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Desde sempre que o ser humano recorre a processos para a obtenção e transformação
de alimentos através de microrganismos.
Atualmente a biotecnologia permite tornar mais sofisticados estes métodos,
aumentando a sua produtividade de forma a estabilizar e rentabilizar a produção.
Assim podem ser utilizados microrganismos para a produção de substâncias
denominadas de “aditivos alimentares” que possuem a função de melhorar a
aparência, o sabor, a consistência ou as propriedades de conservação alimentar.
“Todo o processo se baseia num desejo inato e universal de viver além dos seus
próprios meios”
-Samuel Butter
Atividade enzimática:
Para que os seres vivos sobrevivam, cresçam e se reproduzam, realizam a nível
das células um conjunto de reações químicas- metabolismo celular- que é necessário
ao bom funcionamento destes e que envolve consumo ou libertação de energia.
Através deste mecanismo, consegue ser feita uma gestão dos recursos
materiais e energéticos que uma célula necessita para o seu bom funcionamento,
através de 2 tipos de reações que já abordamos em anos anteriores:
Catabolismo- mecanismo em que células complexas se degradam em
moléculas mais simples, libertando energia logo é um processo exergónico. Um
exemplo conhecido é a degradação da glucose na respiração celular.
Anabolismo-mecanismo em que ocorre a formação de moléculas complexas a
partir de moléculas mais simples, pelo que ocorre um gasto de energia neste processo
(endergónico), como na síntese de proteínas (moléculas estruturalmente mais
complexas) a partir de aminoácidos (unidades estruturais).
Para que haja uma reação química, é necessária a rutura de ligações químicas nas
moléculas dos reagentes e a formação de novas ligações químicas que originam os
produtos de reação.
E para esta reação é preciso que haja energia de ativação (energia necessária para
uma reação química).
Por esta lógica, quanto mais estável for a molécula, maior energia de ativação
terá.
Nas células, como as reações químicas envolvem moléculas muito estáveis, ou
seja, que têm uma energia de ativação elevada, precisam de ser realizadas num curto
período de tempo e a temperaturas reduzidas, de forma a evitar a desnaturação das
proteínas* e morte celular.
*Desnaturação das proteínas- processo em que a proteína perde a sua função por
algum motivo do meio como temperaturas e variação do pH, ou a presença de outras
substâncias como etanol e acetona.
A
Substrato Produtos
Complexo
Enzima enzima-substrato Enzima livre
B Substrato Produtos
Complexo
Enzima enzima-substrato Enzima livre
Especificidade enzimática:
As enzimas possuem especificidade, ou seja, atuam sobre um único substrato
ou sobre um grupo de substrato que se relacionam pelas suas características
químicas.
O que está na origem desta especificidade enzimática?
A complementaridade que se estabelece entre o substrato e o centro ativo da enzima.
Especificidade absoluta:
Neste caso, como o nome indica a enzima atua apenas sobre um determinado
substrato.
Modelo chave-fechadura- foi um modelo apresentado por Fisher em 1894.
Este modelo considera que o centro ativo da enzima é uma estrutura rígida e
que a complementaridade que estabelece com o substrato na formação do
complexo enzima-substrato já existe mesmo anteriormente à ligação.
Especificidade relativa:
A enzima atua sobre um conjunto de substratos que se relacionam a nível
químico e estrutural, ou seja, que tenham, por exemplo, o mesmo grupo
funcional ou o mesmo tipo de ligações químicas
É suportada pelo modelo do encaixe induzido/modelo mão-luva que
Koshland, um bioquímico, propôs em 1959.
Este modelo indica que o centro ativo da enzima interage de uma forma
dinâmica com o substrato, e se ajusta a ele aquando é estabelecida a ligação
entre eles.
Cofatores:
-Podem ser iões metálicos.
-Podem ser moléculas orgânicas como a vitamina B- denominam-se coenzimas.
Representação esquemática da formação de uma holoenzima ativa por uma
apoenzima e um cofator, ambos inativos.
Inibição enzimática:
Além das moléculas que regulam a célula, as enzimas podem ser inibidas por outros
compostos químicos.
Inibidores enzimáticos- substâncias capazes de inibir a atividade das enzimas, que
podem ser utilizados, por exemplo, para prevenir o crescimento de microrganismos. O
uso de inibidores nas vias metabólicas das bactérias permite ao homem o controlo das
doenças que estas possuem.
Conforme o mecanismo de atuação podem se distinguir 2 tipos de inibição, em que o
local onde se ligam os inibidores difere:
Inibição irreversível:
O inibidor liga-se ao centro ativo da enzima de forma permanente através de
ligações covalentes, onde se compartilham um ou mais pares de eletrões.
Assim, a enzima fica inativa e perde a sua função de forma irreversível.
Exemplos: venenos como o DDT que atuam sobre enzimas do sistema nervoso.
Representação esquemática da inibição irreversível.
Inibição reversível:
O inibidor liga-se ao centro ativo da enzima mas por um tempo limitado,
através de ligações fracas.
Assim, quando o inibidor se dissocia do centro ativo da enzima, não há
alteração na funcionalidade da enzima, permitindo que esta se ligue ao
substrato.
Exemplo:
A sulfa (sulfanilamida) é um medicamento microbiano que inibe a via
metabólica microbiana da síntese de ácido fólico.
Quanto maior for a quantidade de moléculas do inibidor em relação à
quantidade do substrato, maior é a probabilidade de o centro ativo da enzima
estar ocupado pelo inibidor e não pelo seu substrato.
Quando não existe o inibidor, a enzima mantém o seu funcionamento normal.
Existem vias metabólicas que são controladas pelo produto final, atuando como
inibidores alostéricos de uma enzima da cadeia de reações.
Esta enzima, ficando inativa na presença do produto final, não permite a formação
deste por feedback negativo (ou retroação).
Assim, quando existe produto de reação em quantidade suficiente, não é necessário
continuar com a sua produção
Molécula Molécula
Substrato inicial Produto final
intermédia A intermédia B
Temperatura
pH
Tal como existe a temperatura ótima nas enzimas, estas também possuem um pH
ótimo de atuação, ao qual corresponde uma maior velocidade da reação.
Tanto para os valores superiores como inferiores ao pH ótimo, a atividade enzimática
diminuiu e acaba por parar.
O pH do meio, influencia a conformação do centro ativo da enzima e a sua interação
com o substrato.
NOTA: A Pepsina e a Tripsina são enzimas digestivas do ser humano.
Concentração de substrato:
Concentração de enzima:
Presença de inibidores
Como já falamos anteriormente existem inibidores de enzimas e a sua presença no
meio em que ocorre uma reação química catalisada por uma enzima diminui a
velocidade da reação. (estes efeitos sobre a velocidade e o modo de ultrapassagem
dependem do tipo de inibidores).
Conservação de alimentos:
O que é a conservação de alimentos?
Quantidade de água:
pH dos alimentos:
Remoção de microrganismos:
Elimina os microrganismos e a sujidade existente na superfície de alimentos sólidos; ou
em suspensão em alimentos líquidos.
Lavagem:
Remove microrganismos ou sujidade da superfície dos alimentos.
É utilizada em frutos e vegetais.
Filtração esterilizante:
Utiliza um filtro para obter microrganismos em suspensão.
É utilizada em vinhos e sumos de fruta.
Calor:
Uma vez que causa a desnaturação das proteínas estruturais e das enzimas
necessárias ao metabolismo, o calor mata os microrganismos.
A combinação da temperatura e do tempo, utilizada em processos de conservação de
alimentos tem como objetivo a destruição de microrganismos indesejáveis com os
menores efeitos possíveis sobre as características e o valor nutritivo dos alimentos.
Qual o calor mais prejudicial? O húmido ou o seco?
O calor húmido é mais eficaz que o calor seco e é eficaz a temperaturas mais baixas e
com menor tempo de atuação.
NOTA: Isto deve-se ao facto de que a presença de água, contribui para destruir as
ligações de hidrogénio.
Dentro do calor, temos três tópicos principais:
Pasteurização:
Neste processo são utilizadas temperaturas inferiores aos 100ºC.
Ocorre a destruição da maioria dos microrganismos patogénicos, mas pode acontecer
não se realizar a destruição dos esporos.
Representação da pasteurização do leite.
Dentro da pasteurização, existe a pasteurização:
-lenta (LTLT- Low temperature, Long Time), em que tal como o nome sugere as
temperaturas são baixas, 65ºC durante 30 minutos.
-rápida (HTST- High Temperature, Short Time), em que são utilizadas temperaturas de
72ºC apenas por 15 a 30s.
Este processo é utilizado para eliminar microrganismos que sejam pouco resistentes
ao calor e permitindo preservar os nutrientes.
NOTA: A pasteurização normalmente, é utilizada em alimentos como o leite, os queijos
e os sumos.
Tratamento UHT (ultra-high temperature) ou ultrapasteurização:
Neste processo, ocorre o aquecimento do alimento a uma temperatura superior a
130ºC por um período de cerca de 1 a 2s.
Este método, elimina todas as bactérias e esporos existentes e é utilizado no leite.
Representação do local onde ocorre o tratamento ultra-high temperature.
Esterilização (enlatados):
Através deste método, os alimentos são preparados e introduzidos num recipiente de
metal ou vidro que é fechado e depois submetido a temperaturas superiores aos
130ºC.
Não só destrói microrganismos e esporos como também nutrientes termolábeis
(suscetível de ser destruído pelo calor), como algumas vitaminas.
É utilizado no peixe e nos vegetais.
Frio:
O frio inibe ou reduz a multiplicação dos microrganismos, mas não os mata, reduz
apenas a atividade das enzimas do alimento e a velocidade das reações químicas
espontâneas.
Dentro do frio temos dois tópicos essenciais:
Refrigeração:
Os alimentos são conservados no frio a temperaturas compreendidas entre os 5ºC e os
7,2ºC.
A refrigeração vai reduzir o crescimento da maior parte dos agentes patogénicos.
NOTA: os organismos psicrófilos, ou seja, tolerantes ao frio, continuam a
desenvolver-se.
Este método é utilizado no fiambre e em queijos frescos.
Redução da água:
A água é essencial ao metabolismo dos microrganismos e à atividade das enzimas
hidrolíticas, pelo que, quando ocorre a redução do teor de humidade dos alimentos, a
velocidade da atividade microbiana e a atividade das enzimas do alimento reduz.
Acontece também uma redução do peso e do volume dos alimentos.
Secagem ao sol:
É possível verificar a evaporação lenta da água em alimentos expostos ao sol.
É usada para conservar peixe e fruta.
Efeitos osmóticos:
Ao serem colocados num meio hipertónico, vai ocorrer a plasmólise das células do
próprio alimento e dos microrganismos, inibindo a sua atividade.
Salga:
É quando o alimento é coberto por sal ou colocado numa solução salina.
É verificada a plasmólise das células, e o ião cloro é tóxico e reduz a solubilidade do
oxigénio.
É utilizada no peixe e na carne.
Modificação da atmosfera:
Permite criar um ambiente anaeróbio em redor do alimento. Este ambiente, inibe o
crescimento de muitas espécies de microrganismos. Impede as reações de oxidação e
protege o alimento da exposição a compostos voláteis do meio ambiente.
Embalagem em vácuo:
O alimento não é exposto a gases.
Este método é utilizado em carne e produtos de charcutaria.
Irradiação:
Ocorre um tratamento superficial com radiações ionizantes, como os raio-X, raios
gama e raios ultravioleta.
Estas radiações são responsáveis por eliminar insetos e microrganismos da superfície
dos alimentos e retardam a germinação de sementes e o amadurecimento dos frutos
o que, consequentemente, aumenta a durabilidade dos alimentos.
Acidez:
Em meios ácidos é de fácil visualização a desnaturação de enzimas, o que reduz a
multiplicação dos microrganismos e as reações de autólise dos alimentos.
Dentro da acidez, temos dois tópicos:
Fermentação:
Tanto a fermentação láctea como a acética, fazem baixar o pH dos alimentos, o que
assim, permite a sua conservação durante períodos de tempo mais longos.
Fumo:
Este fumo provém da queima de madeira.
O fumo, tem uma variedade de compostos voláteis com efeito bacteriostático ou
bactericida, dos quais, o mais importante, é o formaldeído.
É usado no peixe, na carne e em produtos de charcutaria.
Aditivos químicos:
São substâncias que não são alimentos nem ingredientes dos mesmos, mas que são
propositadamente adicionados aos alimentos em qualquer fase do seu
processamento. Podem também ter um papel de conservante, tecnológico (facilitam
as operações industriais de processamento e fabrico) ou sensorial, na medida em que
melhoram o sabor ou aspeto.
Assepsia:
É a que previne a contaminação dos alimentos por microrganismos.
A manutenção de condições assépticas durante o processamento e o embalamento
dos alimentos aumenta a eficácia dos outros fatores de conservação.
Utilização de organismos geneticamente modificados na produção de alimentos:
Os OGMs (organismos geneticamente modificados) são organismos em que o seu
DNA, foi alvo de manipulação genética, a qual leva à alteração dos seus genes ou até
mesmo à introdução de novos genes em laboratório por tecnologias de engenharia
genética como por exemplo a tecnologia do DNA recombinante ou como já foi referido
em trabalhos anteriores, pela CRIPR-cas9.
Existem várias funcionalidades para os OGMs, nomeadamente servir de alimento ao
ser humano, a animais ou até mesmo como ingredientes de produtos alimentares.
NOTA: Desde a antiguidade que a seleção artificial e técnicas como a enxertia,
permitem obter novas variedades de plantas e animais. Nestes casos, as características
desejáveis surgem naturalmente, por mutações, e o ser humano apenas consegue
contribuir para o aumento da frequência das características nas populações.
Ao contrário das espécies que não foram melhoradas por reprodução seletiva, os OGM
possuem características que não ocorrem naturalmente nos organismos não
manipulados da sua espécie.
Redução no uso de produtos químicos potencialmente prejudiciais:
Ao serem resistentes a pragas, os OGM, reduzem a utilização de pesticidas e ficam
assim com benefícios ambientais.
Preocupações associadas aos OGM:
Existem algumas preocupações associadas aos OGM nomeadamente ao nível das
intoxicações alimentares, das alergias, do aumento do cancro, da ameaça à
biodiversidade, à resistência bacteriana e principalmente ao nível de não existir
informação suficiente que nos garanta da sua segurança, tanto para o ser humano
como para todos os que dependem deles como a fauna e flora.
Apesar de não ser consensual, não existem razões nem estudos que apontem para os
OGM como uma desvantagem.
Fungos Bactérias
Utilizados no tratamento
de alguns queijos.
Utilizadas no fabrico do queijo
Bolores e do iogurte.
Os mecanismos de fermentação nos microrganismos, além de
permitirem mobilizar energia contida em moléculas orgânicas, como a
glicose, conduzem também á síntese final de substâncias orgânicas que
têm sido utilizadas para proveito humano.
Fermentação alcoólica
O principal interveniente são as leveduras, por exemplo do tipo saccharomyces
cerevisiae.
Essencial na produção de vinho e cerveja.
Processo anaeróbico no qual açúcares como a glicose, frutose e sacarose são
convertidos em energia celular.
É caracterizada pela produção de grandes quantidades de etanol e dióxido de
carbono, processo realizado por vários tipos de leveduras quando colocadas em
condições de anaerobiose.
A levedura saccharomyces cerevisiae é a mais utilizada neste tipo de fermentação,
principalmente na produção de bebidas alcoólicas e na produção de pão.
O etanol (produto final) provém da redução do acetaldeído (formado por
descarboxilação do piruvato). O acetaldeído é reduzido pelo NADH a etanol.
O rendimento energético da fermentação alcoólica é de 2 ATP provenientes do
processo da glicólise.
Cerveja:
A- Representação visual da produção do vinho
- É fabricada com malte de cevada (grãos de cevada germinados e secos), lúpulo (é
B- Representação
uma planta que confere o sabor visual doágua
amargo da cerveja), Vinhoe(produto
leveduras das espécies
resultante da fermentação alcoólica)
Saccharomyces cerevisiae ou Saccharomyces carlsbergensis.
-Outros materiais ricos em amido ou não maltoso, ou seja não germinados, (como
arroz, milho ou sorgo) também se podem adicionar.
-O malte e os cereais não maltoso são moídos e aquecidos e as enzimas catalisam a
hidrólise do amido em açúcares simples, formando o mosto, nesse mosto são
adicionadas as leveduras que convertem os açúcares em etanol e CO2.
-O CO2 é libertado e o álcool atinge uma concentração de cerca de 3,8% do volume.
- Após a fermentação, a cerveja é armazenada durante alguns meses, durante os
quais ocorre a precipitação de leveduras, proteínas e outras substâncias indesejáveis.
-Por fim, a cerveja é carbonatada, clarificada, filtrada e engarrafada.
Representação visual da cerveja (produto resultante da fermentação alcoólica)
Fermentação láctica
As bactérias são o principal interveniente.
É um processo metabólico no qual é utilizado a glicose (com a ajuda de bactérias como
a Lactobacillus e Streptococcus).
A redução do piruvato e respetiva combinação com o hidrogénio transportado pelo
NADH vai levar à produção de ácido láctico (produto final da fermentação láctica).
O piruvato recebe o ião H+ e os eletrões do NADH.
Considera-se dois tipos de fermentação láctica:
A fermentação homolática: caracteriza-se pela produção de grandes quantidades de
ácido láctico, sendo este o principal produto obtido. Este processo é realizado por
bactérias, como Lactobacillus sp. e Streptococcus sp. E é utilizada, por exemplo no
fabrico de iogurtes e queijos.
A fermentação heterolática: ocorre a formação de outros produtos, como, por
exemplo, o ácido acético, o etanol e o dióxido de carbono, além do ácido láctico. Este
processo é realizado por bactérias dos géneros Leuconoctoc e Lactobacillus, sendo
utilizada na produção de certos queijos e leites fermentados.
(A maior parte dos leites são pasteurizados (processo térmico que visa eliminar a
microbiota patogênica do leite, esse processo permite também a redução da microbiota
deteriorante, o que prolonga a sua conservação), antes da fermentação, para eliminar
microrganismos endógenos, sendo-lhes depois acrescentadas culturas especialmente
preparadas para iniciar o processo, as culturas de arranque, o que permite estabelecer
uma produção mais bem controlada.
Fermentação Acética
Produtos da fermentação acética:
Fermentação Butírica
- Contem bactérias responsáveis pela alteração da manteiga.
-Fermentação butírica é a reação química realizada por bactérias anaeróbias através
do qual se forma o ácido butírico.
-É a conversão dos carboidratos em ácido butírico por ação de bactérias da espécie
Clostridium butyricum na ausência de oxigênio, e caracteriza se pelo surgimento de
odores pútridos e desagradáveis.
-Produz-se a partir da lactose ou do ácido láctico com a formação do ácido butírico e
gás.
- Esse ácido é o responsável pelo odor e o sabor peculiar da manteiga rançosa.
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