ELETROFORESE

Fundao Faculdade Federal de Cincias Mdicas de Porto Alegre Departamento de Cincias Fisiolgicas Disciplina de Bioqumica

Enzimas de Diagnstico
Monitora Joana Eggler Dembogurski

Dosagem de protenas, a partir da diferena de carga eltrica

ENZIMAS
Protenas catalizadoras Dirigem os eventos metablicos Presentes em todos os tecidos Nveis alterados no plasma, em situaes adversas

ISOENZIMAS
Enzimas que catalisam a mesma reao, mas que possuem estruturas diferentes Tecido-especficas Tecido Comportamento eletrofortico diferente til para determinar o stio da patologia

ISOENZIMAS
Enzimas que catalisam a mesma reao, mas que possuem estruturas diferentes Tecido-especficas Tecido Comportamento eletrofortico ( ) diferente

ENZIMAS SRICAS
Enzimas so encontradas no plasma em duas situaes:
1. Homeostasia 2. Patologia

ENZIMAS SRICAS
1. Homeostasia: Homeostasia:
enzimas plasma-especficas plasma possuem funo no plasma concentrao srica elevada no patolgica exemplos: trombina, plasmina, LPL plasmina,

Portanto...

ENZIMAS DE DIAGNSTICO
Enzimas no plasma-especficas plasmaTecido-especficas TecidoNveis aumentados no plasma reflete leso ou hiperplasia do tecido correspondente

ENZIMAS SRICAS
2. Patologia:
enzimas no plasma especficas
intracelulares ou digestivas no possem funo no plasma aparecem no plasma incidentalmente sua dosagem tem valor diagnstico leso ou hiperplasia dos tecidos de origem so fatores responsveis

ENZIMAS DE DIAGNSTICO
Para que o diagnstico do envolvimento de um rgo especfico seja feito, necessrio conhecer:
a relao de proporo enzima/tecido; a cintica de aparecimento e desaparecimento no plasma.

* Nveis sricos muito baixos dessas enzimas podem ser normais devido
renovao celular.

ENZIMAS NO PLASMA-ESPECFICAS PLASMArenovao celular normal nveis sricos no-significativas no-

ENZIMAS DE DIAGNSTICO
Existem mais de 20 enzimas utilizadas tipicamante para diagnstico laboratorial de patologias. Dosagem fcil atravs de marcadores especficos e tcnicas automatizadas Exames de rotina

leso ou hiperplasia Nveis sricos de importncia diagnstica

ENZIMAS DE DIAGNSTICO
Fosfatase cida

Fosfatase Alcalina
Fosfatase Alcalina Aminotransferases

Principais enzimas:
Fosfatase cida Fosfatase Alcalina Aminotransferases
(TGO e TGP)

Amilase Lipase CK
(creatina quinase) quinase)

GGT Amilase Lipase CK LDH

GGT
(gama glutamil transpeptidase) transpeptidase)

LDH
(lactato desidrogenase) desidrogenase)

A resposta heptica para qualquer obstruo a sntese de fosfatase alcalina.

colelitase cncer de cabea de pncreas

Fosfatase cida
Fosfatase cida Fosfatase Alcalina Aminotrasferases GGT Amilase Lipase CK LDH Fosfatase cida

Aminotransferases
(TGO e TGP) Catalisam a interconverso de Aa por transferncia de grupamento amino
Fosfatase Alcalina Aminotransferases GGT Amilase

Maiores concentraes: Prstata Fgado Medula ssea Eritrcitos Plaquetas. Cncer de prstata (PSA) metstases (ACP) met Frao no-prosttica: Frao n prost fisiologicamente elevada nas crianas em fase crian
de crescimento; patologicamente aumentada em condies em condies que existe um hipermetabolismo sseo

TGP
Lipase CK LDH

TGO

*medicina forense

Fosfatase Alcalina
Fosfatase cida Fosfatase Alcalina Aminotransferases GGT Amilase Lipase CK LDH Fosfatase cida

Aminotransferases
(TGO e TGP) TGO Transaminase glutmico-oxalactica glutmicoou Aspartato aminotransferase (AST) TGP Transaminase glutmico-pirvica ou glutmicoAlanina aminotransferase (ALT) Maiores concentraes:
Fgado
Fosfatase Alcalina Aminotransferases GGT Amilase

Envolvida no transporte de lipdios no intestino e em processos de calcificao ssea.

Maiores concentraes: Tbulos renais Epitlio intestinal (avaliar em jejum) Tecido sseo (osteoblastos) Fgado Placenta

Lipase CK LDH

Miocrdio

Menor expresso: Rins, musculo esqueltico e pulmes

Aminotransferases
Fosfatase cida Fosfatase Alcalina Aminotransferases GGT Amilase Lipase CK LDH

(TGO e TGP) TGO citoplasmtica e mitocondrial isoenzima mitocondrial no plasma em leses mais profundas

(-glutamil transferase) transferase)

Fosfatase cida Fosfatase Alcalina Aminotransferases GGT Amilase Lipase

GGT

Aumento concomitante com aminotransferases e fosfatase alcalina em hepatopatias e doenas biliares. Mais especfica para hepatopatias alcolicas. alcolicas.
(cirrose alcolica)

TGP citoplasmtica principalmente fgado elevao imediata marcador mais sensvel de funo heptica

CK LDH

Elevada em alcolatras, mesmo sem alcolatras, hepatopatia. Relacionada obesidade e ao uso de drogas como analgsicos, anticonvulsivantes, quimioterpicos e contraceptivos orais. orais.

Aminotransferases
Fosfatase cida Fosfatase Alcalina Aminotransferases GGT Amilase Lipase CK LDH

Amilase
Fosfatase cida Fosfatase Alcalina Aminotransferases GGT Amilase Lipase CK LDH

(TGO e TGP)
TGO se eleva nas primeiras 12 h aps um IAM, obtendo pico em 24h. TGP se eleva se houver dano heptico secundrio ao IAM.
(IAM)

amilase

(amilase pancretica)

Ambas se elevam antes mesmo dos sintomas clnicos em doenas hepticas associadas a necrose (hepatite viral).

Catalisa a hidrlise da amilose, amilose, amilopectina e glicognio

(hepatite viral)

Fosfatase cida Fosfatase Alcalina Aminotransferases GGT Amilase Lipase CK LDH

(-glutamil transferase) transferase)

Participa do transporte de Aa atravs da membrana celular. Maiores concentraes: tbulo proximal renal fgado pncreas intestino
3 4
(Ciclo do -glutamil)

GGT

Amilase
Fosfatase cida Fosfatase Alcalina Aminotransferases GGT Amilase Lipase CK LDH

Presente normalmente no sangue e urina Origem pancretica e de glndulas salivares Utilidade clnica: diagnstico das doenas do pncreas e na investigao da funo pancretica Causas no pancreticas da elevao dos n pancre elevao nveis de amilase incluem parotidite, apendicite aguda, aneurisma dissecante de aorta, traumas abdominais

Amilase
Fosfatase cida Fosfatase Alcalina Aminotransferases GGT Amilase Lipase CK LDH Fosfatase cida Fosfatase Alcalina Aminotransferases GGT

Lipase x Amilase
Diagnstico diferencial:
- Pancreatite aguda: amilase normal x lipase elevada
(20% dos casos)

Pancreatite aguda 20% dos casos sem alteraes da amilase dosar lipase Carcinoma pancretico s eleva os pancre s nveis da enzima se houver obstruo do obstruo ducto pancretico pancre

Amilase Lipase CK LDH

- Parotidite aguda: amilase elevada x lipase normal

Lipase
Fosfatase cida Fosfatase Alcalina Aminotransferases GGT Amilase Lipase CK LDH Fosfatase cida

CK
(creatina quinase) quinase)
Fosfatase Alcalina Aminotransferases GGT Amilase Lipase CK LDH

Enzima digestiva, principalmente pancretica, que atua na hidlose de TAG

Regula o metabolismo intracelular dos tecidos contrteis, atravs da fosforilao contr atrav fosforilao da creatina pelo ATP.

Lipase
Fosfatase cida Fosfatase Alcalina Aminotransferases GGT Amilase Lipase CK LDH

CK
(creatina quinase) quinase)
Fosfatase cida Fosfatase Alcalina Aminotransferases

Essencial para diagnstico de patologias pancreticas Seu nvel se eleva concomitantemente amilase, permanecendo por mais tempo Seu aumento no se relaciona gravidade, mas sim a maior certeza diagnstica Existem tambm as lipases lingual e gstrica, as quais no possuem importncia diagnstica.

GGT Amilase Lipase CK LDH

Est principalmente: na musculatura estriada (CK-3) (CK no tecido cardaco (CK-2 e 3) (CK no crebro (CK-1) (CK CK-3 presente normalmente no plasma CK CK-1 no soro indica AVC CK Presena de CK-2 indica IAM ( 1 a aparecer) CK-

CK
(creatina quinase) quinase)
Fosfatase cida Fosfatase Alcalina Aminotransferases GGT Amilase Lipase CK LDH Fosfatase cida

CK
(creatina quinase) quinase)
Fosfatase Alcalina Aminotransferases GGT Amilase Lipase CK LDH

Msculo esqueltico: Distrofia Muscular de Duchenne

Tireide: Hipotireoidismo de CK-3 CK Hipertireoidismo aumento principalmente diminui CK

* A faixa de referncia para a CK total bastante ampla, variando com idade, estatura, atividade fsica e volume da massa muscular.

Elevada tambm no exerccio extenuante, aps injees intramusculares e aps traumas musculares

CK
(creatina quinase) quinase)
Fosfatase cida Fosfatase Alcalina Aminotransferases GGT Amilase Lipase CK LDH Fosfatase cida

LDH
(lactato desidrogenase) desidrogenase)
Catalisa a oxidao reversvel do lactato a piruvato
Fosfatase Alcalina Aminotransferases GGT Amilase

Tecido cardaco: Dosagem de CK total e CK-2 no IAM CK-

Essas duas enzimas se elevam tambm em episdios de angina pectoris, taquicardia, pectoris, miocardites, ICC e aps angioplastias

Lipase CK LDH

CK
(creatina quinase) quinase)
Fosfatase cida Fosfatase Alcalina Aminotransferases GGT Amilase Lipase CK LDH Fosfatase cida Fosfatase Alcalina Aminotransferases GGT Amilase Lipase CK LDH

LDH
(lactato desidrogenase) desidrogenase)
Maiores concentraes: Miocrdio Rim Fgado Hemcias Msculo esqueltico

LDH
Fosfatase cida Fosfatase Alcalina
LDH 1

Enzimas do IAM
CK - 2

(lactato desidrogenase) desidrogenase)

Aminotransferases GGT Amilase Lipase CK LDH

LDH 2 LDH 3 LDH 4 LDH 5

TGO (12h)

Possui 5 isoformas, com diferentes isoformas, distribuies nos tecidos

LDH

Incio do Infarto

LDH
Fosfatase cida Fosfatase Alcalina Aminotransferases GGT Amilase Lipase CK LDH

(lactato desidrogenase) desidrogenase)

Seus valores encontram-se elevados encontramem todas as situaes em que ocorre grande destruio celular
Ex.: anemia hemoltica, infarto agudo do miocrdio, infarto miocrdio, pulmonar, doenas musculares, leses hepticas, neoplasias primrias ou secundrias (metastsicas), metastsicas), ( hepatites. hepatites.

Referncias Bibliogrficas
Burtis, Carl A. / Ashwood, Edward R.. Tietz Fundamentals of Clinical Burtis, Ashwood, Chemistry. 4.ed. 1996. W.B. Saunders Company. Chemistry. Company.

Gaw, Allan. Bioqumica Clnica. 2. ed. 2001. Guanabara Koogan. Koogan. Gaw,
Champe, Pamela C. / Harvey, Richard A.. Bioqumica Ilustrada. 2.ed. 1996. Champe, Harvey, Artmed. Artmed. Porto, Celmo C.. Semiologia Mdica. 5.ed. 2005. Guanabara Koogan. Koogan. Henry, John Bernard. Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods. 19.ed. 1996. W.B. Saunders Company Methods. Robbins & Cortan. Phatologic Bases of Disease. 7.ed. 2004. Elsevier. Cortan. Disease. Elsevier. http://bioquimica.fffcmpa.tche.br http://bioquimica.fffcmpa.tche. http://genetica.fffcmpa.tche.br http://www.univie.ac.at/cga/courses/BE513/EKG/Default.htm (universidade http://www.univie.ac.at/cga/courses/BE513/EKG/Default. de Vienna - infarto do miocrdio) http://www.linus-geisler.de/im17/im2_382.html (Prof. Dr. med. Linus Geisler http://www.linus- geisler.de/im17/im2_382.html med. - Alemanha)

LDH
Fosfatase cida Fosfatase Alcalina Aminotransferases GGT Amilase Lipase CK LDH

(lactato desidrogenase) desidrogenase)

Padres de densitometria das isoenzimas LDH no soro normal e em condies patolgicas * A atividade srica total da LDH tambm se encontra aumentada nesses pacientes.

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