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Ol.
com grande satisfao que apresento a voc este curso de
QUMICA, projetado especialmente para atender s necessidades
daquele que se prepara para este concurso de do MAPA, para o cargo de TCNICO DE LABORATRIO. So 184 vagas e uma multido buscando a aprovao. Afinal, o salario INICIAL de mais de
R$ 5.800,00, para nvel MDIO. Um salrio que se consegue em
raros lugares e, ainda, ser funcionrio pblico. Por isto, sua preparao com afinco e dedicao pode ser seu diferencial. E aqui estou,
junto a voc, nesta batalha. Eu e o pessoal da NOVA procuraremos
a sua melhor preparao.
LIGAES QUMICAS
Verifica-se, na natureza, que a maioria dos elementos qumicos encontram-se ligados a outros, e que somente alguns (os gases
nobres) esto isolados. Isso levou os cientistas a conclurem que os
tomos de gases nobres possuem uma configurao eletrnica que
lhes assegura estabilidade.
Os gases nobres apresentam 8 eltrons na ltima camada eletrnica, com exceo do hlio, que possui 2 eltrons, j que a camada
K comporta no mximo 2 eltrons. Essa anlise levou os cientistas
Lewis e Kossel a criarem a chamada Teoria ou Regra do Octeto.
Entender a natureza da ligao covalente dar a voc oportunidade de interpretar e compreender em tamanho microscpico os
fenmenos que envolvem reaes qumicas entre molculas. Nesses casos, as ligaes covalentes que esto sendo quebradas e/ou
formadas produzindo novas substncias, ou seja, transformando a
matria.
Quais eltrons esto envolvidos na formao de uma ligao
qumica? Lewis procurou responder a esta pergunta evocando o modelo atmico de Bohr (1913).
Ligao Covalente
Como foi definida por Lewis, a ligao covalente consiste no
compartilhamento de um par de eltrons entre dois tomos vizinhos.
Lewis props diagramas (ou estruturas) simples para representar os eltrons num determinado tomo e a ligao qumica entre
dois tomos numa molcula. Um dado elemento tende a se combinar com outros para adotar uma configurao com oito eltrons (ou
dois eltrons, no caso do Hidrognio) em sua camada de valncia
(Regra do Octeto).
hidrognio hidrognio
hidrognio no-metal
no-metal no-metal
Obs.: Os semimetais tambm podem ser includos.
importante chamar sua ateno para o fato de que toda ligao covalente tem um carter eletrosttico pronunciado: os eltrons
compartilhados sentem simultaneamente a atrao eletrosttica dos
dois ncleos (Figura abaixo).
Esta hiptese sugere que a formao e a estabilidade das ligaes covalentes podem, de maneira superficial, ser explicadas por
um modelo eletrosttico simples.
Didatismo e Conhecimento
H H (frmula estrutural)
H2 (frmula molecular)
tendncia: ganhar 1e
Resumindo temos:
Ligao Metlica
a fora que mantm unidos os tomos e ctions dos metais.
Didatismo e Conhecimento
Tendncia a receber 1 e B1
Ligao inica pois ocorre com transferncia de eltrons.
Resposta: D
QUESTES PROPOSTAS
Gab:
a) AB e ligao inica.
b) A2B e ligao inica.
c) A2B3 e ligao covalente.
d) AB2 e ligao inica.
e) A2B e ligao covalente.
Didatismo e Conhecimento
Para definir estas substncias existem vrios critrios de classificao. Ns utilizaremos os critrios da condutividade eltrica,
segundo Arrhenius, e o teste com indicadores cido-base para caracterizar semelhana nas propriedades qumicas dessas substncias.
Vale lembrar que o edital s prev as funes cidos e bases.
CIDOS E BASES.
cidos
Introduo
Questo 09) Analise as afirmativas abaixo e indique se as mesmas so falsas ou verdadeiras, justificando cada caso.
a) Slidos inicos so bons condutores de eletricidade.
b) Compostos apolares so solveis em gua.
Desde os tempos dos alquimistas, observou-se que certas substncias apresentavam comportamentos peculiares quando dissolvidos na gua. Entre tais propriedades destacavam-se:
- o sabor azedo facilmente identificado em frutas ctricas, como
limo, laranja e ma (a palavra cido proveniente do latim acidus
- azedo, picante);
Gab:
a) Falsa. Os compostos orgnicos so bons condutores de
eletricidade quando fundidos.
b) Falsa. Compostos apolares so insolveis em gua, pois
esta um solvente polar.
As funes qumicas so um conjunto de substncias com propriedades qumicas semelhantes, que podem ser divididas em orgnicas e inorgnicas.
ANOTAES
Didatismo e Conhecimento
do)
carboxila
O grupo carboxila tambm pode ser representado apenas por:
-COOH
O hidrognio ligado ao tomo de oxignio do grupo carboxila
considerado o hidrognio ionizvel do cido, desta forma na sua
ionizao, teremos:
R-COOH H+ + R-COOEntre os milhares de cidos orgnicos conhecidos, alguns so
de enorme importncia para o homem, como por exemplo:
HCOOH o cido frmico (frmico pois foi descoberto nas
formigas, mas sinttico atualmente)
Didatismo e Conhecimento
- Oxicidos
Sendo HxEzOy a frmula de um cido de um elemento E qualquer, temos
m=y
em que: y = numero de tomos de oxignio
x = nmero de tomos de hidrognios
se:
cido muito forte
m=3
Exemplos: HClO4 , HMnO4...
- Formulao e Nomenclatura
Formulao
O cido formado pelo ction H+ e um nion qualquer (Ax-).
Portanto, podemos representar sua frmula da seguinte maneira:
H+Ax- HxA
cido forte
m=2
Exemplos: HNO3 , H2SO4...
cido moderadoExemplos: H3PO4 , H2SO3 , H3PO3(2
m=1
H+), H3PO2(1 H+)
cido fraco
m=0
Exemplos: HClO, H3BO3
Nomenclatura
Hidrcidos (HxE)
Observao:
1) O cido carbnico (H2CO3) uma exceo, pois um cido
fraco (=0,18%), embora o valor de m = 1
2) Todos os cidos carboxlicos so fracos.
Frmula Estrutural
- Hidrcidos ( HxE)
Cada hidrognio est ligado ao elemento por um trao () que
representa a ligao covalente simples.
Exemplos
Oxicidos (HxEzOy)
Neste caso, como o mesmo elemento pode formar vrios oxicidos, estabelecemos um oxicido padro a partir do qual daremos
nomes aos demais. Oxicido padro cido nome de E ico
Oxicidos (HxEzOy)
Para escrever a frmula estrutural dos oxicidos, devemos proceder da seguinte maneira:
1) escrever o smbolo do elemento central;
2) distribuir ao redor deste elemento todos os oxignios da frmula mencionada.
3) distribuir ao redor dos oxignios os tomos de hidrognio
que sejam ionizveis. Se tiver H no ionizvel (o que ocorre com
cidos do elemento fsforo), os hidrognios no ionizveis devem
ser colocados ao lado do elemento central.
4) Ligar os hidrognios ionizveis aos tomos de oxignio vizinhos, formando grupinhos H-O) e ligar o elemento central a tantos
grupos OH quantos forem os hidrognios ionizveis. Caso haja H
sem ligar, fazer uma ligao simples deste(s) H com o tomo central.
Didatismo e Conhecimento
Como vemos na tabela acima, todo oxicido padro tem terminao ico. Se tivermos um cido com:
a) um oxignio a mais que o padro, acrescentamos o prefixo per;
b) um oxignio a menos que o padro, a terminao muda para oso;
c) dois oxignios a menos que o padro, a terminao continua oso e
acrescentamos o prefixo hipo.
Ionizao dos cidos
A ionizao de um cido, como j vimos anteriormente, na
prpria definio de cido de Arrhenius, a reao do cido com a
molcula de gua, produzindo o ction H3O+.
Se um cido possui dois ou mais hidrognios ionizveis (policido), a ionizao ocorre em etapas.
Exemplos
a)
b)
Nomenclatura dos nions
Podemos considerar que os nions so provenientes dos cidos.
Assim, temos as seguintes terminaes (sufixos) a serem empregados:
Didatismo e Conhecimento
Ex.: NaOH
Ca(OH)2
Ca2+(aq) + 2 OH-(aq)
Al(OH)3
Al3+(aq) + 3 OH-(aq)
Na+(aq) + OH-(aq)
Resumindo teremos:
Bases fortes bases dos metais da famlia 1A e 2A.
Bases fracas bases dos demais metais, Be(OH)2, Mg(OH)2
e NH4OH.
Na+(aq) + OH-(aq)
NaOH
Ca(OH)2
Ca2+(aq) + 2 OH-(aq)
Al(OH)3
Al3+(aq) + 3 OH-(aq)
Sn(OH)4
Sn4+(aq) + 4 OH-(aq)
Observao:
O hidrxido de amnio (NH4OH) a nica base que no apresenta metal em sua frmula sendo proveniente do borbulhamento
da amnia (NH3) em gua. voltil, de natureza molecular, cheiro
muito forte (amonaco) e base muito solvel e fraca (forma poucos
ons em gua).
Exemplos:
NaOH hidrxido de sdio
AgOH hidrxido de prata
Ca(OH)2 hidrxido de clcio
Zn(OH)2 hidrxido de zinco
Al(OH)3 hidrxido de alumnio
NH4OH hidrxido de amnio
Exemplos:
Hidrxido de potssio K+ = KOH
Hidrxido de magnsio Mg2+ = Mg(OH)2
Hidrxido de alumnio Al3+ = Al(OH)3
Hidrxido de amnio NH4+ = NH4OH
Hidrxido de zinco Zn2+ = Zn(OH)2
Hidrxido de prata Ag+ = AgOH
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QUESTES PROPOSTAS
Questo 01) O cido clrico um cido forte, utilizado como
catalisador em reaes de polimerizao e como agente oxidante.
Solues aquosas desse cido pode causar grande irritao na pele
e nas mucosas.
a) Represente a frmula estrutural do cido clrico.
b) Qual o nome do sal formado pela reao de neutralizao
do cido clrico pelo hidrxido de alumnio?
GAB
Questo 04) Sabe-se que a chuva cida formada pela dissoluo, na gua da chuva, de xidos cidos presentes na atmosfera.
Entre os pares de xidos relacionados, qual constitudo apenas por
xidos que provocam a chuva cida?
a) Na2O e NO2
b) CO2 e MgO
c) CO2 e SO3
d) CO e NO2
e) CO e NO
Alternativa C.
O CO2 reage com a gua formando soluo cida e responsvel pela acidez natural da chuva em ambientes no poludos. O SO3 reage com a gua formando cido sulfrico e um
dos principais responsveis por diminuir o pH da chuva a nveis
perigosos para o ambiente.
Questo 05) Ao se dissolverem 5 molculas-grama de um cido HX, em quantidade suficiente de gua, constatou-se que 4 molculas-grama do soluto se ionizaram. Pedem-se:
a) o grau de ionizao de HX;
b) o nmero de ons existentes na soluo obtida.
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Questo 06) Os cidos podem ser classificados quanto ao nmero de hidrognios ionizveis. O cido hipofosforoso, H3PO2, utilizado na fabricao de medicamentos, apresenta frmula estrutural:
H
H
Questo 03) A equao que representa corretamente a dissociao inica de uma base pouco solvel, de frmula M(OH)x, :
a) M(OH)x Mx+ + OHb) M(OH)x xM+ + xOHc) M(OH)x Mx+ + xOHd) M(OH)x Mx+ + OHxe) M(OH)x xM+ + OHGab: C
Questo 05) Uma base forte deve ter ligado ao grupo OH:
a) um elemento muito eletropositivo
b) um elemento muito eletronegativo
c) um semimetal
d) um metal que d 3 eltrons
e) um ametal
Gab: A
Questo 06) Na embalagem de um produto usado para desentupir pias e ralos, base de
soda custica (hidrxido de sdio NaOH), so encontradas,
entre outras, as instrues:
Cuidado: Em caso de contato, lavar imediatamente os olhos ou
a pele com gua em abundncia durante quinze minutos. Se ingerido, no provocar vmito. Dar grande quantidade e tambm vinagre
diludo em um copo de gua. A seguir, dar uma colher de leo comestvel.
No reaproveitar a embalagem vazia. Lavar a colher utilizada
como medida com bastante gua corrente antes de reutiliz-la. No
adicionar gua embalagem do produto.
O quadro abaixo relaciona algumas dessas instrues com as
justificativas para o uso desses procedimentos, com base nas propriedades da soda custica e das outras espcies envolvidas. Assinale a alternativa que contm uma justificativa INCORRETA para
a instruo relacionada.
a) Instruo : Dar vinagre diludo em um copo de gua. Justificativa : O vinagre diludo neutraliza a soda custica atravs de
reao cido-base.
b) Instruo : Lavar a colher utilizada como medida com bastante gua corrente antes de reutiliz-la. Justificativa : A utilizao
de grande quantidade de gua deve-se ao fato de a soda custica ser
insolvel na gua.
c) Instruo : No adicionar gua embalagem com o produto. Justificativa : A adio de gua embalagem com produto provoca forte aquecimento
QUESTES PROPOSTAS
Questo 01) Na reao entre os gases N2 e H2 , obtm-se unicamente gs amnia. A soluo aquosa de amnia recebe o nome
de amonaco (hidrxido de amnio), que o componente ativo de
produtos de limpeza usados para remoo de gorduras.
A partir dessas informaes, considere as seguintes afirmaes:
I. O hidrxido de amnio tem frmula NH3 .
II. Na formao do gs amnia, a reao ocorrida de sntese.
III. O amonaco tem frmula NH4OH .
IV. A amnia tem frmula NH4OH .
V. O cheiro irritante e forte, que se sente quando se usa amonaco, proveniente do gs nitrognio.
Esto corretas, somente:
a) I e IV .
b) II e V .
c) II e III .
d) I e II .
e) III e V.
Gab: C
A reao de sntese da amnia pode ser representada por:
N2(g) + 3H2(g) 2NH3(g)
Didatismo e Conhecimento
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d) Instruo : No reaproveitar a embalagem vazia. Justificativa : A embalagem pode estar contaminada com resduos de soda
custica
Gab: B
Questo 07) Os halognios pertencem a uma classe de elementos com acentuada reatividade. Esto presentes na composio qumica de muitos cidos como o HF, HCl, HBr e HI. Considerando os
dados mostrados na tabela a seguir:
Constante de
acidez a 25
HF(aq) + H 2 O()
H 3 O () + F (aq )
3,5 10
H
C (aq) + H 2 O()
H 3 O + () + C (aq )
1,0 10
HBr(aq) + H 2 O()
H 3 O + ( ) + B
r
1,0 10
HI(aq) + H 2 O()
H 3 O + () + I (aq )
3,0 10
(aq )
Gab: C
Questo 11) Para distinguir uma soluo aquosa de HF (cido
fraco) de outra de HCl (cido forte), de mesma concentrao, foram
efetuados os seguintes procedimentos independentes com cada uma
das solues.
te.
so:
Indicadores cido-base
Voc j observou como a cor do ch muda ligeiramente quando
se junta algumas gotas de um limo? O ch est agindo como um
indicador, mostrando que o limo aumentou a acidez. Alguns produtos qumicos coloridos so usados para mostrar se uma soluo
cida ou bsica (alcalina).
Fenolftalena (conta-gotas) em presena de vinagre que contm cido actico (meio cido) permanecer incolor.
Indicadores naturais
Os corantes obtidos das frutas e vegetais, como pras, amora,
hortnsias, cebolas e repolho roxo, podem tambm ser indicadores.
Eles mudam de cor conforme o pH.
O crculo interior uma escala colorida de um indicador universal: cor-de-rosa no cido forte (pH = 0), azul na base forte (pH
= 14). Os crculos externos mostram como a cor dos sucos de repolho roxo, pra, rabanete e beterraba mudam com o pH.
Fenolftalena
14
!
O suco de repolho roxo pode constituir um bom indicador universal de pH, podendo substituir os papis indicadores universais,
que so encontrados apenas em lojas especializadas.
O papel de tornassol vermelho no muda de cor em meio cido
(esquerda) e fica azul em meio bsico (direita).
Tornassol
Fenolftalena
cida
Vermelho
Incolor
Bsica
Azul
Vermelho
de grande interesse estudarmos os processos usados para obteno dos elementos, a partir de fontes naturais e como so fabricadas algumas substncias de grande interesse industrial e comercial.
Constituio da Terra
O planeta Terra, para efeitos de estudos, dividido basicamente
em trs partes: litosfera, hidrosfera e atmosfera.
Atmosfera
Atmosfera a camada gasosa ao redor da Terra.
O papel de tornassol obtido a partir de uma espcie de lquen (organismo de estrutura simples formada pela associao de
um fungo com uma alga), que fica vermelho em meio cido e azul
em meio bsico.
Didatismo e Conhecimento
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Hidrosfera
Hidrosfera a parte lquida da Terra que corresponde a cerca de
80% da superfcie.
A gua dos oceanos apresenta uma grande variedade de sais
dissolvidos, constituindo-se em fonte principal de obteno de vrios elementos, como bromo, magnsio, sdio, cloro, etc.
Os sais dissolvidos correspondem a 3,3% da gua dos oceanos.
Os elementos que podem ser obtidos da gua dos oceanos apresentam a seguinte abundncia:
O oxignio e o silcio so os elementos mais abundantes da
crosta terrestre, seguidos do alumnio e do ferro. Esses e os demais
elementos encontrados na crosta terrestre compem os chamados
minerais.
Minerais so substncias presentes na crosta terrestre que se
encontram em determinados depsitos. So provenientes da concentrao de vrios elementos que ocorreram com o passar das eras
geolgicas, devido a vrios processos como fuso, cristalizao, dissoluo e precipitao, formando compostos estveis.
Resumindo temos:
Mineral uma substncia simples ou composta que se forma naturalmente na crosta terrestre.
Grande parte dos minerais apresentam, na sua formao, elementos metlicos, cuja extrao desejada.
Litosfera
Didatismo e Conhecimento
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O minrio encontrado na natureza em locais que so chamados minas ou jazidas. O processo de extrao do minrio das minas
chamado de minerao.
Os processos utilizados para obteno dos metais, a partir dos
seus minrios, a metalurgia.
- Purificao do Metal
O metal obtido pelas etapas 1 e 2 contm geralmente pequenas
quantidades de outros metais e/ou no-metais, que devem ser removidos ou no, dependendo da aplicao do metal.
Didatismo e Conhecimento
O cloro encontra-se combinado como cloreto, como os minerais habita (NaCl) e siluita (KCl) em depsitos subterrneos e tambm, nos oceanos.
O cloro um germicida poderoso, usado na purificao da gua
de beber.
obtido industrialmente pela eletrlise de soluo aquosa de
cloreto de sdio.
2NaCI + 2H2O 2NaOH + H2+ CI2
Em laboratrio, pela reao do cido clordrico com dixido de
mangans:
MnO2 + 4 HCI MnCI2+2H2O+CI2
O cloro usado como alvejante industrial no tratamento da celulose para a fabricao de papel, na obteno de compostos como o
cido clordrico, o inseticida BHC (bezeno hexaclorado), etc.
Quando o cloro borbulhado em uma soluo de hidrxido de
sdio temperatura ambiente, ocorre a reao:
Cl2(g) + 2OH-(aq) ClO-(aq) + Cl-(aq) + H2O(l)
A soluo resultante comercializada como gua sanitria para
uso domstico e como desinfetante.
Em laboratrio, obtido pelo tratamento de uma mistura de iodeto de potssio e dixido de mangans com cido sulfrico:
2KI + MnO2 + 3H2SO4 2KHSO4 + MnSO4 + 2H2O + I2
O iodo usado na produo do iodofrmio (CHI3), na fabricao de remdios, desinfetantes, corantes e na indstria fotogrfica
(KI e AgI).
O sal de cozinha iodado (NaCl + NaI) tem a finalidade de combater o hipertireoidismo (doena do bcio).
Hidrognio (H2)
um gs incolor, inodoro, combustvel (chamado combustvel
do futuro). Na Terra, o hidrognio raramente se encontra livre, mas
combinado, geralmente com o oxignio, formando gua.
A molcula de hidrognio to leve que, ao ser libertada, rapidamente sobe aos nveis mais altos da atmosfera de onde, aos poucos, se perde no espao.
obtido industrialmente:
a) a partir do carvo
- Bromo (Br2)
um lquido castanho-avermelhado, de cheiro repugnante, txico, venenoso.
Parcialmente solvel em gua, reagindo com ela e produzindo
gua de bromo.
b) processo Lane
3Fe + 4H2O
c) eletrlise
2H2O
2H2 + O2
2NaCI + 2H2O
2NaOH + H2 + CI2
d) Em laboratrio
Pela reao de cidos com metais mais reativos que o hidrognio.
Zn(S) + 2HCI(aq) ZnCI2(aq)
O hidrognio usado na hidrogenao de leos vegetais para a
produo de margarina, como combustvel, na formao de vrios
compostos, como NH3 e HCl.
- Iodo (I2)
Oxignio (O2)
um slido cinza-escuro, com um brilho semimetlico. Sublima a 184 oC, dando vapor violeta. praticamente insolvel em
gua. solvel em etanol, formando a tintura de iodo que era utilizada como desinfetante e antissptico.
Fe3O4 + 4H2
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I. Processo Haber-Bosch
Neste processo, a temperatura fica entre 500 a 600 C, a presso
de 200 atmosferas e o catalisador o smio ou o urnio.
O resultado uma soluo amonaca com rendimento de 15%.
II. Processo de Claude
Neste processo, a temperatura tambm de 500 a 600 C, s
que a presso de 1000 atmosferas e o catalisador o ferro. Resulta
o gs amonaco liquefeito, com rendimento de 40%.
Em laboratrio
a) Processo Solvay
Ao da cal viva quente sobre o cloreto de amnio.
- Nitrognio (N2)
A vitrificao difere das tcnicas de refrigerao e de armazenagem tradicionais que permite a solidificao transparente
instantnea dos ovos e dos embries sem a formao de cristais de
gelo. Durante a vitrificao o embrio mergulhado no nitrognio
lquido de -196C.
um gs, incolor, inodoro e inspido.
um gs inerte. Ocorre na Terra como o principal constituinte
do ar atmosfrico (~ 78% em volume) onde se encontra livre (N2).
difcil encontrar compostos inorgnicos do nitrognio como
minerais, pois a maioria solvel em gua.
O nitrognio encontrado em compostos orgnicos em todos os
seres vivos, animais e plantas.
Certas bactrias no solo e razes de algumas plantas, especialmente os legumes, convertem o nitrognio atmosfrico em nitrognio orgnico, que ento transformado por outras bactrias em
nitrato, a forma de nitrognio mais usada pelas plantas na sntese
de protenas.
O nitrognio obtido industrialmente por liquefao e posterior
destilao fracionada do ar atmosfrico.
Em laboratrio, obtido pela decomposio do nitrito de amnio (NH4NO2):
2NH4CI + CaO
Enxofre
O enxofre encontrado livre na crosta terrestre, bem como
combinado com outros elementos, principalmente na forma de sulfetos, como a galena (PbS), pirita (FeS2) e vrios sulfatos, como o
sulfato de clcio etc.
NH + OH
Didatismo e Conhecimento
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Alumnio (Al)
o metal mais abundante da litosfera, ocorre nos aluminossilicatos, argilas, micas e feldspatos.
obtido industrialmente pelo processo Hall, que consiste na
eletrlise gnea da alumina (Al2O3) proveniente da bauxita.
O mineral de alumnio bauxita, que xido de alumnio e
hidrato impuro Al2O3 nH2O.
Inicialmente a bauxita purificada, pelo processo de Bayer, formando a alumina (Al2O3).
A alumina dissolvida em criolita (Na3AlF6) fundida e eletrolisada a cerca de 1.000C.
4FeS2 + 11O2
QUESTES RESOLVIDAS
Questo 01) Descreva um mtodo de preparao do cido ntrico economicamente vivel e utilizado pelas indstrias qumicas
modernas para a produo em grande escala. Utilize equaes balanceadas para representar as reaes qumicas que ocorrem com o
emprego do mtodo proposto.
2Fe2O3+8SO2
RESOLUO:
Trata-se de um cido lquido e incolor, txico, corrosivo e
com ponto de ebulio de 83C.
2SO3
O SO3 dissolvido em H2SO4, produzindo o cido pirossulfrico, chamado antigamente de oleum ou cido sulfrico fumegante
(H2S2O7).
SO3(g) + H2SO4(l) H2S2O7(l)
A adio de gua ao cido pirossulfrico produz um cido sulfrico de alta concentrao.
H2S2O7(l) + H2O(I)
2H2SO4(I)
RESOLUO
Em laboratrio preparado a partir do NaCl(s) em reao
com soluo aquosa de cido sulfrico.
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III-procedimento:
- Colar em um balo de fundo redondo 10mL de soluo de
Hidrxido de Clcio e 20mL de soluo de Cloreto de Amnio.
Tampar o balo e montar a aparelhagem conforme o esquema
descrito acima.
- ATENO: a ponta do tubo de vidro que fica dentro do
balo onde ser recolhido o gs deve ser bem estreita.
- aquecer o sistema por alguns minutos, em chama branda.
- desligar o bico de Bnsen. Retirar imediatamente o tubo
de borracha que faz a conexo dos dois bales .
FORMAS CONTROLADORAS:
Do ponto de vista tcnico, podemos empregar algumas medidas, tais como:
- Usar carvo mineral mais purificado;
- Utilizao de sistemas de absoro adequados de SO2 em
caldeiras;
- Eliminao do enxofre existente no petrleo;
- Diminuio do uso de transporte particular e aumento do
uso de transporte coletivo.
Questo 06) Um processo de gravao em vidro envolve a
ao corrosiva do cido fluordrico. O cido fluordrico, em soluo
aquosa, reage com o dixido de silcio da superfcie do vidro, originando tetrafluoreto de silcio gasoso e gua.
Escreva a equao qumica balanceada da reao que ocorre
no processo de gravao em vidro, indicando os estados fsicos de
reagentes e produtos.
Gab: 4 HF(aq) + SiO2(s) SiF4(g) + 2 H2O(l)
I- objetivo:
Obter gs amonaco
II- material:
Bquer, proveta, bales de fundo redondo, tubo de vidro
com ngulo de 45o, tubo de vidro com uma das extremidades
bem estreita, tubo de borracha, rolhas furadas, suporte universal, garras, bico de Bnsen, trip de ferro, tela de amianto, gua,
solues de cloreto de amnio e de hidrxido de clcio.
Didatismo e Conhecimento
As mars vermelhas consistem na liberao de toxinas por cianofceas e dinoflagelados e podem causar a morte de peixes, outros
animais, acumular em bivalentes e at mesmo provocar no homem
a parlyticshllfish poisoning, alm de tudo, podem sair do mar na
forma de aerosois e atingir animais domsticos e o prprio homem.
RELAO COM O NITORGNIO
medida que ocorre aumento na mortandade de peixes e outros animais marinhos, ocorre uma aumento da quantidade de matria orgnica sem decomposio e tambm em aumento direto na
formao de nitritos e nitratos que so fontes de nitrognio para o
fitoplncton.
RESOLUO
a) RESERVATRIOS OU FONTES
o nitrognio atmosfrico (78% aproximadamente em volume)
- jazidas de nitratos de sdio e potssio
- compostos orgnicos de todos os seres vivos ou em cadveres
aonde so transformados por bactrias um nitritos e nitratos;
- descargas eltricas e etc.
b) FIXAO NATURAL
Bactrias : Azobacter clostridium ou nitrobactrias das leguminosas.
Algas: cianofceas estas utilizam o nitrognio atmosfrico ou
at mesmo o on fazendo a sua fixao
c- trata-se na utilizao do nitrognio elementar obtido em laboratrios ou por destilao fracionada do ar lquido:
Laboratrio:
2 NaN3(s) Na(s) + 3 N2(g)
NH4NO2(s) N2(g) + 2 H2O(g)
Sendo que esse nitrognio utilizado em diversos segmentos:
preparo industrial da NH3
preparo industrial do HNO3
preparo industrial de fertilizantes
exemplos de fertilizantes:
NATURAIS:
O = C(NH2) ----- Uria ---------------- via excreo
NaNO3------------ Nitrato de Sdio-----Salitre do chile
Guano-------------Excreo de aves marinhas
NO-2 e NO-3----Obtidos na decomposio bacteriana de
materiais orgnicos
SINTTICOS:
O = C(NH2)--------Sntese industrial
(NH4)2SO4----------Sulfato de amnio
Ca(NO3)2-----------Nitrato de clcio
NH4NO3------------Nitrato de amnio
Alguns fosfatos inorgnicos
Organismos marinho (plncton)como dinoflagelados, algas
azuis (cianofceas) e piridneos, principalmente so capazes de
provocar uma colorao tpica que o vermelho, porm pode ser o
amarelo, castanho avermelhado o leitoso etc, na gua do mar. Tal fenmeno (florescncia) pode ser desencadeado por diversos fatores,
tais como temperatura , salinidade, luz , nutrientes, estabilidade da
coluna de gua: alguns processos oceanogrficos como mars, ventos , divergncia , convergncia, diversidade, presena de quelantes
na gua, vitaminas, substncias hmicas tambm so capazes de
desencadear estes processos.
Didatismo e Conhecimento
22
disperso
dimetro (d)
visibilidade
decantao
ao do filtro
exemplos
etc.)
soluo
tomos, ons, molculas
d < 1nm
no so visveis
no decanta
no separa
sal em gua
disperso coloidal
aglomerados
1nm < d < 1000nm
visvel no ultramicroscpio
decanta no ultracentrifugador
separa no ultrafiltro
gelatina em gua
Suspenso
grandes aglomerados
d>1000nm
visvel a olho nu
decantao espontnea
separa no filtro comum
gua barrenta
-Soluo lquida
O solvente sempre lquido e o soluto pode ser: slido, lquido ou gasoso.
Exemplos: soro fisiolgico (gua - solvente, sal - soluto), refrigerantes (gua - solvente, gs carbnico - soluto), lcool hidratado (gua solvente, lcool - soluto)
-soluo gasosa
O solvente gasoso e o soluto gasoso.
Exemplo: ar atmosfrico filtrado
De acordo com a natureza do soluto
Soluo molecular
As partculas dispersas do soluto so molculas. A soluo molecular tambm chamada de soluo no-eletroltica.
Exemplo: gua + acar (C6H12O6).
Soluo inica
As partculas dispersas do soluto so ons ou ons e molculas (dependendo do sal ou do cido).
Exemplo: gua + sal (NaCl), gua + cido clordrico (HCl)
- De acordo com a proporo do soluto em relao ao solvente
Num determinado dia, ao receber visitas em sua casa, voc resolve preparar suco de laranja e suco de uva para servir a seus convidados. Ao
servir o suco de laranja, nota-se que algumas pessoas fazem cara feia e dizem: nossa como est forte! Enquanto que outras pessoas que beberam
suco de uva dizem: Hum, este est muito fraco!
Nestes dois casos descritos acima, podemos observar que temos dois tipos de solues: diluda e concentrada.
Diluda
Pouco soluto dissolvido em relao ao solvente (suco de uva).
Concentrada
Muito soluto dissolvido em relao ao solvente (suco de laranja).
Ao juntarmos, gradativamente, acar e gua em temperatura constante e sob agitao contnua, notamos que o slido se dissolve, at no
poder ser mais visto. Vamos acrescentando mais acar e tornando a soluo mais concentrada, at que em um dado momento, o acar no
se dissolve mais na gua, mas se deposita no fundo ou se precipita ou se deposita ou se decanta. Neste momento, dizemos que a soluo est
saturada e apresenta um corpo de fundo.
-Saturada
Soluo que contm uma quantidade mxima de soluto dissolvido no solvente numa determinada temperatura e presso.
Esta quantidade mxima de soluto dissolvido expresso atravs do coeficiente de solubilidade (CS).
Por exemplo, a 20 C, a solubilidade do KNO3 31,6 g em cada 100 g de H2O. Isto significa que podemos dissolver at 31,6 g de KNO3 a
20 C em 100 g de H2O.
Didatismo e Conhecimento
23
Interpretando o grfico:
na temperatura de 50C, a quantidade mxima de KNO3 que
se dissolve em 100 g de gua so 80 g. A soluo em questo
saturada;
para obtermos uma soluo saturada KNO3 a 40C, basta dissolver 60 g de KNO3 em 100 g de gua;
se resfriarmos uma soluo saturada de 50C para 40C, teremos um corpo de fundo igual a 20 g de KNO3;
200 g de gua a 40C dissolvem no mximo 120 g de KNO3.
-insaturada ou no saturada
Ocorre quando a quantidade de soluto adicionada inferior ao
coeficiente de solubilidade. Por exemplo, o coeficiente de solubilidade do KNO3 em gua a 20 C 31,6 g/100 g H2O, portanto, a
adio de qualquer quantidade de KNO3 abaixo de 31,6 g em 100 g
de gua, a 20 C, produz soluo insaturada.
-Supersaturada
Soluo que contm uma quantidade de soluto dissolvido superior soluo saturada por meio de uma variao de temperatura.
Por exemplo: a 40 C, a solubilidade do KNO3 61,47 g/100 g
H2O e, a 20 C, 31,6 g/100 g H2O.
As solues supersaturadas so instveis, ou seja, qualquer
perturbao no meio ir fazer com que o KNO3 precipite, tornando
o sistema heterogneo.
O processo de dissoluo: interaes soluto/solvente; efeitos
trmicos.
Solubilidade de Gases em Lquidos
Normalmente, os gases so pouco solveis nos lquidos. Dois
fatores alteram consideravelmente a solubilidade:
Observe:
Temperatura
Todo aumento de temperatura diminui a solubilidade do gs
no lquido. Por exemplo, para eliminar gases dissolvidos na gua,
feito o aquecimento por um certo perodo de tempo. Sendo assim,
a diminuio da temperatura facilita a solubilidade de um gs num
lquido.
Presso
Quando no ocorre reao do gs com o lquido, a influncia da
presso estabelecida pela lei de Henry:
Em temperatura constante, a solubilidade de um gs num lquido diretamente proporcional presso.
Por exemplo, podemos citar os refrigerantes, que apresentam
grande quantidade de CO2 dissolvido sob presso. Quando o refrigerante aberto, a presso diminui, fazendo com que o excesso de
CO2 dissolvido no refrigerante escape.
Curvas de Solubilidade
So diagramas que mostram a variao dos coeficientes de solubilidade das substncias em funo da temperatura.
Analisando o grfico ao lado, observamos que regies abaixo
da curva representam soluo no-saturada, sobre a curva, regio
saturada e acima da curva, desde que as quantidades permaneam
em soluo, regio supersaturada.
O grfico ao lado representa a solubilidade de vrias substncias em funo da temperatura.
Observamos que a maioria das substncias aumenta a solubilidade com o aumento da temperatura. Podemos dizer, ento, que se
trata de uma dissoluo endotrmica.Para uma substncia como
Ce2(SO4)3, a solubilidade diminui com o aumento da temperatura;
portanto, trata-se de uma dissoluo exotrmica.
O grfico do coeficiente de solubilidade em funo da temperatura utilizado principalmente para informar a solubilidade de uma
ou vrias substncias em funo da temperatura. Por exemplo:
Didatismo e Conhecimento
Outras unidades podem ser empregadas, tais como mg, mL, etc.
Exemplo
Calcular a concentrao em g/L de uma soluo com 40 g de
soluto em 500 cm3 de soluo.
Densidade (d)
Indica a relao da massa da soluo pelo volume por ela ocupado.
Dados:
Massa do soluto = 40 g
Volume da soluo = 500 cm3 = 0,5 L
Concentrao da soluo = ? (g/L)
Observao
No confunda Concentrao Comum (C) e densidade (d). Na
densidade leva-se em considerao as massas do soluto e do solvente.
RESOLUO
40 g de soluto ------------------ 0,5 L de soluo
X ------------------ 1,0 L de soluo
X = 80 g de soluto
Desta forma ficamos com: C = 80 g/L
QUESTES RESOLVIDAS
Questo 01) Preparou-se uma soluo dissolvendo-se 40g de
Na2SO4 em 100g de gua a uma temperatura de 60C. A seguir a soluo foi resfriada a 20C , havendo formao de um slido branco.
Ttulo
Indica a relao da massa do soluto pela massa da soluo.
Pode ser multiplicado por 100 e, assim, corresponder ao que considerado a porcentagem em massa do soluto na massa da soluo.
Exemplos
- No rtulo de um frasco de soro fisiolgico 0,9 % interpretamos da seguinte maneira: em 100 mL do soro fisiolgico temos 0,9
g de NaCl.
Didatismo e Conhecimento
Questo 02 ) O grfico a seguir expressa os coeficientes de solubilidade (Cs) do KClO3 em 100g de gua em vrias temperaturas:
25
20 16 12 8 -
4 -
C s(g /1 0 0 g d e g u a )
10
20
30
40
50
T (C )
Para a soluo inicial:
Calcule:
a) a percentagem do KClO3 que dissolve quando adiciona
12g de KClO3 em 100g de gua a 25C.
b) a massa de KClO3 contida em 240g de soluo a 50C.
GAB:
a) 67% aproximadamente
b) 48g de KClO3
Questo 03) Num exame laboratorial, foi recolhida uma amostra de sangue, sendo o plasma separado dos eritrcitos, ou seja , deles isolado antes que qualquer modificao fosse feita na concentrao de gs carbnico. Sabendo-se que a concentrao de CO2. Neste
plasma foi de 0,025 mol/L, essa mesma concentrao em g/L de :
Gab: C = 1,1g/L
Questo 04) Num refrigerante do tipo cola, a anlise qumica determinou uma concentrao de ons fosfato ( PO43-) igual a
0,15 g/L. Qual a concentrao de fosfato, em moles por litro, neste
refrigerante?
No esquecendo que V = V + V2 ou m = m + m2
Observao
Concentrar uma soluo significa aumentar a concentrao pela
retirada de solvente. O solvente retirado por meio de uma evaporao, desde que o soluto no seja voltil. As frmulas utilizadas so
as mesmas apresentadas anteriormente, apenas, ao invs de aumentar o volume final, ele deve diminuir.
RESOLUO
Al + HCl AlCl3 + 3/2H2
m=13,5g V=?
M=0,25mol/L
Clculo do nmero de mol do HCl
27g Al----------------------3mol HCl
13,5g Al-------------------- X
X=1,5mol
Clculo da concentrao molar do HCl
M= n1 /V M = 1,5 / 0,25 M = 6mol/L
QUESTES RESOLVIDAS
Questo 01) Quanto de gua deve ser acrescentado 100 mL
de lcool 96%(v) a fim de transform-lo 46%(v).
DILUIO
Diluir uma soluo consiste em adicionar uma quantidade de
solvente puro, que provoca uma mudana no volume, mudando com
isso a proporo soluto/solvente e, portanto, a concentrao da soluo se altera (diminui).
Didatismo e Conhecimento
Resoluo
1 Opo (Utilizando a frmula)
% . V = % . V 96 . 100 = 46 . V V = 208,7 mL
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Erlenmeyer: Serve para recolher fraes de materiais destilados ou para conter misturas que sero homogeneizadas.
mL
Inicialmente, para sua familiarizao com o preparo de solues de extrema importncia que voc conhea os principais materiais de laboratrio.
Chamarei aqui de material de laboratrio aos instrumentos e/
ou equipamentos utilizados para realizar experincias, efetuar medies, estudar substncias ou recolher dados e PREPARAR SOLUES.
Abaixo, segue uma relao de alguns destes materiais e vidrarias, com suas principais utilizaes no laboratrio qumico:
Balo de fundo chato: Para armazenar, preparar, aquecer ou
recolher solues. Podem ser de vidro transparente ou mbar.
Didatismo e Conhecimento
27
28
Trip de ferro: Usado como apoio para tela de amianto e outros objetos a serem aquecidos.
Kitassato: Recipiente de vidro com paredes super-reforadas e
indicado para filtraes a vcuo.
Didatismo e Conhecimento
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QUESTO PROPOSTA
QUESTO 01) Preparo da soluo de NaOH. Ser considerado o preparo de 1 litro de soluo estoque a 0,15M.
RESOLUO:
-Massa de NaOH a ser pesada: M = n1
M = 0,15 M
V ( L)
V=1L
n= 0,15 mol
n1 =
m1
P
M 1
d) Complete o volume do balo, enchendo-o com gua destilada at o trao de referncia. O balo deve ser arrolhado e agitado
para homogeneizao.
H3O+ + OH
H2O + H2O
Ou simplesmente: H2O
H+ + OH
Como toda ionizao, a da gua tambm atinge um equilbrio,
chamado equilbrio inico da gua. Um litro de gua a 25 C tem
massa igual a 1.000 g. Portanto, em 1 litro, temos aproximadamente
55,5 mols de gua:
30
K.[H2O] = [H+].[OH-]
do que resulta uma nica constante (o produto de duas constantes), ou seja:
Kw = [H+].[OH-],
que o chamado produto inico da gua, onde o w se deve
palavra inglesa water.
O produto inico da gua, Kw, tem valor igual a 1014 a 25 C.
K
uma constante de equilbrio e como tal no afetada pela
w
variao na concentrao de H+ ou OH, mas varia com a temperatura.
pH e pOH
Para no se trabalhar com potncias negativas, Peter L. Srensen props uma nova escala para as medidas de acidez e basicidade
das solues, utilizando logaritmo segundo as definies:
Como log 1 = 0:
pOH = -log[OH-] ou pOH = colog [OH-]
Neste caso:
Exemplo
Neste caso:
Exemplo
Qual o pH de uma soluo de concentrao hidrogeninica
igual a 105 ?
Didatismo e Conhecimento
Portanto, a 25C:
Lembre-se sempre que as solues podem ser:
31
RESOLUO
Soluo-I Soluo-II Soluo-Final
[H+]I =10-1mol/L [H+]II =1,0mol/L [H+]F =? mol/L
VI= 1,0mL VII= 100mL VF= 101mL
Clculo da concentrao de H+ na soluo final
([H+]I x VI ) + ( [H+]I x VII) = [H+]I x VF
(10-1mol/L x 1,0mL) + (1,0mol/L x 100mL) = 101mL x [H+]F
[H+]F = 1,0mol/L
Assim, podemos calcular o pH como sendo:
pH = -log[H] pH = - log1 pH = 0
Observao:
Os conceitos de pH e pOH indicam que em qualquer soluo
coexistem H+ e OH-. Por mais cida que seja a soluo, sempre existiro, embora em pequeno nmero, ons OH-. Nas solues bsicas
tambm estaro presentes os ons H+. As concentraes desses ons
jamais se anulam.
F e
+ 3 H 2O
(L )
F e(O H )3
(s )
+ 3 H
+
(a q )
Portanto:
Escala de pH e pOH:
3 +
(a q )
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Didatismo e Conhecimento
33
-Os fluidos biolgicos so tamponados, utilizando para isso vrias substncias (cidos, bases e sais) que existem no organismo. O
sangue humano apresenta, normalmente, pH em torno de 7,4. Um
aumento ou diminuio de 4 dcimos neste valor, causa morte do
indivduo. Os sucos digestrios tambm so tamponados, pois as
enzimas que catalisam as reaes orgnicas atuam em determinadas
faixas de pH.
Como o cido fraco, a sua concentrao praticamente no varia durante a ionizao, e a quantidade de on A- produzida muito
pequena. Por outro lado, o sal se dissocia totalmente, produzindo
quase todo on A-, presente na soluo.
Portanto, a expresso da constante de equilbrio ficar:
-Determinados medicamentos so tamponados com o objetivo de melhorar a sua atuao ou atenuar os efeitos colaterais. Um
exemplo de medicamento tamponado o Bufferin, que atua como
analgsico e antiinflamatrio. Este medicamento constitudo por
cido acetilsaliclico (AAS ou aspirina) tamponado com carbonato
de magnsio e aminoacetato de alumnio.
O pH e o Sangue
Como j dito, muitos processos qumicos dependem do controle de pH; no corpo humano no diferente. O balano entre os
cidos e as bases no organismo se caracteriza pela busca permanente
do equilbrio.
Didatismo e Conhecimento
34
-O mecanismo respiratrio: O terceiro mecanismo de controlo do pH do sangue envolve a excreo do dixido de carbono. O
dixido de carbono um subproduto importante do metabolismo
do oxignio e, conseqentemente, produzido constantemente pelas
clulas. O sangue transporta o dixido de carbono at os pulmes,
onde expirado. Os centros de controle respiratrio localizados no
crebro regulam a quantidade de dixido de carbono que expirado atravs do controlo da velocidade e profundidade da respirao.
Quando a respirao aumenta, a concentrao de dixido de carbono diminui e o sangue torna-se mais bsico. Quando a respirao
diminui, a concentrao de dixido de carbono aumenta e o sangue
torna-se mais cido. Atravs do ajuste da velocidade e da profundidade da respirao, os centros de controle respiratrio e os pulmes
so capazes de regular o pH sanguneo minuto a minuto.
RESOLUO:
Uma alterao em um ou mais desses mecanismos de controlo do pH pode produzir uma das principais alteraes do equilbrio
cido-base: a acidose ou a alcalose. A acidose uma condio na
qual o sangue apresenta um excesso de cido (ou uma falta de base),
acarretando freqentemente uma reduo do pH sanguneo.
RESOLUO:
A alcalose uma condio na qual o sangue apresenta um excesso de base (ou uma falta de cido), acarretando ocasionalmente um aumento do pH sanguneo. A acidose e a alcalose no so
doenas, mas sim conseqncias de vrios distrbios. A presena
de uma acidose ou uma alcalose prov um indcio importante ao
mdico de que existe um problema metablico grave. A acidose e
a alcalose podem ser classificadas como metablicas ou respiratrias, de acordo com a sua causa primria. A acidose metablica e a
alcalose metablica so causadas por um desequilbrio na produo
e na excreo de cidos ou bases pelos rins. A acidose respiratria
e a alcalose respiratria so causadas principalmente por distrbios
pulmonares ou respiratrios.
Didatismo e Conhecimento
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Anlise imediata: consiste em isolar as espcies que constituem o material. Esse isolamento pode ser feito manualmente. Por
exemplo, se queremos analisar uma amostra slida e esta estiver
inserida em um meio lquido, preciso retirar este slido do meio
aquoso.
- Titrimetria de complexao
Muitos ons metlicos formam complexos suficientemente
estveis. Este fato serve de base para um mtodo barato, e de comprovada eficcia na determinao de ons metlicos e de seus complexantes.
36
- qualquer tcnica instrumental, sem exceo, para que seja correta, necessita de um padro analtico com concentrao bem definida, o que s vezes no fcil nem barato para se obter.
Didatismo e Conhecimento
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ONDE :
B bateria de corrente contnua
R resistncia varivel
C1 celula formada pelos eletrodos e a amostra
C2- celula padro
G galvanometro
P1-p2 fio calibrado a uma resistncia conhecida
V e v valores de leitura
Potenciometria
Entende-se por potenciometria o conjunto de mtodos quantitativos instrumentais destinados determinao de concentraes,
mediante medidas de diferenas de potenciais entre dois eletrodos,
sendo um de referncia e outro indicador. Este ltimo forma com a
soluo em anlise, um sistema com um potencial que ser a funo da concentrao da prpria soluo. A medida das diferenas de
potencial realizada por um potencimetro que pode simplificado
pelo esquema a seguir.
Eletrodo de vidro
o eletrodo de indicador mais utilizado em determinaes do
valor de pH de uma soluo. O eletrodo de vidro constitudo esquematicamente de um bulbo de vidro fino contendo no seu interior
uma soluo de cido Clordrico de concentrao que pode variar
de 0,1 N at 1 N na qual est imerso um fio de platina e em conjunto
um eletrodo de referncia que pode ser o de calomelano ou o de
prata/cloreto de prata. O eletrodo assim montado, passa a funcionar
como um medidor da concentrao hidrogeninica.
Didatismo e Conhecimento
Eletrodo de Calomelano
o eletrodo de referncia mais utilizado e substituiu com vantagens o eletrodo de Hidrognio. O eletrodo de calomelano constitudo por uma mistura de mercrio e cloreto de mercrio I (esta mistura conhecida por calomelano) envolvida por soluo de cloreto
de potssio de concentrao que pode variar de 0,1 N at saturado. A
equao de equilbrio do eletrodo ser :
Hg2Cl2 + 2 e- 2Hg0 + 2 Cl-
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Didatismo e Conhecimento
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Onde :
1 - Espelho refletor
2 - Fonte de luz
3 - Filtro removvel no caso do colormetro
Sistema monocromtico no caso do espectrofotmetro de absoro
4 - Fenda para passagem de luz, muitos equipamentos tem meios para que o operador ajuste a abertura da fenda
5 - Clula de absoro, onde se coloca a mostra.
Didatismo e Conhecimento
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6 - Clula fotoeltrica
7 - Galvanmetro
Para se operar com este tipo de colormetro deve-se inicialmente escolher o filtro que d a maior absorbncia para a soluo em
anlise, ou seja a melhor resposta do aparelho. No espectrofotometro visvel equivale escolher o comprimento de onda que apresenta
a maior absorbncia.
Para o espectrofotmetro, escolher o melhor comprimento de
onda significa fazer a varredura dos vrios comprimentos de onda
que o equipamento possui, afim de identificar o valor adequado.
Esta operao permite obter um grfico A = f(l) que chamado
de curva de absorbncia em funo do comprimento de onda.
Ou seja, prepara-se uma soluo do produto a ser analisade
comea-se a fazer leituras de absorbncia para cada comprimento
de onda, do menor valor para o maior, variando inicialmente de 50
em 50. Obtendo assim o comprimento de onda que fornece a maior
absoro. Depois disto, realiza-se uma nova varredura bem prxima
do valor mximo encontrado, mas deste vez, variando, o comprimento de onda de 5 em 5, para determinar com preciso o comprimento de onda que d a mxima absoro.
Os dados desta varredura podem ser colocados em um grfico,
que tem o seguinte aspecto:
Depois da escolha do melhor comprimento de onda, a quantificao do produto, j pode ser feita e a determinao da concentrao
de uma soluo problema feita por meio de uma curva de calibrao, onde vrias concentraes conhecidas de um determinado
produto, no comprimento de onda determinado, fornecem valores
de absorbncia. A curva de calibrao pode ser feita, para ambos os
equipamentos como A = f(C).
Podemos ver que depois do grfico construdo, obtm-se uma
reta, que apresenta um coeficiente angular (a). Para se determinar a
concentrao da amostra desconhecida, basta apenas fazer a leitura
de Ax e no grfico determinar o valor de x, no eixo da concentrao.
fcil perceber que a diminuio da potncia da radiao incidente dependente do nmero de partculas absorventes encontradas pelo feixe ao atravessar a cubeta. Isso o mesmo que dizer
que a atenuao da potncia da radiao depende da concentrao
da soluo (c) e do percurso da radiao (b) no interior da cubeta.
Onde:
c = a concentrao do material em estudo;
l= o comprimento interno do recipiente que contem a soluo;
(epsilon) absortividade ou coeficiente de absoro, um fator caracterstico da substancia absorvedor (e o solvente), que depende do comprimento de onda da radiao.
Didatismo e Conhecimento
42
Ou seja, aumentando-se a concentrao diminui-se a intensidade de luz que atravessa o meio contendo nossa substncia de estudo.
Deste exemplo podemos definir uma unidade adimencional conhecida como fator de reteno (RF) que pode ser dado por
Rf(A) = DA/D e Rf (B) = DB/D
- Cromatografia em camada
- Cromatografia em coluna
- Cromatografia lquida de alta eficincia
- Cromatografia gasosa
O conceito bsico da tcnica consiste em se separar os componentes de uma amostra, permitindo que a mesma esteja em contato
com dois meios, sendo um fixo e outro mvel. A interao dos componentes da amostra com os meios (adsoro, solubilidade, polaridade) faz com que se separem.
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Onde :
Injetor onde a amostra colocada
Coluna onde ocorre a separao
Detector onde os componentes da amostras so quantificados
Registrador onde se confecciona o cromatograma
Injetor
O injetor consiste de um sistema no qual a amostra entra no
equipamento. Do modo que o mesmo foi concebido s possvel injetar amostras no estado lquido ou gasoso. Produtos slidos devem
ser inicialmente solubilizados em um solvente. No injetor, a amostra
normalmente com um solvente, aquecida e torna-se vapor.
Aqui surge o primeiro item a ser considerado no processo de
anlise por cromatografia a gs, ou seja, as propriedades da amostra
a ser analisada. As propriedades da amostra que permitem que ela
seja analisada por esta tcnica so:
A amostra deve ser homognea a amostra quando adicionada em um solvente deve formar uma soluo homognea, pois caso
contrrio a mesma no ser representativa do todo, sendo causa de
erro, pois estaremos analisando apenas a parte solvel da amostra no
solvente utilizado.
A amostra deve ter estabilidade trmica - no processo de vaporizao a amostra no pode se decompor. Se ocorrer a decomposio da amostra durante a injeo da mesma, os resultados obtidos
no sero coerentes com a amostra. Normalmente a decomposio
observada no aspecto do cromatograma obtido.
A amostra deve ser voltil no processo de vaporizao a
amostra tem que passar totalmente para o estado gasoso . Parte da
amostra no pode deixar de volatilizar, pois se isto ocorre a analise
no ser referente totalidade da amostra e sim apenas a parte dela
Os injetores devido sua importncia foram sendo adaptados evoluo tecnolgica dos equipamentos utilizados em cromatografia gasosa e atualmente existem 2 tipos de injetor denominados de direto e com divisor de amostra (split)
Os injetores diretos fazem com que a amostra introduzida, aps
a volatilizao, atinjam a coluna, sem perda de material, enquanto
que os injetores com divisor de amostra faz uma diviso no volume
injetado e somente uma pequena parte do total entra na coluna A
razo de diviso da amostra ajustada em funo do dimetro da
coluna, tipo de gs de arraste.
Cromatografia em coluna
Esta tcnica na verdade, deriva diretamente da cromatografia
em camada delgada, s que neste caso, o suporte fica em uma coluna
e a fase mvel passa atravs do suporte, arrastando a amostra. Neste
caso, o fluxo de fase mvel contnuo e a fase mvel que sai necessita avaliada para saber se algum componente da amostra j saiu e
isto normalmente realizado pela cromatografia em camada delgada. A vantagem da cromatografia em coluna que se pode trabalhar
com uma quantidade bem maior de amostra. Esta tcnica tambm
utilizada para separar produtos com solubilidade diferente.
A vantagem desta tcnica que se pode trocar a polaridade do
solvente durante a anlise. Da mesma maneira que na cromatografia
em camada delgada a separao ocorre devido a partio e solubilidade, sendo que o solvente desce por gravidade.
Cromatografia gasosa
A cromatografia gasosa pode ser definida como um mtodo fsico-qumico de separao na qual os constituintes da amostra sofrem
partio entre duas fases, sendo uma estacionria e outra mvel. Podemos ver na pratica esta definio, observando uma anlise em cromatografia em camada delgada .Podemos dizer que o que ocorre no
cromatografo a gs bem similar ao que acontece em uma analise
por cromatografia em camada delgada, guardando, logicamente as
devidas propores Podemos apresentar um esquema da separao
por cromatografia onde a amostra tem que migrar atravs da fase
estacionria. Neste processo ocorre ento a separao. O sucesso
da tcnica consiste em se escolher as fases adequadas para a efetiva
separao dos componentes da amostra.
A cromatografia gasosa apresenta exatamente os mesmos conceitos mas tem este nome porque neste caso a fase mvel sempre
um gs e a amostra tem que estar no estado gasoso. Pelo fato de
se trabalhar com gs o equipamento tem que ser mais sofisticado,
da a analise ser instrumental e o resultado fornecido ser na forma grfica. Na cromatografia gasosa o processo de separao fica
transparente ao usurio, que s avalia o resultado aps a emisso
do grfico que comumente denominado de cromatograma.
Para melhor compreenso do que ocorre no cromatgrafo, podemos utilizar o esquema a seguir, onde destacamos :
Didatismo e Conhecimento
Coluna
A coluna o elemento fundamental do processo uma vez que
responsvel pela efetiva separao dos produtos.A coluna fica em
uma estufa, cuja temperatura pode ficar constante ou ser alterada
durante a analise. Quando a temperatura permanece constante denomina-se analise isotermica e quando a temperatura varia, denomina-se com gradiente de temperatura. No mercado existem dois tipos
de colunas:
A empacotada que consiste de tubo de metal com diametro interno de aproximadamente de 0,30 cm preenchido com terra diatomacea recoberta por um produto orgnico que a fase estacionria.
A capilar que consiste de tubo de slica fundida e com um dimetro interno de aproximadamente de 10 mm. Neste caso a fase
estacionria colocada na superfcie interna do tubo . A eficincia de
uma coluna dada em nmero de pratos tericos que vem a ser um
segmento de reta na qual a amostra esta teoricamente em perfeito
equilbrio com as fases estacionria e mvel
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Detector
Aps os componentes da amostra sarem da coluna, devidamente separados, os mesmos devem ser reconhecidos. Criaram-se
os equipamentos denominados de Detectores, que conseguem perceber a variao da composio do gs de arraste e transformam
esta variao em sinal eltrico. Tais equipamentos so chamados de
Detectores e fundamental que forneam respostas proporcionais
concentrao dos componentes. Foram desenvolvidos vrios tipos de Detectores e todos apresentam algumas caractersticas consideradas especficas:Seletividade, sensibilidade , resposta , rudo e
linearidade
Seletividade- os Detectores dependendo de suas caractersticas
podem ser sensvel a alguns produtos, a classes de produtos ou a
vrias classes de produtos Os Detectores so classificados quanto a
sua seletividade como :
Universal detecta qualquer produto que pode sair da coluna
cromatografica
Seletivo detecta classe de produtos
Especfico detecta apenas um produto ou grupo de produtos
Sensibilidade como os Detectores so equipamentos eletrnicos e medem a quantidade de produto que sai pela coluna por unidade de tempo. Dependendo do Detector, s acima de uma quantidade
de massa que consegue gerar um sinal que pode ser quantificado.
Resposta a resposta de um Detector est relacionada diretamente a sua sensibilidade e corresponde a quantidade de sinal eltrico relacionada com uma determinada massa de um composto
Didatismo e Conhecimento
45
Cromatografia lquida
Todos os conceitos utilizados na cromatografia a gs podem ser
transportados para a cromatografia liquida de alta eficincia, bastando ter em mente que a fase mvel agora um lquido, da o tipo de
equipamento, colunas e detectores passam a ser fisicamente diferentes, mas com o mesmo conceito bsico.
A fase mvel agora um solvente ou mistura de solventes,
passando assim, a diferena de polaridade ser muito importante no
processo de separao, j que as amostras no precisam sofrer ao
da temperatura para se separar. Em virtude disto, a cromatografia a
lquido est muito prxima da cromatografia em camada delgada,
mas com a possibilidade de poder quantificar os componentes de
um produto.
Esta tcnica muito utilizada para produtos que no podem
ser analisados por cromatografia a gs, pois sofrem decomposio
quando aquecidos, como por exemplo, vitaminas, acares e etc.
Anlise Qualitativa
A cromatografia pode se utilizada como mtodo de identificao e esta feita atravs do tempo de reteno. A primeira etapa
obter o cromatograma e este fornece o que chamamos de perfil cromatografico da amostra. O perfil informa quantas substncias compem a amostra. A partir do perfil, se tivermos padres, podemos
comparar os tempos de reteno e identificar estes produtos.
Anlise quantitativa
A anlise quantitativa por cromatografia gasosa normalmente
feita por 2 mtodos, em funo da possibilidade da existncia de
padres. Quando no se tem padro, utiliza-se o processo denominado de porcentagem de rea. Onde deve-se inicialmente garantir que
todos os componentes da amostra foram detectados pelo cromatografo. Neste tipo de anlise fundamental que se saiba se a mesma
contem gua ou solventes, pois isto ir ajudar a definir condies
de anlise e tipo de Detector Depois de obter todas as reas de cada
pico, pode se calcular a somatria das mesmas e relacionar esta somatria a 100%. Logo cada pico ter sua parcela porcentual. Esta
tcnica permite fornecer uma noo da composio de uma amostra.
Quando possvel dispor de padres, utiliza-se a o processo
denominado de porcentagem em peso e consiste em comparar a rea
do pico de interesse com a rea do padro. Em funo do modo
como se trabalha a porcentagem em peso pode de denominada de
padronizao externa e de padronizao interna.
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Monocromador
Por mais cuidado que se possa ter, a chama obtida na queima
da mistura do gs e amostra, gera vrias radiaes. Para garantir
que o equipamento est analisando apenas o comprimento de onda
desejado, utiliza se um filtro que inibe a passagem de outras radiaes que no interessam e podem prejudicar a anlise. Em geral os
equipamentos j dispe de filtros prprios para os elementos mais
comuns, como sdio, potssio clcio e outros.
Detector
Para as anlises por espectroscopia de emisso de chama, o detector consiste de uma clula fotoeletrica que detecta a intensidade
de radiao, transformando a mesma em um sinal eltrico.
Caminho da amostra
Registrador
Define-se como registrador um sistema potenciometrico onde o
sinal enviado pelo detector amplificado. Neste caso o registrador
vai informar um nmero dentro de um fundo de escala pr definido.
Em funo deste tipo de resultado, a espectroscopia de emisso permite que se faa principalmente a anlise quantitativa. Em funo do
desenvolvimento tecnolgico, o registrador est sendo substitudo
pelo computador.
Nebulizador
O nebulizador ou atomizador consiste de um sistema no qual
a amostra sofre vrios tratamentos antes de ser propriamente analisada. A amostra entra no equipamento j dissolvida em um solvente apropriado (normalmente gua) e inicialmente sugada por um
sistema de bombas e misturada com ar para que se transforme em
gotculas mnimas.
Em seguida estas gotculas so misturadas a um gs combustvel (oxignio, propano, hidrognio ou mistura dos mesmos). Depois
disto a amostra est pronta para entrar na chama.
Didatismo e Conhecimento
Anlise quantitativa
A anlise quantitativa por espectroscopia de emisso s pode
ser executada em funo da possibilidade da existncia de padres.
Prepara-se ento um conjunto de solues de concentrao conhecida do metal a ser analisado e obtm-se uma curva valor lido x concentrao. Depois disto, analisa-se a amostra problema e obtm-se
a concentrao da amostra. Existe no mercado equipamentos que j
fornecem a curva e calculam diretamente a concentrao da amostra.
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Caminho da amostra
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Espectometria de massas
A espectrometria de massas uma poderosa ferramenta que
foi usada, no princpio, na determinao de massas atmicas e, vem
sendo empregada, na atualidade, na busca de informaes sobre a
estrutura de compostos orgnicos, na anlise de misturas orgnicas
complexas, na anlise elementar e na determinao da composio
isotpica dos elementos. Trata-se do mtodo mais usado para essa
ltima finalidade.
A espectrometria de massas utiliza o movimento de ons em
campos eltricos e magnticos para classific-los de acordo com sua
relao massa -carga. Desta maneira, a espectrometria de massas
uma tcnica analtica por meio da qual as substncias qumicas se
identificam, separando os ons gasosos em campos eltricos e magnticos. Os instrumentos usados nestes estudos chamam-se espectrmetros de massas, sob o princpio que os ons podem ser desviados a campos eltricos e magnticos. O dispositivo que realiza esta
operao e utiliza meios eltricos para detectar os ons classificados
conhecido como espectrmetro de massas.
A MS oferece informao qualitativa e quantitativa sobre a
composio atmica e molecular de materiais
Espectrmetro de massas
O espectrmetro de massas um instrumento que separa ons,
positivos ou negativos, produzidos a partir de tomos ou molculas,
quer sejam das mais simples s mais complexas, de acordo com a
razo massa/carga (q/m).
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Em alta presso, colises destas espcies e reaes on-molcula com o prprio gs reagente so comuns, levando a formao
de ons secundrios, com um pequeno excesso de energia interna:
CH3+ + CH4 ==> C2H5+ + H2 Estes ons secundrios, eventualmente, colidem com molculas da amostra, resultando na ionizao qumica das ltimas. A ionizao qumica , comumente, devido
protonao, especialmente para compostos bsicos:
M + CH5+ ==> ( M + 1 )+ + CH4
Os ons, quase-moleculares, so espcies com eltrons pares
que tendem a ser mais estveis do que os ons moleculares produzidos por EI. A combinao da energia mais baixa no processo de
ionizao, com esta maior estabilidade, indica que os ons quase-moleculares so, geralmente, pouco abundantes no espectro.
A quantidade da fragmentao pode ser mudada pela natureza
do gs reagente. Em geral, tanto as faixas dos compostos protonados e o grau de fragmentao observado decrescem quando o gs
reagente mudado na ordem: metano > isobutano > amnia. Por
exemplo, a amnia protonar fracamente molculas bsicas tais
como alcois e aminas.
Fontes de fase de gs
Nas fontes de fase de gs, a amostra volatilizada antes de ionizar os componentes gasosos . A amostra se vaporiza fora da fonte
de energia. Os exemplos deste mtodo com a ionizao qumica,
ionizao por impacto de eltrons e ionizao por campo.
Tcnicas de Ionizao
Existem diferentes mtodos importantes para a preparao de
ons gasosos No trataremos de todas as formas neste nosso estudo.
A produo de ons nos espectrmetros de massas envolve vrios fatores. Certos tipos de anlises necessitam de ons em profuso
e outros de seletividade. H casos em que a energia com que se forma o on muito importante.
Didatismo e Conhecimento
50
Um emissor de campo consiste em um cabo coberto por partculas de carbono microscpicas, as quais, geralmente, amplificam o
campo efetivo dos pontos de carbono. A amostra gasosa no sistema
de entrada passa rea de campo alto ao redor dos microtips do
emissor. Os eltrons do analito so extrados pelos microtips e h
pouca ou nenhuma fragmentao de ons.
Fontes de Desoro
Nas fontes de desoro os ons se formam na fase condensada. Uma grande vantagem da ionizao por desoro que permite
a anlise de molculas no volteis e termicamente instveis. Dois
exemplos de fontes de desoro so desoro por campo e bombardeamento de tomos acelerados.
Desoro por campo
A desoro por campo uma tcnica valiosa para o estudo de
fenmenos como espcies de desoro e os resultados de reaes
qumicas em superfcies. Tambm um mtodo til para as molculas polares lipoflicas. Na desoro por campo utiliza-se um emissor
de multitips similar ao que se usa na ionizao por campo. O eletrodo montado sobre uma sonda que pode ser removida do compartimento da amostra e recoberta com uma soluo da amostra. A
ionizao realizada aplicando alta potncia ao eletrodo. s vezes
necessrio aquecer o emissor com corrente eltrica.
Bombardeamento de tomos rpidos
Durante o bombardeamento de tomos rpidos um feixe de
energia alta de tomos neutros, comumente xennio ou argnio,
uma amostra slida provoca desoro e ionizao. Esta tcnica
usada para molculas biolgicas grandes que so difceis de penetrar
na fase de gs. O feixe atmico produzido acelerando os ons a
partir de uma fonte e atravs de uma cela de carga. Os ons levantam
um eltron em coliso com tomos neutros para formar um raio de
tomos de alta energia.
Analisadores de massa
O objetivo do analisador de massas separar os ons que so
produzidos na fonte de acordo com as diferentes relaes de massa-carga. Os design de analisador mais comuns incluem os analisadores de quadrupolo, de setor magntico e analisadores de massa por
tempo de vo.
- Quadrupolo
Resumo:
Um campo quadrupolo formado por quatro rolos paralelos aos
quais aplica-se uma corrente contnua que afeta o percurso dos ons
viajando pelo trajeto centralizado entre os 4 rolos. Para as voltagens
dadas, somente os ons de uma relao massa- carga determinada
podem passar atravs do filtro do quadrupolo, enquanto os outros
so varridos como molculas descarregadas. Ao variar os sinais eltricos a um quadrupolo, pode-se variar a faixa da relao massa-carga transmitida. Isto possibilita a varredura espectral.
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Aprofundando
Analisador de massa tipo quadrupolo.
Cada par de barras opostas so conectadas eletricamente e fornecidas voltagens de mesma magnitude porm de polaridades diferentes. A voltagem aplicada em cada par consiste de uma corrente
contnua (C), U, e uma componente de radiofreqncia (rf), Vcos t.
Valores tpicos so varias centenas de volts para U, vrios milhares
de volts para V, e megahertz para . Uma vez que o potencial total de
cada barra +(U + Vcos t) ou ( U + Vcos t), o campo radiofreqncia alterna a polaridade da barra.
Os ons so acelerados ao longo do eixo z (~5 a 10eV) antes
de entrar no espao entre as barras do quadrupolo onde eles experimentam um campo combinado resultante do potencial das barras. O
ction induzido para o plo negativo e vice-versa; se o potencial
muda de sinal antes da descarga do on, o on muda de direo oscilando atravs das barras. O on ir passar com sucesso atravs das
barras ou ser descartado em funo da C e rf voltagem aplicada,
como mostrado na figura abaixo para ons de trs diferentes massas.
Didatismo e Conhecimento
52
Iremos abordar algumas tcnicas para a interpretao de espectros de massa. Atravs de alguns passos iremos identificar alguns
compostos, de uma forma exemplificativa. Porm existem outros
mecanismos de fragmentao que no sero abordados.
Identificar uma molcula simples a partir de um espectro de
massa obtido atravs do impacto eletrnico (EI) muito mais simples que outros tipos de espectro. O espectro de massas mostra a
massa da molcula em seus vrios cacos, aps ser quebrada.
Didatismo e Conhecimento
53
importante que se conhea alguns conceitos bsicos de qumica para iniciarmos o estudo. Inicialmente vamos ver a aparncia
de um espectro de massas e entender como um espectro gerado a
partir de um cromatograma.
Veja um exemplo abaixo:
Os valores da tabela acima mostras as massas das perdas lgicas (o pedao da molcula inicial que foi perdida e as perdas
sequentes. Estas perdas correspondem aos pedaos mais provveis
de serem eliminados no processo.
Exemplo 01) No espectro de massas do 2,2-dimetilpentano podemos observar os dois fragmentos inicos resultantes de quebras
nos pontos de ramificao representados pelos ons a m/z 85 (M 15) e 57 (cation t-butil):
Exemplo 04) O EM da 3-pentanona tem como pico base o fragmento m/z 57 que se forma com a quebra e o on m/z 29 resultado da
carga positiva remanescente na cadeia alquilica:
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Fundamentos
Prova Presuntiva
Anlises Microbiolgicas
O alimento uma exigncia de todos os seres vivos para manter
a existncia e tambm importante para manter o equilbrio psicolgico.
Para um alimento ter uma boa qualidade sanitria, necessrio
que seja livre de microrganismos patognicos. Porm seria impossvel examinar cada alimento, como rotina, para verificar a presena
de todos os patgenos. Nesse caso, padronizado o uso da Contagem Padro em Placa e/ou a enumerao de coliformes, que se
refere a Escherichia coli e bactrias semelhantes a ela em vrios
aspectos, dentro da famlia enterobactericea (Anonymous, 1987).
A presena de E. coli indica geralmente condies de higiene insatisfatrias na planta ou durante o preparo do alimento, visto que sua
deteco no alimento no necessariamente significa origem fecal,
pois ela pode crescer fora do intestino do hospedeiro e permanecer
no ambiente sujo por anos (Anonymous, 1987).
A Secretaria de Vigilncia Sanitria do Ministrio da Sade,
atravs da Portaria 451, de 19 de setembro de 1997 (Brasil, 1997),
ressalta a necessidade de uniformizar os padres microbiolgicos
dos alimentos para a comercializao dos mesmos entre pases e
refere-se a preocupao crescente de rgos Internacionais como a
FAO (Food Agricultural Organization) e OMS (Organizao Mundial de Sade) sobre esse tema. Outros controles analticos que podem ser realizados:
Equipamentos bsicos obrigatrios em laboratrios de microbiologia de alimentos; Banho-maria com movimentao de gua
(agitao ou circulao).
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Incubao
Procedimentos de controle
Aplicar os procedimentos de controle especficos estabelecidos
pelo laboratrio.
Coliformes termotolerantes
Inoculao
Prova presuntiva
Inoculao
Incubao
Incubao
Aps completa solidificao do meio, incubar as placas em posio invertida em temperatura de 36 1C por 18 a 24 horas.
Resultados
Para alimentos comercializados no MERCOSUL, os resultados
de contagem de coliformes totais se referem determinao contagem de coliformes a 35C e os resultados da contagem de coliformes termotolerantes correspondem determinao coliformes
a 45C.
Para o clculo final das contagens de coliformes totais e termotolerantes, proceder de acordo com as indicaes contidas no Anexo
IV, Procedimentos para contagem de colnias, deste Manual.
Expressar o resultado em UFC/g ou mL.
Leitura
Selecionar placas que contenham entre 15 e 150 colnias.
Contar as colnias que apresentarem morfologia tpica de coliformes, ou seja, colnias rseas, com 0,5 a 2 mm de dimetro rodeadas ou no por uma zona de precipitao da bile presente no meio.
Anotar os resultados de contagem.
Contar separadamente colnias tpicas e atpicas e submeter 3 a
5 colnias, de cada uma, s provas confirmativas.
Provas confirmativas
Insumos
Coliformes totais
Insumo a combinao de fatores de produo diretos (matrias-primas) e indiretos (mo-de-obra, energia, tributos), e que
entram na elaborao de certa quantidade de bens ou servios. No
agronegcio os principais insumos so sementes, adubo, defensivos,
maquinrio, combustvel, rao, mo de obra especializada, entre
outros.
Inoculao
Inocular cada uma das colnias tpicas e atpicas selecionadas
em tubos contendo caldo verde brilhante bile 2% lactose.
Didatismo e Conhecimento
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ESTRUTURA DO VRUS
AGENTES NO CONVENCIONAIS
Existem tambm os agentes no convencionais s vezes conhecidos como vrus atpicos At agora, os tipos mais importantes que foram estudados so os virides e prons (HUNT, 2013)
VIRIDES
Virides contm apenas RNA. Eles so pequenos (menos de
400 nucleotdeos), de fita simples, RNAs circulares. Os RNAs
no so empacotados, aparentemente no codificam para nenhuma
protena,e at agora tm se mostrado associados com doenas em
plantas. Entretanto, h algumas sugestes de que agentes um tanto similares podem estar envolvidos em algumas doenas humanas
(HUNT, 2013).
Virus da hepatite delta
Classificao de ICTV
PRIONS
59
BACTERIOLOGIA
* autolisinas esto normalmente inibidas: a penicilina destri inibidores das autolisinas, destruindo a parede.
Metabolismo bacteriano
Enzimas bacterianas
Obteno de energia
Classificao:
a . extracelulares
b . ectocelulares
c . endocelulares
a. Enzimas extracelulares
catalase: protege bactrias contra ao da H2O2 produzida
na fagocitose
coagulase: fibrinognio fibrina
penicilase: age sobre penicilina
b. Enzimas ectocelulares
agem na membrana (permeabilidade seletiva) nos processos
respiratrios e na sntese de parede
c. Enzimas endocelulares
fazem sntese de grnulos de reserva, enzimas envolvidas
no catabolismo
enzimas de constituio: produo permanente, reguladas
pelo PH, concentrao do substrato, etc . . .
enzimas de induo: s quando h necessidade ; reguladas
pela sua sntese atravs do status do gene (se est ou no ativado).
So ativados pelos operons. Produto final inibe ativador dos operons, desligando assim o gene
Consumo de energia
Biossntese
Locomoo
Transporte ativo
Produo de calor
Somente os processos de biossntese de parede e grnulos de
reserva so diferentes das clulas eucariticas
Reproduo
Fermentao
No so processos exclusivos!
No existem bactrias que s fermentam
Todas quimiotrficas respiram
Diferenas entre fermentao e respirao
Na respirao: hidrognios e eltrons transportados
por receptores inorgnicos. Se receptor for O2 aerbica, se no
for anaerbica. No existe bactria que faz respirao aerbica e
anaerbica
Na fermentao: com receptores orgnicos
Produto final:
Respirao aerbica: mais rentvel que a anerbica
Fermentao: menos rentvel dos 3 processos
composto inicial: piruvato
Fermentao alcolica: produto final - lcool etlico; no to
importante para as bactrias e sim para as leveduras
Fermentao ltica: Streptococos - bactria de interesse mdico
Fermentao propinica: produto final - cido propinico.
Ex: Corinibacterium / Propionibacterium: fazem tambm respirao
anaerbica
Fermentao butrica: produto final - cido butrico, lcool
butrico e cido B-hidroxibutrico: tambm realizam respirao anerbica.
Fermentao butilenogliclica: Enterobacter / butilenoglicol
Fermentao acidamista: os produtos finais so o cido actico, lcool etlico e cido succnico
Nota:
* hidrolases - molculas grandes se transformam em monmeros.
Didatismo e Conhecimento
61
Transduo
Na transduo, molculas de DNA so transferidas de uma bactria a outra usando vrus como vetores (bactrifagos). Estes, ao se
montar dentro das bactrias, podem eventualmente incluir pedaos
de DNA da bactria que lhes serviu de hospedeira. Ao infectar outra bactria, o vrus que leva o DNA bacteriano o transfere junto
com o seu. Se a bactria sobreviver infeco viral, pode passar a
incluir os genes de outra bactria em seu genoma.
Esporulao
Algumas espcies de bactrias originam, sob certas condies
ambientais, estruturas resistentes denominadas esporos. A clula
que origina o esporo se desidrata, forma uma parede grossa e sua
atividade metablica torna-se muito reduzida. Certos esporos so
capazes de se manter em estado de dormncia por dezenas de anos.
Ao encontrar um ambiente adequado, o esporo se reidrata e origina
uma bactria ativa, que passa a se reproduzir por diviso binria.
Os esporos so muito resistentes ao calor e, em geral, no morrem quando expostos gua em ebulio. Por isso os laboratrios,
que necessitam trabalhar em condies de absoluta assepsia, costumam usar um processo especial, denominado autoclavagem, para
esterilizar lquidos e utenslios. O aparelho onde feita a esterilizao, a autoclave, utiliza vapor de gua a temperaturas da ordem de
120C, sob uma presso que o dobro da atmosfrica. Aps 1 hora
nessas condies, mesmo os esporos mais resistentes morrem.
Conjugao
A indstria de enlatados toma medidas rigorosas na esterilizao dos alimentos para eliminar os esporos da bactria Clostridium
botulinum. Essa bactria produz o botulismo, infeco frequentemente fatal.
Reproduo sexuada
Na conjugao bacteriana, pedaos de DNA passam diretamente de uma bactria doadora, o macho, para uma receptora, a fmea. Isso acontece atravs de microscpicos tubos proticos, chamados pili, que as bactrias macho possuem em sua superfcie.
O fragmento de DNA transferido se recombina com o cromossomo da bactria fmea, produzindo novas misturas genticas,
que sero transmitidas s clulas-filhas na prxima diviso celular.
Transformao
Na transformao, a bactria absorve molculas de DNA dispersas no meio e so incorporados cromatina. Esse DNA pode ser
proveniente, por exemplo, de bactrias mortas. Esse processo ocorre
espontaneamente na natureza.
62
Alimento
Se considerarmos a forma de obteno de alimento, podemos
classificar as bactrias em autotrficas e heterotrficas. Entre as
autotrficas, existem as fotossintetizantes (ou fotoautotrficas) e as
quimiossintetizantes (ou quimiautotrficas).
As primeiras so aquelas que utilizam a luz como fonte de energia para a sntese de compostos orgnicos. Algumas dessas bactrias, como as proclorfitas e as cianobactrias, realizam fotossntese
semelhante das plantas e algas. J as sulfobactrias realizam um
tipo de fotossntese em que o gs carbnico reage com o gs sulfdrico ao invs da gua, produzindo enxofre elementar e no gs
oxignio.
J para as bactrias quimiossintetizantes, a fonte de energia para
a produo de seu alimento no a luz solar. Elas utilizam a energia
liberada em reaes de oxidao de compostos inorgnicos. As bactrias dos gneros Nitrosomonas e Nitrobacter, que vivem no solo e
so bastante conhecidas por sua participao no ciclo do nitrognio,
por exemplo, obtm energia pela oxidao de amnia e de nitrito
respectivamente.
Entre as bactrias heterotrficas, encontram-se as saprofgicas
e as parasitas. As primeiras obtm alimento a partir de cadveres e
restos de seres vivos, enquanto as parasitas encontram esse alimento
em tecidos de seres vivos, muitas vezes causando-lhes doenas.
Degradao de molculas
Segundo a forma como degradam as molculas orgnicas para
a liberao de energia, as bactrias podem ser respiradoras ou fermentadoras.
MICOLOGIA
Fungos so organismos eucariontes, aclorofilados, heterotrficos, que se reproduzem sexuada e assexuadamente e cujas estruturas somticas so geralmente filamentosas e ramificadas, com
parede celular contendo celulose ou quitina, ou ambos.
Os fungos obtm o alimento seja como saprfitas, organismos
que vivem sobre a matria orgnica morta, ou como parasitas, que
se nutrem da matria viva. Em ambos os casos, as substncias nutritivas so ingeridas por absoro aps terem sido parcialmente digeridas por meio de enzimas.
63
Fase Reprodutiva
Os fungos, em sua maioria, so constitudos de filamentos microscpicos com parede celular bem definida, chamados hifas. A
clula fngica constituda pelos principais componentes encontrados nos organismos eucariotos. A parede celular composta principalmente por polissacardios, pequena quantidade de lipdios e ons
orgnicos. A membrana plasmtica composta por fosfolipdios e
esfingolipdios, protenas, alm de pequenas quantidades de carboidratos. O citoplasma apresenta solutos dissolvidos, no qual esto
imersas organelas membranosas, como mitocndrias, complexo
de Golgi e microcorpos, assim como estruturas no membranosas,
como ribossomos, microtubos e microfilamentos. A clula fngica
apresenta ncleos dotados de uma membrana nuclear ou carioteca.
Os fungos, por serem aclorofilados, no podem utilizar energia
solar para sintetizar seu prprio alimento. A substncia de onde os
fungos retiram os nutrientes de que necessitam chama-se substrato,
o qual pode ser o hmus do solo, restos de cultura, plantas vivas, etc.
As hifas ramificam-se em todas as direes no substrato, formando
o miclio.
As hifas ou miclio, quanto ao nmero de ncleos, podem ser
uninucleadas, binucleadas e multinucleadas. A extremidade da hifa
a regio de crescimento. O protoplasma na extremidade da hifa
sintetiza um grande nmero de enzimas e cidos orgnicos que so
difundidos no substrato. As enzimas e cidos quebram a celulose,
amido, acares, protenas, gorduras e outros constituintes do substrato, que so utilizados como alimentos e energia para o crescimento do fungo.
O crescimento do miclio de um fungo parasita pode ser externo ou interno em relao ao tecido hospedeiro. O miclio externo
ocorre como um denso emaranhado na superfcie de folhas, caules
ou frutos, que no penetra na epiderme dos rgos e nutre-se atravs
de exsudatos (acares) da planta. O miclio interno pode ser subepidrmico, quando desenvolve entre a cutcula e as clulas epidermais; intercelular, quando penetra no hospedeiro e localiza-se nos
espaos intercelulares, sem penetrar nas clulas, sendo os nutrientes
absorvidos atravs de rgos especiais chamados haustrios (estruturas constitudas de clulas da hifa) ou diretamente por difuso
atravs da parede celular; ou intracelular, quando penetra dentro
da clula hospedeira, absorvendo os nutrientes diretamente. Existem
espcies que tem capacidade de penetrar diretamente pela superfcie
intacta do hospedeiro. Estas espcies apresentam rgos especiais,
chamados apressrios, que se fixam na superfcie do hospedeiro
e no ponto de contato ocorre dissoluo do tecido formando um
pequeno orifcio (microscpico).
Didatismo e Conhecimento
Os esporos so as estruturas reprodutivas dos fungos, constituindo a unidade propagativa da espcie, cuja funo semelhante
a de uma semente, mas difere desta pois no contm um embrio
pr-formado.
Os esporos so produzidos em ramificaes especializadas
ou tecidos do talo ou hifa chamados esporforos. Estes, por sua
vez, recebem denominaes de acordo com a classe do organismo.
Como exemplo temos: conidiforo nos Deuteromicetos e esporangiforo nos Oomicetos.
O corpo de frutificao de um fungo, como peritcios, apotcios e picndios, do proteo e apoio s clulas esporgenas, as
quais podem ser agregadas em camadas dentro da cavidade do corpo de frutificao ou em camadas na epiderme do hospedeiro (Ex.:
acrvulos). Nos Ascomicetos as clulas esporgenas compreendem
as ascas, enquanto nos Basidiomicetos as basdias.
Os esporos so comumente unicelulares, mas em muitas espcies podem ser divididos por septos, formando clulas. Os esporos
podem ser mveis (zoosporos) ou imveis, de paredes espessas ou
finas, hialinas ou coloridas, com parede celular lisa ou ornamentada,
as vezes com apndice filiforme simples ou ramificado. Em muitas
espcies de fungos, a colorao e o nmero de septos dos esporos
variam com a idade.
Os esporos podem ser assexuais e sexuais. A fase associada
com os esporos assexuais e miclio estril conhecida como estgio ou fase imperfeita do fungo, enquanto aquela associada com a
produo de zigoto e chamada estgio ou fase perfeita.
Os esporos assexuais so representados por zoosporos, conidiosporos, uredosporos e outros, formados pelas transformaes
do sistema vegetativo sem haver fuso de ncleos. Os esporos sexuais so resultantes da unio de ncleos compatveis, seguido de
meiose e mitose.
Os rgos sexuais do fungo so chamados de gametngios.
O gametngio feminino denominado oognio ou ascognio, enquanto o gametngio masculino denominado anterdio . As clulas sexuais ou ncleos que se fundem na reproduo sexual so
chamados gametas.
Algumas espcies de fungos produzem os gametngios no mesmo talo e so ditos homotlicos (hermafroditas). Outras formam
talos com sexos agregados e so chamados heterotlicos (diicos),
isto , os sexos so agregados em dois indivduos diferentes, no podendo cada talo, ou seja, cada indivduo reproduzir-se sexualmente
sem o concurso de outro.
64
Nos Basidiomicetos, esporos haplides produzem somente pequenas hifas haplides. Quando estas so fecundadas, um miclio
dicaritico (N+N) produzido e desenvolve-se para constituir a estrutura somtica do fungo. Essas hifas dicariticas podem produzir,
por via assexual, esporos dicariticos que desenvolvem novamente
em um miclio dicaritico. Entretanto, em qualquer dos casos, os
ncleos pareados das clulas se unem e formam zigotos, dividindo-se meiticamente para produzir basidisporos, que contm ncleos
haplides. Nos Deuteromicetos, encontrado somente o ciclo assexual, com a seguinte seqncia: esporo haplide miclio haplide esporo haplide.
Em condies prprias podem se apresentar das seguintes formas: - BOLORES: quando apresentam os filamentos ou hifas que
no conjunto, constituem o miclio; - LEVEDURAS: apresentam
formas celulares ovais e arredondadas.
Morfologia: - hifa: a estrutura bsica do fungo, chamada tambm de filamento; - esporo: corpsculo uni ou multicelular, que germina para dar origem a hifa; - clamidsporo: esporo de resistncia
produzido, por qualquer tipo de fungo.
Parassexualidade: ocorrncia de plasmogamia entre duas hifas geneticamente diferentes, formando um heterocarion, ou seja,
presena de dois ncleos geneticamente diferentes na mesma clula.
Esta situao de heterocariose termina quando ocorre a unio destes
ncleos originando uma clula ou hifa diplide, a qual se perpetua
por mitose.
Os vrios processos podem ocorrer simultaneamente no mesmo
talo, sem obedecer uma seqncia regular ou em estgios especficos. O ciclo parassexual pode ou no ser acompanhado de um ciclo
sexual. A parassexualidade constitui um importante mecanismo de
variao gentica para aqueles fungos que no apresentam reproduo sexual ou a apresentam raramente.
Embora os ciclos de vida dos fungos dos distintos grupos variem amplamente, a grande maioria passa por uma srie de etapas
que so bastante similares. Assim, a maioria dos fungos tem um estgio de esporo que contm um ncleo haplide, que possui uma
srie de cromossomos ou 1N. Os esporos, ao germinar, produzem
uma hifa que tambm contm ncleos haplides. A hifa produz novamente esporos haplides (como sempre ocorre com Deuteromicetos) ou pode fundir-se com uma hifa para produzir uma hifa fecunda
em que os ncleos se fundem para formar um ncleo diplide, denominado zigoto, que contm duas sries de cromossomos ou 2N.
Nos Oomicetos, o zigoto se divide e produz esporos haplides, que
concluem o ciclo. Em uma fase breve do ciclo de vida da maioria
dos Ascomicetos e em todos os Basidiomicetos, o par de ncleos
da hifa fecundada no se une, mantendo-se separados dentro da clula (condio dicaritica ou N+N), dividindo-se simultaneamente
para produzir mais clulas hifas que contm pares de ncleos. Nos
Ascomicetos, as hifas dicariticas se localizam isoladas no interior
de corpos de frutificao, onde originam hifas ascgenas, desde que
os ncleos da clula da hifa se una para formar um zigoto (com um
nmero diplide de cromossomos), o qual se divide meioticamente
para produzir ascsporos que contm ncleos haplides.
Didatismo e Conhecimento
Importncia dos fungos fabricao de queijos - roquefort, gorgonzola e camembert; controle de qualidade de produtos industriais;
fontes de remdios sobretudo antibiticos e provocadores de
doenas; consumidos na forma de pratos nobres, como as rarissmas
e caras trufas e o champignon.
Os fungos podem causar os seguintes problemas em seres
humanos: - intoxicao, pela digesto de determinados cogumelos; - alergias, devido ao contato com fungos filamentosos e outros
fungos; - infeces superficiais, tais como sapinho`` causada pela
Cndida ; - infeces subcutneas, como as tinhas ( Microsporum
); - infeces subcutneas, tais como as causadas pelo Sporotrichum
; - infeces pulmonares invasivas, causadas pelo Histoplasma e Aspergillus
MICOSES SUPERFICIAS E DERMATFITOS
Candida albicans: preferncia por reas midas.
Fatores que favorecem uma candidase: uso prolongado de
antibiticos, corticides e anticoncepcionais; desnutrio, senilidade, diabetes, gravidez; uso prolongado de lcool e fumo; contato
permanente com gua e sabo.
Candida albicans - colnias de fungos
Candida albicans
DERMATFITOS: causam doena em estruturas queratinizadas. O Microsporum invade a pele e plos e o Trichophyton, pele,
plos e unhas. Pitirase versicolor: micose superficial causada por
Malassezia furfur .
65
DESENVOLVIMENTO MICROBIANO:
MEDIDAS DE CRESCIMENTO MICROBIANO,
CURVA DE CRESCIMENTO MICROBIANO,
CONDIES IDEAIS DE CRESCIMENTO
MICROBIANO.
O crescimento celular esta associado ao aumento do tamanho
de uma clula ou do nmero de clulas, em consequncia da multiplicao celular, ou a ambos. Ocrescimento microbiano ocorre pelo
crescimento em nmero de umadeterminada populaode microrganismo. As bactrias normalmente se reprozuem por fisso inria.
Com o produto da fisso binria, ocorre a formao de duas clulas
individuais, idnticas clula parental A tendncia de crescimento
s pode ser mantida indefinidamente se houver um suprimento ilimitado de nutrientes, ambiente inaltervel e espao ilimitado. Em
ambientes naturais e em condies experimentais nas quais as disponibilidades de nutrientes e de espao sejam limitadas, em um dado
momento algum fator se torna desfavorvel: um nutriente essencial
torna-se escasso (fontes de energia, elementos-trao), produtos txicos do metabolismo acumulam-se em concentraes que inibem a
diviso celular, o espao torna-se limitado, etc. O tempo de gerao
da maioria das bactrias de 1 a 3 horas, mas algumas podem necessitar de mais de 24 horas para cada gerao(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Ocrescimento microbianotem como base a curva que representa o aumento de indivduos de uma populao em determinado
tempo, em sistema fechado ou em batch (cultura em descontnuo). Em condies experimentais, quando se inocula uma populao bacteriana em um frasco contendo uma quantidade inaltervel
de meio de cultura (sistema fechado), o crescimento dessa populao passa por quatro fases caractersticas, dependendo do ponto no
qual o processo do crescimento seja interrompido pelo experimentador. Uma linha de tendncia passando pelos pontos do grfico
uma curva exponencial e cada ponto por onde a curva passa indica
o nmero terico de clulas, em um dado tempo (BIBLIOTECA
UNIVERSITARIA, 2013).
Neste caso, ummeio de cultura lquidocontendo os nutrientes
necessrios ao crescimento celular inoculadocom uma populao
de clulas viveis do microrganismo em causa e incubado em condies ambientais favorveis sua multiplicao (BIBLIOTECA
UNIVERSITARIA, 2013).
Seacompanharmos o crescimento da populaode clulas ao
longo do tempo e representarmos graficamente o logaritmo do nmero de clulas por unidade de volume (ou, da Densidade ptica da
cultura, D.O, ou da concentrao da Biomassa Microbiana, X) em
funo do tempo, obter-se- uma curva caracterstica, como ilustrado na animao, que exibe as vriasfases do crescimento microbiano em descontnuo (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
66
Fase de morte
Durante a fase de morte ocorre a perda irreversvel da capacidade de diviso celular (morte celular). a taxa de morte celular torna-se
maior que a taxa de diviso e o nmero de clulas viveis decresce
exponencialmente at a completa extino da populao. Nesta fase
muitas clulas assumem formas incomuns. Em bactrias formadoras de esporos sobrevivem mais esporos que clulas vegetativas. A
durao desta fase varivel dependendo tanto das caractersticas
genticas da bactria quanto das condies ambientais (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Avaliao quantitativa do crescimento microbiano
Para acompanhar e traar a curva de crescimento de uma populao microbiana, ento necessrio fazer a avaliao quantitativa
da evoluo da concentrao de clulas ao longo do tempo. Esta
pode basear-se em mtodos diretos, como por exemplo:
- contagem de clulas totais;
- contagem de clulas viveis;
- determinao da biomassa seca.
Ou em mtodos indiretos, como o caso da:
- Anlise espectrofotomtrica da Densidade ptica (D.O.) da
cultura
Embora, em teoria, quando o crescimento de uma populao
microbiana equilibrado, o seu acompanhamento possa basear-se na quantificao de qualquer constituinte celular (por exemplo
cidos nucleicos, protenas, lipdios), o crescimento usualmente
acompanhado com base na determinao da Densidade pticada
cultura, daconcentrao de clulas(totais ou viveis) ou damassa
celular(biomassa). A seleo do mtodo a utilizar depende do tipo
de microrganismo e do problema particular em causa (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
cial)
Tempo
N total de clulas
1,5
2,5
32
32
3,5
64
128
4,5
256
512
5,5
1024
2048
6,5
4096
8192
...
...
10
1048576
to exponencial)
ANOTAES
tem-se quen, o nmero mdio de geraes que ocorreram durante as 5,5 horas de crescimento exponencial igual a 10.
Tal significa que o tempo mdio de uma gerao (g) 0.55 h
ou 33 minutos.
Crescimento exponencial
Caracterizao
Didatismo e Conhecimento
67
(1)
- que traduz o carcter exponencial do crescimento microbiano,
a concentrao de clulas no tempo e
a concene onde
trao de clulas no inicio do crescimento exponencial.
Se aplicarmos logaritmos naturais de um e do outro lado da
equao (1), obtm-se(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).:
(2)
- onde ataxa especfica de crescimento do microrganismoem causa, nas condies de crescimento testadas (as suas uni,
). Este padades so o inverso do tempo; por exemplo
rmetro do crescimento, que reflete a sua cintica, corresponde ao
declive da recta que resulta da representao grfica do logaritmo
natural do nmero de clulas em funo do tempo (representao
logartmicano grfico acima).
A taxa especfica de crescimento est relacionada com o nmero de geraes (ou o tempo de cada gerao) que ocorrem por unidade de tempo numa cultura em crescimento exponencial. De fato,
quanto maior for a taxa especfica de crescimento, mais rapidamente
se divide a populao, maior o nmero de geraes que ocorrem
no mesmo perodo de tempo e menor o tempo de cada gerao.
68
Esses biofilmes so constitudos por uma comunidade estruturada de clulas aderentes a uma superfcie inerte (abitica) ou viva
(bitica), embebidas numa matriz deexopolissacrido. A associao
dos organismos em biofilmes constitui uma forma de proteo ao
seu desenvolvimento, fomentando relaes simbiticas e permitindo a sobrevivncia em ambientes hostis (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Em ecossistemas aquticos, mais de 99,9% das bactrias crescem em biofilmes associadas a uma grande variedade de superfcies.
No Homem, a variedade de infeces bacterianas crnicas envolvendo biofilmes bastante significativa, podendo estas ser causadas por uma nica ou mais espcies (consultar o tpicoFormao
de biofilmes e envolvimento em infeces humanas). Os biofilmes
mais comuns na natureza so hetergeneos, compostos por duas ou
mais espcies, podendo os produtos do metabolismo de uma espcie
auxiliar o crescimento das outras e a adeso de uma dada espcie
fornecer ligandos que promovem a ligao de outras. Inversamente, a competio pelos nutrientes e a acumulao de metabolitos
txicos produzidos pelas espcies colonizadoras podero limitar a
diversidade de espcies num biofilme (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Atravs de tcnicas microscpicas, tem sido possvel observar
a grande heterogeneidade espacial dos biofilmes, em que coexistem
clulas em diferentes estados fisiolgicos. Esta heterogeneidade
constitui uma importante estratgia de sobrevivncia porque essas
clulas tero maior probabilidade de sobreviver a agresses externas
(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Assim, se considerarmos os resultados experimentais apresentados na tabela acima (representados graficamente na figura acima),
o valor da taxa especfica de crescimento,, pode ser calculado com
base numa anlise de regresso linear dos valores delnNtetcorrespondentes fase de crescimento exponencial. O valor decorresponde aodecliveda recta representada pela equao (2) (no
de esperar que os resultados experimentais se possam alinhar sobre a recta representada). Uma estimativa mais grosseira do valor
depode ser obtida do seguinte modo (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).:
Fig. 1 - Representao esquemtica das vrias etapas de desenvolvimento de um biofilme de acordo com o modelo aceite
para Pseudomonas aeruginosa(adaptado de Ghigo et al., 2003)
(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013)..
69
Maturao do biofilme
Aps a adeso primria, as clulas fracamente ligadas consolidam o processo de adeso produzindo exopolissacridos que complexam os materiais da superfcie e os receptores especficos localizados nos flagelos,Pili ou fmbrias. Na ausncia de interferncia
mecnica ou qumica, a adeso torna-se, nesta fase, irreversvel (etapa II da figura 1). Durante este estgio de adeso, os microrganismos
individualizados ou planctnicos podem colar-se uns aos outros,
formando agregados na superfcie a que aderem. Aps a adeso irreversvel da bactria superfcie, inicia-se o processo de maturao
do biofilme (etapas III e IV da figura 1). A densidade e complexidade do biofilme aumenta medida que as clulas se dividem (ou
morrem) e os componentes extracelulares gerados pelas bactrias
interagem com molculas orgnicas e inorgnicas do ambiente circundante para formar o glicoclix. Nesta fase, os biofilmes tornam-se altamente hidratados, formando-se estruturas abertas compostas
por 73 a 98% de material no celular, incluindo exopolissacrido e
canais por onde circulam os nutrientes (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
O crescimento de qualquer biofilme limitado pela disponibilidade de nutrientes no ambiente circundante e pela sua propagao
a clulas localizadas no interior do biofilme. Factores como o pH,
difuso de oxignio, fonte de carbono e osmolaridade controlam
tambm a maturao do biofilme Quando completamente maduro, o
biofilme funciona como um consrcio funcional de clulas, com padres de crescimento alterados, cooperao fisiolgica e eficincia
metablica. Nesta fase, as clulas localizadas em regies diferentes
do biofilme exibem diferentes padres de expresso gentica (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Ruptura do biofilme
Quando o biofilme atinge uma determinada massa crtica e o
equilbrio dinmico alcanado, as camadas mais externas do biofilme comeam a libertar clulas em estado planctnico, que se podem
rapidamente dispersar e multiplicar, colonizando novas superfcies e
organizando novos biofilmes em novos locais (etapa V da figura 1).
Didatismo e Conhecimento
70
Meios diferenciais permitem a distino entre diferentes grupos de microrganismos com base na capacidade de metabolizar componentes especficas do meio de cultura ou na morfologia (aparncia) das colnias. Permitem, por vezes, a identificao de microrganismos com base nas suas caractersticas biolgicas(BIBLIOTECA
UNIVERSITARIA, 2013).
Exemplo: meio Agar de sangue, que permite a distino entre bactrias hemolticas e no-hemolticas. O padro de hemlise
(dos glbulos vermelhos de sangue) no meio agar de sangue permite
destinguir bactrias, tais comoStreptococcus pyogenes(causadora
da faringite) que causa a lise completa dos glbulos vermelhos do
sangue produzindo halos transparentes volta das colnias,Streptococcus mutans(causa crie dentria), que no hemoltica, eStreptococcus pneumoniae(causadora de pneumonia bacteriana) que
lisa parcialmente os glbulos vermelhos do sangue(BIBLIOTECA
UNIVERSITARIA, 2013).
Ummeio de cultura lquidocontem todos os nutrientes necessrios ao crescimento do microrganismo, dissolvidos em gua.
Uma vez preparado, este pode ser inoculado com uma cultura pura
do microrganismo que se pretende cultivar e ser colocado a incubar
em condies timas (temperatura e arejamento) para o crescimento do microrganismo em causa (animao abaixo) (BIBLIOTECA
UNIVERSITARIA, 2013).
Por forma a averiguar o grau de pureza do inculo preparado,
recorre-se, normalmente, transferncia de uma amostra do inculo
para a superfcie de ummeio de cultura slidocom a mesma composio, contido numa placa de Petri (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Os meios de cultura slidos so preparados a partir da adio,
ao meio lquido correspondente, de um agente solidificante (oagarcom uma concentrao de cerca de 1.5-2% p/v), antes da esterilizao do meio (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Os meios de cultura podem ainda ter um estado fsico intermdio (semi-slido), que obtido atravs da adio de uma quantidade
reduzida de agente solidificante (0.3 a 0.5% de agar). A consistncia
menos firme destes meios permite a mobilidade de microrganismos
que sejam mveis(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Composio qumica
A composio de um dado meio de cultura est dependente da
espcie que se pretende cultivar. O conhecimento do habitat natural
de um dado microrganismo muitas vezes til na seleo do meio
de cultura adequado, j que as suas necessidades nutricionais refletem esse mesmo habitat.
Em microbiologia so utilizados basicamente dois tipos de
meios de cultura:
Meios de cultura sintticosou definidos meios de cultura cuja
composio qumica perfeitamente conhecida.
Meios de cultura complexos- meios de cultura cuja composio exata desconhecida. Como componentes apresentam
ingredientes como peptonas, cuja formula no conhecida. Um
exemplo deste tipo de meios omeio LBque um meio rico apropriado ao cultivo de diversos microrganismos, em particular de
bactrias(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Classificao funcional dos meios de cultura
Os meios de cultura podem ser usados na seleo e crescimento de um determinado microrganismo ou na identificao de uma
espcie em particular. Desta forma, a funo de um dado meio depende da sua composio. O isolamento de uma determinada estirpe
microbiana pode ser feito atravs do recurso e/ou combinao dos
seguintes tipos de meios:
Meios seletivos suprimem o crescimento de determinados
microrganismos em benefcio de outros.
Exemplo: meio seletivo para pesquisa de coliformes, utilizado
na anlise microbiolgica de guas: os meios complexos que permitem o isolamento de coliformes (enterobactriasGramnegativas)
so suplementados com sais biliares ou com o sal lauril-sulfato de
sdio, que actuam como agentes inibidores do crescimento de bactriasGram positivas(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Didatismo e Conhecimento
Neste mtodo, aps diluio apropriada da amostra, so espalhados superfcie do meio slido, 0.1 ml da amostra, com o auxlio de
uma vareta de vidro em L, previamente esterilizada(BIBLIOTECA
UNIVERSITARIA, 2013).
As placas so posteriormente incubadas, em posio invertida em atmosfera e temperatura adequadas, at ao aparecimento de
colnias(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
A observao das colnias obtidas superfcie de um meio de
cultura slido permite avaliar o grau de pureza de uma dada cultura.
A presena de mais de um tipo de colnias na mesma placa indica
que a cultura original no estava pura, ou seja, que se encontrava
contaminada com outro microrganismo(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
71
No mtodo por incorporao, a amostra diluda pipetada diretamente sobre a placa de Petri e s depois adicionado o meio
de cultura slido apropriado, no estado liquefeito. Neste mtodo,
obtm-se colnias superfcie e no interior do agar(BIBLIOTECA
UNIVERSITARIA, 2013).
Em todos os mtodos, as placas devem ser incubadas em posio invertida. A temperatura e tempo de incubao dependem do
microrganismo em causa(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Congelao
Liofilizao
As culturas de microrganismos podem ser conservadas temperatura ambiente no laboratrio durante anos, aps o seu tratamento
por liofilizao. Este processo consiste na congelao da suspenso
de clulas a temperaturas baixas (tipicamente, 20C), seguida da
sua sujeio a presso muito reduzida (ex. 0.005 atmosferas), o que
permite a sublimao da gua (passagem do estado slido ao estado
gasoso) e assim a desidratao das clula(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
INDICADORES BIOLGICOS;
Os indicadores biolgicos fazem parte da importante tarefa de
monitorizao do processo de esterilizao, oferecendo maior confiabilidade ao processo. So testes que vm em tubos plsticos com
tampa permevel ao vapor, com uma fita impregnada com uma populao conhecida de esporos, separada do meio nutriente (lquido
roxo), por uma ampola de vidro.
O termo indicador biolgico (ou biomarcador) utilizado em
sentido lato para representar qualquer medida que reflita uma interao entre um sistema biolgico e um agente ambiental, quer este seja
qumico, fsico ou biolgico (PRISTA; UVA, 2007)
72
Fervura
O mecanismo de ao da fervura a desnaturao de protenas.
No um mtodo de esterilizao, mas aps cerca de 15 minutos
de fervura pode matar uma grande quantidade de microorganismos,
mas no eficaz contra endsporos bacterianos e alguns vrus. Normalmente este mtodo utilizado em desinfeces caseiras, preparo
de alimentos, etc.
tambm usado nadescontaminaode roupas e instrumentos mdicos e cirrgicos, assim como de diversos materiais, reutilizveis ou descartveis, contaminados com culturas declulas viveis, antes de serem lavados ou colocados no lixo.
Pasteurizao
O mecanismo de ao da pasteurizao tambm a desnaturao de protenas. Este mtodo foi desenvolvido por Louis Pasteur
em 1846. Consiste em aquecer o produto em uma determinada temperatura, por um certo tempo e logo aps, resfri-lo. Este processo
reduz o nmero de microorganismos, mas no assegura sua esterilizao. Muito utilizado na esterilizao de leite, creme de leite,
cerveja, vinho, etc.
74
a) Flambagem
um mtodo simples, porm muito eficaz. Consiste em colocar
a ala de platina diretamente sobre o fogo, oxidando todo o material
at virar cinzas.
b) Incinerao
Tambm muito eficaz. Utilizado para incinerar diversos tipos
de materiais, como papis, materiais hospitalares, carcaas de animais, etc. Tambm oxida todo o material at virar cinzas.
c) Fornos
Normalmente utilizado para esterilizar vidrarias. Deve-se
atentar bem relao tempo x temperatura.
Radiaes
Dependem do comprimento de onda, da intensidade, da durao e da distncia da fonte para esterilizar.
Ionizantes
Utilizam radiaes gama, mas tem um custo elevado. Formam
radicais superativos e destroem o DNA. Utilizado para esterilizao
de produtos cirrgicos.
No-ionizantes
A mais empregada a luz ultravioleta, que altera o DNA atravs da formao de dmeros. As lmpadas germicidas so de baixo
poder de penetrao.
Oteste de ELISA(do inglsEnzyme Linked ImmunonoSorbent Assay) baseia-se em reaes antgeno-anticorpo detectveis por
meio de reaes enzimticas (teste imunoenzimtico).
Didatismo e Conhecimento
75
Principais tipos
- INDIRETO: detecta principalmente Ac
- SANDUCHE: detecta principalmente Ag
- COMPETIO: detecta Ag com baixo peso molecular (monovalentes)
- CAPTURA: deteco de Acs (principalmente IgM, evitando a
ao do ator reumatide)
ELISA INDIRETO
1) Inicialmente, o Ag adicionado placa e se adere superfcie dos poos
2) Em seguida, so realizadas lavagens para a retirada do Ag
livre nos poos
3)
A soluo a ser pesquisada adicionada. Caso contenha Acs especficos contra os Ags presentes na placa, estes se ligaro aos Ags
4)
Uma nova srie de lavagens realizada para retirar
os Acs que no se ligaram aos Ags
5)
ento adicionado o conjugado, que se liga aos Acs
6)
Uma nova lavagem retira o conjugado livre
7)
O cromgeno e o substrato so adicionados, e se o
cromgeno for oxidado pela ao da reao enzimtica, haver desenvolvimento de cor Antgeno Conjugado Y Anticorpo Cromgeno
(SOARES, 2010)
76
FUNO
Funo: ligar covalentemente a molculas especficas na superfcie de microorganismos invasores, ou em complexos Ag-Ac.
Objetivo: induzir desequilbrio osmtico e/ou apoptose em microorganismos invasores ou clulas tumorais. Componentes : formado
por um grupo de protenas sricas numericamente denominadas, e
na sua maioria produzidas pelo fgado. Complexo de ataque a membrana: Ao unir-se membrana microbiana ou ao complexo Ac-Ag,
o complemento forma um canal transmembrnico de forma anelar,
causando uma lise osmtica, induzindo apoptose e, conseqentemente, a morte da clula (DALTRO, 2010).
COMPREENSO DO ENSAIO: Complexo de ataque a membrana: Ao unir-se membrana microbiana ou ao complexo Ac-Ag,
o complemento forma um canal transmembrnico de forma anelar,
causando uma lise osmtica, induzindo apoptose e, conseqUentemente, a morte da clula(DALTRO, 2010)
ELISA DE CAPTURA
1) Adio de Ac IgG monoclonal contra IgM aos poos da placa
2) Lavagem para retirar os Ac livres
3) Adio da soluo com Ac IgM especfico a ser pesquisado
4) Lavagem para retirar o Ac no capturado
5) Adiciona-se Ag especfico marcado com uma enzima (conjugado) para o Ac pesquisado
6) Lavagem
7) Adio de cromgeno e de substrato. Se o cromgeno for oxidado pela ao da reao enzimtica, haver desenvolvimento de cor Antgeno Anticorpo IgM (SOARES, 2010).
Interpretao dos resultados
- Intensidade da cor diretamente proporcional concentrao
de Acs.
- Por ser um ELISA muito utilizado para a deteco de IgM,
capaz de identificar infeces na fase aguda(SOARES, 2010)
tar).
FIXAO DE COMPLEMENTO
um mtodo sorolgico usado para determinar a presena ou
semi-quantificar anticorpos (Ac) ou antgenos (Ag) (Inibio da
Fixao do Complemento) em uma amostra, utilizando a ao do
Sistema do Complemento. O sistema complemento um conjunto
de protenas sricas que tem por funo ajudar na eliminao de microorganismos invasores. Este sistema funciona em cascata e possui
trs vias. O teste de fixao do complemento tem como base a via
clssica, onde o complemento liga-se ao stio ativo formado pelo
complexo antgeno-anticorpo.
Didatismo e Conhecimento
Desvantagens do mtodo
- Probabilidades para falso-negativos devido a:
- Perda da atividade do complemento.
- Diluies inadequadas.
- Contaminao em solues (gerando efeito anticomplemen-
Vantagens:
- Baixo custo.
- Boa especificidade.
- Boa sensibilidade.
77
Fixao do complemento
O soro do paciente incubado para a inativao do complemento provavelmente existente, para no causar interferncia no teste.
O soro inativado incubado com hemcias (ou outras clulas)
que contm o Ag especfico para os Acs pesquisados adsorvido em
sua membrana. O Ac pesquisado, caso presente na amostra, se ligar
ao Ag da superfcie das clulas.
O complemento inserido para identificar a presena ou no do
complexo Ag/Ac. Em caso positivo, as protenas do sistema complemento se ligaro poro Fc dos Acs, iniciando uma cascata de
reaes que culminar com a lise das hemcias, liberando hemogoblina.
Aps centrifugao, o que se observa uma soluo vermelho-amarronzada homognea, devido a liberao de hemoglobina das
hemcias.
Sistema Hemoltico (hemcias recobertas com Ag especfico)
(DALTRO, 2010)
Tecnica
Desnaturao
Em linhas gerais a Estatstica fornece mtodos que auxiliam
o processo de tomada de deciso atravs da anlise dos dados que
possumos.
Em Estatstica, um resultado significante, portanto, tem significncia estatstica, se for improvvel que tenha ocorrido por acaso
(que em estatstica e probabilidade tratado pelo conceito de chance), caso uma determinada hiptese nula seja verdadeira, mas no
sendo improvvel caso a hiptese base seja falsa. A expresso teste
de significncia foi cunhada por Ronald Fisher.
Mais concretamente, no teste de hipteses com base em frequncia estatstica, a significncia de um teste a probabilidade mxima de rejeitar acidentalmente uma hiptese nula verdadeira (uma
deciso conhecida como erro de tipo I). O nvel de significncia de
um resultado tambm chamado de e no deve ser confundido
com o valor p (p-value).
Por exemplo, podemos escolher um nvel de significncia de,
digamos, 5%, e calcular um valor crtico de um parmetro (por
exemplo a mdia) de modo que a probabilidade de ela exceder esse
valor, dada a verdade da hiptese nulo, ser 5%. Se o valor estatstico calculado (ou seja, o nvel de 5% de significncia anteriormente
escolhido) exceder o valor crtico, ento significante ao nvel de
5%.
Se o nvel de significncia (ex: 5% anteriormente dado) menor, o valor menos provavelmente um extremo em relao ao valor
crtico. Deste modo, um resultado que significante ao nvel de
1% mais significante do que um resultado que significante ao
nvel de 5%. No entanto, um teste ao nvel de 1% mais susceptvel de padecer do erro de tipo II do que um teste de 5% e por isso
ter menos poder estatstico.
A temperatura elevada (geralmente >90C ) separa a cadeia dupla de DNA. As duas fitas de DNA so mantidas unidas por pontes
de hidrognio (relativamente fracas), que se rompem em altas temperaturas. As ligaes entre as molculas de fosfato e desoxirribose
(ligaes covalentes e mais fortes) permanecem intactas.
Hibridizao ou annealing
Temperatura deannealing ou hibridizao: normalmente
encontra-se entre 40C e 65C, dependendo do comprimento dos
primers e da sua sequncia. Os iniciadores (osprimers) marcam as
extremidades da sequncia alvo: estes iniciadores so curtas sequncias sintticas de nucleotdeos, entre 20 e 30 bases. Numa reao
de PCR so includos dois primers, um para cada cadeia simples de
DNA que foi produzida durante o passo de desnaturao.
Extenso
Aps a ligao dos primers ou iniciadores s sequncias complementares de DNA, a temperatura eleva-se a aproximadamente
72C e a enzima taq polimerase replica a cadeia de DNA. O processo de sntese iniciado onde esto ligados osprimers, incorporando
os nucleotdeos complementares sequncia alvo atravs dos dNTPs em soluo. A extenso inicia-se sempre no extremo 3 doprimer. A taq polimerase sintetiza exclusivamente na direo 5 para 3.
Revelao
Finalizada a PCR, o prximo passo detectar a presena de
produtos amplificados. Em geral, isso realizado pela eletroforese
em gel de agarose (corado com brometo de etdeo) ou poliacrilamida (corado pelo nitrato de prata).
Ao divisar um teste de hipteses, o tcnico dever tentar maximizar o poder de uma dada significncia, mas ultimamente tem de
reconhecer que o melhor resultado que se pode obter um compromisso entre significncia e poder, em outras palavras, entre os erros
de tipo I e tipo II.
importante ressaltar que os valores p Fisherianos so filosoficamente diferentes dos erros de tipo I de Neyman-Pearson. Esta
confuso infelizmente propagada por muitos livros de estatstica.
Diviso da Estatstica:
- Estatstica Descritiva: Mdia (Aritmtica, Geomtrica, Harmnica, Ponderada) - Mediana - Moda - Varincia - Desvio padro
- Coeficiente de variao.
- Inferncia Estatstica: Testes de hipteses - Significncia Potncia - Hiptese nula/Hiptese alternativa - Erro de tipo I - Erro
de tipo II - Teste T - Teste Z - Distribuio t de Student - Normalizao - Valor p - Anlise de varincia.
79
Panorama Geral:
Variveis: So caractersticas que so medidas, controladas ou
manipuladas em uma pesquisa. Diferem em muitos aspectos, principalmente no papel que a elas dado em uma pesquisa e na forma
como podem ser medidas.
- Variveis ordinais permitem ordenar os itens medidos em termos de qual tem menos e qual tem mais da qualidade representada pela varivel, mas ainda no permitem que se diga o quanto
mais. Um exemplo tpico de uma varivel ordinal o status scio-econmico das famlias residentes em uma localidade: sabe-se que
mdia-alta mais alta do que mdia, mas no se pode dizer, por
exemplo, que 18% mais alta. A prpria distino entre mensurao
nominal, ordinal e intervalar representa um bom exemplo de uma
varivel ordinal: pode-se dizer que uma medida nominal prov menos informao do que uma medida ordinal, mas no se pode dizer
quanto menos ou como esta diferena se compara diferena entre mensurao ordinal e intervalar.
- Variveis intervalares permitem no apenas ordenar em postos
os itens que esto sendo medidos, mas tambm quantificar e comparar o tamanho das diferenas entre eles. Por exemplo, temperatura,
medida em graus Celsius constitui uma varivel intervalar. Pode-se
dizer que a temperatura de 40C maior do que 30C e que um aumento de 20C para 40C duas vezes maior do que um aumento de
30C para 40C.
80
Aspectos bsicos da relao entre variveis: As duas propriedades formais mais elementares de qualquer relao entre variveis
so a magnitude (tamanho) e a confiabilidade da relao.
- Magnitude muito mais fcil de entender e medir do que a
confiabilidade. Por exemplo, se cada homem em nossa amostra tem
um WCC maior do que o de qualquer mulher da amostra, poderia-se dizer que a magnitude da relao entre as duas variveis (sexo e
WCC) muito alta em nossa amostra. Em outras palavras, poderia-se prever uma baseada na outra (ao menos na amostra em questo).
- Confiabilidade um conceito muito menos intuitivo, mas
extremamente importante. Relaciona-se representatividade do
resultado encontrado em uma amostra especfica de toda a populao. Em outras palavras, diz quo provvel ser encontrar uma
relao similar se o experimento fosse feito com outras amostras
retiradas da mesma populao, lembrando que o maior interesse est
na populao. O interesse na amostra reside na informao que ela
pode prover sobre a populao. Se o estudo atender certos critrios
especficos (que sero mencionados posteriormente) ento a confiabilidade de uma relao observada entre variveis na amostra pode
ser estimada quantitativamente e representada usando uma medida
padro (chamada tecnicamente de nvel-p ou nvel de significncia
estatstica).
Significncia Estatstica (nvel-p): A significncia estatstica de um resultado uma medida estimada do grau em que este
resultado verdadeiro (no sentido de que seja realmente o que
ocorre na populao, ou seja no sentido de representatividade da
populao). Mais tecnicamente, o valor do nvel-p representa um
ndice decrescente da confiabilidade de um resultado. Quanto mais
alto o nvel-p, menos se pode acreditar que a relao observada entre
as variveis na amostra um indicador confivel da relao entre
as respectivas variveis na populao. Especificamente, o nvel-p
representa a probabilidade de erro envolvida em aceitar o resultado
observado como vlido, isto , como representativo da populao.
Didatismo e Conhecimento
Se uma moeda ligeiramente viciada, de tal forma que quando lanada ligeiramente mais provvel que ocorram caras do que
coroas (por exemplo uma proporo 60% para 40%). Ento dez lanamentos no seriam suficientes para convencer algum de que a
moeda viciada, mesmo que o resultado obtido (6 caras e 4 coroas)
seja perfeitamente representativo do viesamento da moeda. Entretanto, dez lanamentos no so suficientes para provar nada? No, se
o efeito em questo for grande o bastante, os dez lanamentos sero
suficientes. Por exemplo, imagine-se que a moeda seja to viciada
que no importe como venha a ser lanada o resultado ser cara. Se
tal moeda fosse lanada dez vezes, e cada lanamento produzisse
caras, muitas pessoas considerariam isso prova suficiente de que h
algo errado com a moeda. Em outras palavras, seria considerada
prova convincente de que a populao terica de um nmero infinito
de lanamentos desta moeda teria mais caras do que coroas. Assim,
se a relao grande, ento poder ser considerada significante mesmo em uma pequena amostra.
Por que a significncia de uma relao entre variveis depende do tamanho da amostra: Se h muito poucas observaes
ento h tambm poucas possibilidades de combinao dos valores
das variveis, e ento a probabilidade de obter por acaso uma combinao desses valores que indique uma forte relao relativamente
alta. Considere-se o seguinte exemplo:
H interesse em duas variveis (sexo: homem, mulher; WCC:
alta, baixa) e h apenas quatro sujeitos na amostra (2 homens e 2
mulheres). A probabilidade de se encontrar, puramente por acaso,
uma relao de 100% entre as duas variveis pode ser to alta quanto 1/8. Explicando, h uma chance em oito de que os dois homens
tenham alta WCC e que as duas mulheres tenham baixa WCC, ou
vice-versa, mesmo que tal relao no exista na populao. Agora
considere-se a probabilidade de obter tal resultado por acaso se a
amostra consistisse de 100 sujeitos: a probabilidade de obter aquele
resultado por acaso seria praticamente zero.
Observando um exemplo mais geral. Imagine-se uma populao terica em que a mdia de WCC em homens e mulheres
exatamente a mesma. Supondo um experimento em que se retiram
pares de amostras (homens e mulheres) de um certo tamanho da populao e calcula-se a diferena entre a mdia de WCC em cada par
de amostras (supor ainda que o experimento ser repetido vrias vezes). Na maioria dos experimento os resultados das diferenas sero
prximos de zero. Contudo, de vez em quando, um par de amostra
apresentar uma diferena entre homens e mulheres consideravelmente diferente de zero. Com que freqncia isso acontece? Quanto menor a amostra em cada experimento maior a probabilidade de
obter esses resultados errneos, que, neste caso, indicariam a existncia de uma relao entre sexo e WCC obtida de uma populao
em que tal relao no existe. Observe-se mais um exemplo (razo
meninos para meninas, Nisbett et al., 1987):
H dois hospitais: no primeiro nascem 120 bebs a cada dia
e no outro apenas 12. Em mdia a razo de meninos para meninas
nascidos a cada dia em cada hospital de 50/50. Contudo, certo dia,
em um dos hospitais nasceram duas vezes mais meninas do que meninos. Em que hospital isso provavelmente aconteceu? A resposta
bvia para um estatstico, mas no to bvia para os leigos: muito
mais provvel que tal fato tenha ocorrido no hospital menor. A razo
para isso que a probabilidade de um desvio aleatrio da mdia da
populao aumenta com a diminuio do tamanho da amostra (e
diminui com o aumento do tamanho da amostra).
Pode uma relao inexistente ser um resultado significante: Quanto menor a relao entre as variveis maior o tamanho de
amostra necessrio para prov-la significante. Por exemplo, imagine-se quantos lanamentos seriam necessrios para provar que uma
moeda viciada se seu viesamento for de apenas 0,000001 %! Ento, o tamanho mnimo de amostra necessrio cresce na mesma proporo em que a magnitude do efeito a ser demonstrado decresce.
Quando a magnitude do efeito aproxima-se de zero, o tamanho de
amostra necessrio para prov-lo aproxima-se do infinito. Isso quer
dizer que, se quase no h relao entre duas variveis o tamanho
da amostra precisa quase ser igual ao tamanho da populao, que
teoricamente considerado infinitamente grande. A significncia estatstica representa a probabilidade de que um resultado similar seja
obtido se toda a populao fosse testada. Assim, qualquer coisa que
fosse encontrada aps testar toda a populao seria, por definio,
significante ao mais alto nvel possvel, e isso tambm inclui todos
os resultados de relao inexistente.
Como medir a magnitude (fora) das relaes entre variveis: H muitas medidas da magnitude do relacionamento entre
variveis que foram desenvolvidas por estatsticos: a escolha de uma
medida especfica em dadas circunstncias depende do nmero de
variveis envolvidas, nveis de mensurao usados, natureza das relaes, etc. Quase todas, porm, seguem um princpio geral: elas
procuram avaliar a relao comparando-a de alguma forma com a
mxima relao imaginvel entre aquelas variveis especficas.
Tecnicamente, um modo comum de realizar tais avaliaes observar quo diferenciados so os valores das variveis, e ento calcular qual parte desta diferena global disponvel seria detectada na
ocasio se aquela diferena fosse comum (fosse apenas devida
relao entre as variveis) nas duas (ou mais) variveis em questo.
Falando menos tecnicamente, compara-se o que comum naquelas
variveis com o que potencialmente poderia haver em comum se
as variveis fossem perfeitamente relacionadas. Outro exemplo:
Em uma amostra o ndice mdio de WCC igual a 100 em
homens e 102 em mulheres. Assim, poderia-se dizer que, em mdia,
o desvio de cada valor da mdia de ambos (101) contm uma componente devida ao sexo do sujeito, e o tamanho desta componente
1. Este valor, em certo sentido, representa uma medida da relao
entre sexo e WCC. Contudo, este valor uma medida muito pobre,
porque no diz quo relativamente grande aquela componente em
relao diferena global dos valores de WCC. H duas possibilidades extremas:
Por que pequenas relaes podem ser provadas como significantes apenas por grandes amostras: Os exemplos dos pargrafos anteriores indicam que se um relacionamento entre as variveis em questo (na populao) pequeno, ento no h meio de
identificar tal relao em um estudo a no ser que a amostra seja
correspondentemente grande. Mesmo que a amostra seja de fato
perfeitamente representativa da populao o efeito no ser estatisticamente significante se a amostra for pequena. Analogamente,
se a relao em questo muito grande na populao ento poder
ser constatada como altamente significante mesmo em um estudo
baseado em uma pequena amostra. Mais um exemplo:
Didatismo e Conhecimento
82
Ilustrao de como a distribuio normal usada em raciocnio estatstico (induo): Retomando o exemplo j discutido,
onde pares de amostras de homens e mulheres foram retirados de
uma populao em que o valor mdio de WCC em homens e mulheres era exatamente o mesmo. Embora o resultado mais provvel para
tais experimentos (um par de amostras por experimento) que a diferena entre a WCC mdia em homens e mulheres em cada par seja
prxima de zero, de vez em quando um par de amostras apresentar
uma diferena substancialmente diferente de zero. Quo freqentemente isso ocorre? Se o tamanho da amostra grande o bastante,
os resultados de tais repeties so normalmente distribudos, e
assim, conhecendo a forma da curva normal pode-se calcular precisamente a probabilidade de obter por acaso resultados representando vrios nveis de desvio da hipottica mdia populacional 0
(zero). Se tal probabilidade calculada to pequena que satisfaz ao
critrio previamente aceito de significncia estatstica, ento pode-se
concluir que o resultado obtido produz uma melhor aproximao do
que est acontecendo na populao do que a hiptese nula. Lembrando ainda que a hiptese nula foi considerada apenas por razes
tcnicas como uma referncia contra a qual o resultado emprico
(dos experimentos) foi avaliado.
Como calculado o nvel de significncia estatstico: Assuma-se que j tenha sido calculada uma medida da relao entre duas
variveis (como explicado acima). A prxima questo quo significante esta relao? Por exemplo, 40% da variao global ser explicada pela relao entre duas variveis suficiente para considerar
a relao significante? Depende. Especificamente, a significncia
depende principalmente do tamanho da amostra. Como j foi explicado, em amostras muito grandes mesmo relaes muito pequenas
entre variveis sero significantes, enquanto que em amostras muito
pequenas mesmo relaes muito grandes no podero ser consideradas confiveis (significantes). Assim, para determinar o nvel de significncia estatstica torna-se necessria uma funo que represente
o relacionamento entre magnitude e significncia das relaes
entre duas variveis, dependendo do tamanho da amostra. Tal funo
diria exatamente quo provvel obter uma relao de dada magnitude (ou maior) de uma amostra de dado tamanho, assumindo que
no h tal relao entre aquelas variveis na populao. Em outras
palavras, aquela funo forneceria o nvel de significncia (nvel-p), e isso permitiria conhecer a probabilidade de erro envolvida em
rejeitar a idia de que a relao em questo no existe na populao.
Esta hiptese alternativa (de que no h relao na populao)
usualmente chamada de hiptese nula. Seria ideal se a funo de
probabilidade fosse linear, e por exemplo, apenas tivesse diferentes inclinaes para diferentes tamanhos de amostra. Infelizmente, a
funo mais complexa, e no sempre exatamente a mesma.
Didatismo e Conhecimento
tes, as quais realam toda a potencialidade da Estatstica, na medida em que vo permitir tirar concluses acerca de uma populao,
baseando-se numa pequena amostra, dando-nos ainda uma medida
do erro cometido.
Exemplo: Ao chegarmos a uma churrascaria, no precisamos
comer todos os tipos de saladas, de sobremesas e de carnes disponveis, para conseguirmos chegar a concluso de que a comida de
boa qualidade. Basta que seja provado um tipo de cada opo para
concluirmos que estamos sendo bem servidos e que a comida est
dentro dos padres.
Levantamento de Dados
Basicamente os dados, dividem-se em contnuos e discretos. O
primeiro definido como qualquer valor entre dois limites quaisquer, tal como um dimetro. Portanto trata-se de um valor que pode
ser quebrado. So dados contnuos, questes que envolvem idade,
renda, gastos, vendas, faturamento, entre muitas outras.
Quando fala-se em valores discretos, aborda-se um valor exato, tal como quantidade de peas defeituosas. Comumente utiliza-se
este tipo de variveis para tratar de numero de filhos, satisfao e
escalas nominais no geral. A tipologia dos dados determina a varivel, ela ser portanto contnua ou discreta. Isto quer dizer que
ao definir-se uma varivel com contnua ou discreta, futuramente
j definiu-se que tipo de tratamento se dar a ela. De acordo com o
que dissemos anteriormente, numa anlise estatstica distinguem-se
essencialmente duas fases:
Uma primeira fase em que se procura descrever e estudar a
amostra:Estatstica Descritiva e uma segunda fase em que se procura tirar concluses para a populao.
organiz-los e sintetiz-los de forma a obter as informaes necessrias do conjunto de dados para responder as questes que esto
sendo investigadas. Tradicionalmente, a anlise descritiva limitava-se a calcular algumas medidas de posio e variabilidade. No final
da dcada de 70, Tukey criou uma nova corrente de anlise.
Utilizando principalmente tcnicas visuais, buscando descrever
quase sem utilizar clculos, alguma forma de regularidade ou padro nos dados, em oposio aos resumos numricos. Nessa etapa,
iremos produzir tabelas, grficos e medidas resumo que descrevam
a tendncia dos dados, quantifiquem a sua variabilidade, permitam
a deteco de estruturas interessantes e valores atpicos no banco
de dados.
Se x for a mdia aritmtica dos elementos do conjunto numrico A = {x1; x2; x3; ...; xn}, ento, por definio:
Concluso
A mdia aritmtica dos n elementos do conjunto numrico A
a soma de todos os seus elementos, dividida por n.
Exemplo
Calcular a mdia aritmtica entre os nmeros 3, 4, 6, 9, e 13.
Resoluo
Se x for a mdia aritmtica dos elementos do conjunto (3, 4, 6,
9, 13), ento x ser a soma dos 5 elementos, dividida por 5. Assim:
A mdia aritmtica 7.
Mdias
Se x for a mdia aritmtica ponderada dos elementos do conjunto numrico A = {x1; x2; x3; ...; xn} com pesos P1; P2; P3; ...; Pn,
respectivamente, ento, por definio:
P1 . x + P2 . x + P3 . x + ... + Pn . x =
= P1 . x1 + P2 . x2 + P3 . x3 + ... + Pn . xn
(P1 + P2 + P3 + ... + Pn) . x =
= P1 . x1 + P2 . x2 + P3 . x3 + ... + Pn . xn e, portanto,
Mdia Aritmtica
Definio
A mdia dos elementos do conjunto numrico A relativa adio chamada mdia aritmtica.
Didatismo e Conhecimento
85
Profissionais
Quantidade
Salrio
Serventes
20 profissionais
R$ 320,00
Tcnicos
10 profissionais
R$ 840,00
Engenheiros
5 profissionais
R$ 1.600,00
10. Calcule a mdia ponderada entre 5, 10 e 15 para os respectivos pesos 10, 5 e 20.
Exemplo
Respostas
1) Resposta 5.
Soluo:
M.A. ( 2 e 8 ) = 2 + 8 / 2 = 10 / 2 = 5 M.A. ( 2 e 8 ) = 5.
Resoluo
2) Resposta 6.
Soluo:
M.A. ( 3, 5 e 10 ) = 3 + 5 + 10 / 3 = 18 / 3 = 6 M.A. ( 3, 5 e
10 ) = 6.
3) Resposta 10.
Soluo: Para resolver esse exerccio basta fazer a soma dos
nmeros e dividi-los por quatro, que a quantidade de nmeros,
portanto:
Solucionando-a temos:
8. Numa turma de 8 srie 10 alunos possuem 14 anos, 12 alunos possuem 15 anos e oito deles 16 anos de idade. Qual ser a idade
mdia dessa turma?
9. Determine a mdia salarial de uma empresa, cuja folha de
pagamento assim discriminada:
Didatismo e Conhecimento
86
Pegamos ento este produto e extramos a sua raiz cbica, chegando ao valor mdio6.
Extramos a raiz cbica, pois o conjunto composto de 3 elementos. Se fossemnelementos, extrairamos a raiz de ndicen.
c) (59 + 84 + 37 + 62 + 10)/5=
= 252/5
= 50,4
d) (1 + 2 + 3 + 4 + 5 + 6 + 7 + 8 + 9)/9=
45/9 =
=5
6) Resposta 22.
Soluo: Neste caso a soluo consiste em multiplicarmos cada
nmero pelo seu respectivo peso e somarmos todos estes produtos.
Este total deve ser ento dividido pela soma total dos pesos:
7) Resposta 4,9.
Soluo:
Vejamos:
8) Resposta
Soluo:
9) Resposta
Soluo: Estamos diante de um problema de mdia aritmtica ponderada, onde as quantidades de profissionais sero os pesos.
E com isso calcularemos a mdia ponderada entre R$ 320,00 , R$
840,00 e R$ 1 600,00 e seus respectivos pesos 20 , 10 e 5. Portanto:
Este tipo de mdia calculado multiplicando-se todos os valores e extraindo-se a raiz de ndicendeste produto.
Digamos que tenhamos os nmeros4,6e9, para obtermos o
valor mdio aritmtico deste conjunto, multiplicamos os elementos
e obtemos o produto216.
Didatismo e Conhecimento
Salrio inicial
+ % mdio
Salrio final
R$ 1.000,00
+ % Informado
20%
R$ 1.200,00
R$ 1.000,00
12, 8417
R$ 1.128,74
R$ 1.200,00
12%
R$ 1.334,00
R$ 1.287,74
12, 8417
R$ 1.274,06
R$ 1.334,00
7%
R$ 1.438,00
R$ 1.274,06
12, 8417
R$ 1.438,08
Salrio Inicial
Observe que o resultado final deR$1.438,08 o mesmo nos dois casos. Se tivssemos utilizado a mdia aritmtica no lugar da mdia
geomtrica, os valores finais seriam distintos, pois a mdia aritmtica de13%resultaria em um salrio final deR$1.442,90, ligeiramente maior
como j era esperado, j que o percentual de13%utilizado ligeiramente maior que os12, 8417%da mdia geomtrica.
Clculo da Mdia Geomtrica
Em uma frmula: a mdia geomtrica dea1,a2, ...,an
A mdia geomtrica de um conjunto de nmeros sempre menor ou igual mdia aritmticados membros desse conjunto (as duas mdias
so iguais se e somente se todos os membros do conjunto so iguais). Isso permite a definio da mdia aritmtica geomtrica, uma mistura das
duas que sempre tem um valor intermedirio s duas.
A mdia geomtrica tambm amdia aritmtica harmnicano sentido que, se duassequncias(an) e (hn) so definidas:
E
entoanehnconvergem para a mdia geomtrica dexey.
Clculo da Media Geomtrica Triangular
Bom primeiro observamos o mapa e somamos as reas dos quadrados catetos e dividimos pela hipotenusa e no final pegamos a soma dos
ngulos subtraindo o que esta entre os catetos e dividimos por PI(3,1415...) assim descobrimos a media geomtrica dos tringulos.
Exemplo
A mdia geomtrica entre os nmeros 12, 64, 126 e 345, dada por:
G = R4[12 64126345] = 76,013
Aplicao Prtica
Dentre todos os retngulos com a rea igual a 64 cm, qual o retngulo cujo permetro o menor possvel, isto , o mais econmico? A
resposta a este tipo de questo dada pela mdia geomtrica entre as medidas do comprimento a e da largura b, uma vez que a.b = 64.
A mdia geomtrica G entre a e b fornece a medida desejada.
G = R[a b] = R[64] = 8
Resposta
o retngulo cujo comprimento mede 8 cm e lgico que a altura tambm mede 8 cm, logo s pode ser um quadrado! O permetro neste
caso p = 32 cm. Em qualquer outra situao em que as medidas dos comprimentos forem diferentes das alturas, teremos permetros maiores
do que 32 cm.
Didatismo e Conhecimento
88
3) Resposta 6.
Soluo: Aplicando a relao: g2 = a.h, teremos:
A mdia geomtrica entre dois segmentos de reta pode ser obtida geometricamente de uma forma bastante simples.
4) Resposta .
Soluo: Se a mdia geomtrica entre 3 nmeros 4, podemos
escrever:
e como x . y . z = 64 64 . m = 216
Dessa juno aparecer um novo segmento AC. Obtenha o ponto mdio O deste segmento e com um compasso centrado em O e
raio OA, trace uma semi-circunferncia comeando em A e terminando em C. O segmento vertical traado para cima a partir de B
encontrar o ponto D na semi-circunferncia. A medida do segmento BD corresponde mdia geomtrica das medidas dos segmentos
AB e BC.
5) Resposta 8.
Soluo: Se dispusermos de uma calculadora cientfica, este
exerccio pode ser solucionado multiplicando-se todos os nmeros e
extraindo-se do produto final, a raiz de ndice cinco, pois se tratam
de cinco nmeros:
Exerccios
1. Determine a mdia proporcional ou geomtrica entre 2 e 8.
2. Determine a mdia geomtrica entre 1, 2 e 4.
3. Determine a mdia geomtrica entre dois nmeros sabendo
que a mdia aritmtica e a mdia harmnica entre eles so, respectivamente, iguais a 4 e 9.
4. A mdia geomtrica entre 3 nmeros 4. Quanto devo multiplicar um desses nmeros para que a mdia aumente 2 unidades ?
5. Qual a mdia geomtrica dos nmeros2,4,8,16e32?
6. Dados dois nmeros quaisquer, a mdia aritmtica simples e
a mdia geomtrica deles so respectivamente 20 e 20,5. Quais so
estes dois nmeros?
7. A mdia geomtrica entre dois nmeros igual a 6. Se a eles
juntarmos o nmero 48, qual ser a mdia geomtrica entre estes
trs nmeros?
8. Calcule a mdia geomtrica entre 4 e 9.
9. Calcule a mdia geomtrica entre 3, 3, 9 e 81
10. Calcule a mdia geomtrica entre 1, 1, 1, 32 e 234.
Como dentro do radical temos um produto de potncias de mesma base, somando-se os expoentes temos:
Respostas
1) Resposta 4.
Soluo:
2) Resposta 2.
Soluo:
Observao: O termo mdia proporcional deve ser, apenas, utilizado para a mdia geomtrica entre dois nmeros.
Didatismo e Conhecimento
Elevando ambos os membros desta equao ao quadrado, iremos obter o valor numrico do produto destes dois nmeros:
Agora para que possamos solucionar a segunda equao, necessrio que fiquemos com apenas uma varivel na mesma. Para
conseguirmos isto iremos substituirapor41 - b:
9) Resposta 9.
Soluo:
10) Resposta 6.
Soluo:
Parab = 16temos:
Equipamentos de laboratrio
Parab = 25temos:
7) Resposta 12.
Didatismo e Conhecimento
90
Cuidados bsicos
O frasco de pesagem
A balana analtica um dos instrumentos de medida mais usados no laboratrio e dela dependem basicamente todos os resultados
analticos.
As balanas analticas modernas, que podem cobrir faixas de
preciso de leitura da ordem de 0,1 g a 0,1 mg, j esto bastante
aperfeioadas a ponto de dispensarem o uso de salas especiais para a
pesagem. Mesmo assim, o simples emprego de circuitos eletrnicos
no elimina as interaes do sistema com o ambiente. Destes, os
efeitos fsicos so os mais importantes, pois no podem ser suprimidos.
As informaes contidas neste texto visam indicar os pontos
mais importantes a serem considerados nas operaes de pesagem.
Localizao da Balana
A preciso e a confiabilidade das pesagens esto diretamente
relacionadas com a localizao da balana analtica.
Os principais itens a serem considerados para o seu correto posicionamento so:
A leitura
- Verificar se o mostrador indica exatamente zero ao iniciar a
operao. Tare a balana, se for preciso.
- Ler o resultado da operao to logo o detector automtico de
estabilidade desaparea do mostrador.
Calibrao
Calibrar a balana regularmente, principalmente se ela estiver
sendo operada pela primeira vez, se tiver sido mudada de local, aps
qualquer nivelamento e aps grandes variaes de temperatura ou
de presso atmosfrica.
As condies da bancada
Ficar firmemente apoiada no solo ou fixada na parede, de modo
a transmitir o mnimo de vibraes possvel.
- Ser rgida, no podendo ceder ou vergar durante a operao de
pesagem. Pode-se usar uma bancada de laboratrio bem estvel ou
uma bancada de pedra.
- Ficar localizada nas posies mais rgidas da construo, geralmente nos cantos da sala.
- Ser antimagntica (no usar metais ou ao) e protegida das
cargas eletrostticas (no usar plsticos ou vidros).
Manuteno
- Manter sempre a cmara de pesagem e o prato de pesagem
limpos.
- Usar somente frascos de pesagem limpos e secos.
Influncias Fsicas sobre as Pesagens Quando o mostrador da
balana ficar instvel seja por variao contnua da leitura para mais
ou para menos ou simplesmente se a leitura estiver errada
As condies ambientais
- Manter a temperatura da sala constante.
- Manter a umidade entre 45% e 60% (deve ser monitorada
sempre que possvel).
- No permitir a incidncia de luz solar direta.
- No pesar prximo a irradiadores de calor.
- Colocar as luminrias distantes da bancada, para evitar distrbios devido radiao trmica. O uso de lmpadas fluorescentes
menos crtico.
- Evitar pesar perto de equipamentos que usam ventiladores
(ex.: ar condicionado, computadores, etc.) ou perto da porta.
Didatismo e Conhecimento
ATENO: Voc estar observando influncias fsicas indesejveis sobre a operao. As mais comuns so:
Temperatura
- Efeito Observado: O mostrador varia constantemente em uma
direo.
- Motivo: A existncia de uma diferena de temperatura entre
a amostra e o ambiente da cmara de pesagem provoca correntes
de ar.
91
- Medidas corretivas:
- Nunca pesar amostras retiradas diretamente de estufas, muflas, ou refrigeradores.
- Deixar sempre a amostra atingir a temperatura do laboratrio
ou da cmara de pesagem.
- Procurar sempre manusear os frascos de pesagens ou as amostras com pinas. Se no for possvel, usar uma tira de papel.
- No tocar a cmara de pesagem com as mos.
- Usar frascos de pesagem com a menor rea possvel.
Gravitao
- Efeito Observado: As pesagens variam de acordo com a latitude. Quanto mais prximo do equador maior a fora centrfuga
devido rotao da Terra, que se contrape fora gravitacional.
Desta forma, a fora atuando sobre uma massa maior nos plos
que no equador. As pesagens dependem tambm da altitude em relao ao nvel do mar (mais exatamente, em relao ao centro da Terra). Quanto mais alto, menor a atrao gravitacional, que decresce
com o quadrado da distncia.
Variao de massa
- Efeito Observado: O mostrador indica leituras que aumentam
ou diminuem, continua e lentamente.
- Motivo: Ganho de massa devido a uma amostra higroscpica
(ganho de umidade atmosfrica) ou
perda de massa por evaporao de gua ou de substncias volteis.
- Medidas corretivas:
- Pesagens diferenciais ou comparativas ou de preciso, efetuadas em diferentes latitudes ou altitudes (ex.: no trreo e em outros
andares de mesmo prdio) devem ser corrigidas.
Medidas corretivas:
- Usar frascos de pesagem limpos e secos e manter o prato de
pesagem sempre livre de poeira, contaminantes ou gotas de lquidos.
- Usar frascos de pesagem com gargalo estreito.
- Usar tampas ou rolhas nos frascos de pesagem.
Eletrosttica
- Efeito Observado: O mostrador da balana fica instvel e indica massas diferentes a cada pesagem da mesma amostra. A reprodutibilidade dos resultados fica comprometida.
- Motivo: O seu frasco de pesagem est carregado eletrostaticamente. Estas cargas formam-se por frico ou durante o transporte
dos materiais, especialmente os ps e grnulos. Se o ar estiver seco
(umidade relativa menor que 40%) estas cargas eletrostticas ficam
retidas ou so dispersadas lentamente. Os erros de pesagem acontecem por foras de atrao eletrostticas que atuam entre a amostra
e o ambiente. Se a amostra e o ambiente estiverem sob o efeito de
cargas eltricas de mesmo sinal [+ ou -] ocorrem repulses, enquanto que sob o efeito de cargas opostas [+ e -], observam-se atraes.
Balo de Fundo Chato: Utilizado como recipiente para conter lquidos ou solues, ou mesmo fazer reaes com desprendimento de gases. Pode ser aquecido sobre o TRIP com TELA DE
AMIANTO.
Balo de Fundo Redondo: Utilizado principalmente em sistemas de refluxo e evaporao a vcuo, acoplado a ROTAEVAPORADOR.
Balo Volumtrico: Possui volume definido e utilizado para
o preparo de solues em laboratrio.
- Medidas corretivas:
Bquer: de uso geral em laboratrio. Serve para fazer reaes entre solues, dissolver substncias slidas, efetuar reaes
de precipitao e aquecer lquidos. Pode ser aquecido sobre a TELA
DE AMIANTO.
- Aumentar a umidade atmosfrica com o uso de um umidificador ou por ajustes apropriados no sistema de ar condicionado
(umidade relativa ideal: 45-60%).
- Descarregar as foras eletrostticas, colocando o frasco de pesagem em um recipiente de metal, antes da pesagem.
- Conectar a balana a um terra eficiente.
Magnetismo
- Efeito Observado: Baixa reprodutibilidade. O resultado da
pesagem de uma amostra metlica depende da sua posio sobre o
prato da balana.
Didatismo e Conhecimento
92
Seu uso mais comum se d nas etapas de padronizao de solues, onde um sal de uma determinada substncia aquecido em
estufa e posteriormente posto para esfriar sob presso reduzida no
interior do dessecador. O resfriamento a presso reduzida e no interior do dessecador impede a absoro de gua pelo sal enquanto
sua temperatura se iguala ambiente, para que seja posteriormente
pesado.
Erlenmeyer: Utilizado em titulaes, aquecimento de lquidos
e para dissolver substncias e proceder reaes entre solues.
Estante para Tubo de Ensaio: usada para suporte de os TUBOS DE ENSAIO.
Funil de Bchner: Utilizado em filtraes a vcuo. Pode ser
usado com a funo de FILTRO em conjunto com o KITASSATO.
Funil de Haste Longa: Usado na filtrao e para reteno de
partculas slidas. No deve ser aquecido.
Funil de Separao: Utilizado na separao de lquidos no
miscveis e na extrao lquido/lquido.
Garra de Condensador: Usada para prender o condensador
haste do suporte ou outras peas como bales, erlenmeyers etc.
Bureta: Aparelho utilizado em anlises volumtricas. Uma bureta um instrumento de medio e transferncia rigorosa de volumes lquidos.
Cadinho: Pea, geralmente de porcelana, cuja utilidade aquecer substncias a seco e com grande intensidade, por isto pode ser
levado diretamente ao BICO DE BUNSEN.
Para utilizar uma destas pipetas tambm necessrio uma prpipeta ou pompete, um pipet-aid ou um macro-filler. Estes podem
ser colocados na ponta superior da pipeta, produzindo um abaixamento da presso de seu interior e provocando a aspirao do lquido de tal forma a preencher a pipeta no volume desejado.
Um outro tipo de pipetas, usado especialmente em laboratrios
de biologia, bioqumica ou quando h a necessidade de se transferir volumes muito reduzidos, a micropipeta (imagem acima). Esta
permite medir pequenos volumes, da ordem de microlitros, porm,
com preciso e exatido geralmente inferiores s obtidas pelas pipetas graduadas e volumtricas de maior volume. Este tipo de pipeta
utiliza pontas (no Brasil chamadas de ponteiras) descartveis, feitas
de polipropileno. O lquido aspirado por elas no entra ou no deve
entrar no corpo principal da micropipeta, sob risco de adulter-la e
descalibr-la.
93
Balo volumtrico:Utilizado para preparar volumes de solues. Por ser mais estreito, o volume medido por ele mais preciso;
Balo de fundo chato:Para preparar solues, aquec-las e
realizar reaes em que gases se desprendem;
Balo de fundo redondo:Tem os mesmos usos que o anterior, porm, pode ser aquecido de uma forma mais abrangente e
apropriado aos processos de destilao, em sistemas de refluxo e
evaporao a vcuo;
Proveta: um cilindro graduado usado para medir e transferir
lquidos e solues por escoamento. No possui muita preciso;
Pipeta graduada: Todas as pipetas so usadas para medir e
transferir volumes de lquidos ou solues, em que se coloca o lquido por um orifcio na extremidade inferior atravs da suco. Para
realizar essa suco, geralmente, usa-se uma pera de borracha.
Sua preciso muito boa;
Vidraria Laboratorial
Bureta: Mede volumes de lquidos e solues que so colocados pela abertura na parte superior. Eles so transferidos por escoamento, na parte inferior. Seu principal benefcio possuir uma
torneira que permite escoar com preciso a quantidade desejada, at
mesmo gota a gota. Visto que ela possui graduaes em toda a sua
extenso, possvel realizar a leitura de volume escoado.
A bureta muito usada em titulaes, onde fica o titulante;
Vareta de vidro (ou basto de vidro):Usada para agitar ou
misturar solues;
Funil de vidro:Realiza filtraes simples.
Texto adaptado por Jennifer Rocha Vargas Fogaa
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O nvel de Biossegurana 3, as prticas, o equipamento de segurana, o planejamento e construo das dependncias so aplicveis para laboratrios clnicos, de diagnstico, laboratrio-escola, de
pesquisa ou de produes. Nesses locais realiza-se o trabalho com
agentes nativos ou exticos que possuam um potencial de transmisso via respiratria e que possam causar infeces srias e potencialmente fatais. O Mycobacterium tuberculosis, o vrus da encefalite
de St. Louis e a Coxiella burnetii so exemplos de microrganismos
determinados para este nvel. Os riscos primrios causados aos trabalhadores que lidam com estes agentes incluem a auto inoculao,
a ingesto e a exposio aos aerossis infecciosos.
No Nvel de Biossegurana 3, enfatizam-se mais as barreiras
primrias e secundrias para protegerem os funcionrios de reas
contguas, a comunidade e o meio ambiente contra a exposio aos
aerossis potencialmente infecciosos. Por exemplo, todas as manipulaes laboratoriais devero ser realizadas em uma cabine de
segurana biolgica (CSB) ou em outro equipamento de conteno,
como uma cmara hermtica de gerao de aerossis. As barreiras
secundrias para este nvel incluem o acesso controlado ao laboratrio e sistemas de ventilao que minimizam a liberao de aerossis
infecciosos do laboratrio.
Didatismo e Conhecimento
96
97
(iii) o compromisso da gerncia do laboratrio com as boas prticas profissionais e de qualidade de ensaios, calibrao, validao
e verificao,
(iv) o compromisso da gerncia do laboratrio com o cumprimento do contedo deste guia,
(v) o requisito de que todo o pessoal relacionado com as atividades de anlise e calibrao dentro do laboratrio esteja familiarizado com a documentao concernente a qualidade e a implementao das polticas e procedimentos de seu trabalho.
Entende-se como barreiras secundrias algumas solues fsicas presentes nos ambientes, devidamente previstas nos projetos
de arquitetura e de instalaes prediais, e construdas de forma a
contriburem para a proteo da equipe do estabelecimento de sade, proporcionando uma barreira de proteo para as pessoas que se
encontram fora do laboratrio contra agentes infecciosos que podem
ser liberados acidentalmente para o ambiente externo.
As barreiras secundrias recomendadas dependero do risco de
transmisso dos agentes especficos. Quando o risco de contaminao atravs da exposio aos aerossis infecciosos estiver presente,
nveis mais elevados de conteno primria e barreiras de proteo
secundrias podero ser necessrios para evitar que agentes infecciosos escapem para o meio ambiente.
NOES DE PRTICAS
LABORATORIAIS ADEQUADAS.
A gerncia da organizao ou laboratrio deve estabelece, implementar e manter um sistema de gesto da qualidade apropriado
para o alcance das suas atividades, incluindo o tipo, serie e volume
dos ensaios e/ou atividade de calibraes, validao e verificao relacionadas. A gerncia do laboratrio deve assegurar que as suas polticas, sistemas, programas, procedimentos e instrues descrevam
a sua extenso necessria para que permita ao laboratrio assegurar
a qualidade dos resultados dos ensaios que gera. A documentao
usada neste sistema de gesto da qualidade deve ser comunicada,
estar disponvel e ser entendida, e implementada pelo pessoal apropriado. Os elementos deste sistema devem estar documentados em
um manual da qualidade, para a organizao e seu conjunto ou para
um laboratrio dentro da organizao.
O laboratrio deve estabelecer, implementar e manter procedimentos operacionais padro (POPs) autorizados e escritos incluindo, mas no se limitando, a operaes tcnicas e administrativa, tais
como:
(a) aes relativas ao pessoal, incluindo qualificaes, treinamento, vesturio e higiene;
(b) controle de alteraes;
(c) auditoria interna
(d) procedimento de reclamaes
(e) implementao e verificao de aes corretivas e preventivas
(f) a compra e recebimento de materiais (por exemplo, amostras, reagentes);
(g) a obteno, preparao e controle de sustncias e materiais
de referncia (8);
(h) rotulagem interna, quarentena e armazenamento de materiais;
Nota: Os laboratrios de controle de qualidade de um fabricante podem ter esta informao em documentos distintos do manual da qualidade
O manual da qualidade deve conter no mnimo:
a) uma declarao de poltica de qualidade, que inclua pelo menos o seguinte:
(i) uma declarao das intenes da gerncia do laboratrio
com relao ao padro de servio que proporcionar;
(ii) um compromisso de estabelecer, implementar e manter um
sistema de gesto da qualidade efetivo,
Didatismo e Conhecimento
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As atividades do laboratrio devem ser peridica e sistematicamente auditadas (internamente e onde corresponda, por auditorias
ou inspees externas) para verificar o cumprimento dos requisitos
do sistema de gesto da qualidade e se for necessrio, para aplicar
aes preventivas e corretivas. As auditorias devem ser realizadas
por pessoas qualificadas e treinadas, que sejam independentes da
atividade a ser auditada. O gerente de qualidade responsvel pelo
planejamento e organizao de auditorias internas abordando todos
os elementos do sistema de gesto da qualidade. Tais auditorias devem ser registradas, junto com os detalhes de qualquer ao corretiva e preventiva adotadas.
Registros
O laboratrio deve estabelecer e manter procedimentos para
a identificao, coleo, indexao, recuperao, armazenamento,
manuteno, eliminao e acesso a todos os registros da qualidade
e tcnico-cientficos.
Todas as observaes originais, incluindo os clculos e dados
brutos, registros de calibraes, validao e verificaes, e resultados finais, devem ser conservados como registros, por um perodo
apropriado de tempo em conformidade com as regulamentaes
nacionais, e corresponde, mediante disposies contratuais, o que
for mais longo. Os registros devem incluir os dados registrados nos
registros de trabalho analtico pelo tcnico ou analista em pginas
numeradas consecutivamente com referncias aos apndices que
contm os registros pertinentes, por exemplo cromatogramas e espectros. Os registros de cada ensaio devem conter informao suficiente que permita que os ensaios sejam repetidos e/ou os resultados
recalculados, se necessrio. Os registros devem incluir a identidade do pessoal envolvido na amostragem, preparao e anlises das
amostras. Os registros das amostras que so usadas em procedimentos legais, devem ser mantidos de acordo com os requisitos legais
que lhes sejam aplicveis.
Todos os registros da qualidade e tcnico/cientficos (incluindo registros de ensaios analticos, laudos de anlise e registros de
trabalho analtico) devem ser legveis, prontamente recuperveis,
armazenados e retidos dentro de dependncias que propiciem um
ambiente adequado para impedir modificaes, danos ou deteriorao e/ou perda.
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Instalaes
As instalaes do laboratrio devem ser de tamanho, construo e localizao adequados. Estas instalaes devem ser projetadas
para atender as funes e operaes que so realizadas. As salas de
repouso e descanso devem ser separadas das reas de laboratrio. Os
vestirios e os banheiros devem ser de fcil acesso e adequados para
o nmero de usurios.
As instalaes do laboratrio devem dispor de equipamentos
de segurana adequados situados apropriadamente e devem ser includas as medidas para assegurar uma boa manuteno. Cada laboratrio deve estar equipado com os instrumentos e equipamentos
adequados, incluindo bancos, bancadas de trabalho e sistemas de
exausto.
As condies ambientais, incluindo iluminao, fontes de energia, temperatura, umidade e presso do ar devem ser adequadas para
as funes e operaes a serem realizadas. O laboratrio deve garantir que as condies ambientais sejam monitoradas, controladas
e documentadas para que no invalidem os resultados ou afetem de
forma adversa a qualidade das medies.
(a) um chefe de laboratrio (supervisor), que deve ter qualificaes apropriadas para a funo, com uma extensa experincia na
anlise de medicamentos e gesto de laboratrio, em laboratrio farmacutico de controle de qualidade em setor regulador ou na indstria. O chefe do laboratrio responsvel pelo contedo dos laudos
de anlise e relatrios de ensaios analticos. Esta pessoa tambm
responsvel por garantir que:
100
Devem estar previstos os procedimentos para a eliminao segura dos tipos de resduos, incluindo resduos txicos (qumicos e
biolgicos), reagentes, amostras, solventes e filtros de ar;
As anlises microbiolgicas, quando realizadas, devem ser conduzidas em uma unidade de laboratrio projetada e construda apropriadamente. Para maiores orientaes, ver a minuta de documento
de trabalho Guia da OMS sobre as boas prticas para laboratrios
de microbiologia farmacutica (referncia QAS/09.297).
Se um ensaios biolgicos in vivo (por exemplo ensaio de pirogneo em coelhos) est includo no escopo das atividades do laboratrio, os biotrios devem ser isolados de outras reas do laboratrio
com uma entrada e sistema de ar condicionado separados. Devem
ser aplicadas orientaes e regulamentos pertinentes (18).
Devem ser mantidas dependncias separadas para o armazenamento seguro de amostras, amostras retidas (ver Parte Trs, Seo
20), reagentes e acessrios de laboratrio (ver Parte Dois, seces
10.13- 10.14), substncias e materiais de referncia (ver Parte Dois,
seo 11). As instalaes de armazenamento devem estar equipadas
para armazenar material, se necessrio, sob refrigerao (2-8 C) e
congelamento (-20 C) e protegida com chave. Todas as condies
de armazenamento devem ser controladas, monitoradas e mantidas
em registros. O acesso deve ser restrito ao pessoal autorizado.
Contratos
Aquisio de servios e suprimentos
O laboratrio deve ter um procedimento para a seleo e aquisio de servios e suprimentos que afetam a qualidade dos ensaios.
Procedimentos apropriados de segurana devem ser elaborados e implementados rigorosamente para as reas de estocagem e
utilizao de reagentes inflamveis ou txicos. O laboratrio deve
fornecer salas ou reas separadas para o armazenamento de substncias inflamveis, bases e cidos concentrados e fumegantes, aminas
volteis e outros reagentes como o cido clordrico, cido ntrico,
amnia e bromo. Materiais auto-inflamveis tais como sdio e potssio metlicos, tambm devem ser armazenados separadamente.
Provises pequenas de cidos, bases e solventes podem ser mantidos em depsitos do laboratrio, mas grandes quantidades destes
produtos devem ser retidas preferencialmente em um local separado
do edifcio do laboratrio.
Os reagentes sujeitos a regulamentaes de venenos ou substncias narcticas controladas e psicotrpicas devem ser identificadas
claramente segundo as exigncias da legislao nacional. Devem ser
mantidos separadamente de outros reagentes em armrios trancados
a chave. Um membro do pessoal designado como responsvel, dever manter um registro destas substncias. O chefe de cada unidade
deve aceitar a responsabilidade pessoal pela guarda destes reagentes
mantidos no local de trabalho.
Quando um laboratrio realiza ensaios para um cliente e subcontrata parte do ensaio, deve informar por escrito ao cliente este
acordo e, se for o caso, obter sua aprovao.
Deve haver um contrato escrito que estabelea claramente os
direitos e as responsabilidades de cada parte, defina os trabalhos
contratados e os acordos tcnicos realizados em relao ao mesmo.
O contrato deve permitir ao laboratrio auditar as instalaes e competncias da organizao contratada e assegurar o acesso do laboratrio aos registros e amostras retidas.
Os gases tambm devem ser guardados em instalaes dedicadas, se possvel isolados do edifcio principal. Sempre que possvel,
deve-se evitar recipientes de gs no laboratrio e prefervel a distribuio a partir de um deposito externo de gs. Se os recipientes
de gs esto presentes no laboratrio, devem ser fixados com segurana.
Didatismo e Conhecimento
Todos os recipientes de reagentes devem ser inspecionados visualmente para garantir que os lacres esto intactos, quando se enviar para o armazenamento e quando distribudos para as unidades.
Reagentes
gua
Devem ser tomadas precaues para evitar a contaminao durante o fornecimento, armazenamento e distribuio.
Os estoques de reagentes devem ser mantidos em um depsito sob condies de armazenamento apropriadas (temperatura ambiente, refrigerao ou congelamento). O depsito deve manter um
fornecimento de recipientes limpos, frascos, esptulas, funis e rtulos, se necessrio, para dispensar reagentes de recipientes maiores
para menores. Equipamentos especiais podem ser necessrios para a
transferncia de grandes volumes de lquidos corrosivos.
(a) O nome;
(b) a molaridade (ou concentrao);
(c) a data da preparao e as iniciais do tcnico/analista
(d) a data da padronizao e as iniciais do tcnico/analista; e
(e) o fator de correo
Nota: Deve-se deve utilizar substncias de referncia farmacopicas, quando disponveis e sejam apropriadas para anlise.
Quando uma substncia de referncia farmacopica no tenha sido
estabelecida, o fabricante deve utilizar sua prpria substncia de
referncia.
Nota: O laboratrio deve assegurar que as solues volumtricas estejam adequadas no momento de uso.
Os materiais de referncia podem ser necessrios para a calibrao e / ou qualificao de equipamentos, instrumentos ou outros
dispositivos.
102
Como o laboratrio pode ter certeza de que sua gua apropriada para os exames?
Existem bons purificadores que transformam a gua potvel em
gua reagente. Mas no basta comprar o aparelho e instal-lo para
ter essa garantia. preciso verificar se a gua de entrada - recebida
da rede de abastecimento - de boa qualidade. Alguns testes podem
ser feitos para verificar o nvel do contaminantes slidos, orgnicos,
partculas, microrganismos etc. Uma gua ferruginosa, alm de interferir em diversas dosagens, pode ainda danificar os equipamentos.
Quais so os principais contaminantes da gua e de que forma interferem nos ensaios?
O cloro excessivo na rede pode passar pelo filtro de carvo,
danificar o equipamento e chegar gua, oxidando os reagentes e
prejudicando os resultados de exames, principalmente os ensaios
colorimtricos. O ferro um coagulante. No perceb-lo na gua
seria erro at primrio, j que facilmente visvel.
Didatismo e Conhecimento
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ANOTAES
Didatismo e Conhecimento
104
Ionizao: um processo qumico mediante ao qual se produzem ons, espcies qumicas eletricamente carregadas, pela perda ou ganho de
eltrons a partir de tomos ou molculas neutras. H vrias maneiras pelas quais se podem formar ons. Na ionizao de um cido, por exemplo,
a molcula de gua responsvel por capturar um hidrognio que est polarizado positivamente no cido, formando o on hidroxnio (H3O+) e
um nion (A-, sendo A um elemento ou composto presente no cido).
HA(aq) + H2O H3O+(aq) + A-(aq)
No que se refere radiao, h uma forma de ionizao produzida pelas radiaes ionizantes que transferem muita energia ao tomo atingido deixando-o instvel, podendo gerar a fisso nuclear. Esse tipo de ionizao muito perigosa aos seres vivos, pois pode ocasionar mutaes
genticas e cancergenas. O exemplo a seguir uma equao qumica que representa a ionizao radioativa:
Ca40 + Radiao ionizante 24 + 18Ar36
20
Pode-se tambm fornecer energia para o tomo liberar os seus eltrons. Inclui-se aqui a propriedade peridica energia de ionizao ou
potencial de ionizao, que diz quanta energia necessria para retirar um eltron do tomo.
Ateno: no confundir com dissociao, que a separao de ons. Com isso a Ionizao se satisfaz com o H20
Destilao: gua destilada a gua que foi obtida por meio da destilao (condensao do vapor de gua obtido pela ebulio ou pela
evaporao). A destilao o modo de separao baseado no fenmeno de equilbrio lquido-vapor de misturas. Em termos prticos, quando
temos duas ou mais substncias formando uma mistura lquida, a destilao pode ser um mtodo para separ-las. Basta apenas que tenham
volatilidades razoavelmente diferentes entre si.
Um exemplo de destilao que remonta antiguidade a destilao de bebidas alcolicas. A bebida feita pela condensao dos vapores
de lcool que escapam mediante o aquecimento de um mosto fermentado. Como o ponto de ebulio do lcool menor que o da gua presente
no mosto, o lcool evapora, dando-se assim a separao da gua e o lcool. Um exemplo disto tambm a aguardente, com compostos de cana
de acar, possibilitando a separao devido aos diferentes pontos de ebulio. Outros exemplos so a grappa, o whisky, o conhaque etc... O
vapor que escapa da mistura aquecida capturado por uma serpentina refrigerada que o devolve ao estado lquido.
Didatismo e Conhecimento
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Carvo Ativado: um material de carbono com uma porosidade bastante desenvolvida, com capacidade de coletar seletivamente
gases, lquidos ou impurezas no interior dos seus poros, apresentando portanto um excelente poder de clarificao, desodorizao e
purificao de lquidos ou gases. Este tipo de carvo obtido a partir
da queima controlada com baixo teor de oxignio de certas madeiras, a uma temperatura de 800 C a 1000 C, tomando-se o cuidado
de evitar que ocorra a queima total do material de forma a manter
sua porosidade. O carvo ativado pode ser feito a partir de cascas de
coco, mas tambm de restos de cortia, material muito poroso, com
caratersticas excelentes no campo da filtrao, desodorizao e remoo de radioativos e txicos. Tambm possvel produzir carvo
ativado a partir da queima de ossos bovinos em altas temperaturas,
sendo este tambm chamado carvo de osso ou negro animal.
Os usos mais comuns para o carvo ativado so a elaborao
de filtros para adsoro de gases e no tratamento de guas, onde o
carvo se destaca por reter nos seus poros impurezas e elementos
poluentes. utilizado em diversos ramos das indstrias qumica,
alimentcia e farmacutica, da medicina e em sistemas de filtragem,
bem como no tratamento de efluentes e gases txicos resultantes de
processos industriais.
Filtrao: a gua passa por filtros formados por carvo, areia e
pedras de diversos tamanhos. Nesta etapa, as impurezas de tamanho
pequeno ficam retidas no filtro. Filtrao ou filtragem um mtodo
utilizado para separar slido de lquido ou fluido que est suspenso,
pela passagem do lquido ou fluido atravs de um meio permevel
capaz de reter as partculas slidas. Existem filtraes de escala laboratorial e filtraes de escala industrial.
Numa filtrao qualitativa, usado o papel de filtro qualitativo,
mas, dependendo do caso, o meio poroso poder ser uma camada de
algodo, tecido, polpa de fibras quaisquer, que no contaminem os
materiais. Para as filtraes quantitativas, usa-se geralmente papel
filtro quantitativo, ou placas de vidro sinterizada ou de porcelana
sinterizada. Em qualquer dos casos indicados h uma grande gama
de porosidades e esta dever ser selecionada dependendo da aplicao em questo
Osmose Reversa: um processo de separao em que um solvente separado de um soluto de baixa massa molecular por uma
membrana permevel ao solvente e impermevel ao soluto. Isso
ocorre quando se aplica uma grande presso sobre este meio aquoso,
o que contraria o fluxo natural da osmose.
Didatismo e Conhecimento
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Didatismo e Conhecimento
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ANOTAES
Didatismo e Conhecimento
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ANOTAES
Didatismo e Conhecimento
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Didatismo e Conhecimento
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Transporte de amostras
Quando h a necessidade de transporte de amostras entre unidades laboratoriais, devemos ficar atentos manuteno da integridade das
amostras (tempo e temperatura de transporte) e s condies de biossegurana de quem realiza o transporte e daqueles que possam vir a ter
contato eventual com o material transportado. Portanto, o laboratrio responsvel por garantir o cumprimento das regras de biossegurana.
A regulao do transporte de amostras perigosas, incluindo substncias infectantes, estabelecida por vrios documentos publicados pelos
rgos competentes.
A IAC 153-1001, uma portaria do Departamento de Aviao Civil (DAC) publicada em 2005, trata do transporte de artigos perigosos e define a documentao da embalagem para o transporte de artigos perigosos. Faz uma abordagem importante sobre a responsabilidade especfica
do expedidor, que o torna pelo preenchimento de formulrio de declarao para todas as expedies que contenham artigos perigosos definidos
ou classificados como tal no Doc. 9284 AN 905 da OACI e Regulamentao de artigos perigosos da International Air Transport Association
(IATA), a menos que a Declarao do Expedidor no seja requerida.
Responsabilidades do expedidor com respeito documentao:
- Utilizar o formulrio adequado da maneira correta;
- Completar o formulrio de maneira exata e legvel;
- Certificar-se de que o formulrio est adequadamente assinado, quando se apresentar expedio ao operador de transporte areo;
- Certificar-se de que o envio tenha sido preparado em conformidade com o Doc. 9284;
- AN 905 da OACI e Regulamentao de Artigos Perigosos da IATA.
A Normatizao da International Air Transport Association (IATA) - em portugus utilizada AITA - determina as regras para o transporte
para materiais infecciosos e substncias biolgicas com ou sem potencial infeccioso, alm de outros materiais perigosos, a nvel internacional.
Esta resoluo define que as pessoas jurdicas envolvidas com expedio, transporte, manuseio, movimentao e armazenagem de artigos
perigosos devero possuir colaboradores habilitados no trato com artigos perigosos, devendo ter o certificado do curso de carga perigosa. O
certificado tem validade de 2 anos para o transporte areo e de 3 anos para o transporte terrestre.
A IATA estabelece, ainda, as codificaes para cada material e tambm o tipo de embalagem especfica, assim como seu modo de manuseio. Em maro de 2007, a Organizao Pan-Americana da Sade publicou uma sntese das regulamentaes para o transporte de substncias
infecciosas. O laboratrio de microbiologia tem uma enorme responsabilidade para que a execuo dos processos seja segura com o resduo
gerado. Portanto, tem responsabilidade com a qualidade dos seus exames e tambm com a sade dos seus colaboradores, e em evitar a contaminao do ambiente interno e externo.
Alm disto, ele regido por leis e normas que devem ser rigorosamente seguidas para que possa estar em conformidade com as exigncias
legais estabelecidas pelos rgos fiscalizadores competentes.
Didatismo e Conhecimento
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Antisspticos: Um antissptico adequado deve exercer a atividade gemicida sobre a flora cutneo-mucosa em presena de sangue,
soro, muco ou pus, sem irritar a pele ou as mucosas. Muitos testes
in vitro foram propostos para avaliar a ao de antissepticos, mas a
avaliao definitiva desses germicidas s pode feita mediante testes
in vivo. Os agentes que melhor satisfazem as exigncias para aplicao em tecidos vivos so os iodos, a cloro-hexidina, o lcool e o
hexaclorofeno.
Para a desinfeco das mos temos:
- Solues antisspticas com detergentes (degermantes) e se
destinam degermao da pele, removendo detritos e impurezas e
realizando anti-sepsia parcial. Como exemplos citam: Soluo detergente de PVPI a 10% (1% de iodo ativo); Soluo detergente de
clorhexidina a 4 %, com 4% de lcool etlico.
- Soluo alcolica para anti-sepsia das mos: Soluo de lcool iodado a 0,5 ou 1 % (lcool
etlico a 70%, com ou sem 2 % de glicerina); lcool etlico a
70%, com ou sem 2% de glicerina.
Tcnicas de Esterilizao
Esterilizao a destruio de todos os organismos vivos, mesmo os esporos bacterianos, de um objeto. Para isso dispomos de
agentes fsicos e qumicos.
Meios de esterilizao:
Desinfeco: o processo pelo qual se destroem particularmente os germes patognicos e/ou se inativa sua toxina ou se inibe o seu
desenvolvimento. Os esporos no so necessariamente destrudos.
Esterilizao: processo de destruio de todas as formas de
vida microbiana (bactrias nas formas vegetativas e esporuladas,
fungos e vrus) mediante a aplicao de agentes fsicos e ou qumicos. Toda esterilizao deve ser precedida de lavagem e enxaguadura do artigo para remoo de detritos.
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Esterilizao pelo calor mido: Podemos usar o calor das seguintes formas:
Fervura: Foi um mtodo correntemente usado na prtica diria, mas no oferece uma esterilizao completa, pois a temperatura
mxima que pode atingir 100C ao nvel do mar, e sabemos que os
esporos, e alguns vrus, como o da hepatite, resistem a essa temperatura, alguns at por 45 h. Por outro lado, a temperatura de ebulio
varia com a altitude do lugar.
Cuidados na esterilizao pela fervura: Devem-se eliminar as
bolhas, pois estas protegem as bactrias - no interior da bolha impera o calor seco, e a temperatura de fervura (100C), este calor
insuficiente para a esterilizao; Devem-se eliminar as substncias
gordurosas e proticas dos instrumentos, pois estas impedem o contacto direto do calor mido com as bactrias.
Tcnica
- Preparo do material - devero estar completamente limpos e
secos. O material que os empacota deve ser permevel, flexvel e
forte para aguentar a manipulao normal do processo de esterilizao. Usar fitas adesivas para identificao e indicadores de xido de
etileno dentro dos pacotes.
- No sobrecarregar o esterilizador para evitar bolses isoladores e tambm o rompimento e abertura dos pacotes durante o aumento de presso da cmara.
- Aerao - o objetivo ventilar para remover o gs contido no
material esterilizado e sendo executado a 50C, o tempo varia de
acordo com o tipo de material, assim: Borracha e material plstico
fino = 6 horas; Borracha e material plstico grosso = 24 horas; Marca passos internos = 4 dias; Luvas, cateteres e outros materiais em
invlucros de plsticos = 7 dias; Qualquer tubo de cirurgia cardaca
= 7 dias.
ANOTAES
Vantagens
- bactericida, esporocida e virucida;
- Agente esterilizante em temperatura relativamente baixa;
- Facilmente removvel;
- Fcil de obter, armazenar e manusear;
- Penetra em qualquer material permevel e poroso;
- Esteriliza uma grande variedade de instrumentos e equipamentos sem danificar a maioria;
- mtodo simples, eficaz econmico e seguro;
- O material esterilizado pode ser estocado por perodo prolongado.
Desvantagens
- Necessita de controle cuidadoso da concentrao de gs, temperatura e umidade.
- A aparelhagem cara e requer superviso tcnica especializada.
- O gs etileno possui efeito txico.
- O processo demorado.
- A utilizao do aparelho limitada a estabelecimentos grandes.
Radiao: A radiao uma alternativa na esterilizao de artigos termossensveis, (seringa de plstico, agulha hipodrmicas,
luvas, fios cirrgicos), por atuar em baixas temperaturas, um mtodo disponvel em escala industrial devido aos elevados custos de
implantao e controle.
Didatismo e Conhecimento
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Produzir sementes, partes e rgos de propagao vegetal livres de patgenos uma tarefa difcil, desafiadora e, por isso, pouco atrativa para o pesquisador e produtor de sementes e de mudas.
Tambm tem sido apoiada timidamente por agncias financiadoras
de projetos de pesquisa, porm, pela importncia, deveria receber
mais incentivos. Material de propagao vegetal refere-se a bulbos,
estacas, gemas, manivas, mudas, toletes, sementes botnicas, rizomas e tubrculos.
A realidade da ateno dada ao tema mostra que no momento
a semente botnica, aparentemente a mais importante fitopatologia, pois existem cursos sobre Patologia de Sementes, porm, a
patologia relativa a outros rgos de propagao vegetal tem recebido menor ateno. Pela importncia deveria se dar o mesmo tratamento e terem-se igualmente cursos e treinamento sobre Patologia
de Mudas, de Bulbos, de Manivas, de Toletes, etc. Principalmente os
produtores destes materiais deveriam receber treinamentos para que
entendam a sua importncia.
Indicadores Biolgicos
A utilizao destes indicadores permite a comprovao da eficincia da esterilizao, uma vez que o crescimento de microrganismos aps a aplicao do processo diretamente testado. Este indicador consiste em uma preparao padronizada de esporos bacterianos
em suspenses que contm em torno de 106 esporos por unidade de
papel. Os microrganismos utilizados so de acordo com o processo
de esterilizao avaliado (APECIH, 1998):
- autoclave a vapor: B. stearothermophilus;
- calor seco: B. subtilis var. niger;
- autoclave a xido de etileno: B. subtilis var. niger;
- plasma de perxido de hidrognio: B. subtilis var. niger;
- radiao gama: Bacillus pumilus;
Diversas perguntas pertinentes a este tema em fitopatologia devem ser feitas. Por que aonde se cultiva uma espcie vegetal sempre
esto presentes as doenas daquela espcie? Como os patgenos encontram a planta hospedeira? Est disponvel aos produtores material de propagao vegetal livre de fitopatgenos? Para que produzir
esse material livre de patgenos? Qual a necessidade? Qual a consequncia? Tem algum interessado? Esta necessidade reconhecida
por produtores, tcnicos e pesquisadores? Sabem-se as consequncias prticas desse material indene de fitoparasitas? Se o vento transporta o inculo de parasitas necrotrficos de um local para outro, se
o ar est repleto de inculo em todos os locais, em todo o tempo, a
proposta aqui apresentada no tem sentido.
Aps o processamento dos indicadores, eles devem ser incubados para se verificar se as cepas ainda so viveis. As condies
de incubao e o meio em que os indicadores devem ser incubados
devem ser fornecidas pelo fabricante das preparaes. O indicador
que fora processado incubado nas mesmas condies e juntamente
com um outro que no tenha passado pelo processo de esterilizao
a fim de se verificar a viabilidade das cepas e as condies adequadas de incubao que favoream o crescimento bacteriano.
A realizao de testes biolgicos deve ser, no mnimo, semanalmente e aps cada manuteno ou suspeita de mau funcionamento.
No processo de esterilizao a xido de etileno o teste deve ser realizado em cada ciclo de esterilizao devido a complexidade do
processo e a maior probabilidade de falhas.
Todos os agentes fitopatognicos podem infectar partes ou rgos de propagao vegetal tais como fungos, estramenpilas, bactrias, vrus, protozorios (Plasmodiophora) e nematides. Neste
artigo d-se nfase aos fungos, bactrias e vrus. Devem-se envidar
todos os esforos para erradicar os fitopatgenos em suas fontes de
inculo primrio. Todos os rgos da planta podem ser atacados pelos fitopatgenos (McNew, 1960) estando aqui includos os de propagao vegetal. Com estes os parasitas so transportados desde o
local de produo do material, at os locais do cultivo comercial.
Os parasitas infectantes de material de propagao vegetal retornaro aos rgos areos de onde eles vieram. No caso de mudas
de plantas perenes com folhas perenes como caf e citros, por exemplo, esse processo no necessrio, pois nunca ocorre a separao
do parasita da planta hospedeira.
Na produo de material vegetal indene de patgenos indispensvel o uso rotineiro de mtodos sensveis ou meios semi-seletivos deteco do patgeno alvo da eliminao. Citam-se como
exemplos para sementes o meio semi-seletivo para Bipolaris sorokiniana (Reis, 1983) que pode ser usado na deteco de outros gneros
Didatismo e Conhecimento
um mnimo ideal de atendimento e de funcionamento dos rgos pblicos, o que deve necessariamente passar por critrios de valorizao dos servidores bons e de treinamento e qualificao permanente
dos quadros de pessoal.
Art. 5 So faltas administrativas, punveis com a pena de demisso, a bem do servio pblico:
I - valer-se, ou permitir dolosamente que terceiros tirem proveito de informao, prestgio ou influncia, obtidos em funo do
cargo, para lograr, direta ou indiretamente, proveito pessoal ou de
outrem, em detrimento da dignidade da funo pblica;
II - exercer comrcio ou participar de sociedade comercial,
exceto como acionista, cotista ou comanditrio;
III - participar da gerncia ou da administrao de empresa
privada e, nessa condio, transacionar com o Estado;
IV - utilizar pessoal ou recursos materiais da repartio em
servios ou atividades particulares;
V - exercer quaisquer atividades incompatveis com o cargo ou
a funo pblica, ou, ainda, com horrio de trabalho;
VI - abandonar o cargo, caracterizando-se o abandono pela
ausncia injustificada do servidor pblico ao servio, por mais de
trinta dias consecutivos;
VII - apresentar inassiduidade habitual, assim entendida a falta
ao servio, por vinte dias, interpoladamente, sem causa justificada
no perodo de seis meses;
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ANOTAES
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2 - Penso que a vida resulta da combinao de quatro processos - metabolismo, compartimentao, memria e manipulao - e
de uma lei de correspondncia entre memria e manipulao. Se
tomarmos isso como definio, os vrus no podem ser considerados
seres vivos, pois no tm nem metabolismo nem lei de correspondncia. (Antoine Danchin apud CINCIA HOJE, p. 25)
A confrontao do conceito de vida expresso anteriormente
com caractersticas exibidas pelos vrus permite afirmar:
(01) Os vrus e os seres vivos compartilham uma mesma linguagem na construo de seus genomas.
(02) Os vrus obtm energia usando os mesmos processos bioenergticos celulares.
(04) A organizao molecular dos vrus expressa a exigncia de
proteo para o material gentico e de reconhecimento pela clula
hospedeira.
(08) A universalidade do DNA como material gentico, entre os
vrus, os aproxima da condio biolgica.
(16) A condio vital est inevitavelmente associada estrutura
celular.
(32) A capacidade de evoluir uma propriedade comum aos
vrus e aos seres vivos.
Soma ( )
3 - No meio de cultura gar sangue adicionado sangue, de carneiro desfribinado, o qual permite a leitura de hemli-ses causadas
por bactrias do gnero:
(A) Staphylococcus.
(B) Escherichia.
(C) Streptococcus.
(D) Clostridium.
10- Dadas as alternativas abaixo, assinale a correta, considerando que a colorao de Gram um dos mtodos de colorao mais
aplicados:
A) Em Hematologia;
B) Em Virologia;
C) Bioqumica;
D) Bacteriologia.
5- Considerando as tcnicas d e esterilizao, dadas asalternativas ab aixo assinale a que NO classi ficada como um processo
fsico:
A) Cmara de xido de etileno;
B) Irradiao ionizante;
C) Autoclavag em;
D) N.A.A.
Didatismo e Conhecimento
16. A pea de vidro que, na ausncia do equipamento que executa o hemograma, permite a realizao da contagem global de hemcias e leuccitos ao microscpio, denomina-se:
A) placa de Petri.
B) tubo de Wintrobe.
C) pipeta de Westergreen.
D) cmara de Neubauer.
E) placa escavada de Kline.
20. Em parasitologia, os mtodos quantitativos so muito importantes no diagnstico de ovos de helmintos nas fezes, sobretudo
os de, que so pesados e difceis de serem analisados pelos mtodos
qualitativos conhecidos. Nas alternativas abaixo o nico mtodo
quantitativo :
A) Faust.
B) Hoffman.
C) Kato Katz.
D) Ritchie.
E) Willis.
121
22. A bactria , atravs do mtodo de colorao de gram, apresenta como caractersticas morfotintoriais:
A) aspecto reniforme, dispostas em pares, com faces cnicas
adjacentes e de tonalidade avermelhada, indicando que se trata de
uma bactria gram-negativa.
B) forma semelhante a uma gota, com bases adjacentes, dispostas em pares e de tonalidade azulada, indicando que se trata de
uma bactria gram-negativa.
C) forma esfrica, aglomeradas assemelhando-se a cacho de
uvas e de colorao azulada, indicando que se trata de uma bactria
gram-positiva.
D) tonalidade avermelhada e formato de bastonetes, dispostas
em pares, indicando que se trata de uma bactria gram-positiva.
E) formato espiral, dispostas individualmente e com tonalidade
azulada, indicando que se trata de uma bactria gram-negativa.
23. Para a realizao da prova de Coombs direto, o sangue do
paciente precisa ser colhido em tubo contendo:
A) fluoreto de sdio.
B) EDTA.
C) citrato de sdio.
D) gel separador, sem anticoagulante.
E) heparina.
24. O mtodo de colorao por hematoxilina frrica tem por
finalidade avaliar a:
A) presena de ovos de Schistosoma mansoni.
B) morfologia das larvas encontradas nas fezes.
C) presena de ferro no interior das hemcias.
D) morfologia dos protozorios nas fezes.
E) presena de hematozorios no sangue.
28. (FCC - 2010 - TRT 22 Regio) O princpio da administrao pblica que tem por fundamento que qualquer atividade de gesto pblica deve ser dirigida a todos os cidados, sem a determinao de pessoa ou discriminao de qualquer natureza, denomina-se
a) Eficincia.
b) Moralidade.
c) Legalidade.
d) Finalidade.
e) Impessoalidade.
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31. (VUNESP - 2012 - SPTrans - Advogado Pleno - Administrativo) Sobre a responsabilidade dos servidores pblicos, correto
afirmar que
a) em face da presuno de inocncia, garantida pela Constituio Federal, a Administrao deve aguardar o desfecho de processo
criminal antes de proceder punio disciplinar do servidor pela
mesma falta.
b) a absolvio criminal afastar o ato punitivo no mbito administrativo se ficar provada, na ao penal, a inexistncia do fato ou
que o acusado no foi o seu autor.
c) a condenao do servidor no mbito civil implica automaticamente o reconhecimento das responsabilidades administrativa e
criminal, posto que a primeira mais ampla que as duas ltimas.
d) a extino da pena administrativa pode se dar pelo seu cumprimento ou pela prescrio, sendo vedada extino por meio do
perdo por parte da Administrao Pblica.
e) o entendimento, atualmente, que, nas aes de reparao de
danos contra a Fazenda Pblica, por responsabilidade objetiva, esta
obrigada a denunciar lide o servidor que causou os danos.
R: B. Quando comprovada a inexistncia do fato ou a negativa de autoria na esfera criminal, tradicionalmente reconhecida por
apurar com maior rigor e arcabouo probatrio os fatos levados a
seu conhecimento (em defesa do direito liberdade e em respeito
presuno de inocncia), entende-se que uma esfera menos rigorosa
no poderia afirmar o contrrio. Logo, ficar afastado o ato punitivo
nos mbito administrativo e cvel.
ANOTAES
30. (FGV - 2011 - SEFAZ-RJ) A respeito do regime de responsabilidade dos servidores pblicos em mbito federal, correto
afirmar que
a) o servidor pblico responde penal e administrativamente
pelo exerccio irregular de suas atribuies, ao passo que a responsabilidade civil exclusiva da Administrao Pblica.
b) embora as instncias penal e administrativa sejam independentes, a deciso penal absolutria por insuficincia de provas vincula a instncia administrativa.
c) as sanes administrativas no podem cumular-se com as
sanes civis decorrentes de uma mesma infrao funcional, sob
pena debis in idem.
d) a ao disciplinar prescreve em 2 (dois) anos, seja qual for a
natureza da infrao administrativa cometida pelo servidor.
e) a responsabilidade do servidor ser afastada no caso de absolvio criminal que negue a existncia do fato ou sua autoria.
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Referncias
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http://pt.wikipedia.org/wiki/Rea%C3%A7%C3%A3o_em_cadeia_da_polimerase
DALTRO, Paula Braga. Fixao do complemento. Universidade federal da bahia instituto de cincias da sade icsdepartamento de
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