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DE AULAS PRÁTICAS
LABORATORIAIS
Disciplina:
BIOQUÍMICA APLICADA
Prática:
DOSAGENS DE PROTEÍNAS TOTAIS
Nº - LAB-PAP- XXX
LAB-MDL-01 / V.03
CÓDIGO:
PROCEDIMENTO DE AULA PRÁTICA
LAB-PAP-XX
CURSO: FARMÁCIA DATA:
DISCIPLINA: BIOQUÍMICA APLICADA VERSÃO: 01
ELABORADO POR: RICARDO SOUZA APROVADO POR: GERENTE DE LABORATÓRIOS
1. NOME DA PRÁTICA:
DOSAGEM DE PROTEÍNAS TOTAIS
2. OBJETIVOS DE APRENDIZAGEM DA PRÁTICA:
Realizar dosagens de proteínas totais.
Entender os princípios minimamente necessários a respeito de dosagens de
proteínas.
OBS.: A quantidade (qtd) material listada abaixo é estimada para apenas um grupo de alunos. A
quantidade de grupos, por aula, deve ser definida pelo professor. Sugestão (05-06) aluno por grupo.
DESCRIÇÃO DOS MATERIAIS
QTD QTD REAGENTES E SOLUÇÕES
NECESSÁRIOS
Tubos de ensaio Solução padrão: 4,0 g/dℓ de albumina
bovina. Conservar entre 15 e 25°C
Estantes para tubos de ensaio Reativo de biureto: contém 1,86 mol/ℓ
de hidróxido de sódio, 0,32 mol/ℓ de
tartarato sódio e potássio, 0,188 mol/ℓ
de sulfato de cobre e 0,3 mol/ℓ de
iodeto de potássio. Conservar entre 15
e 25°C. Estável por 6 meses.
Cubetas, pipetas Amostra: soro ou plasma podem ser
usados, mas prefere-se soro. Amostras
hemolisadas não devem ser
analisadas. As amostras bem fechadas
de soro são estáveis, por 1 semana à
temperatura ambiente, e por 1 mês a 2
a 4°C.
Espectrofotômetro
Papel absorvente
3. METODOLOGIA DA AULA PRÁTICA
3.1 Método
Princípio. O cobre do reativo de biureto reage com as proteínas, em meio alcalino, formando um
complexo cobre-proteína de cor roxa, que absorve luz a 545 nm. A intensidade de cor produzida é
proporcional ao número de ligações peptídicas que estão reagindo e, portanto, à quantidade de proteína
presente. Aminoácidos e dipeptídios não reagem, mas tripeptídios, oligopeptídios e polipeptídios
reagem e produz produtos de cor rosa a violeta avermelhada.
Procedimento. Prepare um conjunto de três tubos e proceda da seguinte maneira. (Veja Tabela).
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3.2 Resultados e conclusão
Compare o valor encontrado na sua dosagem com os valores de referência para dosagem de proteínas
totais. Verifique se a concentração de proteínas totais está dentro da faixa de referência, se indica
hipoproteinemia ou hiperproteinemia.
Em adultos normais em movimento, a concentração de proteína total do soro é de 6,3 a 8,3 g/d ℓ e a de
um adulto em descanso é de 6,0 a 7,8 g/dℓ.
As causas principais de alteração da concentração da proteína total no soro é uma alteração do volume
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de água do plasma e uma alteração na concentração de uma das proteínas específicas do plasma.
Na hemoconcentração (diminuição do volume plasmático) é chamada hiperproteinemia relativa. A
hiperproteinemia é observada em casos de desidratação devido ao baixo consumo de água ou perda
excessiva, tais como nos casos de vômitos e diarreia, doença de Addison e acidose diabética.
A hemodiluição (aumento do volume plasmático) se refere como hipoproteinemia relativa. Ocorre nas
síndromes de intoxicação por água ou retenção de sal, durante infusões intravenosas grandes, e
fisiologicamente quando os indivíduos assumem uma posição inclinada.
3.4 Questões
3.5 Referência
1 - NARDY, M. C; STELLA, M. B; OLIVEIRA, C. Práticas de Laboratório de
Bioquímica e Biofísica: Uma visão Integrada. Editora Guanabara Koogan.
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DEVEM ESTAR EM BANCA ÚNICA O ALUNO SE DIRECIONA E PEGA O
QUANTITATIVO NECESSÁRIO PARA REALIZAÇÃO DE SUA PRÁTICA. JÁ AS
VIDRARIAS DEVEM ESTAR SEPARADAS PARA 6 GRUPOS EM 6 BANCADAS.
PARA A REALIZAÇÃO DA ESTAÇÃO 1 E 2, O TÉCNICO DE LABORATÓRIO
PRECISA OBRIGATORIAMENTE PREPARAR AS SOLUÇÕES NECESSÁRIAS. AO
ALUNO CABE FAZER A EXTRAÇÃO E TESTE DE CARACTERIZAÇÃO.
PARA A ESTAÇÃO 2: TUBOS DE ENSAIO, CONTA-GOTAS, ESTANTE PARA
TUBO DE ENSAIOS, NITRITO SE SÓDIO, SOLUÇÃO DE ÁCIDO SULFÚRICO,
SOLUÇÃO DE METANOL E ÁCIDO CLORÍDRICO. O PROCEDIMENTO DE
VIDRARIAS E SOLUÇÕES DEVE SER O MESMO DA ESTAÇÃO 1.
7. INSTRUÇÕES À TURMA
ANOTAR TUDO QUE FOR SENDO OBSERVADO NO DECORRER DA PRÁTICA PARA
POSTERIOR APRESENTAR RELATÓRIO DE AULA.
FAZER OS PROCEDIMENTOS DESCRITOS PASSO- A – PASSO, E COM ATENÇÃO
PARA EVITAR ERROS DO TIPO SISTEMÁTICOS.
TENHA CUIDADO AO MANUSEAR OS ÁCIDOS SULFÚRICO E CLORÍDRICO, AMBOS
POSSUEM UM ALTO GRAU DE IONIZAÇÃO, E PODEM PROVOCAR LESÕES NA PELE
OU MUSOCAS.
ÁCIDO CLORÍDRICO É UM ÁCIDO VOLÁTIL DE ODOR IRRITANTE, O SEU MANUSEIO
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DEVE SER FEITO OBRIGATORIAMENTE EM UMA CAPELA COM EXAUSTÃO.
METAL É UM ÁLCOOL VENENOSO, CUIDADO SEU MANUSEIO, NÃO CHEIRAR, NÃO
DEIXAR TER CONTATO COM OS OLHOS, E LAVAR BEM AS MÃOS APÓS RETIRAR A
LUVA QUE USAR NA PRÁTICA.
ÉTER ETÍLICO E ÉTER DE PETRÓLEO POSSUEM BAIXOS PONTOS DE EBULIÇÃO, AO
MANUSEAR NÃO DEIXAR O VIDRO ABERTO, OU O COMPOSTO EVAPORA COM MUITA
FACILIDADE.
Instrução Geral: Por favor não remover informações e/ou títulos/subtítulos, e não mudar o layout
do documento.
1. Campo nome da prática: refere-se ao assunto correspondente no plano de ensino, com
nomes curtos e objetivos, este não deve ser feito em forma de texto.
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4.2- Local da aula prática: Ex.: Laboratório de anatomia
4.3- Divisão dos grupos: Ex.: será dividido em 4 grupos que farão rodízios em 4 bancadas
diferentes. Posso montar 2 bancadas com Braço e duas apenas da mão, os alunos em 4 grupos
devem passar nos dois tipos de bancadas. Ou posso montar 4 bancadas, sendo uma com peças
da musculatura do Braço, uma com peças com a musculatura da mão, uma com o atlas aberto
para que transcrevam a origem e inserção de cada músculo e a quarta bancada que eles possam
verificar a ação de cada músculo ou responder a um Quiz pelo celular (assim incluindo o elemento
tecnologia).
4.4- Tempo de duração da prática: Planeje o tempo de Demonstração, Explanação e da
Prática sob Supervisão. Esse planejamento é importante para que você construa seu plano de
aula.
6.1- Objetivo da Estação I de Aprendizagem: Sua prática laboratorial pode ter mais de uma
parada de aprendizagem, portanto, defina o objetivo de cada parada e o que e como os discentes
devem fazer em cada uma delas, bem como o tempo que terão para permanecer nesta parada.
Por exemplo: na parada I os alunos podem observar e localizar nas peças os músculos dos MMSS,
ou pode ser uma parada onde os estudantes irão treinar aferição de pressão arterial e outra
estação onde eles irão treinar ausculta cardíaca.
Obs: Estas orientações devem estar em cima de cada bancada correspondente ou local da sala,
considere explicar em sala uma semana antes para que os estudantes possam estudar o material,
buscar leituras necessárias, etc. Acrescente aqui o material que ele deve estudar no Ambiente
Virtual antes desta prática laboratorial (no caso do ensino híbrido). Acrescente, mesmo que seja
uma regra institucional a necessidade de roupas adequadas, sapatos e necessidade de jaleco se
for o caso.
Ao finalizar essa etapa, devem seguir para a parada II.
7. Instruções à turma: Descreva aqui quais serão as instruções dadas à turma no geral.
A prática de hoje é composta de 3 etapas:
Demonstração: o docente deve demonstrar aos estudantes a prática a ser realizada. Alguns
aspectos aqui são extremamente importantes,
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o Garanta que todos os estudantes estão conseguindo ver a demonstração.
Especialmente em turmas grandes, é possível que parte da turma não consiga
visualizar a prática
o Demonstrar não é apenas fazer, mas explicitar “o que” e “como” fazer enquanto
demonstra
Garantir que todos entendam as orientações.
o Na fase da demonstração, é possível, também, utilizar vídeos demonstrativos.
Coloque neste campo que recursos você vai utilizar e como você vai fazer a
demonstração do treino de habilidades para os alunos, quais instruções vai
oferecer à turma, etc.
o Explanação: na explanação, você vai fazer comentários sobre a atividade, tirar
possíveis dúvidas e oferecer instruções adicionais
o Prática sob supervisão: esta é a fase da prática exaustiva, na qual os estudantes
irão realizar a prática descrita nas orientações até que estejam seguros
Lembre-se:
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