UNIVERSIDADE FEDERAL DO ESPRITO SANTO

CENTRO DE CINCIAS AGRRIAS

DEPARTAMENTO DE ZOOTECNIA

Roteiro de Aula Prtica de Microbiologia

Aulas 6 e 7: Tcnicas de Semeadura de Microorganismos
I - Introduo
Ao se inocular um microorganismo em um meio de cultura adequado para o seu crescimento in vitro, esse
microorganismo inicia o seu desenvolvimento nesse meio. A inoculao correta da amostra um dos passos mais
importantes na identificao de um patgeno. Os meio devem ser sempre examinados antes da inoculao a fim
de que se verifique a presena de contaminantes j existentes na placa. Nessa aula faremos as seguintes tcnicas
de semeadura de microorganismos: semeadura em estrias em meio slido inclinado, semeadura em meio slido
em placa (esgotamento), semeadura em picada em meio semi-slido. H tambm outras tcnicas de semeadura,
como a semeadura em meio lquido.
II Objetivos

Semeadura em picada em meio semi-slido: Verificar a motilidade do microorganismo no gar semi-slido;

Semeadura em estrias em meio slido inclinado: Obter o crescimento do microrganismo no meio de

cultura afim de:
Estocar a bactria;
Estudar seu metabolismo em uma prova bioqumica;
Avaliar sua capacidade de crescimento ou no no meio de cultura.

Semeadura em meio slido em placa (esgotamento): Obter colnias isoladas, o que permite distinguir os
diferentes microrganismos em um material ou cultura microbiana atravs da sua morfologia colonial.

Semeadura em meio lquido: Propicia o aumento de determinada populao microbiana; aps o

crescimento avantajado pode-se ento proceder ao isolamento de determinadas clulas.

III Materiais
Meios e solues: tubos de ensaio contendo caldo nutriente, tubos de ensaio contendo gar nutriente inclinado, placas de
Petri contendo gar nutriente.
Culturas bacterianas: culturas de E. coli, Staphylococcus e Bacillus subtilis.
Equipamentos e utenslios: ala de repicagem, agulha de inoculao, bico de bunsen.
IV Procedimento

A - Semeadura em picada em meio semi-slido: Semear o microrganismo com auxlio de uma agulha de
inoculao, fazendo uma picada no centro do meio de cultura penetrando at a metade da sua altura.

Aps o perodo de incubao interpretar o resultado:

Bactria mvel: crescimento por todo meio de cultura.
Bactria imvel: crescimento somente no local da picada.

B - Semeadura em estrias em meio slido inclinado: semear o microrganismo com auxlio de ala ou agulha de
inoculao, fazendo estrias na superfcie (pice) do meio.

C - Semeadura em meio slido em placa (esgotamento):

1- Semear o material ou a cultura microbiana com auxlio de uma ala de repicagem, fazendo seqncias de
estrias na superfcie do meio de cultura da placa de Petri (Esgotamento Inicial).
2- Fazer seqncias de estrias de modo a obter o esgotamento do inoculo da ala (estrias do bordo para o
centro da placa) e consequentemente permitir que os microrganismos se desenvolvam formando colnias
isoladas.
OBS: A flambagem da ala entre cada seqncia de estrias aumenta a probabilidade de obteno de colnias
isoladas.