Escolar Documentos
Profissional Documentos
Cultura Documentos
alimentos, visto que resduos de biomassa podem ser utilizados como fontes de
carbono (Vicente, Bautista et al., 2009).
Em microrganismos, o acmulo e a composio de lipdios so influenciados pela
constituio gentica e por fatores como condies de cultura (temperatura, pH,
tempo, etc) e composio do meio. (Meng, Yang et al., 2009). leos microbianos
podem ter grande potencial na produo de biodiesel devido composio de
cidos graxos. Bactrias, leveduras, fungos e algas capazes de acumular mais de
20% de lipdios (peso seco) so classificados como oleaginosos (Karatay e Dnmez,
2011). Os lipdios so um grupo de substncias biolgicas, compostos
principalmente de substncias no polares (triglicerdeos, diglicerdeos,
monoglicerdeos e esteris) e compostos mais polares (cidos graxos livres,
fosfolipdios e esfingolipdios) que se ligam covalentemente aos carboidratos e
protenas para formar glicolipdios e lipoprotenas, respectivamente (Manirakiza,
Covaci et al., 2001)(Halim, Danquah et al., 2012). A anlise da composio de cidos
graxos por mtodos cromatogrficos constitui o primeiro passo para a avaliao da
qualidade do leo bruto e/ou seus produtos de transformao. (Costa Neto, Rossi et al.,
2000).
O biodiesel obtido pelo processo qumico chamado transesterificao, onde os
leos so combinados com lcool e quimicamente alterados para formar steres de
cidos graxos, como ster metlico. Quimicamente, so constitudos por steres
alquilas e no por alcanos e hidrocarbonetos aromticos como os derivados de
diesel (Singh e Singh, 2010). Os catalisadores so normalmente usados para
melhorar a taxa de reao e rendimento. Excesso de lcool usado para deslocar o
equilbrio para o produto devido natureza reversvel da reao (Ma e Hanna,
1999). Para esta finalidade so usados alcois primrios e secundrios alifticos
tendo 1-8 tomos de carbono (Singh e Singh, 2010).
A transesterificao in situ de leos foi investigada por Harrington e Catherine
1985 (1985) que compara o processo convencional e o in situ por catlise cida para
o leo de semente de girassol foram maceradas obtendo-se resultados superiores a
40% na transesterificao in situ e 30% na transesterificao convencional. SilerMarinkovic e Tomasevic, 1998 (1998) estudaram diversas condies de reao in
situ de sementes de girassol como razo molar de lcool e leo, catalisador, tempo,
temperatura e rendimento. A composio dos steres da reao in situ foi mesma
da transesterificao convencional mostrando que os produtos so adequados como
substitutos ao diesel. A transesterificao in situ difere da reao convencional, pois
a extrao do lipdeo e a transesterificao ocorrem simultaneamente. O lcool age
como solvente de extrao e como reagente de esterificao. Esta rota elimina
custos associados extrao simplificando os passos na produo de steres
(Hincapi, Mondragn et al., 2011). O objetivo geral do presente trabalho a
extrao de lipdios de Lipomyces starkeyi caracterizando o leo por mtodos
tericos e experimentais e a transesterificao in situ.
2. MATERIAIS E MTODOS
Neste trabalho, foi utilizada a biomassa da levedura Lipomyces starkeyi DSM
70296 obtida aps 143 h de fermentao. Aps a lavagem com gua destilada, a
biomassa foi centrifugada e congelada a -80C e seca por liofilizao Os lipdios da
biomassa liofilizada foram extrados por Bligh & Dyer (1959), seguidos se anlise da
2
(1)
Os lipdios neutros esto ligados covalentemente e podem ser extrados dos tecidos
por solventes apolares. Lipdios polares, os quais esto ligados por foras
eletrostticas e pontes de hidrognio, requerem solventes polares capazes de
quebrar tais ligaes e liber-los (Brum, De Arruda et al., 2009). A diferena entre os
mtodos de extrao Soxhlet e Butt e apenas na percolao do solvente, o extrator
Butt, o solvente aquecido e evaporado diretamente pela cmara de extrao,
condensando, gotejando-se sobre a parte superior do cartucho de celulose assim
lixiviando a frao lipdica dissolvida no balo (Brum, 2004). A vantagem desse
mtodo a fcil recuperao dos lipdios (Mehlenbacher, 1958).
Na extrao por Butt possvel observar uma melhor eficincia de extrao
quando o solvente de menor polaridade (hexano) empregado. O efeito de
solvatao foi aumentado eficientemente para esse solvente com a mudana no
mecanismo de extrao (cmara de extrao). Para os outros solventes, o resultado
no foi to significativo, pois no houve uma grande variao da porcentagem de
lipdios em relao extrao por Soxhlet.
3.3. Caracterizao do leo de L. starkeyi DSM 70296
3.3.1 Composio do leo
Para a determinao da composio do leo, os cidos graxos foram
esterificados a steres metlicos e analisados por CG. O perfil lipdico do leo de L.
starkeyi e outros microorganismos foram relatados por diversas pesquisas (Liu e
Zhao, 2007; Angerbauer, Siebenhofer et al., 2008; Meng, Yang et al., 2009; Wild,
Patil et al., 2010). O perfil cromatogrfico apresentou similariadade com leo de
palma (Tabela 2).
Tabela 2. Composio percentual dos cidos graxos da L. starkeyi.
C14:0
C16:0
C16:1
C18:0
C18:1
C18:2
Nesse estudo
0,390,02 35,090,2 2,820,095 9,800,15 48,140,5 3,700,3
(Garzn, 2009)
Literatura
0,83
20,38
n.d.
10,77
56,06
11,96
C18:2
1,2
47,9
n.d.
4,8
37,0
9,1
0,4
33,0
0,1
4,7
55,1
1,6
*n.d. no detectado
ndide de Iodo
Mtodos Calculados
leo de Palma
57 g I2/100 g (Ramos,
Fernandez et al., 2009)
L. starkeyi
51, 58 g I2/100 g
ndice de Saponificao
*190 209
196,39
Massa Molar
855,13 g/ mol
Padro
A.1
A. 2
(a)
(b)
Figura 1. (a) Cromatograma das amostras (A.1 e A.2) (b) Placa CCD revelada com
vapores de iodo.
Os cidos graxos de maior concentrao determinados na composio do leo
foram identificados nos cromatogramas de steres etlicos com os picos majoritrios
(hexadecanoato de etila, 9- hexadecanoato de etila, octadecanoato de etila, oleato
de etila) comprovando a similaridade dos resultados. A reao de transesterificao
in situ obteve um rendimento de 88%. Pela anlise em CCD possvel observar
uma separao bem evidenciada com o clculo do fator de reteno (Rf) de 0,57
para o padro (heptadecanoato de metila). As amostras (A.1 e A.2) observado um
perfil bem prximo ao padro aplicado na placa cromatogrfica comprovando o
andamento da reao para a produo de steres etlicos.
4. CONCLUSO
A concentrao mssica de lipdios de L. starkeyi depende do efeito do solvente
sobre a extrao lipdica (Soxhlet e Butt) determinando que a eficincia da extrao
est relacionada diretamente com a polaridade do solvente como determinado pela
composio de acilgliceris. A eficincia do hexano foi aumentada para extrao
Butt, pois obteve maior efeito de solvatao. O leo de L. Starkeyi composto
basicamente por seis cidos graxos entre 14 e 18 carbonos, com baixo grau de
insaturao, caracterstica desejvel para a produo de biodiesel. As
transesterificaes in situ alcalinas necessitam de maior otimizao mas mostram-se
vivel a transesterificaes in situ para a levedura em estudo.
5. REFERNCIAS
AGEITOS, J. M. et al. Oily yeasts as oleaginous cell factories.
Applied Microbiology and Biotechnology, v. 90, n. 4, p. 12191227, May 2011. ISSN 0175-7598.
AOCS AMERICAN OIL CHEMISTS SOCIETY) Official Methods
and
Recommended
Practices
of
the
American
Oil
Chemists`Society [recurso eletrnico CD ROM]. Methods for
biodiesel feedstock quality, Urbana, IL:AOCS Press, c 2007
10
11