BIOQUÍMICA

Enzimas

Prof. Me. Adem Nagibe dos Santos Geber Filho

 Introdução
— As enzimas são grandes proteínas complexas que agem como
catalisadoras em reações bioquímicas;

— Como catalisadores celulares extremamente eficientes, as enzimas

possuem a propriedade de acelerar a velocidade de uma reação, em
média 109 a 1012 vezes, transformando de 100 a 1000 moléculas de
substrato em produto por minuto de reação .

Enzimas = proteínas OBS: Enzima = Proteína ▲ Proteína ≠ Enzima

Obs.:
Catalisadores: Ribozimas
velocidade;
energia
 CONCEITO

As enzimas são macromoléculas responsáveis pela catálise das

reações que ocorrem nos sistemas biológicos.

Catalisadores:
velocidade;
energia
 Nomenclatura

— Cada enzima recebe dois nomes:

1 – Nome curto e recomendado, conveniente para uso corriqueiro;
1.1 – Os nomes de enzimas mais frequentemente utilizadas têm
o sufixo “ase” adicionado ao nome do substrato da reação. Obs.: Tripsina e
pepsina.

Substrato ASE ENZIMA

OU

Modo de Ação ASE ENZIMA

 Nomenclatura
˜ Exemplos:
o Amido ASE Amilase
o Lipídio ASE Lipase
o Proteína ASE Protease
o Maltose ASE Maltase
o Lactose ASE Lactase
o RNA ASE Ribonuclease
o DNA ASE Desoxirribonuclease
o Desidrogena ASE Desidrogenase
o Descarboxila ASE Descarboxilase
 Nomenclatura

— Cada enzima recebe dois nomes:

2 – Nome mais completo e sistemático, utilizado quando a enzima precisa

ser identificada sem ambiguidades;
2.1 – São divididas em seis classes principais;
2.2 – O sufixo –ase é adicionado a uma descrição bastante
completa da reação química catalisada.

Catalisadores:
velocidade;
energia
 Nomenclatura

Oxirredutases
Classe 1 Desidrogenases
Oxidases

Transferases
Classe 2 Quinases
Transaminases

Hidrolases
Classe 3 Catalisadores:
Peptidases
velocidade;
energia
 Nomenclatura

Classe 4 Liases Dehidratases

Descarboxilases

Classe 5 Isomerases
Epimerases

Classe 6 Catalisadores:
Ligases Sintetases
velocidade;
energia
Nomenclatura

Catalisadores:
velocidade;
energia
 PROPRIEDADES DAS ENZIMAS
As enzimas são muito específicas para os seus substratos, esta
especificidade pode ser relativa a apenas um substrato ou a vários
substratos ao mesmo tempo. ESPECIFICIDADE.

As reações catalisadoras por enzimas são, em sua maioria,

altamente eficientes, ocorrendo de 103 ou 108 vezes mais rapidamente
EFICIENCIA CATALÍTICA.

Esta especificidade se deve à existência, em uma porção específica

da enzima de um local denominado SÍTIO DE LIGAÇÃO DO
SUBSTRATO.
Catalisadores:
Este sítio pode contervelocidade;
um segundo sítio, chamado SÍTIO
CATALÍTICO ou SÍTIO ATIVO, ou estar próximo dele; é neste sítio ativo
energia
que ocorre a reação enzimática. SÍTIO ATIVO.
 PROPRIEDADES DAS ENZIMAS
A) Sítios ativos - contém cadeias laterais de aminoácidos, as quais criam
uma superfície tridimensional complementar ao substrato;
Enzima-substrato (ES) enzima-produto (EP), o qual
subsequentemente se dissocia em enzima e produto.

Catalisadores:
velocidade;
energia
PROPRIEDADES DAS ENZIMAS

Catalisadores:
velocidade;
energia
PROPRIEDADES DAS ENZIMAS

Catalisadores:
velocidade;
energia
 Especificidade Enzimática

Modelo chave/fechadura

Prevê um encaixe
perfeito do substrato no
sítio de ligação.
 Especificidade Enzimática

Modelo do ajuste Induzido

Sítio de ligação não totalmente pré-formado, mais sim moldável a

molécula do substrato, a enzima se ajustaria a molécula do
substrato na sua presença.
 PROPRIEDADES DAS ENZIMAS
§ Algumas enzimas precisam de outras moléculas além da proteína para
sua atividade enzimática;

§ Holoenzima – se refere à enzima ativa com seu componente não

proteico; Apoenzima – enzima sem seu componente não
proteico, inativa.

§ Cofator – se esse grupo não proteico for um íons metálico,

Fe2+ ou Zn2+;
§ Coenzima - se esse grupo for uma molécula orgânica
pequena.
PROPRIEDADES DAS ENZIMAS
 PROPRIEDADES DAS ENZIMAS
Localização dentro da célula - Muitas
enzimas estão localizadas em organelas
específicas dentro da célula;

Serve para isolar o substrato ou o produto da

reação de outras reações competitivas.

Favorável para a reação e organiza as milhares de enzimas presentes

na célula em vias definidas.
 COMO FUNCIONAM AS ENZIMAS

§ O mecanismo da ação enzimática pode ser visualizado a partir de duas

perspectivas diferentes.

§ 1 – Alterações de energia que ocorrem durante a reação –

praticamente todas as reações têm uma barreira de energia separando
os reatantes dos produtos. Energia Livre.
§ Energia livre – é a diferença entre a energia, que ocorre
durante a formação do produto.

A T* B A = ESTADO INICIAL
T* = INTERMDIÁRIO DE ALTA ENERGIA
B = PRODUTO
 COMO FUNCIONAM AS ENZIMAS
Devido a grande energia livre
de ativação, as velocidades das
reações químicas não catalisadas
são frequentemente lentas.

Para moléculas reagirem,

devem conter energia suficiente
para superar a barreira de
energia do estado de transição.

A enzima permite que ocorra

rapidamente, oferecendo uma rota
alternativa, com menor energia livre de
ativação. Não altera a energia livre dos
reatantes ou dos produtos não alterando o
equilíbrio da reação. Acelera a velocidade
na qual o equilíbrio é atingido.
 COMO FUNCIONAM AS ENZIMAS

§ 2 – Química do sítio ativo – o sítio ativo emprega uma diversidade de

mecanismos químicos para facilitar a conversão do substrato em
produto.
 CINÉTICA ENZIMÁTICA

§ Designa a instancia da enzimologia que estuda a velocidade das reações

enzimáticas e os fatores que influenciam neste velocidade;

§ Cinética da enzima = quantidade de produto ou a quantidade de

substrato consumido por unidade de tempo de reação.

E + S <==> [ES] ==> E + P

 A equação de Michaelis & Menten
§ Michaelis e Menten propuseram o um modelo de reação enzimática para
apenas um substrato;
§ A partir deste modelo, estes pesquisadores criaram uma equação, que
nos permite demonstrar como a velocidade de uma reação varia com a
variação da concentração do substrato.
 A equação de Michaelis & Menten
§ Esta equação pode ser expressa graficamente e representa o efeito da
concentração de substrato sobre a velocidade de reação enzimática.

Platô
Velocidade da
catálise

Velocidade máxima de catálise.

concentração de
substrato
5 15 20

A velocidade de uma reação (v) é o número de moléculas de

substrato convertidas em produto por unidade de tempo.
FATORES QUE INFLUENCIAM NA VELOCIDADE
DA REAÇÃO ENZIMÁTICA
— pH específico:
FATORES QUE INFLUENCIAM NA VELOCIDADE
DA REAÇÃO ENZIMÁTICA
— Temperatura:
Altas temperaturas podem
desnaturar as enzimas.
 INIBIÇÃO ENZIMÁTICA
§ Inibidor – qualquer substancia que possa diminuir a velocidade das
reações catalisadas por enzimas;
§ Inibidores reversíveis – ligam-se as enzimas por ligações não
covalentes;

§ Inibidores irreversíveis – ligam-se as enzimas por ligações covalentes.

§ Os dois tipos mais comuns de inibição reversível são:

COMPETITIVA NÃO-COMPETITIVA
 INIBIÇÃO ENZIMÁTICA
Inibição reversível competitiva à Ocorre quando o inibidor se liga
reversivelmente ao mesmo sítio de ligação do substrato. O efeito é
revertido aumentando-se a concentração de substrato.
 INIBIÇÃO ENZIMÁTICA
Inibição enzimática reversível não-competitiva à O inibidor liga-se
reversivelmente à enzima em um sítio próprio de ligação, podendo estar
ligado à mesma ao mesmo tempo que o substrato. Este tipo de inibição
depende apenas da concentração do inibidor.
 INIBIÇÃO ENZIMÁTICA
Inibição enzimática irreversívelà na inibição enzimática irreversível, há
modificação covalente e definitiva no sítio de ligação ou no sítio
catalítico da enzima, de modo que o inibidor não se desliga do sítio
enzimático.

Substrato

Alteração conformacional sofrida no sítio enzimático

que não permite o desligamento do inibidor.
 Modulação Enzimática Alostérica

Enzimas alostéricas são aquelas que quando sofrem mudanças sutis em

uma determinada região podem desencadear alterações drásticas nas
propriedades de um sítio ativo distante;

A regulação alosterica ocorre nas enzimas que possuem um SÍTIO DE

MODULAÇÃO, ou ALOSTÉRICO, onde se liga de forma não-
covalente um modulador alostérico que pode ser positivo (ativa a
enzima) ou negativo (inibe a enzima);
 Sítio alostérico

Enzima
modulador
alostérico

Ligação não-covalente do modulador ao sítio

de modulação, ou alostérico.

Feedback A ligação do modulador induz a

Negativo modificações conformacionais na estrutura
espacial da enzima, modificando a afinidade
desta para com os seus substratos.

Produtos gerados podem inibir ou estimular a

primeira ou outras enzimas da cadeia alostérica
de regulação.
A
 Enzimas no diagnóstico clínico
q As enzimas plasmáticas podem ser classificadas em dois grupos
principais:

1- grupo relativamente pequeno de enzimas, que é seletivamente

secretado no plasma por certos tipos celulares. Ex.:, o fígado secreta os
zimogênios (precursores inativos) de enzimas envolvidas na coagulação
sanguínea;

2 - Segundo, um grande número de enzimas é liberado das células durante

a renovação celular normal.
 Enzimas no diagnóstico clínico
q Essas enzimas quase sempre atuam intracelularmente e não têm função
fisiológica no plasma;
q Em indivíduos saudáveis, o nível dessas enzimas é razoavelmente
constante e representa um estado de equilíbrio.
q A presença de atividade enzimática elevada no plasma pode indicar lesão
tecidual, que é acompanhada pela liberação aumentada de enzimas
intracelulares.
 Alterações dos níveis plasmáticos de
enzimas em doenças
q Algumas enzimas apresentam atividade relativamente alta em apenas alguns
tecidos. A presença de um aumento do nível dessas enzimas no plasma
reflete uma lesão do referido tecido.
• Ex.: Enzima alanina-aminotransferase (ALT) é abundante no fígado;

• Ex.: Os níveis plasmáticos de creatina-cinase (CK) e de lactato-desidrogenase

(LDH) são comumente determinados para o diagnóstico do infarto do
miocárdio.
1) O que são as enzimas? Qual sua principal função?
2) Explique a nomenclatura básica das enzimas.
3) Explique as características das enzimas, como: ESPECIFICIDADE,
EFICIENCIA CATALÍTICA E SÍTIO ATIVO.
4) Comente sobre os dois modelos da especificidade das enzimas.
5) Como as enzimas aumentam a velocidade das reações? Explique
graficamente.
6) Quais os principais fatores que influenciam na cinética enzimática?
Explique cada um. (pH, temperatura)
7) Faça a equação da reação enzimática e explique cada etapa.
8) Como as enzimas podem ser utilizadas no diagnóstico clínico?
Explique.