Leishmanioses

Profa. Dra. Irene Soares

Disciplina Parasitologia Clnica, FCF/USP

1semestre/2005

Taxonomia
Filo: Sarcomastigophora
Classe: Zoomastigophorea
Ordem: Kinetoplastida
Famlia: Trypanosomatidae
Gneros:
Leishmania leishmanioses cutnea e visceral
Trypanosoma: T. cruzi Doena de Chagas

Biologia do parasita
(formas evolutivas)

Classificao das espcies

Complexo mexicana: L. (L.) mexicana
L. (L.) amazonensis *
L. (L.) pifanoi
Causam leses cutneas (leishmaniose cutnea)
Crescem bem em meios de cultura
So altamente virulentos em hamsters e
camundongos BALB/c
Os promastigotas desenvolvem-se no intestino
mdio e anterior dos vetores flebotomneos
L. (L.) amazonensis o agente etiolgico da
lesihmaniose cutnea difusa no Brasil

Classificao das espcies

Complexo braziliensis: L. (V.) braziliensis *
L. (V.) guyanensis
L. (V.) panamensis
Causam leses cutneas e mucosas (leishmaniose
cutnea e mucocutnea)
Crescem lentamente em meios de cultura
So pouco virulentos para animais de laboratrio
No vetor, os promastigotas desenvolvem-se no
intestino anterior, mdio e posterior

Classificao das espcies

Complexo tropica (leishmaniose cutnea)
L. tropica (V. M.)
L. major (V. M.)
L. aethiopica (V. M.)
Complexo donovani (leishmaniose visceral)
L. (L.) donovani (V. M.)
L. (L.) infantum (V. M.)
L. (L.) chagasi (N. M.) *

Classificao atual
LAINSON e SHAW (1987): Com base em critrios clnicos,
epidemiolgicos e biolgicos
Organizao das espcies que parasitam o homem em dois
subgneros:
Subgnero Leishmania: espcies pertencentes aos Complexos
Donovani, Mexicana e Tropica.
Ex. Leishmania (Leishmania) amazonensis
Subgnero Viannia: espcies pertencentes ao Complexo
Braziliensis.
Ex. Leishmania (Viannia) braziliensis

Morfologia do parasita
(formas evolutivas)
Amastigota
(no hospedeiro vertebrado)
Intracelular, arredondada,

cinetoplasto em forma de basto e

ausncia de flagelo livre
Parasitas exclusivos de clulas
do sistema fagoctico mononuclear
(preferencialmente macrfagos)
Multiplicam-se por diviso binria

Morfologia do parasita
(formas evolutivas)

Promastigota

(no inseto vetor)

Extracelular, alongada
e presena de flagelo
Procclico: forma de
diviso
Metacclico: forma
infectiva

ncleo
cinetoplasto

Mecanismo de Transmisso
A doena transmitida
por insetos flebotomneos
(Phlebotomus sp.,
Lutzomyia sp.) que
inoculam promastigotas
metacclicos durante o
repasto sanguneo
No Brasil: gnero Lutzomya
(mosquito palha, cangalhinha
ou birigui)

Ciclo Biolgico
Ciclo no vetor

Inoculao do estgio
promastigota na pele

Ciclo no vertebrado
Promastigotas so
fagocitados por
macrfagos

4 a 8 horas

Diviso no estmago e migrao

para probscide

d
Transformao de promastigotas
em amastigotas dentro dos macrfagos

Transformao de amastigota
em estgio promastigotas no estmago

Diviso binria

Trato digestivo anterior

ou estmago
d
Multiplicao de amastigotas em clulas
(incluindo macrfagos)

Ingesto de clulas
parasitadas

Ingesto de macrfagos infectados com amastigotas

pela fmea durante respasto sanguneo

Hospedeiro acidental

Domstico

Silvestre
Reservatrios

Leishmaniose Cutnea
ou Tegumentar

Formas clnicas

Leishmaniose cutnea: L. braziliensis,

L. amazonensis, L. guyanensis

Leishmaniose mucocutnea: L. braziliensis

Leishmaniose cutnea difusa: L. amazonensis

Leishmaniose Cutnea - LC
Leso inicial

Formao de ppula

Auto-cura

Leses disseminadas (no ulceradas)

(Leishmaniose Cutnea Difusa - LCD)

lcera //
(nica ou
mltiplas)

Auto-cura

Comprometimento de mucosas e cartilagens

(Leishmaniose Mucocutnea - LMC)

Quadro clnico
Leishmaniose
Cutnea
Leishmaniose
Cutnea difusa

Leso no ulcerada

Leso ulcerada

Leishmaniose mucocutnea
(lcera de Bauru)

Leishmaniose Visceral
ou Calazar

Leishmaniose Visceral
Agente etiolgico no Brasil: Leishmania (L.) chagasi
Perodo de incubao: 10 dias a 24 meses (mdia 2 a
6 meses
Visceralizao das amastigotas para rgos linfides
Sinais gerais1

Sinais viscerais2

bito
1. Febre, anemia, leucopenia, enfraquecimento, etc. (deteco de
amastigotas na medula ssea)
2. Hepatomegalia e esplenomegalia.

Quadro clnico
Fase Inicial (aguda)

Fase final

Mecanismos de invaso da clula

hospedeira
Promastigota
Clula hospedeira

Macrfago, outras clulas (?)

Mecanismo de entrada

Fagocitose

Ligantes do parasita

gp63, LPG

Receptores

CR3, FnR, MFR

Amastigota
Clula hospedeira

Macrfago

Ligantes do parasita

Receptores

Vacolo intracelular

Presente

Fuso com lisosomas

Pode ou no ocorrer

Resposta imune

Resposta imune inata: produo de IL-12 por

macrfagos com posterior ativao de
clulas NK
(atividade ltica direta e
produo de IFN-)

Resposta imune
A resistncia infeco est associada a

ativao de clulas T CD4 do tipo Th1

Camundongos C57BL/6, C3H, CBA

A susceptibilidade infeco est relacionada

a resposta de clulas T CD4 do tipo Th2

Camundongos BALB/c

Citocinas que agem na diferenciao dos linfcitos Th1

durante a resposta imune

Promastigota (LPG)
L. Major
APC (CD?)

IFN-
/
IL-12

CD4
naive

Th2
IFN- ()

Th1

IL-12

Ativao de M
IFN-

NK

IL-2
IFN-
TNF-

IL-12

Camundongos C57BL/6 e C3H

(resistentes)

M
infectado

Resoluo da infeco:
envolve
a produo
de IFN- com posterior
ativao de macrfagos
e
sntese de xido
ntrico (NO)

Citocinas que agem na diferenciao dos linfcitos Th2

durante a resposta imune
Th1

L. major

IL-4 (-)

Ag
LACK

CD4

naive

APC

IL-4 (+)

Th2

LT V
8V
4

Camundongos BALB/c
(susceptveis)

IL-12R
2
IFN-
NO
IL-4
IL-5
IL-10
IL-13

Ativao de LB

LB

Tratamento
Droga de primeira escolha:
Antimoniais pentavalentes (Glucantime, Pentostam)
Aplicao: i.v. ou i.m. diria (20 a 28 dias)
Mecanismo de ao: inibem a via glicoltica e a oxidao
de cidos graxos

amastigota

Contra-indicaes: mulheres gestantes e pacientes cardacos

Efeitos colaterais

Tratamento
Drogas de secunda escolha:
Anfotericina B (fungizona):
Aplicao: i.v.
Mecanismo de ao: altera sntese de fosfolpides de membrana
Contra-indicaes: mulheres gestantes, cardiopatas, nefropatas
e hepatopatas
Efeitos colaterais: diversos
Pentamidina:
Aplicao: i.m.
Mecanismo de ao: altera a estrutura do cinetoplasto e sntese
de poliaminas
Menos eficazes e de maior toxicidade

Epidemiologia
88 pases so considerados regies endmicas

(Amricas, frica, sia e sul da Europa).

350 milhes de pessoas esto sob risco de infeco;
Cerca de 15 milhes de pessoas esto infectadas;
Estima-se que ocorram aproximadamente de 1.5 - 2
milhes de novos casos por ano.

Situao Epidemiolgica no Mundo - LC

Situao Epidemiolgica no Mundo - LV

Situao Epidemiolgica no Brasil - LV

Situao Epidemiolgica no Brasil - LV

Reservatrios
Espcies que causam formas cutneas de leishmaniose
no homem:
Animais silvestres (pacas, tutus, capivaras,
bichos preguia e outros roedores silvestres)
Animal domstico (co)

Espcies que causam formas viscerais de Leishmaniose

no homem:
Animal silvestre (raposa)
Animal domstico (co)

Estratgias de vacinao
Parasitas vivos atenuados
Parasitas mortos
Subunidades antignicas:
Protena recombinante
Vrus recombinante
Vacinas de DNA
Imunizao com clulas dendrticas

Antgenos
gp63
LACK
PSA2
TSA
LmSTI1
LeIF

Diagnstico laboratorial - LC
Diagnstico Parasitolgico:
Exame direto de preparaes coradas (Giemsa ou Leishman):
Mais apropriado nos casos de leishmaniose cutnea causada pela
L. (L.) amazonensis

Amastigotas

As amostras de leso podem ser obtidas por:

- Escarificao
- Bipsia com impresso por aposio
- Aspirao (puno)
Exame histopatolgico

HE

Cultura: Meios NNN ou LIT (27C), 1 semana

Promastigotas
Mtodos bioqumicos e imunolgicos identificao de espcie
Inoculao de animais (hamsters)
leses (~ 1 ms)

observar aparecimento de

Diagnstico laboratorial - LC
Diagnstico Imunolgico:
Intradermorreao de Montenegro (IRM)
Imunofluorescncia indireta
ELISA
A IRM apresenta-se negativa nos casos de leishmaniose
cutneo-difusa

Diagnstico laboratorial - LC
Intradermorreao de Montenegro (IRM)
Princpio: teste de hipersensibilidade tardia
Tcnica: inoculao de um extrato antignico de promastigotas
na face anterior do antebrao
Leitura: aps 48 horas medir o dimetro da indurao
Interpretao:
Reao Negativa: ausncia de qualquer sinal no local de inoculao
ou presena de uma ppula com dimetro < 5 mm
Reao Positiva: presena de ppula ou ndulo com dimetro > ou
= 5 mm

Diagnstico laboratorial - LV
Diagnstico Parasitolgico:
Exame direto de preparaes coradas (Giemsa ou Leishman):
Pesquisa de formas amastigotas
Amostras: puno aspirativa de medula ssea, linfonodos, fgado e
bao
Cultura:
Pesquisa de formas promastigotas
Mtodos bioqumicos e imunolgicos identificao de espcie
Inoculao de animais (hamsters)

Diagnstico laboratorial - LV
Diagnstico Imunolgico:
Intradermorreao de Montenegro (IRM)
Imunofluorescncia indireta
ELISA
A IRM apresenta-se negativa nos casos avanados de
leishmaniose visceral

Mtodos para caracterizao das

espcies de Leishmania
Utilizao de anticorpos monoclonais
Perfil de isoenzimas
Hibridizao de DNA de cinetoplasto
PCR: detecta a presena de DNA de Leishmania a
partir da utilizao de oligonucleotdeos de
sequncias conservadas de determinadas espcies
desse parasita

Doena de Chagas

Biologia do parasita
(formas evolutivas)

Tripomastigota:
(no hospedeiro vertebrado e
em cultura de clulas)

Forma alongada com

cinetoplasto posterior ao
ncleo
O flagelo forma uma extensa
membrana ondulante e tornase livre na poro anterior da
clula

Biologia do parasita
(formas evolutivas)

Amastigota

(no hospedeiro vertebrado e

em cultura de clulas)
intracelular, arredondada
ou oval, desprovida de flagelo
livre
Parasita grande variedade de
clulas, incluindo macrfagos,
fibroblastos, clulas
endoteliais e musculares
Multiplica-se por diviso
binria

Biologia do parasita
(formas evolutivas)

Epimastigota

(no inseto vetor)

Forma alongada com
cinetoplasto anterior e
prximo ao ncleo
Possui pequena membrana
ondulante lateralmente
disposta
Multiplica-se por diviso
binria

Ciclo biolgico
Hospedeiros invertebrados: insetos da Famlia
Reduviidae, sendo as espcies mais representativas
Triatoma infestans, Panstrongylus megistus e Rhodnius
prolixus
Conhecidos popularmente no Brasil como barbeiros
Hospedeiros vertebrados: homem e outros mamferos
(gato, co, porco domstico, rato, macaco de cheiro,
sagui, tatu, gamb, morcego)

Transmisso
Ocorre pela deposio na pele
de formas tripomastigotas
metacclicos eliminados pelos
triatomneos atravs das fezes
ou urina
Principal espcie vetora no Brasil: Triatoma infestans

Ciclo biolgico do Trypanosoma cruzi

tripomastigota

tripomastigota

epimastigota

amastigota

tripomastigota

tripomastigota

Diagnstico Parasitolgico
Deteco de tripomastigotas sanguneos em esfregao
corado com Giemsa ou Leishman

T. cruzi (tripomastigota)