Enzimas:

Cinética e Regulação

Professora: Dra. Darlen Cardoso de Carvalho

darlen.c.carvalho@gmail.com
 Caracteríscas gerais das Enzimas

• Geralmente são proteínas (algumas são riboenzimas);

• Possuem todas as características das proteínas;
• Catalisadores das reações biológicas;
• Estão quase sempre dentro da célula, e
compartimentalizadas;
• Alto grau de especificidade por seus substratos;
• Funcionam em solução aquosa em condições ótimas de
temperatura e pH;
• Atuam em concentrações muito baixas;
• Podem ter sua concentração e atividade reguladas.
 Propriedades das Enzimas

➢ Eficiência catalítica;
➢ Alto grau de especificidade;
➢ Podem ser reguladas (Regulação);
 Eficiência catalítica

• São catalizadores capazes

de aumentar enormemente
a velocidade de reações
químicas específicas sem
serem consumidos no
processo.
• Reduzem energia de
ativação.
 Especificidade
• Sítio Ativo: Região específica, em forma de fenda ou
bolso, onde cadeias laterais de aminoácidos criam um
ambiente tridimensional complementar ao substrato.
 Cinética de Reações químicas

• Estudo da velocidade da reação enzimática

e como ela se altera em função de
diferentes parâmetros.

E + S ⇌ ES E + P
 Cinética de Reações químicas

• Teoria geral da ação das enzimas (Michaelis &

Menten) - 1913
 Cinética de Reações químicas
1 2
E + S ⇌ ES E+P
1. Inicialmente a enzima (E) se combina reversivelmente
com o substrato (S) para formar o complexo ES -Um
passo relativamente rápido;

2. A seguir, o complexo ES se rompe liberando o produto

(P) e regenerando a enzima livre (E) - Uma etapa lenta.
Cinética de Reações químicas
1 2
E + S ⇌ ES E+P
 Cinética de Reações químicas

• Fatores que afetam a velocidade da reação

enzimática:

➢ Concentração do Substrato;
➢ Temperatura;
➢ pH.
 Concentração do Substrato

• Concentração de substrato [S]: Afeta a

velocidade da reação
• Efeito de [S]: Varia durante o curso de uma
reação: S P;
• Velocidade inicial (V0): Velocidade aumenta de
forma linear a [S];
• Velocidade máxima (Vmáx.): Sítios ativos de todas
as moléculas de enzima presentes na amostra estão
totalmente ocupados por substrato.
Concentração do Substrato

E + S ⇌ ES E+P
- Km (constante de Michaelis): É
concentração do substrato na qual a
enzima age na metade da velocidade
máxima (Vmáx/2)

- V0= Vmáx [S]

Km + [S]
Concentração do Substrato
Concentração do Substrato
 Concentração do Substrato: Saturação

Vmáx = Todas as moléculas de E estiverem na forma

ES → enzima “saturada”
 Temperatura

•  T →  velocidade de reação:  energia

cinética;
• T ótima de funcionamento;
• T muito elevadas: Desnaturação da enzima:
- Rompidas as pontes de hidrogênio → alterações estruturas
= nova conformação;
- T desnaturação → pouco acima da T ótima.
Temperatura: Desnaturação
 pH

• Valor de pH ótimo = Atividade máxima;

• Velocidade da reação:  pH afasta do
ótimo;

• O pH pode levar à desnaturação proteica.

- Alterar a conformação geral da proteína.
- Alterar o padrão de cargas de um
determinado sítio ativo.
pH
 Regulação
• A concentração e a atividade da enzima podem ser
reguladas.
• Fatores que afetam a concentração:
- Regulação da expressão gênica.

• Fatores que afetam a atividade:

- pH;
- Temperatura;
- Interação com moduladores/reguladores;
- Interação com inibidores.
 Inibição da Atividade Enzimática
• Inibidores enzimáticos são agentes moleculares
que interferem na catálise, diminuindo a
velocidade da reação.

• Aplicação na farmacologia:

Ex. : Aspirina→ Inibidor da síntese de Prostaglandinas →

Antinflamatório
Inibição da Atividade Enzimática
Fosfolipídeos
Fosfolipase A2

Ácido araquidônico
COX - 1 Protaglandinas
COX - 2
Prostaciclina
Tromboxanos
 Inibição da Atividade Enzimática
• Classificação:

1) Inibição Reversível:

- Inibição Competitiva
- Inibição Não-Competitiva

2) Inibição Irreversível
 Inibição Competitiva
• Inibidor compete (reversívelmente) com o substrato
pelo sítio ativo.
 Inibição Não-Competitiva
• Inibidor e substrato ligam-se a sítios diferentes
(como sítios alostéricos). Gera uma alteração que
impede a formação do produto da reação.
 Inibição Não-Competitiva
• Modulador alostérico: Substância capaz de
modular o efeito de um ligante (substrato)
 Inibição Irreversível
• Inibidores irreversíveis ligam-se covalentemente à
enzima.

Ex: Fármacos utilizados no tratamento da

depressão