ANALTICA V 2S 2012

Aula 4: 10-12-12 ESPECTROSCOPIA Espectrofotometria no UVUV-Vis - Parte I

Prof. Rafael Sousa Departamento de Qumica - ICE rafael.arromba@ufjf.edu.br

Notas de aula: www.ufjf.br/baccan

Terminologias

(IUPAC, Compendium of Chemical Terminology, Gold Book, 2012)

ESPECTROFOTOMETRIA

ESPECTROSCOPIA

ESPECTROMETRIA

ESPECTROFOTOMETRIA no UV-Vis
ABSORO e EMISSO MOLECULAR

Plano de aula: aula: - Definio de espectrofotometria - Aspectos conceituais da ABSORO MOLECULAR - Medidas de absoro e anlises quantitativas - Instrumentos para anlises espectrofotomtricas - Aspectos prticos - Luminescncia (no ser estudado) Fluorescncia e Fosforescncia

Bibliografia recomendada
Anlise Instrumental F Cienfuegos, D Vaitsman; 2000 Vogel - Anlise Qumica Quantitativa GH Jeffrey e col., 6a ed., Guanabara Koogan, Rio de Janeiro, 2002 Anlise Qumica Quantitativa D. Harris; 7a ed., 2008 Principles of Instrumental Analysis Analysis DA Skoog, FL Holler, TA Nieman; 5th ed., 1998 Tutoriais dos fabricantes de espectrofotmetros Fundamentals of Analytical Chemistry DA Skoog, DM West, FL Holler; 5th ed., 1998

Espectrofotometria - Introduo

LUZ
Anlise qumica (mtodos espectroscpios)

MATRIA

Diferentes substncias interagem de forma diferente com a RADIAO ELETROMAGNTICA

Espectrofotometria - Introduo

Espectro obtido para o -caroteno

Espectro obtido para Ag

coloidal

Possvel definio para espectrofotometria metria: : Medida da luz que absorvida ou emitida por uma espcie qumica

Espectrofotometria - Introduo
Aplicaes: Aplicaes : ANALITOS ORGNICOS Alguns exemplos: - Compostos nitrogenados - Frmacos ( (c c. . acetil saliclico saliclico) ) - Fenis - Gorduras (colesterol) ANALITOS INORGNICOS Alguns exemplos: - ons como fosfato, nitrato e sulfato - Amnia - Elementos metlicos em geral, na forma de complexo

Entendendo o contexto O espectro eletromagntico LUZ RADIAO !

(nm)

luz visvel + outras frequencias

FORMAS DE ENERGIA

Aspecto ondulatrio da radiao eletromagntica

Relao entre comprimentos de onda e energia

Ondas com diferentes comprimentos de onda ( )

diferentes cores (Vis)

Anlises instrumentais: medidas de fraes especficas de luz (visvel ou no) MXIMOS DE ABSORO

Aspecto ondulatrio da radiao eletromagntica Relao entre comprimentos de onda () e energia (E) Modelo matemtico h= constante de Planck (6,63 10-34 Js)

hc E=h=

c= veloc. luz no vcuo (2,99 108 ms-1)

E inversamente proporcional ao

Na espectrofotometria os mximos de absoro so a principal diferena que se observa no espectro de substncias diferentes:
fenmeno menos energtico

Espectro obtido para o -caroteno

Espectro obtido para Ag

coloidal

O que faz a absoro da luz ser diferente ?

So os Grupos cromforos !
As substncias absorverem radiao por causa dos Grupos Cromforos So os grupos funcionais com absoro caracterstica na regio do ultraultra -violeta ou do visvel Ex: Ex: Carboxila ((- COOH): 200 210 nm

Absorve em vrios comprimentos de onda diferentes (vrios grupos funcionais)

As substncias absorverem radiao por causa dos Grupos Cromforos

Outros grupos cromforos: Carboxila ((- COOH): 200 210 nm Aldedo ((-CHO): 210; 280 300 Amino (-NH2): 195 Haletos (-Br: Br: 208) Dissulfeto (-S-S-): 194; 255 Ester ((-COOR): 205 ter ((-O-): 185 Nitro ((-NO2): 210 Nitroso ((-NO): 302 Tiocarbonila (=C=S(=C=S-): 205 Tioeter (-S-): 194; 215 Tiol ((-SH): 195

Substncias diferentes Diferentes grupos funcionais Eltrons: transies eletrnicas

As substncias absorverem radiao por causa dos Grupos Cromforos

Cada transio eletrnica vem acompanhada de uma transio rotacional e vibracional Espectros na forma de banda perfil depende do meio

Nveis de energia vibracional

Nveis de energia eletrnicos

As substncias absorverem radiao por causa dos Grupos Cromforos Processos de absoro da radiao envolvem:
Transies eletrnicas (UV (UV-Vis Vis) ) Transies vibracionais

Envolvem diferenas energticas menores Cada nvel de ENERGIA VIBRACIONAL: Subnveis de ENERGIA ROTACIONAL

Envolvem diferenas energticas ainda menores

ESPECTROS de substncias de tipos diferentes tambm tem perfis diferentes

EspectroMETRIA ATMICA (vapor)

EspectroFOTOMETRIA MOLECULAR (vapor ou soluo)

PARA CASA C1 - Explicar porque os espectros abaixo apresentam perfis diferentes,

considerando que os espectros de absoro moleculares so geralmente bandas e no picos estreitos. estreitos.

Como MEDIR a absoro da luz NO LABORATRIO ?

PodePode -se usar faixas especficas do espectro !

O processo de absoro da luz no laboratrio

1 etapa: excitao eletrnica da molcula M M + hv M*

2 etapa:

relaxao
M* M* M* M + calor M + M (fotodecomposio fotodecomposio) )

hv M + hv

(luminescncia)

Medida de absoro e anlise quantitativa

Medidas de absoro (A):

- Obtidas a partir de medidas de transmitncia (T) - Quanto menor a transmitncia, maior a absorbncia

A= - log T= + log P0/P

A absorbncia aumenta com a concentrao da espcie absorvedora - depende da substncia (absortividade molar) - depende do espao fsico ocupado pela amostra (caminho ptico)

Outra caracterstica dos processos de absoro na regio do visvel

A cor de uma espcie complementar quela que ela absorve:

Soluo verdeverde-amarelada absorve violeta amarela violetavioleta -azul laranja azul vermelha azulazul -verde prpura verde violeta verdeverde -amarelo violetavioleta -azulado amarelo azul laranja azulazul -esverdeado vermelho verde prpura

A regio que contem o de mxima absoro de uma espcie de interesse pode ser prevista se a soluo da amostra for colorida

Medida de absoro e anlise quantitativa

Representao grfica para solues de KMnO4 em = 545 nm e um caminho ptico de 1 cm. a) Em %Transmitncia versus c

b) Em Absorbncia versus c

Relao entre absoro e concentrao = ANLISE QUMICA (Lei de Lambert Lambert-Beer Beer) )

Johann Heinrich Lambert (1728 1777 1777) ) observou que a intensidade da luz transmitida por um meio absorvedor era proporcional espessura do meio pelo qual a luz passava

August Beer (1825 1863 1863) ) observou que a intensidade da luz transmitida por um meio absorvedor era proporcional concentrao da espcie absorvedora

Relao entre absoro e concentrao = ANLISE QUMICA (Lei de LambertLambert-Beer Beer) )

A

A=abC
a= absortividade molar ( (: L mol -1cm-1) b= caminho ptico (cm (cm) ) C= concentrao em (mol (mol L-1)
=ab Concentrao

Relao linear entre A e C se as medidas so feitas em

condio de caminho ptico constante

APLICAES DA equao da reta: A = C - Concentraes desconhecidas - OU determinar o valor de a para se obter o de

Determinao da Concentrao
1) PREPARAR AMOSTRA SOLUO DE AMOSTRA

Geralmente a amostra analisada na forma de uma soluo aquosa Ex: Ex: Determinao de Fe3+ em tecido animal

amostra laboratorial

preparo (ou tratamento) da amostra

soluo de amostra

Meio adequado (compatvel) com a tcnica a ser utilizada

Determinao da Concentrao

2) PREPARAR PADRES DE CALIBRAO

TCNICA INSTRUMENTAL

PADRES: Solues semelhante soluo de amostra com concentrao conhecida da espcie de interesse (ANALITO)

3) DETERMINAR a concentrao da SOLUO de AMOSTRA a ser analisada compatvel com a faixa de trabalho do equipamento: - No pode estar muito concentrada - No pode estar muito diluda

Determinao da Concentrao
4) Conhecer o limite de deteco (LOD): Menor quantidade que pode ser detectada com razovel certeza para um dado procedimento analtico (IUPAC)

LOD = C branco + 3xS LOQ = C branco + 10xS

LOD = limite de deteco

C branco ~

3xS

C branco C branco

C branco ~

10xS

LOQ = limite de quantificao (o INMETRO recomenda usar o primeiro ponto da curva analtica de calibrao) C branco = concentrao do branco S branco = desvio padro do branco (n= 10 no mnimo)

Bibliografia utilizada nos slides

Principles of Instrumental Analysis Analysis DA Skoog, FL Holler, TA Nieman; 5th ed., 1998 Anlise Instrumental F Cienfuegos, D Vaitsman; 2000 Vogel - Anlise Qumica Quantitativa GH Jeffrey e col., 6a ed., Guanabara Koogan, Rio de Janeiro, 2002 Anlise Qumica Quantitativa D. Harris; 7a ed., 2008 Tutoriais de fabricantes de espectrofotmetros Slides didticos fornecidos pelo Prof. Dr. Jlio C. J. Silva (UFJF) Figuras da Apostila didtica da disciplina QA 581 do IQ - Unicamp