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II - Prtica 30% (60pts) Digesto do amido pela amilase salivar 1.

.Leia atentamente a actividade experimental que se segue, realize-a utilizando procedimentos cientificamente correctos e de acordo com as regras de higiene e segurana do laboratrio. INTRODUO Esta experincia tem como objectivo observar a aco da amilase salivar sobre o amido. O amido um polissacardeo constitudo por um grande nmero de monossacardeos (glicose) unidos por ligaes glicosdicas (reaco entre dois grupos hidroxilo com libertao de uma molcula de gua). insolvel em gua, no tem sabor doce e desdobrado em maltose e esta em glicose atravs de vrias reaces qumicas catalisadas por enzimas especficas: a amilase salivar e pancretica. Nesta actividade experimental ser usada a a amilase salivar ou ptialina a qual segregada pelas glndulas salivares. As enzimas so protenas compostas por aminocidos e actuam como biocatalisadores que regulam a velocidade de muitas reaces qumicas envolvidas no metabolismo celular. A substncia sobre a qual uma enzima actua chama-se substrato. Este ao ligar-se ao centro activo da enzima desdobrado formando-se duas substncias, dando-se a esta reaco o nome de catabolismo; ou ento, liga-se a outro substrato formando um produto final, reaco anablica. Para que estas reaces se dem necessria energia qual se d o nome de energia de activao.

Figura - Aco da enzima sobre o substrato.

Nesta experincia sero usados 5 tubos de ensaio para testar o meio ptimo onde a enzima actua sobre o amido: utilizou-se HCl para se obter um meio cido; utilizou-se gelo para se obter um meio com uma temperatura baixa e ferveu-se saliva para simular as temperaturas muito altas. O teste do licor de Fehling ser executado nesta experincia. O licor de Fehling, aps aquecimento da lamparina, fica com um precipitado cor de tijolo se contiver muitos acares redutores. A reaco do licor de Fehling com os acares redutores est expressa na figura seguinte.

Figura - Reaco do licor de Fehling com os acares redutores e escala de cores.

PROTOCOLO EXPERIMENTAL 1.1 MATERIAL verifique e confirme a existncia do material da listagem abaixo sobre a bancada.

saliva cozimento de amido a 1% soro fisiolgico a 1% HCl 2 gobels 40 ml 5 tubos de ensaio suporte para tubos de ensaio pipetas graduadas pina de madeira lamparina conta-gotas banho-maria gelo licor de Fehling

1.2 PROCEDIMENTO - leia atentamente o procedimento que se segue e realize-o de acordo com os procedimentos cientificamente correctos que conhece e de acordo com as regras de higiene e segurana do laboratrio (20 pontos) 1. 2. 3. 4. 5. Prepare 5 tubos de ensaio e etiquete-os, numerando-os de 1 a 5. Estimule a produo de saliva (cerca de 4 ml) e recolha-a para um gobel. Faa uma diluio de 1:1 da saliva recolhida em soro fisiolgico. Coloque 1 ml de saliva diluda no tubo de ensaio 3 e ferva. Depois deixe-o arrefecer. A cada tubo adicione 1 ml das substncias indicadas, no quadro 1.

Tubos Substncias a adicionar Amido Saliva HCl Saliva fervida 1 x x 2 x x x x 3 x 4 x 5 x x

Quadro 1- Contedo dos vrios tubos.

6. Adicione a cada tubo, 3 gotas de gua iodada. 7. Tape os tubos e agite-os. Coloque os tubos 1, 2, 3, e 4 em banho-maria, a 37C e o tubo 5 em gelo. 8. Ao fim de 15 minutos remova os tubos do banho-maria e do gelo. Registe os resultados. 9. Faa o teste do licor de Fehling, nos 6 tubos. 10. Registe os resultados.

Figura - Reaco qumica da aco da amilase salivar sobre o amido.

1.3 RESULTADOS na folha de teste realize uma grelha de registo de resultados semelhante do enunciado (10 pontos)

Testes Tubos 1 2 3 4 5 Contedos 1 ml saliva + 1 ml amido 1 ml saliva + 1 ml HCl + 1 ml amido 1 ml saliva fervida + 1 ml amido 1 ml amido 1 ml saliva (no gelo) + 1 ml amido Cor final (Licor de Fehling)

Quadro 2- Quadro de resultados obtidos ao longo da experincia da digesto do amido pela amilase salivar.

1.4 DISCUSSO DOS RESULTADOS relativamente aos resultados obtidos, efectue uma discusso exaustiva dos mesmos com base nos conhecimentos que detm. (20 pontos) No tubo 1, contendo saliva e amido. No tubo 2, contendo saliva, HCl e amido. No tubo 3, contendo saliva fervida e amido. No tubo 4, contendo apenas amido. No tubo 5, contendo saliva e amido e depois colocado no gelo.

1.5 CONCLUSO - Efectue uma concluso descritiva de toda a actividade experimental, com base nos resultados obtidos, no mximo de 15 linhas. (10 pontos)