ENZIMAS

CONCEITOS GERAIS E FUNES

As enzimas so protenas especializadas na catlise de reaes biolgicas. Elas esto entre
as biomol culas mais notveis devi do a sua extraordinria especi ficidade e poder cataltico, que
so mui to superiores aos dos catalisadores produzidos pelo homem. Praticamente todas as
reaes que caracterizam o metabolismo celular so catalisadas por enzimas.
Como catalisadores celulares extremamente poderosos, as enzimas aceleram a velocidade
de uma reao, sem no entanto participar dela como reagente ou produto.
As enzimas atuam ainda como reguladoras deste conj unto complexo de reaes.
As enzimas so, portanto, consideradas as unidades funcionais do metabolismo celul ar.


NOMENCLATURA DAS ENZIMAS

Existem 3 mtodos para nomenclatura enzimtica:
- Nome Recomendado: Mais curto e util izado no di a a dia de quem trabalha com enzimas;
Utili za o sufixo "ase" para caracterizar a enzima. Exs: Urease, Hexoquinase, Peptidase, etc.
- Nome Sistemtico: Mais complexo, nos d informaes precisas sobre a funo
metablica da enzima. Ex: ATP-Glicose-Fosfo-Transferase
- Nome Usual : Consagrados pel o uso; Exs: Tripsina, Pepsina, Ptialina.


CLASSIFICAO DAS ENZIMAS

As enzimas podem ser classificadas de acordo com vrios critri os. O mais importante foi
estabelecido pel a Unio Internacional de Bioqumica (IUB), e estabelece 6 classes:
- Oxidorredutases: So enzimas que catalisam reaes de transferncia de eltrons, ou seja:
reaes de oxi-reduo. So as Desidrogenases e as Oxidases.
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Se uma molcula se reduz, tem que haver outra que se oxide.
- Transferases : Enzimas que catalisam reaes de transferncia de grupamentos funci onais
como grupos amina, fosfato, aci l, carboxil, etc. Como exemplo temos as Quinases e as
Transaminases.
- Hidrolases : Catalisam reaes de hidrlise de ligao covalente. Ex: As peptidades.
- Liases: Catalisam a quebra de ligaes covalentes e a remoo de molculas de gua,
amnia e gs carbnico. As Dehidratases e as Descarboxilases so bons exemplos.
- Isomerases: Catali sam reaes de interconverso entre ismeros pticos ou geomtricos.
As Epimerases so exemplos.
- Ligases: Catalisam reaes de formao e novas molculas a partir da ligao entre duas
j existentes, sempre s custas de energia (ATP). So as Sintetases.


PROPRIEDADES DAS ENZIMAS

So catalisadores biolgicos extremamente eficientes e aceleram em mdia 10
9
a 10
12
vezes
a velocidade da reao, transformando de 100 a 1000 molculas de substrato em produto por
minuto de reao.
Atuam em concentraes muito baixas e em condies suaves de temperatura e pH.
Possuem todas as caractersticas das protenas. Podem ter sua atividade regulada. Esto
quase sempre dentro da clula, e compartimentalizadas.
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COFATORES ENZIMTICOS E COENZIMAS

Cofatores so pequenas molculas orgnicas ou inorgnicas que podem ser necessrias
para a funo de uma enzima. Estes cofatores no esto ligados permanentemente mol cula da
enzima mas, na ausnci a del es, a enzima inativa.
A frao protica de uma enzima, na ausncia do seu cofator, chamada de apoenzi ma.
Enzima + Cofator, chamamos de holoenzima.

Coenzimas so compostos orgnicos, quase sempre derivados de vitaminas, que atuam em
conjunto com as enzimas. Podem atuar segundo 3 modelos:
- Ligando-se enzima com afinidade semelhante do substrato.
- Ligando-se covalentemente em local prximo ou no prprio sti o catalti co da apoenzima.
- Atuando de maneira intermedi ria aos dois extremos acima ci tados.


ESPECIFICIDADE SUBSTRATO \ ENZIMA: O STIO ATIVO

As enzimas so mui to especficas para os seus substratos. Esta especificidade pode ser
relativa a apenas um substrato ou a vrios substratos ao mesmo tempo.
Esta especifici dade se deve existncia, na superfcie da enzima de um local denominado
stio de ligao do substrato. O stio de l igao do substrato de uma enzima dado por um arranjo
tridi mensional especial dos aminocidos de uma determinada regio da molcula, geralmente
complementar molcul a do substrato, e ideal espaci al e eletricamente para a ligao do mesmo.
O stio de ligao do substrato capaz de reconhecer inclusive ismeros ticos " D" e " L" de um
mesmo composto. Este stio pode conter um segundo stio, chamado stio cataltico ou stio ativo,
ou estar prximo dele; neste stio ativo que ocorre a reao enzimtica.
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esquema de la
accin de una
enzima
Composto que transformado por uma enzima que se une a uma zona ativa, onde se
produz ima catlise, que no exempl o conduz a uma formao de produtos.
centro activo de una
enzima
A zona sombreada so os aminocidos desta enzima (protena) que configuram, neste
caso, o centro ativo da enzima.

Alguns modelos procuram explicar a especificidade substrato/enzima:
- Modelo Chave/Fechadura que prev um encaixe perfeito do substrato no stio de ligao,
que seria rgido como uma fechadura. No exemplo da figura abaixo, uma determinada regio da
protena - o mdulo SH2 - liga-se tirosina fosfatada, que se adapta ao sti o ativo da enzima tal
como uma chave faz a sua fechadura.




- Modelo do Ajuste Induzido que prev um stio de ligao no totalmente pr-formado,
mas si m moldvel molcula do substrato; a enzima se ajustaria molcula do substrato na sua
presena.
- Evidncias experimentais sugerem um terceiro modelo que combina o ajuste i nduzido a
uma " toro" da molcula do substrato, que o " ativaria" e o prepararia para a sua transformao
em produto.
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MECANISMO GERAL DE CATLISE

As enzimas aceleram a veloci dade de uma reao por diminuir a energia livre de ativao da
mesma, sem alterar a termodinmi ca da reao, ou sej a: A energia dos reagentes e produtos da
reao enzimti ca e de sua equival ente no enzimtica so idnticas.
Para se superar a energi a de ativao de uma reao, passa-se pela formao de um estado
i ntermedirio chamado " Estado de Transio", sempre um composto instvel e de alta energia,
representado por " Ts" , ligado com altssima afinidade ao stio catal tico. Nas reaes enzimticas,
este composto de transi o " Ts" no pode ser isolado ou mesmo considerado um intermedirio,
uma vez que no liberado para o meio de reao; sua formao ocorre no sti o cataltico da
enzima!! Como a afinidade do " Ts" ao stio catalti co muito maior que a afinidade do substrato
com o mesmo, a pequena quantidade de mol culas em "Ts" ser rapidamente converti da em
produto. Assim, todo o fator que leva a um aumento do nmero de molculas em "Ts" aumenta a
velocidade da reao.
So 4 os mecanismos principais atravs dos quais as enzimas aceleram uma reao,
aumentando a formao de molculas de substrato em " Ts" :
- Catli se cido-Base que ocorre com a participao de aminocidos com cadeias laterais
i onizveis, capazes de doar ou liberar prtons durante a catlise.
- Toro de Substrato, que depende da toro do substrato induzida pela l i gao do mesmo
com o stio de l igao da enzima, alcanando o estado de transio e estimulando sua converso
em produto.
- Catlise Covalente que resulta do ataque nucleoflico ou eletroflico de um radical do stio
catal tico sobre o substrato, ligando-o covalentemente enzima e induzi ndo a sua transformao
em produto. Envolve com freqncia a participao de coenzimas.
- Efeito de Diminuio da Entropia. As enzimas ajudam no posicionamento e na defi nio
da estequiometria correta da reao, facilitando os mecanismos anteriores.


CINTICA ENZIMTICA

a parte da enzimologia que estuda a velocidade das reaes enzi mticas, e os atores que
i nfluenciam nesta velocidade. A cinti ca de uma enzima estudada avaliando-se a quanti dade de
produto formado ou a quantidade de substrato consumido por unidade de tempo de reao.
Uma reao enzimtica pode ser expressa pela seguinte equao:
E + S <==> [ES] ==> E + P
O complexo enzima/substrato (ES) tem uma energia de ativao ligei ramente menor que a
do substrato isol ado, e a sua formao l eva ao apareci mento do estado de transio " Ts".
A formao de "P" a partir de ES a etapa limitante da velocidade da reao.
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A vel ocidade de uma reao enzimti ca depende das concentraes de enzima e de
substrato.

Equao de Michaelis-Menten:
Michaelis e Menten foram 2 pesquisadoras que propuseram o modelo acima ci tado como
modelo de reao enzimti ca para apenas um substrato. A partir deste modelo, estas
pesquisadoras criaram uma equao, que nos permite demonstrar como a velocidade de uma
reao varia com a variao da concentrao do substrato. Esta equao pode ser expressa
graficamente, e representa o efeito da concentrao de substrato sobre a velocidade de reao
enzimtica.
O Km de um substrato para uma enzima especfica caracterstico, e nos fornece um
parmetro de especifici dade deste substrato em relao enzima. Quanto menor o Km, mai or a
especifici dade, e vice-versa.


FATORES EXTERNOS QUE INFLUENCIAM NA VELOCIDADE DE UMA REAO ENZIMTICA

So eles:
- Temperatura: Quanto maior a temperatura, maior a velocidade da reao, at se atingir a
temperatura tima; a partir dela, a atividade volta a diminuir, por desnaturao da molcula.

- pH: Idem temperatura; existe um pH timo, onde a distri buio de cargas eltri cas da
molcula da enzima e, em especial do stio cataltico, ideal para a catl ise.


INIBIO ENZIMTICA

Os inibidores enzimticos so compostos que podem diminuir a atividade de uma enzima.
A i nibio enzimtica pode ser reversvel ou irreversvel;
Existem 2 tipos de inibio enzimtica reversvel:
- Inibio Enzimtica Reversvel Competitiva:
Quando o inibi dor se l iga reversivelmente ao mesmo stio de ligao do substrato;
O efeito revertido aumentando-se a concentrao de substrato
Este tipo de inibio depende das concentraes de substrato e de inibidor.
- Inibio Enzimtica Reversvel No-Competitiva:
Quando o ini bidor liga-se reversi velmente enzima em um stio prprio de ligao, podendo
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estar li gado mesma ao mesmo tempo que o substrato;
Este tipo de inibio depende apenas da concentrao do i nibidor.
Na ini bio enzimtica irreversvel, h modificao covalente e definitiva no stio de ligao
ou no sti o cataltico da enzima.


REGULAO ENZIMTICA

Algumas enzimas podem ter suas atividades reguladas, atuando assim como modul adoras
do metabolismo celular. Esta modulao essencial na coordenao dos i nmeros processos
metablicos pela clula.
Alm dos mecanismos j citados de modulao de atividade enzimtica - por variao da
concentrao do substrato, ou por inibio enzimtica, por exemplo - existem 2 modelos de
regulao enzimtica mais conhecidos:
- Modulao Alostrica
Ocorre nas enzimas que possuem um stio de modulao, ou alostrico, onde se l iga de
forma no-coval ente um modul ador alostri co que pode ser posi tivo (ativa a enzima) ou
negativo (inibe a enzima).
A l igao do modulador induz a modificaes conformacionais na estrutura espacial da
enzima, modificando a afinidade desta para com os seus substratos;
Um modelo muito comum de regulao alostrica a inibio por " feed-back" , onde o
prprio produto da reao atua como modulador da enzima que a catal isa.
- Modulao Covalente:
Ocorre quando h modificao covalente da mol cula da enzima, com converso entre
formas ativa/inativa.
O processo ocorre princi palmente por adio/remoo de grupamentos fosfato de resduos
especficos de serina.


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