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Microbiologia Geral
Bacteriologia
Estrutura da clula procaritica
Forma:
- Esfrica: cocos;
- Bastonete ou cilindro: bacilos;
- Espiral: espirilos (rgidos), espiroquetas (flexveis);
- Vrgula: vibries;
- Pleomrfica (varivel).
diplococos
Estreptococos
Bacilos: diplobacilos
estreptobacilos
Palissadas
2 planos de diviso
ttradas
3 planos de diviso
Sarcina
Estafilococos
pela
estrutura
parede
Membrana
- Fosfolpidos:
- Fosfatidil-etanolamina;
- Fosfatidil-glicerol;
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da
- Fosfatidil-serina;
- Cardiolipina.
- No tem:
- Fosfatidil-colina;
- Esfingomielina;
- Glicolpidos.
- Colesterol (no sintetizado pelas bactrias)
- Mycoplasma no tem parede adquiriu o colesterol do
hospedeiro.
- Hopanides So molculas semelhantes ao colesterol, sintetizados a
partir do mesmo
precursor; provavelmente sintetizam a mesma bactria.
- Protenas Perifricas (20 a 30%) e integrais (70 a 80%).
Funes da membrana:
- Permeabilidade selectiva barreira fsica; sistemas de transporte;
- Respirao cadeia respiratria + ATPase;
- Transporte de nutrientes sistema simporte e antiporte;
- Secreo sistema secreo;
- Locomoo (quimiotaxia) motor do flagelo;
- Diviso ligao ao cromossoma;
- Sntese da parede celular PBP, bactoprenol (molcula carregadora de
precursores do
peptidoglicano; altamente hidrofbica).
Normalmente as membranas plasmticas tm maior proporo de protenas do que
as membranas eucariticas.
Transporte
- Transporte com translocao de grupo;
- Transporte ABC (cassette que liga ATP).
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Geral
Respirao
Mesossomas
So invaginaes da membrana plasmtica com forma de vesculas,
tbulos ou lamelas. Actualmente cr-se que os mesossomas so apenas artefactos
formados durante a fixao das bactrias para a microscopia electrnica.
Nucleide
- Local onde se encontra o cromossoma procaritico e cuja principal
caracterstica (que os
difere dos eucariotas) a ausncia de invlucro nuclear.
- Constitudo por DNA circular (60%), RNA (30%), protenas (10%).
- As protenas do nucleide no so histonas.
- DNA girase a enzima que provoca o enrolamento do DNA,
enrolamento esse que
necessrio para a replicao. A enzima inibida pelas
quinolonas.
- Plasmdeos - Molculas de DNA circulares mais pequenas que tambm
podem estar presentes.
So
reservatrios de carbono,
- Polissacardeos (glicognio)
providenciando material p/
e biossntese.
energia
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fotossintticas.
Enxofre
- Pptidos
Carboxissomas: contm a
Outra
incluso
inorgnica,
presente
nas
bactrias
aspartato.
Vesculas (vacolos) de gs
- Presente em muitas cianobactrias;
- So agregados de um grande nmero de pequenas vesculas de gs;
- As paredes das vesculas no possuem lpidos e so constitudas apenas
por uma pequena
protena.
- As bactrias com estes vacolos podem regular o seu grau de
flutuamento e a
profundidade necessria para terem intensidade de luz
apropriada, concentrao de O2 e
nveis
adequados
de
nutrientes.
Ex: cianobactrias
Ribossomas:
- Podem localizar-se: Na matriz citoplasmtica sintetizam protenas
destinadas a ficarem
na clula
transportarem
Parede Celular
a camada, normalmente rgida, que se localiza por fora da membrana plasmtica.
uma das partes mais importantes das clulas procariticas por vrias razes: do
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forma, protegem da lise osmtica, protegem a clula das substncias txicas e so stio
de aco de vrios antibiticos.
As bactrias Gram + coram com o 1 corante , ficando com uma colorao azulvioleta. Enquanto que as bactrias Gram- coram com o 2 corante adquirindo uma
colorao rosa-avermelhada.
Essas diferenas devem-se presena do peptidoglicano,
quantidades e disposies nas bactrias Gram+ e Gram-.
em
diferentes
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Invlucro de bactrias GramA fina camada de peptidoglicano, nestas bactrias, apenas representa entre 5 a
10% do peso da parede.
Existe uma protena: lipoprotena de Brauns que liga firmemente a membrana
externa e o peptidoglicano.
A membrana externa constituda por lipopolissacardeos (cobrem todo o
exterior da bactria), largas e complexas molculas que contm lpidos e carbohidratos.
Uma das suas funes evitar as defesas do hospedeiro.
A membrana externa serve como barreira de proteco, ao prevenir ou demorar a
entrada de sais biliares, antibiticos ou outras substncias txicas. Apesar de tudo, a
membrana externa mais permevel que a membrana plasmtica.
O espao periplasmtico (quase no existe em meios de baixa osmolaridade,
porque a hipermolaridade do interior empurra a membrana plasmtica para junto da
parede celular) contm o periplasma, rico em protenas que participam na aquisio de
nutrientes, bem como em enzimas envolvidas na sntese do peptidoglicano.
As bactrias Gram+ podem no ter um espao periplasmtico visvel e no tm
tantas protenas periplsmicas.
Filamento: 20 nm de dimetro
At 15-20m de comprimento
Constitudo por flagelina (protena)
Geralmente sem membrana
Ultra-estrutura flagelar:
1) Filamento
2) Corpo basal
3) Gancho
Gram -: no corpo basal existem anis que se associam a zonas diversas
do invlucro bacteriano: M (contacta com a membrana plasmtica), S (no espao
periplasmtico), P (contacta com o peptidoglicano), L (contacta com a membrana
externa ou LPS).
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Movimentao bacteriana
resistncia
de
agentes
http://www.erc.montana.edu
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Gram-negativas
Todo o exterior da bactria coberto pelos lipopolissacardeos. OMP protenas da
membrana externa. O espao periplasmtico quase no existe em meios de
osmolaridade baixa, porque a membrana plasmtica fica muito junto parede.
Peptidoglicano
Rede/malha que envolve toda a bactria. Cadeias em 2D: num sentido constitudas
por acares e no outro sentido por pptidos (que variam entre as Gram- e as Gram+).
Possuem 2 derivados de acares; cido N-acetilmurmico e N-acetilglucosamina (NAM
e NAG) e vrios aminocidos, dos quais D- -glutamato, D-alanina e cido mesodiaminopimlico. Estes aminocidos no so encontrados nas protenas.
Nas protenas s existem formas L, a presena de aminocidos D neste polmero
protege-o do ataque da maioria das peptidases.
O esqueleto deste polmero composto por NAG e NAM alternadamente. Depois
uma cadeia peptdica de 4 aminocidos D alternados est ligada ao grupo carboxlico
do cido N-acetilmurmico.
Cadeias de subunidades de peptidoglicanos ligados so unidas por ligaes
cruzadas entre os pptidos.
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Polmeros acessrios
Esporos (endosporos)
- Estruturas que no coram;
- Esporngio zona da clula onde se forma o esporo.
- Constitudo por membrana, parede celular (rodeia o protoplasma) ,
crtex (composto de peptidoglicano, mas menos cruzado), tnica externa (constituda
por vrias camadas de protenas impermevel), exosprio e ncleo germinativo.
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Geral
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Num meio onde haja O muito perigoso haver Fe, por isso que as clulas tm
uma maquinaria enzimtica especfica para degradar o HO (ex: catalase, glutationa).
Radiaes
- Radiao ionizante: leso do DNA, mutagnese;
(h muitos microrganismos extremamente resistentes radiao)
- Ultravioleta: leso do DNA, mutagnese;
- Visvel: em alta intensidade, oxignio singleto (muito reactivo).
Nutrio: classificao
1- Fonte de energia:
Luz fototrofismo;
Substncia qumica quimiotrofismo.
3- Fontes de carbono:
CO - autotrofismo;
Substncias orgnicas heterotrofismo.
oxidam molculas
orgnicas
para
libertar
energia;
Os quimiolitotrofos utilizam nutrientes inorgnicos como fontes de
energia.
Os microrganismos variam no s nas fontes de energia, como tambm nos
aceitadores de electres usados pelos quimiotrofos. Trs grandes tipos de aceitadores
so utilizados.
Na fermentao a energia do substrato oxidada e degradada sem a
participao de aceitadores exgenos ou externos. Normalmente a via catablica
produz intermedirios, como o piruvato, que actua como aceitador de electres.
Na respirao utilizam-se aceitadores de electres exgenos. Na
respirao aerbia o aceitador final de electres o O2. Na respirao anaerbia o
aceitador final no o O2, mas sim outros aceitadores exgenos. Ex:
,...
Quimiotrofismo
Existe um grupo de bactrias com capacidade de obter energia atravs de
molculas inorgnicas (em vez de orgnicas).
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e o
tambm so
utilizados.
Os dadores mais comuns so o H2, o
, Fe2+, etc.
Fotossntese
Os microrganismos no s so capazes de obter energia atravs da oxidao de
compostos orgnicos e inorgnicos, como tambm so capazes de capturar a energia
luminosa e us-la para sintetizar APT, NADH, ou NADPH, num processo denominado de
fotossntese.
Normalmente um organismo fotossinttico reduz e incorpora CO2.
um processo muito importante porque a maior parte da nossa energia derivada
da energia solar, que fornece o ATP e o NADPH necessrio para o crescimento dos
microrganismos. responsvel pela produo de O2 (cerca de da fotossntese na
terra feita por microrganismos).
(Quimiorganoheterotrficos)
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Geral
- Ciclo do azoto;
- Ciclo do enxofre;
Os microrganismos, durante o seu crescimento e metabolismo, interagem entre si,
originando ciclos de nutrientes como o azoto, enxofre, fsforo, etc.
Ciclo do azoto
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Tipos de meios
- Meios complexos peptona.
Crescimento Bacteriano
O crescimento pode ser definido como um aumento dos constituintes celulares, o
que leva a um aumento no nmero de clulas quando os microrganismos se
reproduzem atravs de processos como:
Fisso binria Clulas individuais crescem e dividem-se originando
duas clulas-filhas com
aproximadamente o mesmo tamanho.
Fase de latncia
Quando os microrganismos so introduzidos num meio de cultura fresco, no ocorre
um aumento imediato do nmero de clulas. No entanto, as clulas vo sintetizando
novos componentes.
Este perodo de latncia pode ser necessrio por vrias razes:
- A clulas podem ser velhas, sem ATP, cofactores e ribossomas, tendo estes
que ser sintetizados para que as clulas se possam dividir.
- O novo meio pode ser diferente daquele a que as clulas estavam habituadas
e precisam de algum tempo para se adaptarem.
Esta fase varia consideravelmente em durao, dependendo da condio dos
microrganismos e a natureza do meio.
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Geral
Fase estacionria
Num determinado momento o crescimento da populao cessa e a curva de
crescimento torna-se horizontal (o que ocorre quando temos uma populao com
aproximadamente 109 clulas/mL.
O tamanho final da populao vai depender:
- Disponibilidade de nutrientes e outros factores;
- Tipo de microrganismos.
Nesta fase o nmero total de microrganismos viveis permanece constante porque:
- O nmero de nascimentos est balanceado com o nmero de mortes ou
- A populao pra de se dividir mas permanece metabolicamente activa.
Esta fase ocorre por vrios motivos:
- Limitao de nutrientes (ex: O2)
- Acumulao de produtos de excreo txicos (ex: cido lctico, etc.)
- Ou porque se atingiu um determinado nvel crtico
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Fase de morte
Caracteriza-se por um declnio do nmero de clulas viveis. A morte (define-se
como a perda irreversvel da capacidade reprodutiva), como o crescimento tambm
exponencial. A taxa de morte pode reduzir-se quando a populao diminuiu
drasticamente, o que se deve sobrevivncia de clulas particularmente resistentes.
H formao de esporos.
Ateno!
O crescimento bacteriano, numa escala aritmtica exponencial, se utilizarmos
uma escala logartmica representa-se como uma recta.
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Geral
microrganismos
que
crescem
em
condies
terrivelmente
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permitindo a sada de soluto quando a osmolaridade do meio se torna muito menor que
a do citoplasma.
Muitos microrganismos mantm a sua concentrao osmtica acima da do seu
habitat atravs da utilizao de solutos compatveis (solutos que necessrio
acumular para manter o turgor quando a osmolaridade do meio aumenta; so solutos
que so compatveis com o metabolismo e crescimento quando em concentraes
intracelulares elevadas), de modo que a membrana celular est sempre firmemente
pressionada contra a parede celular.
A actividade da gua (aw) inversamente relacionada com a presso osmtica.
Se uma soluo tem uma presso osmtica elevada, a sua aw baixa.
Os microrganismos variam bastante na sua capacidade para se adaptarem a
habitats com baixo aw (hiperosmticos).
Num meio com baixo aw os microrganismos tm que despender um esforo extra
para manter uma concentrao de solutos interna elevada, de forma a conseguirem
reter a gua. Este tipo de microrganismos denominam-se osmotolerantes porque so
capazes de crescer em meios com grandes variaes de aw ou concentrao osmtica
(ex: estafilococos).
Haloflicos Esto completamente adaptados a condies salinas e hipertnicas
de modo que necessitam de altos nveis de NaCl para crescer.
pH
a medida da actividade do io hidrognio numa soluo. Os habitats nos quais os
microrganismos crescem variam grandemente no pH, da que este possa afectar
dramaticamente o crescimento microbiano.
Cada espcie tem a sua prpria gama de pH na qual se processa o crescimento,
bem como um valor de pH ptimo de crescimento.
Microrganismos: acidfilo (0 < pH < 5,5) fungos e algas; neutrfilos (5,5 <
pH < 8,0) a maior parte das bactrias e protozorios; alcalfilos (8,5 < pH < 11,5)
Em geral cada grupo microbiano tem preferncias de pH caractersticas.
Apesar dos microrganismos poderem crescer numa gama alargada de pH, afastada
do seu pH ptimo, existem limites para a sua tolerncia.
Variaes drsticas no pH citoplasmtico podem destruir a membrana celular, inibir
a actividade enzimtica e inibir as protenas de transporte da membrana.
Mecanismos para a manuteno de um pH citoplasmtico neutro:
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Geral
Temperatura
Afecta os microrganismos tal como afecta os outros seres vivos.
Os microrganismos so at particularmente susceptveis porque so, a maioria,
unicelulares e a sua temperatura varia com a temperatura do meio externo.
A temperaturas baixas, um aumento de temperatura aumenta a taxa de
crescimento, porque a velocidade das reaces enzimticas tambm aumenta. A partir
de um certo ponto, no entanto, mais aumentos diminuem o crescimento e
temperaturas suficientemente altas so letais.
As altas temperaturas danificam as clulas ao:
Desnaturarem enzimas, transportadores e outras protenas;
Destroem membranas (desintegrao dos lpidos).
Normalmente provocam danos irreversveis e irrecuperveis.
A baixas temperaturas
As membranas gelificam;
O transporte e a actividade enzimtica muito lenta.
Afectam as funes celulares, mas no necessariamente a composio
qumica e a estrutura da clula.
O crescimento varia consoante a temperatura e tem um mximo, um mnimo e uma
temperatura ptima.
Claramente, os organismos procariticos conseguem crescer a temperaturas muito
mais elevadas que os eucariotas.
Concentrao de O2
Tempos vrios tipos de organismos consoante a sua relao com o O2:
Aerbios Organismos capazes de crescer na presena de O2 atmosfrico;
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Geral
Radiao
O nosso mundo bombardeado com radiao electromagntica de vrios tipos.
medida que o comprimento de onda de uma radiao diminui, a sua energia
aumenta.
Muitas formas de radiao electromagntica so perigosas para os microrganismos.
Radiao ionizante: Raios X e raios gama. Tem um comprimento de onda
muito curto e muita energia. Provocam leses do DNA, mutagnese, podendo causar
morte directa ou indirectamente. Isto acontece ao quebrarem as ligaes de
hidrognio, oxidarem as duplas ligaes, destruirem estruturas em anel e
polimerizarem algumas molculas.
Radiao UV: Mata todos os tipos de microrganismos devido tambm ao seu
curto comprimento de onda e elevada energia. Actuam formando dmeros de timina no
DNA, que se unem por ligaes covalentes em cadeias adjacentes, impedindo a
replicao e funo do DNA leso do DNA.
Luz visvel: Apesar de ser fundamental porque a fonte de energia para a
fotossntese, quando presente em alta intensidade pode lesar ou matar clulas
microbianas, nomeadamente porque leva formao do oxignio singleto (1 O2:
um agente oxidante muito reactivo e poderoso que rapidamente destri a clula).
Metabolismo Bacteriano
Anabolismo
Catabolismo
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glucose + 18 ADP + 18 Pi
+ 12 NADP
Consome muita energia
Gasta poder redutor
Importante para os organismos autotrficos.
Para os organismos heterotrficos j no necessrio o ciclo de Calvin:
- Gluconeogenese
Glucose
Gasto de ATP
Vias anaplerticas:
Fosfoenolpiruvato
OAA
Ciclo do glioxilato
Serve para repor os nveis de OAA. Evitam-se os
passos de descarboxilao do ciclo de Krebs.
- Isocitrato liase.
Permite a uma bactria sobreviver e crescer num
meio de cultura cujo nico meio de carbono o acetato ou cidos gordos.
As leveduras em contacto com macrfagos
estimulam o ciclo do glioxilato, o que significa que estas leveduras adaptam-se melhor
aos hospedeiros se este ciclo ocorrer (estudo importante).
Persistence
of
Mycobacterium tuberculosis
macrophages and mice requires the glyoxylate shunt enzyme isocitrate lyase.
in
transcrio.
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Eclipse O fago injectou o seu DNA na bactria mas ainda no se replicou, portanto
deixa de existir.
Replicao fgica
- Injeco do genoma.
- Replicao do DNA. Traduo dos mensageiros em protenas, formao de
nucleocpside.
- Lise da bactria e libertao de novos fagos.
Penetrao
- Landing;
- Attachment;
- Tail contraction;
- Penetrating and unplugging;
- DNA injection.
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Geral
Replicao
- Processos precoces:
- Sntese dos mRNA precoces e das enzimas de replicao e protenas
reguladoras.
- Processos tardios:
- Sntese da nucleocpside, etc.
Progenia
Virologia
1- Introduo
2- Bacterifagos
3- Virides e pries
Vrus
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Virio: uma partcula viral completa. Contem uma ou mais molculas de DNA ou
RNA. Pode possuir vrias camadas (ex: uma membrana).
Morfologia:
- Estruturas filiformes;
- Estruturas cilndricas;
- Fagos de tamanhos variveis;
- Estrutura icosadrica.
Protena Cro Implicada na regulao dos genes do ciclo ltico. Se est em muita
quantidade inibe o repressor levando ao ciclo ltico.
Ciclo lisognico
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Sebenta de Microbiologia Geral
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Fagos e virulncia
- Outros
Factores reguladores da virulncia, enzimas
Virides Agentes infecciosos (de plantas) constitudos apenas por RNA de cadeia
simples. No tm protenas.
So muito pequenos e contm muito pouca informao.
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Geral
Pries Agentes infecciosos constitudos apenas por uma protena (PrP) sem
cidos nucleicos.
- Scrapie doena das ovelhas;
- BSE;
- Doena de Kreutzfeldt-Jakob (DCJ)
- Kuru.
Sem genoma de cido nucleico.
Replicao Resumo
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Efeito citoptico
Corpos de Incluso
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Geral
Oncognese viral
- Herpesvrus: EBV (linfoma de Bukitt; carcinoma nasofarngeo), HHV8
(Sarcoma de Kaposi);
- Adenovrus;
- Retrovrus: HTCV 1 e 2 (leucemias);
- Papovavrus: papilomavrus (carcinoma do colo do tero);
- Hepadnavrus: HBV (carcinoma heptico)
- Flavivrus: HVC (carcinoma heptico
hepatite B;
hepatite C.
Oncogenes Virais
Oncogenes Celulares
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Infeces latentes
Frmacos anti-virais (tem que ser selectivo: ser antimicrobiano mas no atacar o
hospedeiro)
-Dificuldade de encontrar alvos selectivos;
- Toxicidade;
- Design molecular.
Frmacos anti-herpticos
Ex: aciclovir (anlogo da guanosina).
Inibidores da cadeia
Frmacos anti-HIV
Inibidores de proteases.
Ex: a poliprotena GAG no consegue ser clivada porque as proteases
esto inibidas.
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Gentica Bacteriana
Mecanismos de alterao gentica
Mutao
- Mutaes pontuais;
- Deleces;
- Inseres.
Conjugao
F
clulas bacterianas capazes de transferir marcadores (possuem um factor de
fertilidade: factor F (plasmdeo).
F
bactrias que no possuem factor F; aps o receberem o factor F tornam-se
elas prprias F.
F
clulas bacterianas capazes de transferir marcadores preferenciais com uma
frequncia muito superior.
Plasmdeos
- F;
- R conferem resistncia a antibiticos;
Genes que conferem resistncia a muitos antibiticos;
- Colicinas conferem tambm resistncia a antibiticos;
- Virulncia codificam genes de produtos que permitem a aderncia,
internalizao, produo de substncias.
- Metablicos codificam genes de metabolismos estranhos.
Resistncia a metais pesados.
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Plasmdeo R1
- RTF: resistance transfer factor;
- + alguns transposes.
Transformao
Ciclos Fgicos
- Ciclo ltico;
- Ciclo lisognico.
Transduo Especializada
Como os fagos se inserem sempre nos mesmos locais do cromossoma
so sempre as regies adjacentes que so integradas no genoma viral.
Recombinao Site-specific
Recombinao site-specific versus homloga.
Fungos
Basidiomicetes
- Considerada a classe dos fungos superiores tal como os ascomicetes;
- A estrutura somtica miceliana;
cordes
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Deuteromycetes
- Tambm so fungos superiores, no se conhece o ciclo sexual;
- Recebem a designao especfica baseada na sua forma assexual,
principalmente pelo tipo de condios que formam.
Ex: Algumas espcies de Penicillium e Aspergillus, Candida albicans.
Fungos em alimentos
- A aco dos fungos nos alimentos principalmente fermentadora.
- As espcies utilizadas, ou as variedades, dependem do tipo de aco
pretendida dos microrganismos e do sabor que se pretenda dar ao alimento.
- Outros alimentos em cuja preparao intervm fungos:
Sake aguardente de arroz;
Shyu molho de soja.
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Sebenta de Microbiologia
Geral
Fungos
Penicillium
Aspergillus
substrato.
Quimioterpicos
Actuam sobre:
- Peptidoglicano (porque s existem nas bactrias);
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Sebenta de Microbiologia Geral
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Penicilinas (-lactmicos);
Cefalosporinas (-lactmicos);
Vancomicina;
Cicloserina; Menos utilizados
Bacitracina.
resistncia ao
- Resistncia penicilina:
1- Enzimas que destroem a penicilina -lactamases (cortam o anel).
- Evitar a resistncia:
- Adicionar inibidores de -lactamases (ex: cido clavulmico).
Augmentin
2 Partes antibitico;
1 Parte de cido clavulmico.
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Sebenta de Microbiologia
Geral
2- Modificaes nas porinas fazem com que haja menos entrada dos
antibiticos;
3- As prprias PBP so modificadas pelas bactrias (no h forma de
ultrapassar esta resistncia), no se ligando aos -lactmicos.
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Sebenta de Microbiologia
Geral
- Mutaes;
- Internalizao de material gentico estranho (ex: conjugao transferncia de
material gentico entre bactrias).
Quanto menor o halo (?) (mtodo de) maior a resistncia mtodo quantitativo.
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- Barreiras fsicas;
- Sistemas de defesa
Imunidade inata;
Barreiras
Barreiras muco-cutneas
- Tudo o que est entre a pele e as mucosas;
- Lmen que est em contacto directo com o exterior;
- Mecanismos: secrees, enzimas, pH, outros microrganismos (comensalismo),
movimentos mecnicos (lacrimejar, movimentos peristlticos e de deglutio, etc).
Pele
- Epitlio queratinizado;
- Descamao;
- Secrees (suor e sebo cidos gordos ou triglicridos so importantes);
- Flora residente: baixam o pH da pele impedindo o desenvolvimento de outros
microrganismos;
Fermentao cido propinico baixam o pH, tambm so
antimicrobianos;
Como ultrapassar esta barreira?
- Leso (Clostridium perfringens gangrena);
- Picada de vector o prprio vector est infectado;
- Por injeco;
- Por entrada directa (raro): Schistosoma helminta que fura a pele.
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Sebenta de Microbiologia
Geral
Mucosa Respiratria
- Epitlio com clios que batem no sentido de empurrar de dentro para fora;
- Destruio do epitlio ciliado durante a infeco por Mycoplasma pneumoniae;
- Ciliostase (paragem do batimento ciliar) por Bordetella pertussis Tosse
convulsa (somos vacinados).
- O epitlio produz muco apanha os microrganismos;
- Tem clios (o que faz com que o fluxo seja empurrado para fora do
organismo);
- Lisozima (existe em muitas secrees): Cliva as ligaes peptdicas no
peptidoglicano;
Actividade anti-bacteriana porque destri.
Mucosa Intestinal
- Clulas de Paneth que secretam pptidos no antimicrobianos;
- Bactrias resistem por:
- Proteases;
- Excreo activa;
- Neutralizao;
- Reduo da carga negativa;
- Modificao do LPS.;
- Flora intestinal comensal:
- Tem muitas bactrias inofensivas que protegem contra a invaso de
patognios;
- Estmago poucas bactrias porque muito cido;
- Intestino grosso Tem muitas enterobactrias anaerbias estritas,
etc.
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Infeco
- Adeso s superfcies mucosas:
- Estruturas: adesinas (pili ou fmbrias).
- Invaso das mucosas:
- Ex: Helycobacter pylori destri a mucosa;
- Salmonella entrica injecta invasinas que promovem a sua entrada
nos entercitos por endocitose e replica-se em vesculas.
- Shigella sp Induzem a sua entrada e destroem o vacolo onde
estavam e replicam-se no citosol, destruindo toda a mucosa intestinal.
O sistema do complemento
Bactria com antigenes - anticorpos Ligao ao C1 enzimas que actuam em C4 clivado 1 fragmento maior que fica superfcie.
- Cb + Cb Convertase de C (cliva o C) a Cb liga-se superfcie activadora;
- Cb + Cb + C - Activa C (clivado) - Cb recruta C, C, C e C
polimerizao de C que faz um canal na membrana destruindo a capacidade
permevel selectiva da membrana.
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Sebenta de Microbiologia
Geral
por
estruturas
microbianas:
cidos
teicicos,
- Ligao de lectinas.
Via comum:
- Produo de convertases
poros)
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transcrio de genes
1 Sistema
2 Sistema
Oligoadenilato sintetase
Formao
DNA
Oligoadenilato
Activao de PKR
responde ao
de prot.
Resposta da clula
Destruio do RNA viral
Fosforilaes em cadeia
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Ontogenia
- Clulas pluripotenciais
moncitos.
Inflamao
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Sebenta de Microbiologia
Geral
Leuccitos em movimento
- Uropdio (vo frente)
(ex: plectina).
Adeso de neutrfilos ao endotlio via interaces entre selectinas endoteliais e
(?).
Selectinas (E, P e L) ligam-se a acares.
Ligao fraca = rolling (rolamento)
Inflamao:
Adeso (rolling)
Adeso forte via integrinas (reconhecem as imunoglobulinas)
diapedese
migrao.
Fagocitose
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2 Trnsito vacuolar
- Fagocitose formao de vacolo (fagossoma), mas a sua membrana
modifica-se quando interage com os endossomas (formados por pinocitose), fundindose depois com os lisossomas (s possvel essa fuso depois de todas as alteraes
transitrias do fagossoma).
Exploso respiratria (quando a clula ingere uma partcula estranha d-se uma
exploso respiratria elevada produo de radicais de O)
- Macrfagos e neutrfilos produzem muitos radicais de O;
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Sebenta de Microbiologia
Geral
- Mieloperoxidase: HO
microrganismos que so fagocitados).
Sobrevivncia intracelular
- Inibio da fuso fagossoma-lisossoma (ex: mycobacterium, legionella,
toxoplasma);
- Escape do fagossoma (listeria induz a polimerizao da actina, de forma a
passar de clula a clula sem passar pelo espao intersticial; cometas de actina ,
tripanossoma, shigella)
Toxoplasma
- Se entrar sem ser por fagocitose passa a residir num vacolo que no
acidifica.
M. tuberculosis
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Sebenta de Microbiologia Geral
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Imunidade Adquirida
1- Imunidade humoral (anticorpos);
2- Imunidade celular.
Sistema linfide
Linfcitos B produzem anticorpos (so especficos por causa dos antignios);
Linfcitos T amadurecem no timo. Tm receptores das clulas T (da mesma
famlia das imunoglobulinas);
Diferenciam-se em CD4 ou CD8 reconhecem antignios ligados ao
MHC (complexo maior de histocompatibilidade que se liga a pptidos, processa-os e
entrega-os aos linfcitos T).
Anticorpos (Imunoglobulinas)
- 4 cadeias (2 leves unidas por pontes S S - e 2 pesadas)
- Fc fragmento cristalizado no varia dentro da mesma classe de
imunoglobulinas.
- Regio varivel reconhece que estranho.
Regies hipervariveis esto na zona de contacto com o antignio.
Produo de anticorpos
1 Expresso dos anticorpos superfcies: cada clula tem o seu anticorpo
especfico superfcie.
2 Interaco anticorpo-antignio *
Clulas B de memria
Plasmcitos
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Sebenta de Microbiologia
Geral
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Sebenta de Microbiologia Geral
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- Hemaglutinina
formam anticorpos.
As
pandemias
so
provocadas
por
grandes
mutaes.
Mutaes ocorrem nas zonas mais distais, mais expostas
aos anticorpos, mas no ocorrem no seu interior.
Imunidade Celular
- O que que os linfcitos T fazem?
- Gerem o sistema imunolgico:
MHC
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Sebenta de Microbiologia
Geral
Classe II
- Activam macrfagos;
- Podem ser citotxicos MHC classe 1 sentinelas para o que se est a passar
no organismo.
Citotoxidade
- Clulas com muitos grnulos que so libertados e formam poros nas
membranas da clula alvo morte programada da clula alvo.
Interfero gama: a citocina Th1 - muito importante, sem ele o animal morre
mesmo se inoculado com microrganismos incuos.
TH (CD4) TH1
As citoquinas (ex: interfero gama) que libertam so diferentes;
Regulam-se e inibem- TH2
-se mutuamente. As citoquinas so Importantes para activar
linfcitos B, macrfagos, ou Tc.
As citoquinas so diferentes:
Linfcitos B
Mastcitos
Eosinfilos
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Sebenta de Microbiologia Geral
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TH1 actividade
TH2 actividade
IL2
IL4
IFN
IL5
TNF
IL10
Schistosomase
Cercariae (alojam-se no plexo nervoso) Formas mais pequenas do schistosoma
cobrem-se com protenas do prprio hospedeiro e o sistema imunolgico no o
reconhece; os seus ovos ficam nos tecidos e provocam sua volta a fibrose do tecido. A
fibrose leva estenose/compresso dos vasos, que por sua vez leva a insuficincia
biliar.
Toxinas Bacterianas
- Quase sempre protenas secretadas pelos microrganismos.
Exotoxinas so secretadas;
Endotoxinas lipopolissacardeo (pertencem prpria bactria).
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Sebenta de Microbiologia
Geral
Toxicidade do LPS
- Liga a receptores nos macrfagos e este secreta muitas citoquinas que induzem
resposta nas clulas, se esta for um neutrfilo e este liberta o contedo lisossomal.
- Porque que o hospedeiro tem um receptor para o LPS:
- Porque em quantidades pequenas este pode provocar respostas
protectoras (ex: coagulao, activao do complemento, etc.);
- Mas quantidades grandes de LPS induzem uma resposta txica;
- As respostas, que eram dantes protectoras, em grande quantidade
provocam uma grande coagulao e leses no endotlio dos vasos sanguneos
choque sptico (as respostas so as mesmas, mas neste caso muito exageradas, o que
perigoso).
(O LPS em si no txico!)
Superantignios
- H microrganismos que produzem estas protenas que ligam o TCR e MHC
juntando as 2 clulas produo de quantidade exagerada de citoquinas.
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- A Poros grandes
- B Poros pequenos
2- Fosfolipase
Destroem a membrana Lise celular.
Hemolisinas estreptoccicas
- So toxinas;
- Hemlise ;
- Hemlise - causa a amigdalite.
Toxinas A/B
B liga a 1 receptor na clula (acidifica o endossoma) e permite a entrada na
clula e depois faz com que entre o componente A no citoplasma alteram diferentes
funes celulares.
Botulismo
- A toxina entra no motoneurnio, impede a fuso das vesculas no h
contraco muscular. Paralisia flcida.
Ttano
- A toxina bloqueia a libertao do neurnio inibitrio est sempre excitado a
libertar acetilcolina contraco contnua; paralisia espstica.
Antraz (carbnculo)
- A sua toxina do grupo A/B;
- Factor letal;
- Factor de edema.
Sistemas de secreo
- Sistemas 3 e 4 so como agulhas (parecida com flagelos) que injectam no
citoplasma da clula protenas.
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- Outros patogneos.
Ilhas de patogenicidade
- Zonas do genoma de grande dimenso;
- Possuem contedos em G + C S do resto do genoma;
- Codificam factores de virulncia, nomeadamente os sistemas de secreo de
tipo III;
- Resultam da transferncia horizontal de genes entre espcies diferentes.
Cryptococcus
Parasitismo intracelular
Os microrganismos tm que se adaptar ao ambiente intracelular e impedir a
morte dessa clula.
- Capacidade de invadir clulas no fagocticas.
Aspectos fundamentais
Malria
Metabolismo (aulas prticas)
protozorios (Nutrio,
Microbiologia
Estudo dos organismos demasiado pequenos para serem claramente visualizados
a olho nu.
Inclui: Vrus, bactrias, protozorios, algas, fungos.
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Sebenta de Microbiologia Geral
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Bactrias
Arqueobactrias
- Eucariticas
Protozorios
Algas
Fungos
Plantas
Animais
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Geral