Enzimas

Enzimas

o As enzimas são catalisadores proteicos que aumentam a velocidade

de uma reação química e não são consumidos durante a reação que
catalisam.

o Praticamente todas as reações do corpo são mediadas por enzimas

Propriedades das Enzimas
o Sítios ativos: Região específica, em forma de fenda ou bolso com
cadeias laterais de aminoácidos que participam da ligação do
substrato
Propriedades das Enzimas

o Eficiência catalítica – As reaçoes catalisadas por enzimas são, em sua maioria, altamente
eficientes, ocorrendo de 103 até 108 vezes mais rapidamente que as reações não catalisadas

o O número de moléculas de substrato convertido em moléculas de produto por uma molécula

de enzima por segundo é chamado número de renovação ou Kcat – entre 102 a 104 s.
Propriedades das Enzimas

o Especificidade – As enzimas são altamente específicas, interagindo com um ou alguns poucos

substratos e catalisando apenas um tipo de reação química
Propriedades das Enzimas
o Holoenzimas – enzimas que precisam de outras moléculas além da da
proteína para sua atividade enzimática - Apoenzima – forma inativa

o Quem são essas moléculas?

o Co-fatores: Zn2+ ou Fe2+

o Coenzimas: molécula orgânica pequena

o Cosubstratatos – dissociam-se da enzima de forma transitória (NAD+)

o Grupo prostético – permanentemente associada a enzima (FAD)

Propriedades das Enzimas

o Regulação – A atividade enzimática por ser regulada, isto é, podem

ser ativadas ou inibidas, a fim de que a velocidade de formação do
produto responda às necessidades da célula.
Propriedades das Enzimas

o Localização dentro da célula – Muitas enzimas estão localizadas em organelas específicas

dentro das células. Essa compartimentalização serve para isolar o substrato ou produto da
reação de outras reações competitivas.

Oxidação
Ac. graxos
Glicólise
Síntese DNA
Síntese de ac. graxos e RNA
Como funcionam as enzimas

o Podemos entender como funcionam as enzimas a partir de duas perspectivas:

o Catálise – alterações de energia que ocorrem durante a reação, ou seja, as enzimas fornecem
uma rota de reação alternativa, energeticamente favorável, diferente da reação não
catalisada.

o O sítio ativo facilita quimicamente a catálise

Como funcionam as enzimas
o Alterações de energia que ocorrem durante a reação – praticamente
todas as reações químicas possuem uma barreira de energia separando
os reagentes dos produtos

o Energia livre de ativação

o Velocidade de reação

o Rota alternativa de reação

Como funcionam as enzimas

o Química do sítio ativo – o sítio ativo é uma máquina molecular complexa com diversos
mecanismos químicos para facilitar a conversão de substrato em produto

o Estabilização do estado de transição – diferente

Sítio ativo

• Estabilização do estado de transição

Fatores que afetam a velocidade da reação
enzimática

o Diferentes enzimas mostram diferentes respostas as alteraçòes de

concentração de substrato, temperatura e pH.
Concentração do substrato
o Velocidade máxima – a velocidade de
uma reação (v) é o número de
moléculas de substrato convertidas
em produto por unidade de tempo, a
velocidade de uma reação enzimática
aumenta com a concentração do
substrato até uma velocidade máxima
ser atingida.

o Platô – saturação máxima

Temperatura

o Aumento da velocidade com a temperatura – pico de velocidade

o Diminuição da velocidade com temperaturas mais altas – desnaturação da enzima

pH
o Efeito do pH sobre a ionização do sítio ativo – [H+] – o processo
catalítico requer que a enzima e o substrato tenham determinados
grupos químicos em estado ionizado ou não ionizado de modo a
interagirem.

o Efeito do pH sobre a desnaturação da enzima

o O pH ótimo varia de acordo com a enzima

Inibição da atividade enzimática
• Inibição da atividade enzimática – qualquer substância que possa
diminuir a velocidade das reações catalisadas por enzimas é chamada de
inibidor.

• Inibição Reversível: Ligação não-covalente, de modo que a diluição do

complexo enzima-inibidor resulta na dissociação do inibidor
reversivelmente ligado e na recuperação da atividade enzimática.

• Competitiva ou não competitiva

Inibição enzimática competitiva e não competitiva
Inibição Competitiva

o Ocorre quando o inibidor liga-se reversivelmente ao mesmo sítio que o substrato

normalmente ocuparia e dessa forma, compete com o substrato por esse sítio.

o Velocidade?

o Substrato?

o Ex. Estatinas
Inibição não competitiva

o Ocorre quando o inibidor e o substrato ligam-se em sítios diferentes da enzima, o inibidor

pode se ligar tanto a enzima livre, quanto a enzima ocupada pelo substrato, de modo a
impedir que a reação ocorra

o Velocidade?

o Substrato?

o Inseticidas
Regulação da atividade enzimática

o A regulação da velocidade das reações enzimáticas é essencial para o

organismo coordenar seus numerosos processos metabólicos.
Regulação das enzimas alostéricas
o Quando as enzimas são reguladas por moléculas chamadas efetores,
que se ligam as enzimas de forma não covalente a outro sítio que
não seja o ativo.

o Positivo e negativo
Regulação das enzimas por modificação covalente
o Muitas enzimas podem ser reguladas por modificação covalente, mais
frequentemente por adição ou remoção de grupos fosfato de resíduos
específicos de serina, treonina, ou tirosina da enzima.

o Fosforilação ou desfoforilação – proteinas cinases – ATP

Indução e repressão da síntese de enzimas
Enzimas no diagnóstico clínico

o As enzimas plásmaticas podem ser divididas em dois grupos:

o 1. Secretadas de modo ativo no sangue por alguns tipos celulares – zimogênios

o 2. Enzimas que atuam intracelularmente sem função fisiológica no plasma - Transaminases

hepáticas
Enzimas plasmaticas como ferramentas diagnósticas
• Função cardíca – CKMB e troponina

• Função hepática – AST e ALT

Enzimas
Enzimas
Enzimas

o As enzimas são catalisadores proteicos que aumentam

a velocidade de uma reação química e não são
consumidos durante a reação que catalisam.

o Praticamente todas as reações do corpo são mediadas

por enzimas
Propriedades das Enzimas
o Sítios ativos: Região específica, em forma de fenda
ou bolso com cadeias laterais de aminoácidos que
participam da ligação do substrato
Propriedades das Enzimas

o Eficiência catalítica – As reaçoes catalisadas por enzimas são, em sua maioria,

altamente eficientes, ocorrendo de 103 até 108 vezes mais rapidamente que as
reações não catalisadas

o O número de moléculas de substrato convertido em moléculas de produto por

uma molécula de enzima por segundo é chamado número de renovação ou K cat

– entre 102 a 104 s.
Propriedades das Enzimas

o Especificidade – As enzimas são altamente específicas, interagindo

com um ou alguns poucos substratos e catalisando apenas um tipo de
reação química
Propriedades das Enzimas
o Holoenzimas – enzimas que precisam de outras moléculas além da da
proteína para sua atividade enzimática - Apoenzima – forma inativa

o Quem são essas moléculas?

o Co-fatores: Zn2+ ou Fe2+

o Coenzimas: molécula orgânica pequena

o Cosubstratatos – dissociam-se da enzima de forma transitória (NAD+)

o Grupo prostético – permanentemente associada a enzima (FAD)

Propriedades das Enzimas

o Regulação – A atividade enzimática por ser

regulada, isto é, podem ser ativadas ou inibidas, a
fim de que a velocidade de formação do produto
responda às necessidades da célula.
Propriedades das Enzimas

o Localização dentro da célula – Muitas enzimas estão localizadas em

organelas específicas dentro das células. Essa compartimentalização
serve para isolar o substrato ou produto da reação de outras reações
Oxidação
competitivas. Ac. graxos
Glicólise
Síntese DNA
Síntese de ac. graxos e RNA
Como funcionam as enzimas
o Podemos entender como funcionam as enzimas a partir de duas perspectivas:

o Catálise – alterações de energia que ocorrem durante a reação, ou seja, as

enzimas fornecem uma rota de reação alternativa, energeticamente favorável,
diferente da reação não catalisada.

o O sítio ativo facilita quimicamente a catálise

Como funcionam as enzimas
o Alterações de energia que ocorrem durante a reação –
praticamente todas as reações químicas possuem uma
barreira de energia separando os reagentes dos
produtos

o Energia livre de ativação

o Velocidade de reação

o Rota alternativa de reação

Como funcionam as enzimas

o Química do sítio ativo – o sítio ativo é uma máquina molecular

complexa com diversos mecanismos químicos para facilitar a
conversão de substrato em produto

o Estabilização do estado de transição – diferente

Sítio ativo
• Estabilização do estado de transição
Fatores que afetam a velocidade
da reação enzimática

o Diferentes enzimas mostram diferentes respostas

as alteraçòes de concentração de substrato,
temperatura e pH.
Concentração do substrato
o Velocidade máxima – a velocidade de
uma reação (v) é o número de
moléculas de substrato convertidas
em produto por unidade de tempo, a
velocidade de uma reação enzimática
aumenta com a concentração do
substrato até uma velocidade máxima
ser atingida.

o Platô – saturação máxima

Temperatura

o Aumento da velocidade com a temperatura – pico de velocidade

o Diminuição da velocidade com temperaturas mais altas –

desnaturação da enzima
pH
o Efeito do pH sobre a ionização do sítio ativo – [H+] – o processo
catalítico requer que a enzima e o substrato tenham determinados
grupos químicos em estado ionizado ou não ionizado de modo a
interagirem.

o Efeito do pH sobre a desnaturação da enzima

o O pH ótimo varia de acordo com a enzima

Inibição da atividade enzimática
• Inibição da atividade enzimática – qualquer substância que possa
diminuir a velocidade das reações catalisadas por enzimas é chamada de
inibidor.

• Inibição Reversível: Ligação não-covalente, de modo que a diluição do

complexo enzima-inibidor resulta na dissociação do inibidor
reversivelmente ligado e na recuperação da atividade enzimática.

• Competitiva ou não competitiva

Inibição enzimática competitiva e não
competitiva
Inibição Competitiva
o Ocorre quando o inibidor liga-se reversivelmente ao mesmo sítio que o substrato
normalmente ocuparia e dessa forma, compete com o substrato por esse sítio.

o Velocidade?

o Substrato?

o Ex. Estatinas
Inibição não competitiva
o Ocorre quando o inibidor e o substrato ligam-se em sítios diferentes da enzima, o
inibidor pode se ligar tanto a enzima livre, quanto a enzima ocupada pelo
substrato, de modo a impedir que a reação ocorra

o Velocidade?

o Substrato?

o Inseticidas
Regulação da atividade enzimática

o A regulação da velocidade das reações enzimáticas

é essencial para o organismo coordenar seus
numerosos processos metabólicos.
Regulação das enzimas alostéricas
o Quando as enzimas são reguladas por moléculas
chamadas efetores, que se ligam as enzimas de
forma não covalente a outro sítio que não seja o
ativo.

o Positivo e negativo
Regulação das enzimas por modificação
covalente
o Muitas enzimas podem ser reguladas por modificação
covalente, mais frequentemente por adição ou remoção
de grupos fosfato de resíduos específicos de serina,
treonina, ou tirosina da enzima.

o Fosforilação ou desfoforilação – proteinas cinases – ATP

Indução e repressão da síntese de enzimas
Enzimas no diagnóstico clínico
o As enzimas plásmaticas podem ser divididas em dois grupos:

o 1. Secretadas de modo ativo no sangue por alguns tipos celulares –

zimogênios

o 2. Enzimas que atuam intracelularmente sem função fisiológica no

plasma - Transaminases hepáticas
Enzimas plasmaticas como ferramentas
diagnósticas
• Função cardíca – CKMB e troponina

• Função hepática – AST e ALT

Enzimas