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SOLUES Acrilamida MIX 30% Acrilamida Bis-acrilamida H2O q.s.

p Amino-etil-Carbazol (AEC) soluo stock AEC N, N dimetilformamida Comassie gel stain-corante Comassie blue R-250 Etanol H2O destilada cido actico glacial Lquido de Diluio para IPX NaCl Na2HPO4.2H2O NaH2PO4.H2O TWEEN 80 H2O destilada q.s.p. Ajustar pH Lquido de Lavagem para ELISA NaCl Na2HPO4.2H2O NaH2PO4.H2O TWEEN 20 H2O destilada q.s.p. Lquido de Fixao para IPX PBS 1X Acetona Meio Mnimo Essencial de EAGLE (E MEM) MEM (GIBCO) Trishidroximitelaminometano (Tris) 2,4% pH 7,0 H2O deionizada q.s.p. Ajustar pH OPD OPD Tampo Citrato Fosfato Observao: acondicionar em local fresco e escuro 0,34g 100ml 9,6g 50ml 1000ml 7,2 800ml 200ml 8,5g 1,55g 0,23g 5ml 1000ml 29,5g 1,55g 0,23g 5,0ml 1000ml 6,4 1g 450ml 450ml 100ml 0,1g 15ml 29g 1g 100ml

PBS 10X NaCl Na2HPO4.2H2O NaH2PO4.H2O H2O destilada q.s.p. Ajustar pH PBS-Tween 20 PBS 10X H2O destilada TWEEN 20 PBS-Tween 80 PBS 10X H2O destilada TWEEN 80 RPMI 1640 (SIGMA) RPMI 1640 Glutamina Piruvato de Sdio (ou sem) Dextrose Hepes sal sdio Bicarbonato de sdio Gentamicina H2O deionizada q.s.p. Ajustar pH Soluo Cromgena de Carbazol 3-amino, 9-etilcarbazole (AEC) 0,67% Perxido de Hidrognio 100 vol. Tampo Acetato de sdio 0,05M pH 5,0 Soluo de Giemsa soluo concentrada Giemsa em p 0,3g Glicerina 25ml Metanol 25ml Obs.: Para o uso, diluir esta soluo a 1:10 em gua destilada Substrato Amino Etil Carbazol soluo concentrada 3 amino 9 etil carbazol Dimetil formamida Obs.: Armazenar em local escuro Substrato p/ IPX (Amino-etil-Carbazol) Soluo estoque Tampo acetato 300ul 5ml 0,1g 15ml 300ul 10ul 5ml 10,0g 0,3g 0,11g 6,0g 2,3g 2,0g 50ug/ml 1000ml 7,2 a 7,4 100ml 900ml 5ml 100ml 900ml 5ml 85,0g 15,5g 2,3g 1000ml 7,2 - 7,4

H2O2 Substrato para ELISA (OPD)

10ul

OPD 34mg Tampo Citrato Fosfato 100ml Obs.: Guardar em local fresco e escuro. Obs.: Adicionar 5ul de H2O2 para cada 5ml do substrato na hora do uso. Tampo Acetato para IPX (0,05M) cido actico glacial Acetato de sdio H2O Ajustar pH Tampo Acetato (p/ separar IgG c/ c. Caprlico) cido actico glacial Acetato de sdio H2O destilada q.s.p. Tampo Barbital Soluo 1 CaCl2.2H2O MgCl.H2O H2O bidestilada Soluo 2 NaCl NaC8H11N2O3 Sol. 1 H2O bidestilada Ajustar pH 7,6 com HCl 1N, diluir1/4 para uso Tampo Bloqueador (TB) TWEEN 20 Leite em p PBS Tampo Carbonato/Bicarbonato (ELISA) Na2CO3 NaHCO3 H2O destilada q.s.p. Ajustar pH Tampo Citrato/Fosfato cido Ctrico Na2HPO4 H2O destilada q.s,p. 10,2g 14,6g 1000ml 1,59g 2,39g 1000ml 9,6 0,5ml 5g 100ml 3,6ml 8,16g 1000ml 0,89ml 2,89g 100ml 5,0

4,41g 20,33g 1000ml

83,0g 10,19g 5ml 1000ml

5,0 Tampo de Amostra (PAGE) Tris (HCl) H3PO4 1M Sacarose SDS 10% Uria Vermelho Fenol B- mercaptoetanol H2O bidestilada q.s.p. Tampo de Transferncia Tampo Carbonato/Bicarbonato Metanol Ajustar pH Tampo no-Redutor SDS 1% Glicerol Azul de Bromofenol 1% Fosfato de sdio 2H2O Tampo Tris-Glicina 10X (PAGE) Tris Glicina SDS H2O destilada q.s.p. PH ajustado para 8,3 com HCl 1N Tampo para Gel Filtrao NaCl Cloreto de potssio Na2HPO4 Potassium Dihidrogen phosphate H2O destilada q.s.p. Tampo Redutor Tris HCl 1M pH6,8 SDS 10% B Mercapto Glicerina Azul de bromofenol 1% H2O destilada q.s.p. Tampo Salina Fosfato (PBS) pH 7,4 NaCl KCl Na2HPO4.12H2O 8,0g 0,2g 2,9g 2,5ml 3,0ml 1,0ml 2,0ml 100ul 10,0ml 30,3g 144,2g 10,0g 1000ml 1ml 1ml 100ul 0,178g 13mM 20% 9,9 0,1425g 0,64ml 2,0g 2ml 2,4g 0,2g 0,2ml 10ml

16,0g 0,4g 2,3g 0,4g 2000ml

KH2PO4 H2O bidestilada Tripsina Versene Tripsina NaCl KCl EDTA NaHCO3 Vermelho de Fenol H2O deionizada q.s.p. Ajustar pH Fermelho Fenol (1%) Vermelho Fenol NaOH 0,05N H2O q.s.p.

0,2g 1000ml

0,5g 8,0g 0,4g 0,2g 10,0g 1,2ml 1000ml 7,8

1g 15ml 100ml