Enzimologia

Marcus Aurélio Miranda de Araújo.

Inibição irreversível
“Substrato que se combina
irreversivelmente com uma enzima.”

„ Assemelha-se a um inibidor não-competitivo.

„ A enzima é completamente removida do sistema.

„ Vmáx↓ e Km permanece o mesmo.

Inibição irreversível
„ Inibidores suicidas
„ é uma classe especial,

„ participa dos primeiros passos químicos da reação

enzimática normal,

„ Composto reativo – combina irreversivelmente,

„ Chamados de inibidores com base no mecanismo.

Enzimas reguladoras
“enzima que determina a velocidade de
toda a seqüência, pois ela catalisa a
reação mais lenta.”

„ Geralmente, a 1ª enzima de um sistema

multienzimático é a reguladora.
Enzimas reguladoras
„ A atividade destas enzimas é regulada
através de vários tipos de moléculas
sinalizadoras, que podem ser:
„ Pequenos metabólitos,
„ Cofatores.

„ Classes de enzimas reguladoras:

„ Alostéricas,
„ Reguladas pela modificação covalente reversível.
Enzimas Alostéricas
„ Deriva do grego allos = “outros” e stereos = “sólido
ou forma”.

„ Funcionamento: ligação não-covalente e reversível de

um metabólito regulador chamado de modulador.

„ Enzimas alostéricas – possuem “outras formas” ou

conformações induzidas pela união com
moduladores.
„ Inibição por retroalimentação
(inibição alostérica).
Enzimas Alostéricas
„ Os moduladores podem ser:
„ Inibidores ou

„ Estimuladores.

„ Tipos de enzimas alostéricas:

„ homotrópicas = modulador é idêntico ao

substrato.
„ Heterotrópica = quando o modulador é uma

molécula ≠ do substrato.
Enzimas Alostéricas

„ Apresentam 1 ou mais sítios alostéricos ou regulador

e 1 sítio ativo ou catalítico.
„ Ex: calcineurina – fosfatase.

„ Enzimas homotrópicas – sítio ativo e o regulador são

os mesmos.
Enzimas Alostéricas
„ Dados cinéticos:
„ Curva de saturação é uma sigmóide.

„ Comportamento cinético sigmóide – interações

cooperativa entre as múltiplas subunidades
protéicas.
 Estabilidade das
proteínas/enzimas
„ Podem ser desnaturadas por mudanças
de vários parâmetros externos:
„ Temperatura,
„ pH,
„ Pressão,
„ [ ] de desnaturantes: Uréia ou GdmCl.