas pelo corpo,
controlando os movimentos musculares corporais e, alm disso, funcionam como moduladora
das informaes que chegam ao crtex cerebelar (Bloedel, 1987Apfel e sbard, 2002; Sarna e
Hawkes, 2003). A ataxia cerebelar caracterizada principalmente por incoordenao motora e
dficit de equilbrio; e compreende de um distrbio neurolgico devido a diferentes causas
como traumatismo craniano, parada cardaca, hipertireoidismo, deficincias nutricionais e
esclerose mltipla (Jain, 2006). A terapia com clulas tronco visa restaurar a funo de um
rgo ou tecido atravs do transplante dessas clulas para o local da leso. O objetivo do
trabalho foi de avaliar o potencial do transplante de clulas tronco da medula ssea de
camundongos em reverter o dficit motor em um modelo de ataxia cerebelar em ratos.

Metodologia
Animais: Foram utilizados 50 ratos machos winstar divididos em 3 grupos: grupo 1 = Sham
(controle) de leso simulada; grupo 2 = cido ibotnico e soluo salina; grupo 3 = cido
ibotnico + clulas tronco da medula ssea (CMMO). Para a extrao das CMMO foram
utilizados 20 camundongos C57BL/6 EGFP; os animais foram sacrificados e realizado o
lavado do estroma medular. A frao mononuclear foi separada atravs de um gradiente de
densidade sobre histopaque 1,077g/L. Os testes seguiram o delineamento conforme a figura 1:

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Figura1: Delineamento experimental. Os tempos so definidos em dias aps a cirurgia estereotxica. Os

crculos preenchidos na cor cinza mostram o momento de realizao dos testes motores. O crculo preenchido em
preto mostra o momento do transplante de CMMO.

O dia 0 iniciou com a anestesia (ket/xil) (75 mg/Kg/10 mg/Kg) e a cirurgia estereotxica para
leso no ncleo fastigial do cerebelo com cido ibotnico (10 g/L); no primeiro e no
segundo dias os animais foram manipulados. No dia 3 teste basal no rotarod e no 4 dia
transplante via veia caudal. Ao 10 dia os animais transplantados submeteram-se ao primeiro
teste e seguido pelo 17 dia o segundo teste. Para as anlises da leso sobre o efeito do
desempenho motor foi empregada a ANOVA com o teste de Dunnet. Para avaliar o
transplante das CMMO sobre o desempenho motor foi empregada a ANOVA de duas vias
com medidas repetidas utilizando-se como fator a sesso de teste basal, teste 1 e 2 com os
protocolos acelerado e fixo. E os grupos com teste post hoc de Bonferroni para identificar
associaes significativas. O nvel de significncia adotado nas analises foi 5%.
Resultados

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Figura 2: Transplante de CMMO melhora o desempenho de ratos com leso bilateral do ncleo fastigial no teste
do rotarod executado com o protocolo acelerado.

Figura 3: Transplante de CMMO melhora o desempenho de ratos com leso bilateral do ncleo fastigial no teste
do rotarod executado com protocolo fixo.

Concluso
A leso no ncleo fastigial do cerebelo por injeo de cido ibotnico causou ataxia
irreversvel nos animais. Conclumos que o transplante de CMMO melhorou o desempenho
motor desses animais com leso.

Referncias
APFEL MI, SBERARD C, RODRIGUES FK. Estudo Estereolgico das Clulas
de Purkinje Cerebelares Submetidas Intoxicao Alcolica em Ratos Wistar.
Arq Neuropsiquiatry, 2002.
BLOEDEL JR. The cerebellum and memory storage Science 238:1728-1729,
1987.

AIN KK. Drug-induced cerebellar disorders. Drug-induced neurological

disorders 1:272-282, 1996.

SARNA JR, HAWKES R. Patterned Purkinje cell death in the cerebellum.

Progress in Neurobiology, 2003.

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