Enzimas e Cinética Enzimática

Enzimas
São catalisadores das reações dos sistemas biológicos
A quantidade de enzimas no organismo é tão grande
que se tem praticamente uma enzima para cada
reação;

Biocatalisadores: Enzimas
Regulam velocidade dos processos fisiológicos, papel
fundamental na saúde e doença;

Substrato: moléculas nas quais as enzimas atuam.

 S↔P

E + S ↔ ES ↔ EP ↔ E + P
 Enzimas - Histórico
História da Bioquímica começa com pesquisas sobre
enzimas
Catálise biológica início séc.XIX:
1 - digestão da carne por secreções do estômago
2 - digestão do amido pela saliva e extratos vegetais

1850 – Louis Pasteur:

Açúcar Leveduras Álcool

“Fermentos”
 Enzimas - Histórico

1897 – Eduard Buchner

Extratos de Leveduras
Açúcar Álcool
“Fermentos”

Frederick Kühne - ENZIMAS

 Enzimas - Histórico

Início do Século XX

75 enzimas → isoladas e cristalizadas → ficou

evidenciado caráter protéico

Atualmente
+ de 2000 enzimas são conhecidas
 Propriedades das Enzimas
 Extraordinário poder catalítico (X1017);

 Alto grau de especificidade;

 Funcionam em soluções aquosas;

Atuam em pequenas concentrações;

 Agem sob condições específicas de temperatura e

pH;
Não alteram o equilíbrio das reações.
Não são consumidas na reação;
 Estrutura Protéica

Vantagens de serem protéicas:

Células sintetizam enzimas conforme a necessidade;

Grande variedade: uma enzima para cada reação;

Conceitos Básicos

Simples: contêm apenas radicais de aminoácidos.

Complexas ou Conjugadas ou Holoenzimas: contêm
uma parte não-protéica :
Apoenzima: parte protéica
Co-fator, coenzima ou grupo prostético: parte
não-protéica
Conceitos Básicos

Co-fator: Mineral essencial para o funcionamento da

enzima.

Coenzima: Vitaminas essenciais para o

funcionamento da enzima.

Grupo prostético: Mineral ou vitamina

covalentemente ligado à enzima

Isoenzimas: enzimas semelhantes que fazem a

mesma função
 Enzimas - Nomenclatura
No século XIX - poucas enzimas identificadas
• Adicionava-se sufixo ASE ao nome do substrato
– enzima que hidrolisam
• gorduras (lipo - grego) - LIPASE
• amido (amylon - grego) - AMILASE
• proteínas – PROTEASE

• Nomes arbitrários
• Tripsina e pepsina - proteases
• Catalase - H2O2
 Enzimas - Nomenclatura
• No século XX -  quantidade de enzimas descritas
• Nomenclatura existente se tornou ineficaz
• Década de 60 - IUB - União Internacional de
Bioquímica adotou um novo sistema de
nomenclatura e classificação
maiscomplexo
sem ambigüidades
baseado no mecanismo de reação
 Enzimas - Nomenclatura
• Sistema Oficial IUB
• Cada enzima - no de código (E.C.- Enzime
Comission) com 4 dígitos que caracterizam o
tipo de reação
1o dígito - classe
2o dígito - subclasse
3o dígito - sub-subclasse
4odígito - indica o substrato
 Enzimas - Nomenclatura
Nº Classe Tipo de reação catalisada

1 Oxirredutases Transferência de elétrons

(íons hidreto ou átomos H)
2 Transferases Reações de transferência de grupos

3 Hidrolases Reações de hidrólise

4 Liases Adição de grupos em ligas duplas ou remoção

de grupos com a formação de
ligas duplas

5 Isomerases Transferência de grupos dentro da mesma

molécula para formar isômeros
6 Ligases Formação de ligações C-C, C-S, C-O, C-N
pelo acoplamento da clivagem do ATP
 NOMENCLATURA

O nome oficial das enzimas leva em consideração

substrato, produto e coenzimas que participam da
reação:

Ex.
Enzima ATPase (Adenosinatrifosfatase): E.C 3.6.1.3

É uma hidrolase....................................... 3
Atua num anidrido.................................... 3.6
O anidrido contém fosfato........................ 3.6.1
Esse anidrido é ATP................................. 3.6.1.3
 NOMENCLATURA

ATP + D-Glicose ADP + D-Glicose-6-fosfato

IUB - ATP:glicose fosfotransferase - E.C. 2.7.1.1

2 - classe - transferase
7 - sub-classe - fosfotransferase
1 - sub-subclasse - fosfotransferase que utiliza grupo
hidroxila como receptor
1 - indica ser a D-glicose o aceptor do grupo fosfato

Hexoquinase
 Como as enzimas trabalham?

Atuam reduzindo a energia

de ativação das reações

Energia de ativação:

É a diferença entre os níveis de energia do estado

inicial e estado de transição
Energia de ativação
 Enzimas
Componentes da Reação Enzimática

E+S ES E+P

Substrato se liga ao
E - Enzima
SÍTIO ATIVO S - Substrato(s)
da enzima
ES - Complexo Enzima -
Substrato
P – Produto(s)
 Regiões da Enzima

Sítio Ativo: Região da molécula enzimática

responsável pela reação com o substrato;

Sítio Regulador ou Alostérico:

- Enzima alostérica;
- região da enzima que regula indiretamente a
atividade enzimática;
- não está localizada no sítio ativo;
- induz mudança conformacional na enzima
 Sítio ativo
Região
alostérica Fenda do
sítio ativo
(fechada)
 Ligação da Enzima ao Substrato

 2 modelos propostos:

Chave – Fechadura

Encaixe Induzido
Chave – Fechadura
Modelo Encaixe induzido
 Fatores que alteram a
velocidade de reações
enzimáticas
Fatores externos
- pH
- temperatura

Fatores que envolvem componentes da reação

- concentração do substrato

Presença de inibidores
FATORES EXTERNOS
- pH
- temperatura
Influência do pH sobre atividade
enzimática

Aumento da
atividade
enzimática

pH
ótimo

Cada enzima tem seu pH ótimo

Influência da temperatura sobre
atividade enzimática

Ativação Desnaturação
térmica térmica
Aumento da
atividade
enzimática

Temperatura
ótima
Fatores que envolvem componentes
da reação

- concentração do substrato
- concentração da enzima
 Concentração do Substrato

Baixa [S] Alta [S] excesso

Velocidade é proporcional de S
Velocidade independe
a [S]
da [S]
 Inibição Enzimática
• A atividade de uma enzima pode ser bloqueada
pela ação de outra molécula, um inibidor.

• A atividade enzimática, portanto, pode ser

controlada, pelo organismo, através da liberação
ou captação de inibidores.

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 Tipos de Inibição Enzimática

Reversível: Não envolve ligação covalente entre a

enzima e o inibidor;
Irreversível: Ligação covalente entre a enzima e o
inibidor.

Inibição Competitiva: O inibidor e o substrato se

ligam no mesmo sítio da enzima;
Inibição Não-competitiva: O inibidor pode se ligar no
complexo ES.
Inibição Competitiva
Não altera a velocidade máxima da enzima.
Inibição Não-Competitiva
Altera a velocidade máxima da enzima.