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Conhecimentos Especficos

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Prof. Wagner Bertolini

Prof. Dbora Aparecida da Silva Queiroz


Bacharel em Fisioterapia. Licenciatura em Biologia Docente
na Rede Estadual de Ensino

Ol.
com grande satisfao que apresento a voc este curso de
QUMICA, projetado especialmente para atender s necessidades
daquele que se prepara para este concurso de do MAPA, para o cargo de TCNICO DE LABORATRIO. So 184 vagas e uma multido buscando a aprovao. Afinal, o salario INICIAL de mais de
R$ 5.800,00, para nvel MDIO. Um salrio que se consegue em
raros lugares e, ainda, ser funcionrio pblico. Por isto, sua preparao com afinco e dedicao pode ser seu diferencial. E aqui estou,
junto a voc, nesta batalha. Eu e o pessoal da NOVA procuraremos
a sua melhor preparao.

QUMICA GERAL E INORGNICA:


LIGAES QUMICAS.

LIGAES QUMICAS
Verifica-se, na natureza, que a maioria dos elementos qumicos encontram-se ligados a outros, e que somente alguns (os gases
nobres) esto isolados. Isso levou os cientistas a conclurem que os
tomos de gases nobres possuem uma configurao eletrnica que
lhes assegura estabilidade.
Os gases nobres apresentam 8 eltrons na ltima camada eletrnica, com exceo do hlio, que possui 2 eltrons, j que a camada
K comporta no mximo 2 eltrons. Essa anlise levou os cientistas
Lewis e Kossel a criarem a chamada Teoria ou Regra do Octeto.

Permitam-me fazer uma breve apresentao de minha trajetria


acadmica e profissional:
- graduado pela Faculdade de Cincias Farmacuticas pela
USP-RP, em 1990;
- Mestre em sntese de complexos bioinorgnicos de Rutnio,
com liberao de xido ntrico, pela Faculdade de Cincias Farmacuticas USP-RP;

Preste bastante ateno:


As propriedades das substncias quimicas decorrem fundamentalmente do tipo de ligao entre seus tomos. Em funo
do conhecimento do tipo de ligao, os compostos tero propriedades semelhantes. Ou seja: se voc sabe que um composto inico, mesmo sem conhec-lo voc poder atribuir propriedades
a ele, pois estas so propriedades comuns a todos os compostos
que fazem tal tipo de ligao quimica. Por exemplo: todos os
compostos inicos so slidos temperatura ambiente, apresentam alto ponto de fuso e alto ponto de ebulio.
Os tipos de ligaes quimicas tambm influenciam diretamente as interaes entre as molculas. E isto se refletir em
suas foras intermoleculares, o que nos permite inferir se uma
substncia ser slida, lquida ou gasosa em uma dada situao;
se ela ter baixos ou altos pontos de fuso e ebulio; se ser
voltil ou no, etc. Por isto, considero de suma importncia se
entender o assunto ligaes qumicas.

- Doutor em farmacotcnica, estudando o efeito de promotores


de absoro cutnea visando a terapia fotodinmica para o cncer de
pele, Faculdade de Cincias Farmacuticas pela USP-RP;
- Especialista em espectrometria de massas, pela Faculdade de
Qumica, USP-RP;
- professor de Qumica em ensino Mdio e pr-vestibulares
(Anglo, Objetivo, COC) desde 1992.
- professor de Qumica (Orgnica, Geral, Analtica, Fsico-Qumica e Inorgnica) em cursos de graduao; - Professor de Qumica
Farmacutica, em curso de graduao em Farmcia;- Professor de
Ps-Graduao em Biotecnologia (controle de produtos e processos
biotecnolgicos);

Ligao Inica (ou Eletrovalente)


Como o prprio nome j diz, a ligao inica ocorre com a formao de ons Ocorre com transferncia de eltrons do metal para o
ametal, formando ctions (ons positivos) e nions (ons negativos),
respectivamente. Ocorre entre metais e no metais e entre metais e
Hidrognio.
A forte fora de atrao entre os ons dos tomos que formam
o composto de origem eletrosttica. Sempre um dos tomos perde
eltrons, enquanto o outro recebe. O tomo mais eletronegativo arranca os eltrons do de menor eletronegatividade.
Exemplo:
1o) A ligao entre o sdio (11Na) e o cloro (17Cl) um exemplo
caracterstico de ligao inica. Observe a distribuio dos eltrons
em camadas para os dois elementos:
Na 2 - 8 - 1
Cl 2 - 8 - 7
Para o cloro interessa adicionar um eltron sua ltima camada, completando a quantidade de oito eltrons nela. Ao sdio interessa perder o eltron de sua camada M, assim a anterior passar a
ser a ltima, j possuindo a quantidade necessria de eltrons.

- Analista Qumico em indstria farmacutica, AKZO do Brasil, em So Paulo-SP.


- Consultor de pesquisa entre empresa-Universidade, em Ribeiro Preto, onde resido atualmente.
Este material foi projetado de acordo com a sequncia e numerao constantes no Edital, para sua maior segurana e organizao.
Lembre-se que como concursando muitas vezes voc se sente
sozinho, desacreditado e sem muita confiana. Mas saiba que o trabalho do estudo duro, solitrio, cansativo e requer muita vontade.
Mas, quando vier sua aprovao, sua vitria voc ver que o seu
sucesso pertence a todos (inclusive queles que nunca te apoiaram;
mas assim a vida). Fora e pense sempre em voc, nos seus familiares, naqueles por quem voc tem amor.
Desejo um excelente estudo e timos resultados nesta jornada.
Muito boa sorte, dedicao e boa prova!!!!
Didatismo e Conhecimento

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Antes da ligao: tomos instveis

Figura: Viso simplificada das interaes eletrostticas entre


os tomos de hidrognio na molcula de H2. Considere: linha
simples: atrao eltron-ncleo; linha tracejada: repulso
eltron-eltron e ncleo-ncleo.
A ligao covalente tem importncia nica na Qumica e ,
sem duvida, o tipo predominante de unio entre tomos, j que est
presente em muitas molculas, sejam elas orgnicas ou inorgnicas
( comum um composto de natureza inica apresentar tambm ligaes covalentes). O carter inico prevalece nestes compostos.
Exemplo: KNO3.

Aps a ligao: ons estveis


Na representao da ligao, utilizamos somente os eltrons da
ltima camada de cada tomo. Esta notao recebe o nome de Frmula Eletrnica de Lewis.
Observe que o sdio possua inicialmente 11 prtons e 11 eltrons. Aps a ligao, a quantidade de prtons no se altera e a de
eltrons passa a ser 10. O cloro que inicialmente possua 17 prtons
e 17 eltrons tem sua quantidade de eltrons aumentada de uma unidade aps a ligao. Com isso o sdio se torna um on de carga 1+
e o cloro 1-.

Entender a natureza da ligao covalente dar a voc oportunidade de interpretar e compreender em tamanho microscpico os
fenmenos que envolvem reaes qumicas entre molculas. Nesses casos, as ligaes covalentes que esto sendo quebradas e/ou
formadas produzindo novas substncias, ou seja, transformando a
matria.
Quais eltrons esto envolvidos na formao de uma ligao
qumica? Lewis procurou responder a esta pergunta evocando o modelo atmico de Bohr (1913).

A fora que mantm os dois tomos unidos de atrao eltrica,


ou seja, uma ligao muito forte. Como foram utilizados um tomo
de cada tipo, a frmula do composto ser NaCl.

Os eltrons envolvidos numa ligao qumica so os eltrons da


camada de valncia, ou seja: os mais externos. Portanto, a ligao
covalente ocorre quando os tomos ligados possuem tendncia de
ganhar eltrons. No h transferncia de eltrons de um tomo para
outro, e sim um compartilhamento de eltrons entre eles.

Ligao Covalente
Como foi definida por Lewis, a ligao covalente consiste no
compartilhamento de um par de eltrons entre dois tomos vizinhos.

A ligao covalente ocorre entre:

Lewis props diagramas (ou estruturas) simples para representar os eltrons num determinado tomo e a ligao qumica entre
dois tomos numa molcula. Um dado elemento tende a se combinar com outros para adotar uma configurao com oito eltrons (ou
dois eltrons, no caso do Hidrognio) em sua camada de valncia
(Regra do Octeto).

hidrognio hidrognio
hidrognio no-metal
no-metal no-metal
Obs.: Os semimetais tambm podem ser includos.

importante chamar sua ateno para o fato de que toda ligao covalente tem um carter eletrosttico pronunciado: os eltrons
compartilhados sentem simultaneamente a atrao eletrosttica dos
dois ncleos (Figura abaixo).
Esta hiptese sugere que a formao e a estabilidade das ligaes covalentes podem, de maneira superficial, ser explicadas por
um modelo eletrosttico simples.

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Ligao Covalente Normal

Exemplo 3: HCl (frmula molecular do cloreto de hidrognio)


ganhar 1e
ganhar 1e

Quando encontramos um nico par de eltrons compartilhado


entre dois tomos, a ligao denominada de ligao covalente simples.

Ocorre entre dois tomos que compartilham pares de eltrons.


Os tomos participantes da ligao devem contribuir com um eltron
cada, para a formao de cada par eletrnico. Assim, na molcula de
hidrognio (H2), cuja distribuio eletrnica : 1H = 1s1 falta um
eltron para cada tomo de hidrognio para ficar com a camada K
completa (dois eltrons). Os dois tomos de hidrognio se unem formando um par eletrnico comum a eles (compartilhamento). Desta
forma, cada tomo de hidrognio adquire a estrutura eletrnica do
gs nobre Hlio (He). Veja abaixo: Quando o par compartilhado
representado por um trao (), temos a chamada frmula estrutural.

Para dois pares de eltrons compartilhados entre dois tomos, a


ligao denominada de ligao covalente dupla.

Finalmente, para trs pares de eltrons compartilhados entre


dois elementos, a ligao denominada de tripla.

H H (frmula estrutural)
H2 (frmula molecular)

Vale lembrar que esta denominao no depende de os tomos


serem do mesmo ou de diferentes elementos qumicos.
Ligao Covalente Dativa ou Coordenada
frmula eletrnica ou de Lewis
Exemplo 2: formao do Cl2 (frmula molecular do gs cloro)

Na ligao covalente normal, o par de eltrons compartilhado


proveniente um de cada tomo. Ou seja: cada tomo participa com
um eltron para a formao do par. Mas, para explicar certas estruturas das substncias, foi necessrio admitir a formao de pares
de eltrons provenientes de um s tomo; assim, temos a chamada
ligao covalente dativa ou ligao coordenada.

tendncia: ganhar 1e

Exemplo: Formao do dixido de enxofre

Resumindo temos:

Ligao Metlica
a fora que mantm unidos os tomos e ctions dos metais.
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RESOLUO:

Teoria do mar de eltrons ou teoria da nuvem eletrnica


A principal caracterstica dos metais a eletropositividade (tendncia de doar eltrons), assim os eltrons da camada de valncia
saem facilmente do tomo e ficam passeando pelo metal, o tomo
que perde eltrons se transforma num ction, que, em seguida, pode
recapturar esses eltrons, voltando a ser tomo neutro.

A 2 eltrons na camada de valncia

O metal seria um aglomerado de tomos neutros e ctions,


imersos num mar de eltrons livres que estaria funcionando como
ligao metlica, mantendo unidos os tomos e ctions de metais.

7 eltrons na camada de valncia

Tendncia a doar 2 e A2+


B 1s2 2s2 2p6 3s2 3p5

Tendncia a receber 1 e B1
Ligao inica pois ocorre com transferncia de eltrons.
Resposta: D

Os metais exibem uma srie de propriedades em comum: todos


so slidos nas condies ambientes (exceto Hg), tm brilho metlico, maleabilidade (possibilidade de se moldar em chapas), ductilidade (capacidade de formar fios), boa condutividade trmica e eltrica.
Para haver condutividade eltrica, necessrio o movimento
de eltrons atravs do meio. A boa condutividade dos metais sugere
que existam eltrons semilivres, fracamente ligados, nas estruturas
metlicas, que possam ser forados a se mover ao longo de todo
retculo. Como na estrutura metlica, segundo o modelo do gs de
eltrons, todos os ons compartilham eltrons, a repulso entre os
ctions compensada pela atrao eletrosttica entre os eltrons livres e os ons positivos. Os eltrons livres funcionam como uma
cola eletrosttica, ligando os ctions metlicos.

Questo 02) Os elementos H, O, Cl e Na (ver Tabela Peridica)


podem formar compostos entre si.
a) Que compostos podem-se formar entre: H e O, H e Cl, Na
e Cl?
b) Qual o tipo de ligao formada em cada caso?
Gab:
a) H2O, H2O2, HCl, NaCl.
b) H2O, covalente; H2O2, covalente; HCl, covalente; NaCl,
inica.
Questo 03) Cite ts caractersticas fsicas que permitem identificar um elemento metlico.
Gab: Condutividade eltrica, condutividade trmica, brilho, maleabilidade, ductibilidade, tenacidade (resistncia a trao).
Questo 04) Considere o elemento cloro formando compostos
com, respectivamente, Hidrognio, carbono, sdio e clcio.
a) Com quais desses elementos o cloro forma compostos covalentes?
b) Qual a frmula de um dos compostos covalentes formados?
Gab:
a) com o Hidrognio e o carbono
b) H Cl

Modelo do gs de eltrons. Os eltrons de valncia no esto


ligados aos tomos, mas deslocalizados por todo o cristal, movendo-se livremente em todas as direes e sendo compartilhados por
todos os ctions com igual probabilidade.
No caso dos metais maleveis (facilmente deformveis), como
sdio, chumbo, mercrio e outros, os eltrons livres podem se ajustar rapidamente s mudanas na estrutura metlica provocadas por
perturbaes externas.

Questo 05) Os elementos qumicos que apresentam a ltima


camada eletrnica incompleta podem alcanar uma estrutura mais
estvel unindo-se uns aos outros.

QUESTES PROPOSTAS

a) De que forma se podem ligar dois tomos que precisem


ganhar eltrons?
b) Dois elementos situam-se: um no segundo perodo e subgrupo 4A; e o outro, no terceiro perodo e subgrupo 7A da Tabela
Peridica. Qual ser a frmula provvel do composto por eles formado?

Questo 01) Sabe-se que a interao entre tomos que se ligam,


na formao de novas substncias, feita atravs de seus eltrons
mais externos. Uma combinao possvel entre o elemento A com a
configurao eletrnica 1s2 2s2 2p6 3s2 3p6 4s2 e outro B (Z = 17)
ter frmula e ligao, respectivamente:

Gab:

a) AB e ligao inica.
b) A2B e ligao inica.
c) A2B3 e ligao covalente.
d) AB2 e ligao inica.
e) A2B e ligao covalente.
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a) por ligao covalente


b) CCl4
Questo 06) Observe o esboo da tabela peridica:
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A

Com isso, por questes didticas puramente, estudaremos estes


dois ramos importantes de estudo da Qumica, a Qumica Inorgnica
e a Qumica Orgnica, que tambm so subdivididas em outros grupos. As principais funes qumicas inorgnicas cidos, bases, sais
e xidos so encontradas em nosso cotidiano e tambm em nosso
organismo. Por exemplo: o cido clordrico um dos constituintes
do suco gstrico, encontrado no estmago; a soda custica constituinte de produto de uso domstico para desentupir pias e utilizado
para fabricar o sabo; o sal de cozinha constitudo pelo cloreto de
sdio e a cal viva, utilizado na construo civil e tambm na culinria, constituda pelo xido de clcio.

a) Qual a frmula molecular da substncia resultante da ligao de A com C?


b) Identifique o tipo de ligao qumica presente na molcula
do composto formado por D e B. Justifique sua resposta.
Gab:
a) Al2O3
b) Inica, visto que a diferena de eletronegatividade entre os
elementos indicados maior que 1,7.
Questo 07) Considerando os elementos sdio, magnsio, enxofre e cloro, escreva as frmulas dos compostos inicos que podem
ser formados entre eles.
Gab:
Na2S; NaCl; MgS; MgCl2

Para definir estas substncias existem vrios critrios de classificao. Ns utilizaremos os critrios da condutividade eltrica,
segundo Arrhenius, e o teste com indicadores cido-base para caracterizar semelhana nas propriedades qumicas dessas substncias.
Vale lembrar que o edital s prev as funes cidos e bases.

CIDOS E BASES.

Questo 08) Explicar por que o on sdio (Na+) mais estvel


que o tomo de sdio (Nao)?
Gab: ao se transformar em on, o tomo de sdio adquire
configurao eletrnica de um gs nobre.

cidos
Introduo

Questo 09) Analise as afirmativas abaixo e indique se as mesmas so falsas ou verdadeiras, justificando cada caso.
a) Slidos inicos so bons condutores de eletricidade.
b) Compostos apolares so solveis em gua.

Desde os tempos dos alquimistas, observou-se que certas substncias apresentavam comportamentos peculiares quando dissolvidos na gua. Entre tais propriedades destacavam-se:
- o sabor azedo facilmente identificado em frutas ctricas, como
limo, laranja e ma (a palavra cido proveniente do latim acidus
- azedo, picante);

Gab:
a) Falsa. Os compostos orgnicos so bons condutores de
eletricidade quando fundidos.
b) Falsa. Compostos apolares so insolveis em gua, pois
esta um solvente polar.

- formar solues aquosas condutoras de eletricidade;


- provocar efervescncia, quando em contato com o calcrio;

FUNES DA QUMICA INORGNICA.

- produzir mudana de cor nos indicadores cido-base.

As funes qumicas so um conjunto de substncias com propriedades qumicas semelhantes, que podem ser divididas em orgnicas e inorgnicas.

Essas substncias foram denominadas cidos.

ANOTAES

Funes inorgnicas: so aquelas constitudas por todos os


demais elementos qumicos que constituem os cidos, bases, sais e
xidos, estudados pela Qumica Inorgnica. Atualmente o conceito
de substncias inorgnicas e orgnicas pode seguir a seguinte definio:

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Os cidos esto presentes em nosso dia-a-dia, como por exemplo: a laranja, o limo e as demais frutas ctricas contm cido ctrico, a bateria de um automvel contm cido sulfrico, o vinagre
contm cido actico, o cido clordrico constituinte do suco gstrico no estmago, o cido ntrico utilizado para produzir explosivos como o TNT (dinamite).
De um modo geral os cidos so txicos e corrosivos, portanto,
deve-se evitar o contato com a pele, inger-los ou inal-los.
O estudo da funo cido a parte mais complexa das funes
inorgnicas, mas de extrema importncia que voce domine os principais tpicos como: formulao e Nomenclatura. As demais funes so bem mais simples, se comparadas a acidos.

do)

Inorgnicos ou minerais - so de origem mineral e dividem-se


em hidrcidos e oxicidos.
Ex.: HCl, HF, HCN, H2SO4, H3PO4, etc
Quanto presena de oxignio na molcula
Hidrcidos no possuem oxignio em suas molculas
Exemplos: HCl, HCN, HF, HI, HBr, H2S, etc.
Oxicidos possuem oxignio em suas molculas
Exemplos: HNO3 , HClO3 , H2SO4, H3PO4, etc.
Quanto ao nmero de hidrognios ionizveis
Monocidos (ou monoprticos) apresentam um hidrognio
ionizvel.
Exemplos: HCl, HBr, HNO3 , H3PO2 (exceo).
Dicidos (ou diprticos) apresentam dois hidrognios ionizveis.
Exemplos: H2S, H2SO4 , H3PO3 (exceo).
Tricidos apresentam trs hidrognios ionizveis.
Exemplos: H3PO4 , H3BO3.
Tetrcidos apresentam quatro hidrognios ionizveis.
Exemplos: H4SiO4 , H4P2O7.

Definio Segundo Arrhenius


cido todo composto molecular que, em soluo aquosa, se
ioniza, produzindo exclusivamente como ction o H3O+ (hidroxnio).
HCl + H2O H3O+ + Cl
HCN + H2O H3O+ + CN
Simplificadamente, o ction Hidroxnio (H3O+) pode ser representado por H+ e a presena da gua est representada pelo (aq)
ao lado direito da frmula do composto (ou mesmo nem aparecer,
subentendendo-se a presena de meio aquoso, por definio):
HCl(aq) H+ + Cl
HCN H+ + CN
Resumindo:

Quanto ao nmero de elementos qumicos


Binrio: dois elementos qumicos diferentes.
Exemplos: HCl, H2S, HBr.
Ternrio trs elementos qumicos diferentes. Exemplos:
HCN, HNO3 , H2SO4
Quaternrio quatro elementos qumicos diferentes.Exemplos: HCNO, HSCN
Quanto volatilidade (baixo ponto de ebulio, facilidade
em formar vapores)
Observao: Por que se deixarmos um recipiente aberto contendo ter, em pouco tempo, observa-se que o ter desaparecer?
O ter um lquido que possui baixo ponto de ebulio e evapora com facilidade temperatura ambiente. Dizemos neste caso que o
ter uma substncia voltil.
Um outro exemplo comum ocorre com o vinagre, o qual possui
um odor bastante pronunciado devido volatilidade do cido actico, seu principal constituinte.

Classificao dos cidos


Quanto natureza do cido
Orgnicos - so compostos que contm em sua estrutura o grupamento carboxila, composto por um tomo de carbono ligado a um
tomo de oxignio por ligao dupla ( C= O) e a um grupo hidroxila
(-OH), por ligao simples:

cidos volteis - cidos com baixo ponto de ebulio (PE).


Ex.: todos os hidrcidos (HCl, HF, HI, HBr, HCN, H2S), HNO3,
HCOOH e CH3COOH.
cidos fixos - cidos com elevado ponto de ebulio (PE).
Ex.: H2SO4 (PE = 340C), H3PO4 (PE = 213C) e H3BO3 (PE
= 185C).

carboxila
O grupo carboxila tambm pode ser representado apenas por:
-COOH
O hidrognio ligado ao tomo de oxignio do grupo carboxila
considerado o hidrognio ionizvel do cido, desta forma na sua
ionizao, teremos:
R-COOH H+ + R-COOEntre os milhares de cidos orgnicos conhecidos, alguns so
de enorme importncia para o homem, como por exemplo:
HCOOH o cido frmico (frmico pois foi descoberto nas
formigas, mas sinttico atualmente)
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CH3COOH = cido actico (presente no vinagre, acetum aze-

Quanto ao grau de ionizao (fora de um cido)


OBS: tal clculo no exige que voc conhea a frmula do cido e nem a sua estrutura qumica.
cidos fortes: possuem > 50%
cidos moderados: 5% 50%
cidos fracos: < 5%
Como se calcula o valor de (alfa)?
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Regra Prtica para Determinao da Fora de um cido (conhecendo-se a frmula molecular do cido e, se necessrio, sua estrutura molecular):
Hidrcidos cidos fortes: HI > HBr > HCl.
cido moderado: HF.
cidos fracos: demais.

5) (passo circunstancial, pois, depende de ter ou no oxignio


sem ligar): ligar o elemento central ao(s) oxignio(s) restante(s) atravs de ligao dativa (geralmente) ou de uma dupla ligao (ocorre
tal dupla com os elementos carbono e nitrognio).
Exemplos

- Oxicidos
Sendo HxEzOy a frmula de um cido de um elemento E qualquer, temos
m=y
em que: y = numero de tomos de oxignio
x = nmero de tomos de hidrognios
se:
cido muito forte
m=3
Exemplos: HClO4 , HMnO4...

- Formulao e Nomenclatura
Formulao
O cido formado pelo ction H+ e um nion qualquer (Ax-).
Portanto, podemos representar sua frmula da seguinte maneira:
H+Ax- HxA

cido forte
m=2
Exemplos: HNO3 , H2SO4...
cido moderadoExemplos: H3PO4 , H2SO3 , H3PO3(2
m=1
H+), H3PO2(1 H+)
cido fraco
m=0
Exemplos: HClO, H3BO3

Nomenclatura
Hidrcidos (HxE)

Observao:
1) O cido carbnico (H2CO3) uma exceo, pois um cido
fraco (=0,18%), embora o valor de m = 1
2) Todos os cidos carboxlicos so fracos.

O nome de um cido feito basicamente da seguinte forma:


1o) escreve-se a palavra cido;
2o) nome do elemento,com origem em latim;
3o) terminao drico
Exemplos
HCl cido clordrico
HBr cido bromdrico
HCN cido ciandrico
H2S cido sulfdrico
HI cido ioddrico

Frmula Estrutural
- Hidrcidos ( HxE)
Cada hidrognio est ligado ao elemento por um trao () que
representa a ligao covalente simples.
Exemplos

Oxicidos (HxEzOy)
Neste caso, como o mesmo elemento pode formar vrios oxicidos, estabelecemos um oxicido padro a partir do qual daremos
nomes aos demais. Oxicido padro cido nome de E ico

Oxicidos (HxEzOy)
Para escrever a frmula estrutural dos oxicidos, devemos proceder da seguinte maneira:
1) escrever o smbolo do elemento central;
2) distribuir ao redor deste elemento todos os oxignios da frmula mencionada.
3) distribuir ao redor dos oxignios os tomos de hidrognio
que sejam ionizveis. Se tiver H no ionizvel (o que ocorre com
cidos do elemento fsforo), os hidrognios no ionizveis devem
ser colocados ao lado do elemento central.
4) Ligar os hidrognios ionizveis aos tomos de oxignio vizinhos, formando grupinhos H-O) e ligar o elemento central a tantos
grupos OH quantos forem os hidrognios ionizveis. Caso haja H
sem ligar, fazer uma ligao simples deste(s) H com o tomo central.
Didatismo e Conhecimento

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HF = cido fluordrico F- = fluoreto


HCl = cido clordrico Cl- = nion cloreto
HBr = cido bromdrico Br- = nion brometo
HI = cido ioddrico I- = nion iodeto
HCN = cido ciandrico CN- = nion cianeto
HNO3 = cido ntrico NO3- = nion nitrato
HNO2 = cido nitroso NO2- = nion nitrito
HClO3 = cido clrico ClO3- = nion clorato
HClO4 = cido perclrico ClO4- = nion perclorato
HClO2 = cido cloroso ClO2- = nion clorito
HClO = cido hipocloroso ClO- = nion hipoclorito
CH3COOH = cido actico CH3COO- = nion acetato

Regra geral para elementos que formam 2 ou mais oxicidos:

Aplicaes dos principais cidos do cotidiano


cido clordrico (HCl)
- O cido impuro (tcnico) vendido no comrcio com o nome
de cido muritico;
- encontrado no suco gstrico, produzido pelas clulas parietais, responsvel pela acidez estomacal;
- um reagente muito usado na indstria e no laboratrio;
- usado na limpeza de pisos aps a caiao das paredes (cal
hidratada Ca(OH)2), para remover os respingos de cal; HCl(aq) +
Ca(OH)2(s) CaCl2(aq) + 2 H2O
- usado na limpeza de superfcies metlicas antes da soldagem dos respectivos metais.

Como vemos na tabela acima, todo oxicido padro tem terminao ico. Se tivermos um cido com:
a) um oxignio a mais que o padro, acrescentamos o prefixo per;
b) um oxignio a menos que o padro, a terminao muda para oso;
c) dois oxignios a menos que o padro, a terminao continua oso e
acrescentamos o prefixo hipo.
Ionizao dos cidos
A ionizao de um cido, como j vimos anteriormente, na
prpria definio de cido de Arrhenius, a reao do cido com a
molcula de gua, produzindo o ction H3O+.
Se um cido possui dois ou mais hidrognios ionizveis (policido), a ionizao ocorre em etapas.

cido fluordrico (HF)


-Tem a particularidade de corroer o vidro, devendo ser guardado em frascos de plstico, por esta razo usado para fazer gravaes sobre o vidro.
cido ciandrico (HCN)
- O HCN o gs de ao venenosa mais rpida que se conhece:
uma concentrao de 0,3 mg por litro de ar imediatamente mortal;
- o gs usado nos estados americanos do Norte que adotam a
pena de morte por cmara de gs;
-A primeira vtima do HCN foi seu descobridor, Carl Wihelm
Scheele, que morreu ao deixar cair um vidro contendo soluo de
HCN.

Exemplos
a)

cido sulfdrico (H2S)


O H2S um gs incolor, mais pesado do que o ar e inflamvel
com um forte odor desagradvel de ovos podres. Esse gs algumas vezes referido como gs de cano de esgoto. Em pequenas
concentraes ele pode irritar os olhos e atuar como depressivo; em
elevadas concentraes ele pode provocar irritao do sistema respiratrio superior e, durante longas exposies, edema pulmonar.
Sendo mais denso que o ar, o H2S pode acumular-se em depresses
e cavernas.

b)
Nomenclatura dos nions
Podemos considerar que os nions so provenientes dos cidos.
Assim, temos as seguintes terminaes (sufixos) a serem empregados:
Didatismo e Conhecimento

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


cido sulfrico (H2SO4)
- o cido mais utilizado e importante nas indstrias e nos laboratrios, conhecido como burro de carga. O poder econmico
de um pas pode ser avaliado pela quantidade de cido sulfrico que
ele fabrica e consome;
- O maior consumo de cido sulfrico na fabricao de fertilizantes, como os superfosfatos e o sulfato de amnio;
- o cido dos acumuladores de chumbo (baterias) usados nos
automveis;
- consumido em enormes quantidades em inmeros processos
industriais, como processos da indstria petroqumica, fabricao de
papel, corantes, etc;
- O cido sulfrico concentrado um dos desidratantes mais
enrgicos. Assim, ele carboniza os hidratos de carbono como os
acares, amido e celulose; a carbonizao devido desidratao
desses materiais;
- O cido sulfrico destri o papel, o tecido de algodo, a
madeira, o acar e outros materiais devido sua enrgica ao desidratante;
- O cido sulfrico concentrado tem ao corrosiva sobre os tecidos dos organismos vivos tambm devido sua ao desidratante.
Produz srias queimaduras na pele. Por isso, necessrio extremo
cuidado ao manusear esse cido;
- As chuvas cidas em ambiente poludos com dixido de enxofre contm H2SO4 e causam grande impacto ambiental.

- Responsvel pelo processo de formao da chuva cida em


ambientes no poludos na ausncia de descargas eltricas.
cido actico (H3C-COOH)
- o cido constituinte do vinagre, utilizado com condimento
na culinria;
- O vinagre uma soluo aquosa contendo de 3 a 7% de cido
actico.
Bases
Os antigos dividiam as substncias em dois grandes grupos: as
que se assemelhavam ao vinagre, denominadas cidos, e as semelhantes s cinzas de plantas, chamadas lcalis. Os lcalis eram substncias detergentes ou, segundo o farmacutico e qumico francs
Guillaume Franois Rouelle, bases.
Existem muitas bases fracas e inofensivas no nosso cotidiano,
dentre as muitas podemos citar o sabonete que faz muita espuma e
desliza facilmente pela pele, pois, transforma alguns tipos de leos
de nossa pele em substncias parecidas com as usadas para fazer
sabo at compostos utilizados como medicamentos, como o hidrxido de magnsio e o hidrxido de alumnio.
Por outro lado, existem tambm bases fortes e corrosivas tanto
quanto os cidos, como por exemplo: hidrxido de sdio utilizado
em produtos para desentupir encanamentos.
Podemos listar aqui algumas das propriedades funcionais das
bases, como:
-Possuem sabor amargo ou custico (adstringente que amarra a boca);
- Modificam a cor dos indicadores cido-base;
- Conduzem a corrente eltrica quando fundidos ou em soluo
aquosa;
- Reagem com cidos produzindo sal e gua;
Na maioria das vezes so corrosivas e reagem com metais.

S + O2(g) SO2(g) + 1/2 O2(g) SO3(g) + H2O(l)


H2SO4(aq)
cido ntrico (HNO3)
-Depois do sulfrico, o cido mais fabricado e mais consumido na indstria. Seu maior consumo na fabricao de explosivos,
como nitroglicerina (dinamite), trinitrotolueno (TNT), trinitrocelulose (algodo plvora) e cido pcrico e picrato de amnio;
- usado na fabricao do salitre (NaNO3, KNO3) e da plvora
negra (salitre + carvo + enxofre);
Plvora negra: (Salitre - KNO3 + Carvo - C + Enxofre - S)
-As chuvas cidas em ambientes poludos com xidos do nitrognio contm HNO3 e causam srio impacto ambiental. Em ambientes no poludos, mas na presena de raios e relmpagos, a chuva
tambm contm HNO3, mas em proporo mnima;

Conceito de base segundo arrhenius

Ex.: NaOH

N2(g) + O2(g) 2 NO(g) + O2(g) 2 NO2(g) + H2O(l)


HNO2 + HNO3
- O cido ntrico concentrado um lquido muito voltil; seus
vapores so muito txicos. um cido muito corrosivo e, assim
como o cido sulfrico, necessrio muito cuidado para manuselo.

Ca(OH)2

Ca2+(aq) + 2 OH-(aq)

Al(OH)3

Al3+(aq) + 3 OH-(aq)

Como pudemos observar, a principal caracterstica das bases


a presena do on OH- (hidroxila ou hidrxido) ligado ao ction, que
geralmente um metal, sendo sua frmula representada por:
C (OH)x
Onde: C um ction (metal)
X = corresponde ao nmero de hidroxilas (que invertido de baixo para cima esquerda, corresponder carga do metal).

cido fosfrico (H3PO4)


- Os seus sais (fosfatos) tm grande aplicao como fertilizantes
na agricultura;
- usado como aditivo (acidulante) em refrigerantes como
Coca-Cola.

Com isso na dissociao da base genrica C(OH)x ficaremos


com:

cido carbnico (H2CO3)


- o cido das guas minerais gaseificadas e dos refrigerantes.
Forma-se na reao do gs carbnico com a gua: CO2 + H2O
H2CO3
Didatismo e Conhecimento

Na+(aq) + OH-(aq)

C(OH)x Cx+ + x OH-

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Exemplos:

Resumindo teremos:
Bases fortes bases dos metais da famlia 1A e 2A.
Bases fracas bases dos demais metais, Be(OH)2, Mg(OH)2
e NH4OH.

Na+(aq) + OH-(aq)

NaOH
Ca(OH)2

Ca2+(aq) + 2 OH-(aq)

Al(OH)3

Al3+(aq) + 3 OH-(aq)

Sn(OH)4

Sn4+(aq) + 4 OH-(aq)

- Quanto a volatilidade das bases


Base voltil o hidrxido de amnio (NH4OH) a nica base
voltil (baixo ponto de ebulio).
Bases fixas todas as demais bases so consideradas no volteis ou fixas (alto ponto de ebulio).

Observao:
O hidrxido de amnio (NH4OH) a nica base que no apresenta metal em sua frmula sendo proveniente do borbulhamento
da amnia (NH3) em gua. voltil, de natureza molecular, cheiro
muito forte (amonaco) e base muito solvel e fraca (forma poucos
ons em gua).

Nomenclatura das bases


Para ctions que formam uma nica base:

Os ctions que formam uma nica base so: metais da famlia


1A e 2A, Ag+, Zn2+, Al3+ e NH4+ (amnio).
Classificao das bases

Exemplos:
NaOH hidrxido de sdio
AgOH hidrxido de prata
Ca(OH)2 hidrxido de clcio
Zn(OH)2 hidrxido de zinco
Al(OH)3 hidrxido de alumnio
NH4OH hidrxido de amnio

- Quanto ao nmero de hidroxilas na frmula da base


Monobase uma hidroxila na frmula da base.
Ex.: NaOH, KOH, AgOH, etc.
Dibase duas hidroxilas na frmula da base.
Ex.: Ca(OH)2, Mg(OH)2, Zn(OH)2, etc.
Tribase trs hidroxilas na frmula da base.
Ex.: Al(OH)3, Fe(OH)3, Mn(OH)3, etc.
Tetrabase quatro hidroxilas na frmula da base.
Ex.: Mn(OH)4, Sn(OH)4, Pb(OH)24, etc.

Para montar a frmula da base a partir dos nomes, necessrio


sabermos que na formulao das base C(OH)x, o nmero de hidroxilas da base (X) depender da carga do ction (C). Desta forma, teremos: ctions com carga +1 1 OH na frmula; ctions com carga
+2 2 OH na frmula e ctions com carga +3 3 OH na frmula.

- Quanto a solubilidade das bases em gua


Totalmente solveis bases de metais alcalinos (1A) e o hidrxido de
amnio (NH4OH).
Parcialmente solveis bases de metais alcalinos terrosos
(2A).
Praticamente insolveis bases dos demais metais.

Exemplos:
Hidrxido de potssio K+ = KOH
Hidrxido de magnsio Mg2+ = Mg(OH)2
Hidrxido de alumnio Al3+ = Al(OH)3
Hidrxido de amnio NH4+ = NH4OH
Hidrxido de zinco Zn2+ = Zn(OH)2
Hidrxido de prata Ag+ = AgOH

Exceo: O Be(OH)2 e Mg(OH)2 (bases da famlia 2A) so praticamente insolveis.

Para ctions que formam mais de uma base:

- Quanto ao grau de dissociao (fora das bases)


Para que uma base se dissocie necessrio que esta base esteja
dissolvida em gua, com isso teremos:

Os ctions, mais importantes, que formam duas bases so:


Ouro (Au1+ e Au3+)
Cobre (Cu1+ e Cu2+)
Ferro (Fe2+ e Fe3+)
Chumbo (Pb2+ e Pb4+)
Exemplos:
AuOH hidrxido de ouro-I ou auroso

Exceo: O hidrxido de amnio (NH4OH) uma base solvel,


mas que apresenta um pequeno grau de ionizao, desta forma, esta
base classificada como solvel e fraca.
Didatismo e Conhecimento

10

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


utilizado na fabricao de sais de amnio, empregados na
agricultura e como explosivos.

Au(OH)3 hidrxido de ouro-III ou arico


CuOH hidrxido de cobre-I ou cuproso
Cu(OH)2 hidrxido de cobre-II ou cprico
Fe(OH)2 hidrxido de ferro-II ou ferroso
Fe(OH)3 hidrxido de ferro-III ou frrico

QUESTES PROPOSTAS
Questo 01) O cido clrico um cido forte, utilizado como
catalisador em reaes de polimerizao e como agente oxidante.
Solues aquosas desse cido pode causar grande irritao na pele
e nas mucosas.
a) Represente a frmula estrutural do cido clrico.
b) Qual o nome do sal formado pela reao de neutralizao
do cido clrico pelo hidrxido de alumnio?
GAB

Aplicaes das principais bases do cotidiano


Hidrxido de sdio NaOH
Base conhecida como soda custica ou lixvia ou diabo
verde. a base mais importante da indstria e do laboratrio.
fabricado e consumido em grandes quantidades;
Utilizado em produtos para desentupir ralos, pias e limpa forno;
usada na fabricao do sabo. Atualmente, o sabo obtido de gorduras (de boi, de porco, de carneiro, etc) ou de leos (de
algodo, de vrios tipo de palmeiras, etc.). A hidrlise alcalina de
glicerdeos (leos ou gorduras) denominada, genericamente, de
reao de saponificao porque, numa reao desse tipo, quando
utilizado um ster proveniente de um cido graxo, o sal formado recebe o nome de sabo. A equao abaixo representa genericamente
a hidrlise alcalina de um leo ou de uma gordura:
usada em inmeros processos industriais na petroqumica e
na fabricao de papel, celulose, corantes, etc. muito corrosivo e
exige muito cuidado ao ser manuseado.
No existe soda custica livre na natureza. Esta fabricada por
eletrlise (decomposio por corrente eltrica) de soluo aquosa de
sal de cozinha (NaCl).

Questo 02) Escreva :


a) as frmulas moleculares do cido hipoiodoso e do cido
perbrmico.
b) os nomes dos compostos de frmulas H2SO3 e H3PO4.
Gab:
a) HIO e HBrO4
b) cido sulfuroso e cido fosfrico
Questo 03) A queima do enxofre presente na gasolina e no
leo diesel gera dois anidridos que, combinados com a gua da chuva, formam seus cidos correspondentes.
Escreva a frmula desses cidos e indique o cido mais forte.
Justifique sua indicao.
RESOLUO:
H2SO3 e H2SO4
O cido mais forte o H2SO4, pois a diferena entre o nmero de tomos de oxignio e o nmero de tomos de Hidrognio
cido igual a 2, enquanto no H2SO3 essa diferena igual a 1.

Hidrxido de clcio Ca(OH)2


Conhecido como cal hidratada ou cal extinta ou cal apagada;
utilizado na construo civil no preparo da argamassa, usada
na alvenaria, e na caiao (pintura a cal) o que fazem os pedreiros ao
preparar a argamassa.
Hidrxido de magnsio Mg(OH)2
um slido branco pouco solvel em gua;
Quando disperso em gua, origina um lquido espesso, denominado de suspenso, que contm partculas slidas misturadas
gua denominado de leite de magnsia e utilizada como laxante
e anticido.
2 HCl(aq) + Mg(OH)2(aq) MgCl2(aq) + 2 H2O(l)

Questo 04) Sabe-se que a chuva cida formada pela dissoluo, na gua da chuva, de xidos cidos presentes na atmosfera.
Entre os pares de xidos relacionados, qual constitudo apenas por
xidos que provocam a chuva cida?
a) Na2O e NO2
b) CO2 e MgO
c) CO2 e SO3
d) CO e NO2
e) CO e NO
Alternativa C.
O CO2 reage com a gua formando soluo cida e responsvel pela acidez natural da chuva em ambientes no poludos. O SO3 reage com a gua formando cido sulfrico e um
dos principais responsveis por diminuir o pH da chuva a nveis
perigosos para o ambiente.

Hidrxido de alumnio Al(OH)3


um slido gelatinoso insolvel na gua;
Utilizado no tratamento da gua e de gua de piscinas. O hidrxido de alumnio formado na superfcie, como um precipitado
gelatinoso, arrasta as impurezas slidas para o fundo do tanque, no
processo denominado decantao; Al2(SO4)3 + 3 Ca(HCO3)2 2
Al(OH)3 + 3 CaSO4 + 6 CO2
Utilizado como medicamento com ao de anticido estomacal
(Pepsamar, Natusgel, Gelmax, etc) pois neutraliza o excesso de HCl
no suco gstrico.
3 HCl(aq) + Al(OH)3(aq) AlCl3(aq) + 3 H2O(l)
Hidrxido de amnio NH4OH
obtido atravs do borbulhamento de amnia(NH3) em gua,
originando uma soluo conhecida comercialmente como amonaco;
NH3(g) + H2O(l) NH4OH(aq) NH4+(aq) + OH-(aq)
utilizado em produtos de limpeza domstica tais como: ajax,
fria, patopurific, veja, etc.
Didatismo e Conhecimento

Questo 05) Ao se dissolverem 5 molculas-grama de um cido HX, em quantidade suficiente de gua, constatou-se que 4 molculas-grama do soluto se ionizaram. Pedem-se:
a) o grau de ionizao de HX;
b) o nmero de ons existentes na soluo obtida.
11

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


RESOLUO:
a) 80%
b) 4,8 . 1024ons

O amonaco o nome popular do hidrxido de amnio (NH4OH


). Logo, as afirmaes II e III so corretas.
Questo 02) A frmula do hidrxido ferroso :
a) Fe(OH)2
b) Fe(OH)3
c) FeO
d) Fe2O3
e) n.d.a
Gab: A

Questo 06) Os cidos podem ser classificados quanto ao nmero de hidrognios ionizveis. O cido hipofosforoso, H3PO2, utilizado na fabricao de medicamentos, apresenta frmula estrutural:

H
H

Questo 03) A equao que representa corretamente a dissociao inica de uma base pouco solvel, de frmula M(OH)x, :
a) M(OH)x Mx+ + OHb) M(OH)x xM+ + xOHc) M(OH)x Mx+ + xOHd) M(OH)x Mx+ + OHxe) M(OH)x xM+ + OHGab: C

a) Quantos hidrognios so ionizveis no cido hipofosforoso? Justifique sua resposta.


b) Escreva a equao de neutralizao desse cido com o hidrxido de sdio.
RESOLUO:
a) apenas um (01) hidrognio ionizvel.
b) H3PO2 + NaOH NaH2PO2 + H2O

Questo 04) Explique porque praticamente impossvel medir


a condutividade eltrica de um hidrxido que no seja de um metal
alcalino.
Gab: Porque praticamente insolvel em gua.

Questo 07) O cloro um gs irritante e sufocante. Misturado


gua, reage produzindo os cidos clordrico e hipocloroso que age
como desinfetante, destruindo ou inativando os microorganismos.
a) Identifique os reagentes e os produtos desta reao e fornea suas frmulas qumicas.
b) A gua de lavadeira uma soluo aquosa de hipoclorito
e o cido muritico uma soluo concentrada de cido clordrico.
Ambos podem ser utilizados separadamente na limpeza de alguns
tipos de piso. Explique a inconvenincia, para a pessoa que faz a
limpeza, de utilizar uma mistura destes dois produtos.
RESOLUO:

a) Cl2(g) + H2O HCl(aq) + HClO(aq)

b) H+(aq) + ClO(aq) + 2 Cl(aq) Cl2(g) + H2O


como na reao h produo de gs cloro, o incoveniente que
a gua de lavadeira irritante aos olhos, devido a presena do
cloro.

Questo 05) Uma base forte deve ter ligado ao grupo OH:
a) um elemento muito eletropositivo
b) um elemento muito eletronegativo
c) um semimetal
d) um metal que d 3 eltrons
e) um ametal
Gab: A
Questo 06) Na embalagem de um produto usado para desentupir pias e ralos, base de
soda custica (hidrxido de sdio NaOH), so encontradas,
entre outras, as instrues:
Cuidado: Em caso de contato, lavar imediatamente os olhos ou
a pele com gua em abundncia durante quinze minutos. Se ingerido, no provocar vmito. Dar grande quantidade e tambm vinagre
diludo em um copo de gua. A seguir, dar uma colher de leo comestvel.
No reaproveitar a embalagem vazia. Lavar a colher utilizada
como medida com bastante gua corrente antes de reutiliz-la. No
adicionar gua embalagem do produto.
O quadro abaixo relaciona algumas dessas instrues com as
justificativas para o uso desses procedimentos, com base nas propriedades da soda custica e das outras espcies envolvidas. Assinale a alternativa que contm uma justificativa INCORRETA para
a instruo relacionada.
a) Instruo : Dar vinagre diludo em um copo de gua. Justificativa : O vinagre diludo neutraliza a soda custica atravs de
reao cido-base.
b) Instruo : Lavar a colher utilizada como medida com bastante gua corrente antes de reutiliz-la. Justificativa : A utilizao
de grande quantidade de gua deve-se ao fato de a soda custica ser
insolvel na gua.
c) Instruo : No adicionar gua embalagem com o produto. Justificativa : A adio de gua embalagem com produto provoca forte aquecimento

QUESTES PROPOSTAS
Questo 01) Na reao entre os gases N2 e H2 , obtm-se unicamente gs amnia. A soluo aquosa de amnia recebe o nome
de amonaco (hidrxido de amnio), que o componente ativo de
produtos de limpeza usados para remoo de gorduras.
A partir dessas informaes, considere as seguintes afirmaes:
I. O hidrxido de amnio tem frmula NH3 .
II. Na formao do gs amnia, a reao ocorrida de sntese.
III. O amonaco tem frmula NH4OH .
IV. A amnia tem frmula NH4OH .
V. O cheiro irritante e forte, que se sente quando se usa amonaco, proveniente do gs nitrognio.
Esto corretas, somente:
a) I e IV .
b) II e V .
c) II e III .
d) I e II .
e) III e V.
Gab: C
A reao de sntese da amnia pode ser representada por:
N2(g) + 3H2(g) 2NH3(g)
Didatismo e Conhecimento

12

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Questo 10) cido brico, H3BO3, tem a seguinte frmula estrutural.

d) Instruo : No reaproveitar a embalagem vazia. Justificativa : A embalagem pode estar contaminada com resduos de soda
custica
Gab: B
Questo 07) Os halognios pertencem a uma classe de elementos com acentuada reatividade. Esto presentes na composio qumica de muitos cidos como o HF, HCl, HBr e HI. Considerando os
dados mostrados na tabela a seguir:
Constante de

Equilbrio de transferncia de prtons


+

acidez a 25

HF(aq) + H 2 O()

H 3 O () + F (aq )

3,5 10

H
C (aq) + H 2 O()

H 3 O + () + C (aq )

1,0 10

HBr(aq) + H 2 O()

H 3 O + ( ) + B
r

1,0 10

HI(aq) + H 2 O()

H 3 O + () + I (aq )

3,0 10

(aq )

correto afirmar que:


a) o cido com maior capacidade de liberar H3O+ o HBr.
b) o cido clordrico, ao sofrer ionizao, apresenta mais espcies no ionizadas.
c) a ordem de acidez crescente : HCl < HBr < HI <HF.
d) o cido ioddrico mais fraco que o cido bromdrico.
e) o cido fluordrico o cido mais fraco.
Gab: E

Gab: C
Questo 11) Para distinguir uma soluo aquosa de HF (cido
fraco) de outra de HCl (cido forte), de mesma concentrao, foram
efetuados os seguintes procedimentos independentes com cada uma
das solues.

Questo 08) Observe o esquema abaixo:

te.

so:

A fora de um cido medida pelo seu grau de ionizao (a),


ou seja, pela relao entre o nmero de molculas ionizadas e o
nmero total de molculas dissolvidas. Em qual das solues de
mesma concentrao e na mesma temperatura- a lmpada (L) do
esquema apresenta maior brilho?
a) HF
b) HNO3
c) H3PO4
d) H2S
e) H4SiO4
Gab: B

II. Medida de pH.


III. Teste com uma tira de papel tornassol azul.
IV. Medida de condutibilidade eltrica das solues.
Os procedimentos que permitem distinguir entre essas solues
a) I, II e IV, apenas.
b) II, III e IV, apenas.
c) II e IV, apenas.
d) III e IV, apenas.
e) IV, apenas.
Gab: A
Questo 12) Qual dos cidos abaixo o menos voltil?
a) HCl.
b) HI.
c) H2SO3.
d) H2SO4.
e) CH3CH2COOH.
Gab: D
INDICADORES CIDOS BASES

Questo 09) O cido sulfrico um lquido incolor, denso,


muito corrosivo e largamente utilizado na fabricao de matria-prima para o setor industrial. Sobre o cido sulfrico, CORRETO
afirmar:
a) pode ser obtido pela reao de SO3 e gua.
b) sua dissoluo em gua consome calor.
c) trata-se de um composto inico.
d) um cido monoprtico.
Gab: A
Didatismo e Conhecimento

I. Determinao da temperatura de congelamento do solven-

Medida da acidez ou alcalinidade


A medida de acidez ou alcalinidade de uma soluo pode ser
realizada atravs do uso de indicadores cido-base e tambm atravs
da medida do pH da soluo, denominado de potencial hidrogeninico.
O pH uma escala que vai de 0 a 14 e fundamenta-se na quantidade de ons hidrognio que esto contidos numa soluo.
13

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


A fenolftalena foi muito usada como principio ativo de muitos
laxantes, por exemplo, o Lacto-Purga. Todavia por ser suspeito de
possuir um grande poder carcinognico foi substitudo por outras
substncias.

Indicadores cido-base
Voc j observou como a cor do ch muda ligeiramente quando
se junta algumas gotas de um limo? O ch est agindo como um
indicador, mostrando que o limo aumentou a acidez. Alguns produtos qumicos coloridos so usados para mostrar se uma soluo
cida ou bsica (alcalina).

Fenolftalena em soluo de NaOH (meio bsico) apresenta


colorao avermelhada.

Um indicador cido-base uma substncia que apresenta uma


determinada colorao em meio cido e outra em meio bsico ou
alcalino.

Fenolftalena (conta-gotas) em presena de vinagre que contm cido actico (meio cido) permanecer incolor.

Indicadores naturais
Os corantes obtidos das frutas e vegetais, como pras, amora,
hortnsias, cebolas e repolho roxo, podem tambm ser indicadores.
Eles mudam de cor conforme o pH.

H diversos indicadores que podem nos dizer sobre a acidez ou


sobre a alcalinidade de uma soluo.
Um indicador muito til uma mistura de corantes, conhecida
como Indicador Universal.

Embalagem de Indicador Universal. As tiras do indicador so


imersas na soluo na qual se quer determinar o pH, o que feito
comparando-se a cor obtida na tira com a escala de cores que aparece impressa na embalagem do indicador

O crculo interior uma escala colorida de um indicador universal: cor-de-rosa no cido forte (pH = 0), azul na base forte (pH
= 14). Os crculos externos mostram como a cor dos sucos de repolho roxo, pra, rabanete e beterraba mudam com o pH.

Fenolftalena

Alguns jardineiros tm que se preocupar com o pH do solo. H


plantas que s crescem em um valor determinado de pH. Solos em
regies calcrias geralmente so alcalinos (pH de 7 a 7,5). Solos de
arenito, argila, pntano e turfa so cidos (pH de 6,5 a 7).

A Fenolftalena um composto orgnico usado como indicador


cido-base. O composto incolor em soluo cida e rsea em soluo bsica (com a transio de cores ocorrendo por volta de pH 9).
Didatismo e Conhecimento

14

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio

!
O suco de repolho roxo pode constituir um bom indicador universal de pH, podendo substituir os papis indicadores universais,
que so encontrados apenas em lojas especializadas.
O papel de tornassol vermelho no muda de cor em meio cido
(esquerda) e fica azul em meio bsico (direita).

O repolho roxo cortado em pequenos pedaos, colocado em


um recipiente com gua e depois ser fervido at obter uma soluo
roxa que mudar de cor tanto em presena de uma soluo cida
como em uma soluo bsica ou alcalina.

Dos indicadores citados, utilizaremos o papel de tornassol e


fenolftalena para definir solues cidas e bsicas, segundo a colorao obtida.
Com isso teremos:
Soluo

Tornassol

Fenolftalena

cida

Vermelho

Incolor

Bsica

Azul

Vermelho

QUMICA DESCRITIVA DOS ELEMENTOS


REPRESENTATIVOS;

Na Qumica Descritiva estudaremos a ocorrncia dos elementos


na natureza, os locais onde podem ser encontrados, o estado fsico
em que se apresentam e suas combinaes qumicas mais comuns.

Obteno do extrato de repolho roxo


O suco do repolho roxo vai do vermelho (meio cido), ao rosa,
roxo, azul e verde (meio bsico).

de grande interesse estudarmos os processos usados para obteno dos elementos, a partir de fontes naturais e como so fabricadas algumas substncias de grande interesse industrial e comercial.
Constituio da Terra
O planeta Terra, para efeitos de estudos, dividido basicamente
em trs partes: litosfera, hidrosfera e atmosfera.
Atmosfera
Atmosfera a camada gasosa ao redor da Terra.

Solues contendo extrato de repolho roxo funcionando como


indicador de pH.

Sete elementos gasosos podem ser encontrados comumente na


atmosfera, entre eles nitrognio, oxignio e gases nobres.
Todos esses elementos so obtidos industrialmente a partir do
ar atmosfrico, com exceo do gs hlio (He) que extrado do
gs natural de certos poos no Kansas, Oklahoma e Texas, onde sua
concentrao bem superior encontrada no ar atmosfrico.

O papel de tornassol obtido a partir de uma espcie de lquen (organismo de estrutura simples formada pela associao de
um fungo com uma alga), que fica vermelho em meio cido e azul
em meio bsico.
Didatismo e Conhecimento

15

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Dependendo do local, clima e altitude, a composio da atmosfera pode variar; mas, em geral, temos em ordem decrescente de
porcentagem em volume:

Hidrosfera
Hidrosfera a parte lquida da Terra que corresponde a cerca de
80% da superfcie.
A gua dos oceanos apresenta uma grande variedade de sais
dissolvidos, constituindo-se em fonte principal de obteno de vrios elementos, como bromo, magnsio, sdio, cloro, etc.
Os sais dissolvidos correspondem a 3,3% da gua dos oceanos.
Os elementos que podem ser obtidos da gua dos oceanos apresentam a seguinte abundncia:
O oxignio e o silcio so os elementos mais abundantes da
crosta terrestre, seguidos do alumnio e do ferro. Esses e os demais
elementos encontrados na crosta terrestre compem os chamados
minerais.
Minerais so substncias presentes na crosta terrestre que se
encontram em determinados depsitos. So provenientes da concentrao de vrios elementos que ocorreram com o passar das eras
geolgicas, devido a vrios processos como fuso, cristalizao, dissoluo e precipitao, formando compostos estveis.
Resumindo temos:
Mineral uma substncia simples ou composta que se forma naturalmente na crosta terrestre.
Grande parte dos minerais apresentam, na sua formao, elementos metlicos, cuja extrao desejada.
Litosfera

Se o mineral apresenta facilidade de extrao, condies de


transporte, baixo custo de mercado, ele passa a ser chamado de minrio.

Litosfera a parte slida da Terra com cerca de 6.500 km de


raio. A parte mais externa, que corresponde a uma espessura de
aproximadamente 30 km, chamada de crosta terrestre. dela que
extramos alguns principais elementos, os quais, em ordem decrescente de abundncia, so:

Didatismo e Conhecimento

Portanto: minrio todo material do qual se pode extrair


um elemento quimico de forma economicamente vivel.
Os principais minrios e os elementos qumicos extrados encontram-se no quadro a seguir:

16

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Substncias Simples e Compostas Importantes
Halognios
Os elementos da famlia VIIA (atual 17) so conhecidos como
halognios (formadores de sal).
Os halognios, por serem altamente reativos, no so encontrados livres na natureza e ocorrem como ons halogenetos: F, Cl,
Br e I.
- Flor (F2)
um gs amarelo plido que ocorre em minerais, como fluorita
(CaF2), criolita (Na3AlF6) e flor apatita [Ca5F(PO4)3].
A molcula de flor F2 , em princpio, o mais forte dos agentes
oxidantes.

Na prtica, o flor raramente utilizado como agente oxidante,


pois o seu manuseio extremamente perigoso. A molcula de F2
retira eltrons de praticamente todas as espcies, incluindo a gua,
geralmente com exploso violenta.
O flor (F2) obtido pela eletrlise de uma mistura fundida de
HF e KF usando nodo de carbono, no qual se produz F2, e um ctodo de prata ou ao inoxidvel no qual se forma o H2. Os produtos
devem ser mantidos separados, pois reagem explosivamente.
O F2 pode ser armazenado em recipiente de ao, cobre ou certas
ligas, somente porque ele forma rapidamente, uma pelcula fluoreto
na superfcie do metal, e impede o prosseguimento da reao.
O flor reage violentamente com o hidrognio, formando o fluoreto de hidrognio (HF).

O minrio encontrado na natureza em locais que so chamados minas ou jazidas. O processo de extrao do minrio das minas
chamado de minerao.
Os processos utilizados para obteno dos metais, a partir dos
seus minrios, a metalurgia.

HF, apesar de ser um cido fraco, possui propriedades que o


tornam difcil de manusear. O HF(g), ou em soluo aquosa ataca o
vidro.

Esses processos consistem, de um modo geral, em:


- Purificao (ou concentrao) do minrio
Geralmente o minrio obtido da jazida apresenta uma quantidade muito grande de impurezas, material rochoso intil. Portanto, as
impurezas devem ser removidas.
- Reduo do ction metlico ao tomo metlico
Os elementos metlicos encontram-se nos minerais na forma
de ctions metlicos, e, para que se possa obter o metal, tem-se que
fazer a reduo do ction.

As solues de HF devem ser guardadas em recipientes de polietileno ou de parafina.


O HF tem uma outra propriedade que o torna extremamente
perigoso, que causar queimaduras extremamente dolorosas e que
levam vrios meses para cicatrizar.
Os ons fluoretos (F) so usados em preveno de crie dentria. A fonte de ons fluoreto pode ser SnF2 (fluoreto estanoso) encontrado no creme dental, ou NaF, adicionado gua potvel, na
proporo de 1 p.p.m.
- Cloro (Cl2)

- Purificao do Metal
O metal obtido pelas etapas 1 e 2 contm geralmente pequenas
quantidades de outros metais e/ou no-metais, que devem ser removidos ou no, dependendo da aplicao do metal.
Didatismo e Conhecimento

um gs amarelo-esverdeado, venenoso, pouco solvel em


gua, reagindo com ela, dando ons cloreto e hipoclorito.
17

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


CI2(g) + 2I 2CI+ I2
ou pela reduo do
a I :

seguido de oxidao pelo prprio iodato:

O cloro encontra-se combinado como cloreto, como os minerais habita (NaCl) e siluita (KCl) em depsitos subterrneos e tambm, nos oceanos.
O cloro um germicida poderoso, usado na purificao da gua
de beber.
obtido industrialmente pela eletrlise de soluo aquosa de
cloreto de sdio.
2NaCI + 2H2O 2NaOH + H2+ CI2
Em laboratrio, pela reao do cido clordrico com dixido de
mangans:
MnO2 + 4 HCI MnCI2+2H2O+CI2
O cloro usado como alvejante industrial no tratamento da celulose para a fabricao de papel, na obteno de compostos como o
cido clordrico, o inseticida BHC (bezeno hexaclorado), etc.
Quando o cloro borbulhado em uma soluo de hidrxido de
sdio temperatura ambiente, ocorre a reao:
Cl2(g) + 2OH-(aq) ClO-(aq) + Cl-(aq) + H2O(l)
A soluo resultante comercializada como gua sanitria para
uso domstico e como desinfetante.

Em laboratrio, obtido pelo tratamento de uma mistura de iodeto de potssio e dixido de mangans com cido sulfrico:
2KI + MnO2 + 3H2SO4 2KHSO4 + MnSO4 + 2H2O + I2
O iodo usado na produo do iodofrmio (CHI3), na fabricao de remdios, desinfetantes, corantes e na indstria fotogrfica
(KI e AgI).
O sal de cozinha iodado (NaCl + NaI) tem a finalidade de combater o hipertireoidismo (doena do bcio).
Hidrognio (H2)
um gs incolor, inodoro, combustvel (chamado combustvel
do futuro). Na Terra, o hidrognio raramente se encontra livre, mas
combinado, geralmente com o oxignio, formando gua.
A molcula de hidrognio to leve que, ao ser libertada, rapidamente sobe aos nveis mais altos da atmosfera de onde, aos poucos, se perde no espao.
obtido industrialmente:
a) a partir do carvo

- Bromo (Br2)
um lquido castanho-avermelhado, de cheiro repugnante, txico, venenoso.
Parcialmente solvel em gua, reagindo com ela e produzindo
gua de bromo.

b) processo Lane
3Fe + 4H2O
c) eletrlise

obtido industrialmente pela oxidao em meio cido do Br


das guas do mar, usando cloro como agente oxidante.
Cl2(g) + 2Br-(aq) 2Cl-(aq) + Br2(aq)
O bromo gasoso arrastado por uma corrente de ar e, em seguida, condensado ao estado lquido.
No laboratrio, o bromo pode ser obtido pele oxidao de Br
por MnO2 em meio cido ou outro agente oxidante.
O bromo produz queimaduras dolorosas na pele que dificilmente cicatrizam, por isso deve ser manuseado com extremo cuidado.
usado na fabricao de bromofrmio (CHBr3), de desinfetantes, corantes e na indstria fotogrfica, principalmente na forma de
brometo de prata (AgBr).

2H2O

2H2 + O2

2NaCI + 2H2O

2NaOH + H2 + CI2

d) Em laboratrio
Pela reao de cidos com metais mais reativos que o hidrognio.
Zn(S) + 2HCI(aq) ZnCI2(aq)
O hidrognio usado na hidrogenao de leos vegetais para a
produo de margarina, como combustvel, na formao de vrios
compostos, como NH3 e HCl.

- Iodo (I2)

Oxignio (O2)

um slido cinza-escuro, com um brilho semimetlico. Sublima a 184 oC, dando vapor violeta. praticamente insolvel em
gua. solvel em etanol, formando a tintura de iodo que era utilizada como desinfetante e antissptico.

um gs incolor, inodoro e, no estado lquido, azul plido.


o elemento mais abundante na Terra, quer em porcentagem de
tomos, em massa. Ocorre livre na atmosfera, combinado com hidrognio na hidrosfera e combinado como silcio, ferro, alumnio e
outros elementos na crosta terrestre (litosfera).

produzido industrialmente pela oxidao de I com gs Cl2:


Didatismo e Conhecimento

Fe3O4 + 4H2

18

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


usado como comburente, substncia que alimenta as combustes.
obtido industrialmente por liquefao e posterior destilao
fracionada do ar atmosfrico.
Inicialmente, o ar atmosfrico submetido a sucessivas compresses e resfriamentos at atingir uma temperatura de aproximadamente 200 C. O ar torna-se lquido e, ento, faz-se a destilao
fracionada.
Inicialmente, destila o componente mais leve que o nitrognio
(PE = 195 C), depois argnio (PE 190 C) e, por ultimo, o
oxignio (PE 185 C).
obtido tambm pela eletrlise da gua:
2H2O 2H2+O2
Na Medicina, aplicado em inalaes e em aparelhos de respirao artificial contra envenenamentos provocados por certos gases
como o monxido de carbono (CO). usado na fabricao do ao e
em equipamentos de mergulho.

obtida industrialmente pela sntese cataltica:

I. Processo Haber-Bosch
Neste processo, a temperatura fica entre 500 a 600 C, a presso
de 200 atmosferas e o catalisador o smio ou o urnio.
O resultado uma soluo amonaca com rendimento de 15%.
II. Processo de Claude
Neste processo, a temperatura tambm de 500 a 600 C, s
que a presso de 1000 atmosferas e o catalisador o ferro. Resulta
o gs amonaco liquefeito, com rendimento de 40%.
Em laboratrio
a) Processo Solvay
Ao da cal viva quente sobre o cloreto de amnio.

- Nitrognio (N2)
A vitrificao difere das tcnicas de refrigerao e de armazenagem tradicionais que permite a solidificao transparente
instantnea dos ovos e dos embries sem a formao de cristais de
gelo. Durante a vitrificao o embrio mergulhado no nitrognio
lquido de -196C.
um gs, incolor, inodoro e inspido.
um gs inerte. Ocorre na Terra como o principal constituinte
do ar atmosfrico (~ 78% em volume) onde se encontra livre (N2).
difcil encontrar compostos inorgnicos do nitrognio como
minerais, pois a maioria solvel em gua.
O nitrognio encontrado em compostos orgnicos em todos os
seres vivos, animais e plantas.
Certas bactrias no solo e razes de algumas plantas, especialmente os legumes, convertem o nitrognio atmosfrico em nitrognio orgnico, que ento transformado por outras bactrias em
nitrato, a forma de nitrognio mais usada pelas plantas na sntese
de protenas.
O nitrognio obtido industrialmente por liquefao e posterior
destilao fracionada do ar atmosfrico.
Em laboratrio, obtido pela decomposio do nitrito de amnio (NH4NO2):

2NH4CI + CaO

b) Sal de amnio com base solvel.

A amnia utilizada em refrigerao, na produo de fertilizantes, na preparao de cido ntrico.


cido Ntrico (HNO3)
Puro, um lquido incolor, voltil (PE = 86 C) e solvel em
gua. Em soluo aquosa, d origem a um cido forte, (aqua fortis),
de cheiro irritante, muito venenoso se inalado ou ingerido, e forte
agente oxidante.
obtido industrialmente pela oxidao da amnia, pelo processo Ostwald:

Por ser inerte, usado na forma gasosa no empacotamento de


alimentos e no interior de lmpadas incandescentes.
Na forma lquida, usado na conservao de alimentos, na de
smen para inseminao artificial.
usado tambm na sntese da amnia e na do cido ntrico.

Enxofre
O enxofre encontrado livre na crosta terrestre, bem como
combinado com outros elementos, principalmente na forma de sulfetos, como a galena (PbS), pirita (FeS2) e vrios sulfatos, como o
sulfato de clcio etc.

Amnia ou Gs Amonaco (NH3)


um gs incolor (ponto de ebulio normal - 33,4 C), com
odor caracterstico, sufocante, e sua inalao, em altas concentraes, causa problemas respiratrios.
A amnia extremamente solvel em gua, produzindo o hidrxido de amnio, o qual no existe isolado.
NH4OH
NH3 + H2O
NH4OH

obtido industrialmente pelo processo Frasch, no qual o vapor


dgua superaquecido (a cerca de 170 C e sob presso) e ar comprimido so injetados por encanamentos at os depsitos subterrneos.
O enxofre se funde e forado a subir para a superfcie como uma
espuma de ar-gua-enxofre.
O enxofre um slido cristalino amarelo, insolvel em gua e
solvel em dissulfeto de carbono (CS2).

NH + OH
Didatismo e Conhecimento

CaCI2 + 2NH3 + H2O

19

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Apresenta uma variedade de formas alotrpicas.
temperatura ambiente, ou abaixo de 95,5 C, o enxofre estvel o rmbico ou enxofre cuja molcula cclica (S8).
Quando aquecido lentamente, transforma-se na forma cristalina monoclnica, estvel acima de 95,5 C.
Quando o enxofre lquido (ponto de fuso = 119 C) resfriado
rapidamente, sendo despejado em gua, forma-se o enxofre plstico
ou amorfo. Ele se parece muito com uma goma de mascar e, aparentemente, consiste em cadeias muito longas e entrelaadas.
O enxofre usado na vulcanizao da borracha, na fabricao
de plvora e em fogos de artifcio.
Em medicina, empregado em pomadas ou sabonetes, no combate de certas molstias da pele.
usado na sntese do cido sulfrico.

Alumnio (Al)
o metal mais abundante da litosfera, ocorre nos aluminossilicatos, argilas, micas e feldspatos.
obtido industrialmente pelo processo Hall, que consiste na
eletrlise gnea da alumina (Al2O3) proveniente da bauxita.
O mineral de alumnio bauxita, que xido de alumnio e
hidrato impuro Al2O3 nH2O.
Inicialmente a bauxita purificada, pelo processo de Bayer, formando a alumina (Al2O3).
A alumina dissolvida em criolita (Na3AlF6) fundida e eletrolisada a cerca de 1.000C.

cido Sulfrico (H2SO4)


um lquido incolor, viscoso, forte agente oxidante, desidratante, densidade igual a 1,84 g/cm3. Seu ponto de ebulio cerca
de 330 C, sendo um cido fixo (difcil de vaporizar). um dos
reagentes industriais mais importantes.
obtido industrialmente de duas etapas:
I. Obteno do dixido de enxofre (SO2)
a) a partir da combusto do enxofre
S+O2 SO2
b) a partir da ustulao da pirita (FeS2)

O alumnio um metal extremamente verstil. Ele pode ser


prensado, curvado, enrolado, moldado, estruturado, dando origem
s mais variadas formas.
Sua baixa densidade torna-o til na construo de aeronaves e
est sendo cada vez mais utilizado nas indstrias automobilsticas
para obter veculos mais leves. utilizado na fabricao de utenslios domsticos, como panelas, bacias, formas etc., e tambm na
produo de fios para eletricidade.

4FeS2 + 11O2

QUESTES RESOLVIDAS
Questo 01) Descreva um mtodo de preparao do cido ntrico economicamente vivel e utilizado pelas indstrias qumicas
modernas para a produo em grande escala. Utilize equaes balanceadas para representar as reaes qumicas que ocorrem com o
emprego do mtodo proposto.

2Fe2O3+8SO2

II. Processo de Contato


Oxidao cataltica do SO2 a SO3, pelo pentxido de divandio
(V2O5) ou pela platina (Pt) finamente dividida.
2SO2+O2

RESOLUO:
Trata-se de um cido lquido e incolor, txico, corrosivo e
com ponto de ebulio de 83C.

2SO3

O SO3 dissolvido em H2SO4, produzindo o cido pirossulfrico, chamado antigamente de oleum ou cido sulfrico fumegante
(H2S2O7).
SO3(g) + H2SO4(l) H2S2O7(l)
A adio de gua ao cido pirossulfrico produz um cido sulfrico de alta concentrao.
H2S2O7(l) + H2O(I)

Indiscutivelmente preparado a partir do NH3


12NH3 + 15O2 12NO + 18 H2O
12NO + 6O2 12NO2
12NO2 + 4H2O 8HNO3 + 4NO
Questo 02) Descreva como se pode obter, num laboratrio de
qumica, cloridreto (HCl (g)) a partir de cloreto de sdio slido. De
sua descrio devem constar: as outras matrias primas necessrias,
o desenho esquemtico da aparelhagem a ser utilizada e as equaes
qumicas balanceadas das reaes envolvidas.

2H2SO4(I)

Este processo de contato o mais moderno utilizado para a


obteno de cido sulfrico. Antigamente, usava-se o processo das
camadas de chumbo.

RESOLUO
Em laboratrio preparado a partir do NaCl(s) em reao
com soluo aquosa de cido sulfrico.

A dissoluo do cido sulfrico em gua deve ser feita com


extremo cuidado, pois libera grande quantidade de calor.
Devemos sempre adicionar o cido gua lentamente e sob
agitao.
Nunca adicionar gua no cido, porque o calor liberado vaporiza rapidamente a gua medida que ela vai sendo adicionada, o que
pode provocar queimaduras graves.
O cido sulfrico muito corrosivo e carboniza a matria orgnica.
utilizado como eletrlito de bateria de autos, na fabricao
de outros cidos, na produo de fertilizantes e na fabricao de explosivos.
Didatismo e Conhecimento

20

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Equipamento de kipp.
No recipiente A colocado o NaCl em fase slida;
No recipiente C colocado soluo de H2SO4 que ir gotejar sobre o NaCl;
O HCl gasoso ser recolhido no recipiente B.

III-procedimento:
- Colar em um balo de fundo redondo 10mL de soluo de
Hidrxido de Clcio e 20mL de soluo de Cloreto de Amnio.
Tampar o balo e montar a aparelhagem conforme o esquema
descrito acima.
- ATENO: a ponta do tubo de vidro que fica dentro do
balo onde ser recolhido o gs deve ser bem estreita.
- aquecer o sistema por alguns minutos, em chama branda.
- desligar o bico de Bnsen. Retirar imediatamente o tubo
de borracha que faz a conexo dos dois bales .

Questo 03) Descreva como o hidrxido de sdio obtido em


escala industrial. Sua descrio deve incluir as matrias primas utilizadas, as equaes das reaes qumicas envolvidas no processo, as
condies de operao e o aproveitamento de eventuais subprodutos
obtidos no processo.
RESOLUO
Processo:
O Hidrxido de sdio obtido industrialmente por eletrlise de solues aquosas de NaCl:
Matrias primas:
NaCl e H2O
Equaes:
2NaCl + H2O 2NaOH + H2(g) + Cl2(g)
Sub-produtos
Hidrognio gasoso: usado em outras reaes qumicas.
Cloro gasoso: aproveitado no para diversas outra reaes
como de clorao, obteno de compostos para o tratamento
de gua etc.

Questo 05) Explique o que se entende por chuva cida. Quais


so as causas deste problema? Quais so as formas de control-lo?
RESOLUO
- Entende-se por chuva cida a qualquer chuva que apresenta pH < 5,6
- CAUSAS:
Nos lagos:
- o aumento da acidez das guas provoca a destruio da
vegetao aqutica e provoca a morte de peixes como por exemplo a truta e o salmo que morrem em pH=5,5.
Nas florestas:
Produz morte nas floresta de grande porte devido destruio das
clulas respiratrias (estmatos) das rvores.
No solo:
Altera o pH , sendo necessrio o uso de agentes corretivos
como por exemplo o calcrio ( CaCO3)
Nos monumentos:
Os monumentos base de calcrio e mrmore sofrem corroso na presena de cido sulfrico, sendo parcial ou totalmente destrudos.
Na sade humana:
Produz diversos danos ao aparelho respiratrio
- Distrbios biolgicos como tosse, asma, bronquite, efizema pulmonar e etc.

Questo 04) Descreva como se pode preparar NH3 gasoso, em


pequena escala, a partir de substncias freqentemente disponveis
em laboratrios de qumica. Sua resposta deve conter uma descrio
do procedimento experimental, deve vir acompanhada de uma figura da aparelhagem utilizada e das equaes balanceadas das reaes
envolvidas no processo de preparao.
RESOLUO
A nvel de pequena escala o NH3 pode ser obtido a partir de
reaes de bases fortes com sais de amnio:
2NH4Cl + Ca(OH)2 CaCl2 + 2H2 O +2NH3(g)

FORMAS CONTROLADORAS:
Do ponto de vista tcnico, podemos empregar algumas medidas, tais como:
- Usar carvo mineral mais purificado;
- Utilizao de sistemas de absoro adequados de SO2 em
caldeiras;
- Eliminao do enxofre existente no petrleo;
- Diminuio do uso de transporte particular e aumento do
uso de transporte coletivo.
Questo 06) Um processo de gravao em vidro envolve a
ao corrosiva do cido fluordrico. O cido fluordrico, em soluo
aquosa, reage com o dixido de silcio da superfcie do vidro, originando tetrafluoreto de silcio gasoso e gua.
Escreva a equao qumica balanceada da reao que ocorre
no processo de gravao em vidro, indicando os estados fsicos de
reagentes e produtos.
Gab: 4 HF(aq) + SiO2(s) SiF4(g) + 2 H2O(l)

I- objetivo:
Obter gs amonaco
II- material:
Bquer, proveta, bales de fundo redondo, tubo de vidro
com ngulo de 45o, tubo de vidro com uma das extremidades
bem estreita, tubo de borracha, rolhas furadas, suporte universal, garras, bico de Bnsen, trip de ferro, tela de amianto, gua,
solues de cloreto de amnio e de hidrxido de clcio.
Didatismo e Conhecimento

Questo 07) Dentro do espao disponvel, discuta o que voc


sabe sobre o ciclo do nitrognio na natureza. Sua discusso deve
incluir tpicos tais como:
21

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


a) Principais reservatrios acessveis deste elemento no nosso planeta.
b) O que se entende por fixao natural e quais os organismos responsveis pela mesma.
c) O que se entende por fixao artificial do nitrognio e
quais so os principais processos industriais utilizados para atingir
este fim.
d) Quais so os principais produtos naturais e quais so os
principais compostos sintticos utilizveis como fertilizantes nitrogenados.
e) Caso voc sabia algo sobre a relao entre mar vermelha
e ciclo do nitrognio, diga-o.

As mars vermelhas consistem na liberao de toxinas por cianofceas e dinoflagelados e podem causar a morte de peixes, outros
animais, acumular em bivalentes e at mesmo provocar no homem
a parlyticshllfish poisoning, alm de tudo, podem sair do mar na
forma de aerosois e atingir animais domsticos e o prprio homem.
RELAO COM O NITORGNIO
medida que ocorre aumento na mortandade de peixes e outros animais marinhos, ocorre uma aumento da quantidade de matria orgnica sem decomposio e tambm em aumento direto na
formao de nitritos e nitratos que so fontes de nitrognio para o
fitoplncton.

RESOLUO
a) RESERVATRIOS OU FONTES
o nitrognio atmosfrico (78% aproximadamente em volume)
- jazidas de nitratos de sdio e potssio
- compostos orgnicos de todos os seres vivos ou em cadveres
aonde so transformados por bactrias um nitritos e nitratos;
- descargas eltricas e etc.
b) FIXAO NATURAL
Bactrias : Azobacter clostridium ou nitrobactrias das leguminosas.
Algas: cianofceas estas utilizam o nitrognio atmosfrico ou
at mesmo o on fazendo a sua fixao
c- trata-se na utilizao do nitrognio elementar obtido em laboratrios ou por destilao fracionada do ar lquido:

CONCEITO DE SOLUO, SOLVENTE E


SOLUTO, MOLARIDADE;
DISPERSES E SOLUES
Disperses
Imagine a seguinte situao: necessitamos dissolver uma determinada quantidade de acar (C6H12O6) em gua (H2O).
Neste exemplo podemos definir alguns conceitos tais como:
O acar (C6H12O6) que ser dissolvido chama-se disperso, a
gua (H2O) que dissolver o acar chama-se dispersante ou dispergente e a mistura gua com acar denominada de disperso.

Laboratrio:
2 NaN3(s) Na(s) + 3 N2(g)
NH4NO2(s) N2(g) + 2 H2O(g)
Sendo que esse nitrognio utilizado em diversos segmentos:
preparo industrial da NH3
preparo industrial do HNO3
preparo industrial de fertilizantes
exemplos de fertilizantes:

Classificao das disperses


Se voc adicionar um pouco de sal a um copo de gua e agitar,
notar que o sal ir se dissolver e, a partir dessa mistura, formar
uma soluo aquosa. No entanto, se a mesma experincia for feita
com um pouco de areia fina, o resultado ser muito diferente. Como
a areia no se dissolve em gua, ir depositar-se no fundo do recipiente, logo aps o trmino da agitao. A mistura de gua e areia,
no momento da agitao, constitui um bom exemplo de suspenso.
Mesmo atravs da filtrao, seria possvel observar uma diferena
importante entre esses dois tipos de mistura: as suspenses podem
ser filtradas; as solues, no.
evidente que essa diferena de comportamento entre as solues e as suspenses se deve ao tamanho da partcula dispersa.
Enquanto que os enormes gros de areia, a maioria visveis a olho
nu, ficam presos no papel de filtro, os invisveis ons Na+ e Cl- possuem dimenses to reduzidas que atravessam facilmente os poros
do filtro. H uma ampla variedade de valores entre o dimetro mdio dos ons e das molculas comuns e o dimetro mdio de corpos
maiores como os da areia, constitudos de slica (SiO2). Em outras
palavras, as partculas dispersas num meio slido, lquido ou gasoso
possuem tamanhos muito diferentes. Para muitos pesquisadores, os
dispersos com dimetros mdios entre 1,0 nm e 1000 nm constituem fronteiras gerais para uma classificao das misturas. Assim,
partculas com dimetro inferior a 1,0 nm encontram-se em soluo.
Por outro lado, partculas com dimetro superior a 1000 nm estariam dispersas em misturas denominadas suspenses. Os cientistas
observaram que partculas com dimetro entre 1,0 nm e 1000 nm
participam de um campo muito importante, chamado de misturas
coloidais ou simplesmente colides.

NATURAIS:
O = C(NH2) ----- Uria ---------------- via excreo
NaNO3------------ Nitrato de Sdio-----Salitre do chile
Guano-------------Excreo de aves marinhas
NO-2 e NO-3----Obtidos na decomposio bacteriana de
materiais orgnicos
SINTTICOS:
O = C(NH2)--------Sntese industrial
(NH4)2SO4----------Sulfato de amnio
Ca(NO3)2-----------Nitrato de clcio
NH4NO3------------Nitrato de amnio
Alguns fosfatos inorgnicos
Organismos marinho (plncton)como dinoflagelados, algas
azuis (cianofceas) e piridneos, principalmente so capazes de
provocar uma colorao tpica que o vermelho, porm pode ser o
amarelo, castanho avermelhado o leitoso etc, na gua do mar. Tal fenmeno (florescncia) pode ser desencadeado por diversos fatores,
tais como temperatura , salinidade, luz , nutrientes, estabilidade da
coluna de gua: alguns processos oceanogrficos como mars, ventos , divergncia , convergncia, diversidade, presena de quelantes
na gua, vitaminas, substncias hmicas tambm so capazes de
desencadear estes processos.
Didatismo e Conhecimento

22

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Analisando o quadro a seguir, podemos comparar caractersticas gerais das solues, das misturas coloidais e das suspenses. Note que,
nas misturas em geral, a substncia em menor quantidade pode ser chamada de disperso, ou seja, uma substncia que se encontra espalhada,
de maneira homognea ou no, em outra substncia denominada dispersante. Nessas condies, a mistura receber o nome geral de disperso.

disperso
dimetro (d)
visibilidade
decantao
ao do filtro
exemplos

etc.)

soluo
tomos, ons, molculas
d < 1nm
no so visveis
no decanta
no separa
sal em gua

disperso coloidal
aglomerados
1nm < d < 1000nm
visvel no ultramicroscpio
decanta no ultracentrifugador
separa no ultrafiltro
gelatina em gua

Suspenso
grandes aglomerados
d>1000nm
visvel a olho nu
decantao espontnea
separa no filtro comum
gua barrenta

Classificao das solues


- De acordo com o estado fsico
Soluo slida
O solvente sempre slido e o soluto pode ser: slido, lquido ou gasoso.
Exemplos: ligas metlicas (Solda: Sn+Pb, Ouro 18K: Au+Ag e/ou Cu, Bronze: Cu+Sn, Ao: Fe+C, Lato: Cu+Zn, Amlgama: Hg+Ag,

-Soluo lquida
O solvente sempre lquido e o soluto pode ser: slido, lquido ou gasoso.
Exemplos: soro fisiolgico (gua - solvente, sal - soluto), refrigerantes (gua - solvente, gs carbnico - soluto), lcool hidratado (gua solvente, lcool - soluto)
-soluo gasosa
O solvente gasoso e o soluto gasoso.
Exemplo: ar atmosfrico filtrado
De acordo com a natureza do soluto
Soluo molecular
As partculas dispersas do soluto so molculas. A soluo molecular tambm chamada de soluo no-eletroltica.
Exemplo: gua + acar (C6H12O6).
Soluo inica
As partculas dispersas do soluto so ons ou ons e molculas (dependendo do sal ou do cido).
Exemplo: gua + sal (NaCl), gua + cido clordrico (HCl)
- De acordo com a proporo do soluto em relao ao solvente
Num determinado dia, ao receber visitas em sua casa, voc resolve preparar suco de laranja e suco de uva para servir a seus convidados. Ao
servir o suco de laranja, nota-se que algumas pessoas fazem cara feia e dizem: nossa como est forte! Enquanto que outras pessoas que beberam
suco de uva dizem: Hum, este est muito fraco!
Nestes dois casos descritos acima, podemos observar que temos dois tipos de solues: diluda e concentrada.
Diluda
Pouco soluto dissolvido em relao ao solvente (suco de uva).
Concentrada
Muito soluto dissolvido em relao ao solvente (suco de laranja).
Ao juntarmos, gradativamente, acar e gua em temperatura constante e sob agitao contnua, notamos que o slido se dissolve, at no
poder ser mais visto. Vamos acrescentando mais acar e tornando a soluo mais concentrada, at que em um dado momento, o acar no
se dissolve mais na gua, mas se deposita no fundo ou se precipita ou se deposita ou se decanta. Neste momento, dizemos que a soluo est
saturada e apresenta um corpo de fundo.
-Saturada
Soluo que contm uma quantidade mxima de soluto dissolvido no solvente numa determinada temperatura e presso.
Esta quantidade mxima de soluto dissolvido expresso atravs do coeficiente de solubilidade (CS).
Por exemplo, a 20 C, a solubilidade do KNO3 31,6 g em cada 100 g de H2O. Isto significa que podemos dissolver at 31,6 g de KNO3 a
20 C em 100 g de H2O.
Didatismo e Conhecimento

23

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


A variao de temperatura pode alterar o coeficiente de solubilidade de uma substncia. Geralmente, o aumento da temperatura
aumenta a solubilidade da maioria das substncias.

Interpretando o grfico:
na temperatura de 50C, a quantidade mxima de KNO3 que
se dissolve em 100 g de gua so 80 g. A soluo em questo
saturada;
para obtermos uma soluo saturada KNO3 a 40C, basta dissolver 60 g de KNO3 em 100 g de gua;
se resfriarmos uma soluo saturada de 50C para 40C, teremos um corpo de fundo igual a 20 g de KNO3;
200 g de gua a 40C dissolvem no mximo 120 g de KNO3.

-insaturada ou no saturada
Ocorre quando a quantidade de soluto adicionada inferior ao
coeficiente de solubilidade. Por exemplo, o coeficiente de solubilidade do KNO3 em gua a 20 C 31,6 g/100 g H2O, portanto, a
adio de qualquer quantidade de KNO3 abaixo de 31,6 g em 100 g
de gua, a 20 C, produz soluo insaturada.

Eletrlitos e solues eletrolticas.


Solues eletrolticas
So denominadas solues eletrolticas, as que conduzem energia eltrica, solues aquosas de NaCl, KI, NaOH, HCl entre outras.
Os compostos destas solues so denominados eletrlitos.
Essas solues (NaCl,KI,NaOH, HCl) so condutores de energia pelo fato de se transformarem ao serem colocadas na gua.
A Teoria da Dissociao Eletroltica do qumico sueco Arrhenius, diz respeito ao fato das transformaes poderem voltar ao estado anterior em sentido oposto, ou seja elas so consideradas reversveis, pois elas ocorrem nos dois sentidos, sendo assim equacionadas
com dupla seta, sendo uma contraria da outra.

-Supersaturada
Soluo que contm uma quantidade de soluto dissolvido superior soluo saturada por meio de uma variao de temperatura.
Por exemplo: a 40 C, a solubilidade do KNO3 61,47 g/100 g
H2O e, a 20 C, 31,6 g/100 g H2O.
As solues supersaturadas so instveis, ou seja, qualquer
perturbao no meio ir fazer com que o KNO3 precipite, tornando
o sistema heterogneo.
O processo de dissoluo: interaes soluto/solvente; efeitos
trmicos.
Solubilidade de Gases em Lquidos
Normalmente, os gases so pouco solveis nos lquidos. Dois
fatores alteram consideravelmente a solubilidade:

Observe:

Temperatura
Todo aumento de temperatura diminui a solubilidade do gs
no lquido. Por exemplo, para eliminar gases dissolvidos na gua,
feito o aquecimento por um certo perodo de tempo. Sendo assim,
a diminuio da temperatura facilita a solubilidade de um gs num
lquido.
Presso
Quando no ocorre reao do gs com o lquido, a influncia da
presso estabelecida pela lei de Henry:
Em temperatura constante, a solubilidade de um gs num lquido diretamente proporcional presso.
Por exemplo, podemos citar os refrigerantes, que apresentam
grande quantidade de CO2 dissolvido sob presso. Quando o refrigerante aberto, a presso diminui, fazendo com que o excesso de
CO2 dissolvido no refrigerante escape.

Preste ateno no resumo abaixo:


Soluo ou substncia fundida:
Contendo ons conduz eletricidade.
No contendo ons no conduz eletricidade.
Substncia inica no estado slido no conduz eletricidade.
Substncia inica no estado fundido ou dissolvida conduz eletricidade.

Curvas de Solubilidade
So diagramas que mostram a variao dos coeficientes de solubilidade das substncias em funo da temperatura.
Analisando o grfico ao lado, observamos que regies abaixo
da curva representam soluo no-saturada, sobre a curva, regio
saturada e acima da curva, desde que as quantidades permaneam
em soluo, regio supersaturada.
O grfico ao lado representa a solubilidade de vrias substncias em funo da temperatura.
Observamos que a maioria das substncias aumenta a solubilidade com o aumento da temperatura. Podemos dizer, ento, que se
trata de uma dissoluo endotrmica.Para uma substncia como
Ce2(SO4)3, a solubilidade diminui com o aumento da temperatura;
portanto, trata-se de uma dissoluo exotrmica.
O grfico do coeficiente de solubilidade em funo da temperatura utilizado principalmente para informar a solubilidade de uma
ou vrias substncias em funo da temperatura. Por exemplo:
Didatismo e Conhecimento

Substncia molecular no estado fundido ou no estado slido


no conduz eletricidade.
Substncia molecular em soluo contendo ons (cidos ionizados em gua) conduz eletricidade, no contendo ons, no conduz
eletricidade.
Concentrao de solues: em g/l, em mol/l e em percentuais.
Clculos.
Para a identificao das quantidades envolvidas na formao
(composio) de uma soluo adotaremos ndices, para maior facilidade de memorizao das relaes.
O soluto ter ndice 1; o solvente ter ndice 2 e a soluo ser
representada sem nenhum ndice.
24

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Concentrao Comum (C) (apenas a massa do soluto considerada)
Indica a relao da massa do soluto em gramas pelo volume da
soluo em litros.

-Vodka: 40% volume ou 40oGL: 100 mL da bebida possui 40%


em volume ou 40 mL de lcool etlico.
- A gua oxigenada 10 vol ou 20 vol uma soluo aquosa que,
temperatura ambiente, sofre decomposio: H2O2(aq) H2O(l) +
O2(g)
Devido a liberao do oxignio, esta soluo utilizada como
antissptico na limpeza de ferimentos, pois o oxignio liberado elimina as bactrias aerbicas, que causam o apodrecimento do tecido.

Outras unidades podem ser empregadas, tais como mg, mL, etc.

Exemplo
Calcular a concentrao em g/L de uma soluo com 40 g de
soluto em 500 cm3 de soluo.

Densidade (d)
Indica a relao da massa da soluo pelo volume por ela ocupado.

Dados:
Massa do soluto = 40 g
Volume da soluo = 500 cm3 = 0,5 L
Concentrao da soluo = ? (g/L)

Observao
No confunda Concentrao Comum (C) e densidade (d). Na
densidade leva-se em considerao as massas do soluto e do solvente.

RESOLUO
40 g de soluto ------------------ 0,5 L de soluo
X ------------------ 1,0 L de soluo
X = 80 g de soluto
Desta forma ficamos com: C = 80 g/L

Concentrao em mols por litro (mol/L) ou Molaridade


(): Quantidade, em mols, do soluto existente em 1 litro de soluo
(soluto + solvente).

QUESTES RESOLVIDAS
Questo 01) Preparou-se uma soluo dissolvendo-se 40g de
Na2SO4 em 100g de gua a uma temperatura de 60C. A seguir a soluo foi resfriada a 20C , havendo formao de um slido branco.

Ttulo
Indica a relao da massa do soluto pela massa da soluo.
Pode ser multiplicado por 100 e, assim, corresponder ao que considerado a porcentagem em massa do soluto na massa da soluo.

a) Qual o slido que se formou?


b) Qual a concentrao da soluo final (20C).

Os valores possveis para o ttulo se enquadram no seguinte intervalo: 0 T 1,0.


Como o ttulo pode assumir valores pequenos, por exemplo,
0,0045, costuma-se multiplicar o valor do Ttulo por 100 e, assim,
popularmente se referir ao Ttulo como a porcentagem em massa.
Vale lembrar que o Ttulo expressa uma relao entre massas e, portanto, adimensional, ou seja, no tem unidades, sendo expresso por
um nmero puro.

Dados: as curvas de solubilidade do Na2SO4 . 10 H2O e do


Na2SO4, no grfico abaixo; a solubilidade est indicada, nos dois
casos, em gramas de Na2SO4 / 100g de H2O.
Gab:
a) Na2SO4.10H2O
b) 0,2 g de sal/g H2O.

Exemplos
- No rtulo de um frasco de soro fisiolgico 0,9 % interpretamos da seguinte maneira: em 100 mL do soro fisiolgico temos 0,9
g de NaCl.
Didatismo e Conhecimento

Questo 02 ) O grfico a seguir expressa os coeficientes de solubilidade (Cs) do KClO3 em 100g de gua em vrias temperaturas:
25

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio

20 16 12 8 -

4 -

C s(g /1 0 0 g d e g u a )

Consideremos o seguinte sistema:

10

20

30

40

50

T (C )
Para a soluo inicial:

Calcule:
a) a percentagem do KClO3 que dissolve quando adiciona
12g de KClO3 em 100g de gua a 25C.
b) a massa de KClO3 contida em 240g de soluo a 50C.
GAB:
a) 67% aproximadamente
b) 48g de KClO3

Para a soluo final:


Como foi adicionado apenas solvente, no alteramos a quantidade de soluto (m1 = m), portanto:
C V = C V

Questo 03) Num exame laboratorial, foi recolhida uma amostra de sangue, sendo o plasma separado dos eritrcitos, ou seja , deles isolado antes que qualquer modificao fosse feita na concentrao de gs carbnico. Sabendo-se que a concentrao de CO2. Neste
plasma foi de 0,025 mol/L, essa mesma concentrao em g/L de :
Gab: C = 1,1g/L

Utilizando o ttulo, encontramos:

Questo 04) Num refrigerante do tipo cola, a anlise qumica determinou uma concentrao de ons fosfato ( PO43-) igual a
0,15 g/L. Qual a concentrao de fosfato, em moles por litro, neste
refrigerante?

Utilizando a concentrao molar:

Dados: massa atmicas relativas: P = 31; O = 16.


Gab:
C = 1,58 . 10-3mol/L
Questo 05) Determine o menor volume de soluo de cido
clordrico 0,250 molar necessrio para dissolver completamente
13,5 g de alumnio metlico granulado.

No esquecendo que V = V + V2 ou m = m + m2
Observao
Concentrar uma soluo significa aumentar a concentrao pela
retirada de solvente. O solvente retirado por meio de uma evaporao, desde que o soluto no seja voltil. As frmulas utilizadas so
as mesmas apresentadas anteriormente, apenas, ao invs de aumentar o volume final, ele deve diminuir.

RESOLUO
Al + HCl AlCl3 + 3/2H2
m=13,5g V=?
M=0,25mol/L
Clculo do nmero de mol do HCl
27g Al----------------------3mol HCl
13,5g Al-------------------- X
X=1,5mol
Clculo da concentrao molar do HCl
M= n1 /V M = 1,5 / 0,25 M = 6mol/L

QUESTES RESOLVIDAS
Questo 01) Quanto de gua deve ser acrescentado 100 mL
de lcool 96%(v) a fim de transform-lo 46%(v).

DILUIO
Diluir uma soluo consiste em adicionar uma quantidade de
solvente puro, que provoca uma mudana no volume, mudando com
isso a proporo soluto/solvente e, portanto, a concentrao da soluo se altera (diminui).
Didatismo e Conhecimento

Resoluo
1 Opo (Utilizando a frmula)
% . V = % . V 96 . 100 = 46 . V V = 208,7 mL
26

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Vgua = V - V = 208,7 mL - 100 mL Vgua = 108,7 mL

Erlenmeyer: Serve para recolher fraes de materiais destilados ou para conter misturas que sero homogeneizadas.

2 Opo (Interpretao por regra de trs)


Antes da diluio:
Vsoluo = 100 mL
%soluto = 96% (v) 96 mL
Aps a diluio
%soluto = 46% (v) 46 mL
Vsoluo = ?
100 mL de soluo 96 mL de soluto
X
46 mL de soluto
X = 208,7 mL de soluo

mL

Clculo do volume de gua acrescentado:


Vgua = Vaps a diluio - Vantes da diluio Vgua = 208,7 - 100 = 108,7

Bquer: Resistem ao aquecimento, resfriamento e ataques de


produtos qumicos, com escala de pouca preciso.

PREPARO DE SOLUES E DILUIES,


CONCEITO DE PH E TAMPO.

Inicialmente, para sua familiarizao com o preparo de solues de extrema importncia que voc conhea os principais materiais de laboratrio.
Chamarei aqui de material de laboratrio aos instrumentos e/
ou equipamentos utilizados para realizar experincias, efetuar medies, estudar substncias ou recolher dados e PREPARAR SOLUES.

Funil de vidro: Empregado para transferir lquidos e para


apoiar o papel de filtro.

Abaixo, segue uma relao de alguns destes materiais e vidrarias, com suas principais utilizaes no laboratrio qumico:
Balo de fundo chato: Para armazenar, preparar, aquecer ou
recolher solues. Podem ser de vidro transparente ou mbar.

Tubos de ensaio: Recipientes de vidro onde ocorrem reaes


e anlises. Tambm utilizados para coleta de amostras em pequena
quantidade.

Didatismo e Conhecimento

27

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Condensadores: So colunas de vidro com tamanho varivel
entre 10 cm e 1,7 metro, dentro das quais existem tubos em forma
reta, espiral ou bolas seqenciais. So utilizados em destilaes.

Basto ou baqueta: um basto macio de vidro. Serve para


agitar e facilitar as dissolues ou manter massas lquidas em constante movimento.

Balo volumtrico com sada lateral: Empregado na ebulio


de lquidos em pequenas destilaes.

Proveta ou cilindro graduado: Serve para medio precisa de


volumes maiores de lquidos.
Bico de Bunsen: Aquecedor a gs com chama de temperatura
varivel, de acordo com a regulagem.

Cadinho ou cpsula de porcelana: usada em evaporao ou


secagem e pode ser levada ao fogo sobre tela de amianto.

Bureta: Serve para determinar pequenos volumes de reagentes


com preciso. Pode ser de vidro ou de polietileno.

Suporte universal, garra e pinas de fixao: Usados para


segurar e sustentar vidrarias, como bales e condensadores, entre
outros.
Pipetas: Utilizadas para medir e transferir mnimas quantidades de lquidos com preciso. Podem ser graduadas ou volumtricas.
Existem as pipetas automticas, que no so de vidro.
Didatismo e Conhecimento

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Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio

Trip de ferro: Usado como apoio para tela de amianto e outros objetos a serem aquecidos.
Kitassato: Recipiente de vidro com paredes super-reforadas e
indicado para filtraes a vcuo.

Tela de amianto: suporte para as peas a serem aquecidas. A


funo do amianto distribuir uniformemente o calor recebido pela
chama do bico de Bunsen. H alguns anos est proibido seu uso
por ser cancergeno. Substitudos por mantas eltricas ou placas de
aquecimento, termostatizadas.
Funil de separao: Utilizado na separao de misturas de lquidos imiscveis. Tambm pode ser chamado funil de decantao
ou funil de bromo.

Estante para tubos de ensaio: utilizado para apoiar tubos


de ensaio.

Pisseta: Deve conter solventes, gua ou solues de sabes e


utilizada para efetuar lavagens de outras vidrarias.

Funil de Buchner: Usado em filtraes a vcuo, pode substituir os cadinhos de Gooch.

Didatismo e Conhecimento

29

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


rios

Preparo de solues: clculos, tcnicas e materiais necess-

c) Complete o volume do balo com gua destilada at o trao


de referncia.
d) Arrolhar o balo e agit-lo para homogeneizao.
e) Guarde a soluo em frasco rotulado(H2SO4@0,5mol/L)

Qual deve ser o procedimento, as etapas, os cuidados e os


passos para se preparar uma soluo? Voce est costumado a esta
situao? Veja que neste concurso o candidato deve ter uma certa
experiencia (ou, no mnimo, um certo conhecimento) para preparar
uma soluo.
Portanto, a seguir trarei algumas situaes para o preparo de
solues, utilizando-se solutos lquidos ou slidos.

QUESTO PROPOSTA
QUESTO 01) Preparo da soluo de NaOH. Ser considerado o preparo de 1 litro de soluo estoque a 0,15M.
RESOLUO:
-Massa de NaOH a ser pesada: M = n1
M = 0,15 M
V ( L)
V=1L
n= 0,15 mol

1 EXPERINCIA: Preparar 100mL de soluo aquosa de


NaOH de concentrao aproximadamente 0,5mol/L.
a) Pese 2g de NaOH em um bquer de 100mL
OBS. 1: A balana um aparelho delicado que deve ser manuseado com CUIDADO !

- calcular a massa de NaOH

n1 =

m1
P
M 1

m1= n1 X PM1 = 40 x 0,15 = 6g

Portanto devero ser pesadas 6g de NaOH.


Procedimento:
O hidrxido de sdio dever ser pesado em balana analtica e
pr-dissolvido em gua desionizada utilizando-se um Becker e um
basto de vidro. Em seguida dever ser transferida para um balo
volumtrico de 1 litro que ter seu volume completado com gua
deionizada. Aps a homogeneizao, a soluo dever ser transferida para um frasco de reagentes de 1 litro, devidamente etiquetado.

OBS.2: O ndice 1 se refere ao soluto, o ndice 2 se refere ao


solvente e ausncia de ndice indica dados da soluo.

PRODUTO INICO DA GUA. PH. SOLUO TAMPO

b) Acrescente ao bquer uma quantidade de gua destilada,


aproximadamente 30mL, suficiente para dissolver o soluto.
OBS.3: A dissoluo do NaOH exotrmica

pH e pOH de Solues Aquosas

c) Transfira esta soluo para um balo volumtrico de 100mL,


com auxlio de um funil. Lave o bquer e o funil, com gua destilada
e transfira as guas de lavagem tambm para o balo.

muito comum ouvirmos algum dizer que o pH da gua de


uma piscina precisa ser controlado, assim como o pH da gua de um
aqurio ou de um solo, para favorecer um determinado plantio. At
mesmo nosso sangue deve manter um pH sempre entre os valores de
7,35 e 7,45. Uma variao de 0,4 pode ser fatal! O que exatamente
o pH e o que significam seus valores?

d) Complete o volume do balo, enchendo-o com gua destilada at o trao de referncia. O balo deve ser arrolhado e agitado
para homogeneizao.

Equilbrio Inico da gua (Kw)


Considere um copo com gua. Ser que essa gua composta
apenas por molculas de H2O? No, pois como essas molculas esto em constante movimento, elas se chocam o tempo todo. Resultado: uma molcula de gua pode colidir e reagir com outra molcula
de gua! O equilbrio gerado conhecido como auto-ionizao da
gua:
A gua um eletrlito extremamente fraco, que se ioniza segundo a equao:

e) Guarde a soluo em frasco rotulado(NaOH@ 0,5mol/L).


2 EXPERINCIA: Preparar 100mL de soluo aquosa
H2SO4 ( cido sulfrico) de concentrao 0,5 mol/L
a) De acordo com a equao de molaridade, apresentada na experiencia anteior, faz-se o clculo do volume de cido a ser usado,
no se esquecendo de levar em considerao a densiddade do lquido. Determinou-se que o volume seria de 2,7 mL.
Mea 2,7mL de H2SO4 98% atravs de uma bureta (em alguns
casos pode se usar uma pipeta, mas, teremos menor preciso) contendo o referido cido, em um bquer de 100mL contendo, aproximadamente, 20mL de H2O destilada.

H3O+ + OH
H2O + H2O
Ou simplesmente: H2O
H+ + OH
Como toda ionizao, a da gua tambm atinge um equilbrio,
chamado equilbrio inico da gua. Um litro de gua a 25 C tem
massa igual a 1.000 g. Portanto, em 1 litro, temos aproximadamente
55,5 mols de gua:

b) Transfira vagarosamente o H2SO4 para um balo volumtrico


de 100mL, utilizando um funil. Lave o bquer e o funil, com gua
destilada e transfira as guas de lavagem tambm para o balo.
Didatismo e Conhecimento

30

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio

Destes 55,5 mols, constata-se experimentalmente que apenas


107 mols sofrem ionizao.
Como a gua pura neutra (j que para cada on H+, forma-se
tambm um on OH-), temos que [H+] = [OH-], a 25 C, quando [H+].
[OH-] = 1,0.10-14, temos que [H+] = [OH-] = 10-7 mol/L.
Como a concentrao molar da gua praticamente constante,
retomando a constante de equilbrio, podemos escrever:

Para Solues Bsicas

K.[H2O] = [H+].[OH-]
do que resulta uma nica constante (o produto de duas constantes), ou seja:
Kw = [H+].[OH-],
que o chamado produto inico da gua, onde o w se deve
palavra inglesa water.
O produto inico da gua, Kw, tem valor igual a 1014 a 25 C.
K
uma constante de equilbrio e como tal no afetada pela
w
variao na concentrao de H+ ou OH, mas varia com a temperatura.

Por analogia, define-se pOH como sendo o logaritmo (decimal)


do inverso da concentrao hidroxilinica:
pOH = log 1/[OH-]
Ou ainda, como sendo o cologaritmo da concentrao de OH-:
pOH = colog [OH-]
Assim:
pOH = log 1/[OH-] pOH = log 1 log [OH-]

pH e pOH
Para no se trabalhar com potncias negativas, Peter L. Srensen props uma nova escala para as medidas de acidez e basicidade
das solues, utilizando logaritmo segundo as definies:

Como log 1 = 0:
pOH = -log[OH-] ou pOH = colog [OH-]
Neste caso:

A letra p, minscula, significa potencial; portanto:


pH o potencial hidrogeninico da soluo;
pOH o potencial hidroxilinico da soluo.
Para solues cidas
Srensen definiu pH como sendo o logaritmo(decimal) do inverso da concentrao hidrogeninica:
pH = log 1/[H+]
Ou ainda, como o cologartmo da concentrao hidrogeninica:
pH = colog [H+]
Ou seja:
pH = log 1/[H+] pH = log 1 log [H+]
Como log 1 = 0:
pH = -log[H+] ou pH = colog [H+] que igual ao inverso do log.

Exemplo

Neste caso:

Exemplo
Qual o pH de uma soluo de concentrao hidrogeninica
igual a 105 ?

Didatismo e Conhecimento

Portanto, a 25C:
Lembre-se sempre que as solues podem ser:

31

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


QUESTES PROPOSTAS
Questo 01) A 25oC, adiciona-se 1mL de uma soluo aquosa 0,10mol/L em HCl a 100mL de uma soluo aquosa 1mol/L em
HCl. O pH da mistura final :
a) 0
b) 1
c) 2
d) 3
e) 4

Exemplos de clculo de pH:

RESOLUO
Soluo-I Soluo-II Soluo-Final
[H+]I =10-1mol/L [H+]II =1,0mol/L [H+]F =? mol/L
VI= 1,0mL VII= 100mL VF= 101mL
Clculo da concentrao de H+ na soluo final
([H+]I x VI ) + ( [H+]I x VII) = [H+]I x VF
(10-1mol/L x 1,0mL) + (1,0mol/L x 100mL) = 101mL x [H+]F
[H+]F = 1,0mol/L
Assim, podemos calcular o pH como sendo:
pH = -log[H] pH = - log1 pH = 0

Observao:
Os conceitos de pH e pOH indicam que em qualquer soluo
coexistem H+ e OH-. Por mais cida que seja a soluo, sempre existiro, embora em pequeno nmero, ons OH-. Nas solues bsicas
tambm estaro presentes os ons H+. As concentraes desses ons
jamais se anulam.

Questo 02) O pH do suco de um determinado limo prximo


de 2. Sendo assim, quando 100 mL desse suco so diludos com
gua para o preparo de 1 L de limonada, o pH
a) diminui de 1 unidade.
b) diminui de 10 unidades.
c) aumenta de 1 unidade.
d) aumenta de 3 unidades.
e) aumenta de 10 unidades.
Gab: C

Relao entre pH e pOH

Questo 03) O ferro um dos elementos mais abundantes na


crosta terrestre. O ons ferro-III em soluo aquosa hidrolisado de
acordo com a equao :

F e

+ 3 H 2O

(L )

F e(O H )3

(s )

+ 3 H

+
(a q )

a) Com base nesta equao , explique por que na gua do mar


(pH = 8) no h ons Fe3+(aq) presentes.
b) O que se pode dizer sobre as guas de determinados rios
que so ricos em ons Fe3+(aq)?
Gab:
a) como o pH 8 (pH bsico) h, na gua do mar uma grande
quantidade de ons hidroxila que ir consumir os ons H+(aq) presentes o que deslocar o equilbrio para a direita consumindo os ons
Fe3+(aq).
b) so gua que apresentam pH cido.

Portanto:

Escala de pH e pOH:

Questo 04) Qual das opes a seguir contm a afirmao


ERRADA a respeito do que se observa quando da adio de uma
poro de nquel metlico, pulverizado, a uma soluo aquosa, ligeiramente cida, de sulfato de cobre?
a) A mistura muda gradualmente de cor.
b) A concentrao de ons Ni2+(aq) aumenta.
c) A concentrao de ons Cu2+(aq) diminui.
d) A quantidade de nquel oxidado igual quantidade de
cobre reduzido.

A escala acima apresenta as relaes entre os valores de pH e


pOH e suas respectivas concentraes dos ons.
Didatismo e Conhecimento

3 +
(a q )

32

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


e) O pH da soluo aumenta.
RESOLUO
a) Verdadeiro, pois o cobre reduzido enquanto o nquel
oxidado.
Nio(s) + CuSO4(aq) NiSO4(aq) + Cuo
b) Verdadeiro, pois o nquel oxidado dando uma soluo
de sulfato de nquel representada no item a.
c) Verdadeiro, o on Cu2+ reduzido a cobre metlico.
d) Verdadeiro, pois os equivalentes eletroqumicos de ambos so iguais.
e) Falso, no h variao de pH quando se adiciona o nquel.
SOLUO TAMPO
Considere as seguintes situaes:
Perceba que a adio de uma pequena quantidade de um cido
forte ou de uma base forte gua pura provoca uma alterao brusca
no pH do meio (variao de 4 unidades). Verifique, tambm, que a
adio da mesma quantidade do cido ou da base soluo formada
pelo cido actico e acetato de sdio provoca uma alterao muito
pequena no pH desta soluo (variao de 0,1 unidade). A soluo
formada por cido actico e acetato de sdio recebe o nome de soluo tampo.
Portanto temos:
Soluo tampo ou soluo tamponada aquela que, ao
adicionarmos uma pequena quantidade de cido ou base, mesmo que fortes, mantm o seu pH praticamente invarivel.
provvel que a observao destes fatos levem ao seguinte
questionamento:
Como as solues tampo conseguem manter o seu pH praticamente constante?
Vamos imaginar uma soluo tampo constituda por uma base
fraca (BOH) e um sal (BA) derivado desta base.
Nesta soluo, ocorrem os seguintes fenmenos:
-Pequena dissociao da base:

(Na soluo predominam frmulas da base BOH)


-Dissociao total do sal:
BA B+ + A(Na soluo predominam ons B+ e A-)
Observao: Note que o on B+ comum base e ao sal.
Ao juntarmos a esta soluo uma base forte, esta ir liberar ons
OH-, que sero consumidos pelo equilbrio:

Como consequncia, este equilbrio desloca-se para a esquerda,


e com isso a basicidade da soluo no aumenta e o pH no sofre
variao significativa. Perceba que no ir faltar o on B+ para que
o equilbrio acima se desloque para a esquerda, uma vez que a dissociao do sal
BA B+ + A- fornece uma boa reserva deste on.
Se juntarmos soluo tampo um cido qualquer, este ir se
ionizar colocando ons H+ em soluo. Estes ons H+ sero consumidos pelos ons OH- resultantes da dissociao da base, e, desta
forma, a acidez no aumenta e o pH no muda.

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33

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


H+ + OH- H2O

Para uma soluo tampo de base fraca e um sal derivado desta


base, podemos demonstrar que:
Como pH + pOH = 14, neste caso ficamos com: pH = 14 - pOH
Com isso teremos:

Perceba que no iro faltar ons OH- para reagir com o H+ do


cido, pois a base BOH fraca, e o estoque de frmulas BOH que
continuar se dissociando e fornecendo OH- muito grande.
Desta forma, conseguimos compreender que a soluo tampo
s resistir s variaes de pH at que toda base BOH ou todo sal
BA sejam consumidos. A resistncia que uma soluo tampo oferece s variaes de pH recebe o nome de efeito tampo.
Caso a soluo tampo fosse constituda por um cido fraco e
um sal derivado deste cido, a explicao para o comportamento
desta soluo seria semelhante anterior.
Conclumos, ento, que uma soluo tampo usada sempre
que se necessita de um meio com pH praticamente constante e preparada dissolvendo-se em gua:

Aplicaes das solues tampo


-Como os microorganismos se desenvolvem melhor em determinadas faixas de pH, os meios de cultura so, geralmente, tamponados.

um cido fraco e um sal derivado deste cido;


uma base fraca e um sal derivado desta base.

clculo do pH de uma soluo tampo


Vamos supor uma soluo tampo constituda por um cido fraco (HA) e um sal (BA) derivado deste cido.
Neste caso, teremos:

-Os fluidos biolgicos so tamponados, utilizando para isso vrias substncias (cidos, bases e sais) que existem no organismo. O
sangue humano apresenta, normalmente, pH em torno de 7,4. Um
aumento ou diminuio de 4 dcimos neste valor, causa morte do
indivduo. Os sucos digestrios tambm so tamponados, pois as
enzimas que catalisam as reaes orgnicas atuam em determinadas
faixas de pH.

Deduzindo a expresso da constante do equilbrio para o cido


fraco, temos:

Como o cido fraco, a sua concentrao praticamente no varia durante a ionizao, e a quantidade de on A- produzida muito
pequena. Por outro lado, o sal se dissocia totalmente, produzindo
quase todo on A-, presente na soluo.
Portanto, a expresso da constante de equilbrio ficar:

Aplicando logaritmo aos dois membros da equao, teremos:

-Determinados medicamentos so tamponados com o objetivo de melhorar a sua atuao ou atenuar os efeitos colaterais. Um
exemplo de medicamento tamponado o Bufferin, que atua como
analgsico e antiinflamatrio. Este medicamento constitudo por
cido acetilsaliclico (AAS ou aspirina) tamponado com carbonato
de magnsio e aminoacetato de alumnio.
O pH e o Sangue
Como j dito, muitos processos qumicos dependem do controle de pH; no corpo humano no diferente. O balano entre os
cidos e as bases no organismo se caracteriza pela busca permanente
do equilbrio.

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Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


QUESTES PROPOSTAS

O grau de acidez uma importante propriedade qumica do


sangue e de outros lquidos corporais. Normalmente, o sangue discretamente alcalino, com um pH situado na faixa de 7,35 a 7,45. O
equilbrio cido-base controlado com preciso, pois, mesmo um
pequeno desvio da faixa normal, pode afetar gravemente muitos rgos.
O organismo utiliza trs mecanismos para controlar o equilbrio
cido-base do sangue:
- O mecanismo qumico: o corpo utiliza solues tampo (soluocapaz de atenuar a variao do valor do seu pH, resistindo
adio, dentro de limites, de reagentes cidos ou alcalinos) do sangue para se defender contra alteraes sbitas da acidez. O tampo
mais importante do sangue utiliza o bicarbonato (um composto
bsico) que se encontra em equilbrio com o dixido de carbono
(um composto cido). medida que mais cido ingressa na corrente sangunea, mais bicarbonato e menos dixido de carbono so
produzidos.
medida que mais base entra na corrente sangunea, mais dixido de carbono e menos bicarbonato so produzidos. Em ambos os
casos, o efeito sobre o pH minimizado.

QUESTO 01) Qual o pH de uma soluo cuja concentrao


hidrogeninica ([H+] 10-8 ?
RESOLUO:

QUESTO 02) Calcular o pH de um meio cuja concentrao


hidrogeninica 0,01 mol/L.
RESOLUO:

-O mecanismo renal: o excesso de cido excretado pelos


rins, principalmente sob a forma de amnia. Os rins possuem uma
certa capacidade de alterar a quantidade de cido ou de base que
excretada, mas, geralmente, esse processo demora vrios dias.

QUESTO 03) Qual o pH de uma soluo cuja concentrao


hidroxilinica de 0,1 mol/L?

-O mecanismo respiratrio: O terceiro mecanismo de controlo do pH do sangue envolve a excreo do dixido de carbono. O
dixido de carbono um subproduto importante do metabolismo
do oxignio e, conseqentemente, produzido constantemente pelas
clulas. O sangue transporta o dixido de carbono at os pulmes,
onde expirado. Os centros de controle respiratrio localizados no
crebro regulam a quantidade de dixido de carbono que expirado atravs do controlo da velocidade e profundidade da respirao.
Quando a respirao aumenta, a concentrao de dixido de carbono diminui e o sangue torna-se mais bsico. Quando a respirao
diminui, a concentrao de dixido de carbono aumenta e o sangue
torna-se mais cido. Atravs do ajuste da velocidade e da profundidade da respirao, os centros de controle respiratrio e os pulmes
so capazes de regular o pH sanguneo minuto a minuto.

RESOLUO:

QUESTO 04) Calcular o pH de uma soluo de cido clordrico HCl 0,1M

Uma alterao em um ou mais desses mecanismos de controlo do pH pode produzir uma das principais alteraes do equilbrio
cido-base: a acidose ou a alcalose. A acidose uma condio na
qual o sangue apresenta um excesso de cido (ou uma falta de base),
acarretando freqentemente uma reduo do pH sanguneo.

RESOLUO:

A alcalose uma condio na qual o sangue apresenta um excesso de base (ou uma falta de cido), acarretando ocasionalmente um aumento do pH sanguneo. A acidose e a alcalose no so
doenas, mas sim conseqncias de vrios distrbios. A presena
de uma acidose ou uma alcalose prov um indcio importante ao
mdico de que existe um problema metablico grave. A acidose e
a alcalose podem ser classificadas como metablicas ou respiratrias, de acordo com a sua causa primria. A acidose metablica e a
alcalose metablica so causadas por um desequilbrio na produo
e na excreo de cidos ou bases pelos rins. A acidose respiratria
e a alcalose respiratria so causadas principalmente por distrbios
pulmonares ou respiratrios.
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Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Anlise quantitativa: a anlise mais criteriosa. Alm de saber do que se trata o material ainda preciso saber a quantidade do
componente em questo dentro da amostra.
A anlise instrumental no dispensa, entretanto, o conhecimento das anlises via mida tradicionais (qualitativa e quantitativa),
nem os fundamentos bsicos da instrumentao utilizada.

QUMICA ANALTICA: QUMICA ANALTICA


QUALITATIVA E QUANTITATIVA, ANLISE
GRAVIMTICA, ANLISE VOLUMTRICA,
TRATAMENTO ESTATSTICO DE DADOS,
FUNDAMENTOS DE ESPECTROSCOPIA,
TCNICAS ESPECTROSCPICAS
(ESPECTROSCOPIA DE INFRAVEMELHO,
ABSORO ATMICA, EMISSO ATMICA,
FOTOMETRIA DE CHAMA), TCNICAS
CROMATOGRFICAS (CROMATOGRAFIA
EM CAMADA DELGADA, CROMATOGRAFIA
GASOSA, CROMATOGRAFIA LQUIDA DE
ALTA EFICINCIA), ESPECTROMETRIA DE
MASSAS;

Mtodos Convencionais de anlise qumica:


Estes mtodos no envolvem nenhum equipamento sofisticado,
utilizando apenas vidrarias e reagentes. As anlises quantitativas que
utilizam os mtodos convencionais geralmente so baseadas na:
- gravimetria, atravs de uma balana de preciso;
- volumetria, atravs de vidrarias ou recipientes cuidadosamente calibradas.
Mtodos instrumentais de anlise qumica:
Neste caso so utilizados equipamentos eletrnicos mais sofisticados. Apesar de mais utilizado em relao aos convencionais, podem ter seu uso limitado em funo dos seguintes motivos:
1. Alto custo dos equipamentos eletrnicos;
2. No existncia de um equipamento disponvel para determinada anlise;
3. Existncia de requerimento de um mtodo convencional sob
o aspecto legal, por se tratar de um mtodo oficial;
4. Em casos raros, os mtodos convencionais podem apresentar
resultados melhores que os instrumentais.

PRINCPIOS BSICOS DA ANLISE QUMICA


Este tpico eu deixei para o final. O motivo desta alterao
bem simples: o nico tpico em que voc precisar recorrer a vrios conhecimentos de graduao. o tpico que exige um prvio
conhecimento em anlises qumicas sob diversos aspectos.
Como muitos candidatos deste concurso podem no ter graduado em qumica ou farmcia, provavelmente podero desconhecer o
que ser aqui explanado de uma maneira bem superficial, pois, so
temas muito complexos e longos.

Dentre vrias tcnicas empregadas citarremos algumas. Tais


como:
- Mtodos de anlise gravimtrica
A anlise gravimtrica est baseada na medida indireta da massa de um (ou mais constituinte) de uma amostra, por medida indireta (deve-se entender: converter determinada espcie qumica em
uma forma separvel do meio em que esta se encontra, para ento
ser recolhida e, atravs de clculos estequiomtricos, determinada
a quantidade real de determinado elemento ou composto qumico,
constituinte da amostra inicial). Pode ser dividida em : precipitao
e volatilizao

Portanto, apresentarei algumas noes bsicas das principais


tcnicas analticas. Ento, vamos ao trabalho:
Anlise qumica o conjunto de tcnicas de laboratrio utilizadas na identificao das espcies qumicas envolvidas em uma reao, como tambm na quantificao dessas espcies.
As anlises qumicas podem ser realizadas de trs diferentes
formas: quantitativamente, qualitativamente ou apenas imediata.
Devido necessidade de determinao de concentraes extremamente baixas de diferentes espcies qumicas, com rapidez, a
anlise qumica encontra-se dependente da disponibilidade de equipamentos modernos o que, em muitos casos, permite a automao
das anlises. Entretanto, no se deve esquecer que, na maioria dos
casos, uma titulao ou um simples ensaio qualitativo por via mida
pode fornecer a informao procurada, e que os mtodos volumtricos e gravimtricos tradicionais continuam sendo extremamente
teis nos laboratrios de ensino, pesquisa e industrial.

Precipitao: em linhas gerais segue a seguinte ordem:


precipitao => filtrao => lavagem => aquecimento => pesagem
Inicialmente, o item em anlise encontra-se em uma forma solvel em determinado meio. Vrios ons podem ser determinados
por gravimetria, so precipitados com um reagente e pesados aps
secagem. Para ser realizada a separao, adicionado um agente
precipitante. O ons ento convertido em uma forma insolvel neste meio, de modo que: ocorre o surgimento de fases e no h perda
aprecivel por redissoluo, permitindo o recolhimento atravs de
meios filtrantes do item em anlise, sendo este reconvertido ou no
em sua forma na pesagem.

Anlise imediata: consiste em isolar as espcies que constituem o material. Esse isolamento pode ser feito manualmente. Por
exemplo, se queremos analisar uma amostra slida e esta estiver
inserida em um meio lquido, preciso retirar este slido do meio
aquoso.

- Titrimetria de complexao
Muitos ons metlicos formam complexos suficientemente
estveis. Este fato serve de base para um mtodo barato, e de comprovada eficcia na determinao de ons metlicos e de seus complexantes.

Anlise qualitativa: essa etapa identifica a composio do


material e preciso ter instrumentos apropriados para executar este
procedimento. O resultado neste caso pode ser obtido pela mistura
de outro componente mistura.
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Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Por bastante tempo a complexometria foi limitada pela baixa
estabilidade dos complexos conhecidos e pelo fato da formao de
vrios complexos ocorrer em estgios gerando complexos do tipo
MeLn (onde Me = metal, L=ligante, n = assume vrios valores, dependendo do on e dos reagentes em uso).
Isto gerava muitas discusses pois, com tantos produtos formados, as teorias criadas acabavam perdendo credibilidade devido aos
resultados diversos.
Tais limitaes somente foram superadas em 1945, quando foi
introduzido o cido etilenodiaminotetractico (EDTA), um poderoso reagente, que complexa com vrios on, incluindo metais pesados e alcalino terrosos, formando estruturas estveis do tipo 1:1.
Titulaes complexomtricas so extremamente teis para a determinao de grande nmeros de metais. Esta tcnica tem alcance
de milimoles (10-3 moles ~ 10-3 gramas) e pelo uso de agentes auxiliares e controle do pH, a seletividade necessria pode ser alcanada.

Porm, novas tcnicas instrumentais foram surgindo com a


evoluo cientfica. Surgiram tcnicas quantitativas que aplicam
conceitos diversos e normalmente instrumentos que permitem medir
uma propriedade fsico-qumica e associar esta propriedade com a
concentrao do produto a ser determinado.

A complexao uma atrao eletrosttica entre um on e um


agente quelante de modo que no h transferncia de eltrons entre
estes. Quanto s cargas, a estrutura final ter como carga a somatria
das cargas individuais de cada participante do complexo.

A razo pela qual as tcnicas instrumentais so utilizadas com


grande frequncia que so bastante rpidos e conseguem determinar quantidades muito pequenas. Entretanto, apesar de que as
tcnicas instrumentais serem de grande facilidade e preciso, no
eliminaram as tcnicas consideradas clssicas em virtude de alguns
fatores importantes , a saber:

Agente quelante: Qualquer estrutura, da qual faam parte dois


ou mais tomos possuidores de pares de eltrons no utilizados em
ligaes qumicas primrias, mas sim, usados como ims eletrostticos para se prenderem a ons metlicos.

- a aparelhagem necessria para os procedimentos clssicos


barata e comum na maioria dos laboratrios, enquanto que as tcnicas instrumentais, alm de um custo alto para sua execuo, necessitam, muitas vezes, de locais especficos para sua execuo.

Dentre os complexantes mais comuns podemos citar a gua,


responsvel (ligada ao ons cobre) pela cor azul das solues de sais
de cobre, a amnia (quando substitui a gua ao redor do cobre, produz cor azul mais intensa) e o EDTA (cido etilenodiaminotetractico (que com o cobre, rivaliza a amnia).

- qualquer tcnica instrumental, sem exceo, para que seja correta, necessita de um padro analtico com concentrao bem definida, o que s vezes no fcil nem barato para se obter.

O EDTA pode ser considerado o reagente complexomtrico


(agente quelante) padro, da a necessidade do conhecimento de sua
estrutura e suas titulaes devem ser realizadas sob pH controlado,
optando pelo menor valor possvel segundo cada complexo desejado, de modo a impedir a ionizao da molcula de EDTA e at a
competio pelos ction metlicos devido aos ons OH- (que existem em maior ou desprezvel quantidade conforme pH>7 ou pH<7).

- as tcnicas instrumentais tornam-se teis principalmente para


grandes quantidades de anlise, pois se for pouca quantidade de anlises, no se justifica, a no ser que a concentrao a ser determinada seja to baixa que as tcnicas convencionais no conseguem
detectar.
Em virtude destes fatores comum nos laboratrios encontrar
as duas tcnicas clssicas e instrumentais como sendo mutuamente
suplementares.
Existem diversas tcnicas instrumentais, sendo que neste curso
vamos apresentar as mais usuais que, na medida do possvel, iremos
correlacionar com as tcnicas clssicas.

Dependendo dos conceitos utilizados, podem ser classificadas como volumtricas, pticas, de separao e gravimtricas.
Existem, alm destas, outras tcnicas, que ainda no se classificam,
devido a sua especificidade, e que seu uso ainda muito limitado
como tcnica de uso rotineiro.
Os mtodos volumtricos instrumentais so conhecidos como
Potenciomtricos
mede-se o potencial de um eletrodo em equilbrio com o on a
ser determinado. Neste caso, pode substituir muitas anlises titrimtricas, como neutralizao ou oxido reduo

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Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Condutimtricos
- mede-se a condutividade eltrica de uma soluo.

ONDE :
B bateria de corrente contnua
R resistncia varivel
C1 celula formada pelos eletrodos e a amostra
C2- celula padro
G galvanometro
P1-p2 fio calibrado a uma resistncia conhecida
V e v valores de leitura

Os mtodos pticos instrumentais so conhecidos como


Espectrofotomtricos e Colorimtricos
mede-se a radiao luminosa, na regio do visvel, absorvida
por uma soluo.
Espectrofotometria no infravermelho
- mede-se a radiao luminosa, na regio do ultravioleta ou infravermelho, absorvida por uma soluo.

A bateria (B) envia a corrente atravs de um fio calibrado com


resistncia conhecida (P1-P2) e da resistncia varivel (R) que regulada para se obter a maior variao de potencial entre os pontos
P1 e P2, sendo que os valores V de potencial so proporcionais ao
comprimento da seo do fio ( P1-V).
O sistema entra em equilbrio quando o potencial entre as clulas C1 e C2 entram em equilibrio e a deflexo do galvanometro
passa a ser zero.
Para se realizar a leitura de potencial de uma soluo necessrio que se utilize um conjunto de eletrodos, ou seja, um para leitura
e outro para referncia. Em funo das vrias anlises foram desenvolvidos vrios eletrodos. Os eletrodos mais comuns so :
- eletrodos de referncia e eletrodo de Hidrognio
O eletrodo de Hidrognio foi o primeiro eletrodo de referncia
a ser utilizado e teve importncia fundamental no desenvolvimento
o potencial, pois todos os potenciais de eletrodo so medidos em
funo dele que foi definido como potencial zero. Em virtude de sua
dificuldade operacional hoje ele citado apenas como histrico ou
utilizado em casos muito especficos. O esquema em anexo d uma
idia de como um eletrodo de Hidrognio.

Espectroscopia de absoro atmica


- mede-se a radiao luminosa emitida por uma lmpada que
irradia o espectro do elemento a ser determinado.
Os mtodos de separao instrumentais so conhecidos como
cromatograficos e permitem separar, identificar e at quantificar os
componentes de uma mistura. Dependendo do tipo de separao utilizada, a cromatografia conhecida como de camada fina, lquida e
gasosa.
O mtodo gravimtrico instrumental mais usual a eletrogravimetria que permite a deposio de um elemento qumico
Alem destas tcnicas existem outras como ressonncia nuclear
magntica, raios-X, Radioatividade, Espectrometria de massa, mtodos cinticos, rotao ptica, mtodos trmicos entre outros.
Amostragem e abertura de amostras
A Qumica Analtica a parte da qumica que se preocupa em
reconhecer diferentes substncias e determinar seus constituintes.
Um dos objetivos a determinao de constituintes com teores
cada vez menores, diminuindo o tempo de anlises.
O resultado de uma anlise pode ser to importante e causar impacto em questes sociais como o doping de atletas, econmicas,
como aumento de custos.
Em funo da importncia do resultado analtico a amostragem
o primeiro passo e o mais importante dentro do contexto da obteno do resultado final, visto que, feita inadequadamente, a anlise
quantitativa ou qualitativa se esvazia do ponto de vista cientfico.
Como, quanto e onde amostrar, fora e dentro do laboratrio, so dvidas constantes quando se busca a confiabilidade de um resultado.
Outra questo, pouco explorada, a preservao da amostra, ou seja,
onde e como armazen-la. Existem vrias normas publicadas para
amostrar, assim como critrios de aprovao e rejeio.
Dentre as consideraes quanto ao produto a ser analisado, est
a preservao da amostra como um todo. de conhecimento geral
que a integridade de uma amostra em trnsito por longo perodo depende do sistema de preservao, principalmente quando se trata de
refrigerao, mas tambm de como a amostra ser embalada e transportada, tomando-se o cuidado de no ocorrer vazamento da mesma.

Eletrodo de prata- cloreto de prata


o eletrodo de referncia mais utilizado como eletrodo interior
de referncia em vrios eletrodos, que pelo fato de conterem o eletrodo de referncia j embutido, so chamados de combinados, bem
como utilizado como eletrodo de referncia externo. Este eletrodo
consiste de um fio de prata (Ag0) recoberto por um de seus sais insolveis, no caso o AgCl, imerso em uma soluo de cloreto de potssio de concentrao que pode variar de 0,1 N at 1 N. A equao de
equilbrio do eletrodo ser :
AgCl + e- Ag0 + Cl-

Potenciometria
Entende-se por potenciometria o conjunto de mtodos quantitativos instrumentais destinados determinao de concentraes,
mediante medidas de diferenas de potenciais entre dois eletrodos,
sendo um de referncia e outro indicador. Este ltimo forma com a
soluo em anlise, um sistema com um potencial que ser a funo da concentrao da prpria soluo. A medida das diferenas de
potencial realizada por um potencimetro que pode simplificado
pelo esquema a seguir.

Eletrodo de vidro
o eletrodo de indicador mais utilizado em determinaes do
valor de pH de uma soluo. O eletrodo de vidro constitudo esquematicamente de um bulbo de vidro fino contendo no seu interior
uma soluo de cido Clordrico de concentrao que pode variar
de 0,1 N at 1 N na qual est imerso um fio de platina e em conjunto
um eletrodo de referncia que pode ser o de calomelano ou o de
prata/cloreto de prata. O eletrodo assim montado, passa a funcionar
como um medidor da concentrao hidrogeninica.

Didatismo e Conhecimento

Eletrodo de Calomelano
o eletrodo de referncia mais utilizado e substituiu com vantagens o eletrodo de Hidrognio. O eletrodo de calomelano constitudo por uma mistura de mercrio e cloreto de mercrio I (esta mistura conhecida por calomelano) envolvida por soluo de cloreto
de potssio de concentrao que pode variar de 0,1 N at saturado. A
equao de equilbrio do eletrodo ser :
Hg2Cl2 + 2 e- 2Hg0 + 2 Cl-

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Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


A Equao de equilbrio pode ser dada, considerando como o eletrodo de referncia o de prata/cloreto de prata como
AgCl + H+ Ag0 + HCl + eAgCl + e- Ag0 + ClO esquema do eletrodo de vidro pode ser dado por :

Eletrodo de platina (Pt)


o eletrodo de indicador mais utilizado em determinaes da variao do valor do potencial de uma reao de xido reduo. O eletrodo
de platina constitudo esquematicamente de um fio de platina imerso em uma soluo que contem ons em dois nveis de oxidao. O eletrodo
passa a ter um potencial proporcional s concentraes das formas oxidada e reduzida do on na soluo em estudo. Como exemplo, no esquema, vamos considerar um eletrodo de platina para a determinao de ferro
Espectrofotometria e colorimetria
Nesta tcnica, utiliza-se a cor de uma substncia que pode ser obtida por uma reao ou ser do prprio produto. A intensidade da cor varia
segundo a concentrao do produto na soluo e comparando-se com solues de concentrao conhecida, pode-se quantificar o produto.
comum, realizarmos a colorimetria visual e muitas vezes dizemos em nosso dia a dia pela cor isto est mais concentrado e etc.
Existem no mercado colormetros de vrios tipos, desde um simples que pode ser utilizado com a luz do dia, outros que necessitam de uma
lmpada e os mais sofisticados denominados colormetro fotoeltrico, onde a luz de uma lmpada passa atravs de filtros que selecionam o
comprimento de onda da luz que atinge o produto. O espectroftometro, por sua vez diferencia-se do colormetro apenas pelo fato de que pode
emitir e selecionar radiaes na regio do ultravioleta enquanto que o colormetro utiliza apenas radiao na regio do visvel.
A principal vantagem desta tcnica que proporciona um meio simples de se quantificar pequenas quantias de um produto.
O princpio desta tcnica consiste no fato de que quando uma luz incide em um meio, uma parcela da luz incidente refletida, outra parcela
absorvida e outra transmitida.
A partir desta considerao, o estudo quantitativo da absoro da energia radiante por solues coloridas ficou conhecido como lei de
Lambert Beer.
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Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Estados energticos das espcies qumicas:
A teoria quntica, proposta por Marx Planck em 1900, procura explicar as propriedades da radiao emitida por corpos aquecidos. A teoria
foi posteriormente estendida para explicar outros processos de emisso e absoro de luz, atravs de dois postulados importantes:
- tomos, ons e molculas podem existir somente em certos estados discretos de energia. Quando uma espcie altera seu estado, absorve
ou emite uma quantidade de energia exatamente igual diferena de energia entre os estados.
- quando tomos, ons ou molculas absorvem ou emitem radiao ao efetuar uma transio de um estado de energia para outro, a radiao
de freqncia f ou de comprimento de onda est relacionada diferena de energia entre dos dois estados pela equao:

E1 = estado de energia mais elevado ou excitado


E0 = estado de energia mais baixo ou fundamental
c = velocidade da luz no vcuo
h = constante de Planck
= comprimento de onda
f = freqncia
A energia de um tomo tanto maior quanto mais distante do ncleo estiver localizada a rbita que o eltron percorre. Geralmente, para
um tomo qualquer, quando os eltrons percorrem rbitas situadas o mais prximo possvel do ncleo, a energia do tomo mnima, e o tomo
encontra-se no estado fundamental. Os estados de maior energia nos quais um ou mais eltrons percorrem rbitas mais externas, so chamados
estados excitados.
Regies do espectro
O espectro das Radiaes Eletromagnticas dividido em algumas regies, para maior convenincia de seu estudo. Essas regies foram
obtidas atravs de limites prticos adequados a mtodos experimentais de produo de deteco de radiaes. Essas regies ainda informam o
tipo e o mecanismo de interao com a matria. As regies mais importantes so mostradas abaixo.
As de maior importncia nas pesquisas e nas aplicaes prticas, em funo do comprimento de onda (propriedade que fornece uma das
principais caractersticas da onda): Raios-X (faixa de 10-1 a 10 ), ondas ultravioletas (faixa de 1 a 400 m), o espectro de luz visvel (faixa de
400 a 700 m), ondas infravermelhas (faixa de 700 m a 1 mm) e faixas de radiofreqncia que variam de 20 cm at 105 m.

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Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio

Colormetro fotoeltrico e espectrofotmetro de absoro


Neste tipo de colormetro a vista humana fica substituda por uma clula fotoeltrica. Esta clula permite a leitura precisa da intensidade de
luz absorvida. Paralelamente, com um conjunto de filtros pode-se selecionar o comprimento de onda em que se quer trabalhar. A diferena entre
o colormetro e o espectrofotometro reside exatamente no modo como a luz filtrada antes de atingir a amostra. No colormetro, normalmente,
existem trs filtros de cores azul, verde e vermelha, que so substitudos de acordo com a necessidade. Enquanto que no espectrofotmetro
existe a possibilidade de se obter uma luz bem prxima da monocromtica, podendo-se trabalhar com um comprimento de onda escolhido. O
esquema bsico destes equipamentos pode ser dado :

Onde :
1 - Espelho refletor
2 - Fonte de luz
3 - Filtro removvel no caso do colormetro
Sistema monocromtico no caso do espectrofotmetro de absoro
4 - Fenda para passagem de luz, muitos equipamentos tem meios para que o operador ajuste a abertura da fenda
5 - Clula de absoro, onde se coloca a mostra.
Didatismo e Conhecimento

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Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


A lei de Lambert- Beer
Lambert estudou a transmisso de luz por slidos homogneos.
Beer estendeu o trabalho de Lambert ao estudo de solues. Pode-se
apresentar as concluses dos dois pesquisadores na forma de uma lei
conhecida como a Lei de Lambert-Beer.
Atravs dessa lei, intensidades da radiao incidente e emergente podem ser relacionadas com as concentraes do material presente na soluo. Vamos discorrer brevemente sobre essa lei, com os
seguintes esclarecimentos:

6 - Clula fotoeltrica
7 - Galvanmetro
Para se operar com este tipo de colormetro deve-se inicialmente escolher o filtro que d a maior absorbncia para a soluo em
anlise, ou seja a melhor resposta do aparelho. No espectrofotometro visvel equivale escolher o comprimento de onda que apresenta
a maior absorbncia.
Para o espectrofotmetro, escolher o melhor comprimento de
onda significa fazer a varredura dos vrios comprimentos de onda
que o equipamento possui, afim de identificar o valor adequado.
Esta operao permite obter um grfico A = f(l) que chamado
de curva de absorbncia em funo do comprimento de onda.
Ou seja, prepara-se uma soluo do produto a ser analisade
comea-se a fazer leituras de absorbncia para cada comprimento
de onda, do menor valor para o maior, variando inicialmente de 50
em 50. Obtendo assim o comprimento de onda que fornece a maior
absoro. Depois disto, realiza-se uma nova varredura bem prxima
do valor mximo encontrado, mas deste vez, variando, o comprimento de onda de 5 em 5, para determinar com preciso o comprimento de onda que d a mxima absoro.
Os dados desta varredura podem ser colocados em um grfico,
que tem o seguinte aspecto:

1. So considerados desprezveis os efeitos de reflexo, refrao e espalhamento.

2. A radiao incidente deve ser monocromtica, isto , conter


somente um comprimento de onda. I0 e I so, respectivamente, as
intensidades da radiao incidente e transmitida pela amostra. Muitas vezes, a intensidade transmitida decai exponencialmente com o
aument o do caminho percorrido na soluo (comprimento l), e tambm com o aumento da concentrao c.
Suponha-se que uma radiao monocromtica de potncia I0
incide sobre as faces planas e paralelas de uma cubeta de espessura
b, a qual contm uma soluo de uma espcie qumica que absorve
energia radiante. Designando por I, a potncia da radiao que emerge da cubeta, sabe-se que I < I0, devido absoro da radiao pela
espcie qumica contida na soluo que preenche a cubeta.

Depois da escolha do melhor comprimento de onda, a quantificao do produto, j pode ser feita e a determinao da concentrao
de uma soluo problema feita por meio de uma curva de calibrao, onde vrias concentraes conhecidas de um determinado
produto, no comprimento de onda determinado, fornecem valores
de absorbncia. A curva de calibrao pode ser feita, para ambos os
equipamentos como A = f(C).
Podemos ver que depois do grfico construdo, obtm-se uma
reta, que apresenta um coeficiente angular (a). Para se determinar a
concentrao da amostra desconhecida, basta apenas fazer a leitura
de Ax e no grfico determinar o valor de x, no eixo da concentrao.

fcil perceber que a diminuio da potncia da radiao incidente dependente do nmero de partculas absorventes encontradas pelo feixe ao atravessar a cubeta. Isso o mesmo que dizer
que a atenuao da potncia da radiao depende da concentrao
da soluo (c) e do percurso da radiao (b) no interior da cubeta.

Onde:
c = a concentrao do material em estudo;
l= o comprimento interno do recipiente que contem a soluo;
(epsilon) absortividade ou coeficiente de absoro, um fator caracterstico da substancia absorvedor (e o solvente), que depende do comprimento de onda da radiao.
Didatismo e Conhecimento

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Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Sabe-se que sais coloridos, diludos em diferentes propores
apresentam diferentes nuances de cor. Por exemplo, o cromato de
potssio deve se apresentar semelhante figura a seguir:

Por capilaridade, o solvente sobe na placa arrastando a amostra.


Se existir produtos diferentes na amostra, eles tendem a se separar.
Com exemplo desta tcnica podemos supor que temos uma
amostra contendo os componentes A e B. Sabemos que estes componentes apresentam solubilidade diferente quando colocados em
contato com a acetona.
Aplicamos uma quantidade de amostra na placa absorvente
(meio fixo), como mostrado na figura e em seguida colocamos em
um becker ou cuba contendo a acetona e deixamos que a acetona
migre na fase absorvente por um determinado tempo , como visto
na figura a seguir

Ou seja, aumentando-se a concentrao diminui-se a intensidade de luz que atravessa o meio contendo nossa substncia de estudo.

Como os produtos A e B tm polaridade diferentes, depois do


tempo que a placa ficou no solvente podemos ter a placa com o
seguinte aspecto

De uma maneira geral, para uma soluo de dada substncia,


em um certo solvente, analisada a um certo comprimento de onda
da radiao, pode-se traar uma curva da absorbncia A em funo
da concentrao c; a partir dessa curva ser possvel determinar a
concentrao de qualquer amostra dessa soluo.
Cromatografia
A palavra cromatografia deriva do grego que significa estudo
da cor e foi criada em 1903 por Michael Tswett, que era botnico
e trabalhava no estudo de separao de cores de pigmentos. Atcnica demonstrou-se muito til que rapidamente se desenvolveu e o
nome s foi mantido por questes histricas. Atualmente a cromatografia abrange um conjunto de tcnicas que permite a separao e
identificao dos componentes de uma mistura, bem como tambm
quantificar os mesmos. A diversificao da tcnica e os conceitos
desenvolvidos se especializaram tanto que cada tcnica estudada
separadamente. As tcnicas mais comuns da cromatografia pode ser
dividida da seguinte forma, sendo que as duas ltimas so instrumentais :

Deste exemplo podemos definir uma unidade adimencional conhecida como fator de reteno (RF) que pode ser dado por
Rf(A) = DA/D e Rf (B) = DB/D

- Cromatografia em camada
- Cromatografia em coluna
- Cromatografia lquida de alta eficincia
- Cromatografia gasosa
O conceito bsico da tcnica consiste em se separar os componentes de uma amostra, permitindo que a mesma esteja em contato
com dois meios, sendo um fixo e outro mvel. A interao dos componentes da amostra com os meios (adsoro, solubilidade, polaridade) faz com que se separem.

Podemos ento elaborar uma tabela de RF para um produto em


vrios suportes e solventes.
Se no dispomos de tabela, podemos aplicar simultaneamente
um produto conhecido, com a amostra. Se tiverem o mesmo RF,
devem ser o mesmo produto.
No podemos esquecer que este processo ocorre principalmente por trs conceitos importantes que so a capilaridade, partio e
a polaridade Destes conceitos surgiu toda a tcnica cromatogrfica
existente atualmente.
Esta tcnica recebe muitos nomes como CCD cromatografia
em camada delgada ou fina que normalmente utilizada para anlise
qualitativa.
Tambm comum utilizar o nome de CCG cromatografia em
camada grossa, que utilizada para anlise quantitativa.

Cromatografia em camada delgada


Esta tcnica consiste em se preparar uma superfcie de material
absorvente, como papel, slica alumina ou celulose microcristalina.
No comercio comum existir placas prontas para a cromatografia
em camada delgada. nesta superfcie que colocamos a amostra
e em seguida, mergulhamos o extremo contendo a amostra em um
solvente.
Didatismo e Conhecimento

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Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Existe tambm a cromatografia chamada de planar, onde a mesma ocorre no plano.
Os suportes da cromatografia em camada so normalmente o
vidro, alumnio e plstico.
Os absorventes mais comuns so a slica, a celulose e a alumina
e muitas vezes podem ser usado tambm o papel.
Para se obter a cor de muitas substncias aps correr um cromatografia em camada, usa-se um reagente ou misturas de reagentes
que geram cor em contato com a substncias. Os mais comuns so o
Iodo, cido sulfrico e anisaldedo.

Onde :
Injetor onde a amostra colocada
Coluna onde ocorre a separao
Detector onde os componentes da amostras so quantificados
Registrador onde se confecciona o cromatograma
Injetor
O injetor consiste de um sistema no qual a amostra entra no
equipamento. Do modo que o mesmo foi concebido s possvel injetar amostras no estado lquido ou gasoso. Produtos slidos devem
ser inicialmente solubilizados em um solvente. No injetor, a amostra
normalmente com um solvente, aquecida e torna-se vapor.
Aqui surge o primeiro item a ser considerado no processo de
anlise por cromatografia a gs, ou seja, as propriedades da amostra
a ser analisada. As propriedades da amostra que permitem que ela
seja analisada por esta tcnica so:
A amostra deve ser homognea a amostra quando adicionada em um solvente deve formar uma soluo homognea, pois caso
contrrio a mesma no ser representativa do todo, sendo causa de
erro, pois estaremos analisando apenas a parte solvel da amostra no
solvente utilizado.
A amostra deve ter estabilidade trmica - no processo de vaporizao a amostra no pode se decompor. Se ocorrer a decomposio da amostra durante a injeo da mesma, os resultados obtidos
no sero coerentes com a amostra. Normalmente a decomposio
observada no aspecto do cromatograma obtido.
A amostra deve ser voltil no processo de vaporizao a
amostra tem que passar totalmente para o estado gasoso . Parte da
amostra no pode deixar de volatilizar, pois se isto ocorre a analise
no ser referente totalidade da amostra e sim apenas a parte dela
Os injetores devido sua importncia foram sendo adaptados evoluo tecnolgica dos equipamentos utilizados em cromatografia gasosa e atualmente existem 2 tipos de injetor denominados de direto e com divisor de amostra (split)
Os injetores diretos fazem com que a amostra introduzida, aps
a volatilizao, atinjam a coluna, sem perda de material, enquanto
que os injetores com divisor de amostra faz uma diviso no volume
injetado e somente uma pequena parte do total entra na coluna A
razo de diviso da amostra ajustada em funo do dimetro da
coluna, tipo de gs de arraste.

Cromatografia em coluna
Esta tcnica na verdade, deriva diretamente da cromatografia
em camada delgada, s que neste caso, o suporte fica em uma coluna
e a fase mvel passa atravs do suporte, arrastando a amostra. Neste
caso, o fluxo de fase mvel contnuo e a fase mvel que sai necessita avaliada para saber se algum componente da amostra j saiu e
isto normalmente realizado pela cromatografia em camada delgada. A vantagem da cromatografia em coluna que se pode trabalhar
com uma quantidade bem maior de amostra. Esta tcnica tambm
utilizada para separar produtos com solubilidade diferente.
A vantagem desta tcnica que se pode trocar a polaridade do
solvente durante a anlise. Da mesma maneira que na cromatografia
em camada delgada a separao ocorre devido a partio e solubilidade, sendo que o solvente desce por gravidade.
Cromatografia gasosa
A cromatografia gasosa pode ser definida como um mtodo fsico-qumico de separao na qual os constituintes da amostra sofrem
partio entre duas fases, sendo uma estacionria e outra mvel. Podemos ver na pratica esta definio, observando uma anlise em cromatografia em camada delgada .Podemos dizer que o que ocorre no
cromatografo a gs bem similar ao que acontece em uma analise
por cromatografia em camada delgada, guardando, logicamente as
devidas propores Podemos apresentar um esquema da separao
por cromatografia onde a amostra tem que migrar atravs da fase
estacionria. Neste processo ocorre ento a separao. O sucesso
da tcnica consiste em se escolher as fases adequadas para a efetiva
separao dos componentes da amostra.
A cromatografia gasosa apresenta exatamente os mesmos conceitos mas tem este nome porque neste caso a fase mvel sempre
um gs e a amostra tem que estar no estado gasoso. Pelo fato de
se trabalhar com gs o equipamento tem que ser mais sofisticado,
da a analise ser instrumental e o resultado fornecido ser na forma grfica. Na cromatografia gasosa o processo de separao fica
transparente ao usurio, que s avalia o resultado aps a emisso
do grfico que comumente denominado de cromatograma.
Para melhor compreenso do que ocorre no cromatgrafo, podemos utilizar o esquema a seguir, onde destacamos :

Didatismo e Conhecimento

Coluna
A coluna o elemento fundamental do processo uma vez que
responsvel pela efetiva separao dos produtos.A coluna fica em
uma estufa, cuja temperatura pode ficar constante ou ser alterada
durante a analise. Quando a temperatura permanece constante denomina-se analise isotermica e quando a temperatura varia, denomina-se com gradiente de temperatura. No mercado existem dois tipos
de colunas:
A empacotada que consiste de tubo de metal com diametro interno de aproximadamente de 0,30 cm preenchido com terra diatomacea recoberta por um produto orgnico que a fase estacionria.
A capilar que consiste de tubo de slica fundida e com um dimetro interno de aproximadamente de 10 mm. Neste caso a fase
estacionria colocada na superfcie interna do tubo . A eficincia de
uma coluna dada em nmero de pratos tericos que vem a ser um
segmento de reta na qual a amostra esta teoricamente em perfeito
equilbrio com as fases estacionria e mvel
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Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Linearidade a relao entre a concentrao da amostra e a
resposta do Detector. Ou seja, existe uma faixa de concentrao que
o Detector responde linearmente. A faixa de linearidade do Detector
dada pela razo entre a maior e menor concentrao que o equipamento linear.
Nas determinaes quantitativas, sempre construmos um grfico para avaliar se estamos dentro da faixa de linearidade do Detector
Na cromatografia gasosa, os Detectores mais comuns so :

O processo de separao dos componentes da amostra bem


complexo e existem vrios fatores para que o mesmo ocorra, entretanto podemos generalizar o processo em dois itens principais:
A polaridade da fase estacionria a fase estacionria como
um produto qumico, tem polaridade inerente a sua caracterstica
e os componentes da amostra entrando em contato com a fase estacionria pode se solubilizar mais ou menos. Podemos utilizar para
isto, o conceito de que na solubilidade o semelhante solubiliza o
semelhante. Portanto se uma determinada amostra tiver 2 compostos
com polaridade diferentes, um deles pode ter mais afinidade com a
fase estacionria ficando mais tempo dissolvido na mesma, ficando
atrasado em relao ao outro que ficou menos em contato com a fase
estacionria.

Detector por condutividade trmica - utiliza a perda de calor


para detectar a presena de um produto que sai da coluna. Ou seja,
baseia-se na propriedade de corpos quentes perderem calor com
uma velocidade que depende da condutividade trmica dos gases
que os envolve e de sua composio .O Detector de condutividade
trmica utiliza como corpo quente (sensor) filamentos de tungstnio
aquecidos por uma corrente eltrica e dispostos em oposio numa
ponte de Wheatstone. Neste tipo de detector, necessrio ter uma
coluna de referncia.
Quando o gs de arraste sai da coluna levando os componentes
da amostra passa sobre um dos filamentos enquanto que no outro
filamento continua passando o gs de arraste ( coluna de referncia
) a temperatura do filamento se altera, causando mudana em sua
resistncia eltrica.
A mudana da resistncia ento medida pela ponte de Wheatstone gerando um sinal que enviado ao registrador.O Detector
de condutividade trmica tem a propriedade de ser universal, mas
apresenta baixa sensibilidade e baixa regio de linearidade.

Ponto de ebulio considerando-se que na amostra existem


2 compostos com polaridade similar mas com pontos de ebulio
diferentes, o que tiver menor ponto de ebulio vai atingir a sada da
coluna mais rapidamente.
Na verdade ,alm das propriedades fsico-qumicas dos componentes da amostra, existem outros fatores como eficincia da coluna,
condies de temperatura da anlise e etc ,que afetam a qualidade
da separao cromatografica. Existem vrias fases estacionrias e
as colunas so denominadas com uma sigla que pode ser referente
ao composto contido na fase estacionria ou um cdigo estabelecido pelo fabricante. Para se relacionar e comparar os vrios tipos de
colunas um dos critrios a polaridade relativa, que dada pelas
constantes de Mc Reynolds

Detector de ionizao de chama - baseia-se no fato de que


partculas carregadas em um gs tm a propriedade de conduzir eletricidade e a condutividade eltrica deste gs proporcional quantidade de ons contidos no gs. O gs de arraste ao sair da coluna
entra na fonte de ionizao onde existe uma chama onde os componentes do gs so queimados. A chama encontra-se dentro de um
campo eltrico alimentado por uma fonte contnua. Quando o gs
de arraste sai da coluna levando os componentes da amostra ocorre
a queima dos mesmos e surgem radicais livres que na presena do
campo eltrico so ionizados e aumentam a corrente eltrica. A variao da corrente eltrica gera um sinal que amplificado e enviado
para o registrador. O Detector de ionizao tem a propriedade de ser
seletivo pois s identifica compostos orgnicos , mas apresenta alta
sensibilidade e alta regio de linearidade. Paralelamente no detecta
a gua.

Detector
Aps os componentes da amostra sarem da coluna, devidamente separados, os mesmos devem ser reconhecidos. Criaram-se
os equipamentos denominados de Detectores, que conseguem perceber a variao da composio do gs de arraste e transformam
esta variao em sinal eltrico. Tais equipamentos so chamados de
Detectores e fundamental que forneam respostas proporcionais
concentrao dos componentes. Foram desenvolvidos vrios tipos de Detectores e todos apresentam algumas caractersticas consideradas especficas:Seletividade, sensibilidade , resposta , rudo e
linearidade
Seletividade- os Detectores dependendo de suas caractersticas
podem ser sensvel a alguns produtos, a classes de produtos ou a
vrias classes de produtos Os Detectores so classificados quanto a
sua seletividade como :
Universal detecta qualquer produto que pode sair da coluna
cromatografica
Seletivo detecta classe de produtos
Especfico detecta apenas um produto ou grupo de produtos
Sensibilidade como os Detectores so equipamentos eletrnicos e medem a quantidade de produto que sai pela coluna por unidade de tempo. Dependendo do Detector, s acima de uma quantidade
de massa que consegue gerar um sinal que pode ser quantificado.
Resposta a resposta de um Detector est relacionada diretamente a sua sensibilidade e corresponde a quantidade de sinal eltrico relacionada com uma determinada massa de um composto

Detector por captura eletrnica - baseia-se no fato de que o


gs de arraste que sai da coluna bombardeado por partculas beta
(eltron) geradas por uma fonte de radiao. Estes eltrons so responsveis por uma corrente eltrica. Quando o gs de arraste sai da
coluna levando os componentes da amostra, e contiver molculas
que podem capturar eltrons, ocorre a diminuio desta corrente, e
que proporcional concentrao destas molculas. A variao da
corrente eltrica gera um sinal que amplificado e enviado para o
registrador. O Detector por captura eletrnica tem a propriedade de
ser seletivo pois s identifica compostos como halogenetos orgnicos, nitrilas, nitratos e organometlicos

Rudo como o Detector um equipamento eletrnico existe


um sinal eltrico associado e inerente ao equipamento que no pode
ser eliminado este sinal gerado denominado de rudo. O rudo de
um equipamento responsvel diretamente pela sensibilidade do
mesmo. Quanto maior o rudo, menor sua sensibilidade.

Detector termoinico - um tipo especfico de Detector por


ionizao onde metais alcalinos sofrem ao de um potencial eltrico, gerando um plasma. Este Detector baseia-se no fato de que o gs
de arraste que sai da coluna, aps sofrer ionizao entra em contato
com o plasma gera uma corrente eltrica.

Didatismo e Conhecimento

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Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Padronizao interna - O raciocnio o mesmo que para a padronizao externa, entretanto, tanto na amostra como nas solues
padres adiciona-se um produto com caractersticas similares da
amostra e procede- de da mesma maneira, como na padronizao
externa, mas na construo do grfico utiliza-se a relao entre a
rea do padro e a rea do padro interno.
A vantagem da tcnica por padro interno que torna-se menos
sensvel a desvio de injeo da amostra e instrumentais

Quando o gs de arraste sai da coluna levando os componentes


da amostra, e contiver tomos de nitrognio e fsforo, estes reagem
com o plasma, gerando ons negativos, ocorrendo aumento desta
corrente, e que proporcional concentrao destes ons. A variao da corrente eltrica gera um sinal que amplificado e enviado
para o registrador. O Detector termoinico tem a propriedade de ser
seletivo pois s identifica compostos de nitrognio e fsforo.
Registrador
Define-se como registrador um sistema potenciomtrico onde
o sinal enviado pelo Detector amplificado e um grfico pode ser
construdo. Este em forma de picos correspondendo cada pico a
um produto que sai da coluna. Este grfico normalmente denominado de cromatograma. Atualmente com o avano da tecnologia os
registradores esto sendo substitudos por computadores.
Do grfico pode se obter 2 informaes importantes :
- tempo de reteno : corresponde ao tempo que uma substncia gasta para percorrer desde o injetor, passando pela coluna e
ser detectado. Para cada substncia, em uma determinada coluna e
condies estabelecidas existe um tempo de reteno. O tempo de
reteno serve para se identificar componentes

Cromatografia lquida
Todos os conceitos utilizados na cromatografia a gs podem ser
transportados para a cromatografia liquida de alta eficincia, bastando ter em mente que a fase mvel agora um lquido, da o tipo de
equipamento, colunas e detectores passam a ser fisicamente diferentes, mas com o mesmo conceito bsico.
A fase mvel agora um solvente ou mistura de solventes,
passando assim, a diferena de polaridade ser muito importante no
processo de separao, j que as amostras no precisam sofrer ao
da temperatura para se separar. Em virtude disto, a cromatografia a
lquido est muito prxima da cromatografia em camada delgada,
mas com a possibilidade de poder quantificar os componentes de
um produto.
Esta tcnica muito utilizada para produtos que no podem
ser analisados por cromatografia a gs, pois sofrem decomposio
quando aquecidos, como por exemplo, vitaminas, acares e etc.

- rea do pico : relaciona-se com a concentrao do produto


que gerou o pico. E este recurso que torna a cromatografia uma
tcnica muito til para anlise de produtos qumicos

Espectroscopia de absoro atmica e espectroscopia de


emisso de chama
Quando colocamos uma soluo de um sal metlico qualquer
em uma chama ocorrem vrios processos quase que instantaneamente, sendo que primeiro ocorre a vaporao da soluo e este vapor contm tomos do metal e parte dos tomos metlicos no estado
gasoso podem ser promovidos a um nvel de energia para que ocorra
a emisso da radiao caracterstica do metal (como exemplo a chama amarela do sdio). Este processo conhecido como espectroscopia de emisso de chama ou como fotometria de chama (nome
antigamente utilizado).
Entretanto, um grande nmero de tomos do metal no sofrem
alterao no seu nvel de energia, permanecendo no estado fundamental. Mas estes tomos podem absorver energia radiante com
comprimento especfico da sua ressonncia, que normalmente a
mesma que os tomos emitem na sua emisso, quando retornam ao
estado fundamental. Ento, se tivermos uma fonte de energia radiante caracterstica de um metal e passar em uma chama contendo vapor
do metal no estado fundamental, parte desta energia ser absorvida
e a quantidade de energia absorvida ser proporcional ao nmero de
tomos no estado fundamental contidos no vapor. Este processo
conhecido como espectroscopia de absoro atmica.

Anlise Qualitativa
A cromatografia pode se utilizada como mtodo de identificao e esta feita atravs do tempo de reteno. A primeira etapa
obter o cromatograma e este fornece o que chamamos de perfil cromatografico da amostra. O perfil informa quantas substncias compem a amostra. A partir do perfil, se tivermos padres, podemos
comparar os tempos de reteno e identificar estes produtos.
Anlise quantitativa
A anlise quantitativa por cromatografia gasosa normalmente
feita por 2 mtodos, em funo da possibilidade da existncia de
padres. Quando no se tem padro, utiliza-se o processo denominado de porcentagem de rea. Onde deve-se inicialmente garantir que
todos os componentes da amostra foram detectados pelo cromatografo. Neste tipo de anlise fundamental que se saiba se a mesma
contem gua ou solventes, pois isto ir ajudar a definir condies
de anlise e tipo de Detector Depois de obter todas as reas de cada
pico, pode se calcular a somatria das mesmas e relacionar esta somatria a 100%. Logo cada pico ter sua parcela porcentual. Esta
tcnica permite fornecer uma noo da composio de uma amostra.
Quando possvel dispor de padres, utiliza-se a o processo
denominado de porcentagem em peso e consiste em comparar a rea
do pico de interesse com a rea do padro. Em funo do modo
como se trabalha a porcentagem em peso pode de denominada de
padronizao externa e de padronizao interna.

O processo de vaporizao de uma soluo contendo um metal


quando aspirado por uma chama pode ser dividido da seguinte
forma :
1 evaporao do solvente deixando um resduo slido
2 - vaporizao do slido, que inicialmente tem os tomos no
seu estado fundamental
3 - alguns tomos no estado fundamental absorvem energia pulam para um estado de energia que permite que irradiem energia a
um comprimento de onda caracterstico
4 - outros tomos no estado fundamental podem absorver energia radiante com comprimento de onda caracterstico

Padronizao externa: A primeira atitude em uma analise


quantitativa determinar a faixa de linearidade do Detector, para
a concentrao que se pretende trabalhar. Depois disto, constroi-se
uma curva de calibrao com pelo menos 3 pontos e obtm-se a
equao da reta.Com a rea da amostra podemos calcular a concentrao da mesma.
Didatismo e Conhecimento

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Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Podemos representar este processo por meio de dois desenhos,
sendo que no primeiro, apresentamos as mudanas possveis de nveis de energia de um tomo e no segundo o desenho todas as mudanas que ocorrem quando a soluo de um metal entra na chama

O primeiro item a ser considerado neste processo de anlise


exatamente as propriedades da amostra a ser analisada. As propriedades da amostra que permitem que ela seja analisada por esta
tcnica so:
A amostra deve ser homognea a amostra quando adicionada em um solvente deve formar uma soluo homognea, pois caso
contrrio a mesma no ser representativa do todo, sendo causando
erro, pois estaremos analisando apenas a parte solvel da amostra no
solvente utilizado.
A mistura do gs combustvel deve atingir a temperatura
ideal para anlise
Dependendo do gs combustivel utilizado temos valores diferente de temperatura na queima, por exemplo :
Metano-Ar 19500C
Metano-Oxignio 27500C
Hidrognio-Ar 21000C
Chama
A chama obtida pela queima da mistura do gs utilizado e
neste ponto que os tomos absorvem a energia suficiente para mudar do estado fundamental. O xito da queima vai depender de um
conjunto de fatores, como o tipo de amostra e a mistura de gases
utilzada no nebulizador e na chama. fundamental que a chama
obtida durante a queima no contenha traos de impurezas nem oscile muito sua intensidade durante a anlise. Em muitos trabalhos, o
conjunto nebulizador e chama denominado de atomizador.

Espectroscopia de emisso de chama


A fotometria de chama ou espectroscopia de emisso de chama
uma tcnica instrumental baseada em medidas da intensidade das
radiaes luminosas dos elementos qumicos quando esto sob ao
de uma chama.
A energia calorfica fornecida pela chama absorvida pela substncia e transformada em radiaes luminosas, com comprimento de
onda especfico do metal contido na substncia. A intensidade desta
radiao pode ser relacionada com a concentrao do metal contido
na soluo.
Para melhor compreenso do que ocorre no espectrofotometro
de emisso, podemos utilizar o esquema a seguir, onde destacamos :

Monocromador
Por mais cuidado que se possa ter, a chama obtida na queima
da mistura do gs e amostra, gera vrias radiaes. Para garantir
que o equipamento est analisando apenas o comprimento de onda
desejado, utiliza se um filtro que inibe a passagem de outras radiaes que no interessam e podem prejudicar a anlise. Em geral os
equipamentos j dispe de filtros prprios para os elementos mais
comuns, como sdio, potssio clcio e outros.
Detector
Para as anlises por espectroscopia de emisso de chama, o detector consiste de uma clula fotoeletrica que detecta a intensidade
de radiao, transformando a mesma em um sinal eltrico.

Caminho da amostra

Registrador
Define-se como registrador um sistema potenciometrico onde o
sinal enviado pelo detector amplificado. Neste caso o registrador
vai informar um nmero dentro de um fundo de escala pr definido.
Em funo deste tipo de resultado, a espectroscopia de emisso permite que se faa principalmente a anlise quantitativa. Em funo do
desenvolvimento tecnolgico, o registrador est sendo substitudo
pelo computador.

Nebulizador
O nebulizador ou atomizador consiste de um sistema no qual
a amostra sofre vrios tratamentos antes de ser propriamente analisada. A amostra entra no equipamento j dissolvida em um solvente apropriado (normalmente gua) e inicialmente sugada por um
sistema de bombas e misturada com ar para que se transforme em
gotculas mnimas.
Em seguida estas gotculas so misturadas a um gs combustvel (oxignio, propano, hidrognio ou mistura dos mesmos). Depois
disto a amostra est pronta para entrar na chama.
Didatismo e Conhecimento

Anlise quantitativa
A anlise quantitativa por espectroscopia de emisso s pode
ser executada em funo da possibilidade da existncia de padres.
Prepara-se ento um conjunto de solues de concentrao conhecida do metal a ser analisado e obtm-se uma curva valor lido x concentrao. Depois disto, analisa-se a amostra problema e obtm-se
a concentrao da amostra. Existe no mercado equipamentos que j
fornecem a curva e calculam diretamente a concentrao da amostra.
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Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Aplicao
Este tipo de anlise normalmente feita para se determinar
concentraes baixssimas de um determinado elemento, como por
exemplo :
Bario, Clcio, Cromo, Ferro Magnsio e Potssio quantidades
inferiores a 1 ppm
Alumnio, Cdmio, Cobalto, Chumbo Nquel - quantidades entre 1 e 10 ppm

Como corresponde absoro de radiao, podemos utilizar a


lei de Beer-Lambert e podemos dizer que A = f (C). Prepara-se ento
um conjunto de solues de concentrao conhecida do metal a ser
analisado e obtm-se uma curva valor lido x concentrao. Depois
disto, analisa-se a amostra problema e obtm-se a concentrao da
amostra
Existe no mercado equipamentos que j fornecem a curva e calculam diretamente a concentrao da amostra. A curva de calibrao
pode ser feita, como A = f(C) , gerando o seguinte tipo de grfico :

Espectroscopia de absoro atmica


A espectroscopia de absoro atomica uma tcnica instrumental baseada em medidas da intensidade das radiaes luminosas
dos elementos qumicos quando esto sob ao de uma chama e
recebem a incidncia de uma luz com comprimento de onda igual
da radiao de emisso do elemento. Neste caso, os eletrons que
esto no estado fundamental passam para nveis de energia superior.
A diferena de energia emitida e a energia recebida pela clula fotoeletrica, fornece a quantidade de energia absorvida pelos tomos.
Esta energia absorvida proporcional concentrao do metal na
soluo
Para melhor compreenso do que ocorre no espectrofotometro
de absoro, podemos utilizar o esquema a seguir, onde destacamos

Podemos ver que depois do grfico construdo, obtm-se uma


reta, que apresenta um coeficiente angular ( a ). Para se determinar a
concentrao da amostra desconhecida, basta apenas fazer a leitura
de Ax e no grfico determinar o valor de x, no eixo da concentrao.
Espectrometria de massas

Esta tcnica uma das mais modernamente empregadas,
apesar de seu conhecimento no ser to recente. Ocorre que, em
funo das dificuldades iniciais da tcnica esta no foi levada muito
a srio, pois, supunha-se ser de pouca importncia.

Porm, a tcnica passou a ter grande importancia a partir
dos anos 80. Muitos novos conhecimentos foram aplicados, novos
equipamentos foram desenvolvidos e a tcnica , atualmente, de
grande importancia e de extrema funcionalidade. Permite anlises
extremamente seletivas (pode-se se determinar em uma complexa
mistura a concentrao de um nico composto, por exemplo, em
uma centena de outros compostos).

Como existem muitas variveis da tcnica iremos trabalhar com as mais empregadas para a maioria dos compostos, objetivando apenas dar uma ideia a quem nunca teve contato com esta
brilhante tcnica.

O assunto muito complexo. Para os que o desconhecem
ficar uma dificuldade adicional. Para os que j tiveram alguma disciplina na graduao que envolvia tal tcnica, menores as dificuldades de se conhecer o bsico.

Esta tcnica tem uma grande desvantagem: o custo. Os
espectrometros custam de R$ 300.000,00 (os mais simples) a R$
1.200.000,00. O valor mdio para uso industrial gira por volta de
uns R$ 500.000,00. Os valores dependem das formas de ionizao,
dos detectores, dos analisadores de massas, entre outros.

A manuteno do aparelho tambm um aspecto a ser
considerado devido aos elevados cuustos. Alm do espao fsico necessrio para a instalao destes

Nas instituies pblicas comum a presena de espectrmetros de toda natureza. Porm, em instituies particulares estes
so mais raros.

Trabalhei com espectro de massas em laboratrio na Faculdade de Qumica da USP-RP, onde fiz curso de ps-graduao e,
em um concurso pblico para contratao de um analista cientfico
entre 55 candidatos (todos mais novos que eu e vrios deles j trabalhando com a tcnica ou tendo cursado a tcnica) fui o 5 classificado. Lembrando que a segunda fase do concurso era estritamente
sobre questes prticas (e eu nunca havia colocado as mos em um
equipamento, mas tive que fazer 4 questes prticas...e acertei 3. A
questo que eu errei me custou a classificao).

Depois de algum tempo no meu projeto de ps-doutoramento eu tive um contato maior com a tcnica.

Desenvolvi, sob superviso de um professor da mesma
instituio, uma parceria Industria-Universidade, onde tive a oportunidade de trabalhar com alguns espectrometros.

Caminho da amostra

O esquema a seguir mostra de outra maneira o espectrofotometro de absoro atmica

Os componentes do equipamento para absoro atmica so


basicamente os mesmos que os equipamentos de emisso de chama,
com exceo do acrscimo de uma fonte de radiao (normalmente
lmpada de ctodo oco).
Anlise quantitativa
A anlise quantitativa por espectroscopia de absoro s pode
ser executada em funo da possibilidade da existncia de padres.
Didatismo e Conhecimento

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Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio



Tive a grande felicidade de poder fazer algumas anlises
no Laboratrio ThoMSon, na Unicamp, ao utilizar um espectrometro que mais apropriado a macromolculas, protenas, polmeros.
Tal espectrometro denominado de MALDI, que na verdade, o
tipo de tcnica e no o nome do aparrelho. Este laboratrio uma
referncia nacional. Provavelmente o de maior expresso no Brasil,
na Amrica Latina e um dos mais respeitados internacionalmente.

No sei se servir de consolo, mas quem conhece a tcnica
uma grande MINORIA de candidatos, a meu ver. Pois, normalmente poucos graduandos no Brasil tiveram a possibilidade de tocar
um destes aparelhos.

Em alguns casos que estudaremos neste material colocarei um tipo de resumo (que visa dar uma idia inicial ao candidato
com poucas referncias) e um tipo de aprofundamento (com uma
linguagem mais tcnica, para o candidato com maior conhecimento
da tcnica).

- A amostra ento ionizada;


- Os ons formados podem ser positivos ou negativos;
- Fragmentos neutros no so detectados;
- Os ons so ento separados de acordo com sua razo m/z;
m = massa; z = carga
- Os ons so, ento, detectados.
Histrico
J. J. Thomson em 1910 foi o primeiro cientista a separar os tomos e molculas de um gs, de acordo com suas massas, usando o
hoje conhecido mtodo de Thomson para anlise de raios positivos.
Por esse meio, J. J. Thomson foi capaz de mostrar que o elemento
nenio apresentava dois tipos de tomos, alguns com peso relativo
20 e outros com peso 22.
Em 1919, Aston aperfeioou o aparelho de Thomson e produziu
um novo tipo de aparelho de raios positivos, no qual se alcanava
maior separao de ons de diferentes massas, cada uma, correspondendo a um nmero definido de ons, com mesma razo carga/
massa, e por mostrar um espectro de linhas foi chamado de espectrgrafo de massas. Esse aparelho destinava-se a determinaes de
massas atmicas.
Na poca do desenvolvimento do espectrgrafo de massas por
Aston, Dempster construiu um instrumento, basicamente mais simples e apropriado para medidas quantitativas de istopos, apesar
de no poder ser usado para fazer medidas de massas atmicas. O
aparelho de Dempester foi chamado de espectrmetro de massas
(Mass Spectrometer-MS), uma vez que a corrente de ons era medida eletronicamente e no registrada numa chapa fotogrfica como
no de Aston.
A partir do final do primeiro quarto do sculo vinte os espectros
de massas dos elementos foram investigados em detalhes e, como
conseqncia, foram determinadas a composio e as abundncias
dos istopos dos elementos de ocorrncia natural.

Para situar o concursando vou fazer um breve resumo em


tpicos:
O que Espectrometria de Massas?
- Uma poderosa tcnica analtica que possibilita:
Medir massa molecular de compostos
Identificar compostos desconhecidos
Quantificar compostos
Revelar a estrutura de molculas
Determinar modificaes ps traducionais em protenas
Alguns Usos:
- Monitorar pacientes durante uma cirurgia;
- Determinar a composio de espcies encontradas no espao;
- Localizar depsitos de petrleo;
- Monitorar processos de fermentao;
- Deteco de dioxinas em peixes;
- Determinar danos em genes;
- Estabelecer composio elementar de material semi condutor.
- Detectar e identificar o uso de esterides e outras drogas em
atletas
- Anlises judiciais (abuso de drogas)
- Determinar como as drogas so usadas pelo corpo
- Anlise de Biomolculas
- Verificar adulterao de alimentos e bebidas (mel, vinho, vinagre, cerveja e outros)
- Monitorar processos de fermentao em indstrias biotecnolgicas
- Seqnciar biopolmeros
- Identificar a estrutura de biomolculas
- determinar resduos de drogas em alimentos animais, etc

Espectometria de massas
A espectrometria de massas uma poderosa ferramenta que
foi usada, no princpio, na determinao de massas atmicas e, vem
sendo empregada, na atualidade, na busca de informaes sobre a
estrutura de compostos orgnicos, na anlise de misturas orgnicas
complexas, na anlise elementar e na determinao da composio
isotpica dos elementos. Trata-se do mtodo mais usado para essa
ltima finalidade.
A espectrometria de massas utiliza o movimento de ons em
campos eltricos e magnticos para classific-los de acordo com sua
relao massa -carga. Desta maneira, a espectrometria de massas
uma tcnica analtica por meio da qual as substncias qumicas se
identificam, separando os ons gasosos em campos eltricos e magnticos. Os instrumentos usados nestes estudos chamam-se espectrmetros de massas, sob o princpio que os ons podem ser desviados a campos eltricos e magnticos. O dispositivo que realiza esta
operao e utiliza meios eltricos para detectar os ons classificados
conhecido como espectrmetro de massas.
A MS oferece informao qualitativa e quantitativa sobre a
composio atmica e molecular de materiais

Por que espectrometria de massas?


- Informao de massa molecular, com altssima preciso
- Identificao de protenas usando massa molecular de peptdeos trpticos
- Informao Estrutural
- Sequenciamento de peptdeos
- Identificar modificaes ps-traducionais (fosforilao, glicosilao e pontes de sulfeto)

Espectrmetro de massas
O espectrmetro de massas um instrumento que separa ons,
positivos ou negativos, produzidos a partir de tomos ou molculas,
quer sejam das mais simples s mais complexas, de acordo com a
razo massa/carga (q/m).

Como um espectrmetro de massas trabalha?


- Uma pequena quantidade de amostra vaporizada e injetada
no espectrmetro de massa;
Didatismo e Conhecimento

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Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Espectometria de massas - Instrumental
Os espectrmetros de massas constam de quatro partes bsicas:
um sistema de manipulao para introduzir a amostra desconhecida
no equipamento; uma fonte de on, na qual produzido um feixe de
partculas proveniente da amostra; um analisador que separa partculas de acordo com a massa; um detector, no qual os ons separados
so recolhidos e caracterizados.

Os mtodos mais utilizados em espectrometria de massas so:


Ionizao por eltrons ou impacto de eltrons (EI); Ionizao Qumica (CI); Ionizao por radiao laser; Ionizao por campo eltrico; Ionizao de superfcie; Ionizao por electrospray. Nesta explanao ser dada nfase aos dois mtodos mais utilizados que so
impacto de eltrons (EI) e ionizao qumica (CI).
Ionizao qumica (CI)
Resumo:
Na ionizao qumica, uma pequena quantidade de tomos gasosos ionizada por coliso com tomos produzidos pelo bombardeamento do gs reativo. Alguns dos gases reativos mais comuns
so metano, oxignio, amnia e hidrognio.
Aprofundando:
Um modo alternativo de ionizao a ionizao qumica (CI).
Alguns equipamentos, que contm um cromatgrafo acoplado, permitem atravs de um chaveamento automtico a obteno do espectro por impacto eletrnico (EI) e a ionizao qumica (CI). O mtodo da CI envolve a mistura da amostra (~10- 4Torr) com um gs
reagente em alta presso (1Torr) na fonte de formao dos ons. Os
gases reagentes, comumente usados, so: metano, isobutano e amnia. A mistura resultante submetida ao bombardeio eletrnico ioniza, inicialmente, algumas molculas do gs reagente. Deste modo,
usando o gs metano as espcies esperadas so, CH4 +. e CH3+.

O espectrmetro requer um percurso de coliso livre para os


ons e, por tanto, funciona a vcuo ou em condies quase a vcuo.
O sistema de entrada da amostra est desenhado para uma mnima
perda de vcuo. A fonte de on cria fragmentos de on gasosos da
amostra. Existem dois tipos de fontes de on: Fontes de fase de gs
e fontes de desoro.

Em alta presso, colises destas espcies e reaes on-molcula com o prprio gs reagente so comuns, levando a formao
de ons secundrios, com um pequeno excesso de energia interna:
CH3+ + CH4 ==> C2H5+ + H2 Estes ons secundrios, eventualmente, colidem com molculas da amostra, resultando na ionizao qumica das ltimas. A ionizao qumica , comumente, devido
protonao, especialmente para compostos bsicos:
M + CH5+ ==> ( M + 1 )+ + CH4
Os ons, quase-moleculares, so espcies com eltrons pares
que tendem a ser mais estveis do que os ons moleculares produzidos por EI. A combinao da energia mais baixa no processo de
ionizao, com esta maior estabilidade, indica que os ons quase-moleculares so, geralmente, pouco abundantes no espectro.
A quantidade da fragmentao pode ser mudada pela natureza
do gs reagente. Em geral, tanto as faixas dos compostos protonados e o grau de fragmentao observado decrescem quando o gs
reagente mudado na ordem: metano > isobutano > amnia. Por
exemplo, a amnia protonar fracamente molculas bsicas tais
como alcois e aminas.

Alguns termos importantes para a espectrometria.


Resoluo define-se com a habilidade do aparelho para separar feixes de ons que diferem na razo m/q , sendo dada pela razo
m/Dm, significando m: a massa nominal de uma feixe particular do
espectro de massas e Dm: a diferena nas massas ou nmeros de
massas dos feixes de ons que resultar em um vale de 10 a 50 %
entre m e m+Dm.
Preciso refere-se a reprodutibilidade de uma medida de
abundncia ou de razo isotpica.
Exatido - avalia-se por comparao com um padro.
Sensibilidade define-se como o mnimo de amostra requerida
para uma anlise, com uma certa preciso.

Ionizao por impacto de eltrons


Resumo:
O impacto eletrnico o mtodo de ionizao mais usado. Utiliza-se um fecho gerado pela lmpada de tungstnio ou de filamento
rnio para ionizar os tomos de fase de gs ou molculas. Formam-se ons durante a coliso do feixe com as molculas da amostra.
M + e- -> M+. + 2eAqui M representa a molcula do analito e M+ seu on molecular. Os ons positivos so acelerados por um campo eltrico e
transportados ao campo magntico. Ao mudar a voltagem de acelerao, ou seja, a velocidade da partcula ou a fora do campo
magntico, os ons de diferentes propores massa-carga podem ser
recolhidos e medidos.

Fontes de fase de gs
Nas fontes de fase de gs, a amostra volatilizada antes de ionizar os componentes gasosos . A amostra se vaporiza fora da fonte
de energia. Os exemplos deste mtodo com a ionizao qumica,
ionizao por impacto de eltrons e ionizao por campo.
Tcnicas de Ionizao
Existem diferentes mtodos importantes para a preparao de
ons gasosos No trataremos de todas as formas neste nosso estudo.
A produo de ons nos espectrmetros de massas envolve vrios fatores. Certos tipos de anlises necessitam de ons em profuso
e outros de seletividade. H casos em que a energia com que se forma o on muito importante.
Didatismo e Conhecimento

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Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Aprofundando:
Quando uma corrente aplicada a um filamento, o filamento
aquecido resistivamente at a incandescncia, emitindo vrios eltrons simultaneamente. Placas colimadoras so empregadas para o
controle do feixe de eltrons emitidos. Um potencial de aproximadente 70 V mantido entre o filamento e a placa de tal forma que os
eltrons sejam acelerados para longe do filamento e passem atravs
das placas colimadoras com uma energia mdia de 70eV.
O valor de 70 eV comum porque a probabilidade de ionizao para a maioria dos compostos orgnicos maximizada prximo
deste valor.
As placas colimadoras levam os eltrons energticos a colidirem com as molculas do gs. Utilizando o nitrognio como exemplo, o impacto do eltron primrio, ep-, sobre a molcula de N2 faz
com que a molcula em seu estado fundamental seja promovida a
energias maiores escapando do poo de potencial da molcula neutra. Um eltron secundrio, es-, liberado pela molcula de nitrognio, segundo a equao.
O ction de nitrognio excitado (N2 +.), tem uma energia no estado fundamental de 15,6 eV acima da molcula original de N2, pois
a energia de ionizao EI (N2) de 15,6 eV. A coliso pode resultar
na formao de N2+ excitado com energias mais altas. Quando o
excesso de energia eletrnico, a energia pode ser liberada na forma
de um fton com energia especfica, permitindo que on N2+ volte ao
seu estado fundamental (X).
O impacto do eltron primrio pode tambm aumentar a energia vibracional do ction resultante e este aumento na energia vibracional tem um importante papel na espectrometria de massas. Na
medida em que a razo de vibrao e alongamento aumenta, a probabilidade de rompimento da ligao tambm aumenta. A ruptura da
ligao resulta na fragmentao do on-pai.

Um emissor de campo consiste em um cabo coberto por partculas de carbono microscpicas, as quais, geralmente, amplificam o
campo efetivo dos pontos de carbono. A amostra gasosa no sistema
de entrada passa rea de campo alto ao redor dos microtips do
emissor. Os eltrons do analito so extrados pelos microtips e h
pouca ou nenhuma fragmentao de ons.
Fontes de Desoro
Nas fontes de desoro os ons se formam na fase condensada. Uma grande vantagem da ionizao por desoro que permite
a anlise de molculas no volteis e termicamente instveis. Dois
exemplos de fontes de desoro so desoro por campo e bombardeamento de tomos acelerados.
Desoro por campo
A desoro por campo uma tcnica valiosa para o estudo de
fenmenos como espcies de desoro e os resultados de reaes
qumicas em superfcies. Tambm um mtodo til para as molculas polares lipoflicas. Na desoro por campo utiliza-se um emissor
de multitips similar ao que se usa na ionizao por campo. O eletrodo montado sobre uma sonda que pode ser removida do compartimento da amostra e recoberta com uma soluo da amostra. A
ionizao realizada aplicando alta potncia ao eletrodo. s vezes
necessrio aquecer o emissor com corrente eltrica.
Bombardeamento de tomos rpidos
Durante o bombardeamento de tomos rpidos um feixe de
energia alta de tomos neutros, comumente xennio ou argnio,
uma amostra slida provoca desoro e ionizao. Esta tcnica
usada para molculas biolgicas grandes que so difceis de penetrar
na fase de gs. O feixe atmico produzido acelerando os ons a
partir de uma fonte e atravs de uma cela de carga. Os ons levantam
um eltron em coliso com tomos neutros para formar um raio de
tomos de alta energia.

O padro de fragmentao depende da composio do on-pai,


e o exame do padro de fragmentao leva a uma compreenso da
estrutura e composio do on-pai. Para o nitrognio a nica fragmentao possvel o on N+.

Analisadores de massa
O objetivo do analisador de massas separar os ons que so
produzidos na fonte de acordo com as diferentes relaes de massa-carga. Os design de analisador mais comuns incluem os analisadores de quadrupolo, de setor magntico e analisadores de massa por
tempo de vo.
- Quadrupolo
Resumo:
Um campo quadrupolo formado por quatro rolos paralelos aos
quais aplica-se uma corrente contnua que afeta o percurso dos ons
viajando pelo trajeto centralizado entre os 4 rolos. Para as voltagens
dadas, somente os ons de uma relao massa- carga determinada
podem passar atravs do filtro do quadrupolo, enquanto os outros
so varridos como molculas descarregadas. Ao variar os sinais eltricos a um quadrupolo, pode-se variar a faixa da relao massa-carga transmitida. Isto possibilita a varredura espectral.

Esquema de fonte de ionizao eletrnica


Ionizao por campo
As molculas podem perder um eltron quando colocadas num
campo eltrico muito alto. Os campos altos podem ser criados em
uma fonte de on aplicando alta voltagem entre o ctodo e o nodo,
o que se chama emissor de campo.
Didatismo e Conhecimento

51

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


- Analisador de setor magntico
Resumo
O analisador de setor magntico emprega um campo magntico
que faz com que os ons viajem em um percurso circular de 189, 90
ou 60 graus. Inicialmente os ons so acelerados atravs da fenda B
no tubo de metal do analisador. Os ons de diferentes massas podem
ser varridos atravs da fenda de sada variando a fora do campo do
magneto ou o potencial de acelerao entre as fendas A e B. Os ons
que passam atravs da fenda de sada caem em um eletrodo coletor,
resultando na corrente que depois ser amplificada e registrada.

Foto mostrando sistema GC/MS (cortesia PerkinElmer) Um


analisador de massa tipo quadrupolo consiste de quatro barras hiperblicas e circulares.

- Analisador de massa por tempo de vo


Um espectrmetro de massa por tempo de vo usa as diferenas
de tempo que levam os ons gerados e acelerados para chegar a um
eletrodo coletor. Os ons da fonte so acelerados por um pulso de
campo eltrico. As partculas aceleradas passam atravs de um tubo
de vo de um metro de comprimento.

Aprofundando
Analisador de massa tipo quadrupolo.
Cada par de barras opostas so conectadas eletricamente e fornecidas voltagens de mesma magnitude porm de polaridades diferentes. A voltagem aplicada em cada par consiste de uma corrente
contnua (C), U, e uma componente de radiofreqncia (rf), Vcos t.
Valores tpicos so varias centenas de volts para U, vrios milhares
de volts para V, e megahertz para . Uma vez que o potencial total de
cada barra +(U + Vcos t) ou ( U + Vcos t), o campo radiofreqncia alterna a polaridade da barra.
Os ons so acelerados ao longo do eixo z (~5 a 10eV) antes
de entrar no espao entre as barras do quadrupolo onde eles experimentam um campo combinado resultante do potencial das barras. O
ction induzido para o plo negativo e vice-versa; se o potencial
muda de sinal antes da descarga do on, o on muda de direo oscilando atravs das barras. O on ir passar com sucesso atravs das
barras ou ser descartado em funo da C e rf voltagem aplicada,
como mostrado na figura abaixo para ons de trs diferentes massas.

O princpio essencial da espectrometria de massa por tempo de


vo baseia-se em que todos os ons so acelerados com a mesma
energia. Suas velocidades so inversamente proporcionais s razes
quadradas de suas massas. Os ons mais leves de alta velocidade
chegam ao detector antes do que os ons mais pesados de baixa velocidade.

Na figura, o on de massa m2 tem uma trajetria estvel (podem


passar atravs do quadrupolo) em valores U e V situado dentro da
curva ponteada.

Sistema de recolhimento de ons


O sistema de recolhimento de ons mede a abundncia relativa de fragmentos de cada massa. Diferentes tipos de detectores so
disponveis para espectrmetros de massas. O detector usado para
a maioria dos experimentos de rotina o multiplicador de eltrons.
Outro tipo de detector o de placas fotogrficas revestidas com
emulso de brometo de prata, o qual sensvel aos ons energticos. Uma placa fotogrfica pode dar uma resoluo mais alta que o
detector eltrico.
Detectores de Massa
Os ons com trajetrias estveis que saem do filtro de massas
quadrupolar so detectados de duas formas: usando um Copo de Faraday (CF) ou um Multiplicador de Eltrons (ME). O CF o detector mais simples. Os ons positivos que saem do espectrmetro de
massas entram no copo metlico que esta aterrado. Quando os ons
se chocam com as paredes do copo, os mesmos so neutralizados,
absorvendo um eltron do copo metlico, a perda de um eltron do
copo metlico medida por um ampermetro interposto entre o copo

Diagramas superpostos de estabilidade U por V para ons em


ordem crescente de razo massa/carga. Rampeando os potenciais
de DC e RF apropriadamente, somente os picos de cada diagrama
individual sero interceptadas. Portanto, os ons sero emitidos seletivamente do filtro de massas quadrupolar sendo os ons mais leves
primeiramente emitidos.

Didatismo e Conhecimento

52

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


e o terra. Portanto, quanto maior o nmero de ons que entram no
copo, maior a corrente detectada. Uma das melhores caractersticas
do CF a de que todos os ons so detectados com a mesma eficincia, de acordo com suas massas. No entanto, o CF e limitado a
baixas presses e se torna impraticvel abaixo de 10-9 Torr.
A baixas presses, inferior a 10-9 Torr, o ME e um detector
bastante preciso. O ME tem formato de cone e os ons entram na
boca do cone. A boca do cone fortemente negativa, relativamente
ao fundo do cone, de tal forma que ons positivos so acelerados em
direo a superfcie do cone. Na medida em que atingem a cone, as
ons de velocidade alta ejetam eltrons da superfcie do cone.

Representao ilustrada de um espectrmetro de massas acoplado a um CG.

Multiplicadora de Eltrons (ME).


ons positivos atingem o interior do cone, prximo da boca do
multiplicador de eltrons, liberando eltrons que so acelerados na
direo do fim do cone devido a um gradiente negativo no cone. Os
eltrons se chocam repetidamente com a superfcie interna do cone,
causando a emisso de mais eltrons. Esta multiplicao de eltrons
causa a emisso de uma cascata de eltrons no final do cone. Os
eltrons atingem o detector de tal forma que a corrente eletrnica
proporcional a corrente de ons que penetram a boca do cone.

Espectrmetro de massas acoplado a um cromatgrafo (Agilent).

Estes eltrons secundrios so acelerados em direo ao fim


do cone, se chocando com a superfcie do mesmo repetidamente e
causando a liberao de mais eltrons da superfcie do cone. Esta
multiplicao do nmero de eltrons causa a emisso de uma cascata de eltrons no fim do cone. O gradiente no cone e ajustado de
tal forma a manter um mnimo de 105 eltrons emitidos no fim do
cone para cada on que entra, no entanto a cone pode liberar ate 108
eltrons por on. A corrente eletrnica amplificada para produzir
uma corrente eltrica ou sinal inico que proporcional corrente
inica incidente no detector.
Uma vez que as potenciais DC e RF so rampeados a uma razo
constante, o grfico da variao temporal da intensidade do sinal de
CF ou ME produz um espectro de massas para as razes massa/ carga do intervalo de varredura. Cada pico obtido pode ser relacionado
a uma correspondente razo massa/ carga. Esta converso do eixo
x de tempo para razo massa/carga s vlida na medida em que
a razo de rampeamento de U e V sejam conhecidas e possam ser
referenciadas ao correspondente diagrama de estabilidade.

Foto ampliada de uma fonte de ons para a tcnica impacto de


eltrons (Agilent).
Uma das etapas mais interessantes, apesar de difcil no incio
(e muitas vezes at mesmo para quem tem certa experiencia) a
anlise dos espctros obtidos em uma anlise. Existem muitas etapas
a serem avaliadas, buscando determinar composio, estrutura, perdas lgicas, etc.
Vamos ver algumas destas situaes na sequencia.
Anlise dos espectrogramas.
O espectro de ons totais e o espectro de massas

Algumas imagens de espectrometros de massas, acoplados


cromatografia

Iremos abordar algumas tcnicas para a interpretao de espectros de massa. Atravs de alguns passos iremos identificar alguns
compostos, de uma forma exemplificativa. Porm existem outros
mecanismos de fragmentao que no sero abordados.
Identificar uma molcula simples a partir de um espectro de
massa obtido atravs do impacto eletrnico (EI) muito mais simples que outros tipos de espectro. O espectro de massas mostra a
massa da molcula em seus vrios cacos, aps ser quebrada.

Didatismo e Conhecimento

53

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


-Buscar a determinao de on Molecular
O on molecular fornece a mais valiosa informao no espectro de massa; sua massa e composio elementar mostra os limites
da molcula no qual os fragmentos indicados no espectro de massa
devem ser explicados.
Dicas:
- Uma molcula com nmero mpar de tomos de nitrognio
ter peso molecular mpar. ons nos quais resultam de uma fragmentao simples tm massas pares.
- Molculas com nmero par de tomos de nitrognio (0 um
nmero par) tm peso molecular par.
- ons nos quais resultam de fragmentao simples tm massa
mpar.

importante que se conhea alguns conceitos bsicos de qumica para iniciarmos o estudo. Inicialmente vamos ver a aparncia
de um espectro de massas e entender como um espectro gerado a
partir de um cromatograma.
Veja um exemplo abaixo:

- Perdas Lgicas de fragmentos


Somente um nmero limitado de fragmentos neutros de baixa
massa que so perdidos na decomposio do on molecular. Estes
fragmentos resultam da quebra de ligaes simples.
Os fragmentos mais comuns so:
- Perdas lgicas de molculas
As perdas de molculas neutras resultam em fragmentos no espectro de massas no qual o on tem um nmero de eltrons mpar. A
perda de uma molcula neutra pode somente ocorrer atravs de uma
combinao intramolecular do tomo via mecanismo de transferncia e eliminao. Isto menos comum de ocorrer do que nos
processos de fragmentao de ligaes simples. A perda de molcula neutra a partir de um on molecular par, normalmente resulta em
fragmento de massa par no espectro de massas.

Como pode ser observado na figura, considerando que temos


acoplado ao espectrmetro de massas um cromatgrafo, uma amostra foi injetada e aps aproximadamente 5 minutos, notamos 5 picos
formados a partir da soma das abundncias dos fragmentos ionizados das molculas de cada scan.
A palavra scan traduzida indica varredura, ou seja, em intervalos de tempo pre-programados o detector de massas varre uma
faixa de massas que pode variar de acordo com o interesse do estudo
(ex. de 10 a 400 u).
O intervalo de tempo para cada scan pode atingir at 7 scans/
segundo dependendo das condies de interesse do mtodo analtico. No quadro abaixo, visualizamos o que chamamos de espectro
de massas, onde o primeiro composto apresenta fragmentos de 25
a 200 u.
Este scan compreende ao instante em que a abundncia de ons
mais intensa, ou seja, na altura mxima do pico. Portanto, cada
pico corresponde a um composto distinto, previamente separado na
coluna cromatogrfica.

Um nmero de grupos orgnicos funcionais produz fragmentos


especficos. A observao destes detalhes poder ser til na identificao dos possveis grupos funcionais do composto desconhecido
no espectro de massas.

Algumas nomenclaturas importantes no estudo de interpretao:


Pico base o pico mais abundante do espectro.
on molecular on com mesma massa nominal da molcula
neutra

Os valores da tabela acima mostras as massas das perdas lgicas (o pedao da molcula inicial que foi perdida e as perdas
sequentes. Estas perdas correspondem aos pedaos mais provveis
de serem eliminados no processo.

Pico parente o on molecular


Massa medida em daltons, anteriormente amu (unidade de
massa atmica)
Razo massa/carga (m/z): refere-se massa do on.
Abundncia absoluta - Resposta do sistema de deteco.
Abundncia relativa Pico base normalizado para 100%.

Por exemplo, se uma substancia tiver massa molecular igual a


M e depois observa-se o primeiro fragmento com valor (M- 15) este
valor (15) corresponde perda de um fragmento (CH3).

Procedimento para Interpretao


Inicialmente vou listar alguns termos. No se preocupe se no
compreender nada ou pouco no incio. Ao ver os exemplos poder
ser bem mais fcil do que parece.
Didatismo e Conhecimento

Ento, com a prtica e algumas tabelas padronizadas (como a


tabela acima) vamos montando o quebra cabea dos fragmentos e
buscar desvendar qual a estrutura da molcula inicial.
54

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Exemplos de interpretao de espectros de massas
Este tpico requer muitos estudos, pois, para cada funo organica termos diferentes perdas lgicas e as anlises devem ser personalsticas. Vou dar aguns exemplos de compostos, fagmentos e
espectros dos ions obtidos.

O principal modo de fragmentao dos alcois a quebra da


ligao ao grupo hidroxi resultando num on oxonium estabilizado por ressonncia. Uma outra caracterstica no processo de fragmentao dos alcois a perda de uma molcula de gua a partir
do on molecular originando o pico [M-18], desta forma o pico on
molecular nos alcois primrios e secundrios so de baixa intensidade e nos alcois tercirios o pico M geralmente no observado.
O mais favorecida a que forma o maior radical (n-propil) e o on
m/z 45 estabilizado por ressonncia:

Exemplo 01) No espectro de massas do 2,2-dimetilpentano podemos observar os dois fragmentos inicos resultantes de quebras
nos pontos de ramificao representados pelos ons a m/z 85 (M 15) e 57 (cation t-butil):

Exemplo 02) O 3-metilpentano perde a cadeia lateral (radical


metil) originando o fragmento m/z =71 (M - 15). No entanto a quebra mais favorecida a perda do radical etil com a formao do carbocation secundrio 2-butil representado pelo fragmento pico base
a m/z = 57:

Exemplo 04) O EM da 3-pentanona tem como pico base o fragmento m/z 57 que se forma com a quebra e o on m/z 29 resultado da
carga positiva remanescente na cadeia alquilica:

Exemplo 03) O modo de fragmentao dos alcois ilustrado


para o 2-pentanol onde temos duas possibilidades de quebra
Didatismo e Conhecimento

55

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


- Aplica-se a amostras de matrias-primas, alimentos e raes,
devendo ser utilizada quando o limite mximo tolerado for igual ou
superior a 100 UFC/g ou ml.

NOES DE TCNICAS UTILIZADAS NAS


ANLISES DE ALIMENTOS E INSUMOS
AGROPECUARIOS;

Fundamentos
Prova Presuntiva

Caracterizar um alimento envolve analisar a sua constituio


qumica, caractersticas fsicas, microbiolgicas e sensoriais. A
determinao da composio qumica dos alimentos visa determinar
principalmente os teores de: umidade, cinzas, protenas, carboidratos, fibras e lipdios. Atravs da anlise de algumas caractersticas
fsicas especficas para um determinado tipo de alimentos, como:
viscosidade, ingredientes; textura para matrias-primas (carnes, pescados, frutas e vegetais) e produtos finais (panificados, extrusados,
sorvetes, queijos).
A qualidade microbiana dos alimentos fundamental para a
sade pblica e o registro do Servio de Inspeo Federal no sinnimo de garantia de ausncia de patgenos nos alimentos, como se
comprovou recentemente (Nascimento et al., 1999a,b; Cunha et al.,
1999). H necessidade de se identificar o grau de contaminao dos
alimentos, em uma primeira fase para que, de acordo com a carga
microbiana obtida, se possa estabelecer recomendaes e aplicao
de medidas de controle para garantir a segurana alimentar.
Por intermdio das tcnicas de anlise de sensorial, que alm de
integrar a anlise de alimentos, fundamental para seleo de um
produto mais palatvel, atravs da percepo dos rgos dos sentidos.

Baseia-se na inoculao das diluies desejadas das amostras


sob teste em gar cristal violeta vermelho neutro bile (VRBA) e
posterior contagem das colnias suspeitas. O gar cristal violeta
vermelho neutro bile apresenta em sua composio sais biliares e
cristal violeta, responsveis pela inibio de microrganismos Gram
positivos e vermelho neutro, um indicador de pH que revela a fermentao da lactose pelos microrganismos presentes. A adio de
sobre camada visa a preveno do crescimento e do espraiamento
de colnias na superfcie do gar.
Prova confirmativa para coliformes totais
A confirmao da presena de coliformes totais feita por meio
da inoculao das colnias suspeitas em caldo verde brilhante bile
2% lactose e posterior incubao a 36 1C. A presena de gs
nos tubos de Durhan evidencia a fermentao da lactose presente
no meio. O caldo verde brilhante bile 2% lactose apresenta em sua
composio bile bovina e um corante derivado do trifenilmetano
(verde brilhante) responsveis pela inibio de microrganismos
Gram positivos.

Anlises Microbiolgicas
O alimento uma exigncia de todos os seres vivos para manter
a existncia e tambm importante para manter o equilbrio psicolgico.
Para um alimento ter uma boa qualidade sanitria, necessrio
que seja livre de microrganismos patognicos. Porm seria impossvel examinar cada alimento, como rotina, para verificar a presena
de todos os patgenos. Nesse caso, padronizado o uso da Contagem Padro em Placa e/ou a enumerao de coliformes, que se
refere a Escherichia coli e bactrias semelhantes a ela em vrios
aspectos, dentro da famlia enterobactericea (Anonymous, 1987).
A presena de E. coli indica geralmente condies de higiene insatisfatrias na planta ou durante o preparo do alimento, visto que sua
deteco no alimento no necessariamente significa origem fecal,
pois ela pode crescer fora do intestino do hospedeiro e permanecer
no ambiente sujo por anos (Anonymous, 1987).
A Secretaria de Vigilncia Sanitria do Ministrio da Sade,
atravs da Portaria 451, de 19 de setembro de 1997 (Brasil, 1997),
ressalta a necessidade de uniformizar os padres microbiolgicos
dos alimentos para a comercializao dos mesmos entre pases e
refere-se a preocupao crescente de rgos Internacionais como a
FAO (Food Agricultural Organization) e OMS (Organizao Mundial de Sade) sobre esse tema. Outros controles analticos que podem ser realizados:

Prova confirmativa para coliformes termotolerantes


A confirmao da presena de coliformes termotolerantes
feita por meio da inoculao das colnias suspeitas em caldo EC
e posterior incubao em temperatura seletiva de 45 0,2C, em
banho-maria com agitao ou circulao de gua. A presena de gs
nos tubos de Durhan evidencia a fermentao da lactose presente
no meio.
O caldo EC apresenta em sua composio uma mistura de fosfatos que lhe confere um poder tamponante impedindo a sua acidificao. A seletividade devido a presena de sais biliares responsveis pela inibio de microrganismos Gram positivos.
Reagentes e Materiais
Vidrarias e demais insumos bsicos obrigatrios em laboratrios de microbiologia de alimentos;
gar cristal violeta vermelho neutro bile (VRBA);
Caldo verde brilhante bile 2% lactose;
Caldo EC;
Soluo salina peptonada 0,1%.
Equipamentos

Contagem de Coliformes Totais e Coliformes Termotolerantes


em Alimentos

Equipamentos bsicos obrigatrios em laboratrios de microbiologia de alimentos; Banho-maria com movimentao de gua
(agitao ou circulao).

- Estabelecer procedimento para a contagem de coliformes totais e coliformes termotolerantes em alimentos;


Didatismo e Conhecimento

56

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Procedimentos

Incubao

Pesagem e preparo da amostra

Incubar os tubos a 36 1C por 24 a 48 horas.


Leitura

Pesar 25 0,2 g ou pipetar 25 0,2 mL da amostra de acordo


com as instrues contidas no Anexo V, Procedimentos para o preparo, pesagem e descarte de amostras, deste Manual.
Adicionar 225 mL de soluo salina peptonada 0,1%.
Homogeneizar por aproximadamente 60 segundos em stomacher.
Esta a diluio 10-1.

A presena de coliformes totais confirmada pela formao de


gs (mnimo 1/10 do volume total do tubo de Durhan) ou efervescncia quando agitado gentilmente.
Anotar o resultado obtido para cada colnia, bem como a diluio utilizada.
Observao: A leitura pode ser feita aps 24 horas de incubao, porm, s sero vlidos os resultados positivos. Os tubos que
apresentarem resultado negativo devero ser reincubados por mais
24 horas.

Procedimentos de controle
Aplicar os procedimentos de controle especficos estabelecidos
pelo laboratrio.

Coliformes termotolerantes
Inoculao

Prova presuntiva

Inocular as culturas suspeitas de coliformes termotolerantes em


tubos contendo caldo EC.

Inoculao

Incubao

A partir da diluio inicial (10-1), efetuar as demais diluies


desejadas em soluo salina peptonada 0,1% de acordo com as instrues contidas no Anexo II, Diluies e solues, deste Manual.
Inocular 1 mL de cada diluio desejada em placas de Petri esterilizadas.
Adicionar a cada placa cerca de 15 mL de VRBA previamente
fundido e mantido a 46C - 48C em banho-maria.
Homogeneizar cuidadosamente e deixar em repouso at total
solidificao do meio.
Adicionar, sobre cada placa, cerca de 10 mL de VRBA previamente fundido e mantido a 46C - 48C em banho-maria, formando
uma segunda camada de meio. Deixar solidificar.

Incubar os tubos a 45 0,2C, por 24 a 48 horas em banho-maria com agitao.


Leitura
A presena de coliformes termotolerantes confirmada pela
formao de gs (mnimo 1/10 do volume total do tubo de Durhan)
ou efervescncia quando agitado gentilmente;
Anotar o resultado obtido para cada tubo, bem como a diluio
utilizada.
Observao: A leitura pode ser feita aps 24 horas de incubao, porm, s sero vlidos os resultados positivos. Os tubos que
apresentarem resultado negativo devero ser reincubados por mais
24 horas.

Incubao
Aps completa solidificao do meio, incubar as placas em posio invertida em temperatura de 36 1C por 18 a 24 horas.

Resultados
Para alimentos comercializados no MERCOSUL, os resultados
de contagem de coliformes totais se referem determinao contagem de coliformes a 35C e os resultados da contagem de coliformes termotolerantes correspondem determinao coliformes
a 45C.
Para o clculo final das contagens de coliformes totais e termotolerantes, proceder de acordo com as indicaes contidas no Anexo
IV, Procedimentos para contagem de colnias, deste Manual.
Expressar o resultado em UFC/g ou mL.

Leitura
Selecionar placas que contenham entre 15 e 150 colnias.
Contar as colnias que apresentarem morfologia tpica de coliformes, ou seja, colnias rseas, com 0,5 a 2 mm de dimetro rodeadas ou no por uma zona de precipitao da bile presente no meio.
Anotar os resultados de contagem.
Contar separadamente colnias tpicas e atpicas e submeter 3 a
5 colnias, de cada uma, s provas confirmativas.

Texto adaptado de Macedo, Maurco.

Provas confirmativas

Insumos

Coliformes totais

Insumo a combinao de fatores de produo diretos (matrias-primas) e indiretos (mo-de-obra, energia, tributos), e que
entram na elaborao de certa quantidade de bens ou servios. No
agronegcio os principais insumos so sementes, adubo, defensivos,
maquinrio, combustvel, rao, mo de obra especializada, entre
outros.

Inoculao
Inocular cada uma das colnias tpicas e atpicas selecionadas
em tubos contendo caldo verde brilhante bile 2% lactose.
Didatismo e Conhecimento

57

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


delas para a sua multiplicao. Alguns vrus possuem enzimas. Por
exemplo o HIV tem a enzima Transcriptase reversa que faz com
que o processo de Transcrio reversa seja realizado (formao de
DNA a partir do RNA viral). Esse processo de se formar DNA a partir de RNA viral denominado retrotranscrio, o que deu o nome
retrovrus aos vrus que realizam esse processo. Os outros vrus
que possuem DNA fazem o processo de transcrio (passagem da
linguagem de DNA para RNA) e s depois a traduo. Estes ltimos
vrus so designados de adenovrus.
Vrus so parasitas intracelulares obrigatrios: a falta de hialoplasma e ribossomos impede que eles tenham metabolismo prprio. Assim, para executar o seu ciclo de vida, o vrus precisa de um
ambiente que tenha esses componentes. Esse ambiente precisa ser
o interior de uma clula que, contendo ribossomos e outras substncias, efetuar a sntese das protenas dos vrus e, simultaneamente,
permitir que ocorra a multiplicao do material gentico viral.
Em muitos casos os vrus modificam o metabolismo da clula
que parasitam, podendo provocar a sua degenerao e morte. Para
isso, preciso que o vrus inicialmente entre na clula: muitas vezes
ele adere parede da clula e injeta o seu material gentico ou ento entra na clula por englobamento - por um processo que lembra
a fagocitose, a clula engole o vrus e o introduz no seu interior
(S BIOLOGIA, 2013).
Vrus infectam todos os grupos principais de organismos: vertebrados, invertebrados, plantas, fungos, bactria, mas alguns vrus
tm um espectro de hospedeiros maior que outros; entretanto, nenhum cruza a barreira eucaritica/procaritica (HUNT, 2013).
Factores que afetam o espectro de hospedeiro incluem:
-Se o virus pode penetrar na clula hospedeira
-Se o virus pode penetrar na clula, se a maquinria celular
apropriada est disponvel para a replicao viral
-Se o virus pode replicar, se o virus infeccioso pode sair da
clula e espalhar a infeco (HUNT, 2013)

ESTRUTURA DO VRUS

MICROBIOLOGIA: NOES DE VIROLOGIA,


BACTERIOLOGIA E MICOLOGIA;

Os vrus so seres muito simples e pequenos (medem menos


de 0,2 m), formados basicamente por uma cpsula proteica envolvendo o material gentico, que, dependendo do tipo de vrus, pode
ser o DNA, RNA ou os dois juntos (citomegalovrus). A palavra
vrus vem do Latim vrus que significa fludo venenoso ou toxina.
Atualmente utilizada para descrever os vrus biolgicos, alm de
designar, metaforicamente, qualquer coisa que se reproduza de forma parasitria, como ideias. O termo vrus de computador nasceu
por analogia. A palavra vrion ou vron usada para se referir a uma
nica partcula viral que estiver fora da clula hospedeira.
Das 1.739.600 espcies de seres vivos conhecidos, os vrus representam 3.600 espcies (S BIOLOGIA, 2013)
Vrus consistem em um cido nuclico (quer DNA ou RNA)
associado com protenas codificadas pelo cido nuclico. O vrus
tambm pode ter uma membrana bi-laminar de lipdeos (ou envoltrio) mas isto adquirido a partir da clula hospedeira, normalmente
ao atravessar a membrana celular do hospedeiro. Se a membrana
estiver presente, deve conter uma ou mais protenas virais que agem
como ligantes para receptores na clula hospedeira. Muitos vrus
codificam para algumas protenas estruturais (as que fazem uma
partcula viral madura (ou virion) e talvez uma enzima que participa na replicao do genoma viral. Outros vrus podem codificar
muito mais protenas, muitas das quais no fazem parte de um vrus maduro mas participam de alguma forma na replicao viral. O
vrus do herpes um dos mais complicados vrus e tem 90 genes.
Como muitos vrus fazem poucas ou no produzem enzimas, eles
so dependentes das enzimas das clulas hospedeiras para produzir mais partculas virais. Assim a estrutura viral e replicao so
fundamentalmente diferentes daquelas de organismos celulares. A
dependncia viral da clula hospedeira em vrios aspectos do ciclo
de crescimento tem complicado o desenvolvimento de drogas visto
que a maioria das drogas inibem o crescimento celular e tambm a
multiplicao viral (porque eles usam as mesmas enzimas). Uma
vez que uma das principais razes para se estudar o metabolismo
viral encontrar drogas que inibam seletivamente a multiplicao
de vrus, precisamos saber quando os vrus usam suas prprias protenas no seu ciclo de replicao - da podemos ento tentar desenvolver drogas que inibam as protenas virais (especialmente enzimas
virais) especificamente. Contrariamente aos vrus, a bactria muito
maior realiza seus prprios processos metablicos e codificam para
suas prprias enzimas. Mesmo catalisando reaes similares, as enzimas bacterianas diferem das dos seus homlogos eucariticos e
pode portanto ser alvo de antibiticos especficos. Assim como vrus, algumas bactrias (tais como micoplasma, ricketsia e clamidia)
podem entrar no citoplasma de clulas eucariticas e se tornarem
parasitas. Essas pequenas bactrias intracelulares entretanto proporcionam todas as enzimas que so necessrias para a replicao.
Assim, mecanismos de controle de bactria, incluindo aqueles com
um estilo parasitrio, so mais facilmente desenvolvidos do que os
virais.(HUNT, 2013)
Os vrus no so constitudos por clulas, embora dependam
Didatismo e Conhecimento

Vrus variam de tamanho desde menos de 100 nanmetros de


dimetro a algumas centenas de nanmetros em comprimento no
caso do filoviridae (HUNT, 2013)
Todos os vrus contm um genoma de cidos nuclicos (RNA
ou DNA) e uma capa protica protetora (chamada capsdio). O genoma de cido nuclico mais a capa protica protetora chamado
de nucleocapsdio que tem uma simetria icosadrica, helicoidal ou
complexa. Vrus podem ou no ter um envelope. Vrus envelopados
obtm seus envelopes por gemulao atravs da membrana da clula
hospedeira. Em alguns casos o vrus gemulam atravs da membrana plasmtica mas em outros casos o envelope se deriva de outras
membranas tais como as do corpsculo de Golgi ou do ncleo.
Alguns vrus se associam com partes especializadas da membrana
plasmtica da clula hospedeira; por exemplo, o vrus Ebola se associa com pores lipdicas ricas em esfingomielina, colesterol e
protenas contendo glicolipdios. Poxvrus so excees pois eles se
auto-empacotam com membranas da clula hospedeira usando um
mecanismo diferente do processo de gemulao normal utilizado
por outros vrus (HUNT, 2013).
Virus envelopados nem sempre precisam matar suas clulas
hospedeiras para serem liberados, uma vez que eles podem brotar
para fora da clula processo esse que no necessariamente letal
para a clula portanto alguns virus que brotam podem montar infeces persistentes (HUNT, 2013).
58

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Vrus envelopados so prontamente infecciosos somente se o
envelope estiver intacto (uma vez que protenas da adsoro viral
que reconhecem os receptores nas clulas hospedeiras esto no envelope viral). Isso segnifica que agentes que danificam o envelope,
tais como detergentes alcolicos, reduzem a infectividade(HUNT,
2013)

Eles so pequenos, partculas proteinceas e existe controvrsia


sobre se eles contm algum cido nuclico, mas se contiverem ser
muito pequena, e quase certamente no suficientemente grande
para codificar para protena: Exemplos de doenas humanas causadas por prons so Kuru, doena de Creutzfeldt-Jakob disease e
sndrome de Gerstmann-Straussler. Prions so tambm causa de
scrapie em caprinos.
Isso depende da definio de vida. Para evitar possvel confuso, ns frequentemente referimos a se eles perderam ou no algum
aspecto de suas atividades biolgicas ao invs de referir a vrus vivos ou mortos. Portanto, falamos sobre nmero de partculas infecciosas, ou nmero de partculas formadoras de colnias e no do
nmero de partculas vivas (HUNT, 2013)

CINCO FORMAS ESTRUTURAIS BSICAS DE VRUS NA


NATUREZA
- Icosadrica nua (no envolvido) ex. poliovrus, adenovrus,
vrus da hepatite A
- Helicoisal nua (no envolvido) ex. vrus do mosaico do tabaco. At o presente nenhum vrus humanos conhecido com essa
estrutura.
-Envelopado icosadrico ex. vrus do herpes, vrus da febre
amarela, vrus da rubola
- Helicoidal envelopado ex. vrus da raiva, vrus da influenza,
vrus da parainfluenza, vrus da caxumba, vrus do sarampo
-Complexo ex. Poxvrus (vrus da varola) (HUNT, 2013).

AGENTES NO CONVENCIONAIS

CLASSIFICAO DOS VRUS


Os sistemas internacionalmente consensuais de classificao de
vrus se baseiam na estrutura e composio da partcula viral (virion). Em alguns casos o modo de replicao tambm importante
na classificao. Vrus so classificados em vrias famlias com base
nisso (HUNT, 2013).
De acordo com a classificao, os vrus so agrupados de acordo com suas propriedades, no as pilhas que contaminam. Os critrios principais eram o tipo de ADN nucleico do cido ou RNA
(MANDAL, 2013).
Quatro caractersticas deviam ser usada para a classificao de
todos os vrus:
- Tipo do cido nucleico que inclui o tamanho do genoma, o
strandedness (simples ou duplo), o linear ou circular, o positivo ou
o negativo (sentido), segmentos (nmero e tamanho), seqncia e
G+C Etc. satisfeito.
- Simetria do escudo da protena
- Presena ou ausncia de uma membrana do lipido
- Dimenses ou o tamanho do virion e do capsid
Outras propriedades incluem as propriedades fsico-qumicas
que incluem a massa molecular, pH, estabilidade trmica, susceptibilidade aos produtos qumicos e aos extremos fsicos e ao ter e aos
detergentes (MANDAL, 2013).

Existem tambm os agentes no convencionais s vezes conhecidos como vrus atpicos At agora, os tipos mais importantes que foram estudados so os virides e prons (HUNT, 2013)
VIRIDES
Virides contm apenas RNA. Eles so pequenos (menos de
400 nucleotdeos), de fita simples, RNAs circulares. Os RNAs
no so empacotados, aparentemente no codificam para nenhuma
protena,e at agora tm se mostrado associados com doenas em
plantas. Entretanto, h algumas sugestes de que agentes um tanto similares podem estar envolvidos em algumas doenas humanas
(HUNT, 2013).
Virus da hepatite delta

Classificao de ICTV

No presente momente, o nico agente conhecido de doena


humana que se assemelha a viride o vrus da hepatite delta. De
certas formas HDV (tambm chamado agente da hepatite delta) aparenta ser intermedirio entre vrus clssicos e virides. HDV tem
um genoma de RNA muito pequeno (~1700 nucleotdeos) comparado com a maioria dos vrus, embora seja um pouco maior do que
virides. Entretanto, caractersticas da sequncia dos cidos nuclicos dos HDVs e estrutura so similares a de alguns virides. HDV
difere dos virides por codificar para uma protena (vrias formas de
antgenos de hepatite delta). Diferentemente dos virides ele empacotado. Entretanto, ele difere dos vrus verdadeiros po no codificar para suas prprias protenas de ligao. O RNA encapsidiado
pelo antgeno da hepatite delta, e HDV age como um parasita nos
vrus da hepatite B no relacionados (HBV), usando envelopes do
HBV contendo a protena de ligao do vrus da hepatite B (HBsAg)
(HUNT, 2013).

A conveno de Nomeao depende primeiramente do material


do genoma e do cido nucleico dos vrus com a revelao do cido
nucleico que arranja em seqncia tecnologias nos anos 70. Nomear executada pelo Comit Internacional na Taxonomia dos Vrus
(ICTV). Um catlogo completo de vrus conhecidos mantido pelo
ICTV em ICTVdb (MANDAL, 2013).
O pedido como segue;
Pedido - virales
Famlia - viridae
Subfamlia - virinae
Gnero - vrus
Espcie - vrus
Na classificao de 2011 ICTV h seis pedidos - Caudovirales,
Herpoesvirales, Mononegavirales, Nidovirales, Picornavirales e Tymovirales. O stimo Ligamenvirales foi propor (MANDAL, 2013).
A classificao de Baltimore

PRIONS

Isto classifica de acordo com a sntese viral do mRNA. Isto veio


do vencedor de Prmio nobel David Baltimore(MANDAL, 2013).

Prions contm apenas protena (embora seja motivo de controvrsia).


Didatismo e Conhecimento

59

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


ICTV e classificaes de Baltimore usadas junto

No solo existem bactrias que podem ser benficas de vrias


maneiras, uma delas ajudar as folhas velhas das plantas a apodrecerem fornecendo alimento s novas plantas. Entretanto, h certas
bactrias que so daninhas aos vegetais prejudicando-os a ponto de
destru-los.
No caso dos seres humanos, elas podem ser combatidas atravs do uso de antibiticos, que, quando usados conforme orientao
mdica, tem efeito eficaz sobre os germes prejudiciais a sade. Caso
contrrio, elas aumentaro rapidamente ampliando o nmero de colnias. Em muitos casos, elas podem ser transferidas de pessoas para
pessoas.
Podemos citar como principais tipos de bactrias : Cocos (formato arredondado); Bacilos (alongadas em forma de bastonetes);
Espirilos (formato espiralado) e Vibries (possuem formato de virgulas).

Presentemente ICTV e a classificao de Baltimore so usados


junto. Grupo Eu possuo por exemplo o ADN encalhado dobro e o
nicos ADN do grupo II, Grupo III com RNA encalhado dobro e
Grupo encalhados IV com positivo escolhem o RNA e o Grupo encalhados V com nico RNA encalhado do sentido negativo. O Grupo VI tem mais o nico RNA encalhado com transcriptase reverso
que converte o RNA ao ADN como o vrus do VIH e o Grupo VII
tem o ADN encalhado dobro com transcriptase reverso e este inclui
o vrus da Hepatite B (MANDAL, 2013).
Doenas humanas virais

No homem, inmeras doenas so causadas por esses seres


acelulares. Praticamente todos os tecidos e rgos humanos so afetados por alguma infeco viral. Abaixo voc encontra as viroses
mais frequentes na nossa espcie. Valorize principalmente os mecanismos de transmisso e de preveno. Note que a febre amarela
e dengue so duas viroses que envolvem a transmisso por insetos
(mosquito da espcie Aedes aegypti). Para a primeira, existe vacina. Duas viroses relatadas abaixo, AIDS e condiloma acuminado,
so doenas sexualmente trasmissveis (DSTs). A tabela tambm
relaciona viroses comuns na infncia, rublola, caxumba, sarampo,
poliomelite - para as quais exiestem vacinas.
Algumas das principais viroses que acometem os seres humanos:
Resfriado Comum;
Caxumba;
Raiva;
Rubola;
Sarampo;
Hepatites;
Dengue;
Poliomielite;
Febre amarela;
Varicela ou Catapora;
Varola;
Meningite viral;
Mononucleose Infecciosa;
Herpes
Condiloma
Hantavirose
AIDS.

At 300 anos atrs, ningum sabia da existncia deste tipo de


vida, foi um holands chamado Leeuwenhoek que as observou pela
primeira vez. Em 1865, Louis Pasteur, atravs de seus estudos e observaes, descobriu como elas se multiplicam e causam doenas.
Contudo, os estudos desta forma de vida s foram mais precisos depois que Roberto Koch, em 1870, descobriu como colori-las e mant-las vivas em uma espcie de gelia que ele mesmo criou. Desta
forma, elas poderiam ser observadas por mais tempo e tambm de
formas diferentes, fato que permitiria um conhecimento mais completo e aprofundado deste tipo de vida.
Principais doenas causadas por bactrias:
Tuberculose: causada pelo bacilo Mycobacterium tuberculosis.
Hansenase (lepra): transmitida pelo bacilo de Hansen (Mycobacterium lepra).
Difteria: provocada pelo bacilo diftrico.
Coqueluche: causada pela bactria Bordetella pertussis.
Pneumonia bacteriana: provocada pela bactria Streptococcus pneumoniae.
Escarlatina: provocada pelo Streptococcus pyogenes.
Ttano: causado pelo bacilo do ttano (Clostridium tetani).

BACTERIOLOGIA

Leptospirose: causada pela Leptospira interrogans.

As bactrias so seres muito pequenos que, em sua maior parte,


no podem ser vistos a olho nu. Apesar de seu tamanho, elas se multiplicam em grande velocidade, e, muitas delas, conhecidas como
germes, so prejudiciais a sade do homem, pois podem causar inmeras doenas.
Elas se encontram por toda parte, e h milhares delas no ar, na
gua, no solo e, inclusive, em nossos corpos. Contudo, nem todas
so malficas, h aquelas que desempenham papis extremamente
teis para muitas formas de vida, inclusive para os seres humanos.
No caso de plantas, como as ervilhas, elas se beneficiam desta forma
de vida, que habita em suas razes dentro de pequenos caroos, em
seu crescimento atravs da substncia qumica que estas bactrias
produzem.
Didatismo e Conhecimento

Tracoma: provocada pela Chlamydia trachomatis.


Gonorria ou blenorragia: causada por uma bactria, o gonococo (Neisseria gonorrhoeae).
Sfilis: provocada pela bactria Treponema pallidum.
Meningite meningoccica: causada por uma bactria chamada
de meningococo.
Clera: doena causada pela bactria Vibrio cholerae , o vibrio colrico.
60

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Febre tifide: causada pela Salmonella typhi.

* autolisinas esto normalmente inibidas: a penicilina destri inibidores das autolisinas, destruindo a parede.

Metabolismo bacteriano

Enzimas bacterianas

Obteno de energia

Classificao:
a . extracelulares
b . ectocelulares
c . endocelulares
a. Enzimas extracelulares
catalase: protege bactrias contra ao da H2O2 produzida
na fagocitose
coagulase: fibrinognio fibrina
penicilase: age sobre penicilina
b. Enzimas ectocelulares
agem na membrana (permeabilidade seletiva) nos processos
respiratrios e na sntese de parede
c. Enzimas endocelulares
fazem sntese de grnulos de reserva, enzimas envolvidas
no catabolismo
enzimas de constituio: produo permanente, reguladas
pelo PH, concentrao do substrato, etc . . .
enzimas de induo: s quando h necessidade ; reguladas
pela sua sntese atravs do status do gene (se est ou no ativado).
So ativados pelos operons. Produto final inibe ativador dos operons, desligando assim o gene

Bactrias pratrficas: possuem metabolismo defeituoso. Ainda


que oferecido carbono orgnico no conseguem sintetizar todos os
compostos. Portanto, s conseguem viver na clula hospedeira. Ex:
clasmdeos e requtseas.
Respirao aerbica
Respirao anaerbica Quimiotrficas

Consumo de energia
Biossntese
Locomoo
Transporte ativo
Produo de calor
Somente os processos de biossntese de parede e grnulos de
reserva so diferentes das clulas eucariticas

Reproduo

Fermentao
No so processos exclusivos!
No existem bactrias que s fermentam
Todas quimiotrficas respiram
Diferenas entre fermentao e respirao
Na respirao: hidrognios e eltrons transportados
por receptores inorgnicos. Se receptor for O2 aerbica, se no
for anaerbica. No existe bactria que faz respirao aerbica e
anaerbica
Na fermentao: com receptores orgnicos
Produto final:
Respirao aerbica: mais rentvel que a anerbica
Fermentao: menos rentvel dos 3 processos
composto inicial: piruvato
Fermentao alcolica: produto final - lcool etlico; no to
importante para as bactrias e sim para as leveduras
Fermentao ltica: Streptococos - bactria de interesse mdico
Fermentao propinica: produto final - cido propinico.
Ex: Corinibacterium / Propionibacterium: fazem tambm respirao
anaerbica
Fermentao butrica: produto final - cido butrico, lcool
butrico e cido B-hidroxibutrico: tambm realizam respirao anerbica.
Fermentao butilenogliclica: Enterobacter / butilenoglicol
Fermentao acidamista: os produtos finais so o cido actico, lcool etlico e cido succnico
Nota:
* hidrolases - molculas grandes se transformam em monmeros.
Didatismo e Conhecimento

Reproduo das Bactrias


A reproduo mais comum nas bactrias assexuada por bipartio ou cissiparidade. Ocorre a duplicao do DNA bacteriano
e uma posterior diviso em duas clulas. As bactrias multiplicam-se por este processo muito rapidamente quando dispem de condies favorveis (duplica em 20 minutos).
A separao dos cromossomos irmos conta com a participao dos mesossomos, pregas internas da membrana plasmtica nas
quais existem tambm as enzimas participantes da maior parte da
respirao celular.
Repare que no existe a formao do fuso de diviso e nem de
figuras clssicas e tpicas da mitose. Logo, no mitose.

61

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio

Transduo
Na transduo, molculas de DNA so transferidas de uma bactria a outra usando vrus como vetores (bactrifagos). Estes, ao se
montar dentro das bactrias, podem eventualmente incluir pedaos
de DNA da bactria que lhes serviu de hospedeira. Ao infectar outra bactria, o vrus que leva o DNA bacteriano o transfere junto
com o seu. Se a bactria sobreviver infeco viral, pode passar a
incluir os genes de outra bactria em seu genoma.

Esporulao
Algumas espcies de bactrias originam, sob certas condies
ambientais, estruturas resistentes denominadas esporos. A clula
que origina o esporo se desidrata, forma uma parede grossa e sua
atividade metablica torna-se muito reduzida. Certos esporos so
capazes de se manter em estado de dormncia por dezenas de anos.
Ao encontrar um ambiente adequado, o esporo se reidrata e origina
uma bactria ativa, que passa a se reproduzir por diviso binria.
Os esporos so muito resistentes ao calor e, em geral, no morrem quando expostos gua em ebulio. Por isso os laboratrios,
que necessitam trabalhar em condies de absoluta assepsia, costumam usar um processo especial, denominado autoclavagem, para
esterilizar lquidos e utenslios. O aparelho onde feita a esterilizao, a autoclave, utiliza vapor de gua a temperaturas da ordem de
120C, sob uma presso que o dobro da atmosfrica. Aps 1 hora
nessas condies, mesmo os esporos mais resistentes morrem.

Conjugao

A indstria de enlatados toma medidas rigorosas na esterilizao dos alimentos para eliminar os esporos da bactria Clostridium
botulinum. Essa bactria produz o botulismo, infeco frequentemente fatal.

Reproduo sexuada

Na conjugao bacteriana, pedaos de DNA passam diretamente de uma bactria doadora, o macho, para uma receptora, a fmea. Isso acontece atravs de microscpicos tubos proticos, chamados pili, que as bactrias macho possuem em sua superfcie.
O fragmento de DNA transferido se recombina com o cromossomo da bactria fmea, produzindo novas misturas genticas,
que sero transmitidas s clulas-filhas na prxima diviso celular.

Para as bactrias considera-se reproduo sexuada qualquer


processo de transferncia de fragmentos de DNA de uma clula para
outra. Depois de transferido, o DNA da bactria doadora se recombina com o da receptora, produzindo cromossomos com novas misturas de genes. Esses cromossomos recombinados sero transmitidos
s clulas-filhas quando a bactria se dividir.
A transferncia de DNA de uma bactria para outra pode ocorrer de trs maneiras: por transformao, transduo e por conjugao.

Transformao
Na transformao, a bactria absorve molculas de DNA dispersas no meio e so incorporados cromatina. Esse DNA pode ser
proveniente, por exemplo, de bactrias mortas. Esse processo ocorre
espontaneamente na natureza.

Conjugao bacterian mostrando o pili sexual.

Os cientistas tm utilizado a transformao como uma tcnica


de Engenharia Gentica, para introduzir genes de diferentes espcies em clulas bacterianas.
Didatismo e Conhecimento

62

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Formas de classificar as bactrias
Podemos classificar as bactrias em trs grandes grupos: as
Gram-positivas, as Gram-negativas e os Micoplasmas. Essa classificao tem como critrio a diferena na colorao das bactrias,
obtida a partir do mtodo de Gram, desenvolvido por Hans Christian
Joachin Gram (microbiologista dinamarqus), em 1884.
Esse mtodo utiliza dois corantes, um violeta e um rosa. Bactrias cuja parede celular espessa retm ambos os corantes e, ao
microscpio, apresentam a colorao violeta, sendo chamadas de
Gram-positivas, como, por exemplo, os Lactobacilos, as Bacilceas,
os Actinomicetos, etc. J as bactrias que apresentam uma parede
celular mais fina retm apenas o corante rosa e apresentam essa colorao ao microscpio. So as Gram-negativas, como as Pseudomonadceas, as Enterobactrias, etc.
Os micoplasmas so bactrias que no apresentam parede celular e so muito pequenas (entre 0,1 e 0,25 m). H espcies de
vida livre, mas muitas so parasitas causadoras de doenas, como o
Mycoplasma pneumoniae e o Mycoplasma genitalium, que causam,
em seres humanos, uma forma de pneumonia e uretrite, respectivamente.
Este tipo de classificao apresenta vantagens do ponto de vista
mdico, j que bactrias Gram-positivas so mais sensveis ao
da penicilina, enquanto as Gram-negativas, alm de serem resistentes penicilina, possuem componentes em sua parede celular que
so txicos ao nosso organismo.
No entanto, as classificaes mais modernas levam em considerao critrios evolutivos, estabelecendo relaes de parentesco
a partir da similaridade entre as sequncias de DNA das diferentes
espcies.
At recentemente, considerava-se a diviso dos seres procariticos em dois grupos: as arqueobactrias e as eubactrias. Entretanto, muitos cientistas tm argumentado que as diferenas genticas
entre as arqueobactrias e as eubactrias so muito grandes, e passaram a propor a diviso do Reino Monera em dois sub-reinos: as
Arqueas e as Bactrias.
As arqueas diferem das bactrias por no possurem peptidioglicanos na parede celular e so geneticamente mais prximas dos
eucariticos, os organismos que apresentam carioteca em suas clulas.
Nesse sub-reino encontram-se as halfitas, que habitam guas
com alta concentrao de sal, as termoacidfilas, que suportam altas temperaturas e grande acidez, vivendo, por exemplo, em fendas vulcnicas ou fontes termais cidas, e as metanognicas, que
produzem metano e podem ser encontradas em pntanos e no tubo
digestrio de cupins e de animais herbvoros.

Alimento
Se considerarmos a forma de obteno de alimento, podemos
classificar as bactrias em autotrficas e heterotrficas. Entre as
autotrficas, existem as fotossintetizantes (ou fotoautotrficas) e as
quimiossintetizantes (ou quimiautotrficas).
As primeiras so aquelas que utilizam a luz como fonte de energia para a sntese de compostos orgnicos. Algumas dessas bactrias, como as proclorfitas e as cianobactrias, realizam fotossntese
semelhante das plantas e algas. J as sulfobactrias realizam um
tipo de fotossntese em que o gs carbnico reage com o gs sulfdrico ao invs da gua, produzindo enxofre elementar e no gs
oxignio.
J para as bactrias quimiossintetizantes, a fonte de energia para
a produo de seu alimento no a luz solar. Elas utilizam a energia
liberada em reaes de oxidao de compostos inorgnicos. As bactrias dos gneros Nitrosomonas e Nitrobacter, que vivem no solo e
so bastante conhecidas por sua participao no ciclo do nitrognio,
por exemplo, obtm energia pela oxidao de amnia e de nitrito
respectivamente.
Entre as bactrias heterotrficas, encontram-se as saprofgicas
e as parasitas. As primeiras obtm alimento a partir de cadveres e
restos de seres vivos, enquanto as parasitas encontram esse alimento
em tecidos de seres vivos, muitas vezes causando-lhes doenas.
Degradao de molculas
Segundo a forma como degradam as molculas orgnicas para
a liberao de energia, as bactrias podem ser respiradoras ou fermentadoras.

MICOLOGIA
Fungos so organismos eucariontes, aclorofilados, heterotrficos, que se reproduzem sexuada e assexuadamente e cujas estruturas somticas so geralmente filamentosas e ramificadas, com
parede celular contendo celulose ou quitina, ou ambos.
Os fungos obtm o alimento seja como saprfitas, organismos
que vivem sobre a matria orgnica morta, ou como parasitas, que
se nutrem da matria viva. Em ambos os casos, as substncias nutritivas so ingeridas por absoro aps terem sido parcialmente digeridas por meio de enzimas.

Entre as bactrias respiradoras h as que realizam a respirao


celular aerbica, onde o gs oxignio o aceptor final de ons hidrognio, e as que realizam a respirao celular anaerbica, onde o gs
oxignio substitudo por outras molculas, que funcionam como
aceptores finais de hidrognio, tais como nitratos ou sulfatos.
Na ausncia de oxignio, no entanto, outras bactrias, como
Lactobacillus, Streptococcus, Escherichia, etc., realizam processos
de fermentao lctica ou alcolica.
Didatismo e Conhecimento

63

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


A maioria dos fungos constituda de espcies saprfitas que
desempenham a importante funo de decomposio na biosfera,
degradando produtos orgnicos e devolvendo carbono, nitrognio e
outros componentes ao solo, tornando assim disponveis s plantas.
Cerca de 100 espcies de fungos produzem doenas no homem e
quase o mesmo nmero em animais, a maioria das quais so enfermidades superficiais da pele ou de seus apndices. No entanto, mais
de 8.000 espcies de fungos causam doenas em plantas, sendo que
todas as plantas so atacadas por algum tipo de fungo, e cada um dos
fungos parasitas atacam a um ou mais tipos de plantas.

No processo de desenvolvimento os fungos formam estruturas


vegetativas que funcionam como estruturas de resistncia, tais
como:
Rizomorfas: estruturas macroscpicas formadas por hifas entrelaadas no sentido longitudinal, com crescimento semelhante a
uma raiz.
Esclercios: estruturas macroscpicas formados pelo enovelamento de hifas com endurecimento do crtex.
Clamidosporos: estruturas microscpicas, formadas pela
diferenciao de clulas da hifa, com a formao de uma parede
espessa.
Todas essas estruturas permanecem em repouso quando as
condies so desfavorveis, entrando em atividade em condies
favorveis.

CRESCIMENTO DOS FUNGOS


O crescimento dos fungos constitudo das fases vegetativa e
reprodutiva.
Fase Vegetativa

Fase Reprodutiva

Os fungos, em sua maioria, so constitudos de filamentos microscpicos com parede celular bem definida, chamados hifas. A
clula fngica constituda pelos principais componentes encontrados nos organismos eucariotos. A parede celular composta principalmente por polissacardios, pequena quantidade de lipdios e ons
orgnicos. A membrana plasmtica composta por fosfolipdios e
esfingolipdios, protenas, alm de pequenas quantidades de carboidratos. O citoplasma apresenta solutos dissolvidos, no qual esto
imersas organelas membranosas, como mitocndrias, complexo
de Golgi e microcorpos, assim como estruturas no membranosas,
como ribossomos, microtubos e microfilamentos. A clula fngica
apresenta ncleos dotados de uma membrana nuclear ou carioteca.
Os fungos, por serem aclorofilados, no podem utilizar energia
solar para sintetizar seu prprio alimento. A substncia de onde os
fungos retiram os nutrientes de que necessitam chama-se substrato,
o qual pode ser o hmus do solo, restos de cultura, plantas vivas, etc.
As hifas ramificam-se em todas as direes no substrato, formando
o miclio.
As hifas ou miclio, quanto ao nmero de ncleos, podem ser
uninucleadas, binucleadas e multinucleadas. A extremidade da hifa
a regio de crescimento. O protoplasma na extremidade da hifa
sintetiza um grande nmero de enzimas e cidos orgnicos que so
difundidos no substrato. As enzimas e cidos quebram a celulose,
amido, acares, protenas, gorduras e outros constituintes do substrato, que so utilizados como alimentos e energia para o crescimento do fungo.
O crescimento do miclio de um fungo parasita pode ser externo ou interno em relao ao tecido hospedeiro. O miclio externo
ocorre como um denso emaranhado na superfcie de folhas, caules
ou frutos, que no penetra na epiderme dos rgos e nutre-se atravs
de exsudatos (acares) da planta. O miclio interno pode ser subepidrmico, quando desenvolve entre a cutcula e as clulas epidermais; intercelular, quando penetra no hospedeiro e localiza-se nos
espaos intercelulares, sem penetrar nas clulas, sendo os nutrientes
absorvidos atravs de rgos especiais chamados haustrios (estruturas constitudas de clulas da hifa) ou diretamente por difuso
atravs da parede celular; ou intracelular, quando penetra dentro
da clula hospedeira, absorvendo os nutrientes diretamente. Existem
espcies que tem capacidade de penetrar diretamente pela superfcie
intacta do hospedeiro. Estas espcies apresentam rgos especiais,
chamados apressrios, que se fixam na superfcie do hospedeiro
e no ponto de contato ocorre dissoluo do tecido formando um
pequeno orifcio (microscpico).
Didatismo e Conhecimento

Os esporos so as estruturas reprodutivas dos fungos, constituindo a unidade propagativa da espcie, cuja funo semelhante
a de uma semente, mas difere desta pois no contm um embrio
pr-formado.
Os esporos so produzidos em ramificaes especializadas
ou tecidos do talo ou hifa chamados esporforos. Estes, por sua
vez, recebem denominaes de acordo com a classe do organismo.
Como exemplo temos: conidiforo nos Deuteromicetos e esporangiforo nos Oomicetos.
O corpo de frutificao de um fungo, como peritcios, apotcios e picndios, do proteo e apoio s clulas esporgenas, as
quais podem ser agregadas em camadas dentro da cavidade do corpo de frutificao ou em camadas na epiderme do hospedeiro (Ex.:
acrvulos). Nos Ascomicetos as clulas esporgenas compreendem
as ascas, enquanto nos Basidiomicetos as basdias.
Os esporos so comumente unicelulares, mas em muitas espcies podem ser divididos por septos, formando clulas. Os esporos
podem ser mveis (zoosporos) ou imveis, de paredes espessas ou
finas, hialinas ou coloridas, com parede celular lisa ou ornamentada,
as vezes com apndice filiforme simples ou ramificado. Em muitas
espcies de fungos, a colorao e o nmero de septos dos esporos
variam com a idade.
Os esporos podem ser assexuais e sexuais. A fase associada
com os esporos assexuais e miclio estril conhecida como estgio ou fase imperfeita do fungo, enquanto aquela associada com a
produo de zigoto e chamada estgio ou fase perfeita.
Os esporos assexuais so representados por zoosporos, conidiosporos, uredosporos e outros, formados pelas transformaes
do sistema vegetativo sem haver fuso de ncleos. Os esporos sexuais so resultantes da unio de ncleos compatveis, seguido de
meiose e mitose.
Os rgos sexuais do fungo so chamados de gametngios.
O gametngio feminino denominado oognio ou ascognio, enquanto o gametngio masculino denominado anterdio . As clulas sexuais ou ncleos que se fundem na reproduo sexual so
chamados gametas.
Algumas espcies de fungos produzem os gametngios no mesmo talo e so ditos homotlicos (hermafroditas). Outras formam
talos com sexos agregados e so chamados heterotlicos (diicos),
isto , os sexos so agregados em dois indivduos diferentes, no podendo cada talo, ou seja, cada indivduo reproduzir-se sexualmente
sem o concurso de outro.
64

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


A maioria dos fungos eucrpico, ou seja, apenas parte do talo
transforma-se na estrutura reprodutiva. Nos fungos mais inferiores,
em algumas espcies, todo talo transforma-se na estrutura reprodutiva, sendo chamadas holocrpicas.
Os fungos podem apresentar reproduo assexuada, sexuada e
tambm um mecanismo de recombinao gnica, denominado parassexualidade.

Nos Basidiomicetos, esporos haplides produzem somente pequenas hifas haplides. Quando estas so fecundadas, um miclio
dicaritico (N+N) produzido e desenvolve-se para constituir a estrutura somtica do fungo. Essas hifas dicariticas podem produzir,
por via assexual, esporos dicariticos que desenvolvem novamente
em um miclio dicaritico. Entretanto, em qualquer dos casos, os
ncleos pareados das clulas se unem e formam zigotos, dividindo-se meiticamente para produzir basidisporos, que contm ncleos
haplides. Nos Deuteromicetos, encontrado somente o ciclo assexual, com a seguinte seqncia: esporo haplide miclio haplide esporo haplide.

Reproduo assexuada: muito comum nos fungos, pode


ocorrer pela fragmentao do miclio (cada fragmento origina novo
organismo) ou pela produo de esporos assexuais. Neste tipo de
reproduo no ocorre fuso de ncleos, somente ocorrendo mitoses
sucessivas.

O ciclo assexual o mais comum entre os fungos, pois pode ser


repetido vrias vezes durante a estao de crescimento, enquanto o
ciclo sexual ocorre somente uma vez por ano.

Reproduo sexuada: ocorre entre dois esporos mveis ou


no, em que trs processos se sucedem:
a) Plasmogamia: fuso dos protoplasmas, resultante da anastomose de duas clulas.
b) Cariogamia: fuso de dois ncleos haplides (N) e compatveis, formando um ncleo diplide (2N).
c) Meiose: onde o ncleo diplide (2N) sofre uma diviso reducional para formar dois ncleos haplides (N), seguindo-se a mitose,
embora em alguns casos esta preceda a meiose. O ncleo haplide
forma ento uma parede que o protege, recebendo o nome de esporo.

Em condies prprias podem se apresentar das seguintes formas: - BOLORES: quando apresentam os filamentos ou hifas que
no conjunto, constituem o miclio; - LEVEDURAS: apresentam
formas celulares ovais e arredondadas.
Morfologia: - hifa: a estrutura bsica do fungo, chamada tambm de filamento; - esporo: corpsculo uni ou multicelular, que germina para dar origem a hifa; - clamidsporo: esporo de resistncia
produzido, por qualquer tipo de fungo.

Parassexualidade: ocorrncia de plasmogamia entre duas hifas geneticamente diferentes, formando um heterocarion, ou seja,
presena de dois ncleos geneticamente diferentes na mesma clula.
Esta situao de heterocariose termina quando ocorre a unio destes
ncleos originando uma clula ou hifa diplide, a qual se perpetua
por mitose.
Os vrios processos podem ocorrer simultaneamente no mesmo
talo, sem obedecer uma seqncia regular ou em estgios especficos. O ciclo parassexual pode ou no ser acompanhado de um ciclo
sexual. A parassexualidade constitui um importante mecanismo de
variao gentica para aqueles fungos que no apresentam reproduo sexual ou a apresentam raramente.
Embora os ciclos de vida dos fungos dos distintos grupos variem amplamente, a grande maioria passa por uma srie de etapas
que so bastante similares. Assim, a maioria dos fungos tem um estgio de esporo que contm um ncleo haplide, que possui uma
srie de cromossomos ou 1N. Os esporos, ao germinar, produzem
uma hifa que tambm contm ncleos haplides. A hifa produz novamente esporos haplides (como sempre ocorre com Deuteromicetos) ou pode fundir-se com uma hifa para produzir uma hifa fecunda
em que os ncleos se fundem para formar um ncleo diplide, denominado zigoto, que contm duas sries de cromossomos ou 2N.
Nos Oomicetos, o zigoto se divide e produz esporos haplides, que
concluem o ciclo. Em uma fase breve do ciclo de vida da maioria
dos Ascomicetos e em todos os Basidiomicetos, o par de ncleos
da hifa fecundada no se une, mantendo-se separados dentro da clula (condio dicaritica ou N+N), dividindo-se simultaneamente
para produzir mais clulas hifas que contm pares de ncleos. Nos
Ascomicetos, as hifas dicariticas se localizam isoladas no interior
de corpos de frutificao, onde originam hifas ascgenas, desde que
os ncleos da clula da hifa se una para formar um zigoto (com um
nmero diplide de cromossomos), o qual se divide meioticamente
para produzir ascsporos que contm ncleos haplides.
Didatismo e Conhecimento

Importncia dos fungos fabricao de queijos - roquefort, gorgonzola e camembert; controle de qualidade de produtos industriais;
fontes de remdios sobretudo antibiticos e provocadores de
doenas; consumidos na forma de pratos nobres, como as rarissmas
e caras trufas e o champignon.
Os fungos podem causar os seguintes problemas em seres
humanos: - intoxicao, pela digesto de determinados cogumelos; - alergias, devido ao contato com fungos filamentosos e outros
fungos; - infeces superficiais, tais como sapinho`` causada pela
Cndida ; - infeces subcutneas, como as tinhas ( Microsporum
); - infeces subcutneas, tais como as causadas pelo Sporotrichum
; - infeces pulmonares invasivas, causadas pelo Histoplasma e Aspergillus
MICOSES SUPERFICIAS E DERMATFITOS
Candida albicans: preferncia por reas midas.
Fatores que favorecem uma candidase: uso prolongado de
antibiticos, corticides e anticoncepcionais; desnutrio, senilidade, diabetes, gravidez; uso prolongado de lcool e fumo; contato
permanente com gua e sabo.
Candida albicans - colnias de fungos
Candida albicans
DERMATFITOS: causam doena em estruturas queratinizadas. O Microsporum invade a pele e plos e o Trichophyton, pele,
plos e unhas. Pitirase versicolor: micose superficial causada por
Malassezia furfur .
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Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


O nmero de indivduos no aumenta nesta fase, podendo at
mesmo decrescer, pelo menos em condies de equilbrio. Durante
este perodo verifica-se, por exemplo, a sntese de novas enzimas.
Estas podem ser necessrias sntese de compostos essenciais ao
crescimento e que no se encontrem presentes no meio de cultura
ou para a hidrlise ou metabolizao dos compostos presentes e que
so as nicas fontes de carbono, azoto, etc, a que o organismo no se
encontra adaptado. Esta fase dita de latncia pode ter uma durao
mais ou menos extensa consoante o estado fisiolgico da cultura
usada como inculo e as condies de crescimento. Por exemplo, a
presena de uma % elevada de clulas no-viveis no inculo, um
meio de cultura contendo um nutriente essencial difcil de metabolizar ou a incubao em condies ambientais de stresse a que o organismo no se encontra adaptado, conduzem normalmente a fases de
latncia extensas (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).

DESENVOLVIMENTO MICROBIANO:
MEDIDAS DE CRESCIMENTO MICROBIANO,
CURVA DE CRESCIMENTO MICROBIANO,
CONDIES IDEAIS DE CRESCIMENTO
MICROBIANO.
O crescimento celular esta associado ao aumento do tamanho
de uma clula ou do nmero de clulas, em consequncia da multiplicao celular, ou a ambos. Ocrescimento microbiano ocorre pelo
crescimento em nmero de umadeterminada populaode microrganismo. As bactrias normalmente se reprozuem por fisso inria.
Com o produto da fisso binria, ocorre a formao de duas clulas
individuais, idnticas clula parental A tendncia de crescimento
s pode ser mantida indefinidamente se houver um suprimento ilimitado de nutrientes, ambiente inaltervel e espao ilimitado. Em
ambientes naturais e em condies experimentais nas quais as disponibilidades de nutrientes e de espao sejam limitadas, em um dado
momento algum fator se torna desfavorvel: um nutriente essencial
torna-se escasso (fontes de energia, elementos-trao), produtos txicos do metabolismo acumulam-se em concentraes que inibem a
diviso celular, o espao torna-se limitado, etc. O tempo de gerao
da maioria das bactrias de 1 a 3 horas, mas algumas podem necessitar de mais de 24 horas para cada gerao(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Ocrescimento microbianotem como base a curva que representa o aumento de indivduos de uma populao em determinado
tempo, em sistema fechado ou em batch (cultura em descontnuo). Em condies experimentais, quando se inocula uma populao bacteriana em um frasco contendo uma quantidade inaltervel
de meio de cultura (sistema fechado), o crescimento dessa populao passa por quatro fases caractersticas, dependendo do ponto no
qual o processo do crescimento seja interrompido pelo experimentador. Uma linha de tendncia passando pelos pontos do grfico
uma curva exponencial e cada ponto por onde a curva passa indica
o nmero terico de clulas, em um dado tempo (BIBLIOTECA
UNIVERSITARIA, 2013).
Neste caso, ummeio de cultura lquidocontendo os nutrientes
necessrios ao crescimento celular inoculadocom uma populao
de clulas viveis do microrganismo em causa e incubado em condies ambientais favorveis sua multiplicao (BIBLIOTECA
UNIVERSITARIA, 2013).
Seacompanharmos o crescimento da populaode clulas ao
longo do tempo e representarmos graficamente o logaritmo do nmero de clulas por unidade de volume (ou, da Densidade ptica da
cultura, D.O, ou da concentrao da Biomassa Microbiana, X) em
funo do tempo, obter-se- uma curva caracterstica, como ilustrado na animao, que exibe as vriasfases do crescimento microbiano em descontnuo (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).

Fase exponencial (ou EXP)


Fase na qual o nmero de clulas da populao dobra a cada
gerao. Esta taxa de crescimento no pode ser mantida indefinidamente em um sistema fechado. Aps um determinado perodo
de crescimento exponencial, as condies ambientais tornam-se
desfavorveis pela escassez de nutrientes essenciais, acmulo de
metablitos txicos e limitao de espao. medida que a disponibilidade de nutrientes diminui as clulas se tornam menos capazes
de gerar ATP e a taxa de crescimento se reduz. Durante esta fase,
em que todos os nutrientes esto presentes em excesso, os microrganismos dividem-se e a populao cresce com uma taxa especfica de crescimento mxima que depende do potencial gentico do
microrganismo, da composio do meio de cultura e das condies
de crescimento (temperatura, pH, disponibilidade de gua, etc.) (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Fase de desacelerao
Durante esta fase ocorre um declnio da taxa especfica mxima
de crescimento, em resultado da diminuio para valores limitantes
do crescimento da concentrao de um (ou mais) nutrientes essenciais ao metabolismo celular e/ou do aumento da concentrao de
produtos do metabolismo txicos para as clulas. As clulas continuam metabolizando e se dividindo, mas parte das clulas torna-se invivel e a taxa de diviso celular muito prxima da taxa de
morte celular, o que mantm constante o nmero de clulas viveis
na populao. A curva de crescimento atinge um plat. A durao da
fase estacionria depende do balano entre a taxa de diviso celular
e o nmero de clulas que vo se tornando inviveis (morte celular ou incapacidade de se dividir) devido s condies ambientais
tornarem-se progressivamente desfavorveis (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Fase estacionria
Na fase estacionria o esgotamento de um nutriente essencial
e/ou a acumulao de produtos inibidores do metabolismo leva a
quediviso da populao pare. No entanto, em carncia de nutrientes, as clulas podem manter-se viveis durante perodos de tempo
mais ou menos longos, custa das reservas endgenas, que usam
em processos de manuteno. Contudo, mais cedo ou mais tarde,
verifica-se um declnio da concentrao de clulas viveis durante
a fase de morte celular (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).

Fases do crescimento em descontnuo


Fase de latncia (ou LAG)
Durante o perodo de tempo que se segue inoculao do meio
de cultura, as clulas do microrganismo tm normalmente que se
adaptar ao novo meio.
Didatismo e Conhecimento

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Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Clculo do tempo de gerao ou duplicao, g, de uma populao microbiana em crescimento exponencial

Fase de morte
Durante a fase de morte ocorre a perda irreversvel da capacidade de diviso celular (morte celular). a taxa de morte celular torna-se
maior que a taxa de diviso e o nmero de clulas viveis decresce
exponencialmente at a completa extino da populao. Nesta fase
muitas clulas assumem formas incomuns. Em bactrias formadoras de esporos sobrevivem mais esporos que clulas vegetativas. A
durao desta fase varivel dependendo tanto das caractersticas
genticas da bactria quanto das condies ambientais (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Avaliao quantitativa do crescimento microbiano
Para acompanhar e traar a curva de crescimento de uma populao microbiana, ento necessrio fazer a avaliao quantitativa
da evoluo da concentrao de clulas ao longo do tempo. Esta
pode basear-se em mtodos diretos, como por exemplo:
- contagem de clulas totais;
- contagem de clulas viveis;
- determinao da biomassa seca.
Ou em mtodos indiretos, como o caso da:
- Anlise espectrofotomtrica da Densidade ptica (D.O.) da
cultura
Embora, em teoria, quando o crescimento de uma populao
microbiana equilibrado, o seu acompanhamento possa basear-se na quantificao de qualquer constituinte celular (por exemplo
cidos nucleicos, protenas, lipdios), o crescimento usualmente
acompanhado com base na determinao da Densidade pticada
cultura, daconcentrao de clulas(totais ou viveis) ou damassa
celular(biomassa). A seleo do mtodo a utilizar depende do tipo
de microrganismo e do problema particular em causa (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).

cial)

Tempo

N total de clulas

1,5

2,5

32

32

3,5

64

128

4,5

256

512

5,5

1024

2048

6,5

4096

8192

...

...

10

1048576

(nmero de clulas no inicio do crescimento exponen-

to exponencial)

(nmero de clulas aps 5,5 horas de crescimen-

Com base na equao (2):

ANOTAES
tem-se quen, o nmero mdio de geraes que ocorreram durante as 5,5 horas de crescimento exponencial igual a 10.
Tal significa que o tempo mdio de uma gerao (g) 0.55 h
ou 33 minutos.

Crescimento exponencial
Caracterizao

Ocrescimento exponencialde uma populao microbiana em


suspenso em meio lquido caracterizado pela duplicao do nmero de clulas e, por conseguinte, da massa (biomassa) (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).

Didatismo e Conhecimento

67

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Processo de duplicao de um microrganismo durante a fase
de crescimento exponencial. Aps a duplicao (ou replicao) do
material gentico a clula divide-se para dar uma clula-filha com as
mesmas caractersticas da clula inicial(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).

- estudar o efeito que uma determinada alterao das condies


ambientais exerce sobre o crescimento do microrganismo.
clculo da taxa especfica de crescimento

Cintica do crescimento exponencial


Durante o crescimento exponencial, o nmero de clulas aumentade acordo com uma exponencial de base 2 (verTempo de gerao ou duplicao). De fato, a duplicao de 2 clulas em 4 pode
, a de 4 em 8 expressa como
,
ser expressa como
e por a adiante. Existe pois uma relao entre o nmero de clulas
presentes no incio (tempo zero) do crescimento exponencial e o
nmero de clulas presente aps um perodo tdesse crescimento
exponencial, dada pela seguinte equao(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013):

clulas presentes no incio do crescimento exponencial en o


nmero de geraes que ocorreram durante o perodotde crescimento exponencial. possvel exprimir o parmetronem funo de
, numa populao em crescimento exponencial, com base
na equao(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013):

Fig. 3 - Comparao entre a curva aritmtica (a laranja) e a curva


logartmica (a azul) do aumento do nmero total de clulas ao longo
do tempo durante a fase do crescimento exponencial(BIBLIOTECA
UNIVERSITARIA, 2013).
Para uma populao de clulas emcrescimento exponencial,
se representarmos graficamente os valores do nmero de clulas em
funo do tempo de crescimento, obtm-se uma funo exponencial
(representao aritmticano grfico acima). Esta representada
pela equao (1) (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).:

O tempo de duplicao ou gerao,g, pode ser calculado


comot/n, ondet o tempo de durao (horas ou minutos) do crescimento exponencial eno nmero de geraes ocorridas durante
essa fase do crescimento exponencial (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Com base naavaliao quantitativa do crescimentode uma populao de clulas de um determinado microrganismo, possvel
ao longo do tempot, (como exemconhecer os valores de
plificado na tabela junta). O conhecimento de dados experimentais
deste tipo permite, com base na equao anterior,calcular o tempo
que a populao microbiana demora a duplicar o nmero de clulas, em condies bem definidas, isto , o seutempo de gerao
ou duplicao. tambm possvel, calcular ataxa especfica de
crescimentodo microrganismo em questo (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Ataxa especfica de crescimento,, e otempo de gerao ou
duplicao,g, de uma populao microbiana so parmetros muito
importantes em Microbiologia. Os valores deegdependem da
estirpe microbiana em questo e so fortemente influenciados pelas
condies ambientais e pela composio do meio de cultura. Por
um lado, o seu conhecimento permite prever como evoluir a concentrao de um microrganismo ao longo do tempo de crescimento
exponencial. Por outro lado, so parmetros que do indicao sobre
a resposta do microrganismo s diversas condies ambientais incluindo a modificao do meio de cultura(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
O clculo dos valores degede um dado microrganismo, em
condies de cultura diferentes, til, por exemplo, para:
- selecionar ascondiesde culturatimaspara o crescimento
desse microrganismo;
Didatismo e Conhecimento

(1)
- que traduz o carcter exponencial do crescimento microbiano,
a concentrao de clulas no tempo e
a concene onde
trao de clulas no inicio do crescimento exponencial.
Se aplicarmos logaritmos naturais de um e do outro lado da
equao (1), obtm-se(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).:
(2)
- onde ataxa especfica de crescimento do microrganismoem causa, nas condies de crescimento testadas (as suas uni,
). Este padades so o inverso do tempo; por exemplo
rmetro do crescimento, que reflete a sua cintica, corresponde ao
declive da recta que resulta da representao grfica do logaritmo
natural do nmero de clulas em funo do tempo (representao
logartmicano grfico acima).
A taxa especfica de crescimento est relacionada com o nmero de geraes (ou o tempo de cada gerao) que ocorrem por unidade de tempo numa cultura em crescimento exponencial. De fato,
quanto maior for a taxa especfica de crescimento, mais rapidamente
se divide a populao, maior o nmero de geraes que ocorrem
no mesmo perodo de tempo e menor o tempo de cada gerao.
68

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


A partir dos resultados de uma experincia de crescimento
como os apresentados, possvel calcular o valor da taxa especfica
de crescimento da populao microbiana.

Esses biofilmes so constitudos por uma comunidade estruturada de clulas aderentes a uma superfcie inerte (abitica) ou viva
(bitica), embebidas numa matriz deexopolissacrido. A associao
dos organismos em biofilmes constitui uma forma de proteo ao
seu desenvolvimento, fomentando relaes simbiticas e permitindo a sobrevivncia em ambientes hostis (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Em ecossistemas aquticos, mais de 99,9% das bactrias crescem em biofilmes associadas a uma grande variedade de superfcies.
No Homem, a variedade de infeces bacterianas crnicas envolvendo biofilmes bastante significativa, podendo estas ser causadas por uma nica ou mais espcies (consultar o tpicoFormao
de biofilmes e envolvimento em infeces humanas). Os biofilmes
mais comuns na natureza so hetergeneos, compostos por duas ou
mais espcies, podendo os produtos do metabolismo de uma espcie
auxiliar o crescimento das outras e a adeso de uma dada espcie
fornecer ligandos que promovem a ligao de outras. Inversamente, a competio pelos nutrientes e a acumulao de metabolitos
txicos produzidos pelas espcies colonizadoras podero limitar a
diversidade de espcies num biofilme (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Atravs de tcnicas microscpicas, tem sido possvel observar
a grande heterogeneidade espacial dos biofilmes, em que coexistem
clulas em diferentes estados fisiolgicos. Esta heterogeneidade
constitui uma importante estratgia de sobrevivncia porque essas
clulas tero maior probabilidade de sobreviver a agresses externas
(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).

Assim, se considerarmos os resultados experimentais apresentados na tabela acima (representados graficamente na figura acima),
o valor da taxa especfica de crescimento,, pode ser calculado com
base numa anlise de regresso linear dos valores delnNtetcorrespondentes fase de crescimento exponencial. O valor decorresponde aodecliveda recta representada pela equao (2) (no
de esperar que os resultados experimentais se possam alinhar sobre a recta representada). Uma estimativa mais grosseira do valor
depode ser obtida do seguinte modo (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).:

Etapas de desenvolvimento de um biofilme


1. Adeso a uma superfcie
O padro de desenvolvimento de um biofilme envolve vrias
etapas: a adeso inicial superfcie, seguida da formao de microcolnias e, na maioria dos casos, a diferenciao das microcolnias
em macrocolnias envolvidas numa matriz de exopolissacrido, formando biofilmes maduros (figura 1).

Ataxa especfica de crescimentoe otempo de duplicao ou


geraode uma populao microbiana esto intimamente relacionados entre si e o valor de um pode ser calculado a partir do conhecimento do valor do outro, com base na equao (3) (BIBLIOTECA
UNIVERSITARIA, 2013).:
(3)
que se obtm por substituio de
= 2
duplicao celular) et = gna equao (2)).

(que traduz uma

Crescimento microbiano em biofilmes

Fig. 1 - Representao esquemtica das vrias etapas de desenvolvimento de um biofilme de acordo com o modelo aceite
para Pseudomonas aeruginosa(adaptado de Ghigo et al., 2003)
(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013)..

A maior parte da actividade bacteriana na natureza ocorre, no


com as clulas individualizadas, mas com as bactrias organizadas
em comunidades sob a forma de um biofilme.
Didatismo e Conhecimento

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Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


A adeso de uma bactria a uma superfcie abitica , geralmente, mediada por interaes inespecficas (e.g., foras hidrofbicas), enquanto que a adeso a um tecido vivo ou desvitalizado
normalmente mediada por mecanismos moleculares especficos de
ancoragem, nomeadamente atravs de letinas, ligandos ou adesinas. A adeso primria de um organismo a uma superfcie um processo reversvel que envolve a aproximao deste superfcie, de
forma aleatria ou atravs de mecanismos de quimiotaxia e de mobilidade (etapa I da figura 1). Quando o microrganismo atinge uma
proximidade crtica da superfcie, a ocorrncia de adeso depende
do balano final entre foras atrativas e repulsivas (e.g. interaes
eletrostticas e hidrofbicas, foras de Van der Waals, impedimento
estereoqumico, etc) geradas entre as duas superfcies. A repulso
entre duas superfcies pode ser ultrapassada atravs de interaes
moleculares especficas mediadas por adesinas, que so protenas
localizadas em estruturas que irradiam da superfcie celular. Foi
ainda demonstrado que os mecanismos de mobilidade das clulas,
dependentes depilisuperficiais e doflagelo polarso fundamentais
no processo de iniciao de um biofilme(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).

Com a ausncia de nutrientes e/ou de oxignio ou dificuldades


na sua difuso, a diminuio do pH e a acumulao de metabolitos
secundrios txicos, inicia-se um processo de morte celular junto
superfcie e subsequente desintegrao do biofilme(BIBLIOTECA
UNIVERSITARIA, 2013).

MEIOS DE CULTURA: CLASSIFICAO,


FUNES E PREPARAO;
Nos habitats naturais, os microrganismos crescem frequentemente em populaes mistas mais ou menos complexas, que incluem vrias espcies microbianas. Contudo, para estudar um dado
microrganismo, necessrio obter a uma populao de clulas desse
microrganismo em cultura pura ou axnica. Assim, o isolamento
de um determinado microrganismo a partir de populaes mistas,
a manuteno e conservao de culturas purase o crescimento de
populaes microbianas purasemmeios de culturalaboratoriais
so tcnicas bsicas e essenciais emMicrobiologia (BIBLIOTECA
UNIVERSITARIA, 2013).
Os microrganismos so ubquos, isto , esto presentes em todo
o lado. Por isso, para obter e manter uma cultura pura essencial
evitar que outros microrganismos (contaminantes), entrem em contacto com ela (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Os meios de cultura so classificados quanto ao estado fsico
em slidos, quando contm agentes solidificantes, principalmente
gar (cerca de 1 a 2,0 %); semi-slidos, quando a quantidade de gar
e ou gelatina de 0,075 a 0,5 %, dando uma consistncia intermediria, de modo a permitir o crescimento de microrganismos em tenses variadas de oxignio ou a verificao da motilidade e tambm
para conservao de culturas; e lquidos, sem agentes solidificantes,
apresentando-se como um caldo, utilizados para ativao das culturas, repiques de microrganismos, provas bioqumicas, dentre outros.
Os meios de cultura (preparaes slidas, lquidas ou semi-slidas que contm todos os nutrientes necessrios para o crescimento de microrganismos) so utilizados com a finalidade decultivaremantermicrorganismos viveis no laboratrio, sob a forma de
culturas puras (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Os meios de cultura devem ter na sua composio, osnutrientes indispensveis ao crescimento do organismo em questo, sob
forma assimilvel e em concentrao no inibitria do crescimento.
Alm disso, aps a sua preparao, cada meio de cultura deve ser
submetido a esterilizao, por forma a eliminar qualquer organismo
vivo contaminante (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Por outro lado, para manter umacultura pura, necessrio que
o meio de cultura que se pretende utilizar seja mantido desprovido de qualquer organismo vivo contaminante. Para a preveno de
contaminaes durante a manipulao de culturas puras recorre-se
atcnicas de assepsia (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
De um ponto de vista geral, os meios de cultura podem ser
classificados tendo em conta o seuestado fsico, a suacomposio
qumicae osobjetivos funcionaisa que se destinam (BIBLIOTECA
UNIVERSITARIA, 2013).
A especificidade dos meios de cultura muito importante, nomeadamente no isolamento e identificao de certos microrganismos (por exemplo, no isolamento de microrganismos do solo) ou
emtestes de sensibilidade a antibiticosou na anlise microbiolgica de guas, de alimentos, etc (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA,
2013).

Maturao do biofilme
Aps a adeso primria, as clulas fracamente ligadas consolidam o processo de adeso produzindo exopolissacridos que complexam os materiais da superfcie e os receptores especficos localizados nos flagelos,Pili ou fmbrias. Na ausncia de interferncia
mecnica ou qumica, a adeso torna-se, nesta fase, irreversvel (etapa II da figura 1). Durante este estgio de adeso, os microrganismos
individualizados ou planctnicos podem colar-se uns aos outros,
formando agregados na superfcie a que aderem. Aps a adeso irreversvel da bactria superfcie, inicia-se o processo de maturao
do biofilme (etapas III e IV da figura 1). A densidade e complexidade do biofilme aumenta medida que as clulas se dividem (ou
morrem) e os componentes extracelulares gerados pelas bactrias
interagem com molculas orgnicas e inorgnicas do ambiente circundante para formar o glicoclix. Nesta fase, os biofilmes tornam-se altamente hidratados, formando-se estruturas abertas compostas
por 73 a 98% de material no celular, incluindo exopolissacrido e
canais por onde circulam os nutrientes (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
O crescimento de qualquer biofilme limitado pela disponibilidade de nutrientes no ambiente circundante e pela sua propagao
a clulas localizadas no interior do biofilme. Factores como o pH,
difuso de oxignio, fonte de carbono e osmolaridade controlam
tambm a maturao do biofilme Quando completamente maduro, o
biofilme funciona como um consrcio funcional de clulas, com padres de crescimento alterados, cooperao fisiolgica e eficincia
metablica. Nesta fase, as clulas localizadas em regies diferentes
do biofilme exibem diferentes padres de expresso gentica (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Ruptura do biofilme
Quando o biofilme atinge uma determinada massa crtica e o
equilbrio dinmico alcanado, as camadas mais externas do biofilme comeam a libertar clulas em estado planctnico, que se podem
rapidamente dispersar e multiplicar, colonizando novas superfcies e
organizando novos biofilmes em novos locais (etapa V da figura 1).
Didatismo e Conhecimento

70

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Estado fsico dos meios de cultura

Meios diferenciais permitem a distino entre diferentes grupos de microrganismos com base na capacidade de metabolizar componentes especficas do meio de cultura ou na morfologia (aparncia) das colnias. Permitem, por vezes, a identificao de microrganismos com base nas suas caractersticas biolgicas(BIBLIOTECA
UNIVERSITARIA, 2013).
Exemplo: meio Agar de sangue, que permite a distino entre bactrias hemolticas e no-hemolticas. O padro de hemlise
(dos glbulos vermelhos de sangue) no meio agar de sangue permite
destinguir bactrias, tais comoStreptococcus pyogenes(causadora
da faringite) que causa a lise completa dos glbulos vermelhos do
sangue produzindo halos transparentes volta das colnias,Streptococcus mutans(causa crie dentria), que no hemoltica, eStreptococcus pneumoniae(causadora de pneumonia bacteriana) que
lisa parcialmente os glbulos vermelhos do sangue(BIBLIOTECA
UNIVERSITARIA, 2013).

Ummeio de cultura lquidocontem todos os nutrientes necessrios ao crescimento do microrganismo, dissolvidos em gua.
Uma vez preparado, este pode ser inoculado com uma cultura pura
do microrganismo que se pretende cultivar e ser colocado a incubar
em condies timas (temperatura e arejamento) para o crescimento do microrganismo em causa (animao abaixo) (BIBLIOTECA
UNIVERSITARIA, 2013).
Por forma a averiguar o grau de pureza do inculo preparado,
recorre-se, normalmente, transferncia de uma amostra do inculo
para a superfcie de ummeio de cultura slidocom a mesma composio, contido numa placa de Petri (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Os meios de cultura slidos so preparados a partir da adio,
ao meio lquido correspondente, de um agente solidificante (oagarcom uma concentrao de cerca de 1.5-2% p/v), antes da esterilizao do meio (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Os meios de cultura podem ainda ter um estado fsico intermdio (semi-slido), que obtido atravs da adio de uma quantidade
reduzida de agente solidificante (0.3 a 0.5% de agar). A consistncia
menos firme destes meios permite a mobilidade de microrganismos
que sejam mveis(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).

Cultura pura ou axnica


A cultura pura de um dado microrganismo uma cultura de
clulas gentica e morfologicamente idnticas. A imobilizao das
clulas num meio slido torna possvel a visualizao do crescimento em massas celulares isoladas denominadascolnias. As colnias
microbianas so caracterizadas por uma forma e tamanho que depende do prprio organismo, de condies ambientais como sejam:
da quantidade de oxignio e de nutrientes disponveis no meio de
cultura e de outros parmetros fisiolgicos(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Para obter uma cultura pura podem ser usadas as tcnicas de:
- riscado em meio slido
- espalhamento em meio slido
- incorporao

Composio qumica
A composio de um dado meio de cultura est dependente da
espcie que se pretende cultivar. O conhecimento do habitat natural
de um dado microrganismo muitas vezes til na seleo do meio
de cultura adequado, j que as suas necessidades nutricionais refletem esse mesmo habitat.
Em microbiologia so utilizados basicamente dois tipos de
meios de cultura:
Meios de cultura sintticosou definidos meios de cultura cuja
composio qumica perfeitamente conhecida.

Riscado em meio slido


Aps recolha do inculo com a ponta da ansa, este espalhado
na superfcie do meio de cultura slido (contido em placas de Petri
ou tubos de vidro), riscando a superfcie com a ponta da ansa contendo o inculo, tal como ilustrado na figura abaixo. A ansa deve ser
esterilizada sempre que se mude de direo, por forma a ir reduzindo
o nmero de clulas presentes no inculo(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Este mtodo permite o isolamento e obteno de culturas puras
atravs do isolamento de colnias.

Meios de cultura complexos- meios de cultura cuja composio exata desconhecida. Como componentes apresentam
ingredientes como peptonas, cuja formula no conhecida. Um
exemplo deste tipo de meios omeio LBque um meio rico apropriado ao cultivo de diversos microrganismos, em particular de
bactrias(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Classificao funcional dos meios de cultura

Espalhamento em meio slido

Os meios de cultura podem ser usados na seleo e crescimento de um determinado microrganismo ou na identificao de uma
espcie em particular. Desta forma, a funo de um dado meio depende da sua composio. O isolamento de uma determinada estirpe
microbiana pode ser feito atravs do recurso e/ou combinao dos
seguintes tipos de meios:
Meios seletivos suprimem o crescimento de determinados
microrganismos em benefcio de outros.
Exemplo: meio seletivo para pesquisa de coliformes, utilizado
na anlise microbiolgica de guas: os meios complexos que permitem o isolamento de coliformes (enterobactriasGramnegativas)
so suplementados com sais biliares ou com o sal lauril-sulfato de
sdio, que actuam como agentes inibidores do crescimento de bactriasGram positivas(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
Didatismo e Conhecimento

Neste mtodo, aps diluio apropriada da amostra, so espalhados superfcie do meio slido, 0.1 ml da amostra, com o auxlio de
uma vareta de vidro em L, previamente esterilizada(BIBLIOTECA
UNIVERSITARIA, 2013).
As placas so posteriormente incubadas, em posio invertida em atmosfera e temperatura adequadas, at ao aparecimento de
colnias(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
A observao das colnias obtidas superfcie de um meio de
cultura slido permite avaliar o grau de pureza de uma dada cultura.
A presena de mais de um tipo de colnias na mesma placa indica
que a cultura original no estava pura, ou seja, que se encontrava
contaminada com outro microrganismo(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
71

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Incorporao

Manuteno em rampas de meio slido


A cultura semeada com o auxlio de uma ansa em meio agarizado apropriado contido em tubos de ensaio rolhados, e, em seguida,
incubada em condies timas de crescimento para o microrganismo
em causa. Os tubos so depois guardados a 4C durante semanas ou
meses, dependendo do microrganismo a conservar(BIBLIOTECA
UNIVERSITARIA, 2013).

No mtodo por incorporao, a amostra diluda pipetada diretamente sobre a placa de Petri e s depois adicionado o meio
de cultura slido apropriado, no estado liquefeito. Neste mtodo,
obtm-se colnias superfcie e no interior do agar(BIBLIOTECA
UNIVERSITARIA, 2013).
Em todos os mtodos, as placas devem ser incubadas em posio invertida. A temperatura e tempo de incubao dependem do
microrganismo em causa(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).

Congelao

Isolamento e cultivo de microrganismos


O estudo dos microrganismos est muitas vezes dependente da
possibilidade de cultivar e manter microrganismos viveis no laboratrio, sob a forma de culturas puras(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).
So preparadas suspenses de uma cultura pura do microrganismo em causa, em meio estril contendo glicerol, e armazenadas em
arcas congeladoras especiais (que permitem uma temperatura igual
ou inferior a 70C) ou em azoto lquido (-196C) (BIBLIOTECA
UNIVERSITARIA, 2013).
Muitos microrganismos podem ser mantidos viveis durante
anos, se congelados temperatura de 70C ou a temperaturas inferiores.

As necessidades nutricionais especficas dos microrganismos


variam de espcie para espcie, sendo possvel distinguir vrios grupos nutricionais de microrganismos. Com o conhecimento dos nutrientes necessrios ao crescimento dos microrganismos, possvel
a formulao demeios de cultura que promovam o crescimento de
um determinado microrganismo no laboratrio.
Oisolamentode um determinado microrganismo em cultura
pura a partir de uma populao mista (por exemplo, presente numa
amostra de solo, na gua de um rio, num esgoto, num alimento ou
tecido contaminado, etc.) envolve, em geral, o uso demeios de
cultura slidose o recurso atcnicas de isolamento de colnias,
como seja pelomtodo de espalhamento em placa, ilustrado na
animao ao lado. Este mtodo permite obtercolnias individualizadas e espacialmente separadas que, teoricamente, so originadas a
partir de uma nica clula, correspondendo, por isso, a uma cultura
pura de um microrganismo particular(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).

Liofilizao
As culturas de microrganismos podem ser conservadas temperatura ambiente no laboratrio durante anos, aps o seu tratamento
por liofilizao. Este processo consiste na congelao da suspenso
de clulas a temperaturas baixas (tipicamente, 20C), seguida da
sua sujeio a presso muito reduzida (ex. 0.005 atmosferas), o que
permite a sublimao da gua (passagem do estado slido ao estado
gasoso) e assim a desidratao das clula(BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).

Sabe-se, contudo, que cerca de 90% a 99% do nmero total de


microrganismos que existem no Ambiente (por exemplo, no solo,
gua ou ar) no so cultivveis em meios de cultura e outras condies laboratoriais conhecidos. Este fato tem limitado a possibilidade
de serem isolados, a partir do Ambiente, microrganismos com potencial interesse para aplicaes biotecnolgicas. Contudo, presentemente, em consequncia do grande desenvolvimento das tcnicas
da Biologia Molecular nas ltimas dcadas, o microbiologista pode
identificar e estudar os microrganismos com base na anlise direta
das suas macromolculas (em particular do seu DNA), sem que seja
necessrio isol-los em meios de cultura laboratoriais. Entre as tcnicas da Biologia Molecular que permitem este progresso salienta-se a Reaco em Cadeia da Polimerase (PCR Polymerase Chain
Reaction) (BIBLIOTECA UNIVERSITARIA, 2013).

INDICADORES BIOLGICOS;
Os indicadores biolgicos fazem parte da importante tarefa de
monitorizao do processo de esterilizao, oferecendo maior confiabilidade ao processo. So testes que vm em tubos plsticos com
tampa permevel ao vapor, com uma fita impregnada com uma populao conhecida de esporos, separada do meio nutriente (lquido
roxo), por uma ampola de vidro.
O termo indicador biolgico (ou biomarcador) utilizado em
sentido lato para representar qualquer medida que reflita uma interao entre um sistema biolgico e um agente ambiental, quer este seja
qumico, fsico ou biolgico (PRISTA; UVA, 2007)

Manuteno de microrganismos viveis no laboratrio


Vrias metodologias permitem a manuteno de culturas viveis no laboratrio durante perodos de tempo mais ou menos longos, nomeadamente:
Didatismo e Conhecimento

72

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


TIPOS DE INDICADORES BIOLGICOS

Leitura do Resultado: Se o processo de esterilizao no for


realizado corretamente o meio indicador mudar da cor prpura para
a cor amarela logo aps a incubao a 56C +/- 2C, indicando dessa
maneira a presena de esporos vivos de Geobacillus Stearothermophilus. Se o processo de esterilizao for correto o meio indicador
permanecer da cor prpura, devendo se realizar a leitura final depois de transcorridas 24 horas do incio da incubao.

INDICADORES BIOLGICOS LEITURA RPIDA PARA VAPOR


Indicado no controle rpido e confivel dos processos de esterilizao a vapor.
Composio: O Indicador contm uma populao de esporos
de Geobacillus stearothermophilus ATCC 7953, embebidos em uma
tira de papel filtro, dentro de um tubo plstico. Dentro do tubo se
encontra uma ampola de vidro selada hermeticamente, contendo um
meio de cultura especialmente desenvolvido para o crescimento microbiolgico.
Descrio do Produto: Os Indicadores Biolgicos auto-contidos de Leitura Rpida foram desenvolvidos para o controle rpido
e confivel dos processos de esterilizao a Vapor. A caracterstica
inovadora deste sistema de Leitura Rpida consiste em uma formulao especial do meio de cultura que permite a rpida identificao
de um produto fluorescente. Isso resultado da atividade da alfa-glucosidase, enzima presente no microorganismo, que catalisa a
ruptura de um substrato no fluorescente. Esta Enzima sintetizada
durante a germinao das esporas de Geobacillus Stearothermophilus. Cada ampola possui um rtulo externo que informa o lote, a data
de fabricao, validade do produto e tambm possui campos para
identificao do processo de esterilizao, alm de um indicador
qumico de processo (Classe 1) que permite diferenciar as ampolas
processadas das no-processadas. Os Indicadores Biolgicos podem
ser introduzidos na cmara de esterilizao junto com os artigos a
serem esterilizados, em um pacote apropriado de acordo com as prticas recomendadas de esterilizaes. Os Indicadores Biolgicos se
encontram devidamente certificados por espcie, populao, pureza
e resistncia (Valor D, Valor Z e dados de sobrevida e mortalidade).

INDICADORES BIOLGICOS PARA ETO


Os indicadores biolgicos para xido de etileno tem papel fundamental no processo de esterilizao, pois so os nicos controles
capazes de certificar a morte efetiva dos microorganismos. Recomendado para centrais de esterilizao e hospitai
Quando Utilizar: Diariamente, em todos os processo de esterilizao
Composio: Cada Tubo contm uma populao de esporos de
Bacillus atrophaeus ATCC 9372 embebidos em uma tira de papel.
Possui, alm disso, um meio indicador de crescimento contido na
ampola de vidro.
Descrio do Produto: Indicador Biolgico do tipo auto-contido, com tempo de resposta de no mximo 48 horas, para controle biolgico dos processos de esterilizao a xido de Etileno. A
tira contendo esporos est armazenada em uma ampola plstica que
tambm acondiciona uma ampola de vidro contendo um caldo nutriente prprio para o cultivo dos microorganismos. A ampola plstica fechada por uma tampa verde perfurada e protegida por um
papel de filtro hidrofbico. Cada ampola possui um rtulo externo
que informa o lote e a data da fabricao do produto, contendo campos para identificao da ampola e um indicador qumico externo
que diferencia as ampolas processadas das no-processadas.

Incubao e Leitura: pode-se obter uma deteco preliminar


dos resultados positivos em intervalos de tempos cabveis anteriores
s 3 horas, por exemplo, em 1 e 2 horas. A leitura final negativa do
Indicador Biolgico processado se d em 3 horas. Aps a obteno da leitura definitiva, a ampola de Indicador Biolgico pode ser
descartada. Por se tratar de um teste de dupla leitura, o Indicador
processado e o controle piloto podem ser submetidos a processo de
Incubao adicional a 60C (2C) para obteno do resultado atravs da mudana de cor devido a alterao do pH.

Leitura do Resultado: Se o processo de esterilizao no for


realizado corretamente o meio indicador mudar da cor Azul para a
cor Amarela logo aps a incubao a 37C +/- 2C, indicando dessa
maneira a presena de esporos vivos de Bacillus atrophaeus. Se o
processo de esterilizao for correto o meio indicador permanecer
da cor Azul, devendo se realizar a leitura final depois de transcorridas 48 horas do incio da incubao.

INDICADORES BIOLGICOS PARA VAPOR

CONTROLE DOS MICRORGANISMOS:


MTODOS FSICOS DE CONTROLE: CALOR
SECO, CALOR MIDO, PASTEURIZAO,
RADIAES, FILTRAO;

Composio: Cada Tubo contm uma populao de esporos


de Geobacillus Stearothermophilus ATCC 7953 embebidos em uma
tira de papel. Possui, alm disso, um meio indicador de crescimento
de cor prpura contido na ampola de vidro.
Descrio do Produto: Indicador Biolgico do tipo auto-contido, com tempo de resposta de no mximo 24 horas, para controle biolgico dos processos de esterilizao a vapor saturado em
autoclaves gravitacionais ou a vcuo. A tira contendo esporos est
armazenada em uma ampola plstica que tambm acondiciona uma
ampola de vidro contendo um caldo nutriente prprio para o cultivo
dos microorganismos. A ampola plstica fechada por uma tampa
marrom perfurada e protegida por um papel de filtro hidrofbico.
Cada ampola possui um rtulo externo que informa o lote e a data
da fabricao do produto, contendo campos para identificao da
ampola e um indicador qumico externo que diferencia as ampolas
processadas das no-processadas.
Didatismo e Conhecimento

Os microrganismos podem ser encontrados em todo o lado. Por


isso, de modo a obter e manter uma cultura pura, necessrio assegurar a ausncia de quaisquer organismos indesejveis (contaminantes). Para tal, o microbiologista recorre esterilizao do meio
de cultura e utilizatcnicas de assepsia, que evitam a ocorrncia
de contaminaes durante a manipulao de culturas puras e meios
de cultura estreis.
O controlo do crescimento microbianopode ser efectuado
quer atravs da inibio do crescimento quer da induo da morte
dos microrganismos viveis.
73

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Osagentes antimicrobianosque destroem ou tornam bactrias
ou fungos inviveis so designados bactericidas ou fungicidas. Por
outro lado, os agentes que inibem o crescimento bacteriano ou de
fungos so bacterostticos ou fungistticos.
O controlo do crescimento microbiano pode ser alcanado
por descontaminao, desinfecoeesterilizao, podendo ser
usados tanto mtodos fsicos comoqumicos.
Mtodos Fsicos
A esterilizao de qualquer material ou equipamento consiste
na destruio ou remoo de todas as formas de vida, patognicas
ou no, a ele associadas.
Para a obteno e manuteno de uma cultura pura, recorre-se
tanto esterilizao do meio de cultura como do material de laboratrio a utilizar no seu manuseamento.
Entre osagentes fsicosde esterilizao, utilizam-se, principalmente, ocalor, afiltraoe aradiao(por exemplo, radiao
no-ionizante, como a Ultra-Violeta, eradiaoionizante, como os
raios X e os raios ).

Fig. 2 - Placas depois de autoclavadas.


A utilizao decalor em ambiente mido um dos mtodos
mais eficazes de destruio de microrganismos.
A morte das clulas microbianas por ao docalor midoresulta da desnaturao das protenas e da destabilizao da membrana
citoplasmtica. Ocorre quando as clulas so sujeitas a temperaturas
superiores temperatura mxima de crescimentodos microrganismos em causa.
A esterilizao por calor mido efetuada em autoclave (figura 1), que consiste numa cmara com vapor de gua saturado
presso de 1 atm acima da presso atmosfrica, a que corresponde,
em locais ao nvel do mar, uma temperatura de ebulio da gua de
121C. No laboratrio de Microbiologia, usual sujeitar o material
a esterilizar a 121C (1 atm; presso relativa) durante 15 minutos, de
modo a assegurar a morte de todas as formas de vida microbianas,
incluindo a dos endsporos bacterianos, mais resistentes ao calor
que as clulas vegetativas. Contudo, o tempo necessrio para se esterilizar convenientemente os materiais, a esta temperatura, depende
da natureza do material a esterilizar e/ou do seu volume.
O calor mido sob presso utilizado na esterilizao de meios
de cultura que no contenham componentes termolbeis e na esterilizao de material de plstico e de vidro a utilizar nos trabalhos
experimentais de Microbiologia.

Esterilizao pelo calor: autoclavagem

Fervura
O mecanismo de ao da fervura a desnaturao de protenas.
No um mtodo de esterilizao, mas aps cerca de 15 minutos
de fervura pode matar uma grande quantidade de microorganismos,
mas no eficaz contra endsporos bacterianos e alguns vrus. Normalmente este mtodo utilizado em desinfeces caseiras, preparo
de alimentos, etc.
tambm usado nadescontaminaode roupas e instrumentos mdicos e cirrgicos, assim como de diversos materiais, reutilizveis ou descartveis, contaminados com culturas declulas viveis, antes de serem lavados ou colocados no lixo.
Pasteurizao
O mecanismo de ao da pasteurizao tambm a desnaturao de protenas. Este mtodo foi desenvolvido por Louis Pasteur
em 1846. Consiste em aquecer o produto em uma determinada temperatura, por um certo tempo e logo aps, resfri-lo. Este processo
reduz o nmero de microorganismos, mas no assegura sua esterilizao. Muito utilizado na esterilizao de leite, creme de leite,
cerveja, vinho, etc.

Fig. 1 - Esterilizao por calor mido em autoclave


Didatismo e Conhecimento

74

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Calor Seco

Para alm de ser utilizada para esterilizar solues, a filtrao


atravs de membranas filtrantes pode tambm ser utilizada para concentrar clulas microbianas a partir de volumes grandes de amostras
lquidas, como acontece na anlise bacteriolgica de guas.

a) Flambagem
um mtodo simples, porm muito eficaz. Consiste em colocar
a ala de platina diretamente sobre o fogo, oxidando todo o material
at virar cinzas.
b) Incinerao
Tambm muito eficaz. Utilizado para incinerar diversos tipos
de materiais, como papis, materiais hospitalares, carcaas de animais, etc. Tambm oxida todo o material at virar cinzas.
c) Fornos
Normalmente utilizado para esterilizar vidrarias. Deve-se
atentar bem relao tempo x temperatura.

O ar que circula emcmaras de fluxo laminar de segurana


biolgica(Fotografia abaixo) ou em salas limpas frequentemente sujeito a filtrao atravs de filtros de elevada eficincia (High
Efficiency Particle Air HEPA- Filter) que permitem a reteno de
pelo menos 99,999% das clulas e esporos microbianos ou outras
partculas presentes no ar.

Radiaes
Dependem do comprimento de onda, da intensidade, da durao e da distncia da fonte para esterilizar.
Ionizantes
Utilizam radiaes gama, mas tem um custo elevado. Formam
radicais superativos e destroem o DNA. Utilizado para esterilizao
de produtos cirrgicos.

Fig. 3 - Aspecto exterior de uma cmara de fluxo laminar onde


feita a esterilizao do ar por filtrao de modo a deixar o seu ambiente interior estril.

No-ionizantes
A mais empregada a luz ultravioleta, que altera o DNA atravs da formao de dmeros. As lmpadas germicidas so de baixo
poder de penetrao.

TCNICAS DE DIAGNSTICO DE DOENAS


CAUSADAS POR BACTRIAS: ELISA,
FIXAO DO COMPLEMENTO, REAO EM
CADEIA DA POLIMERASE.

Esterilizao por filtrao

Oteste de ELISA(do inglsEnzyme Linked ImmunonoSorbent Assay) baseia-se em reaes antgeno-anticorpo detectveis por
meio de reaes enzimticas (teste imunoenzimtico).

Fig. 1 - Sistemas de filtrao usados para a esterilizao por


filtrao.

A enzima mais comumente usada nesta prova a peroxidase,


responsvel por catalisar a reao de desdobramento da gua oxigenada (H2O2) em H2O mais O2 (TESTE ELISA, 2013).

A filtrao envolve a remoo de clulas de microrganismos de


solues lquidas ou de gases atravs do atravessamento demembranas filtrantes. Estas podem ser de vrios materiais (mais vulgarmente, acetato de celulose ou de policarbonato) e tm dimetros de
poro muito pequenos (usualmente 0,2 m) onde as clulas microbianas ficam retidas.
Esta tcnica muito utilizada em laboratrios de Microbiologia para esterilizar meios de cultura com componentes que possam
sofrer alterao por aco do calor (p.ex. vitaminas, antibiticos,
acares, aminocidos) e na indstria farmacutica para esterilizao de solues de vitaminas, de agentes quimioteraputicos, soro
etc.. Contudo, a maior parte dos vrus so suficientemente pequenos
para atravessarem os poros destas membranas filtrantes, pelo que
esta tcnica no assegura a esterilidade total das solues ou gases
filtrados.

Existem diversos tipos de testes de ELISA. O modelo mais


simples conhecido como ELISA indireto, onde um antgeno que
encontra-se aderido a um suporte slido (placa de ELISA) preparado e, em seguida, colocado sobre os soros que esto sendo testados,
em busca de anticorpos contra o antgeno. Caso estejam presentes
anticorpos no soro, especficos para o antgeno em questo, haver a formao da ligao antgeno-anticorpo que, por conseguinte,
detectada pela adio de um segundo anticorpo dirigido contra
imunoglobulinas da espcie que est sendo pesquisada, a qual ligada a peroxidase. Este anticorpo anti-IgG, ligado enzima recebe
o nome de conjugado. Quando adiciona-se o substrato apropriado
para a enzima (ou seja, H2O2dissolvida em uma substncia qumica
eu d uma reao colorida quando H2O2 desdobrada), os locais
onde ocorre a reao antgeno-anticorpo, que apresentam uma colorao caracterstica, sendo que esta colorao varia de acordo com o
substrato (TESTE ELISA, 2013).

Didatismo e Conhecimento

75

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Existe tambm um mtodo denominado ELISA de bloqueio
ou competio, onde a presena de anticorpos em determinado
soro observada devido competio com um anticorpo especfico
(mono ou policlonal) voltado ao antgeno (TESTE ELISA, 2013).
O teste de ELISA responsvel pela deteco de diferentes doenas infecciosas, uma vez que a maioria dos agentes patolgicos
leva produo de imunoglobulinas. Tambm pode ser utilizado
no diagnstico de doenas auto-imunes ou alergias(TESTE ELISA,
2013).
Este mtodo de diagnstico o de eleio para a deteco do
vrus HIV. Estes testes at a sua terceira gerao s detectavam a
presena de anticorpos (IgG e IgM) trs ou quatro semanas aps o
contato. Todavia, os testes de quarta gerao j detectam tanto anticorpos quanto um dos antgenos do HIV, a protena p24, fato esse
que reduziu sensivelmente o perodo de janela imunolgica, podendo chegar a apenas duas semanas (TESTE ELISA, 2013).

- Exemplos na Medicina Humana: diagnstico sorolgico da


Doena de Chagas e da SIDA/AIDS(SOARES, 2010)
- Exemplos na Medicina Veterinria: diagnstico da LinfadeniteCaseosa e da Leishmaniose.
- OBS: No deve-se detectar IgM por esta tcnica devido ao
do fator reumatide. O fator reumatide um auto-anticorpo geralmente da classe IgM, especfico para IgG. Este fator encontra-se
elevado em algumas situaes, particularmente nas doenas reumticas. Tal anticorpo pode se ligar na IgG especfica (contra o antgeno teste), presente no soro do paciente, gerando assim um resultado
falso positivo caso se use um conjugado anti-IgM, como no ELISA
indireto. Para mensurao de IgM, deve-se utilizar o ELISA de captura (SOARES, 2010).
ELISA SANDUCHE
1) Um Ac conhecido adicionado placa e se liga sua superfcie
2) Lavagens so feitas para retirar os Ac livres
3) Adiciona-se a soluo com o Ag a ser pesquisado e este, caso
presente, se liga aos Ac nos poos
4) Realiza-se lavagens para retirar o Ag no capturado
5) Adiciona-se conjugado especfico para o Ag procurado
6) Novas lavagens retiram o conjugado livre
7) O cromgeno e o substrato so adicionados, e se o cromgeno for oxidado pela ao da reao enzimtica, haver desenvolvimento de cor Antgeno Conjugado / Anticorpo Cromgeno (SOARES, 2010)

Principais tipos
- INDIRETO: detecta principalmente Ac
- SANDUCHE: detecta principalmente Ag
- COMPETIO: detecta Ag com baixo peso molecular (monovalentes)
- CAPTURA: deteco de Acs (principalmente IgM, evitando a
ao do ator reumatide)
ELISA INDIRETO
1) Inicialmente, o Ag adicionado placa e se adere superfcie dos poos
2) Em seguida, so realizadas lavagens para a retirada do Ag
livre nos poos
3)
A soluo a ser pesquisada adicionada. Caso contenha Acs especficos contra os Ags presentes na placa, estes se ligaro aos Ags
4)
Uma nova srie de lavagens realizada para retirar
os Acs que no se ligaram aos Ags
5)
ento adicionado o conjugado, que se liga aos Acs
6)
Uma nova lavagem retira o conjugado livre
7)
O cromgeno e o substrato so adicionados, e se o
cromgeno for oxidado pela ao da reao enzimtica, haver desenvolvimento de cor Antgeno Conjugado Y Anticorpo Cromgeno
(SOARES, 2010)

Interpretao dos resultados:


- A intensidade da cor diretamente proporcional concentrao de Ag da amostra pesquisada.
- Para este teste se tornar quantitativo, necessria a construo
de uma curva com os valores de densidade tica obtidos a partir da
reao de padres com concentraes conhecidas do antgeno a ser
dosado. A curva serve como padro de comparao para deduzir as
quantidades de antgenos nas solues-teste (SOARES, 2010).
Aplicaes na medicina humana e veterinria:
- Muito usado para a dosagem de hormnios, marcadores tumorais e outras protenas sricas, bem como para a deteco de antgenos virais e de outros patgenos nas fezes, na urina e em secrees.
Pode detectar 10-12 a 10-14g(SOARES, 2010)
- Exemplos na Medicina Humana: Teste de Gravidez (teste de
deteco da gonadotropina corinica humana (HCG) no soro) (SOARES, 2010)
- Exemplos na Medicina Veterinria: Triagem na indstria de
alimentos (pesquisa de patgenose contaminantes nos alimentos)
(SOARES, 2010)

Interpretao dos resultados


- A intensidade da cor diretamente proporcional concentrao de Ac da mostra pesquisada.
- Para determinar quais indivduos so positivos ou negativos
para a doena pesquisada, deve-se calcular um ponto de corte (cut-off) para aquele ensaio. Acima dos limites do cut-off, encontram-se os indivduos positivos e abaixo os negativos (SOARES, 2010).
O ELISA Indireto no determina se o indivduo EST ou no
doente naquele momento. Ele apenas afirma se aquele animal/paciente j teve ou no contato com o agente causador da enfermidade
em algum momento de sua vida (SOARES, 2010).

ELISA POR COMPETIO


1) Adio do Ac especfico aos poos da placa
2) Lavagem para retirar os Ac livres
3) Adio da soluo com o Ag a ser pesquisado e de uma outra
soluo contendo Ag marcado (conjugado) no mesmo poo. Os Ags
competem entre si pelo stio de ligao do Ac e aquele que estiver
em maior concentrao, se ligar a mais Ac
4) Lavagem para retirar os Ag no capturados

Aplicaes na medicina humana e veterinria:


- Diagnstico sorolgico de doenas infecto-contagiosas, onde
a deteco de AcIgG, IgA ou IgE seja significativa(SOARES, 2010)
Didatismo e Conhecimento

76

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


5) Adiciona-se o cromgeno e o substrato. Caso o conjugado
tenha se ligado aos Ac da placa, ocorrer reao enzimtica e o cromgeno ser oxidado, havendo desenvolvimento de cor Antgeno
Conjugado / Anticorpo Cromgeno(SOARES, 2010)

O complexo Ag-Ac: Quando molculas de anticorpos ligam-se


ao antgeno, os stios ativos da regio Fc tornam-se disponveis para
a ligao do complemento. (DALTRO, 2010)
CARACTERSTICAS BSICAS

Interpretao dos resultados:


- A intensidade da cor INVERSAMENTE proporcional
concentrao de ag da amostra pesquisada, ou seja, quanto maior
a quantidade de Ag-teste, menor a possibilidade de ligao do Ag
marcado e assim, menor a intensidade de cor emitida (SOARES,
2010).

A ativao do sistema complemento por anticorpos ligados a


antgenos resulta na formao de complexos de ataque a membrana que podem romper a membrana celular. Se o anticorpo ligado
a antgenos adsorvidos nas hemcias, estas so destrudas e ocorre
hemlise (DALTRO, 2010)
Pode ser um teste qualitativo ou semi-quantitativo, quando
ento realizada uma diluio seriada da amostra, observando-se a
mxima diluio onde ocorre reao positiva (DALTRO, 2010).

Aplicaes na Medicina Humana e Veterinria:


- Dosagem de hormnios, marcadores tumorais e outras protenas sricas. Diagnstico sorolgico de algumas doenas.
- Exemplo na Medicina Humana: dosagem de T3, T4, testosterona, estradiol, progesterona.
- Exemplo na Medicina Veterinria: deteco sorolgica de
Herpesvrus Bovino tipo I.

FUNO
Funo: ligar covalentemente a molculas especficas na superfcie de microorganismos invasores, ou em complexos Ag-Ac.
Objetivo: induzir desequilbrio osmtico e/ou apoptose em microorganismos invasores ou clulas tumorais. Componentes : formado
por um grupo de protenas sricas numericamente denominadas, e
na sua maioria produzidas pelo fgado. Complexo de ataque a membrana: Ao unir-se membrana microbiana ou ao complexo Ac-Ag,
o complemento forma um canal transmembrnico de forma anelar,
causando uma lise osmtica, induzindo apoptose e, conseqentemente, a morte da clula (DALTRO, 2010).
COMPREENSO DO ENSAIO: Complexo de ataque a membrana: Ao unir-se membrana microbiana ou ao complexo Ac-Ag,
o complemento forma um canal transmembrnico de forma anelar,
causando uma lise osmtica, induzindo apoptose e, conseqUentemente, a morte da clula(DALTRO, 2010)

ELISA DE CAPTURA
1) Adio de Ac IgG monoclonal contra IgM aos poos da placa
2) Lavagem para retirar os Ac livres
3) Adio da soluo com Ac IgM especfico a ser pesquisado
4) Lavagem para retirar o Ac no capturado
5) Adiciona-se Ag especfico marcado com uma enzima (conjugado) para o Ac pesquisado
6) Lavagem
7) Adio de cromgeno e de substrato. Se o cromgeno for oxidado pela ao da reao enzimtica, haver desenvolvimento de cor Antgeno Anticorpo IgM (SOARES, 2010).
Interpretao dos resultados
- Intensidade da cor diretamente proporcional concentrao
de Acs.
- Por ser um ELISA muito utilizado para a deteco de IgM,
capaz de identificar infeces na fase aguda(SOARES, 2010)

Elementos necessrios para a realizao:


- Soro teste
- Sistema Complemento
- Sistema hemoltico (hemcias recobertas com antgenos)
- Estufa para incubao
- Centrfuga
- Antgeno purificado (na Inibio da Fixao do Complemento) (DALTRO, 2010).

Aplicaes na Medicina Humana e Veterinria


- Principalmente usado para a deteco de anticorpos da classe
IgM contra os mais diversos antgenos (virais, bacterianos, de protozorios) em todas as doenas em que seja importante identificar o
seu recente aparecimento. Apesar de ser mais utilizado para a deteco de IgM, o ELISA de Captura tambm pode ser utilizado para a
dosagem de outros Acs (SOARES, 2010)
Exemplos na Medicina Humana: diagnstico de rubola, toxoplasmose, herpesvrus e citomegalia, em suas fases agudas, da gestante (complexo TORCH) (SOARES, 2010)

tar).

- Sensibilizao insuficiente de hemcias.


- Probabilidades para falso-positivos devido a:
- Hemcias fragilizadas (velhas).
- Soro no-inativado.
- Baixa especificidade (dependendo do antgeno adsorvido na
hemcia) (DALTRO, 2010)

FIXAO DE COMPLEMENTO
um mtodo sorolgico usado para determinar a presena ou
semi-quantificar anticorpos (Ac) ou antgenos (Ag) (Inibio da
Fixao do Complemento) em uma amostra, utilizando a ao do
Sistema do Complemento. O sistema complemento um conjunto
de protenas sricas que tem por funo ajudar na eliminao de microorganismos invasores. Este sistema funciona em cascata e possui
trs vias. O teste de fixao do complemento tem como base a via
clssica, onde o complemento liga-se ao stio ativo formado pelo
complexo antgeno-anticorpo.
Didatismo e Conhecimento

Desvantagens do mtodo
- Probabilidades para falso-negativos devido a:
- Perda da atividade do complemento.
- Diluies inadequadas.
- Contaminao em solues (gerando efeito anticomplemen-

Vantagens:
- Baixo custo.
- Boa especificidade.
- Boa sensibilidade.
77

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Alm do teste de fixao do complemento, tambm existe o
teste de inibio da fixao do complemento, o qual tem por objetivo detectar e semi-quantificar Ags especficos em uma amostra
(DALTRO, 2010)

No caso de haver o antgeno pesquisado na amostra, os stios de


ligao do anticorpo monoclonal ficaro ocupados, o que inibir a
sua ligao com os antgenos na membrana da hemcia, no havendo hemlise e nem liberao de material intracelular (hemoglobina)
(teste positivo) (DALTRO, 2010)

Fixao do complemento

REAO EM CADEIA DA POLIMERASE

O soro do paciente incubado para a inativao do complemento provavelmente existente, para no causar interferncia no teste.
O soro inativado incubado com hemcias (ou outras clulas)
que contm o Ag especfico para os Acs pesquisados adsorvido em
sua membrana. O Ac pesquisado, caso presente na amostra, se ligar
ao Ag da superfcie das clulas.
O complemento inserido para identificar a presena ou no do
complexo Ag/Ac. Em caso positivo, as protenas do sistema complemento se ligaro poro Fc dos Acs, iniciando uma cascata de
reaes que culminar com a lise das hemcias, liberando hemogoblina.
Aps centrifugao, o que se observa uma soluo vermelho-amarronzada homognea, devido a liberao de hemoglobina das
hemcias.
Sistema Hemoltico (hemcias recobertas com Ag especfico)
(DALTRO, 2010)

A Reao em Cadeia da Polimerase (PCR) um mtodo muito


sensvel de anlise e por isso realizado com muito cuidado para
evitar contaminaes que possam inviabilizar ou tornar errneo o
resultado. A PCR possibilita a sntese de fragmentos de DNA, usando a enzima DNA-polimerase, a mesma que participa da replicao
do material gentico nas clulas. Esta enzima sintetiza uma sequncia complementar de DNA, desde que um pequeno fragmento (o
iniciador, ouprimer, em ingls) j esteja ligado a uma das cadeias
do DNA no ponto escolhido para o incio da sntese. Os iniciadores
definem a sequncia a ser replicada e o resultado obtido a amplificao de uma determinada sequncia DNA com bilhes de cpias.
Os cientistas ento simplificaram ao mximo o processo de polimerizao das molculas. A maquinaria para separar as fitas sense
e antisense so muito complexas na clula, no lugar utiliza-se a mudana de temperatura. Os ciclos so pensados para disponibilizar o
sitio alvo para a ligao dos primers, funcionamento da polimerase
e iniciou de um novo ciclo. Em primeiro lugar, deve-se extrair o
material gentico daclulaou outro material a ser estudado (exemplo: vestgios de crimes) sem danific-lo. Normalmente o material
extrado oDNA(ADN), mas pode-se trabalhar com oRNA(ARN)
em umaRT-PCRque um desdobramento da PCR e possui outras
aplicaes.
Resultado da PCR aps ser realizada umaeletroforese em
gelde agarose ou de poliacrilamida.

Interpretao dos resultados:


No caso de no haver anticorpo especfico para o antgeno pesquisado, no ocorre hemlise e nem liberao de material intracelular (hemoglobina) (teste negativo). Portanto, aps a centrifugao
dos tubos, ser observada a presena de um precipitado avermelhado no fundo dos mesmos, o qual corresponde s hemcias no lisadas (DALTRO, 2010).
No caso de encontrar o complexo Ag/Ac, o complemento ativado e leva a lise das hemcias, com liberao de material intracelular (hemoglobina) (teste positivo) (DALTRO, 2010).

Depois de extrado o DNA, a este adicionada uma mistura


(tambm conhecida como pr-mix) que contm osdNTPs(desoxir
ribonucleotdeos trifosfatos), que so as bases nitrogenadas ligadas
com um trs fosfato, osprimers(tambm chamados de oligonucleotdeos ou iniciadores) e aenzimaDNA polimeraseem umasoluo
tampo. Toda esta mistura colocada no termociclador, o qual faz
ciclos de temperatura pr-estabelecidos com tempos exatos especficos para cada reao (fragmento a ser amplificado).

Inibio da fixao do complemento


O soro do paciente incubado para a inativao do complemento provavelmente existente, para no causar interferncia no teste.
O soro inativado incubado com anticorpo monoclonal dirigido para o antgeno pesquisado. No caso de haver o antgeno pesquisado na amostra, os stios de ligao do anticorpo monoclonal
ficaro ocupados.
A soluo de soro-Ac monoclonal ento incubada com Sistema Hemoltico e com o Sistema Complemento. Caso os Acs monoclonais estejam previamente ligados aos Ags da amostra, eles no se
ligaro com os Ags na membrana da hemcia, no havendo hemlise e nem liberao de material intracelular (hemoglobina).
Portanto, aps centrifugao, o que se observa um precipitado avermelhado no fundo do tubo (resultado positivo) (DALTRO,
2010).

Na primeira etapa do ciclo a temperatura elevada de 94 a


96C por pouco tempo para que haja a separao da dupla cadeia de
DNA (Desnaturao, quebra das pontes de hidrognio). Na segunda
etapa, a temperatura reduzida entre 50 a 60 C dependendo da
quantidade decitosina(C) eguanina(G) encontrada no primer, para
que os primers se anelem (emparelham) com a fita molde de DNA
(anelamento). Na ltima etapa do ciclo a temperatura elevada a
72C para que a enzima possa funcionar sintetizando a nova molcula (extenso), em seguida um novo ciclo iniciado. Normalmente
so realizados de 25 a 40 ciclos para cada reao na qual a taxa de
replicao exponencial

Interpretao dos resultados:


No caso de no haver o antgeno pesquisado na amostra, o anticorpo monoclonal ficar com seus stios de ligao livres, podendo
se ligar ao antgeno adsorvido na membrana das hemcias, ativando
o complemento e causando hemlise com liberao de material intracelular (hemoglobina) (teste negativo) (DALTRO, 2010)
Didatismo e Conhecimento

O resultado analisado atravs de uma eletroforese em gel


deagaroseou depoliacrilamidae depois interpretado com a ajuda de um profissional competente. Geralmente um padro de peso
molecular adicionado em uma das fileiras do gel, assim poder se
avaliar o tamanho do fragmento amplificado
78

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


A reao de PCR ativada quando a temperatura atinge 940C.
Esse procedimento aumenta a especificidade da PCR, pois aDNA
polimerasecontm umanticorpo, que se desnatura e ativa a enzima
ao atingir a temperatura de 940C. DNA polimerases que no possuem esse inibidor podem amplificar produtos indesejados (inespecficos) em temperatura ambiente.

Estatstica pode ser pensada como a cincia de aprendizagem


a partir de dados. No nosso quotidiano, precisamos tomar decises,
muitas vezes decises rpidas.

Tecnica
Desnaturao
Em linhas gerais a Estatstica fornece mtodos que auxiliam
o processo de tomada de deciso atravs da anlise dos dados que
possumos.
Em Estatstica, um resultado significante, portanto, tem significncia estatstica, se for improvvel que tenha ocorrido por acaso
(que em estatstica e probabilidade tratado pelo conceito de chance), caso uma determinada hiptese nula seja verdadeira, mas no
sendo improvvel caso a hiptese base seja falsa. A expresso teste
de significncia foi cunhada por Ronald Fisher.
Mais concretamente, no teste de hipteses com base em frequncia estatstica, a significncia de um teste a probabilidade mxima de rejeitar acidentalmente uma hiptese nula verdadeira (uma
deciso conhecida como erro de tipo I). O nvel de significncia de
um resultado tambm chamado de e no deve ser confundido
com o valor p (p-value).
Por exemplo, podemos escolher um nvel de significncia de,
digamos, 5%, e calcular um valor crtico de um parmetro (por
exemplo a mdia) de modo que a probabilidade de ela exceder esse
valor, dada a verdade da hiptese nulo, ser 5%. Se o valor estatstico calculado (ou seja, o nvel de 5% de significncia anteriormente
escolhido) exceder o valor crtico, ento significante ao nvel de
5%.
Se o nvel de significncia (ex: 5% anteriormente dado) menor, o valor menos provavelmente um extremo em relao ao valor
crtico. Deste modo, um resultado que significante ao nvel de
1% mais significante do que um resultado que significante ao
nvel de 5%. No entanto, um teste ao nvel de 1% mais susceptvel de padecer do erro de tipo II do que um teste de 5% e por isso
ter menos poder estatstico.

A temperatura elevada (geralmente >90C ) separa a cadeia dupla de DNA. As duas fitas de DNA so mantidas unidas por pontes
de hidrognio (relativamente fracas), que se rompem em altas temperaturas. As ligaes entre as molculas de fosfato e desoxirribose
(ligaes covalentes e mais fortes) permanecem intactas.
Hibridizao ou annealing
Temperatura deannealing ou hibridizao: normalmente
encontra-se entre 40C e 65C, dependendo do comprimento dos
primers e da sua sequncia. Os iniciadores (osprimers) marcam as
extremidades da sequncia alvo: estes iniciadores so curtas sequncias sintticas de nucleotdeos, entre 20 e 30 bases. Numa reao
de PCR so includos dois primers, um para cada cadeia simples de
DNA que foi produzida durante o passo de desnaturao.
Extenso
Aps a ligao dos primers ou iniciadores s sequncias complementares de DNA, a temperatura eleva-se a aproximadamente
72C e a enzima taq polimerase replica a cadeia de DNA. O processo de sntese iniciado onde esto ligados osprimers, incorporando
os nucleotdeos complementares sequncia alvo atravs dos dNTPs em soluo. A extenso inicia-se sempre no extremo 3 doprimer. A taq polimerase sintetiza exclusivamente na direo 5 para 3.
Revelao
Finalizada a PCR, o prximo passo detectar a presena de
produtos amplificados. Em geral, isso realizado pela eletroforese
em gel de agarose (corado com brometo de etdeo) ou poliacrilamida (corado pelo nitrato de prata).

Ao divisar um teste de hipteses, o tcnico dever tentar maximizar o poder de uma dada significncia, mas ultimamente tem de
reconhecer que o melhor resultado que se pode obter um compromisso entre significncia e poder, em outras palavras, entre os erros
de tipo I e tipo II.

VALIDAO DE MTODOS DE ANLISES E


NOES DE ESTATSTICA BSICA;
Conceitos Bsicos

importante ressaltar que os valores p Fisherianos so filosoficamente diferentes dos erros de tipo I de Neyman-Pearson. Esta
confuso infelizmente propagada por muitos livros de estatstica.

A estatstica , hoje em dia, um instrumento til e, em alguns


casos, indispensvel para tomadas de deciso em diversos campos:
cientfico, econmico, social, poltico
Todavia, antes de chegarmos parte de interpretao para tomadas de deciso, h que proceder a um indispensvel trabalho de
recolha e organizao de dados, sendo a recolha feita atravs de recenseamentos (ou censos ou levantamentos estatsticos) ou sondagens.
Existem indcios que h 300 mil anos a.C. j se faziam censos
na China, Babilnia e no Egito. Censos estes que se destinavam
taxao de impostos.
Didatismo e Conhecimento

Diviso da Estatstica:
- Estatstica Descritiva: Mdia (Aritmtica, Geomtrica, Harmnica, Ponderada) - Mediana - Moda - Varincia - Desvio padro
- Coeficiente de variao.
- Inferncia Estatstica: Testes de hipteses - Significncia Potncia - Hiptese nula/Hiptese alternativa - Erro de tipo I - Erro
de tipo II - Teste T - Teste Z - Distribuio t de Student - Normalizao - Valor p - Anlise de varincia.
79

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


- Estatstica No-Paramtrica: Teste Binomial - Teste Qui-quadrado (uma amostra, duas amostras independentes, k amostras
independentes) - Teste Kolmogorov-Smirnov (uma amostra, duas
amostras independentes) - Teste de McNemar - Teste dos Sinais Teste de Wilcoxon - Teste de Walsh - Teste Exata de Fisher - Teste Q
de Cochran - Teste de Kruskal-Wallis - Teste de Friedman.
- Anlise da Sobrevivncia: Funo de sobrevivncia - Kaplan-Meier - Teste log-rank - Taxa de falha - Proportional hazards models.
- Amostragem: Amostragem aleatria simples (com reposio,
sem reposio) - Amostragem estratificada - Amostragem por conglomerados - Amostragem sistemtica - estimador razo - estimador
regresso.
- Distribuio de Probabilidade: Normal - De Pareto - De Poisson - De Bernoulli - Hipergeomtrica - Binomial - Binomial negativa - Gama - Beta - t de Student - F-Snedecor.
- Correlao: Varivel de confuso - Coeficiente de correlao
de Pearson - Coeficiente de correlao de postos de Spearman - Coeficiente de correlao tau de Kendall).
Regresso: Regresso linear - Regresso no-linear - Regresso
logstica - Mtodo dos mnimos quadrados - Modelos Lineares Generalizados - Modelos para Dados Longitudinais.
- Anlise Multivariada: Distribuio normal multivariada Componentes principais - Anlise fatorial - Anlise discriminante
- Anlise de Cluster (Anlise de agrupamento) - Anlise de Correspondncia.
- Sries Temporais: Modelos para sries temporais - Tendncia
e sazonalidade - Modelos de suavizao exponencial - ARIMA Modelos sazonais.

Variveis dependentes e variveis independentes: Variveis


independentes so aquelas que so manipuladas enquanto que variveis dependentes so apenas medidas ou registradas. Esta distino
confunde muitas pessoas que dizem que todas variveis dependem
de alguma coisa. Entretanto, uma vez que se esteja acostumado
a esta distino ela se torna indispensvel. Os termos varivel dependente e independente aplicam-se principalmente pesquisa experimental, onde algumas variveis so manipuladas, e, neste sentido, so independentes dos padres de reao inicial, intenes
e caractersticas dos sujeitos da pesquisa (unidades experimentais).
Espera-se que outras variveis sejam dependentes da manipulao
ou das condies experimentais. Ou seja, elas dependem do que os
sujeitos faro em resposta. Contrariando um pouco a natureza da
distino, esses termos tambm so usados em estudos em que no
se manipulam variveis independentes, literalmente falando, mas
apenas se designam sujeitos a grupos experimentais baseados em
propriedades pr-existentes dos prprios sujeitos. Por exemplo, se
em uma pesquisa compara-se a contagem de clulas brancas (White
Cell Count em ingls, WCC) de homens e mulheres, sexo pode ser
chamada de varivel independente e WCC de varivel dependente.

Nveis de Mensurao: As variveis diferem em quo bem


elas podem ser medidas, isto , em quanta informao seu nvel de
mensurao pode prover. H obviamente algum erro em cada medida, o que determina o montante de informao que se pode obter,
mas basicamente o fator que determina a quantidade de informao
que uma varivel pode prover o seu tipo de nvel de mensurao.
Sob este prisma as variveis so classificadas como nominais, ordinais e intervalares.
- Variveis nominais permitem apenas classificao qualitativa.
Ou seja, elas podem ser medidas apenas em termos de quais itens
pertencem a diferentes categorias, mas no se pode quantificar nem
mesmo ordenar tais categorias. Por exemplo, pode-se dizer que 2
indivduos so diferentes em termos da varivel A (sexo, por exemplo), mas no se pode dizer qual deles tem mais da qualidade representada pela varivel. Exemplos tpicos de variveis nominais
so sexo, raa, cidade, etc.

Panorama Geral:
Variveis: So caractersticas que so medidas, controladas ou
manipuladas em uma pesquisa. Diferem em muitos aspectos, principalmente no papel que a elas dado em uma pesquisa e na forma
como podem ser medidas.

Pesquisa Correlacional X Pesquisa Experimental: A


maioria das pesquisas empricas pertencem claramente a uma dessas duas categorias gerais: em uma pesquisa correlacional (Levantamento) o pesquisador no influencia (ou tenta no influenciar) nenhuma varivel, mas apenas as mede e procura por relaes (correlaes) entre elas, como presso sangnea e nvel de colesterol. Em
uma pesquisa experimental (Experimento) o pesquisador manipula
algumas variveis e ento mede os efeitos desta manipulao em
outras variveis; por exemplo, aumentar artificialmente a presso
sangnea e registrar o nvel de colesterol. A anlise dos dados em
uma pesquisa experimental tambm calcula correlaes entre variveis, especificamente entre aquelas manipuladas e as que foram
afetadas pela manipulao. Entretanto, os dados experimentais podem demonstrar conclusivamente relaes causais (causa e efeito)
entre variveis. Por exemplo, se o pesquisador descobrir que sempre
que muda a varivel A ento a varivel B tambm muda, ento ele
poder concluir que A influencia B. Dados de uma pesquisa correlacional podem ser apenas interpretados em termos causais com
base em outras teorias (no estatsticas) que o pesquisador conhea,
mas no podem ser conclusivamente provar causalidade.
Didatismo e Conhecimento

- Variveis ordinais permitem ordenar os itens medidos em termos de qual tem menos e qual tem mais da qualidade representada pela varivel, mas ainda no permitem que se diga o quanto
mais. Um exemplo tpico de uma varivel ordinal o status scio-econmico das famlias residentes em uma localidade: sabe-se que
mdia-alta mais alta do que mdia, mas no se pode dizer, por
exemplo, que 18% mais alta. A prpria distino entre mensurao
nominal, ordinal e intervalar representa um bom exemplo de uma
varivel ordinal: pode-se dizer que uma medida nominal prov menos informao do que uma medida ordinal, mas no se pode dizer
quanto menos ou como esta diferena se compara diferena entre mensurao ordinal e intervalar.
- Variveis intervalares permitem no apenas ordenar em postos
os itens que esto sendo medidos, mas tambm quantificar e comparar o tamanho das diferenas entre eles. Por exemplo, temperatura,
medida em graus Celsius constitui uma varivel intervalar. Pode-se
dizer que a temperatura de 40C maior do que 30C e que um aumento de 20C para 40C duas vezes maior do que um aumento de
30C para 40C.
80

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Relaes entre variveis: Duas ou mais variveis quaisquer
esto relacionadas se em uma amostra de observaes os valores
dessas variveis so distribudos de forma consistente. Em outras
palavras, as variveis esto relacionadas se seus valores correspondem sistematicamente uns aos outros para aquela amostra de observaes. Por exemplo, sexo e WCC seriam relacionados se a maioria
dos homens tivesse alta WCC e a maioria das mulheres baixa WCC,
ou vice-versa; altura relacionada ao peso porque tipicamente indivduos altos so mais pesados do que indivduos baixos; Q.I. est
relacionado ao nmero de erros em um teste se pessoas com Q.I.s
mais altos cometem menos erros.

Por exemplo, um nvel-p de 0,05 (1/20) indica que h 5% de


probabilidade de que a relao entre as variveis, encontrada na
amostra, seja um acaso feliz. Em outras palavras, assumindo que
no haja relao entre aquelas variveis na populao, e o experimento de interesse seja repetido vrias vezes, poderia-se esperar que
em aproximadamente 20 realizaes do experimento haveria apenas
uma em que a relao entre as variveis em questo seria igual ou
mais forte do que a que foi observada naquela amostra anterior. Em
muitas reas de pesquisa, o nvel-p de 0,05 costumeiramente tratado como um limite aceitvel de erro.
Como determinar que um resultado realmente significante: No h meio de evitar arbitrariedade na deciso final de qual
nvel de significncia ser tratado como realmente significante.
Ou seja, a seleo de um nvel de significncia acima do qual os
resultados sero rejeitados como invlidos arbitrria. Na prtica,
a deciso final depende usualmente de: se o resultado foi previsto
a priori ou apenas a posteriori no curso de muitas anlises e comparaes efetuadas no conjunto de dados; no total de evidncias
consistentes do conjunto de dados; e nas tradies existentes na
rea particular de pesquisa. Tipicamente, em muitas cincias resultados que atingem nvel-p 0,05 so considerados estatisticamente
significantes, mas este nvel ainda envolve uma probabilidade de
erro razovel (5%). Resultados com um nvel-p 0,01 so comumente
considerados estatisticamente significantes, e com nvel-p 0,005 ou
nvel-p 0,001 so freqentemente chamados altamente significantes. Estas classificaes, porm, so convenes arbitrrias e apenas
informalmente baseadas em experincia geral de pesquisa. Uma
conseqncia bvia que um resultado considerado significante a
0,05, por exemplo, pode no s-lo a 0,01.

Importncia das relaes entre variveis: Geralmente o


objetivo principal de toda pesquisa ou anlise cientfica encontrar relaes entre variveis. A filosofia da cincia ensina que no
h outro meio de representar significado exceto em termos de
relaes entre quantidades ou qualidades, e ambos os casos envolvem relaes entre variveis. Assim, o avano da cincia sempre tem que envolver a descoberta de novas relaes entre variveis. Em pesquisas correlacionais a medida destas relaes feita
de forma bastante direta, bem como nas pesquisas experimentais. Por exemplo, o experimento j mencionado de comparar
WCC em homens e mulheres pode ser descrito como procura de
uma correlao entre 2 variveis: sexo e WCC. A Estatstica nada
mais faz do que auxiliar na avaliao de relaes entre variveis.

Aspectos bsicos da relao entre variveis: As duas propriedades formais mais elementares de qualquer relao entre variveis
so a magnitude (tamanho) e a confiabilidade da relao.
- Magnitude muito mais fcil de entender e medir do que a
confiabilidade. Por exemplo, se cada homem em nossa amostra tem
um WCC maior do que o de qualquer mulher da amostra, poderia-se dizer que a magnitude da relao entre as duas variveis (sexo e
WCC) muito alta em nossa amostra. Em outras palavras, poderia-se prever uma baseada na outra (ao menos na amostra em questo).
- Confiabilidade um conceito muito menos intuitivo, mas
extremamente importante. Relaciona-se representatividade do
resultado encontrado em uma amostra especfica de toda a populao. Em outras palavras, diz quo provvel ser encontrar uma
relao similar se o experimento fosse feito com outras amostras
retiradas da mesma populao, lembrando que o maior interesse est
na populao. O interesse na amostra reside na informao que ela
pode prover sobre a populao. Se o estudo atender certos critrios
especficos (que sero mencionados posteriormente) ento a confiabilidade de uma relao observada entre variveis na amostra pode
ser estimada quantitativamente e representada usando uma medida
padro (chamada tecnicamente de nvel-p ou nvel de significncia
estatstica).

Significncia Estatstica (nvel-p): A significncia estatstica de um resultado uma medida estimada do grau em que este
resultado verdadeiro (no sentido de que seja realmente o que
ocorre na populao, ou seja no sentido de representatividade da
populao). Mais tecnicamente, o valor do nvel-p representa um
ndice decrescente da confiabilidade de um resultado. Quanto mais
alto o nvel-p, menos se pode acreditar que a relao observada entre
as variveis na amostra um indicador confivel da relao entre
as respectivas variveis na populao. Especificamente, o nvel-p
representa a probabilidade de erro envolvida em aceitar o resultado
observado como vlido, isto , como representativo da populao.
Didatismo e Conhecimento

Significncia estatstica e o nmero de anlises realizadas:


Desnecessrio dizer quanto mais anlises sejam realizadas em um
conjunto de dados, mais os resultados atingiro por acaso o nvel
de significncia convencionado. Por exemplo, ao calcular correlaes entre dez variveis (45 diferentes coeficientes de correlao),
seria razovel esperar encontrar por acaso que cerca de dois (um
em cada 20) coeficientes de correlao so significantes ao nvel-p
0,05, mesmo que os valores das variveis sejam totalmente aleatrios, e aquelas variveis no se correlacionem na populao. Alguns
mtodos estatsticos que envolvem muitas comparaes, e portanto
uma boa chance para tais erros, incluem alguma correo ou ajuste para o nmero total de comparaes. Entretanto, muitos mtodos
estatsticos (especialmente anlises exploratrias simples de dados)
no oferecem nenhum remdio direto para este problema. Cabe ento ao pesquisador avaliar cuidadosamente a confiabilidade de descobertas no esperadas.
Fora X Confiabilidade de uma relao entre variveis: Foi
dito anteriormente que fora (magnitude) e confiabilidade so dois
aspectos diferentes dos relacionamentos entre variveis. Contudo,
eles no so totalmente independentes. Em geral, em uma amostra
de um certo tamanho quanto maior a magnitude da relao entre
variveis, mais confivel a relao.
Assumindo que no h relao entre as variveis na populao,
o resultado mais provvel deveria ser tambm no encontrar relao
entre as mesmas variveis na amostra da pesquisa. Assim, quanto
mais forte a relao encontrada na amostra menos provvel a no
existncia da relao correspondente na populao.
81

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Ento a magnitude e a significncia de uma relao aparentam
estar fortemente relacionadas, e seria possvel calcular a significncia a partir da magnitude e vice-versa. Entretanto, isso vlido
apenas se o tamanho da amostra mantido constante, porque uma
relao de certa fora poderia ser tanto altamente significante ou no
significante de todo dependendo do tamanho da amostra.

Se uma moeda ligeiramente viciada, de tal forma que quando lanada ligeiramente mais provvel que ocorram caras do que
coroas (por exemplo uma proporo 60% para 40%). Ento dez lanamentos no seriam suficientes para convencer algum de que a
moeda viciada, mesmo que o resultado obtido (6 caras e 4 coroas)
seja perfeitamente representativo do viesamento da moeda. Entretanto, dez lanamentos no so suficientes para provar nada? No, se
o efeito em questo for grande o bastante, os dez lanamentos sero
suficientes. Por exemplo, imagine-se que a moeda seja to viciada
que no importe como venha a ser lanada o resultado ser cara. Se
tal moeda fosse lanada dez vezes, e cada lanamento produzisse
caras, muitas pessoas considerariam isso prova suficiente de que h
algo errado com a moeda. Em outras palavras, seria considerada
prova convincente de que a populao terica de um nmero infinito
de lanamentos desta moeda teria mais caras do que coroas. Assim,
se a relao grande, ento poder ser considerada significante mesmo em uma pequena amostra.

Por que a significncia de uma relao entre variveis depende do tamanho da amostra: Se h muito poucas observaes
ento h tambm poucas possibilidades de combinao dos valores
das variveis, e ento a probabilidade de obter por acaso uma combinao desses valores que indique uma forte relao relativamente
alta. Considere-se o seguinte exemplo:
H interesse em duas variveis (sexo: homem, mulher; WCC:
alta, baixa) e h apenas quatro sujeitos na amostra (2 homens e 2
mulheres). A probabilidade de se encontrar, puramente por acaso,
uma relao de 100% entre as duas variveis pode ser to alta quanto 1/8. Explicando, h uma chance em oito de que os dois homens
tenham alta WCC e que as duas mulheres tenham baixa WCC, ou
vice-versa, mesmo que tal relao no exista na populao. Agora
considere-se a probabilidade de obter tal resultado por acaso se a
amostra consistisse de 100 sujeitos: a probabilidade de obter aquele
resultado por acaso seria praticamente zero.
Observando um exemplo mais geral. Imagine-se uma populao terica em que a mdia de WCC em homens e mulheres
exatamente a mesma. Supondo um experimento em que se retiram
pares de amostras (homens e mulheres) de um certo tamanho da populao e calcula-se a diferena entre a mdia de WCC em cada par
de amostras (supor ainda que o experimento ser repetido vrias vezes). Na maioria dos experimento os resultados das diferenas sero
prximos de zero. Contudo, de vez em quando, um par de amostra
apresentar uma diferena entre homens e mulheres consideravelmente diferente de zero. Com que freqncia isso acontece? Quanto menor a amostra em cada experimento maior a probabilidade de
obter esses resultados errneos, que, neste caso, indicariam a existncia de uma relao entre sexo e WCC obtida de uma populao
em que tal relao no existe. Observe-se mais um exemplo (razo
meninos para meninas, Nisbett et al., 1987):
H dois hospitais: no primeiro nascem 120 bebs a cada dia
e no outro apenas 12. Em mdia a razo de meninos para meninas
nascidos a cada dia em cada hospital de 50/50. Contudo, certo dia,
em um dos hospitais nasceram duas vezes mais meninas do que meninos. Em que hospital isso provavelmente aconteceu? A resposta
bvia para um estatstico, mas no to bvia para os leigos: muito
mais provvel que tal fato tenha ocorrido no hospital menor. A razo
para isso que a probabilidade de um desvio aleatrio da mdia da
populao aumenta com a diminuio do tamanho da amostra (e
diminui com o aumento do tamanho da amostra).

Pode uma relao inexistente ser um resultado significante: Quanto menor a relao entre as variveis maior o tamanho de
amostra necessrio para prov-la significante. Por exemplo, imagine-se quantos lanamentos seriam necessrios para provar que uma
moeda viciada se seu viesamento for de apenas 0,000001 %! Ento, o tamanho mnimo de amostra necessrio cresce na mesma proporo em que a magnitude do efeito a ser demonstrado decresce.
Quando a magnitude do efeito aproxima-se de zero, o tamanho de
amostra necessrio para prov-lo aproxima-se do infinito. Isso quer
dizer que, se quase no h relao entre duas variveis o tamanho
da amostra precisa quase ser igual ao tamanho da populao, que
teoricamente considerado infinitamente grande. A significncia estatstica representa a probabilidade de que um resultado similar seja
obtido se toda a populao fosse testada. Assim, qualquer coisa que
fosse encontrada aps testar toda a populao seria, por definio,
significante ao mais alto nvel possvel, e isso tambm inclui todos
os resultados de relao inexistente.
Como medir a magnitude (fora) das relaes entre variveis: H muitas medidas da magnitude do relacionamento entre
variveis que foram desenvolvidas por estatsticos: a escolha de uma
medida especfica em dadas circunstncias depende do nmero de
variveis envolvidas, nveis de mensurao usados, natureza das relaes, etc. Quase todas, porm, seguem um princpio geral: elas
procuram avaliar a relao comparando-a de alguma forma com a
mxima relao imaginvel entre aquelas variveis especficas.
Tecnicamente, um modo comum de realizar tais avaliaes observar quo diferenciados so os valores das variveis, e ento calcular qual parte desta diferena global disponvel seria detectada na
ocasio se aquela diferena fosse comum (fosse apenas devida
relao entre as variveis) nas duas (ou mais) variveis em questo.
Falando menos tecnicamente, compara-se o que comum naquelas
variveis com o que potencialmente poderia haver em comum se
as variveis fossem perfeitamente relacionadas. Outro exemplo:
Em uma amostra o ndice mdio de WCC igual a 100 em
homens e 102 em mulheres. Assim, poderia-se dizer que, em mdia,
o desvio de cada valor da mdia de ambos (101) contm uma componente devida ao sexo do sujeito, e o tamanho desta componente
1. Este valor, em certo sentido, representa uma medida da relao
entre sexo e WCC. Contudo, este valor uma medida muito pobre,
porque no diz quo relativamente grande aquela componente em
relao diferena global dos valores de WCC. H duas possibilidades extremas:

Por que pequenas relaes podem ser provadas como significantes apenas por grandes amostras: Os exemplos dos pargrafos anteriores indicam que se um relacionamento entre as variveis em questo (na populao) pequeno, ento no h meio de
identificar tal relao em um estudo a no ser que a amostra seja
correspondentemente grande. Mesmo que a amostra seja de fato
perfeitamente representativa da populao o efeito no ser estatisticamente significante se a amostra for pequena. Analogamente,
se a relao em questo muito grande na populao ento poder
ser constatada como altamente significante mesmo em um estudo
baseado em uma pequena amostra. Mais um exemplo:
Didatismo e Conhecimento

82

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


- Se todos os valore de WCC de homens so exatamente iguais
a 100 e os das mulheres iguais a 102 ento todos os desvios da mdia
conjunta na amostra seriam inteiramente causados pelo sexo. Poderia-se dizer que nesta amostra sexo perfeitamente correlacionado
a WCC, ou seja, 100% das diferenas observadas entre os sujeitos
relativas a suas WCCs devem-se a seu sexo.

Entretanto, em muitos casos, sua forma conhecida e isso pode


ser usado para determinar os nveis de significncia para os resultados obtidos em amostras de certo tamanho. Muitas daquelas funes
so relacionadas a um tipo geral de funo que chamada de normal
(ou gaussiana).
Por que a distribuio normal importante: A distribuio normal importante porque em muitos casos ela se aproxima
bem da funo introduzida no item anterior. A distribuio de muitas
estatsticas de teste normal ou segue alguma forma que pode ser
derivada da distribuio normal. Neste sentido, filosoficamente, a
distribuio normal representa uma das elementares verdades acerca da natureza geral da realidade, verificada empiricamente, e seu
status pode ser comparado a uma das leis fundamentais das cincias
naturais. A forma exata da distribuio normal (a caracterstica curva do sino) definida por uma funo que tem apenas dois parmetros: mdia e desvio padro.
Uma propriedade caracterstica da distribuio normal que
68% de todas as suas observaes caem dentro de um intervalo de
1 desvio padro da mdia, um intervalo de 2 desvios padres inclui
95% dos valores, e 99% das observaes caem dentro de um intervalo de 3 desvios padres da mdia. Em outras palavras, em uma
distribuio normal as observaes que tem um valor padronizado
de menos do que -2 ou mais do que +2 tem uma freqncia relativa de 5% ou menos (valor padronizado significa que um valor
expresso em termos de sua diferena em relao mdia, dividida
pelo desvio padro).

- Se todos os valores de WCC esto em um intervalo de 0 a


1000, a mesma diferena (de 2) entre a WCC mdia de homens e
mulheres encontrada no estudo seria uma parte to pequena na diferena global dos valores que muito provavelmente seria considerada
desprezvel. Por exemplo, um sujeito a mais que fosse considerado
poderia mudar, ou mesmo reverter, a direo da diferena. Portanto,
toda boa medida das relaes entre variveis tem que levar em conta
a diferenciao global dos valores individuais na amostra e avaliar a
relao em termos (relativos) de quanto desta diferenciao se deve
relao em questo.
Formato geral de muitos testes estatsticos: Como o objetivo principal de muitos testes estatsticos avaliar relaes entre
variveis, muitos desses testes seguem o princpio exposto no item
anterior. Tecnicamente, eles representam uma razo de alguma medida da diferenciao comum nas variveis em anlise (devido sua
relao) pela diferenciao global daquelas variveis. Por exemplo,
teria-se uma razo da parte da diferenciao global dos valores de
WCC que podem se dever ao sexo pela diferenciao global dos
valores de WCC. Esta razo usualmente chamada de razo da variao explicada pela variao total. Em estatstica o termo variao
explicada no implica necessariamente que tal variao compreendida conceitualmente. O termo usado apenas para denotar a variao comum s variveis em questo, ou seja, a parte da variao
de uma varivel que explicada pelos valores especficos da outra
varivel e vice-versa.

Ilustrao de como a distribuio normal usada em raciocnio estatstico (induo): Retomando o exemplo j discutido,
onde pares de amostras de homens e mulheres foram retirados de
uma populao em que o valor mdio de WCC em homens e mulheres era exatamente o mesmo. Embora o resultado mais provvel para
tais experimentos (um par de amostras por experimento) que a diferena entre a WCC mdia em homens e mulheres em cada par seja
prxima de zero, de vez em quando um par de amostras apresentar
uma diferena substancialmente diferente de zero. Quo freqentemente isso ocorre? Se o tamanho da amostra grande o bastante,
os resultados de tais repeties so normalmente distribudos, e
assim, conhecendo a forma da curva normal pode-se calcular precisamente a probabilidade de obter por acaso resultados representando vrios nveis de desvio da hipottica mdia populacional 0
(zero). Se tal probabilidade calculada to pequena que satisfaz ao
critrio previamente aceito de significncia estatstica, ento pode-se
concluir que o resultado obtido produz uma melhor aproximao do
que est acontecendo na populao do que a hiptese nula. Lembrando ainda que a hiptese nula foi considerada apenas por razes
tcnicas como uma referncia contra a qual o resultado emprico
(dos experimentos) foi avaliado.

Como calculado o nvel de significncia estatstico: Assuma-se que j tenha sido calculada uma medida da relao entre duas
variveis (como explicado acima). A prxima questo quo significante esta relao? Por exemplo, 40% da variao global ser explicada pela relao entre duas variveis suficiente para considerar
a relao significante? Depende. Especificamente, a significncia
depende principalmente do tamanho da amostra. Como j foi explicado, em amostras muito grandes mesmo relaes muito pequenas
entre variveis sero significantes, enquanto que em amostras muito
pequenas mesmo relaes muito grandes no podero ser consideradas confiveis (significantes). Assim, para determinar o nvel de significncia estatstica torna-se necessria uma funo que represente
o relacionamento entre magnitude e significncia das relaes
entre duas variveis, dependendo do tamanho da amostra. Tal funo
diria exatamente quo provvel obter uma relao de dada magnitude (ou maior) de uma amostra de dado tamanho, assumindo que
no h tal relao entre aquelas variveis na populao. Em outras
palavras, aquela funo forneceria o nvel de significncia (nvel-p), e isso permitiria conhecer a probabilidade de erro envolvida em
rejeitar a idia de que a relao em questo no existe na populao.
Esta hiptese alternativa (de que no h relao na populao)
usualmente chamada de hiptese nula. Seria ideal se a funo de
probabilidade fosse linear, e por exemplo, apenas tivesse diferentes inclinaes para diferentes tamanhos de amostra. Infelizmente, a
funo mais complexa, e no sempre exatamente a mesma.
Didatismo e Conhecimento

Todos os testes estatsticos so normalmente distribudos:


No todos, mas muitos so ou baseados na distribuio normal diretamente ou em distribuies a ela relacionadas, e que podem ser
derivadas da normal, como as distribuies t, F ou Chi-quadrado
(Qui-quadrado). Tipicamente, estes testes requerem que as variveis
analisadas sejam normalmente distribudas na populao, ou seja,
que elas atendam suposio de normalidade. Muitas variveis
observadas realmente so normalmente distribudas, o que outra
razo por que a distribuio normal representa uma caracterstica
geral da realidade emprica.
83

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


O problema pode surgir quando se tenta usar um teste baseado
na distribuio normal para analisar dados de variveis que no so
normalmente distribudas. Em tais casos h duas opes. Primeiramente, pode-se usar algum teste no paramtrico alternativo (ou
teste livre de distribuio); mas isso freqentemente inconveniente porque tais testes so tipicamente menos poderosos e menos flexveis em termos dos tipos de concluses que eles podem
proporcionar. Alternativamente, em muitos casos ainda se pode usar
um teste baseado na distribuio normal se apenas houver certeza
de que o tamanho das amostras suficientemente grande. Esta ltima opo baseada em um princpio extremamente importante
que largamente responsvel pela popularidade dos testes baseados
na distribuio normal. Nominalmente, quanto mais o tamanho da
amostra aumente, mais a forma da distribuio amostral (a distribuio de uma estatstica da amostra) da mdia aproxima-se da forma
da normal, mesmo que a distribuio da varivel em questo no
seja normal. Este princpio chamado de Teorema Central do Limite.

tes, as quais realam toda a potencialidade da Estatstica, na medida em que vo permitir tirar concluses acerca de uma populao,
baseando-se numa pequena amostra, dando-nos ainda uma medida
do erro cometido.
Exemplo: Ao chegarmos a uma churrascaria, no precisamos
comer todos os tipos de saladas, de sobremesas e de carnes disponveis, para conseguirmos chegar a concluso de que a comida de
boa qualidade. Basta que seja provado um tipo de cada opo para
concluirmos que estamos sendo bem servidos e que a comida est
dentro dos padres.
Levantamento de Dados
Basicamente os dados, dividem-se em contnuos e discretos. O
primeiro definido como qualquer valor entre dois limites quaisquer, tal como um dimetro. Portanto trata-se de um valor que pode
ser quebrado. So dados contnuos, questes que envolvem idade,
renda, gastos, vendas, faturamento, entre muitas outras.
Quando fala-se em valores discretos, aborda-se um valor exato, tal como quantidade de peas defeituosas. Comumente utiliza-se
este tipo de variveis para tratar de numero de filhos, satisfao e
escalas nominais no geral. A tipologia dos dados determina a varivel, ela ser portanto contnua ou discreta. Isto quer dizer que
ao definir-se uma varivel com contnua ou discreta, futuramente
j definiu-se que tipo de tratamento se dar a ela. De acordo com o
que dissemos anteriormente, numa anlise estatstica distinguem-se
essencialmente duas fases:
Uma primeira fase em que se procura descrever e estudar a
amostra:Estatstica Descritiva e uma segunda fase em que se procura tirar concluses para a populao.

Como se conhece as consequncias de violar a suposio de


normalidade: Embora muitas das declaraes feitas anteriormente
possam ser provadas matematicamente, algumas no tm provas tericas e podem demonstradas apenas empiricamente via experimentos Monte Carlo (simulaes usando gerao aleatria de nmeros).
Nestes experimentos grandes nmeros de amostras so geradas por
um computador seguindo especificaes pr-designadas e os resultados de tais amostras so analisados usando uma grande variedade
de testes. Este o modo emprico de avaliar o tipo e magnitude dos
erros ou viesamentos a que se expe o pesquisador quando certas
suposies tericas dos testes usados no so verificadas nos dados
sob anlise. Especificamente, os estudos de Monte Carlo foram usados extensivamente com testes baseados na distribuio normal para
determinar quo sensveis eles eram violaes da suposio de que
as variveis analisadas tinham distribuio normal na populao. A
concluso geral destes estudos que as conseqncias de tais violaes so menos severas do que se tinha pensado a princpio. Embora
estas concluses no devam desencorajar ningum de se preocupar
com a suposio de normalidade, elas aumentaram a popularidade
geral dos testes estatsticos dependentes da distribuio normal em
todas as reas de pesquisa.

1 Fase Estatstica Descritiva: Procura-se descrever a amostra,


pondo em evidncia as caractersticas principais e as propriedades.
2 Fase Estatstica Indutiva: Conhecidas certas propriedades
(obtidas a partir de uma anlise descritiva da amostra), expressas
por meio de proposies, imaginam-se proposies mais gerais, que
exprimam a existncia de leis (na populao).
No entanto, ao contrrio das proposies deduzidas, no podemos dizer que so falsas ou verdadeiras, j que foram verificadas
sobre um conjunto restrito de indivduos, e portanto no so falsas,
mas no foram verificadas para todos os indivduos da Populao,
pelo que tambm no podemos afirmar que so verdadeiras.
Existe, assim, um certo grau de incerteza (percentagem de erro)
que medido em termos de Probabilidade. Precisamos aqui da noo de Probabilidade, para medir o grau de incerteza que existe,
quando tiramos uma concluso para a populao, a partir da observao da amostra.
Exemplo: Uma empresa fabricante de um automvel, pretende
avaliar a potencialidade do mercado, estimando atravs de um mercado teste. Atravs de1000 entrevistados, pretende-se verificar como se
comportar a fatia de inteno de votos para determinado candidato.
Problema: pretende-se, a partir da percentagem de respostas afirmativas, de entre os inquiridos sobre a compra do novo produto, obter
uma estimativa do nmero de compradores na Populao.

Objeto da Estatstica: Estatstica uma cincia exata que visa


fornecer subsdios ao analista para coletar, organizar, resumir, analisar e apresentar dados. Trata de parmetros extrados da populao,
tais como mdia ou desvio padro. A estatstica fornece-nos as tcnicas para extrair informao de dados, os quais so muitas vezes
incompletos, na medida em que nos do informao til sobre o
problema em estudo, sendo assim, objetivo da Estatstica extrair
informao dos dados para obter uma melhor compreenso das situaes que representam. Quando se aborda uma problemtica envolvendo mtodos estatsticos, estes devem ser utilizados mesmo antes
de se recolher a amostra, isto , deve-se planejar a experincia que
nos vai permitir recolher os dados, de modo que, posteriormente, se
possa extrair o mximo de informao relevante para o problema em
estudo, ou seja, para a populao de onde os dados provm. Quando
de posse dos dados, procura-se agrup-los e reduzi-los, sob forma de
amostra, deixando de lado a aleatoriedade presente. Seguidamente o
objetivo do estudo estatstico pode ser o de estimar uma quantidade
ou testar uma hiptese, utilizando-se tcnicas estatsticas convenienDidatismo e Conhecimento

Anlise Exploratria de Dados: Aps a coleta e a digitao de


dados em um banco de dados apropriado, o prximo passo a anlise descritiva. Esta etapa fundamental, pois uma anlise descritiva detalhada permite ao pesquisador familiarizar-se com os dados,
84

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Clculo da mdia aritmtica

organiz-los e sintetiz-los de forma a obter as informaes necessrias do conjunto de dados para responder as questes que esto
sendo investigadas. Tradicionalmente, a anlise descritiva limitava-se a calcular algumas medidas de posio e variabilidade. No final
da dcada de 70, Tukey criou uma nova corrente de anlise.
Utilizando principalmente tcnicas visuais, buscando descrever
quase sem utilizar clculos, alguma forma de regularidade ou padro nos dados, em oposio aos resumos numricos. Nessa etapa,
iremos produzir tabelas, grficos e medidas resumo que descrevam
a tendncia dos dados, quantifiquem a sua variabilidade, permitam
a deteco de estruturas interessantes e valores atpicos no banco
de dados.

Se x for a mdia aritmtica dos elementos do conjunto numrico A = {x1; x2; x3; ...; xn}, ento, por definio:

Tipo de variveis: Cada uma das caractersticas de interesse


observadas ou medidas durante o estudo denominada de varivel. As variveis que assumem valores numricos so denominadas
quantitativas, enquanto que as no numricas, qualitativas.

Concluso
A mdia aritmtica dos n elementos do conjunto numrico A
a soma de todos os seus elementos, dividida por n.

Uma varivel qualitativa quando seus valores so atributos ou


qualidades (por ex: sexo, raa, classe social). Se tais variveis possuem uma ordenao natural, indicando intensidades crescentes de
realizao, so classificadas de qualitativas ordinais (por ex: classe
social - baixa, mdia ou alta). Se no for possvel estabelecer uma
ordem natural entre seus valores, so classificadas como qualitativas nominais (por ex: Sexo - masculino ou feminino).

Exemplo
Calcular a mdia aritmtica entre os nmeros 3, 4, 6, 9, e 13.
Resoluo
Se x for a mdia aritmtica dos elementos do conjunto (3, 4, 6,
9, 13), ento x ser a soma dos 5 elementos, dividida por 5. Assim:

As variveis quantitativas podem ser classificadas ainda em


discretas ou contnuas. Variveis discretas podem ser vistas como
resultantes de contagens, e assumem, em geral, valores inteiros (por
ex: Nmero de filhos). Variveis contnuas podem assumir qualquer
valor dentro de um intervalo especificado e so, geralmente, resultados de uma mensurao (por ex: Peso, em kg; Altura, em metros).

A mdia aritmtica 7.

Descrio dos dados: importante conhecer e saber construir


os principais tipos de tabelas, grficos e medidas resumo para realizar uma boa anlise descritiva dos dados. Vamos tentar entender
como os dados se distribuem, onde esto centrados, quais observaes so mais frequentes, como a variabilidade etc., tendo em vista
responder s principais questes do estudo. Cada ferramenta fornece
um tipo de informao e o seu uso depende, em geral, do tipo de
varivel que est sendo investigada.

Mdia Aritmtica Ponderada


Definio
A mdia dos elementos do conjunto numrico A relativa adio e na qual cada elemento tem um determinado peso chamada
mdia aritmtica ponderada.
Clculo da mdia aritmtica ponderada

Mdias

Se x for a mdia aritmtica ponderada dos elementos do conjunto numrico A = {x1; x2; x3; ...; xn} com pesos P1; P2; P3; ...; Pn,
respectivamente, ento, por definio:

Noo Geral de Mdia


Considere um conjunto numrico A = {x1; x2; x3; ...; xn} e efetue
uma certa operao com todos os elementos de A.
Se for possvel substituir cada um dos elementos do conjunto A
por um nmero x de modo que o resultado da operao citada seja o
mesmo diz-se, por definio, que x ser a mdia dos elementos de A
relativa a essa operao.

P1 . x + P2 . x + P3 . x + ... + Pn . x =
= P1 . x1 + P2 . x2 + P3 . x3 + ... + Pn . xn
(P1 + P2 + P3 + ... + Pn) . x =
= P1 . x1 + P2 . x2 + P3 . x3 + ... + Pn . xn e, portanto,

Mdia Aritmtica
Definio
A mdia dos elementos do conjunto numrico A relativa adio chamada mdia aritmtica.
Didatismo e Conhecimento

85

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Observe que se P1 = P2 = P3 = ... = Pn = 1, ento:
que a mdia aritmtica simples.
Concluso
A mdia aritmtica ponderada dos n elementos do conjunto numrico A a soma dos produtos de cada elemento multiplicado pelo
respectivo peso, dividida pela soma dos pesos.

Profissionais

Quantidade

Salrio

Serventes

20 profissionais

R$ 320,00

Tcnicos

10 profissionais

R$ 840,00

Engenheiros

5 profissionais

R$ 1.600,00

10. Calcule a mdia ponderada entre 5, 10 e 15 para os respectivos pesos 10, 5 e 20.

Exemplo

Respostas

Calcular a mdia aritmtica ponderada dos nmeros 35, 20 e 10


com pesos 2, 3, e 5, respectivamente.

1) Resposta 5.
Soluo:
M.A. ( 2 e 8 ) = 2 + 8 / 2 = 10 / 2 = 5 M.A. ( 2 e 8 ) = 5.

Resoluo

2) Resposta 6.
Soluo:
M.A. ( 3, 5 e 10 ) = 3 + 5 + 10 / 3 = 18 / 3 = 6 M.A. ( 3, 5 e
10 ) = 6.

Se x for a mdia aritmtica ponderada, ento:

A mdia aritmtica ponderada 18.

3) Resposta 10.
Soluo: Para resolver esse exerccio basta fazer a soma dos
nmeros e dividi-los por quatro, que a quantidade de nmeros,
portanto:

Observao: A palavra mdia, sem especificar se aritmtica,


deve ser entendida como mdia aritmtica.
Exerccios
1. Determine a mdia aritmtica entre 2 e 8.
2. Determine a mdia aritmtica entre 3, 5 e 10.
3. Qual a mdia aritmtica simples dos nmeros 11, 7, 13 e 9?
4. A mdia aritmtica simples de 4 nmeros pares distintos, pertences ao conjunto dos nmeros inteiros no nulos igual a 44. Qual
o maior valor que um desses nmeros pode ter?

Logo, a mdia aritmtica 10.


4) Resposta 164.
Soluo: Quando falamos de mdia aritmtica simples, ao diminuirmos um dos valores que a compe, precisamos aumentar a
mesma quantidade em outro valor, ou distribu-la entre vrios outros
valores, de sorte que a soma total no se altere, se quisermos obter
a mesma mdia. Neste exerccio, trs dos elementos devem ter o
menor valor possvel, de sorte que o quarto elemento tenha o maior
valor dentre eles, tal que a mdia aritmtica seja igual a44. Este ser
o maior valor que o quarto elemento poder assumir. Em funo do
enunciado, os trs menores valores inteiros, pares, distintos e no
nulos so:2,4e6. Identificando comoxeste quarto valor, vamos
montar a seguinte equao:

5. Calcule a mdia aritmtica simples em cada um dos seguintes casos:


a) 15; 48; 36
b) 80; 71; 95; 100
c) 59; 84; 37; 62; 10
d) 1; 2; 3; 4; 5; 6; 7; 8; 9
6. Qual a mdia aritmtica ponderada dos nmeros10,14,18e30sabendo-se que os seus pesos so respectivamente1,2,3e5?
7. Calcular a mdia ponderada entre 3, 6 e 8 para os respectivos
pesos 5 , 3 e 2.

Solucionando-a temos:

8. Numa turma de 8 srie 10 alunos possuem 14 anos, 12 alunos possuem 15 anos e oito deles 16 anos de idade. Qual ser a idade
mdia dessa turma?
9. Determine a mdia salarial de uma empresa, cuja folha de
pagamento assim discriminada:

Logo, o maior valor que um desses nmeros pode ter 164.


5) Soluo:
a) (15 + 48 + 36)/3 =
99/3 =33

Didatismo e Conhecimento

86

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


b) (80 + 71 + 95 + 100)/4=
346/4 = 86,5

Pegamos ento este produto e extramos a sua raiz cbica, chegando ao valor mdio6.
Extramos a raiz cbica, pois o conjunto composto de 3 elementos. Se fossemnelementos, extrairamos a raiz de ndicen.

c) (59 + 84 + 37 + 62 + 10)/5=
= 252/5
= 50,4

Neste exemplo teramos a seguinte soluo:

d) (1 + 2 + 3 + 4 + 5 + 6 + 7 + 8 + 9)/9=
45/9 =
=5

Utilidades da Mdia Geomtrica


Progresso Geomtrica

6) Resposta 22.
Soluo: Neste caso a soluo consiste em multiplicarmos cada
nmero pelo seu respectivo peso e somarmos todos estes produtos.
Este total deve ser ento dividido pela soma total dos pesos:

Uma das utilizaes deste tipo de mdia na definio de uma


progresso geomtrica que diz que em toda PG., qualquer termo
mdia geomtrica entre o seu antecedente e o seu consequente:

Logo, a mdia aritmtica ponderada 22.

Tomemos como exemplo trs termos consecutivos de uma PG.:


7,21e63.
Temos ento que o termo 21 mdia geomtrica dos termos7e63.

7) Resposta 4,9.
Soluo:

Vejamos:
8) Resposta
Soluo:

Variaes Percentuais em Sequncia


Outra utilizao para este tipo de mdia quando estamos trabalhando com variaes percentuais em sequncia.
Exemplo

9) Resposta
Soluo: Estamos diante de um problema de mdia aritmtica ponderada, onde as quantidades de profissionais sero os pesos.
E com isso calcularemos a mdia ponderada entre R$ 320,00 , R$
840,00 e R$ 1 600,00 e seus respectivos pesos 20 , 10 e 5. Portanto:

Digamos que uma categoria de operrios tenha um aumento


salarial de20%aps um ms,12%aps dois meses e7%aps trs
meses. Qual o percentual mdio mensal de aumento desta categoria?
Sabemos
que
para
acumularmos
um
aumento
de20%,12%e7%sobre o valor de um salrio, devemos multiplic-lo sucessivamente por1,2,1,12e 1,07que so os fatores correspondentes a tais percentuais.
A partir dai podemos calcular a mdia geomtrica destes fatores:

10) Resposta 11,42.


Soluo:

Como sabemos, um fator de1, 128741corresponde a12,


8741%de aumento.
Mdia Geomtrica

Este o valor percentual mdio mensal do aumento salarial, ou


seja, se aplicarmos trs vezes consecutivas o percentual12, 8741%,
no final teremos o mesmo resultado que se tivssemos aplicado os
percentuais20%,12%e7%.

Este tipo de mdia calculado multiplicando-se todos os valores e extraindo-se a raiz de ndicendeste produto.
Digamos que tenhamos os nmeros4,6e9, para obtermos o
valor mdio aritmtico deste conjunto, multiplicamos os elementos
e obtemos o produto216.
Didatismo e Conhecimento

Digamos que o salrio desta categoria de operrios seja


deR$1.000,00, aplicando-se os sucessivos aumentos temos:
87

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Salrio final

Salrio inicial

+ % mdio

Salrio final

R$ 1.000,00

+ % Informado
20%

R$ 1.200,00

R$ 1.000,00

12, 8417

R$ 1.128,74

R$ 1.200,00

12%

R$ 1.334,00

R$ 1.287,74

12, 8417

R$ 1.274,06

R$ 1.334,00

7%

R$ 1.438,00

R$ 1.274,06

12, 8417

R$ 1.438,08

Salrio Inicial

Observe que o resultado final deR$1.438,08 o mesmo nos dois casos. Se tivssemos utilizado a mdia aritmtica no lugar da mdia
geomtrica, os valores finais seriam distintos, pois a mdia aritmtica de13%resultaria em um salrio final deR$1.442,90, ligeiramente maior
como j era esperado, j que o percentual de13%utilizado ligeiramente maior que os12, 8417%da mdia geomtrica.
Clculo da Mdia Geomtrica
Em uma frmula: a mdia geomtrica dea1,a2, ...,an

A mdia geomtrica de um conjunto de nmeros sempre menor ou igual mdia aritmticados membros desse conjunto (as duas mdias
so iguais se e somente se todos os membros do conjunto so iguais). Isso permite a definio da mdia aritmtica geomtrica, uma mistura das
duas que sempre tem um valor intermedirio s duas.
A mdia geomtrica tambm amdia aritmtica harmnicano sentido que, se duassequncias(an) e (hn) so definidas:

E
entoanehnconvergem para a mdia geomtrica dexey.
Clculo da Media Geomtrica Triangular
Bom primeiro observamos o mapa e somamos as reas dos quadrados catetos e dividimos pela hipotenusa e no final pegamos a soma dos
ngulos subtraindo o que esta entre os catetos e dividimos por PI(3,1415...) assim descobrimos a media geomtrica dos tringulos.
Exemplo
A mdia geomtrica entre os nmeros 12, 64, 126 e 345, dada por:
G = R4[12 64126345] = 76,013
Aplicao Prtica
Dentre todos os retngulos com a rea igual a 64 cm, qual o retngulo cujo permetro o menor possvel, isto , o mais econmico? A
resposta a este tipo de questo dada pela mdia geomtrica entre as medidas do comprimento a e da largura b, uma vez que a.b = 64.
A mdia geomtrica G entre a e b fornece a medida desejada.
G = R[a b] = R[64] = 8
Resposta
o retngulo cujo comprimento mede 8 cm e lgico que a altura tambm mede 8 cm, logo s pode ser um quadrado! O permetro neste
caso p = 32 cm. Em qualquer outra situao em que as medidas dos comprimentos forem diferentes das alturas, teremos permetros maiores
do que 32 cm.
Didatismo e Conhecimento

88

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Interpretao grfica

3) Resposta 6.
Soluo: Aplicando a relao: g2 = a.h, teremos:

A mdia geomtrica entre dois segmentos de reta pode ser obtida geometricamente de uma forma bastante simples.

g2 = 4.9 g2 = 36 g = 6 MG. (4, 9) = 6.

Sejam AB e BC segmentos de reta. Trace um segmento de reta


que contenha a juno dos segmentos AB e BC, de forma que eles
formem segmentos consecutivos sobre a mesma reta.

4) Resposta .
Soluo: Se a mdia geomtrica entre 3 nmeros 4, podemos
escrever:

Se multiplicarmos um deles por m, a nova mdia ser:

e como x . y . z = 64 64 . m = 216

Dessa juno aparecer um novo segmento AC. Obtenha o ponto mdio O deste segmento e com um compasso centrado em O e
raio OA, trace uma semi-circunferncia comeando em A e terminando em C. O segmento vertical traado para cima a partir de B
encontrar o ponto D na semi-circunferncia. A medida do segmento BD corresponde mdia geomtrica das medidas dos segmentos
AB e BC.

5) Resposta 8.
Soluo: Se dispusermos de uma calculadora cientfica, este
exerccio pode ser solucionado multiplicando-se todos os nmeros e
extraindo-se do produto final, a raiz de ndice cinco, pois se tratam
de cinco nmeros:

Exerccios
1. Determine a mdia proporcional ou geomtrica entre 2 e 8.
2. Determine a mdia geomtrica entre 1, 2 e 4.
3. Determine a mdia geomtrica entre dois nmeros sabendo
que a mdia aritmtica e a mdia harmnica entre eles so, respectivamente, iguais a 4 e 9.
4. A mdia geomtrica entre 3 nmeros 4. Quanto devo multiplicar um desses nmeros para que a mdia aumente 2 unidades ?
5. Qual a mdia geomtrica dos nmeros2,4,8,16e32?
6. Dados dois nmeros quaisquer, a mdia aritmtica simples e
a mdia geomtrica deles so respectivamente 20 e 20,5. Quais so
estes dois nmeros?
7. A mdia geomtrica entre dois nmeros igual a 6. Se a eles
juntarmos o nmero 48, qual ser a mdia geomtrica entre estes
trs nmeros?
8. Calcule a mdia geomtrica entre 4 e 9.
9. Calcule a mdia geomtrica entre 3, 3, 9 e 81
10. Calcule a mdia geomtrica entre 1, 1, 1, 32 e 234.

Se no dispusermos de uma calculadora cientfica esta soluo


ficaria meio invivel, pois como iramos extrair tal raiz, isto sem
contar na dificuldade em realizarmos as multiplicaes?
Repare que todos os nmeros so potncia de 2, podemos ento
escrever:

Como dentro do radical temos um produto de potncias de mesma base, somando-se os expoentes temos:

Finalmente dividindo-se o ndice e o expoente por 5 e resolvendo a potncia resultante:

Respostas
1) Resposta 4.
Soluo:

Logo, a mdia geomtrica deste conjunto 8.

2) Resposta 2.
Soluo:

6) Resposta 16, 25.


Soluo: Chamemos deaebestes dois nmeros. A mdia aritmtica deles pode ser expressa como:

Observao: O termo mdia proporcional deve ser, apenas, utilizado para a mdia geomtrica entre dois nmeros.
Didatismo e Conhecimento

J mdia geomtrica pode ser expressa como:


89

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Soluo: Se chamarmos dePo produto destes dois nmeros,
a partir do que foi dito no enunciado podemos montar a seguinte
equao:

Vamos isolarana primeira equao:

Elevando ambos os membros desta equao ao quadrado, iremos obter o valor numrico do produto destes dois nmeros:

Agora que sabemos que o produto de um nmero pelo outro


igual36, resta-nos multiplic-lo por48e extramos a raiz cbica
deste novo produto para encontrarmos a mdia desejada:

Agora para que possamos solucionar a segunda equao, necessrio que fiquemos com apenas uma varivel na mesma. Para
conseguirmos isto iremos substituirapor41 - b:

Note que para facilitar a extrao da raiz cbica, realizamos


a decomposio dos nmeros36e48em fatores primos. Acesse a
pginadecomposio de um nmero natural em fatores primospara
maiores informaes sobre este assunto.
Logo, ao juntarmos o nmero 48 aos dois nmeros iniciais, a
mdia geomtrica passar a ser 12.
8) Resposta 6.
Soluo:

Note que acabamos obtendo uma equao do segundo grau:

Solucionando a mesma temos:

9) Resposta 9.
Soluo:

10) Resposta 6.
Soluo:

O nmerobpode assumir, portanto os valores16e25. de se


esperar, portanto que quandobfor igual a16, queaseja igual a25e
quandobfor igual a25, queaseja igual a16. Vamos conferir.

, portanto atribuindo abum de


Sabemos que
seus possveis valores, iremos encontrar o valor dea.

TCNICAS GERAIS DE LABORATRIO:


CONHECIMENTO, ORGANIZAO,
MANUTENO E UTILIZAO DE
VIDRARIA E EQUIPAMENTOS;

Parab = 16temos:

Equipamentos de laboratrio

Parab = 25temos:

Almofariz com Pistilo: Usado na triturao e pulverizao de


slidos.

Logo, os dois nmeros so 16, 25.

Alonga: Serve para conectar o condensador ao frasco coletor


nas destilaes, direcionando o fluxo de lquido.

7) Resposta 12.
Didatismo e Conhecimento

90

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Cuidados operacionais

Anel ou Argola: Usado como suporte do funil na filtrao.

Cuidados bsicos

Aparelhagem de Destilao: Montagem de aparelhos para


uma destilao. utilizado, um condensador reto, uma alonga, um
balo volumtrico, um adaptador para destilao e uma manta aquecedora.

- Verificar sempre o nivelamento da balana.


- Deixar sempre a balana conectada tomada e ligada para
manter o equilbrio trmico dos circuitos eletrnicos.
- Deixar sempre a balana no modo stand by, evitando a necessidade de novo tempo de aquecimento (warm up).

Balana Digital: Para a medida de massa de slidos e lquidos


no volteis com grande preciso.

O frasco de pesagem

A balana analtica um dos instrumentos de medida mais usados no laboratrio e dela dependem basicamente todos os resultados
analticos.
As balanas analticas modernas, que podem cobrir faixas de
preciso de leitura da ordem de 0,1 g a 0,1 mg, j esto bastante
aperfeioadas a ponto de dispensarem o uso de salas especiais para a
pesagem. Mesmo assim, o simples emprego de circuitos eletrnicos
no elimina as interaes do sistema com o ambiente. Destes, os
efeitos fsicos so os mais importantes, pois no podem ser suprimidos.
As informaes contidas neste texto visam indicar os pontos
mais importantes a serem considerados nas operaes de pesagem.

- Usar sempre o menor frasco de pesagem possvel.


- No usar frascos plsticos, quando a umidade estiver abaixo
de 30-40%.
- A temperatura do frasco de pesagem e seu contedo devem estar mesma temperatura que a do ambiente da cmara de pesagem.
- Nunca tocar os frascos diretamente com os dedos ao coloc-los ou retir-los da cmara de pesagem.
O prato de pesagem
- Colocar o frasco de pesagem sempre no centro do prato de
pesagem.
- Remover o frasco de pesagem do prato de pesagem to logo
termine a operao de pesagem.

Localizao da Balana
A preciso e a confiabilidade das pesagens esto diretamente
relacionadas com a localizao da balana analtica.
Os principais itens a serem considerados para o seu correto posicionamento so:

A leitura
- Verificar se o mostrador indica exatamente zero ao iniciar a
operao. Tare a balana, se for preciso.
- Ler o resultado da operao to logo o detector automtico de
estabilidade desaparea do mostrador.

Caractersticas da sala de pesagem


- Ter apenas uma entrada.
- Ter o mnimo de janelas possvel, para evitar a luz direta do
sol e correntes de ar.
- Ser pouco susceptvel a choques e vibraes.

Calibrao
Calibrar a balana regularmente, principalmente se ela estiver
sendo operada pela primeira vez, se tiver sido mudada de local, aps
qualquer nivelamento e aps grandes variaes de temperatura ou
de presso atmosfrica.

As condies da bancada
Ficar firmemente apoiada no solo ou fixada na parede, de modo
a transmitir o mnimo de vibraes possvel.
- Ser rgida, no podendo ceder ou vergar durante a operao de
pesagem. Pode-se usar uma bancada de laboratrio bem estvel ou
uma bancada de pedra.
- Ficar localizada nas posies mais rgidas da construo, geralmente nos cantos da sala.
- Ser antimagntica (no usar metais ou ao) e protegida das
cargas eletrostticas (no usar plsticos ou vidros).

Manuteno
- Manter sempre a cmara de pesagem e o prato de pesagem
limpos.
- Usar somente frascos de pesagem limpos e secos.
Influncias Fsicas sobre as Pesagens Quando o mostrador da
balana ficar instvel seja por variao contnua da leitura para mais
ou para menos ou simplesmente se a leitura estiver errada

As condies ambientais
- Manter a temperatura da sala constante.
- Manter a umidade entre 45% e 60% (deve ser monitorada
sempre que possvel).
- No permitir a incidncia de luz solar direta.
- No pesar prximo a irradiadores de calor.
- Colocar as luminrias distantes da bancada, para evitar distrbios devido radiao trmica. O uso de lmpadas fluorescentes
menos crtico.
- Evitar pesar perto de equipamentos que usam ventiladores
(ex.: ar condicionado, computadores, etc.) ou perto da porta.
Didatismo e Conhecimento

ATENO: Voc estar observando influncias fsicas indesejveis sobre a operao. As mais comuns so:
Temperatura
- Efeito Observado: O mostrador varia constantemente em uma
direo.
- Motivo: A existncia de uma diferena de temperatura entre
a amostra e o ambiente da cmara de pesagem provoca correntes
de ar.
91

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Estas correntes de ar geram foras sobre o prato de pesagem
fazendo a amostra parecer mais leve (chamada flutuao dinmica).
Este efeito s desaparece quando o equilbrio trmico for estabelecido. Alm disso, o filme de umidade que cobre qualquer amostra, e
que varia com a temperatura, encoberto pela flutuao dinmica.
Isto faz com que um objeto frio parea mais pesado ou um objeto
mais quente mais leve.

- Motivo: Se o material for magntico (ex.: ferro, ao, nquel,


etc.) pode estar ocorrendo atrao mtua com o prato da balana,
criando foras que levam a uma medida errnea.
- Medidas corretivas:
- Se possvel, desmagnetize as amostras ferromagnticas.
- Como as foras magnticas diminuem com a distncia, separar a amostra do prato usando um suporte no-magntico (ex.: um
bquer invertido ou um suporte de alumnio).
- Usar o gancho superior do prato da balana, se existir.

- Medidas corretivas:
- Nunca pesar amostras retiradas diretamente de estufas, muflas, ou refrigeradores.
- Deixar sempre a amostra atingir a temperatura do laboratrio
ou da cmara de pesagem.
- Procurar sempre manusear os frascos de pesagens ou as amostras com pinas. Se no for possvel, usar uma tira de papel.
- No tocar a cmara de pesagem com as mos.
- Usar frascos de pesagem com a menor rea possvel.

Gravitao
- Efeito Observado: As pesagens variam de acordo com a latitude. Quanto mais prximo do equador maior a fora centrfuga
devido rotao da Terra, que se contrape fora gravitacional.
Desta forma, a fora atuando sobre uma massa maior nos plos
que no equador. As pesagens dependem tambm da altitude em relao ao nvel do mar (mais exatamente, em relao ao centro da Terra). Quanto mais alto, menor a atrao gravitacional, que decresce
com o quadrado da distncia.

Variao de massa
- Efeito Observado: O mostrador indica leituras que aumentam
ou diminuem, continua e lentamente.
- Motivo: Ganho de massa devido a uma amostra higroscpica
(ganho de umidade atmosfrica) ou
perda de massa por evaporao de gua ou de substncias volteis.

- Medidas corretivas:
- Pesagens diferenciais ou comparativas ou de preciso, efetuadas em diferentes latitudes ou altitudes (ex.: no trreo e em outros
andares de mesmo prdio) devem ser corrigidas.

Medidas corretivas:
- Usar frascos de pesagem limpos e secos e manter o prato de
pesagem sempre livre de poeira, contaminantes ou gotas de lquidos.
- Usar frascos de pesagem com gargalo estreito.
- Usar tampas ou rolhas nos frascos de pesagem.
Eletrosttica
- Efeito Observado: O mostrador da balana fica instvel e indica massas diferentes a cada pesagem da mesma amostra. A reprodutibilidade dos resultados fica comprometida.
- Motivo: O seu frasco de pesagem est carregado eletrostaticamente. Estas cargas formam-se por frico ou durante o transporte
dos materiais, especialmente os ps e grnulos. Se o ar estiver seco
(umidade relativa menor que 40%) estas cargas eletrostticas ficam
retidas ou so dispersadas lentamente. Os erros de pesagem acontecem por foras de atrao eletrostticas que atuam entre a amostra
e o ambiente. Se a amostra e o ambiente estiverem sob o efeito de
cargas eltricas de mesmo sinal [+ ou -] ocorrem repulses, enquanto que sob o efeito de cargas opostas [+ e -], observam-se atraes.

Balo de Fundo Chato: Utilizado como recipiente para conter lquidos ou solues, ou mesmo fazer reaes com desprendimento de gases. Pode ser aquecido sobre o TRIP com TELA DE
AMIANTO.
Balo de Fundo Redondo: Utilizado principalmente em sistemas de refluxo e evaporao a vcuo, acoplado a ROTAEVAPORADOR.
Balo Volumtrico: Possui volume definido e utilizado para
o preparo de solues em laboratrio.

- Medidas corretivas:

Bquer: de uso geral em laboratrio. Serve para fazer reaes entre solues, dissolver substncias slidas, efetuar reaes
de precipitao e aquecer lquidos. Pode ser aquecido sobre a TELA
DE AMIANTO.

- Aumentar a umidade atmosfrica com o uso de um umidificador ou por ajustes apropriados no sistema de ar condicionado
(umidade relativa ideal: 45-60%).
- Descarregar as foras eletrostticas, colocando o frasco de pesagem em um recipiente de metal, antes da pesagem.
- Conectar a balana a um terra eficiente.

Bico de Bunsen: a fonte de aquecimento mais utilizada em


laboratrio. Mas contemporaneamente tem sido substitudo pelas
MANTAS E CHAPAS DE AQUECIMENTO.
O bico de Bunsen um dispositivo usado em qumica para efetuar aquecimento de solues em laboratrio. O bico de Bunsen foi
aperfeioado por Robert Wilhelm Bunsen, a partir de um dispositivo
desenhado por Michael Faraday.

Magnetismo
- Efeito Observado: Baixa reprodutibilidade. O resultado da
pesagem de uma amostra metlica depende da sua posio sobre o
prato da balana.
Didatismo e Conhecimento

92

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Em biologia, especialmente em microbiologia e biologia molecular, usado para manuteno de condies estreis quando da
manipulao de microorganismos, DNA, etc.
O bico de Bunsen queima em segurana um fluxo contnuo de
gs sem haver o risco da chama se propagar pelo tubo at o depsito
de gs que o alimenta. Normalmente o bico de Bunsen queima gs
natural, ou alternativamente um GPL, tal como propano ou butano,
ou uma mistura de ambos. (O gs natural basicamente metano com
uma reduzida quantidade de propano e butano).
Diz-se que a rea estril do bico de bunsen seja de 10 cm. Quando a janela do Bico de Bunsen est fechada sua chama igual de
uma vela, pois apenas queima o oxignio que esta em volta e sua
chama fica mais fraca.
Os bicos de Bunsen esto sendo substitudos hoje em dia por
outros sistemas de aquecimento usando energia eltrica. Sistemas
eltricos so mais seguros, pois no produzem chamas, eliminando
assim o risco de reaes no controladas.
Tambm so mais eficientes que os bicos de Bunsen pois conseguem atingir temperaturas muito mais altas, e em uma rea muito
mais abrangente do que a chama atingiria.
Os bicos de Bunsen ainda so muito usados em laboratrios
devido velocidade com que conseguem atingir altas temperaturas
e tambm para esterilizao de materiais.

Seu uso mais comum se d nas etapas de padronizao de solues, onde um sal de uma determinada substncia aquecido em
estufa e posteriormente posto para esfriar sob presso reduzida no
interior do dessecador. O resfriamento a presso reduzida e no interior do dessecador impede a absoro de gua pelo sal enquanto
sua temperatura se iguala ambiente, para que seja posteriormente
pesado.
Erlenmeyer: Utilizado em titulaes, aquecimento de lquidos
e para dissolver substncias e proceder reaes entre solues.
Estante para Tubo de Ensaio: usada para suporte de os TUBOS DE ENSAIO.
Funil de Bchner: Utilizado em filtraes a vcuo. Pode ser
usado com a funo de FILTRO em conjunto com o KITASSATO.
Funil de Haste Longa: Usado na filtrao e para reteno de
partculas slidas. No deve ser aquecido.
Funil de Separao: Utilizado na separao de lquidos no
miscveis e na extrao lquido/lquido.
Garra de Condensador: Usada para prender o condensador
haste do suporte ou outras peas como bales, erlenmeyers etc.

Bureta: Aparelho utilizado em anlises volumtricas. Uma bureta um instrumento de medio e transferncia rigorosa de volumes lquidos.

Kitassato: Utilizado em conjunto com o FUNIL DE BUCHNER em FILTRAES a vcuo.

Cadinho: Pea, geralmente de porcelana, cuja utilidade aquecer substncias a seco e com grande intensidade, por isto pode ser
levado diretamente ao BICO DE BUNSEN.

Manta Aquecedora: Equipamento usado juntamente com um


balo de fundo redondo; uma fonte de calor que pode ser regulada
quanto temperatura.

Cpsula de Porcelana: Pea de porcelana usada para evaporar


lquidos das solues.

Pina de Madeira: Usada para prender o TUBO DE ENSAIO


durante o aquecimento.

Chapa Eltrica e Agitador: utilizada para o aquecimento de


substncias de uma forma em geral, principalmente as substncias
inflamveis. Esta a forma mais comum e segura de aquecimento
em um laboratrio de qumica, atualmente. Ela tambm pode ser
utilizada para o agitamento de solues, aquecidas ou no.

Pina Metlica: Usada para manipular objetos aquecidos.


Pipeta: H dois tipos clssicos de pipetas:
- pipetas graduadas: possuem uma escala para medir volumes
variveis;
- pipetas volumtricas: possuem apenas um trao final, para indicar o volume fixo e final indicado por ela, sendo estas mais rigorosas que as graduadas.

Condensador: Utilizado na destilao, tem como finalidade


condensar vapores gerados pelo aquecimento de lquidos.
Dessecador: Usado para guardar substncias em atmosfera
com baixo ndice de umidade. Um dessecador um recipiente fechado que contm um agente de secagem chamado dessecante. A
tampa engraxada (com graxa de silicone) para que feche de forma
hermtica. utilizado para guardar substancias em ambientes com
baixo teor de umidade.

Para utilizar uma destas pipetas tambm necessrio uma prpipeta ou pompete, um pipet-aid ou um macro-filler. Estes podem
ser colocados na ponta superior da pipeta, produzindo um abaixamento da presso de seu interior e provocando a aspirao do lquido de tal forma a preencher a pipeta no volume desejado.
Um outro tipo de pipetas, usado especialmente em laboratrios
de biologia, bioqumica ou quando h a necessidade de se transferir volumes muito reduzidos, a micropipeta (imagem acima). Esta
permite medir pequenos volumes, da ordem de microlitros, porm,
com preciso e exatido geralmente inferiores s obtidas pelas pipetas graduadas e volumtricas de maior volume. Este tipo de pipeta
utiliza pontas (no Brasil chamadas de ponteiras) descartveis, feitas
de polipropileno. O lquido aspirado por elas no entra ou no deve
entrar no corpo principal da micropipeta, sob risco de adulter-la e
descalibr-la.

O agente dessecante mais utilizado a slica, que deve estar


na colorao azul (seca). Quando a slica fica na colorao avermelhada, significa que j est saturada de gua, impossibilitando que a
mesma absorva a gua do interior do dessecador. Como auxlio ao
processo de secagem de substncias, comum o acoplamento de
uma bomba de vcuo para reduzir a presso no interior do dessecador, quando o mesmo apresenta uma vlvula para esta finalidade
na tampa. Aps o vcuo desejado, a vlvula fechada e a bomba de
vcuo desacoplada.
Didatismo e Conhecimento

93

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Para biologia molecular, so utilizadas pontas com um filtro de
polipropileno para no haver uma contaminao da micropipeta. A
micropipeta pode ser digital e eletrnica. A maioria das micropipetas
so monocanais mas tambm existem micropipetas multicanais (8 e
12 canais). A micropipeta mais precisa do mundo uma pipeta que
mede zeptolitros e foi inventada pelo Brookhaven National Laboratory.

Erlenmeyer:Usado principalmente para preparar e guardar


solues, e em titulaes, onde fica o titulado, isto , a soluo que
queremos descobrir a concentrao, com algum indicador cido-base adicionado. Todas as funes exercidas pelo bquer tambm
podem ser realizadas com o erlenmeyer, porm, essa ltima vidraria
tem a vantagem de seu formato ser mais afunilado, o que permite
agitao manual sem que haja risco de perda do material;

Pisseta ou Frasco Lavador: Usada para lavagens de materiais


ou recipientes atravs de jatos de gua, lcool ou outros solventes.
Proveta ou Cilindro Graduado: Serve para medir e transferir
volumes de lquidos. No pode ser aquecida.
Suporte Universal: Utilizado em operaes como:
Filtrao, Suporte para Condensador, Bureta, Sistemas de Destilao etc. Serve tambm para sustentar peas em geral.
Tela de Amianto: Suporte para as peas a serem aquecidas. A
funo do amianto distribuir uniformemente o calor recebido pelo
BICO DE BUNSEN.
Tubo de Ensaio: Empregado para fazer reaes em pequena
escala, principalmente em testes de reao em geral. Pode ser aquecido com movimentos circulares e com cuidado diretamente sob a
chama do BICO DE BNSEN.
Trip: Sustentculo para efetuar aquecimentos de solues em
vidrarias diversas de laboratrio. utilizado em conjunto com a
TELA DE AMIANTO.
Vidro de Relgio: Pea de Vidro de forma cncava usada em
anlises e evaporaes. No pode ser aquecida diretamente.

Balo volumtrico:Utilizado para preparar volumes de solues. Por ser mais estreito, o volume medido por ele mais preciso;
Balo de fundo chato:Para preparar solues, aquec-las e
realizar reaes em que gases se desprendem;
Balo de fundo redondo:Tem os mesmos usos que o anterior, porm, pode ser aquecido de uma forma mais abrangente e
apropriado aos processos de destilao, em sistemas de refluxo e
evaporao a vcuo;
Proveta: um cilindro graduado usado para medir e transferir
lquidos e solues por escoamento. No possui muita preciso;
Pipeta graduada: Todas as pipetas so usadas para medir e
transferir volumes de lquidos ou solues, em que se coloca o lquido por um orifcio na extremidade inferior atravs da suco. Para
realizar essa suco, geralmente, usa-se uma pera de borracha.
Sua preciso muito boa;

Vidraria Laboratorial

Pipeta volumtrica: Mesma aplicao da anterior, porm, o


volume que medido e transferido fixo;

O qumico um profissional que investiga a composio das


substncias, as suas propriedades, suas transformaes, os efeitos
dessas transformaes em novas substncias e o desenvolvimento
de modelos que possam explicar esses fenmenos. Alm disso, ele
atua no desenvolvimento de processos de anlise, sntese de substncias e materiais, bem como na separao de misturas.
Mas para realizar esse trabalho de modo eficaz, os cientistas dependem cada vez mais da construo de aparelhos e equipamentos
que tenham a maior preciso possvel. Entre esses equipamentos,
os mais usados pelos qumicos so asvidrarias, que recebem esse
nome exatamente porqueso feitas de vidro temperado, dessa forma aguentam temperaturas muito elevadas.
Cada vidraria usada com uma finalidade especfica. J os mais
estreitos, como as pipetas e os bales volumtricos, identificam facilmente a variao de pequenas gotas no volume do recipiente, sendo, portanto, mais precisos.

Bureta: Mede volumes de lquidos e solues que so colocados pela abertura na parte superior. Eles so transferidos por escoamento, na parte inferior. Seu principal benefcio possuir uma
torneira que permite escoar com preciso a quantidade desejada, at
mesmo gota a gota. Visto que ela possui graduaes em toda a sua
extenso, possvel realizar a leitura de volume escoado.
A bureta muito usada em titulaes, onde fica o titulante;
Vareta de vidro (ou basto de vidro):Usada para agitar ou
misturar solues;
Funil de vidro:Realiza filtraes simples.
Texto adaptado por Jennifer Rocha Vargas Fogaa

Veja as vidrarias mais usadas nos laboratrios de Qumica e


suas aplicaes:
Tubo de ensaio:Esse um dos mais usados em laboratrio,
pois serve para testar reaes em pequena escala, com poucos reagentes;
Bquer:Tambm um dos mais usados em laboratrio, servindo para diversas finalidades, tais como preparar solues dissolvendo substncias slidas no solvente, aquecer lquidos ou solues,
realizar reaes e misturas. Em algumas situaes, ele usado para
se estimar o volume de lquido ou solues, mas visto que ele um
recipiente mais largo, ele ser impreciso na medida;
Didatismo e Conhecimento

94

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


O nvel de Biossegurana 2 adequado para qualquer trabalho
que envolva sangue humano, lquidos corporais, tecidos ou linhas de
clulas humanas primrias onde a presena de um agente infeccioso
pode ser desconhecida. Embora os organismos rotineiramente manipulados em um Nvel de Biossegurana 2 no sejam transmitidos
atravs de aerossis, os procedimentos envolvendo um alto potencial para a produo de salpicos ou aerossis que possam aumentar
o risco de exposio destes funcionrios devem ser conduzidos com
um equipamento de conteno primria ou com dispositivos como
a Cabine de Segurana Biolgica (CSB) ou os copos de segurana da centrfuga. Outras barreiras primrias, como os escudos para
borrifos, proteo facial, aventais e luvas, devem ser utilizadas. As
barreiras secundrias, como pias para higienizao das mos e instalaes para descontaminao de lixo, devem existir com o objetivo
de reduzir a contaminao potencial do meio ambiente.

PRINCPIOS DE BIOSSEGURANA: NVEIS


DE BIOSSEGURANA LABORATORIAL,
EQUIPAMENTOS DE SEGURANA
(BARREIRAS PRIMRIAS) E INSTALAES
LABORATORIAIS (BARREIRAS
SECUNDRIAS).
A biossegurana em laboratrios tambm abordada na RDC
n 50, atravs de um conjunto de prticas, equipamentos e instalaes voltados para a preveno, minimizao ou eliminao de
riscos inerentes s atividades de prestao de servios, pesquisas,
produo e ensino, visando sade dos homens, preservao do
ambiente e qualidade dos resultados. Existem quatro nveis de
biossegurana: NB-1, NB-2, NB-3 e NB-4, crescentes no maior
grau de conteno e complexidade do nvel de proteo, que consistem de combinaes de prticas e tcnicas de laboratrio e barreiras
primrias e secundrias de um laboratrio. O responsvel tcnico
pelo laboratrio o responsvel pela avaliao dos riscos e pela aplicao adequada dos nveis de biossegurana, em funo dos tipos de
agentes e das atividades a serem realizadas.
Para manipulao dos microrganismos pertencentes a cada uma
das quatro classes de risco devem ser atendidos alguns requisitos de
segurana, conforme o nvel de conteno necessrio. Estes nveis
de conteno so denominados de nveis de Biossegurana.
Os nveis so designados em ordem crescente, pelo grau de proteo proporcionado ao pessoal do laboratrio, meio ambiente e
comunidade.

O nvel de Biossegurana 3, as prticas, o equipamento de segurana, o planejamento e construo das dependncias so aplicveis para laboratrios clnicos, de diagnstico, laboratrio-escola, de
pesquisa ou de produes. Nesses locais realiza-se o trabalho com
agentes nativos ou exticos que possuam um potencial de transmisso via respiratria e que possam causar infeces srias e potencialmente fatais. O Mycobacterium tuberculosis, o vrus da encefalite
de St. Louis e a Coxiella burnetii so exemplos de microrganismos
determinados para este nvel. Os riscos primrios causados aos trabalhadores que lidam com estes agentes incluem a auto inoculao,
a ingesto e a exposio aos aerossis infecciosos.
No Nvel de Biossegurana 3, enfatizam-se mais as barreiras
primrias e secundrias para protegerem os funcionrios de reas
contguas, a comunidade e o meio ambiente contra a exposio aos
aerossis potencialmente infecciosos. Por exemplo, todas as manipulaes laboratoriais devero ser realizadas em uma cabine de
segurana biolgica (CSB) ou em outro equipamento de conteno,
como uma cmara hermtica de gerao de aerossis. As barreiras
secundrias para este nvel incluem o acesso controlado ao laboratrio e sistemas de ventilao que minimizam a liberao de aerossis
infecciosos do laboratrio.

O nvel de Biossegurana 1, representa um nvel bsico de


conteno que se baseia nas prticas padres de microbiologia, sem
uma indicao de barreiras primrias ou secundrias, com exceo
de uma pia para a higienizao das mos. As prticas, o equipamento de segurana e o projeto das instalaes so apropriados para o
treinamento educacional secundrio ou para o treinamento de tcnicos e de professores de tcnicas laboratoriais. Este conjunto tambm utilizado em outros laboratrios onde realizado o trabalho,
com cepas definidas e caracterizadas de microrganismos viveis e
conhecidos por no causarem doenas em homens adultos e sadios.
O Bacillus subtilis, o Naegleria gruberi, o vrus da hepatite canina
infecciosa e organismos livres sob as Diretrizes do NIH de DNA Recombinantes so exemplos de microrganismos que preenchem todos
estes requisitos descritos acima. Muitos agentes que geralmente no
esto associados a processos patolgicos em homens so, entretanto,
patgenos oportunos e que podem causar uma infeco em jovens,
idosos e indivduos imunodeprimidos.

O nvel de Biossegurana 4, As prticas, o equipamento de


segurana, o planejamento e construo das dependncias so aplicveis para trabalhos que envolvam agentes exticos perigosos que
representam um alto risco por provocarem doenas fatais em indivduos. Estes agentes podem ser transmitidos via aerossis, e at o
momento no h nenhuma vacina ou terapia disponvel. Os agentes
que possuem uma relao antignica prxima ou idntica aos dos
agentes do Nvel de Biossegurana 4 tambm devero ser manuseados neste nvel. Quando possumos dados suficientes, o trabalho
com esses agentes deve continuar neste nvel ou em um nvel inferior. Os vrus como Marburg ou vrus da febre hemorrgica Crimia
Congo so manipulados no Nvel de Biossegurana 4.

O nvel de Biossegurana 2, as prticas, os equipamentos, o


projeto e a construo so aplicveis aos laboratrios clnicos, de
diagnstico, laboratrios-escolas e outros laboratrios onde o trabalho realizado com um maior espectro de agente nativos de risco
moderado presentes na comunidade e que estejam associados a uma
patologia humana de gravidade varivel. Com boas tcnicas de microbiologia, esses agentes podem ser usados de maneira segura em
atividades conduzidas sobre uma bancada aberta, uma vez que o
potencial para a produo de borrifos e aerossis baixo. O vrus da
hepatite B, o HIV, a Salmonella spp. e Toxoplasma spp. so exemplos de microrganismos designados para este nvel de conteno.
Didatismo e Conhecimento

Os riscos primrios aos trabalhadores que manuseiam agentes


do Nvel de Biossegurana 4 incluem a exposio respiratria aos
aerossis infecciosos, exposio da membrana mucosa e/ou da pele
lesionada s gotculas infecciosas e a auto inoculao. Todas as manipulaes de materiais de diagnstico potencialmente infeccioso,
substncias isoladas e animais naturalmente ou experimentalmente
infectados apresentam um alto risco de exposio e infeco aos
funcionrios de laboratrio, comunidade e ao meio ambiente.
95

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


O completo isolamento dos trabalhadores de laboratrios em relao aos materiais infecciosos aerossolizados realizado primariamente
em cabines de segurana biolgica Classe III ou com um macaco individual suprido com presso de ar positivo. A instalao do Nvel de
Biossegurana 4 geralmente construda em um prdio separado ou em uma zona completamente isolada, com uma complexa e especializada
ventilao e sistemas de gerenciamento de lixo que evitem uma liberao de agentes viveis no meio ambiente.
A seguir, apresentado um quadro resumo dos nveis de biossegurana recomendados para agentes infecciosos, segundo orientao contida na publicao do CDC Centro de Preveno e Controle de Doenas do Departamento de Sade e Servios Humanos dos EUA, Biossegurana em Laboratrios Biomdicos e de Microbiologia, traduzida pelo Ministrio da Sade/Fundao Nacional de Sade.

Didatismo e Conhecimento

96

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


De acordo com o nvel de biossegurana exigido, so definidos os requisitos recomendados e obrigatrios, que se classificam em barreiras
de conteno primrias e secundrias.
Barreiras Primrias - equipamentos de segurana
So considerados como barreiras primrias as cabines de segurana biolgica (CSB) ou outros equipamentos projetados para remover ou
minimizar exposies aos materiais biolgicos perigosos. A CSB o dispositivo principal utilizado para proporcionar a conteno de borrifos
ou aerossis infecciosos provocados por inmeros procedimentos microbiolgicos.
Trs tipos de cabines de segurana biolgica (Classe I, II e III) usadas em laboratrios de microbiologia esto descritas.

Anlise das diferenas


As cabines de segurana biolgica Classe I e II, que possuem a frente aberta, so barreiras primrias que oferecem nveis significativos de
proteo para a equipe do laboratrio e para o meio ambiente quando utilizadas com boas tcnicas microbiolgicas.
As cabines de segurana biolgica Classe II subdividem-se ainda segundo o padro de fluxo do ar em A, B1, B2 e B3. Fornecem uma
proteo contra a contaminao externa de materiais (por exemplo, cultura de clulas, estoque microbiolgico) que sero manipulados dentro
das cabines. A cabine de segurana biolgica Classe III, hermtica e impermevel aos gases, proporciona o mais alto nvel de proteo aos
funcionrios e ao meio ambiente.
Didatismo e Conhecimento

97

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Barreiras Secundrias

(iii) o compromisso da gerncia do laboratrio com as boas prticas profissionais e de qualidade de ensaios, calibrao, validao
e verificao,
(iv) o compromisso da gerncia do laboratrio com o cumprimento do contedo deste guia,
(v) o requisito de que todo o pessoal relacionado com as atividades de anlise e calibrao dentro do laboratrio esteja familiarizado com a documentao concernente a qualidade e a implementao das polticas e procedimentos de seu trabalho.

Entende-se como barreiras secundrias algumas solues fsicas presentes nos ambientes, devidamente previstas nos projetos
de arquitetura e de instalaes prediais, e construdas de forma a
contriburem para a proteo da equipe do estabelecimento de sade, proporcionando uma barreira de proteo para as pessoas que se
encontram fora do laboratrio contra agentes infecciosos que podem
ser liberados acidentalmente para o ambiente externo.
As barreiras secundrias recomendadas dependero do risco de
transmisso dos agentes especficos. Quando o risco de contaminao atravs da exposio aos aerossis infecciosos estiver presente,
nveis mais elevados de conteno primria e barreiras de proteo
secundrias podero ser necessrios para evitar que agentes infecciosos escapem para o meio ambiente.

(b) a estrutura do laboratrio (organograma);


(c) as atividades operacionais e funcionais relacionadas com a
qualidade, de modo que o alcance e os limites das responsabilidades
estejam claramente definidas;
(d) o esboo da estrutura da documentao usada no sistema de
gesto da qualidade do laboratrio
(e) os procedimentos gerais internos de gesto da qualidade;
(f) referncias aos procedimentos especficos para cada ensaio;
(e) informao sobre as qualificaes apropriadas, experincias
e competncias que so requeridas para o pessoal
(h) informao sobre capacitao do pessoal, inicial e em servio;
(i) uma poltica para auditorias interna e externa
(j) Uma poltica para implementar e verificar aes preventivas
e corretivas;
(k) uma poltica para tratar as reclamaes;
(l) uma poltica para realizar revises gerenciais do sistema de
gesto da qualidade;
(m) uma poltica para selecionar, estabelecer e aprovar os procedimentos analticos;
(n) uma poltica para tratamento dos resultados fora de especificao (OOS);
(o) uma poltica para o emprego de substncia e materiais de
referncia apropriados;
(p) uma poltica para a participao em sistema adequados de
ensaios de proficincia e ensaios colaborativos e avaliao de desempenho (aplicveis a laboratrios farmacuticos nacionais de
controle de qualidade, para que se possa aplicar a outros laboratrios);
(q) uma poltica para selecionar os fornecedores de servios e
materiais;

Estas caractersticas do projeto incluem:


- Sistemas de ventilao especializados em assegurar o fluxo de
ar unidirecionado;
- Sistemas de tratamento de ar para a descontaminao ou remoo do ar liberado;
- Zonas de acesso controlado;
- Cmaras pressurizadas com entradas separadas para o laboratrio ou mdulos para isolamento do laboratrio.

NOES DE PRTICAS
LABORATORIAIS ADEQUADAS.

A gerncia da organizao ou laboratrio deve estabelece, implementar e manter um sistema de gesto da qualidade apropriado
para o alcance das suas atividades, incluindo o tipo, serie e volume
dos ensaios e/ou atividade de calibraes, validao e verificao relacionadas. A gerncia do laboratrio deve assegurar que as suas polticas, sistemas, programas, procedimentos e instrues descrevam
a sua extenso necessria para que permita ao laboratrio assegurar
a qualidade dos resultados dos ensaios que gera. A documentao
usada neste sistema de gesto da qualidade deve ser comunicada,
estar disponvel e ser entendida, e implementada pelo pessoal apropriado. Os elementos deste sistema devem estar documentados em
um manual da qualidade, para a organizao e seu conjunto ou para
um laboratrio dentro da organizao.

O laboratrio deve estabelecer, implementar e manter procedimentos operacionais padro (POPs) autorizados e escritos incluindo, mas no se limitando, a operaes tcnicas e administrativa, tais
como:
(a) aes relativas ao pessoal, incluindo qualificaes, treinamento, vesturio e higiene;
(b) controle de alteraes;
(c) auditoria interna
(d) procedimento de reclamaes
(e) implementao e verificao de aes corretivas e preventivas
(f) a compra e recebimento de materiais (por exemplo, amostras, reagentes);
(g) a obteno, preparao e controle de sustncias e materiais
de referncia (8);
(h) rotulagem interna, quarentena e armazenamento de materiais;

Nota: Os laboratrios de controle de qualidade de um fabricante podem ter esta informao em documentos distintos do manual da qualidade
O manual da qualidade deve conter no mnimo:
a) uma declarao de poltica de qualidade, que inclua pelo menos o seguinte:
(i) uma declarao das intenes da gerncia do laboratrio
com relao ao padro de servio que proporcionar;
(ii) um compromisso de estabelecer, implementar e manter um
sistema de gesto da qualidade efetivo,
Didatismo e Conhecimento

98

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


(i) a qualificao de equipamentos (11);
(j) a calibrao de equipamentos;
(k) manuteno preventiva e verificao de instrumentos e
equipamentos;
(l) amostragem, se realizada pelo laboratrio, e inspeo visual;
(m) a anlise das amostras com descries dos mtodos e equipamentos utilizados;
(n) resultados atpicos e fora de especificaes (OOS);
(o) validao de procedimentos analticos
(p) limpeza de instalaes do laboratrio, incluindo a parte superior dos bancos, equipamentos, bancadas de trabalho, salas limpas
(salas asspticas) e vidraria;
(q) monitoramento e controle das condies ambientais, por
exemplo, temperatura e umidade;
(r) monitoramento e controle das condies de armazenamento;
(s) eliminao de reagentes e amostras de solventes; e
(t) medidas de biossegurana;

(d) Qualquer documento invlido seja removido e substitudo


pelo documento revisado e autorizado com efeito imediato;
(e) um documento revisado inclua referncias ao documento
anterior;
(f) os documentos antigos e invlidos sejam conservados em
arquivos para assegurar a rastreabilidade e a evoluo dos procedimentos, caso alguma cpia seja destruda;
(g) todos os membros pertinentes do grupo de trabalho sejam
treinados nos procedimentos operacionais padro (POPs) novos e
revisados; e
(h) a documentao da qualidade, incluindo os registros, seja
conservada por no mnimo 5 anos.
Um sistema de controle de alterao deve estar includo para
informar ao grupo de trabalho os procedimentos novos e revisados.
O sistema deve assegurar que:
(a) os documentos revisados sejam preparados por um elaborador, ou uma pessoa que realize a mesma funo, revisados e
aprovados no mesmo nvel que o documento original e conhecido
posteriormente pelo gerente de qualidade (unidade de qualidade); e
b) o pessoal reconhecido por uma assinatura tenha conhecimento das mudanas aplicveis e seus dados de implementao.

As atividades do laboratrio devem ser peridica e sistematicamente auditadas (internamente e onde corresponda, por auditorias
ou inspees externas) para verificar o cumprimento dos requisitos
do sistema de gesto da qualidade e se for necessrio, para aplicar
aes preventivas e corretivas. As auditorias devem ser realizadas
por pessoas qualificadas e treinadas, que sejam independentes da
atividade a ser auditada. O gerente de qualidade responsvel pelo
planejamento e organizao de auditorias internas abordando todos
os elementos do sistema de gesto da qualidade. Tais auditorias devem ser registradas, junto com os detalhes de qualquer ao corretiva e preventiva adotadas.

Registros
O laboratrio deve estabelecer e manter procedimentos para
a identificao, coleo, indexao, recuperao, armazenamento,
manuteno, eliminao e acesso a todos os registros da qualidade
e tcnico-cientficos.
Todas as observaes originais, incluindo os clculos e dados
brutos, registros de calibraes, validao e verificaes, e resultados finais, devem ser conservados como registros, por um perodo
apropriado de tempo em conformidade com as regulamentaes
nacionais, e corresponde, mediante disposies contratuais, o que
for mais longo. Os registros devem incluir os dados registrados nos
registros de trabalho analtico pelo tcnico ou analista em pginas
numeradas consecutivamente com referncias aos apndices que
contm os registros pertinentes, por exemplo cromatogramas e espectros. Os registros de cada ensaio devem conter informao suficiente que permita que os ensaios sejam repetidos e/ou os resultados
recalculados, se necessrio. Os registros devem incluir a identidade do pessoal envolvido na amostragem, preparao e anlises das
amostras. Os registros das amostras que so usadas em procedimentos legais, devem ser mantidos de acordo com os requisitos legais
que lhes sejam aplicveis.

A reviso gerencial em questes de qualidade deve ser realizada


regularmente (pelo menos anualmente) incluindo:
(a) relatrios de auditorias ou inspees internas e externas e
qualquer controle necessrio para corrigir todas as deficincias;
(b) o resultado das investigaes realizadas como consequncia de reclamaes recebidas, resultados anormais ou duvidosos
(atpicos) informados em anlises de colaborao e/ou ensaios de
proficincia; e
(c) Aes corretivas aplicadas e aes preventivas introduzidas
como resultados destas investigaes.
Controle de documentos
A documentao parte essencial do sistema de gesto da qualidade. O laboratrio deve estabelecer e manter procedimentos para
controlar e revisar todos os documentos (tanto os gerados internamente como provenientes de origem externa) que fazem parte da
documentao da qualidade. Deve-se estabelecer e estar disponvel
facilmente, uma lista mestra para identificar o estado da verso atual
e da distribuio de documentos

Nota: recomenda-se como perodo de reteno a vida til mais


um ano para um produto farmacutico no mercado e 15 anos para
um produto em investigao, a menos que regulaes nacionais sejam mais restritivas ou ajustes contratuais no o requeiram.

Os procedimentos devem assegurar que:


(a) cada documento, seja um documento da qualidade ou tcnico, tenha uma identificao, nmero de reviso e data de implementao unvocos;
(b) procedimentos operacionais padro (POPs) autorizados e
apropriados estejam disponveis nos locais pertinentes, por exemplo, prximo de equipamentos;
(c) os documentos so mantidos atualizados e revisados segundo seu requisitos;
Didatismo e Conhecimento

Todos os registros da qualidade e tcnico/cientficos (incluindo registros de ensaios analticos, laudos de anlise e registros de
trabalho analtico) devem ser legveis, prontamente recuperveis,
armazenados e retidos dentro de dependncias que propiciem um
ambiente adequado para impedir modificaes, danos ou deteriorao e/ou perda.
99

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


As condies sob os quais todos os registros originais devem
ser armazenados so aquelas que assegurem sua segurana e confidencialidade, e o acesso a eles devem ser restringidos ao pessoal
autorizado. Armazenamento e assinatura eletrnicos devem ser implementados com acesso restrito e em conformidade com os requisitos de registros eletrnicos (12-16).

(i) Os procedimentos para realizar a calibrao, verificao e


(re)qualificao de instrumentos, controle das condies ambientais
e armazenamento estejam previstos e sejam realizados como requeridos,
(ii) sejam preparados programas de treinamento em servio,
para atualizar e melhorar as competncias tanto do pessoal de nvel
superior como tcnico,
(iii) seja guardado em segurana qualquer material sujeito a
regulao como veneno ou substncias narcticas controladas e psicotrpicas e mantida em local de trabalho sob a superviso de uma
pessoa autorizada;
(iv) os laboratrios farmacuticos nacionais de controle de qualidade participem regularmente em ensaios de proficincia adequados e ensaios de colaborao para avaliar os procedimentos analticos e de substncias de referncia;
(c) os analistas, com graduao em farmcia, qumica analtica, microbiologia ou outras matrias pertinentes com o requisito de
conhecimento, destreza e habilidade, com capacidade para executar
corretamente as funes atribudas pela gesto e superviso do pessoal tcnico;
(d) o pessoal tcnico, tem que ter diploma em matrias afins,
outorgados por escolas tcnicas ou vocacionais; e
(e) um gerente da qualidade (ver Parte Um, seo 1.3(j)).

Os registros de gesto da qualidade devem incluir relatrios de


auditorias internas (e externas, se forem realizadas) e anlise crtica
pela direo, assim como os registros de todas as denuncias e suas
investigaes, incluindo as possveis aes preventivas e corretivas.
Pessoal
O laboratrio deve ter pessoal suficiente com formao, treinamento, conhecimento tcnico e experincia necessria para as funes atribudas.
A gerncia tcnica deve assegurar a competncia de todas as
pessoas que operam equipamentos especficos, instrumentos ou
outros dispositivos, e que realizam ensaios e/ou calibraes, validaes ou verificaes. As suas obrigaes tambm incluem tanto
a avaliao de resultados, bem como a assinatura dos registros de
ensaios analticos e laudos de anlises (ver Parte trs, sees 18.7
18.11 e 19).
O pessoal em treinamento deve ser supervisionado apropriadamente, sendo recomendvel uma avaliao formal aps o treinamento. O pessoal que realiza tarefas especficas deve ser qualificado
apropriadamente ao trmino de sua formao, treinamento, experincia e/ou habilidades demonstradas, como requerido.
O pessoal do laboratrio deve ter vnculo empregatcio permanente ou por contrato. O laboratrio deve assegurar que o pessoal
tcnico adicional e de apoio chave contratado seja supervisionado,
suficientemente competente e que seu trabalho esteja em conformidade com o sistema de gesto da qualidade.
O laboratrio deve manter descries dos cargos vigentes para
todo o pessoal envolvido nos ensaios e/ou calibraes, validaes e
verificaes. Tambm deve manter registros de todo o pessoal tcnico, descrevendo suas qualificaes, treinamentos e experincias.
6.6 O laboratrio deve ter o seguinte pessoal tcnico e de gerncia:

Instalaes
As instalaes do laboratrio devem ser de tamanho, construo e localizao adequados. Estas instalaes devem ser projetadas
para atender as funes e operaes que so realizadas. As salas de
repouso e descanso devem ser separadas das reas de laboratrio. Os
vestirios e os banheiros devem ser de fcil acesso e adequados para
o nmero de usurios.
As instalaes do laboratrio devem dispor de equipamentos
de segurana adequados situados apropriadamente e devem ser includas as medidas para assegurar uma boa manuteno. Cada laboratrio deve estar equipado com os instrumentos e equipamentos
adequados, incluindo bancos, bancadas de trabalho e sistemas de
exausto.
As condies ambientais, incluindo iluminao, fontes de energia, temperatura, umidade e presso do ar devem ser adequadas para
as funes e operaes a serem realizadas. O laboratrio deve garantir que as condies ambientais sejam monitoradas, controladas
e documentadas para que no invalidem os resultados ou afetem de
forma adversa a qualidade das medies.

(a) um chefe de laboratrio (supervisor), que deve ter qualificaes apropriadas para a funo, com uma extensa experincia na
anlise de medicamentos e gesto de laboratrio, em laboratrio farmacutico de controle de qualidade em setor regulador ou na indstria. O chefe do laboratrio responsvel pelo contedo dos laudos
de anlise e relatrios de ensaios analticos. Esta pessoa tambm
responsvel por garantir que:

Deve ser tomadas precaues especiais e, se for necessrio,


devem existir uma unidade separada e dedicada ao equipamento
(por exemplo isolador, mesa de trabalho com fluxo laminar) para
manejar, pesar e manipular substncias altamente txicas, incluindo
substncias genotxicas.
Devem ser estabelecidos procedimentos para evitar a exposio
e contaminao.

(i) todos os membros chave do pessoal do laboratrio tenham


competncia necessria para as funes requeridas e sua qualificao reflita as suas responsabilidades;
(ii) revise periodicamente a adequao do pessoal atual, a gesto e os procedimentos de treinamento;

As instalaes de arquivo devem ser proporcionais para garantir


um armazenamento seguro e recuperao de todos os documentos.
O desenho e as condies dos arquivos devem servir para proteger
o contedo da deteriorao. O acesso aos arquivos deve ser restrito
ao pessoal designado.

(iii) a gesto tcnica seja adequadamente supervisionada;


(b) A gesto tcnica deve assegura que:
Didatismo e Conhecimento

100

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Nota: Se debe considerar la instalacin de generadores de gas.
Nota: Deve-se considerar a instalao de geradores de gs.

Devem estar previstos os procedimentos para a eliminao segura dos tipos de resduos, incluindo resduos txicos (qumicos e
biolgicos), reagentes, amostras, solventes e filtros de ar;

Equipamentos, instrumentos e outros DISPOSITIVOS

As anlises microbiolgicas, quando realizadas, devem ser conduzidas em uma unidade de laboratrio projetada e construda apropriadamente. Para maiores orientaes, ver a minuta de documento
de trabalho Guia da OMS sobre as boas prticas para laboratrios
de microbiologia farmacutica (referncia QAS/09.297).

Os equipamentos, instrumentos e outros dispositivos devem


ser projetados, construdos, adaptados, localizados, calibrados,
qualificados, verificados e mantidos segundo seja requerido pelas
operaes de impacto ambiental. O usurio deve adquirir os equipamentos de um representante capaz de oferecer pleno apoio tcnico e
manuteno, se necessrio.

Se um ensaios biolgicos in vivo (por exemplo ensaio de pirogneo em coelhos) est includo no escopo das atividades do laboratrio, os biotrios devem ser isolados de outras reas do laboratrio
com uma entrada e sistema de ar condicionado separados. Devem
ser aplicadas orientaes e regulamentos pertinentes (18).

O laboratrio deve ter equipamentos de ensaio, instrumentos e


outros dispositivos para a execuo correta dos ensaios e / ou calibrao, validao e verificao (incluindo a preparao de amostras
e o processamento e anlise destes ensaios e / ou os dados de calibrao).

Instalaes de armazenamento do laboratrio


As instalaes de armazenamento devem ser bem organizadas
para o armazenamento corretos das amostras, reagentes e equipamentos.

Os equipamentos, instrumentos e outros dispositivos, incluindo


aqueles usados para amostragem, devem cumprir com os requisitos
do laboratrio e com as especificaes do padro correspondente,
bem como ser verificados, qualificados e/ou calibrados regularmente (vide Parte Dois, seo 12).

Devem ser mantidas dependncias separadas para o armazenamento seguro de amostras, amostras retidas (ver Parte Trs, Seo
20), reagentes e acessrios de laboratrio (ver Parte Dois, seces
10.13- 10.14), substncias e materiais de referncia (ver Parte Dois,
seo 11). As instalaes de armazenamento devem estar equipadas
para armazenar material, se necessrio, sob refrigerao (2-8 C) e
congelamento (-20 C) e protegida com chave. Todas as condies
de armazenamento devem ser controladas, monitoradas e mantidas
em registros. O acesso deve ser restrito ao pessoal autorizado.

Contratos
Aquisio de servios e suprimentos
O laboratrio deve ter um procedimento para a seleo e aquisio de servios e suprimentos que afetam a qualidade dos ensaios.

Procedimentos apropriados de segurana devem ser elaborados e implementados rigorosamente para as reas de estocagem e
utilizao de reagentes inflamveis ou txicos. O laboratrio deve
fornecer salas ou reas separadas para o armazenamento de substncias inflamveis, bases e cidos concentrados e fumegantes, aminas
volteis e outros reagentes como o cido clordrico, cido ntrico,
amnia e bromo. Materiais auto-inflamveis tais como sdio e potssio metlicos, tambm devem ser armazenados separadamente.
Provises pequenas de cidos, bases e solventes podem ser mantidos em depsitos do laboratrio, mas grandes quantidades destes
produtos devem ser retidas preferencialmente em um local separado
do edifcio do laboratrio.

O laboratrio deve avaliar os fornecedores de insumos crticos,


suprimentos e servios que afetam a qualidade dos ensaios, manter
registros destas avaliaes e listas de fornecedores aprovados, que
tenham demonstrado a qualidade adequada com relao aos requisitos do laboratrio.
Subcontratao de ensaios
Quando um laboratrio subcontrata trabalho, que podem incluir
um ensaio especfico, deve ser feito com as organizaes autorizadas
para o tipo de atividade necessria. O laboratrio responsvel pela
avaliao peridica da competncia de uma organizao contratada.

Os reagentes sujeitos a regulamentaes de venenos ou substncias narcticas controladas e psicotrpicas devem ser identificadas
claramente segundo as exigncias da legislao nacional. Devem ser
mantidos separadamente de outros reagentes em armrios trancados
a chave. Um membro do pessoal designado como responsvel, dever manter um registro destas substncias. O chefe de cada unidade
deve aceitar a responsabilidade pessoal pela guarda destes reagentes
mantidos no local de trabalho.

Quando um laboratrio realiza ensaios para um cliente e subcontrata parte do ensaio, deve informar por escrito ao cliente este
acordo e, se for o caso, obter sua aprovao.
Deve haver um contrato escrito que estabelea claramente os
direitos e as responsabilidades de cada parte, defina os trabalhos
contratados e os acordos tcnicos realizados em relao ao mesmo.
O contrato deve permitir ao laboratrio auditar as instalaes e competncias da organizao contratada e assegurar o acesso do laboratrio aos registros e amostras retidas.

Os gases tambm devem ser guardados em instalaes dedicadas, se possvel isolados do edifcio principal. Sempre que possvel,
deve-se evitar recipientes de gs no laboratrio e prefervel a distribuio a partir de um deposito externo de gs. Se os recipientes
de gs esto presentes no laboratrio, devem ser fixados com segurana.
Didatismo e Conhecimento

A organizao contratada no deve passar a uma terceira parte


nenhum trabalho que lhe seja encomendado no contrato sem uma
avaliao prvia do laboratrio e a aprovao dos acordos.
101

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


O laboratrio deve manter um registro de todos os subcontratados com a evoluo da competncia.

Todos os recipientes de reagentes devem ser inspecionados visualmente para garantir que os lacres esto intactos, quando se enviar para o armazenamento e quando distribudos para as unidades.

O laboratrio responsvel por todos os resultados informados,


incluindo aqueles fornecidos pela organizao subcontratada. Parte
dois. Materiais, equipamentos, instrumentos e outros dispositivos

Os reagentes com suspeita de terem sido adulterados devem


ser recusados. Entretanto, este requisito pode ser excepcionalmente
omitido se a identidade e a pureza do reagente puderem ser confirmadas por anlise.

Reagentes

gua

Todos os reagentes qumicos, incluindo solventes e materiais


utilizados em ensaios e anlises, devem ter qualidade apropriada.

A gua deve ser considerada como um reagente. Deve ser usado


o grau apropriado para um ensaio especfico conforme descrito em
farmacopias ou um ensaio aprovado quando estiver disponvel.

Os reagentes devem ser comprados de fornecedores aprovados


e acreditados e devem vir acompanhados do certificado de anlise e
pela ficha de dados de segurana de material, se aplicvel.

Devem ser tomadas precaues para evitar a contaminao durante o fornecimento, armazenamento e distribuio.

Para a preparao de solues de reagentes no laboratrio:


(a) a responsabilidade desta tarefa deve ser claramente especificada na descrio de cargo da pessoa designada para realiz-la; e
(b) Os procedimentos a serem seguidos devem estar de acordo
com o publicado em farmacopias ou outros padres, quando estiverem disponveis. Devem ser conservados os registros da preparao
e padronizao das solues volumtricas.

A qualidade da gua deve ser verificada regularmente para


assegurar que diversos graus da gua cumprem as especificaes
apropriadas.
Armazenamento

Os rtulos de todos os reagentes devem especificar claramente:


(a) o contedo;
(b) o fabricante;
(c) a data de recebimento e data que o recipiente foi aberto;
(d) a concentrao se for aplicado
(e) as condies de armazenamento; e
(f) a data de validade ou re-anlise, quando justificar.

Os estoques de reagentes devem ser mantidos em um depsito sob condies de armazenamento apropriadas (temperatura ambiente, refrigerao ou congelamento). O depsito deve manter um
fornecimento de recipientes limpos, frascos, esptulas, funis e rtulos, se necessrio, para dispensar reagentes de recipientes maiores
para menores. Equipamentos especiais podem ser necessrios para a
transferncia de grandes volumes de lquidos corrosivos.

Os rtulos das solues de reagentes preparadas no laboratrio


devem especificar claramente:
(a) O nome
(b) a data de preparao e as iniciais do tcnico ou do analista
(c) a data de validade ou de re-anlises, segundo a justificativa;
e
(d) a concentrao, se aplicvel.

A pessoa responsvel pelo depsito responsvel por controlar


as instalaes de armazenamento e seu estoque e registrar a data de
validade dos produtos qumicos e reagentes. Pode ser necessrio um
treinamento em manipulao de produtos qumicos com segurana
e com o cuidado necessrio.

O rtulo das solues volumtricas preparadas no laboratrio


devem indicar claramente:

As substncias de referncia (substncia de referncia primria


ou substncia de referncia secundria (8)) so utilizadas para a anlise de uma amostra.

Substncias e materiais de referncia

(a) O nome;
(b) a molaridade (ou concentrao);
(c) a data da preparao e as iniciais do tcnico/analista
(d) a data da padronizao e as iniciais do tcnico/analista; e
(e) o fator de correo

Nota: Deve-se deve utilizar substncias de referncia farmacopicas, quando disponveis e sejam apropriadas para anlise.
Quando uma substncia de referncia farmacopica no tenha sido
estabelecida, o fabricante deve utilizar sua prpria substncia de
referncia.

Nota: O laboratrio deve assegurar que as solues volumtricas estejam adequadas no momento de uso.

Os materiais de referncia podem ser necessrios para a calibrao e / ou qualificao de equipamentos, instrumentos ou outros
dispositivos.

No transporte e fracionamento de reagentes:


(a) sempre que possvel, devem ser transportados nas embalagens originais;
(b) quando for necessrio o fracionamento, devem ser usadas
embalagens limpas e apropriadamente rotuladas. Inspeo visual
Didatismo e Conhecimento

102

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


O alumnio, oriundo da gua de entrada ou do prprio sistema
de purificao, permanece dissolvido em guas com pH extremo,
devido a sua caracterstica anfotera. Sua presena interfere em alguns ensaios por manter algumas substncias insolveis. Os metais,
quando presentes na gua, apresentam resultados falsos em exames
de metais em urina e sangue.

QUALIDADE DA GUA EM LABORATRIOS:


TIPOS DE GUA REAGENTE UTILIZADOS
EM LABORATRIO;

As cidades que utilizam cloro em suas estaes de tratamento


fornecem gua de qualidade?
O fato de ter cloro na gua no garante a ausncia de coliformes. Uma gua turva, pode ter cloro e coliforme. Principalmente em
cidades onde a rede est corroda e deteriorada. A presena do cloro
um bom indicador, mas no suficiente

A preocupao com a potabilidade da gua que consumimos j


est incorporada ao nosso dia a dia. Procuramos sempre beber gua
mineral ou filtrada, e, na maioria das cidades brasileiras, podemos
contar com um sistema de tratamento que minimiza os efeitos contaminantes da gua utilizada para consumo. Mas, em se tratando de
gua reagente para anlises clnicas, as exigncias so ainda maiores, pois uma substncia contaminante da gua poder produzir um
resultado falso.
Para falar sobre assunto, o Qualifique conversou com o Dr.
Gandhi Giordano, Diretor do Departamento de Engenharia Sanitria da UERJ e Diretor Tcnico da TECMA - Tecnologia em Meio
Ambiente Ltda, que realiza anlise da gua em rgos pblicos e
privados de todo o Brasil. Segundo Gandhi, antes de sofrer tratamento para ser qualificada como reagente, a gua deve atender aos
padres mnimos de potabilidade, o que nem sempre possvel,
mesmo quando recebida do sistema de abastecimento pblico.
Toda gua utilizada em laboratrios clnicos deve ser rigorosamente tratada. Esse processo vai desde a visualizao do aspecto
da gua at uma anlise completa dos contaminantes. O Dr. Gandhi
Giordano alerta para os problemas originados por uma m qualidade
da gua e d dicas para super-los.

Existe alguma recomendao para a escolha do sistema de


purificao?
Como as guas variam de regio para regio, um equipamento
pode funcionar muito bem em um laboratrio, mas no em outro.
Dependendo das faixas em que se encontram algumas substncias,
como sais e sdio dissolvidos, um filtro pode saturar mais rapidamente do que se fosse usado em uma outra regio. A experincia
pode ser compartilhada entre os laboratrios, mas deve ser observada individualmente. Cada um precisa conhecer a gua que recebe,
para saber como se comportar com o equipamento adquirido.
Quais os critrios indicados para contratar empresas que realizam anlise da gua reagente?
Se o laboratrio optar por terceirizar o controle da sua gua reagente, interessante buscar laboratrios com competncia tcnica
comprovada. Uma possibilidade buscar laboratrios habilitados
pela ANVISA ou acreditados pelo INMETRO, que seguem a ISO
17025.

O que gua reagente?


Dr. Gandhi Giordano - a gua tratada por um sistema de purificao especial para uso em laboratrios. Existem, basicamente,
trs tipos de gua reagente. A do Tipo I, ideal para laboratrios, muito limpa do ponto de vista microbiolgico e fsico-qumico, quase
livre de sais. A do Tipo II usada para preparar meios de cultura, e
necessita ser esterilizada aps o uso. uma gua pura do ponto de
vista microbiolgico e tolera alguma concentrao de sais. E a do
Tipo III, menos pura, com pouca utilidade em laboratrios. Existe
ainda um Tipo Especial de gua, como a usada para cromatografia
(hplc), que extremamente pura.

MTODOS DE PURIFICAO DA GUA:


IONIZAO, DESTILAO, CARVO
ATIVADO, FILTRAO, OSMOSE REVERSA.
A purificao da gua. Passo a passo.
- Certifique-se de que a gua de seu estabelecimento boa.
Numa primeira anlise, a cor pode indicar uma m qualidade. Se
tiver aspecto diferente, j deve ser descartada.
- Realize uma anlise inicial da sua gua de entrada.
- Feita a anlise, informe-se sobre o sistema de purificao mais
adequado para o seu processo.
- Estude o equipamento comprado, para saber sobre vazo,
presso etc., antes de instal-lo.
- Verifique as condies da cisterna, que deve ser limpa regularmente e estar sem infiltrao ou aquecimento direto do sol.
- Nunca trabalhe com vazo de gua superior recomendada
pelo fabricante. Se precisar de mais gua, deixe o equipamento ligado durante a noite, de forma a no dispensar uma vazo muito forte,
danificando-o irreversivelmente.
- Calibre os equipamentos continuamente.
- Verifique a possibilidade de pr-tratamento para esse purificador (ex.: um pr-filtro). Isto pode reduzir custo na reposio do
sistema e melhorar o desempenho.

Como o laboratrio pode ter certeza de que sua gua apropriada para os exames?
Existem bons purificadores que transformam a gua potvel em
gua reagente. Mas no basta comprar o aparelho e instal-lo para
ter essa garantia. preciso verificar se a gua de entrada - recebida
da rede de abastecimento - de boa qualidade. Alguns testes podem
ser feitos para verificar o nvel do contaminantes slidos, orgnicos,
partculas, microrganismos etc. Uma gua ferruginosa, alm de interferir em diversas dosagens, pode ainda danificar os equipamentos.
Quais so os principais contaminantes da gua e de que forma interferem nos ensaios?
O cloro excessivo na rede pode passar pelo filtro de carvo,
danificar o equipamento e chegar gua, oxidando os reagentes e
prejudicando os resultados de exames, principalmente os ensaios
colorimtricos. O ferro um coagulante. No perceb-lo na gua
seria erro at primrio, j que facilmente visvel.

Didatismo e Conhecimento

103

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


- Evite realizar testes com gs ou outras substncias prximo ao local de produo da gua reagente. O ideal seria uma rea exclusiva para
o purificador da gua, de forma a no ter interferncia externa de substncias que possam se solubilizar na gua.
- O recipiente que contm a gua reagente deve ser inerte.
- Muito cuidado com a assepsia antes de repor peas do filtro. De preferncia, use luvas e cuidado com superfcies sujas. A troca de peas
deve ser feita sob superviso. Ao trocar o filtro sujo, uma nova assepsia antes de manusear o filtro novo.

ANOTAES

Didatismo e Conhecimento

104

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio

Ionizao: um processo qumico mediante ao qual se produzem ons, espcies qumicas eletricamente carregadas, pela perda ou ganho de
eltrons a partir de tomos ou molculas neutras. H vrias maneiras pelas quais se podem formar ons. Na ionizao de um cido, por exemplo,
a molcula de gua responsvel por capturar um hidrognio que est polarizado positivamente no cido, formando o on hidroxnio (H3O+) e
um nion (A-, sendo A um elemento ou composto presente no cido).
HA(aq) + H2O H3O+(aq) + A-(aq)
No que se refere radiao, h uma forma de ionizao produzida pelas radiaes ionizantes que transferem muita energia ao tomo atingido deixando-o instvel, podendo gerar a fisso nuclear. Esse tipo de ionizao muito perigosa aos seres vivos, pois pode ocasionar mutaes
genticas e cancergenas. O exemplo a seguir uma equao qumica que representa a ionizao radioativa:
Ca40 + Radiao ionizante 24 + 18Ar36

20

Pode-se tambm fornecer energia para o tomo liberar os seus eltrons. Inclui-se aqui a propriedade peridica energia de ionizao ou
potencial de ionizao, que diz quanta energia necessria para retirar um eltron do tomo.
Ateno: no confundir com dissociao, que a separao de ons. Com isso a Ionizao se satisfaz com o H20
Destilao: gua destilada a gua que foi obtida por meio da destilao (condensao do vapor de gua obtido pela ebulio ou pela
evaporao). A destilao o modo de separao baseado no fenmeno de equilbrio lquido-vapor de misturas. Em termos prticos, quando
temos duas ou mais substncias formando uma mistura lquida, a destilao pode ser um mtodo para separ-las. Basta apenas que tenham
volatilidades razoavelmente diferentes entre si.
Um exemplo de destilao que remonta antiguidade a destilao de bebidas alcolicas. A bebida feita pela condensao dos vapores
de lcool que escapam mediante o aquecimento de um mosto fermentado. Como o ponto de ebulio do lcool menor que o da gua presente
no mosto, o lcool evapora, dando-se assim a separao da gua e o lcool. Um exemplo disto tambm a aguardente, com compostos de cana
de acar, possibilitando a separao devido aos diferentes pontos de ebulio. Outros exemplos so a grappa, o whisky, o conhaque etc... O
vapor que escapa da mistura aquecida capturado por uma serpentina refrigerada que o devolve ao estado lquido.
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Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


O petrleo um exemplo moderno de mistura que deve passar
por vrias etapas de destilao antes de resultar em produtos realmente teis ao homem: gases (um exemplo o gs liquefeito de
petrleo ou GLP), gasolina, leo diesel, querosene, asfalto e outros.
O uso da destilao como mtodo de separao disseminou-se pela
indstria qumica moderna. Pode-se encontr-la em quase todos os
processos qumicos industriais em fase lquida em que seja necessria uma purificao.
Em teoria, no se pode purificar substncias at 100% de pureza atravs da destilao. Para conseguir uma pureza bastante alta,
necessrio fazer uma separao qumica do destilado posteriormente. A destilao tem suas limitaes. No se pode separar misturas
azeotrpicas por destilao comum. Destilao o processo de vaporizar o lquido para depois condens-lo e recolh-lo em um outro
recipiente.

Por essa razo o processo denominado osmose reversa. Na


osmose inversa, as membranas retm partculas cujo dimetro varia
entre 1 e 10 (2). As partculas retidas so solutos de baixa massa
molecular como sais ou molculas orgnicas simples.
A presso osmtica das solues proporcional a concentrao
de soluto. Para que a produo de permeado seja razovel, a diferena de presso hidrosttica atravs da membrana tem que ser elevada,
para gua, varia entre 3 e 100 atm(2). Os usos da osmose reversa
so diversos, sempre relacionados separao de ies. Dentre eles
possvel citar:
- Dessalinizao de gua do mar: Tanto para consumo humano
quanto para outros processos, a membrana de Osmose Reversa pode
reduzir a concentrao de cloreto de sdio de 35.000 mg/L para 350
mg/L.
- Irrigao: Um dos problemas da agricultura a acumulao
de sais no solo em funo da irrigao com gua de rios ou poos.
A partir de certo patamar os sais tornam-se nocivos s plantaes. A
Osmose Reversa capaz de remover este excesso de sais de forma
economicamente vivel.
- Alimentao de caldeiras: Caldeiras exigem gua purssima,
pois a evaporao da gua causa a incrustao da superfcie dos
tubos pelos slidos presentes na mesma, reduzindo a transferncia
de calor, aumentando o consumo de combustvel e o risco de exploses. A osmose reversa, assim como a troca inica, tm sido o
tratamento mais utilizado nestes casos.
- Produo de produtos qumicos: Hospitais, conglomerados
farmacuticos e laboratrios utilizam o processo de Osmose Reversa para garantira mxima pureza em seus produtos. Processos de hemodilise so alimentados com gua desmineralizada ou destilada.
- Recuperao de guas residuais na indstria
- Concentrao de sucos, protenas e vinho na indstria alimentcia.
- Na rea grfica, no sistema de impresso OFF-SET, usa-se
gua que passou por osmose reversa e que, depois, recebeu um produto chamado endurecedor. Esse produto acrescenta apenas dois
sais minerais gua: clcio e magnsio. O valor de dureza dessa
gua para impresso deve ser de 8 a 12 dh (Deutsch Hardness). Aps
isso, a gua recebe um outro produto, chamado soluo de molha
(ou de fonte) e usada na impresso.

Carvo Ativado: um material de carbono com uma porosidade bastante desenvolvida, com capacidade de coletar seletivamente
gases, lquidos ou impurezas no interior dos seus poros, apresentando portanto um excelente poder de clarificao, desodorizao e
purificao de lquidos ou gases. Este tipo de carvo obtido a partir
da queima controlada com baixo teor de oxignio de certas madeiras, a uma temperatura de 800 C a 1000 C, tomando-se o cuidado
de evitar que ocorra a queima total do material de forma a manter
sua porosidade. O carvo ativado pode ser feito a partir de cascas de
coco, mas tambm de restos de cortia, material muito poroso, com
caratersticas excelentes no campo da filtrao, desodorizao e remoo de radioativos e txicos. Tambm possvel produzir carvo
ativado a partir da queima de ossos bovinos em altas temperaturas,
sendo este tambm chamado carvo de osso ou negro animal.
Os usos mais comuns para o carvo ativado so a elaborao
de filtros para adsoro de gases e no tratamento de guas, onde o
carvo se destaca por reter nos seus poros impurezas e elementos
poluentes. utilizado em diversos ramos das indstrias qumica,
alimentcia e farmacutica, da medicina e em sistemas de filtragem,
bem como no tratamento de efluentes e gases txicos resultantes de
processos industriais.
Filtrao: a gua passa por filtros formados por carvo, areia e
pedras de diversos tamanhos. Nesta etapa, as impurezas de tamanho
pequeno ficam retidas no filtro. Filtrao ou filtragem um mtodo
utilizado para separar slido de lquido ou fluido que est suspenso,
pela passagem do lquido ou fluido atravs de um meio permevel
capaz de reter as partculas slidas. Existem filtraes de escala laboratorial e filtraes de escala industrial.
Numa filtrao qualitativa, usado o papel de filtro qualitativo,
mas, dependendo do caso, o meio poroso poder ser uma camada de
algodo, tecido, polpa de fibras quaisquer, que no contaminem os
materiais. Para as filtraes quantitativas, usa-se geralmente papel
filtro quantitativo, ou placas de vidro sinterizada ou de porcelana
sinterizada. Em qualquer dos casos indicados h uma grande gama
de porosidades e esta dever ser selecionada dependendo da aplicao em questo

Comparada ao processo de troca inica, muito utilizado para a


remoo de ons em guas industriais, a osmose reversa tem a vantagem de dispensar a etapa de regenerao, um processo que interrompe a produo e ao mesmo tempo consome uma grande quantidade
de produtos qumicas (cidos e bases fortes). Como desvantagem
existe a gerao de um fluxo de rejeito, soluo com elevadas concentraes de sais em volumes de at 50% da alimentao total.
Osmose Reversa na dessalinizao das guas dos mares A Osmose Reversa uma tcnica utilizada na dessalinizao da gua.
Separando-se uma soluo de gua salgada e gua pura por uma
membrana semipermevel e se aplicando uma presso externa muito grande sobre a soluo, ocorre a passagem da gua da soluo
para a gua pura, ou seja, no caminho inverso Unidade de dessalinizao de gua por Osmose Reversa
A Osmose uma Propriedade Coligativa conceituada como a
passagem de solvente atravs de membranas semipermeveis. Da o
significado da origem grega de seu nome: osms = impulso. Neste
processo, h a difuso de solvente da soluo menos concentrada
(ou mais diluda) para a mais concentrada (menos diluda), igualando assim a concentrao de ambas as solues.

Osmose Reversa: um processo de separao em que um solvente separado de um soluto de baixa massa molecular por uma
membrana permevel ao solvente e impermevel ao soluto. Isso
ocorre quando se aplica uma grande presso sobre este meio aquoso,
o que contraria o fluxo natural da osmose.
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No entanto, principalmente em regies beira-mar, que possuem pouca gua potvel, utiliza-se uma tcnica para transformar gua salgada
em gua doce, isto , no sentido oposto ao da osmose descrita. Chama-se, portanto, osmose reversa ou osmose invertida (ou ainda inversa).
Neste processo, o solvente passa pela membrana semipermevel no sentido da soluo mais concentrada para a menos concentrada.
Com este objetivo de dessalinizar a gua do mar, tm-se construdo muitas usinas, como a de Yuma no Arizona (Estado Unidos), que tem a
capacidade de produzir 72 milhes de gales de gua pura por dia. Em 2010 foi inaugurada em Israel a maior usina de dessalinizao do mundo.
Feita para produzir 127 milhes de metros cbicos de gua por ano o suficiente para abastecer um sexto da populao israelense.
No mundo, exemplos so as ilhas gregas, as ilhas de Fernando de Noronha, a ilha de Pscoa e a ilha de Malta. Alm tambm de usar este
processo na gua salobra (que vem do subsolo, contendo muito sal) em certas regies do nordeste brasileiro. Mas, como isso possvel? Isto se
d em razo da presso osmtica, isto , a presso externa que se aplica sobre a soluo, para impedir a entrada de gua pura. Se esta presso
for bastante aumentada, obtm-se a osmose reversa, em que h a passagem da gua da soluo para a gua pura.

NOES SOBRE GERENCIAMENTO DE RESDUOS GERADOS


NAS ATIVIDADES ANALTICAS: MANUSEIO, IDENTIFICAO,
ACONDICIONAMENTO, TRANSPORTE E DESCARTE;

Resduos - gerenciamento de resduos


A RDC 306, publicada no DPU em 07 de dezembro de 2004, dispe sobre o regulamento tcnico para o gerenciamento de resduos de
servios de sade, RSS. So geradores de RSS todos os servios relacionados com o atendimento sade humana ou animal, inclusive:
- Servios de assistncia domiciliar e de trabalhos de campo;
- Laboratrios analticos de produtos para sade;
- Necrotrios, funerrias e servios onde se realizem atividades de embalsamamento (tanatopraxia e somatoconservao);
- Servios de medicina legal;
- Drogarias e farmcias, inclusive as de manipulao;
- Estabelecimentos de ensino e pesquisa na rea de sade;
- Centros de controle de zoonoses;
- Distribuidores de produtos farmacuticos;
- Importadores, distribuidores e produtores de materiais e controles para diagnstico in vitro;
- Unidades mveis de atendimento sade;
- Servios de acupuntura, servios de tatuagem, dentre outros similares.
- Esta Resoluo no se aplica a fontes radioativas seladas, que devem seguir as determinaes da Comisso Nacional de Energia Nuclear
CNEN, e s indstrias de produtos para a sade, que devem observar as condies especficas do seu licenciamento ambiental.
O gerenciamento dos RSS constitui-se em um conjunto de procedimentos de gesto, planejados e implementados a partir de bases cientficas e tcnicas, normativas e legais, com o objetivo de minimizar a produo de resduos e proporcionar aos resduos gerados um encaminhamento seguro, de forma eficiente, visando proteo dos trabalhadores, preservao da sade pblica, dos recursos naturais e do meio
ambiente.
Todo gerador deve elaborar um Plano de Gerenciamento de Resduos de Servios de Sade PGRSS, baseado nas caractersticas dos resduos gerados, estabelecendo as diretrizes de manejo dos RSS. Este deve ser elaborado de forma compatvel com as normas locais relativas coleta, transporte e disposio final dos resduos gerados nos servios de sade, estabelecidas pelos rgos locais responsveis por todas as etapas.
Etapas:
- Manejo do resduo;
- Segregao;
- Acondicionamento;
Os resduos slidos devem ser acondicionados em saco constitudo de material resistente a ruptura e vazamento, impermevel, baseado na
NBR 9191/2000 da ABNT, respeitados os limites de peso de cada saco, sendo proibido o seu esvaziamento ou reaproveitamento;
Os sacos devem estar contidos em recipientes de material lavvel, resistente punctura, ruptura e vazamento, com tampa provida de sistema de abertura sem contato manual, com cantos arredondados e ser resistente ao tombamento;
Os recipientes de acondicionamento existentes nas salas de cirurgia e nas salas de parto no necessitam de tampa para vedao. Os resduos lquidos devem ser acondicionados em recipientes constitudos de material compatvel com o lquido armazenado, resistentes, rgidos e
estanques, com tampa rosqueada e vedante.

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Identificao
A identificao deve estar aposta nos sacos de acondicionamento, nos recipientes de coleta interna e externa, nos recipientes de transporte
interno e externo e nos locais de armazenamento. Deve estar em local de fcil visualizao, de forma indelvel, utilizando-se smbolos, cores
e frases, atendendo aos parmetros referenciados na norma NBR 7.500 da ABNT, alm de outras exigncias relacionadas identificao de
contedo e ao risco especfico de cada grupo de resduos;
A identificao dos sacos de armazenamento e dos recipientes de transporte poder ser feita por adesivos, desde que seja garantida a resistncia destes aos processos normais de manuseio dos sacos e recipientes;
O Grupo A identificado pelo smbolo de substncia infectante constante na NBR-7500 da ABNT, com rtulos de fundo branco, desenho
e contornos pretos;
O Grupo B identificado atravs do smbolo de risco associado, de acordo com a NBR-7500 da ABNT, e com discriminao de substncia
qumica e frases de risco;
O Grupo C representado pelo smbolo internacional de presena de radiao ionizante (triflio de cor magenta) em rtulos de fundo
amarelo e contornos pretos, acrescido da expresso REJEITO RADIOATIVO;
O Grupo E identificado pelo smbolo de substncia infectante constante na NBR-7500 da ABNT, com rtulos de fundo branco, desenho
e contornos pretos, acrescido da inscrio de RESDUO PERFUROCORTANTE, indicando o risco que apresenta o resduo.
A resoluo estabelece, tambm, normas (Quadro) levando em considerao a classificao de resduos diante das situaes:
- Transporte interno;
- Recipientes para transporte interno;
- Armazenamento temporrio;
- Tratamento;
- Armazenamento externo;
- Coleta e transportes externos;
- Disposio final, que consiste na disposio do resduo no solo.

ANOTAES

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ANOTAES

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Transporte de amostras
Quando h a necessidade de transporte de amostras entre unidades laboratoriais, devemos ficar atentos manuteno da integridade das
amostras (tempo e temperatura de transporte) e s condies de biossegurana de quem realiza o transporte e daqueles que possam vir a ter
contato eventual com o material transportado. Portanto, o laboratrio responsvel por garantir o cumprimento das regras de biossegurana.
A regulao do transporte de amostras perigosas, incluindo substncias infectantes, estabelecida por vrios documentos publicados pelos
rgos competentes.
A IAC 153-1001, uma portaria do Departamento de Aviao Civil (DAC) publicada em 2005, trata do transporte de artigos perigosos e define a documentao da embalagem para o transporte de artigos perigosos. Faz uma abordagem importante sobre a responsabilidade especfica
do expedidor, que o torna pelo preenchimento de formulrio de declarao para todas as expedies que contenham artigos perigosos definidos
ou classificados como tal no Doc. 9284 AN 905 da OACI e Regulamentao de artigos perigosos da International Air Transport Association
(IATA), a menos que a Declarao do Expedidor no seja requerida.
Responsabilidades do expedidor com respeito documentao:
- Utilizar o formulrio adequado da maneira correta;
- Completar o formulrio de maneira exata e legvel;
- Certificar-se de que o formulrio est adequadamente assinado, quando se apresentar expedio ao operador de transporte areo;
- Certificar-se de que o envio tenha sido preparado em conformidade com o Doc. 9284;
- AN 905 da OACI e Regulamentao de Artigos Perigosos da IATA.
A Normatizao da International Air Transport Association (IATA) - em portugus utilizada AITA - determina as regras para o transporte
para materiais infecciosos e substncias biolgicas com ou sem potencial infeccioso, alm de outros materiais perigosos, a nvel internacional.
Esta resoluo define que as pessoas jurdicas envolvidas com expedio, transporte, manuseio, movimentao e armazenagem de artigos
perigosos devero possuir colaboradores habilitados no trato com artigos perigosos, devendo ter o certificado do curso de carga perigosa. O
certificado tem validade de 2 anos para o transporte areo e de 3 anos para o transporte terrestre.
A IATA estabelece, ainda, as codificaes para cada material e tambm o tipo de embalagem especfica, assim como seu modo de manuseio. Em maro de 2007, a Organizao Pan-Americana da Sade publicou uma sntese das regulamentaes para o transporte de substncias
infecciosas. O laboratrio de microbiologia tem uma enorme responsabilidade para que a execuo dos processos seja segura com o resduo
gerado. Portanto, tem responsabilidade com a qualidade dos seus exames e tambm com a sade dos seus colaboradores, e em evitar a contaminao do ambiente interno e externo.
Alm disto, ele regido por leis e normas que devem ser rigorosamente seguidas para que possa estar em conformidade com as exigncias
legais estabelecidas pelos rgos fiscalizadores competentes.
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Germicidas: so meios qumicos utilizados para destruir todas
as formas microscpicas de vida e so designados pelos sufixos
cida ou lise, como por exemplo, bactericida, fungicida, virucida, bacterilise etc. Na rotina, os termos antisspticos, desinfetantes
e germicidas so empregados como sinnimos, fazendo que no
haja diferenas absolutas entre desinfetantes e antisspticos. Entretanto, caracterizamos como antissptico quando a empregamos em
tecidos vivo e desinfetante quando a utilizamos em objetos inanimados. Sanitizao, neologismo do ingls sanitization, em que emprega sanitizer, tipo particular de desinfetante que reduz o nmero de
bactrias contaminantes a nveis julgados seguros para as exigncias
de sade pblica.

MTODOS QUMICOS E FSICOS DE


DESINFECO E ESTERILIZAO DE
MATERIAIS PARA USO EM ENSAIOS
LABORATORIAIS;
Assepsia: o conjunto de medidas que utilizamos para impedir
a penetrao de microorganismos num ambiente que logicamente
no os tem, logo um ambiente assptico aquele que est livre de
infeco.
Antissepsia: o conjunto de medidas propostas para inibir o
crescimento de microorganismos ou remov-los de um determinado ambiente, podendo ou no destru-los e para tal fim utilizamos
antisspticos ou desinfetantes. A descontaminao de tecidos vivos
depende da coordenao de dois processos: degermao e antissepsia. a destruio de micro-organismos existentes nas camadas superficiais ou profundas da pele, mediante a aplicao de um agente
germicida de baixa causticidade, hipoalergenico e passvel de ser
aplicado em tecido vivo. Os detergentes sintticos no-inicos praticamente so destitudos de ao germicida. Sabes e detergentes
sintticos aninicos exercem ao bactericida contra microorganismos muito frgeis como o Pneumococo, porm, so inativos para
Stafilococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa e outras bactrias
Gram negativas. Consequentemente, sabes e detergentes sintticos
(no inicos e aninicos) devem ser classificados como degermantes, e no como antisspticos.

Antisspticos: Um antissptico adequado deve exercer a atividade gemicida sobre a flora cutneo-mucosa em presena de sangue,
soro, muco ou pus, sem irritar a pele ou as mucosas. Muitos testes
in vitro foram propostos para avaliar a ao de antissepticos, mas a
avaliao definitiva desses germicidas s pode feita mediante testes
in vivo. Os agentes que melhor satisfazem as exigncias para aplicao em tecidos vivos so os iodos, a cloro-hexidina, o lcool e o
hexaclorofeno.
Para a desinfeco das mos temos:
- Solues antisspticas com detergentes (degermantes) e se
destinam degermao da pele, removendo detritos e impurezas e
realizando anti-sepsia parcial. Como exemplos citam: Soluo detergente de PVPI a 10% (1% de iodo ativo); Soluo detergente de
clorhexidina a 4 %, com 4% de lcool etlico.
- Soluo alcolica para anti-sepsia das mos: Soluo de lcool iodado a 0,5 ou 1 % (lcool
etlico a 70%, com ou sem 2 % de glicerina); lcool etlico a
70%, com ou sem 2% de glicerina.

Degermao: Vem do ingls degermation, ou desinquimao, e


significa a diminuio do nmero de microorganismos patognicos
ou no, aps a escovao da pele com gua e sabo. a remoo
de detritos e impurezas depositados sobre a pele. Sabes e detergentes sintticos, graas a sua propriedade de umidificao, penetrao,
emulsificao e disperso, removem mecanicamente a maior parte
da flora microbiana existente nas camadas superficiais da pele, tambm chamada flora transitria, mas no conseguem remover aquela
que coloniza as camadas mais profundas ou flora residente.

Tcnicas de Esterilizao
Esterilizao a destruio de todos os organismos vivos, mesmo os esporos bacterianos, de um objeto. Para isso dispomos de
agentes fsicos e qumicos.
Meios de esterilizao:

Fumigao: a disperso sob forma de partculas, de agentes


desinfectantes como gases, lquidos ou slidos.

Fsico: Calor seco (Estufa, Flambagem e Fulgurao); Calor


mido (Fervura e Autoclave); Radiaes (Raios alfa, Raios gama
e Raios x).
Qumico: Desinfetantes - Para conseguir-se a esterilizao, h
vrios fatores importantes: Das caractersticas dos microorganismos, o grau de resistncia das formas vegetativas; a resistncia das
bactrias produtoras de esporos e o nmero de microorganismos e
da caracterstica do agente empregado para a esterilizao.

Desinfeco: o processo pelo qual se destroem particularmente os germes patognicos e/ou se inativa sua toxina ou se inibe o seu
desenvolvimento. Os esporos no so necessariamente destrudos.
Esterilizao: processo de destruio de todas as formas de
vida microbiana (bactrias nas formas vegetativas e esporuladas,
fungos e vrus) mediante a aplicao de agentes fsicos e ou qumicos. Toda esterilizao deve ser precedida de lavagem e enxaguadura do artigo para remoo de detritos.

Esterilizao pelo calor: A susceptibilidade dos organismos ao


calor muito varivel e dependem de alguns fatores, e dentre eles
citamos:
- Variao individual de resistncia,
- Capacidade de formao de esporos,
- Quantidade de gua do meio,
- ph do meio,
- Composio do meio.

Esterilizantes: so meios fsicos (calor, filtrao, radiaes, etc)


capazes de matar os esporos e a forma vegetativa, isto , destruir
todas as formas microscpicas de vida.
Esterilizao: o conceito de esterilizao absoluto. O material
esterilizado ou contaminado, no existe meio termo.
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Esterilizao pelo calor seco: A incinerao afeta aos microorganismos de forma muito parecida a como afeta as demais protenas.
Os microorganismos so carbonizados ou consumidos pelo calor
(oxidao), assim, podemos usar a chama para esterilizar (flambagem) e a eletricidade (fulgurao). O aparelho mais comum para a
esterilizao pelo calor seco a estufa, que consiste em uma caixa
com paredes duplas, entre as quais circula ar quente, proveniente
de uma chama de gs ou de uma resistncia eltrica. A temperatura
interior controlada por um termostato.
As estufas so usadas para esterilizar materiais secos, como
vidraria, principalmente as de preciso, seringas, agulhas, ps, instrumentos cortantes, gases vaselinadas, gases furacinadas, leos, vaselina, etc. A esterilizao acontece quando a temperatura no interior
da estufa atinge de 160 oC a 170oC, durante 2 horas, ocorrendo destruio de microorganismos, inclusive os esporos. Deve-se salientar que a temperatura precisa permanecer constante por todo esse
tempo, evitando-se abrir a porta da estufa antes de vencer o tempo.

Desse modo, as disposies dos materiais a serem esterilizados


dentro da autoclave devem obedecer a certas regras, formando espaos entre eles e facilitando o escoamento do ar e vapor, tendo-se
em mente a analogia com o escoamento de gua de um reservatrio, evitando assim a formao de bolses de ar seco (onde agiria
apenas o calor seco, insuficiente para esterilizar nas temperaturas
atingidas habitualmente pelo autoclave.
A quantidade efetiva de gua sob a forma de vapor dentro da
cmara de presso pode ser reduzida, de modo que, ao retirar-se os
objetos esterilizados, estes estejam quase secos. A ao combinada de temperatura, presso e da umidade so suficientes para uma
esterilizao rpida, de modo que vapor saturado a 750 mmHg e
temperatura de 121C so suficientes para destruir os esporos mais
resistentes, em 30 minutos. Essa a combinao mais usada, servindo para todos os objetos que no estragam com a umidade e temperatura alta como panos meios bacteriolgicos, solues salinas,
instrumentais (no os de corte), agulhas, seringas, vidraria (no as
de preciso ) etc.
Usando-se vapor saturado a 1150 mmHg e 128 C, o tempo cai
para 6 minutos, podendo se assim evitar a ao destruidora do calor
sobre panos e borracha. Em casos de emergncia, usamos durante 2
minutos a temperatura de 132C e 1400 mmHg. Para testar a eficincia da esterilizao em autoclave lanamos mo de indicadores, que
pode ser tintas que mudam de cor quando submetidas a determinada temperatura durante certo tempo, ou tiras de papel com esporos
bacterianos, que so cultivados em caldos aps serem retirados do
autoclave. Como exemplo citamos tubinho contendo cido benzico
mais eosina, que tem ponto de fuso de 121C. Anidrido ftalico mais
verde metila tem ponto de fuso de 132C. cido salicilico mais
violeta de genciana tem ponto de fuso de 156C.

Esterilizao pelo calor mido: Podemos usar o calor das seguintes formas:
Fervura: Foi um mtodo correntemente usado na prtica diria, mas no oferece uma esterilizao completa, pois a temperatura
mxima que pode atingir 100C ao nvel do mar, e sabemos que os
esporos, e alguns vrus, como o da hepatite, resistem a essa temperatura, alguns at por 45 h. Por outro lado, a temperatura de ebulio
varia com a altitude do lugar.
Cuidados na esterilizao pela fervura: Devem-se eliminar as
bolhas, pois estas protegem as bactrias - no interior da bolha impera o calor seco, e a temperatura de fervura (100C), este calor
insuficiente para a esterilizao; Devem-se eliminar as substncias
gordurosas e proticas dos instrumentos, pois estas impedem o contacto direto do calor mido com as bactrias.

Bioindicadores: Podemos usar ampolas contendo 2 ml de caldo


de cultura com acares mais um indicador de pH e esporos de bacilo Stearo thermophilus (espcie no patognica), esporo estes que
morrem quando submetidos a 121C por 15 minutos. Incuba-se por
24 a 48 horas a 55C, e se a esterilizao foi suficiente a cor violeta
no se altera. Podemos tambm usar cadaros embebidos com suspenso salina de cultura de Bacilo subtilis (em esporulao acentuada) colocados no interior de um campo cirrgico dobrado, que ser
colocado no centro dos pacotes, caixas ou tambores. Findo o prazo
de esterilizao, o cadaro enviado para cultura no laboratrio. (o
Bacilo subtilis no patognico e um dos mais resistentes ao calor)

Esterilizao pelo vapor sob presso (autoclave): Age atravs


da difuso do vapor dgua para dentro da membrana celular (osmose), hidratando o protoplasma celular, produzindo alteraes qumicas (hidrlise) e coagulando mais facilmente o protoplasma, sob
ao do calor. O autoclave uma caixa metlica de paredes duplas,
delimitando assim duas cmaras; uma mais externa que a cmara
de vapor, e uma interna, que a cmara de esterilizao ou de presso de vapor. A entrada de vapor na cmara de esterilizao se faz
por uma abertura posterior e superior, e a sada de vapor se fazem
por uma abertura anterior e inferior, devido ao fato de ser o ar mais
pesado que o vapor.
O vapor admitido primeiramente na cmara externa com o
objetivo de aquecer a cmara de esterilizao, evitando assim a condensao de vapor em suas paredes internas. Sabe-se que 1 grama de
vapor saturado sob presso, libera 524 calorias ao se condensar. Ao
entrar em contacto com as superfcies frias o vapor saturado se condensa imediatamente, molhando e aquecendo o objeto, fornecendo
assim dois fatores importantes para a destruio dos micro-organismos. O vapor dgua, ao ser admitido na cmara de esterilizao
menos denso que o ar, e portanto empurra este para baixo, at que
sai da cmara, e atravs de correntes de conveco, retira todo o ar
dos interstcios dos materiais colocados na cmara. Ao condensar-se, reduz de volume, surgindo assim reas de presso negativa, que
atraem novas quantidades de vapor.
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ter cclico - xido de etileno: um gs incolor, inflamvel,


txico, altamente reativo, completamente solvel em gua, lcool,
ter e muitos solventes orgnicos, borracha, couro e plsticos. bactericida esporicida e virucida. Eficaz em temperatura relativamente
baixa, penetra em substncias porosas, no corroe ou danifica materiais, age rapidamente, removvel rapidamente.
Esterilizao pelo xido de etileno: Autorizado pelo Ministrio
da Sade como agente qumico para esterilizao, portaria 930/1992.
Necessita de trs unidades: aparelho de autoclave combinado, gs e
vapor; aparelho de comando que vai misturar o gs, e o freon na
concentrao pr-estabelecida e o aparelho aerador. Existem quatro
condies que so primordiais e que guardam relao entre si para
que o xido de etileno se torne um agente esterilizante:
- Tempo - o tempo de exposio ao gs varia de acordo com a
temperatura do aparelho,
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Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


Radiaes ionizantes: (raios beta, gama, (cobalto), X, alfa ).
Tem boa penetrabilidade nos materiais mesmos j empacotados o
que justifica a sal comodidade.

- Temperatura - Geralmente utiliza a temperatura de 55oC e a


exposio em 2 horas. Em temperaturas mais baixas necessitamos
de exposies maiores e vice-versa.
- Umidade relativa - usa de 20 a 40%,
- Concentrao do gs - usa a concentrao de 450 mg/L de
espao da cmara esterilizadora. Por ser altamente inflamvel quando puro, usamos misturar com dixido de carbono (90%) ou freon
(80%).

Radiaes no ionizantes: (raios ultravioleta, ondas curtas e


raios infravermelhos) devido a sua baixa eficincia est vetado o seu
uso pelo Ministrio da Sade desde 1992. Filtrao usada como
controle ambiental, criando reas limpas e reas estreis, podendo
inclusive lanar utilizar se do fluxo laminar.

Tcnica
- Preparo do material - devero estar completamente limpos e
secos. O material que os empacota deve ser permevel, flexvel e
forte para aguentar a manipulao normal do processo de esterilizao. Usar fitas adesivas para identificao e indicadores de xido de
etileno dentro dos pacotes.
- No sobrecarregar o esterilizador para evitar bolses isoladores e tambm o rompimento e abertura dos pacotes durante o aumento de presso da cmara.
- Aerao - o objetivo ventilar para remover o gs contido no
material esterilizado e sendo executado a 50C, o tempo varia de
acordo com o tipo de material, assim: Borracha e material plstico
fino = 6 horas; Borracha e material plstico grosso = 24 horas; Marca passos internos = 4 dias; Luvas, cateteres e outros materiais em
invlucros de plsticos = 7 dias; Qualquer tubo de cirurgia cardaca
= 7 dias.

Aldedo: Agente qumico autorizado pelo Ministrio da Sade,


(portaria 930/1992). Glutaraldeido a 2%, associada a um antioxidante, por 8 a 12 horas, usado para esterilizar material de acrlica, cateteres, drenos, nylon, silicone, teflon, pvc, laringoscpicos e outros);
Formaldedo, usado tanto na forma lquida ou gasosa por 18 horas.
Paraformaldedo, as pastilhas tem ao esterilizante na concentrao
de 3 gramas por 100 centmetros cbico de volume do recipiente
onde o material esterilizado por um perodo de 4 horas a 50C.

ANOTAES

Vantagens
- bactericida, esporocida e virucida;
- Agente esterilizante em temperatura relativamente baixa;
- Facilmente removvel;
- Fcil de obter, armazenar e manusear;
- Penetra em qualquer material permevel e poroso;
- Esteriliza uma grande variedade de instrumentos e equipamentos sem danificar a maioria;
- mtodo simples, eficaz econmico e seguro;
- O material esterilizado pode ser estocado por perodo prolongado.

Desvantagens
- Necessita de controle cuidadoso da concentrao de gs, temperatura e umidade.
- A aparelhagem cara e requer superviso tcnica especializada.
- O gs etileno possui efeito txico.
- O processo demorado.
- A utilizao do aparelho limitada a estabelecimentos grandes.

Flambagem: O Ministrio da Sade, atravs da portaria 930 de


27 de agosto de 1992, relaciona a flambagem como meio possvel de
esterilizao nas laboratrios de microbiologia para a manipulao
de material biolgico ou transferencia de massa bacteriana pela ala
bacteriolgica e para a esterilizao de agulhas, na vacina de BCG
intradrmico.

Radiao: A radiao uma alternativa na esterilizao de artigos termossensveis, (seringa de plstico, agulha hipodrmicas,
luvas, fios cirrgicos), por atuar em baixas temperaturas, um mtodo disponvel em escala industrial devido aos elevados custos de
implantao e controle.

Didatismo e Conhecimento

114

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


de fungos como Alternaria, Drechslera, Exerohilum e Stemphylium,
para Fusarium o meio de Nash & Snyder (1960), etc. Para a deteco de bactrias em sementes sugere-se consultar Van Vuurde, et al.
(1983), Bashan & Assouline (1983), Maringoni & Kurosawa (1994)
e Schad et al. (2001). No caso de viroses, o teste imuno-enzimtico
(ELISA) e o ISEM so suficientemente sensveis para a deteco
desses agentes causais de doenas no material de propagao vegetal (Lange et al., 1983).
A presente abordagem tem como objetivos contribuir para a
produo de material de propagao vegetal livre de fitoparasitas
reduzindo a ocorrncia e a intensidade das doenas em rgos areos na rea de cultivo comercial. Quando o patgeno excludo do
material de propagao do hospedeiro, possvel cultivar a planta
livre do parasita pelo resto de sua vida (Agrios, 1997). Todo e qualquer material de propagao vegetal livre de patgenos, deveria ser
continuamente produzido, mantido e comercializado acompanhado
de certificado sanitrio que comprove essa condio.

MTODOS BIOLGICOS UTILIZADOS EM


ANLISES DE MATERIAIS DE PROPAGAO
VEGETAL.

Produzir sementes, partes e rgos de propagao vegetal livres de patgenos uma tarefa difcil, desafiadora e, por isso, pouco atrativa para o pesquisador e produtor de sementes e de mudas.
Tambm tem sido apoiada timidamente por agncias financiadoras
de projetos de pesquisa, porm, pela importncia, deveria receber
mais incentivos. Material de propagao vegetal refere-se a bulbos,
estacas, gemas, manivas, mudas, toletes, sementes botnicas, rizomas e tubrculos.
A realidade da ateno dada ao tema mostra que no momento
a semente botnica, aparentemente a mais importante fitopatologia, pois existem cursos sobre Patologia de Sementes, porm, a
patologia relativa a outros rgos de propagao vegetal tem recebido menor ateno. Pela importncia deveria se dar o mesmo tratamento e terem-se igualmente cursos e treinamento sobre Patologia
de Mudas, de Bulbos, de Manivas, de Toletes, etc. Principalmente os
produtores destes materiais deveriam receber treinamentos para que
entendam a sua importncia.

Indicadores Biolgicos
A utilizao destes indicadores permite a comprovao da eficincia da esterilizao, uma vez que o crescimento de microrganismos aps a aplicao do processo diretamente testado. Este indicador consiste em uma preparao padronizada de esporos bacterianos
em suspenses que contm em torno de 106 esporos por unidade de
papel. Os microrganismos utilizados so de acordo com o processo
de esterilizao avaliado (APECIH, 1998):
- autoclave a vapor: B. stearothermophilus;
- calor seco: B. subtilis var. niger;
- autoclave a xido de etileno: B. subtilis var. niger;
- plasma de perxido de hidrognio: B. subtilis var. niger;
- radiao gama: Bacillus pumilus;

Diversas perguntas pertinentes a este tema em fitopatologia devem ser feitas. Por que aonde se cultiva uma espcie vegetal sempre
esto presentes as doenas daquela espcie? Como os patgenos encontram a planta hospedeira? Est disponvel aos produtores material de propagao vegetal livre de fitopatgenos? Para que produzir
esse material livre de patgenos? Qual a necessidade? Qual a consequncia? Tem algum interessado? Esta necessidade reconhecida
por produtores, tcnicos e pesquisadores? Sabem-se as consequncias prticas desse material indene de fitoparasitas? Se o vento transporta o inculo de parasitas necrotrficos de um local para outro, se
o ar est repleto de inculo em todos os locais, em todo o tempo, a
proposta aqui apresentada no tem sentido.

Aps o processamento dos indicadores, eles devem ser incubados para se verificar se as cepas ainda so viveis. As condies
de incubao e o meio em que os indicadores devem ser incubados
devem ser fornecidas pelo fabricante das preparaes. O indicador
que fora processado incubado nas mesmas condies e juntamente
com um outro que no tenha passado pelo processo de esterilizao
a fim de se verificar a viabilidade das cepas e as condies adequadas de incubao que favoream o crescimento bacteriano.
A realizao de testes biolgicos deve ser, no mnimo, semanalmente e aps cada manuteno ou suspeita de mau funcionamento.
No processo de esterilizao a xido de etileno o teste deve ser realizado em cada ciclo de esterilizao devido a complexidade do
processo e a maior probabilidade de falhas.

Todos os agentes fitopatognicos podem infectar partes ou rgos de propagao vegetal tais como fungos, estramenpilas, bactrias, vrus, protozorios (Plasmodiophora) e nematides. Neste
artigo d-se nfase aos fungos, bactrias e vrus. Devem-se envidar
todos os esforos para erradicar os fitopatgenos em suas fontes de
inculo primrio. Todos os rgos da planta podem ser atacados pelos fitopatgenos (McNew, 1960) estando aqui includos os de propagao vegetal. Com estes os parasitas so transportados desde o
local de produo do material, at os locais do cultivo comercial.

LEI FEDERAL N 8.027, DE 12 DE ABRIL DE


1990 - CDIGO DE TICA DOS SERVIDORES
PBLICOS.

Os parasitas infectantes de material de propagao vegetal retornaro aos rgos areos de onde eles vieram. No caso de mudas
de plantas perenes com folhas perenes como caf e citros, por exemplo, esse processo no necessrio, pois nunca ocorre a separao
do parasita da planta hospedeira.
Na produo de material vegetal indene de patgenos indispensvel o uso rotineiro de mtodos sensveis ou meios semi-seletivos deteco do patgeno alvo da eliminao. Citam-se como
exemplos para sementes o meio semi-seletivo para Bipolaris sorokiniana (Reis, 1983) que pode ser usado na deteco de outros gneros

Didatismo e Conhecimento

LEI N 8.027, DE 12 DE ABRIL DE 1990.


Converso da Medida Provisria n 159/90
Dispe sobre normas de conduta dos servidores pblicos civis
da Unio, das Autarquias e das Fundaes Pblicas, e d outras
providncias.
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Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


O PRESIDENTE DA REPBLICA, fao saber que o Congresso Nacional decreta e eu sanciono a seguinte lei:

um mnimo ideal de atendimento e de funcionamento dos rgos pblicos, o que deve necessariamente passar por critrios de valorizao dos servidores bons e de treinamento e qualificao permanente
dos quadros de pessoal.

Art. 1 Para os efeitos desta lei, servidor pblico a pessoa


legalmente investida em cargo ou em emprego pblico na administrao direta, nas autarquias ou nas fundaes pblicas.
O artigo 1 traz o conceito de funcionrios pblicos para os fins
desta lei.

VI - zelar pela economia do material e pela conservao do


patrimnio pblico;
Esse deve basilar. Se o agente no zelar pela economia e pela
conservao dos bens pblicos presta um desservio nao que
lhe remunera. E como se ver adiante poder ser causa inclusive de
demisso, se no cumprir o presente dever, quando por descumprimento dele a gravidade do fato implicar a infrao a normas mais
graves.

Art. 2 So deveres dos servidores pblicos civis:


Tomam-se como base os ensinamentos de Lima1 a respeito destes deveres, aliados a comentrios pessoais:
I - exercer com zelo e dedicao as atribuies legais e regulamentares inerentes ao cargo ou funo;
Zelo quer dizer cuidado, cautela, para que as atividades sempre
sejam desempenhadas do melhor modo. Eficcia remete ao dever
de fazer com que suas atividades atinjam o fim para o qual foram
praticadas, isto , que no sejam abandonadas pela metade.

VII - guardar sigilo sobre assuntos da repartio, desde que


envolvam questes relativas segurana pblica e da sociedade;
O agente pblico deve guardar sigilo sobre o que se passa na
repartio, principalmente quanto aos assuntos oficiais. Pela Lei
n 12.527, de 18 de novembro de 2011, hoje est regulamentado o
acesso s informaes. Porm, o servidor deve ter cuidado, pois at
mesmo o fornecimento ou divulgao das informaes exigem um
procedimento. Maior cuidado h que se ter, quando a informao
possa expor a intimidade da pessoa humana. As informaes pessoais dos administrados em geral devem ser tratadas forma transparente e com respeito intimidade, vida privada, honra e imagem
das pessoas, bem como s liberdades e garantias individuais, segundo o artigo 31, da Lei n 21.527, 2011. A exceo para o sigilo existe,
pois, no devemos tratar a questo em termos de clusula jurdica de
carter absoluto, podendo ter autorizada a divulgao ou o acesso
por terceiros quando haja previso legal. Outra exceo quando h
o consentimento expresso da pessoa a que elas se referirem. No caso
de cumprimento de ordem judicial, para a defesa de direitos humanos, e quando a proteo do interesse pblico e geral preponderante
o exigir, tambm devem ser fornecidas as informaes. Portanto, o
servidor h que ter reserva no seu comportamento e fala, esquivando-se de revelar o contedo do que se passa no seu trabalho. Se o
assunto pululante uma irregularidade absurda, deve ento reduzir
a escrito e representar para que se apure o caso. Deveriam diminuir
as conversas de corredor e se efetivar a apurao dos fatos atravs do
processo administrativo disciplinar. Os assuntos objeto do servio
merecem reserva. Devem ficar circunscritos aos servidores designados para o respectivo trabalho interno, no devendo sair da seo
ou setor de trabalho, sem o trmite hierrquico do chefe imediato.
Se o assunto ou o trabalho, enfim, merecer divulgao mais ampla,
deve ser contatado o rgo de assessoria de comunicao social, que
saber proceder de forma oficial, obedecendo ao bom senso e s leis
vigentes.

II - ser leal s instituies a que servir;


Significa desempenhar suas funes com transparncia, de forma honesta e responsvel, sendo leal instituio. Lealdade no significa acobertar ilegalidades. O funcionrio deve se portar de forma
digna, exteriorizando virtudes em suas aes.
III - observar as normas legais e regulamentares;
O Direito uma das facetas mais relevantes da tica porque
exterioriza o valor do justo e o seu cumprimento essencial para que
a gesto tica seja efetiva.
IV - cumprir as ordens superiores, exceto quando manifestamente ilegais;
Dentro do servio pblico h uma hierarquia, que deve ser
obedecida para a boa execuo das atividades. Seria uma desordem
se todos mandassem e se cada qual decidisse que funo iria desempenhar. Por isso, cabe o respeito ao que o superior determina,
executando as funes da melhor forma possvel.
V - atender com presteza:
a) ao pblico em geral, prestando as informaes requeridas,
ressalvadas as protegidas pelo sigilo;
b) expedio de certides requeridas para a defesa de direito
ou esclarecimento de situaes de interesse pessoal;
Este dever foi insculpido na lei para que o servidor pblico
trabalhe diuturnamente no sentido de desfazer a imagem desagradvel que o mesmo possui perante a sociedade. Exige-se que atue com
presteza no atendimento a informaes solicitadas pela Fazenda Pblica. Esta engloba o fisco federal, estadual, municipal e distrital. O
servidor pblico tem que ser expedito, diligente, laborioso. No h
mais lugar para o burocrata que se afasta do administrado, dificultando a vida de quem necessita de atendimento rpido e escorreito.
Entretanto, h um longo caminho a ser percorrido at que se atinja
1
LIMA, Fbio Lucas de Albuquerque. O regime disciplinar dos servidores federais. Disponvel em: <http://www.sato.
adm.br/artigos/o_regime_disciplinar_dos_servidores_federais.
htm>. Acesso em: 11 ago. 2013.
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VIII - manter conduta compatvel com a moralidade pblica;


O ato administrativo no se satisfaz somente com o ser legal.
Para ser vlido o ato administrativo tem que ser compatvel com
a moralidade administrativa. O agente deve se comportar em seus
atos de maneira proba, escorreita, sria, no atuando com intenes
escusas e desvirtuadas. Seu poder-dever no pode ser utilizado, por
exemplo, para satisfao de interesses menores, como realizar a prtica de determinado ato para beneficiar uma amante ou um parente.
Se o agente viola o dever de agir com comportamento incompatvel
com a moralidade administrativa, poder estar sujeito a sano disciplinar.
116

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Seu ato mprobo ou imoral configura o chamado desvio de poder, que totalmente abominvel no Direito Administrativo e poder ser anulado interna corporis ou judicialmente atravs da ao
popular, ao de ressarcimento ao errio e ao civil pblica se o ato
violar direito coletivo ou transindividual.

Art. 3 So faltas administrativas, punveis com a pena de advertncia por escrito:


I - ausentar-se do servio durante o expediente, sem prvia
autorizao do superior imediato;
Violao do dever de assiduidade.

IX - ser assduo e pontual ao servio;


Dois conceitos diferentes, porm parecidos. Ser assduo significa ser presente dentro do horrio do expediente. O oposto do
assduo o ausente, o faltoso. Pontual aquele servidor que no
atrasa seus compromissos. o que comparece no horrio para as
reunies de trabalho e demais atividades relacionadas com o exerccio do cargo que ocupa. Embora sejam conceitos diferentes, aqui o
dever violado, seja por impontualidade, seja por inassiduidade (que
ainda no aquela inassiduidade habitual de 60 dias ensejadora de
demisso), merece reprimenda de advertncia, com fins educativos
e de correo do servidor.

II - recusar f a documentos pblicos;


dever do servidor pblico conferir f aos documentos pblicos, revestindo-lhes da autoridade e confiana que seu cargo possui.
Violao do dever de transparncia.
III - delegar a pessoa estranha repartio, exceto nos casos
previstos em lei, atribuio que seja de sua competncia e responsabilidade ou de seus subordinados.
Art. 4 So faltas administrativas, punveis com a pena de suspenso por at 90 (noventa) dias, cumulada, se couber, com a destituio do cargo em comisso:
I - retirar, sem prvia autorizao, por escrito, da autoridade
competente, qualquer documento ou objeto da repartio;
II - opor resistncia ao andamento de documento, processo ou
execuo de servio;
III - atuar como procurador ou intermedirio junto a reparties pblicas;
IV - aceitar comisso, emprego ou penso de Estado estrangeiro, sem licena do Presidente da Repblica;
V - atribuir a outro servidor pblico funes ou atividades
estranhas s do cargo, emprego ou funo que ocupa, exceto em
situao de emergncia e transitoriedade;
VI - manter sob a sua chefia imediata cnjuge, companheiro ou
parente at o segundo grau civil;
VII - praticar comrcio de compra e venda de bens ou servios no recinto da repartio, ainda que fora do horrio normal de
expediente.
Pargrafo nico. Quando houver convenincia para o servio, a penalidade de suspenso poder ser convertida em multa, na
base de cinquenta por cento da remunerao do servidor, ficando
este obrigado a permanecer em servio.

X - tratar com urbanidade os demais servidores pblicos e o


pblico em geral;
No mundo moderno, e mxime em nossa civilizao ocidental, o trato tem que ser o mais urbano possvel. Urbano, nessa acepo, no quer dizer citadino ou oriundo da urbe (cidade), mas, sim,
educado, civilizado, cordato e que no possa criar embaraos aos
usurios dos servios pblicos.
der.

XI - representar contra ilegalidade, omisso ou abuso de po-

Pargrafo nico. A representao de que trata o inciso XI deste


artigo ser obrigatoriamente apreciada pela autoridade superior
quela contra a qual formulada, assegurando-se ao representado
ampla defesa, com os meios e recursos a ela inerentes.
Caso o funcionrio pblico denuncie outro servidor, esta representao ser encaminhada a algum que seja superior hierarquicamente ao denunciado, que ter direito ampla defesa.
O servidor tem obrigao legal de dar conhecimento s autoridades de qualquer irregularidade de que tiver cincia em razo do
cargo, principalmente no processo em que est atuando ou quando o
fato aconteceu sob as suas vistas. No concebvel que o servidor se
defronte com uma irregularidade administrativa e fique inerte. Deve
provocar quem de direito para que a irregularidade seja sanada de
imediato. Caso haja indiferena no seu crculo de atuao, i.e., no
seu setor ou seo, dever representar aos rgos superiores. Assim
que o dever de informar acerca de irregularidades anda de brao
dado com o dever de representar. No surtindo efeito a notcia da
irregularidade, no corrigida esta, sobrevm o dever de representar.
O dever de representao no deixa de ser uma prerrogativa legal,
investindo o servidor de um mnus pblico importante, constituindo
o servidor em um curador legal do ente pblico. O mais humilde
servidor passa a ser um agente promotor de legalidade. claro o inciso XII do art. 116 quando diz que dever do servidor representar
contra ilegalidade, omisso ou abuso de poder. De modo que tambm a omisso pode ensejar a representao. A omisso do agente
que ilegalmente no pratica ato a que se acha vinculado pode at
configurar o ilcito penal de prevaricao. O dever de representao
deve ser privilegiado, mas deve ser usado com o devido equilbrio,
no podendo servir a finalidades egosticas, poltico-partidrias, induzido por inimizades de cunho pessoal, o que de pronto trespassar
o representante de autor a ru por prtica de abuso de poder ou denunciao caluniosa.
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Art. 5 So faltas administrativas, punveis com a pena de demisso, a bem do servio pblico:
I - valer-se, ou permitir dolosamente que terceiros tirem proveito de informao, prestgio ou influncia, obtidos em funo do
cargo, para lograr, direta ou indiretamente, proveito pessoal ou de
outrem, em detrimento da dignidade da funo pblica;
II - exercer comrcio ou participar de sociedade comercial,
exceto como acionista, cotista ou comanditrio;
III - participar da gerncia ou da administrao de empresa
privada e, nessa condio, transacionar com o Estado;
IV - utilizar pessoal ou recursos materiais da repartio em
servios ou atividades particulares;
V - exercer quaisquer atividades incompatveis com o cargo ou
a funo pblica, ou, ainda, com horrio de trabalho;
VI - abandonar o cargo, caracterizando-se o abandono pela
ausncia injustificada do servidor pblico ao servio, por mais de
trinta dias consecutivos;
VII - apresentar inassiduidade habitual, assim entendida a falta
ao servio, por vinte dias, interpoladamente, sem causa justificada
no perodo de seis meses;
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VIII - aceitar ou prometer aceitar propinas ou presentes, de
qualquer tipo ou valor, bem como emprstimos pessoais ou vantagem de qualquer espcie em razo de suas atribuies.
Pargrafo nico. A penalidade de demisso tambm ser aplicada nos seguintes casos:
I - improbidade administrativa;
II - insubordinao grave em servio;
III - ofensa fsica, em servio, a servidor pblico ou a particular, salvo em legtima defesa prpria ou de outrem;
IV - procedimento desidioso, assim entendido a falta ao dever
de diligncia no cumprimento de suas atribuies;
V - revelao de segredo de que teve conhecimento em funo
do cargo ou emprego.

possvel que o mesmo fato gere responsabilidade civil, penal


e administrativa, mas tambm possvel que este gere apenas uma
ou outra espcie de responsabilidade. Da o fato das responsabilidades serem independentes: o mesmo fato pode gerar a aplicao de
qualquer uma delas, cumulada ou isoladamente.
O instituto da responsabilidade civil parte integrante do direito obrigacional, uma vez que a principal consequncia da prtica
de um ato ilcito a obrigao que gera para o seu auto de reparar
o dano, mediante o pagamento de indenizao que se refere s perdas e danos. Afinal, quem pratica um ato ou incorre em omisso
que gere dano deve suportar as consequncias jurdicas decorrentes,
restaurando-se o equilbrio social.3
A responsabilidade civil, assim, difere-se da penal, podendo recair sobre os herdeiros do autor do ilcito at os limites da herana,
embora existam reflexos na ao que apure a responsabilidade civil
conforme o resultado na esfera penal (por exemplo, uma absolvio
por negativa de autoria impede a condenao na esfera cvel, ao passo que uma absolvio por falta de provas no o faz).
Genericamente, os elementos da responsabilidade civil se encontram no art. 186 do Cdigo Civil: aquele que, por ao ou omisso voluntria, negligncia ou imprudncia, violar direito e causar
dano a outrem, ainda que exclusivamente moral, comete ato ilcito.
Este o artigo central do instituto da responsabilidade civil, que tem
como elementos: ao ou omisso voluntria (agir como no se deve
ou deixar de agir como se deve), culpa ou dolo do agente (dolo a
vontade de cometer uma violao de direito e culpa a falta de diligncia), nexo causal (relao de causa e efeito entre a ao/omisso
e o dano causado) e dano (dano o prejuzo sofrido pelo agente, que
pode ser individual ou coletivo, moral ou material, econmico e no
econmico).
Prev o artigo 37, 6 da Constituio Federal:

Art. 6 Constitui infrao grave, passvel de aplicao da pena


de demisso, a acumulao remunerada de cargos, empregos e
funes pblicas, vedada pela Constituio Federal, estendendo-se
s autarquias, empresas pblicas, sociedades de economia mista da
Unio, dos Estados, do Distrito Federal e dos Municpios, e fundaes mantidas pelo Poder Pblico.
Art. 7 Os servidores pblicos civis so obrigados a declarar,
no ato de investidura e sob as penas da lei, quais os cargos pblicos, empregos e funes que exercem, abrangidos ou no pela
vedao constitucional, devendo fazer prova de exonerao ou demisso, na data da investidura, na hiptese de acumulao constitucionalmente vedada.
1 Todos os atuais servidores pblicos civis devero apresentar ao respectivo rgo de pessoal, no prazo estabelecido pelo
Poder Executivo, a declarao a que se refere o caput deste artigo.
2 Caber ao rgo de pessoal fazer a verificao da incidncia ou no da acumulao vedada pela Constituio Federal.
3 Verificada, a qualquer tempo, a incidncia da acumulao
vedada, assim como a no apresentao, pelo servidor, no prazo a
que se refere o 1 deste artigo, da respectiva declarao de acumulao de que trata o caput, a autoridade competente promover
a imediata instaurao do processo administrativo para a apurao
da infrao disciplinar, nos termos desta lei, sob pena de destituio
do cargo em comisso ou funo de confiana, da autoridade e do
chefe de pessoal.

As pessoas jurdicas de direito pblico e as de direito privado


prestadoras de servios pblicos respondero pelos danos que seus
agentes, nessa qualidade, causarem a terceiros, assegurado o direito de regresso contra o responsvel nos casos de dolo ou culpa.
Este artigo deixa clara a formao de uma relao jurdica autnoma entre o Estado e o agente pblico que causou o dano no
desempenho de suas funes. Nesta relao, a responsabilidade civil
ser subjetiva, ou seja, caber ao Estado provar a culpa do agente
pelo dano causado, ao qual foi anteriormente condenado a reparar.
Direito de regresso justamente o direito de acionar o causador direto do dano para obter de volta aquilo que pagou vtima, considerada a existncia de uma relao obrigacional que se forma entre a
vtima e a instituio que o agente compe.
Assim, o Estado responde pelos danos que seu agente causar
aos membros da sociedade, mas se este agente agiu com dolo ou
culpa dever ressarcir o Estado do que foi pago vtima. O agente
causar danos ao praticar condutas incompatveis com o comportamento tico dele esperado.4
A responsabilidade civil do servidor exige prvio processo administrativo disciplinar no qual seja assegurado contraditrio e ampla defesa.
3
GONALVES, Carlos Roberto. Responsabilidade
Civil. 9. ed. So Paulo: Saraiva, 2005.
4
SPITZCOVSKY, Celso. Direito Administrativo. 13. ed.
So Paulo: Mtodo, 2011.

Art. 8 Pelo exerccio irregular de suas atribuies o servidor


pblico civil responde civil, penal e administrativamente, podendo
as cominaes civis, penais e disciplinares cumular-se, sendo umas
e outras independentes entre si, bem assim as instncias civil, penal
e administrativa.
1 Na aplicao das penas disciplinares definidas nesta lei,
sero consideradas a natureza e a gravidade da infrao e os danos
que dela provierem para o servio pblico, podendo cumular-se, se
couber, com as cominaes previstas no 4 do art. 37 da Constituio.
Segundo Carvalho Filho2, a responsabilidade se origina de
uma conduta ilcita ou da ocorrncia de determinada situao ftica prevista em lei e se caracteriza pela natureza do campo jurdico
em que se consuma. Desse modo, a responsabilidade pode ser civil,
penal e administrativa. Cada responsabilidade , em princpio, independente da outra.
2
CARVALHO FILHO, Jos dos Santos. Manual de
direito administrativo. 23. ed. Rio de Janeiro: Lumen juris, 2010.
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5 A aplicao da penalidade de suspenso acarreta o cancelamento automtico do valor da remunerao do servidor, durante
o perodo de vigncia da suspenso.
6 A demisso ou a destituio de cargo em comisso incompatibiliza o ex-servidor para nova investidura em cargo pblico
federal, pelo prazo de cinco anos.
7 Ainda que haja transcorrido o prazo a que se refere o pargrafo anterior, a nova investidura do servidor demitido ou destitudo do cargo em comisso, por atos de que tenham resultado prejuzos ao errio, somente se dar aps o ressarcimento dos prejuzos
em valor atualizado at a data do pagamento.
8 O processo administrativo disciplinar para a apurao
das infraes e para a aplicao das penalidades reguladas por
esta lei permanece regido pelas normas legais e regulamentares em
vigor, assegurado o direito ampla defesa.
9 Prescrevem:
I - em dois anos, a falta sujeita s penas de advertncia e suspenso;
II - em cinco anos, a falta sujeita pena de demisso ou pena
de cassao de aposentadoria ou disponibilidade.
10. A falta, tambm prevista na lei penal, como crime, prescrever juntamente com este.

Trata-se de responsabilidade civil subjetiva ou com culpa.


Havendo ao ou omisso com culpa do servidor que gere dano ao
errio (Administrao) ou a terceiro (administrado), o servidor ter
o dever de indenizar.
A responsabilidade penal do servidor decorre de uma conduta
que a lei penal tipifique como infrao penal, ou seja, como crime
ou contraveno penal.
O servidor poder ser responsabilizado apenas penalmente,
uma vez que somente caber responsabilizao civil se o ato tiver
causado prejuzo ao errio (elemento dano).
Os crimes contra a Administrao Pblica se encontram nos
artigos 312 a 326 do Cdigo Penal, mas existem outros crimes espalhados pela legislao especfica.
Quando o servidor pratica um ilcito administrativo, a ele
atribuda responsabilidade administrativa. O ilcito pode verificar-se
por conduta comissiva ou omissiva e os fatos que o configuram so
os previstos na legislao estatutria. Por exemplo, as sanes aplicadas pela Comisso de tica por violao ao Decreto n 1.171/94
so administrativas.
Se as responsabilidades se cumularem, tambm as sanes sero cumuladas. Da afirmar-se que tais responsabilidades so independentes, ou seja, no dependem uma da outra.
Determinadas decises na esfera penal geram excluso da responsabilidade nas esferas civil e administrativa, quais sejam: absolvio por inexistncia do fato ou negativa de autoria. A absolvio
criminal por falta de provas no gera excluso da responsabilidade
civil e administrativa.
A absolvio proferida na ao penal, em regra, nada prejudica
a pretenso de reparao civil do dano ex delicto, conforme artigos
65, 66 e 386, IV do CPP: art. 65. Faz coisa julgada no cvel a
sentena penal que reconhecer ter sido o ato praticado em estado de
necessidade, em legtima defesa, em estrito cumprimento de dever
legal ou no exerccio regular de direito (excludentes de antijuridicidade); art. 66. no obstante a sentena absolutria no juzo
criminal, a ao civil poder ser proposta quando no tiver sido, categoricamente, reconhecida a inexistncia material do fato; art.
386, IV estar provado que o ru no concorreu para a infrao
penal.
Entendem Fuller, Junqueira e Machado5: a absolvio dubitativa (motivada por juzo de dvida), ou seja, por falta de provas, (art.
386, II, V e VII, na nova redao conferida ao CPP), no empresta
qualquer certeza ao mbito da jurisdio civil, restando intocada a
possibilidade de, na ao civil de conhecimento, ser provada e reconhecida a existncia do direito ao ressarcimento, de acordo com
o grau de cognio e convico prprios da seara civil (na esfera
penal, a deciso de condenao somente pode ser lastreada em juzo
de certeza, tendo em vista o princpio constitucional do estado de
inocncia).

Art. 9 Ser cassada a aposentadoria ou a disponibilidade do


inativo que houver praticado, na ativa, falta punvel com demisso,
aps apurada a infrao em processo administrativo disciplinar,
com direito ampla defesa.
Pargrafo nico. Ser igualmente cassada a disponibilidade
do servidor que no assumir no prazo legal o exerccio do cargo ou
emprego em que for aproveitado.
Art. 10. Essa lei entra em vigor na data de sua publicao.
Art. 11. Revogam-se as disposies em contrrio.
Braslia, 12 de abril de 1990; 169 da Independncia e 102 da
Repblica.

ANOTAES

2 A competncia para a imposio das penas disciplinares


ser determinada em ato do Poder Executivo.
3 Os atos de advertncia, suspenso e demisso mencionaro sempre a causa da penalidade.
4 A penalidade de advertncia converte-se automaticamente
em suspenso, por trinta dias, no caso de reincidncia.
5
FULLER, Paulo Henrique Aranda; JUNQUEIRA,
Gustavo Octaviano Diniz; MACHADO, Angela C. Cangiano.
Processo Penal. 9. ed. So Paulo: Revista dos Tribunais, 2010.
(Coleo Elementos do Direito)
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119

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


QUESTES

6- Das alternativas ab aixo, assinale qual instrumento utilizado em anlises volumtricas:


A) Bureta;
B) Cadinho;
C) Becker;
D) N.A.A.

1 - Hoje a classificao dos seres vivos admite 3 domnios:


Archaea, Bacteria e Eucaria que englobam, respectivamente, os seguintes representantes: (A) metanognicos, animais e protozorios.
(B) protozorios, microrganismos e vegetais.
(C) cianobactrias, protozorios e vegetais.
(D) vegetais, fungos e animais.
(E) hipertermoflicos, pneumococos e fungos.

7- Com relao a centrifugao, das alternativas abaixo, assinale a corret a:


A) A centrifugao compreende a sedimentao de
materiais em suspenso, em meio lquido, por ao de
um campo;
B) Em uma centr fuga qu e utilize tubos, estes podem
ser colocados, de fo rma aleatria, no rotor, sem causar
danos centr fuga e ao operador;
C) Um fator neg ativo da centri fugao que esta no
consegue proporcionar seletividade, pois todo m aterial
que colocado para centri fugar sediment a,
independente das condi es utilizadas;
D) N.A.A.

2 - Penso que a vida resulta da combinao de quatro processos - metabolismo, compartimentao, memria e manipulao - e
de uma lei de correspondncia entre memria e manipulao. Se
tomarmos isso como definio, os vrus no podem ser considerados
seres vivos, pois no tm nem metabolismo nem lei de correspondncia. (Antoine Danchin apud CINCIA HOJE, p. 25)
A confrontao do conceito de vida expresso anteriormente
com caractersticas exibidas pelos vrus permite afirmar:
(01) Os vrus e os seres vivos compartilham uma mesma linguagem na construo de seus genomas.
(02) Os vrus obtm energia usando os mesmos processos bioenergticos celulares.
(04) A organizao molecular dos vrus expressa a exigncia de
proteo para o material gentico e de reconhecimento pela clula
hospedeira.
(08) A universalidade do DNA como material gentico, entre os
vrus, os aproxima da condio biolgica.
(16) A condio vital est inevitavelmente associada estrutura
celular.
(32) A capacidade de evoluir uma propriedade comum aos
vrus e aos seres vivos.

8- Dadas as afirmativas abaixo assinale a correta, considerando


a limpeza dos laboratrios:
A.1 - A limpeza geral do laboratrio deve ser feita em funo da
quantidade de lix o produzido e do grau de sujidade. recomendado
que se faa a limpeza incluindo piso, duas vezes ao dia.
A.2 - A limpeza sempre deve ser feita em momentos em que
no haja manipulao no laboratrio, correspondendo ao final de um
turno e portanto, preparando o laboratrio para o prximo.
A.3 - Proceder limpeza durante a atividade dos laboratrios
significa risco para o funcionrio da limpeza alm de transtornos e
riscos muito mais elevados para os tcnicos.
A) Apenas as afirmativas A.1 e A.2 esto corretas;
B) Apenas as afirmativas A.1 e A.3 esto corretas;
C) Apenas as afirmativas A.2 e A.3 esto corretas;
D) T odas as afirmativas esto corretas

Soma ( )
3 - No meio de cultura gar sangue adicionado sangue, de carneiro desfribinado, o qual permite a leitura de hemli-ses causadas
por bactrias do gnero:
(A) Staphylococcus.
(B) Escherichia.
(C) Streptococcus.
(D) Clostridium.

9- Considerando que um dos mtodos d e colorao bacteriana


mais conhecido o mtodo de Gam e que ao final desta colorao,
as bactrias presentes em um a
amostra estaro coradas de roxo-Gram positivas ou de vermelho, Gram negativas, das altern ativas abaixo assinale a estrutura
bacteriana responsvel por esse fenmeno:
A) Ribossomos;
B) Citoplasma Celular;
C) Parede celular;
D) N.A.A

4-Caracterstica(s) que todos os seres vivos tm, inclusive os


vrus:
a) metabolismo prprio e reproduo
b) reproduo e mutao
c) organizao celular
d) ncleo com DNA
e) citoplasma com ribossomos

10- Dadas as alternativas abaixo, assinale a correta, considerando que a colorao de Gram um dos mtodos de colorao mais
aplicados:
A) Em Hematologia;
B) Em Virologia;
C) Bioqumica;
D) Bacteriologia.

5- Considerando as tcnicas d e esterilizao, dadas asalternativas ab aixo assinale a que NO classi ficada como um processo
fsico:
A) Cmara de xido de etileno;
B) Irradiao ionizante;
C) Autoclavag em;
D) N.A.A.
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11. O germicida que possui alto poder de desinfeco, sendo


utilizado, principalmente, nos processos de descontaminao de superfcies e de materiais infectados com amostras biolgicas, como
tubos e lminas, :
120

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


18. A criao das tiras reativas para a pesquisa de elementos
anormais na urina possibilitou maior rapidez com confiabilidade
na liberao dos resultados. Este mtodo foi desenvolvido a partir
dos mtodos de pesquisa convencionais. Na ausncia destas tiras,
os mtodos clssicos so imprescindveis e ainda muito usados. A
alternativa que descreve corretamente um mtodo convencional de
pesquisa de Elementos Anormais na Urina (EAS) :
A) Na pesquisa de corpos cetnicos, utiliza-se o reativo de Rothera, no qual a reao entre o complexo acetona-cido actico e o
nitroprussiato de sdio, em contato com a urina, forma uma reao
de cor vermelho-cereja.
B) A anlise qualitativa das protenas realizada com o reativo
de Benedict, tendo como produto final da reao a formao de um
anel de cor verde, cuja espessura indicar o grau de positividade.
C) O mtodo de Fouchet para pesquisa de pigmentos biliares
consiste na precipitao do cloreto de brio, juntamente com uma
oxidao do cloreto frrico, resultando na formao de um anel de
cor rosa que pode variar para o vermelho de acordo com o grau de
concentrao destes pigmentos na urina.
D) A anlise da glicose realizada com a utilizao do reativo
de Robert, no qual o sulfato de cobre reduzido na presena da
glicose, formando um precipitado de cor que varia do azul claro
prpura.
E) O reativo de Johanessen empregado na identificao de
hemoglobina, atravs da oxidao da fenoftalena pela presena de
zinco, em que a ausncia de cor representa reao negativa ou pode
variar do rseo ao vermelho, de acordo com o grau de positividade.

A) polivinil pirrolidona a 10%.


B) detergente neutro.
C) lcool a 70%.
D) hipoclorito de sdio a 1%.
E) clorexidina a 0,1%.
12. Para a realizao da primeira etapa do mtodo de Jaff modificado, adicionam-se 2 partes de soro do paciente em 15 partes
de soluo de cido pcrico. Se o produto final da reao for igual a
3,4 mL, quantos mL de amostra de soro e soluo de cido pcrico
foram necessrios?
A) 0,2 mL de amostra de soro e 3,2 mL de soluo de cido pcrico.
B) 0,4 mL de amostra de soro e 3,0 mL de soluo de cido pcrico.
C) 0,8 mL de amostra de soro e 2,6 mL de soluo de cido pcrico.
D) 1,0 mL de amostra de soro e 2,4 mL de soluo de cido pcrico.
E) 3,2 mL de amostra de soro e 0,2 mL de soluo de cido pcrico.
13. Na anlise do eritrograma, a policromasia ou policromatofilia uma alterao morfolgica que tem por definio:
A) variabilidade no grau de colorao ou hemoglobinizao
dos eritrcitos.
B) diminuio no tamanho eritrocitrio.
C) reduo da colorao dos eritrcitos.
D) variabilidade no tamanho eritrocitrio.
E) presena de eritrcitos de colorao rseo-azulada.
14. um procedimento de extrema importncia a ser realizado
no preparo da gota espessa, para melhor visualizao dos parasitas:
A) ultracentrifugao.
B) desprotonao.
C) desemoglobinizao.
D) fixao.
E) hemaglutinao.

19. Um tcnico recebeu uma amostra de urina de 24 horas e


uma amostra de sangue (soro) para a realizao da prova de depurao da creatinina. Aps a obteno dos resultados preliminares do
paciente, o Tcnico registrou os seguintes valores:
- creatinina srica: 0,8 mg/dL
- creatinina urinria: 64 mg/dL
- volume de urina de 24 horas do paciente: 2160 mL
- superfcie corporal do paciente: 1,60 m
- superfcie corporal padro: 1,73 m

15. A funo do hidrxido de sdio a 0,1N na soluo de urease


para determinao da ureia :
A) saturar a soluo de urease, alcalinizando o pH.
B) ajustar o pH da soluo a 6,5.
C) acelerar a reao da ureia com a urease.
D) inibir a ao da urease com o EDTA.
E) acidificar o pH da soluo de hipoclorito alcalino.

De acordo com estas informaes, qual o valor de depurao da


creatinina corrigida para este paciente?
A) 83,04 mL/minuto.
B) 86,50 mL/minuto.
C) 110,98 mL/minuto.
D) 120 mL/minuto.
E) 129,75 mL/minuto.

16. A pea de vidro que, na ausncia do equipamento que executa o hemograma, permite a realizao da contagem global de hemcias e leuccitos ao microscpio, denomina-se:
A) placa de Petri.
B) tubo de Wintrobe.
C) pipeta de Westergreen.
D) cmara de Neubauer.
E) placa escavada de Kline.

20. Em parasitologia, os mtodos quantitativos so muito importantes no diagnstico de ovos de helmintos nas fezes, sobretudo
os de, que so pesados e difceis de serem analisados pelos mtodos
qualitativos conhecidos. Nas alternativas abaixo o nico mtodo
quantitativo :
A) Faust.
B) Hoffman.
C) Kato Katz.
D) Ritchie.
E) Willis.

17. Na realizao do transporte de fezes, o meio de cultura ideal


para isolamento de Shigella e Salmonella :
A) salina tamponada.
B) caldo tioglicolato.
C) gar Thayer-Martin chocolate.
D) gar Teague.
E) gar MacConkey.
Didatismo e Conhecimento

121

Conhecimentos Especficos / Tcnico de Laboratrio


21. Na diferenciao bioqumica de enterobactrias com a utilizao do meio trplice-acar-ferro, a presena de acidez ou alcalinidade no pice do meio, acidez na base do meio, produo de gs e
de H2S, indica que a espcie provvel ser:
A) Proteus vulgaris.
B) Escherichia coli
C) Klebsiella.
D) Shigella
E) Salmonella typhi.

E) Gorro Equipamento de Proteo Individual (EPI); protege


parcialmente o rosto, em especial a regio nasal e mucosa oral, sendo descartado aps seu uso.
26. (ASPERH - 2010 - Professor auxiliar tica profissional)
Referente a principio constitucional da moralidade administrativa e
administrao publica incorretoafirmar:
a)O principio constitucional da moralidade administrativa configura um vigoroso instrumento funo de controle de legalidade,
legitimidade e economicidade dos atos administrativos dos quais
resultam despesas pblicas
b)O principio atua positivamente, impondo Administrao
Publica o dever de bem gerir e aumentando os demais deveres de
conduta administrativa, tais como os de agir impessoalmente, garantir a ampla publicidade de seus atos, pautar-se com razoabilidade, motivar seus atos e decises, agir com eficincia e observar a
compatibilidade entre o objetivo de suas aes e o ato praticado para
operacionalizar tal objetivo ou finalidade. Bem assim, configura
cnone de interpretao e integrao de norma jurdicas e/ou atos
administrativos
c)O princpio atua negativamente, impondo limites ao exerccio da discricionariedade e permitindo a correo dos atos praticados em desvio de finalidade, mediante o seu expurgo do mundo
jurdico atravs da invalidao
d)O princpio geralmente aplicvel isoladamente, compondo-se e articulando-se, algumas vezes, com outros princpio jurdicos
e)O princpio consubstancia norma jurdica e, portanto, ao
utiliz-lo no exerccio das funes constitucionais de controle dos
atos administrativos que geram despesas pblicas sob os prismas de
legalidade e da legitimidade, no desborda o Tribunal de Contas de
sua competncia constitucional
R: D. O princpio da moralidade administrativa deve sempre ser
lido em conjunto com os demais princpios constitucionais, notadamente os aplicveis Administrao Pblica: legalidade, impessoalidade, publicidade e eficincia.

22. A bactria , atravs do mtodo de colorao de gram, apresenta como caractersticas morfotintoriais:
A) aspecto reniforme, dispostas em pares, com faces cnicas
adjacentes e de tonalidade avermelhada, indicando que se trata de
uma bactria gram-negativa.
B) forma semelhante a uma gota, com bases adjacentes, dispostas em pares e de tonalidade azulada, indicando que se trata de
uma bactria gram-negativa.
C) forma esfrica, aglomeradas assemelhando-se a cacho de
uvas e de colorao azulada, indicando que se trata de uma bactria
gram-positiva.
D) tonalidade avermelhada e formato de bastonetes, dispostas
em pares, indicando que se trata de uma bactria gram-positiva.
E) formato espiral, dispostas individualmente e com tonalidade
azulada, indicando que se trata de uma bactria gram-negativa.
23. Para a realizao da prova de Coombs direto, o sangue do
paciente precisa ser colhido em tubo contendo:
A) fluoreto de sdio.
B) EDTA.
C) citrato de sdio.
D) gel separador, sem anticoagulante.
E) heparina.
24. O mtodo de colorao por hematoxilina frrica tem por
finalidade avaliar a:
A) presena de ovos de Schistosoma mansoni.
B) morfologia das larvas encontradas nas fezes.
C) presena de ferro no interior das hemcias.
D) morfologia dos protozorios nas fezes.
E) presena de hematozorios no sangue.

27. (FCC - 2010 - TRT 8 Regio) O servidor pblico que deixa


de acatar as ordens legais de seus superiores e a sua fiel execuo,
infringe o dever de
a) conduta tica.
b) eficincia.
c) obedincia.
d) lealdade.
e) fidelidade.
R: C. Dever de obedincia o que se liga diretamente hierarquia que deve ser respeitada dentro das instituies pblicas, garantindo a melhor prestao do servio. Os demais princpios so
mais abrangentes, referindo-se ao cargo como um todo, no apenas
relao hierrquica.

25. Assinale a alternativa que descreve corretamente o tipo de


Equipamento de Proteo e sua respectiva funo.
A) Capela de exausto qumica Equipamento de Proteo Individual (EPI) onde, atravs de um ambiente estril, graas parede
de ar que atravessa os filtros HEPA, permitem a manipulao de
amostras biolgicas sem contamin-las.
B) Caixa de descarte de perfurocortantes Equipamento de
Proteo Coletiva (EPC); realiza a esterilizao de materiais biolgicos atravs do calor mido.
C) Pra de borracha Equipamento de Proteo Coletiva
(EPC); facilita a aspirao em pipetas volumtricas ou graduadas,
evitando que este procedimento seja realizado com a boca.
D) Cabine de fluxo laminar Equipamento de Proteo Coletiva (EPC); acionada atravs de um sistema de pedais ou alavancas
de mo, realizando a lavagem dos olhos, permitindo remover resduos nocivos que possam atingir a face do operador.
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28. (FCC - 2010 - TRT 22 Regio) O princpio da administrao pblica que tem por fundamento que qualquer atividade de gesto pblica deve ser dirigida a todos os cidados, sem a determinao de pessoa ou discriminao de qualquer natureza, denomina-se
a) Eficincia.
b) Moralidade.
c) Legalidade.
d) Finalidade.
e) Impessoalidade.
122

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R: E. Quando comprovada a inexistncia do fato ou a negativa de autoria na esfera criminal, tradicionalmente reconhecida por
apurar com maior rigor e arcabouo probatrio os fatos levados a
seu conhecimento (em defesa do direito liberdade e em respeito
presuno de inocncia), entende-se que uma esfera menos rigorosa
no poderia afirmar o contrrio. Somente cabe condenao cvel ou
administrativa em caso de absolvio criminal quando esta se der
por falta de provas.

R: E. Todos os princpios da administrao pblica se ligam,


por isso, ao menos indiretamente todos acabam se fazendo presentes. Contudo, preciso se atentar ao mais especfico: o prembulo da
questo descreve exatamente o conceito do princpio da impessoalidade, que veda distines indevidas entre os administrados.
29. (FGV - 2010 - PC-AP - Delegado de Polcia) Com relao
responsabilidade civil, penal e administrativa decorrente do exerccio do cargo, emprego ou funo pblica, analise as afirmativas a
seguir:
I. O funcionrio pblico, condenado na esfera criminal, poder
ser absolvido na esfera civil e administrativa, prevalecendo a regra
da independncia entre as instncias.
II. A absolvio judicial do servidor pblico repercute na esfera
administrativa se negar a existncia do fato ou exclu-lo da condio
de autor do fato.
III. A Administrao Pblica pode demitir funcionrio pblico
por corrupo passiva antes de transitado em julgado da sentena
penal condenatria.
IV. A absolvio do servidor pblico, em ao penal transitada
em julgado, por no provada a autoria, implica a impossibilidade de
aplicao de pena disciplinar administrativa, porm permite a ao
regressiva civil para ressarcimento de dano ao errio.
Assinale:
a) se somente a afirmativa I estiver correta.
b) se somente as afirmativas I e II estiverem corretas.
c) se somente as afirmativas II e IV estiverem corretas.
d) se somente as afirmativas II e III estiverem corretas.
e) se todas as afirmativas estiverem corretas.
R: D. I est incorreta porque a condenao na esfera criminal
dotada de tal fora que no faria sentido a absolvio na esfera cvel
e administrativa, que requerem menor arcabouo probatrio para
a condenao; II est correta porque as absolvies criminais por
negativa da autoria ou inexistncia do fato geram necessariamente
absolvio cvel e administrativa; III est correta porque a pena de
demisso pode ser aplicada antes do trnsito em julgado da sentena
penal condenatria ao final do processo administrativo disciplinar,
que corre de maneira independente; IV est incorreta porque no
exemplo tambm se d excluso da responsabilidade civil.

31. (VUNESP - 2012 - SPTrans - Advogado Pleno - Administrativo) Sobre a responsabilidade dos servidores pblicos, correto
afirmar que
a) em face da presuno de inocncia, garantida pela Constituio Federal, a Administrao deve aguardar o desfecho de processo
criminal antes de proceder punio disciplinar do servidor pela
mesma falta.
b) a absolvio criminal afastar o ato punitivo no mbito administrativo se ficar provada, na ao penal, a inexistncia do fato ou
que o acusado no foi o seu autor.
c) a condenao do servidor no mbito civil implica automaticamente o reconhecimento das responsabilidades administrativa e
criminal, posto que a primeira mais ampla que as duas ltimas.
d) a extino da pena administrativa pode se dar pelo seu cumprimento ou pela prescrio, sendo vedada extino por meio do
perdo por parte da Administrao Pblica.
e) o entendimento, atualmente, que, nas aes de reparao de
danos contra a Fazenda Pblica, por responsabilidade objetiva, esta
obrigada a denunciar lide o servidor que causou os danos.
R: B. Quando comprovada a inexistncia do fato ou a negativa de autoria na esfera criminal, tradicionalmente reconhecida por
apurar com maior rigor e arcabouo probatrio os fatos levados a
seu conhecimento (em defesa do direito liberdade e em respeito
presuno de inocncia), entende-se que uma esfera menos rigorosa
no poderia afirmar o contrrio. Logo, ficar afastado o ato punitivo
nos mbito administrativo e cvel.

ANOTAES

30. (FGV - 2011 - SEFAZ-RJ) A respeito do regime de responsabilidade dos servidores pblicos em mbito federal, correto
afirmar que
a) o servidor pblico responde penal e administrativamente
pelo exerccio irregular de suas atribuies, ao passo que a responsabilidade civil exclusiva da Administrao Pblica.
b) embora as instncias penal e administrativa sejam independentes, a deciso penal absolutria por insuficincia de provas vincula a instncia administrativa.
c) as sanes administrativas no podem cumular-se com as
sanes civis decorrentes de uma mesma infrao funcional, sob
pena debis in idem.
d) a ao disciplinar prescreve em 2 (dois) anos, seja qual for a
natureza da infrao administrativa cometida pelo servidor.
e) a responsabilidade do servidor ser afastada no caso de absolvio criminal que negue a existncia do fato ou sua autoria.
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Gabarito:
1

10

01 + 04 + 16 + 32 = 53

11

12

13

14

15

16

17

18

19

20

21

22

23

24

25

Referncias
www.microbiologia.ufba.br/aulas/MEIOS%20DE%20CULTURA.doc
GONALVES. Fabiana Santos. Disponvel em: http://www.infoescola.com/microbiologia/metodos-fisicos-de-controle-de-microorganismos/
TESTE ELISA, 2013. Disponvel em: http://www6.ufrgs.br/labvir/material/aulap10.pdf
http://www.infoescola.com/medicina/teste-elisa/
http://www.elisa-development.com/
SOARES, Ludmilla. Elisa. Universidade federal da bahia instituto de cincias da sade icsdepartamento de biointeraodisciplina: imunologia i. 2010. Disponvel em: http://pt.slideshare.net/labimuno/elisa-3454963
http://www.biomedicinapadrao.com/2011/10/reacao-em-cadeia-da-polimerase-pcr.html
http://pt.wikipedia.org/wiki/Rea%C3%A7%C3%A3o_em_cadeia_da_polimerase
DALTRO, Paula Braga. Fixao do complemento. Universidade federal da bahia instituto de cincias da sade icsdepartamento de
iointeraodisciplina: imunologia i. 2010. Disponvel em: http://pt.slideshare.net/labimuno/fixao-decomplemento
http://www.cristofoli.com/biosseguranca/?p=15
PRISTA, JOO; UVA, ANTNIO DE SOUSA. A utilizao de indicadores biolgicos em Sade Ocupacional. Disponvel em: http://
www.ensp.unl.pt/dispositivos-de-apoio/cdi/cdi/sector-de-publicacoes/revista/2000-2008/pdfs/e-04-2006.pdf
Hunt, Margaret. Virologia bsica: definies, classificao, morfologia e qumica. Disponvel em http://pathmicro.med.sc.edu/portuguese/virol-port-chapter1.htm
Mandal, Ananya. Disponvel em: http://www.news-medical.net/health/Virus-Classification-%28Portuguese%29.aspx
http://educacao.uol.com.br/disciplinas/biologia/bacterias-2-estrutura-modo-de-vida-e-classificacao.htm
http://estudmed.com.sapo.pt/microbiologia/metabolismo_bacteriano.htm
http://wwwbiologiareinofungi.blogspot.com.br/2011/04/reproducao-dos-fungos.html
http://pt.slideshare.net/Love_Pharmacy/micologia-1parte

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