Manual Analise Agua 2ed PDF

Manual Prtico de
Anlise de gua
Braslia, 2006
Copyright 2004
Fundao Nacional de Sade (Funasa)
Ministrio da Sade
Editor
Assessoria de Comunicao e Educao em Sade
Ncleo de Editorao e Mdias de Rede/Ascom/Presi/Funasa/MS
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70.070-040 - Braslia/DF
Distribuio e Informao
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70.070-040 - Braslia/DF
Tiragem
3.000 exemplares
Brasil. Fundao Nacional de Sade.

Manual prtico de anlise de gua. 2 ed. rev. Braslia: Fundao Nacional de Sade, 2006.
146 p.
1. Saneamento. I. Ttulo.
permitida a reproduo parcial ou total desta obra, desde que

citada a fonte.
Impresso no Brasil
Printed in Brazil
Apresentao
Este manual, elaborado de forma e linguagem simples,
tem como objetivo auxiliar pessoas que trabalham
nos laboratrios de controle da qualidade da gua de
estaes de tratamento de pequeno e mdio porte, no
desenvolvimento de suas atividades dirias.
A idia surgiu da necessidade de se ter no laboratrio
um instrumento de consulta que pudesse acompanhar os
passos do tcnico a todo instante e em qualquer lugar.
Nele esto descritos os procedimentos mais comuns
que so realizados rotineiramente no laboratrio de
uma ETA.
Qualquer procedimento aqui abordado que necessite de
um conhecimento mais profundo, deve-se consultar os
grandes compndios que tratam do assunto, como por
exemplo, o Standard Methods for the Examination of Water
and Wastewater, publicao da AWWA, APHA e WPCF.
A primeira parte do manual aborda os exames
bacteriolgicos envolvendo a pesquisa de coliformes totais
e termotolerantes, inclusive Escherichia coli e a contagem
padro de bactrias heterotrficas, desde a preparao
do material a ser utilizado, passando pela realizao dos
ensaios at a emisso de resultados. Na segunda parte
esto descritas as tcnicas das anlises fsico-qumicas e
testes de rotina de uma ETA e, finalmente, a preparao de
todos os reagentes utilizados. Foram includos, tambm,
alguns procedimentos de biossegurana em laboratrio, a
Portaria MS n 518/2004 que trata das Normas e Padres
de Potabilidade da gua para consumo humano no Brasil e
uma relao de equipamentos e materiais de laboratrio.
Acredita-se que os parmetros aqui descritos so suficientes

para monitorar o controle da qualidade da gua distribuda
para consumo humano em diversas localidades do pas.
O exame da gua, principalmente daquela destinada ao
consumo humano, de fundamental importncia. Por ele
pode-se ter certeza de que a gua distribuda de confiana,
se est isenta de microorganismos ou substncias qumicas
que podem ser prejudiciais sade das pessoas.
Distribuir gua sem antes examin-la um tiro no escuro,
muitas vezes de conseqncias irremediveis.
Sumrio
Apresentao
Exame bacteriolgico da gua .................... 7
Coliformes termotolerantes ...................... 7
Bactrias heterotrficas ............................ 7
Anlises fsico-qumica da gua ................. 35
Titulomtricas .......................................... 35
Colorimtricas ......................................... 35
Exame bacteriolgico da gua

Coliformes totais
Coliformes termotolerantes
Bactrias heterotrficas
Introduo
A gua potvel no deve conter microorganismos
patognicos e deve estar livre de bactrias indicadoras de
contaminao fecal. Os indicadores de contaminao fecal,
tradicionalmente aceitos, pertencem a um grupo de bactrias
denominadas coliformes. O principal representante desse
grupo de bactrias chama-se Escherichia coli.
A Portaria n 518/2004 do Ministrio da Sade estabelece que
sejam determinados, na gua, para aferio de sua potabilidade,
a presena de coliformes totais e termotolerantes de preferncia
Escherichia coli e a contagem de bactrias heterotrficas.
A mesma portaria recomenda que a contagem padro de
bactrias no deve exceder a 500 Unidades Formadoras de
Colnias por 1 mililitro de amostra (500/UFC/ml)
Bactrias do grupo coliforme

Conceito:
Denomina-se de bactrias do grupo coliforme bacilos gramnegativos, em forma de bastonetes, aerbios ou anaerbios
facultativos que fermentam a lactose a 35-37C, produzindo
cido, gs e aldedo em um prazo de 24-48 horas. So
tambm oxidase-negativos e no formam esporos.
A razo da escolha desse grupo de bactrias como indicador
de contaminao da gua deve-se aos seguintes fatores:
esto presentes nas fezes de animais de sangue quente,
inclusive os seres humanos;
sua presena na gua possui uma relao direta com o
grau de contaminao fecal;
Fundao Nacional de Sade
so facilmente detectveis e quantificveis por tcnicas

simples e economicamente viveis, em qualquer tipo de
gua;
possuem maior tempo de vida na gua que as bactrias
patognicas intestinais, por serem menos exigentes
em termos nutricionais, alm de ser incapazes de se
multiplicarem no ambiente aqutico;
so mais resistentes ao dos agentes desinfetantes do
que os germes patognicos.
A Contagem Padro de Bactrias muito importante durante
o processo de tratamento da gua, visto que permite avaliar
a eficincia das vrias etapas do tratamento.
importante, tambm, conhecer a densidade de bactrias,
tendo em vista que um aumento considervel da populao
bacteriana pode comprometer a deteco de organismos
coliformes. Embora a maioria dessas bactrias no seja
patognica, pode representar riscos sade, como tambm,
deteriorar a qualidade da gua, provocando odores e sabores
desagradveis.
As tcnicas adotadas neste manual para quantificar os
coliformes e hetertrofos na gua so as preconizadas
no Standard Methods for the Examination of Water and
Wastewater publicao da American Public Health
Association (APHA), American Water Works Association
(AWWA) e Water Environment Federation.
Manual Prtico de Anlise de gua
Algumas doenas veiculadas pela gua e seus agentes

Doenas
Origem bacteriana
Febre tifide e paratifide
Disenteria bacilar
Clera
Gastroenterites agudas e
diarrias
Origem viral
Hepatite A e B
Poliomielite
Gastroenterites agudas e
crnicas
Origem parasitria
Disenteria amebiana
Gastroenterites
Fonte: Opas, 1999
Agentes patognicos
Salmonella typhi
Salmonella parathyphi A e B
Shigella sp
Vibrio cholerae
Escherichia coli enterotxica
Campylobacter
Yersnia enterocoltica
Salmonella sp
Shigella sp
Vrus da hepatite A e B
Vrus da poliomielite
Vrus Norwalk
Rotavirus
Enterovirus
Adenovirus
Entamoeba histolytica
Girdia lmblia
Cryptosporidium
Material utilizado em bacteriologia

a) autoclave;
b) estufa bacteriolgica;
c) estufa de esterilizao e secagem;
d) balana;
e) destilador;
f) banho-maria;
g) contador de colnias;
h) ala de platina com cabo;
i) tubo de Durhan;
10
j)
tubo de ensaio;
k) algodo em rama;
l)
meios de cultura;
m) frascos de coleta;
n) pipetas graduadas;
o) papel-alumnio;
p) lamparina a lcool ou bico de Bunsen;
q) placas de Petri;
r) pina de ao inox;
s) membranas filtrantes;
t) porta-filtro de vidro ou ao inox;
u) lmpada ultravioleta.
Preparo do material de vidro

Tubos de ensaio
a) colocar o tubo de Durhan na posio invertida dentro do
tubo de ensaio;
b) tampar o tubo de ensaio com um chumao de algodo
em rama.
Frascos de coleta
a) colocar duas gotas (0,1 ml) de Tiossulfato de Sdio a 10%
dentro do frasco;
b) colocar uma tira de papel-alumnio entre a boca e a
tampa do frasco;
c) envolver a boca e tampa do frasco em papel-alumnio.
11
Pipetas
a) colocar um pequeno chumao de algodo no bocal da
pipeta;
b) envolv-la em papel-alumnio ou papel-madeira (Kraft).
Placas de petri de vidro

a) envolv-las em papel-alumnio ou papel-madeira.
Nota: Frascos de coleta, pipetas e placas de Petri devem ser
esterilizados e antes de serem preparados devem estar
limpos e secos (ver esterilizao pg. 34).
Meios de cultura
a) caldo lactosado;
b) caldo lactosado verde brilhante Bile a 2%;
c) caldo EC;
d) Plate Count Agar
Preparao dos meios de cultura

Caldo lactosado de concentrao dupla
a) pesar 26 gramas do meio de cultura e dissolver em
1.000 ml de gua destilada;
b) distribuir em tubos de ensaio (10 ml em cada tubo),
tampar os tubos;
c) esterilizar a 121 C (1 Kg/cm2 de presso) em autoclave
durante 15 minutos;
d) deixar esfriar;
e) guardar no refrigerador (vlido por uma semana).
12
Caldo lactosado de concentrao simples

a) pesar 13 gramas do meio de cultura desidratado e
dissolver em 1.000 ml de gua destilada;
tampar os tubos;
durante 15 minutos;
d) deixar esfriar;
Caldo lactosado verde brilhante bile a 2%
a) pesar 40 gramas do meio de cultura desidratado e
dissolver em 1.000 ml de gua destilada;
tampar os tubos;
durante 15 minutos;
d) deixar esfriar;
Meio EC
a) pesar 37,0 gramas do meio desidratado e dissolver em
1000 ml de gua destilada;
b) distribuir em tubos de ensaio contendo o tubo Durhan
invertido, 10 ml em cada tubo, tampar os tubos;
c) esterilizar a 121 C (1Kg/cm2 de presso) em autoclave
durante 15 minutos;
d) guardar no refrigerador (Vlido por 96 horas).
13
Plate Count Agar

a) pesar 20,5 gramas do meio de cultura desidratado e
dissolver em 1000 ml de gua destilada fria;
b) deixar em repouso durante 5 minutos;
c) aquecer, agitando freqentemente com basto de
vidro, at completa dissoluo do meio (durante o
aquecimento no deixar entrar em ebulio);
d) se necessrio, ajustar o pH para 7,0 com Hidrxido de
Sdio soluo normal (NaOH 1N);
e) distribuir em tubos de ensaio com tampa rosquevel
(12 ml em cada tubo );
f)
esterilizar a 121 C (1 Kg/cm2 de presso) em autoclave

durante 15 minutos.
Notas: 1. Este meio, depois de frio, se solidifica. Fundir em banhomaria antes de us-lo.
2. Devido variedade de meios de cultura existentes no
mercado, seguir sempre as instrues do fabricante, que
vem estampada no rtulo do frasco.
gua de diluio
Soluo 1
-
Pesar 34 gramas de Fosfato de Potssio Monobsico

(KH2PO4) e dissolver em 500 ml de gua destilada,
ajustar o pH para 7,2 com Hidrxido de Sdio, soluo
normal (NaOH 1N) e diluir a 1 litro com gua destilada.
Normalmente so necessrios 175 ml de NaOH 1N para
elevar o pH.
14
Soluo 2
-
Pesar 81,1 gramas de Cloreto de Magnsio

hexahidratado (MgCl2.6H2O) e dissolver em 1 litro de
gua destilada.
Soluo 3
-
Adicionar 1,25 ml da soluo 1 e 5 ml da soluo 2 a

1 litro de gua destilada. Distribuir em tubos de ensaio
em quantidade que, aps autoclavao, assegurem um
volume de 9 0,2 ml.
Esterilizar em autoclave a 121 C (1Kg/cm2 de presso)

durante 15 minutos.
Modo de usar a gua de diluio quando for

determinar o NMP de coliformes
a) tomar 1 tubo de ensaio contendo 9 0,2 ml de gua de
diluio esterilizada;
b) adicionar 1 ml da amostra de gua a ser examinada;
c) misturar bem. Est pronta a diluio 1:10;
d) tirar da diluio acima, com pipeta esterilizada, 1 ml e
inocular no tubo contendo caldo lactosado de concentrao
simples. (diluio 1:100).
Coleta de amostras de gua para exames

bacteriolgicos
As amostras devem ser coletadas em frascos de vidro branco,
boca larga, com tampa de vidro esmerilhada, bem ajustada,
capacidade de 125 ml, previamente esterilizados ou saco
plstico estril, descartvel, contendo pastilha de tiossulfato
de sdio .
15
Os frascos para a coleta de guas cloradas devem receber,

antes de serem esterilizados, 0,1 ml (2 gotas) de tiossulfato
de sdio a 10%.
Procedimentos para coleta em residncias

a) lavar as mos com gua e sabo;
b) limpar a torneira do usurio com um pedao de algodo
embebido em lcool;
c) abrir a torneira e deixar escorrer a gua durante 1 ou 2
minutos;
d) fechar e flambar a torneira;
e) abrir novamente a torneira e deixar escorrer por mais 2
ou 3 minutos;
f) coletar a amostra de gua;
g) encher com pelo menos de seu volume;
h) tampar o frasco, Identific-lo, anotando endereo, a hora
e a data da coleta, o estado do tempo, o nome do coletor,
etc;
i) marcar o frasco com o nmero da amostra, correspondente
ao ponto de coleta;
j) preencher a ficha de identificao da amostra de gua;
k) colocar o frasco da amostra na caixa de isopor com
gelo;
l) lacrar, identificar e enviar a caixa para o laboratrio.
O tempo de coleta e a realizao do exame no deve
exceder 24 horas;
Nota: Alm de residncias as amostras podem ser coletadas em
hospitais, escolas, torneiras pblicas, etc, o procedimento
o mesmo acima. Segundo a Cetesb antes da coleta, a
16
torneira pode ser flambada, se necessrio. Entretanto,

esse procedimento no muito aconselhvel, pois alm
de provocar danos s torneiras, comprovou-se no ter
efeito letal sobre as bactrias. atualmente o processo de
flambagem opcional. A Cetesb e o Standard Methods
recomendam utilizar soluo de hipoclorito de sdio a
100 mg/l e utilizando esse procedimento deve-se remover
completamente o hipoclorito, antes da coleta.
Fases do procedimento
Fonte: OMS, 1998

17
Outros locais de coleta

Nas estaes de tratamento, as amostras so coletadas na
captao (gua bruta), nos decantadores, na sada dos filtros
e nos reservatrios de gua tratada.
Procedimentos para o exame

Coliformes totais
Mtodo dos tubos mltiplos
Material necessrio:
a) tubo de ensaio.
b) estante para tubo de ensaio.
c) tubo de Durhan.
d) pipeta graduada de 10 mL.
e) pipeta graduada de 1 mL.
f)
bico de Bunsen ou lamparina a lcool.
g) caldo Lactosado de concentrao dupla.

h) caldo Lactosado de concentrao simples.
i)
caldo Lactosado Verde Brilhante Bile a 2%.
j)
gua de diluio.
k) ala de platina com cabo de Kolle.

l)
estufa bacteriolgica.
18
Execuo do teste
Teste presuntivo
a) tomar uma bateria contendo 15 tubos de ensaio
distribudos de 5 em 5;
b) nos primeiros 5 tubos, (os que contm caldo
lactosado de concentrao dupla) inocular com
pipeta esterilizada, 10 ml da amostra de gua a ser
examinada, em cada tubo. (Diluio 1:1);
c) nos 10 tubos restantes (os que contm caldo lactosado
de concentrao simples), inocular nos 5 primeiros, 1
ml da amostra (Diluio 1:10) e nos 5 ltimos tubos,
inocular 0,1 ml da amostra, em cada tubo. (Diluio
1:100). Ver pgina 15;
d) misturar;
e) incubar a 35 0,5 C durante 24/48 horas;
f)
se no final de 24/48 horas, houver a formao de

gs dentro do tubo de Durhan, significa que o teste
Presuntivo foi Positivo. Neste caso, fazer o teste
confirmativo. Se no houver a formao de gs durante
o perodo de incubao, o exame termina nesta fase
e o resultado do teste considerado negativo.
Observao: No lugar do caldo Lactosado pode ser usado o

caldo Lauril Triptose.
Teste confirmativo
a) tomar o nmero de tubos do Teste Presuntivo que
deram Positivos (Formao de gs) nas 3 diluies 1:
1; 1:10 e 1:100;
19
b) tomar igual nmero de tubos contendo o meio de

Cultura Verde Brilhante Bile a 2%;
c) com a ala de platina, previamente flambada e fria,
retirar de cada tubo positivo uma poro de amostra
e inocular no tubo correspondente contendo o
meio Verde Brilhante. Este procedimento chama-se
repicagem;
d) identificar os tubos;
e) incubar durante 24/48 horas a 35 0,5C;
f)
se no final do perodo de 24/48 horas houver a

formao de gs dentro do tubo de Durhan o teste
considerado Positivo. Caso no haja formao de gs,
o teste considerado negativo.
Fases do teste
Inocular em Cl ou CLT e
inocular por 24 2 hs a 35
0,50C
(A) Formao de gs ou
crescimento forte.
Confirmar em VB a 35 0,50C
durante 24/48 horas
1) No produz gs.
Ausncia do grupo
coliforme
2) Produz gs.
Grupo coliforme
confirmado.
(B) Ausncia de gs ou
produo duvidosa. Incubar
por + 24 horas
1) Produo de gs ou
produo duvidosa e
crescimento forte.
Confirmar como em (A)
Nota: CL = Caldo lactosado

CLT = Caldo lauril triptose
VB = Verde brilhante bile a 2%
20
2) Ausncia de gs.
teste negativo para o
grupo coliforme
Expresso dos resultados

a) os resultados so expressos em N.M.P (Nmero Mais
Provvel) /100 ml de amostra.
b) para se determinar o N.M.P, verifica-se a combinao
formada pelo nmero de tubos positivos que
apresentaram as diluies 1:1; 1:10 e 1:100 no Teste
Confirmativo.
Exemplo:
a) nos 5 tubos da diluio 1:1, obtiveram-se 3 tubos
positivos;
b) nos 5 tubos da diluio 1:10, obtiveram-se 2 tubos
positivos;
c) nos 5 tubos da diluio 1:100, obteve-se 1 tubo
positivo;
d) formou-se, portanto, a combinao 3-2-1;
d) determina-se o N.M.P consultando a tabela 1.
Se no quiser trabalhar com 15 tubos para determinar o NMP
fazer apenas 5 tubos na diluio 1:1 (10 ml do meio de
cultura + 10 ml da amostra) e calcular o NMP consultando
a tabela 2.
21
Tabela 1 do NMP com limite de confiana de 95% para

vrias combinaes de resultados positivos quando 5 tubos
so usados para cada diluio (10 ml, 1,0 ml e 0,1 ml)
22
Combinao de
positivos
NMP/100 ml
0-0-0
0-0-1
0-1-0
0-2-0
1-0-0
1-0-1
1-1-0
1-1-1
1-2-0
2-0-0
2-0-1
2-1-0
2-1-1
2-2-0
2-3-0
3-0-0
3-0-1
3-1-0
3-1-1
3-2-0
3-2-1
4-0-0
4-0-1
4-1-0
4-1-1
4-1-2
4-2-0
4-2-1
4-3-0
4-3-1
4-4-0
5-0-0
5-0-1
5-0-2
5-1-0
5-1-1
5-1-2
5-2-0
5-2-1
5-2-2
5-3-0
5-3-1
5-3-2
5-3-3
5-4-0
5-4-1
5-4-2
5-4-3
<2
2
2
4
2
4
4
6
6
4
7
7
9
9
12
8
11
11
14
14
17
13
17
17
21
26
22
26
27
33
34
23
30
40
30
50
60
50
70
90
80
110
140
170
130
170
220
280
Limites
Inferior
Superior
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
2.0
2.0
1.0
2.0
2.0
3.0
3.0
5.0
3.0
4.0
4.0
6.0
6.0
7.0
5.0
7.0
7.0
9.0
12
9.0
12
12
15
16
9
10
20
10
20
30
20
30
40
30
40
60
80
50
70
100
120
10
10
13
11
15
15
18
18
17
20
21
24
25
29
24
29
29
35
35
40
38
45
46
55
63
56
65
67
77
80
86
110
140
120
150
180
170
210
250
250
300
360
410
390
480
560
690
continuao tabela 1
Combinao de
positivos
NMP/100 ml
5-4-4
5-5-0
5-5-1
5-5-2
5-5-3
5-5-4
5-5-5
350
240
300
500
900
1600
1600
Limites
Inferior
Superior
160
100
100
200
300
600
-
820
940
1300
2000
2900
5300
-
Fonte: APHA, 1985
Tabela 2 do NMP com limite de confiana de 95% para

os resultados positivos quando 5 pores de 10 ml so
examinadas
Limites
Nmero de tubos
positivos
NMP/100 ml
< 2,2
6,0
2,2
0,1
12,6
5,1
0,5
19,2
9,2
1,6
29,4
16,0
3,3
52,9
>16,0
8,0
Infinito
Inferior
Superior
Fonte: APHA, 1985
Mtodo dos tubos mltiplos
Material necessrio:
a) tubos de ensaio com Meio EC;
b) bico de Bunsen ou lamparina a lcool;
c) ala de platina;
d) banho-maria.
23
Execuo do ensaio
a) tomar todos os tubos do Teste Presuntivo que deram
Positivos (Formao de gs) e todos os tubos negativos
em que houve crescimento aps 48 horas, nas 3
diluies (1:1; 1:10 e 1:100);
b) transferir, com ala de platina flambada e fria, uma
poro para os tubos de ensaio contento o meio EC;
c) misturar e deixar todos os tubos em banho de gua
durante 30 minutos;
d) incubar em banho-maria a 44,5 0,2 C durante 24
2 horas;
e) se no final de 24 horas ou menos houver a formao de gs,
est indicado a presena de coliformes de origem fecal;
f)
calcular o N.M.P consultando a tabela 1.
Nota: Este ensaio deve ser realizado simultaneamente com o

Teste Confirmativo para Coliformes Totais.
Observao: Fazer sempre este exame toda vez que forem
realizados testes confirmativo para coliformes
totais.
Contagem padro de bactrias

Bactrias heterotrficas
Material necessrio
a) placa de Petri;
b) pipeta graduada;
c) bico de Bunsen ou lamparina a lcool;
24
d) plate Count Agar;

e) estufa bacteriolgica;
f)
contador de colnia.
Execuo do ensaio
a) transferir, com pipeta estril, 1 ml da amostra para uma
placa de Petri previamente esterilizada;
b) entreabrir a placa e adicionar o meio de cultura,
previamente fundido e estabilizado em banho-maria
a 44-46C, contido no tubo de ensaio;
c) homogeneizar o contedo da placa em movimentos
circulares moderados em forma de ( ), em torno de
10 vezes consecutivas;
d) quando o meio de cultura se solidificar, incubar a
placa em posio invertida a 35 0,5 C durante 48
3 horas;
e) no final do perodo de incubao, fazer a contagem das
colnias com o auxlio de um contador de colnias.
Expresso dos resultados
Os resultados so expressos como n de Colnias de bactrias/
ml ou Unidades Formadoras de Colnias (UFC)/ml.
a) antes de iniciar os exames desinfetar a bancada do
laboratrio, usando uma soluo de lcool etlico a
70% ou outro desinfetante que no deixe resduo;
b) todas as amostras a serem examinadas devem ser
homogeneizadas pelo menos 25 vezes;
c) no esquecer de flambar a boca dos tubos de ensaio
contendo meios de cultura, antes de us-los;
25
d) o Tiossulfato de Sdio a 10% colocado nos frascos de

coleta para neutralizar a ao do cloro;
e) as placas de Petri devem ser colocadas na posio
invertida para evitar a condensao de gua na
superfcie do gar;
f)
fazer a Contagem Padro de Bactrias, sempre em

duplicata.
Coliformes totais
Mtodo da membrana filtrante
Material necessrio:
a) equipamento de filtrao com porta-filtro;
b) placa de Petri esterilizada de 47 mm;
c) filtros de membrana de 47 mm e porosidade de
0,45m, com carto absorvente;
d) meio de cultura (M ENDO MF);
e) gua de diluio estril;
f)
pina de ao inox;
g) copo de ao inox;
h) bico de Bunsen ou lamparina a lcool;
i)
bomba de vcuo (Seringa);
j)
estufa bacteriolgica.
Execuo do ensaio
a) com a pina, colocar cuidadosamente na placa de Petri
um carto absorvente;
26
b) com pipeta esterilizada colocar 1,8 ml do meio de

cultura no carto absorvente e tampar a placa;
c) colocar a membrana filtrante no porta-filtro, com a
pina previamente flambada e fria;
d) agitar o frasco contendo a amostra, pelo menos 25
vezes;
e) destampar e flambar a boca do frasco;
f)
verter, cuidadosamente, 100 mL de amostra no portafiltro, evitando que a gua respingue sobre as bordas
superiores;
g) ligar a bomba de vcuo (seringa) e fazer a suco;

h) aps filtrada a amostra, lavar 3 vezes as paredes do
funil com gua de diluio estril com pores de 20
ml aplicando vcuo;
i)
aps a lavagem e filtrao, aliviar o vcuo e remover

o funil do suporte;
j)
com a pina flambada e fria, remover o filtro do suporte

e coloc-lo na placa de Petri, antes preparada, com o
lado quadriculado para cima;
k) tampar a placa de Petri e incub-la invertida a 35 C

durante 24 2 horas;
l)
aps o perodo de incubao, examinar o filtro fazendo

a contagem das colnias.
Leitura dos resultados

As colnias indicativas de Coliformes Totais tpicas tm uma
cor rosa a vermelho escuro, com brilho metlico.
O brilho pode aparecer no centro ou na periferia da colnia.
As no coliformes aparecem com colorao vermelho-clara
ou escura sem o brilho metlico caracterstico.
27
Observao: s vezes, quando o disco est muito mido e a fonte

de luz muito intensa, as colnias de no Coliformes
podem aparecer com um brilho falso, causando erros.
Isto poder ser contornado usando-se fonte de luz mais
difusa ou secando-se o filtro antes de ser examinado.
Preparo do meio de cultura

Material necessrio:
a) meio de cultura desidratado (M ENDO MF);
b) gua destilada;
c) lcool etlico a 95%;
d) frasco Erlenmeyer de 125 ml;
e) vidro de relgio;
f)
Tcnica
a) pesar 4,8 gramas do meio desidratado;
b) transferir para o Erlenmeyer;
c) adicionar aos poucos 100 ml de gua destilada
contendo 2 ml de lcool etlico a 95%;
d) aquecer em banho-maria ou no bico de Bunsen at o
incio da fervura (no deixar ferver);
e) deixar esfriar;
f)
distribuir 1,8 ml em cada placa.
Observao: 1. Preparar somente a quantidade necessria para

uso. Este meio pode ser adquirido em ampolas
de 2 ml, porm o custo muito elevado. mais
econmico prepar-lo no laboratrio.
28
2. Em substituio ao Caldo M FC poder ser

utilizado o meio slido (gar M-Endo LES).
Mtodo da membrana filtrante
Material necessrio
a) equipamento de filtrao com porta filtro;
b) placa de esterilizada de 47 mm;
c) filtros de membrana de 47 mm e porosidade de
0,45m, com carto absorvente;
d) meio de cultura (Caldo M FC);
e) gua de diluio estril;
f)
pina de ao inox;
g) copo de ao inox;
h) bico de Bunsen ou lamparina a lcool;
i)
bomba de vcuo (seringa);
j)
estufa bacteriolgica ou banho-maria.
Preparo do meio de cultura

Material necessrio:
a) meio de cultura desidratado (Caldo M FC);
b) gua destilada;
c) cido roslico a 1% em NaOH 0,2 N;
d) frasco Erlenmeyer de 125 ml;
29
e) vidro de relgio;
f)
Tcnica
a) pesar 3,7 gramas do meio desidratado;
b) transferir para o Erlenmeyer;
c) dissolver o meio pesado, em 100 ml de gua
destilada;
d) adicionar 1 ml da soluo de cido roslico a 1%;
e) aquecer at a ebulio;
f)
deixar esfriar;
g) distribuir 2,0 ml em cada placa.

Observao: 1. Preparar somente a quantidade necessria para uso;
2. Este meio pode ser adquirido em ampolas
de 2 ml,porm o custo muito elevado. mais
econmico prepar-lo no laboratrio;
3. Para preparar o cido roslico a 1% dissolver 1
grama do cido em 100 ml de NaOH 0,2 N;
4. Para preparar o NaOH 0,2 N diluir 20 ml da
soluo 1N para 100 ml de gua destilada;
5. O cido roslico dura 2 semanas ou menos, quando
guardado na geladeira (2 a 10C). Descarte-o quando
a colorao mudar de vermelho-escuro para marrom;
6. Em substituio ao Caldo M FC poder ser
utilizado o meio slido (gar M FC).
Execuo do ensaio
a) com a pina, colocar cuidadosamente na placa de Petri
um carto absorvente;
b) com pipeta esterilizada colocar 2,0 ml do meio de
cultura no carto absorvente e tampar a placa;
30
c) colocar a membrana filtrante no porta-filtro, com a

pina previamente flambada e fria;
d) agitar o frasco contendo a amostra, pelo menos 25
vezes;
e) destampar e flambar a boca do frasco;
f)
verter, cuidadosamente, 100 ml de amostra no porta

filtro, evitando que a gua respingue sobre as bordas
superiores;
g) ligar a bomba de vcuo (seringa) e fazer a suco;

h) aps filtrada a amostra, lavar 3 vezes as paredes do
funil com gua de diluio estril com pores de
20 ml aplicando vcuo;
i)
Aps a lavagem e filtrao, aliviar o vcuo e remover

o funil do suporte;
j)
com a pina flambada e fria, remover o filtro do

suporte e coloc-lo dentro, da placa de Petri, com o
lado quadriculado para cima;
k) tampar a placa de Petri e incub-la invertida a 44,5

0,2 C durante 24 2 horas;
l)
aps o perodo de incubao, examinar o filtro fazendo

a contagem das colnias;
m) as colnias indicativas de Coliformes termotolerantes

aparecem de cor azul. As no coliformes, aparecem
com colorao clara ou rsea.
Esterilizao do conjunto de filtrao no campo

a) umedecer cuidadosamente o anel de asbesto situado
na base do suporte, com meia tampa de lcool metlico
(tampa do frasco de lcool);
b) atear fogo;
31
c) colocar a cuba de ao por cima do funil quase o

tampando;
d) aps aquecer a cuba at o suportvel pela mo, tampar
o suporte;
e) esperar 15 minutos, aproximadamente e ento remover
a cuba e lavar o funil com gua de diluio estril a fim
de remover qualquer resduo txico.
Observaes: a. A combusto incompleta do metanol provoca
a formao de aldedo frmico que o agente
esterilizante;
b. O suporte do filtro deve estar estril no incio de
cada srie de filtrao e essa srie no deve ultrapassar
mais de 30 amostras. A cada srie de filtrao efetuar
o exame de 100 ml da gua de diluio para controle
da esterilidade do porta-filtro;
c. Os meios de cultura preparados para uso com
membrana filtrante valem por 96 horas quando
guardados em
refrigerador com temperatura
entre 2 a 10 C;
d. O conjunto de filtrao tambm pode ser
esterilizado em autoclave.
Colimetria total e Escherichia coli

Teste de presena/ausncia
Mtodo do substrato cromognico
Material necessrio:
a) recipiente de coleta de vidro ou de plstico;
b) substrato Cromognico;
c) estufa bacteriolgica;
d) lmpada ultravioleta de 365 nm.
32
Execuo do ensaio
a) coletar a amostra em um frasco estril ou saco de
coleta contendo tiossulfato de sdio a 10% para gua
tratada;
b) no prprio frasco ou saco adicionar o contedo de 1
(um) frasconete contendo o substrato cromognico;
c) fechar o frasco ou o saco e agitar levemente, no
precisa dissolver totalmente, essa dissoluo ocorrer
normalmente;
d) incubar a 35,0 0,5 C durante 24 horas.
Interpretao e expresso dos resultados

Decorridos 24 horas de incubao, retirar da estufa o
material: ao observar a cor amarela, o resultado presena
de Coliformes Totais na amostra.
Com o auxlio de uma lmpada ultravioleta 365 nm, observar
se existe fluorescncia azul no frasco amarelo aproximando
a lmpada do frasco. Caso isso acontea, significa que h
presena de Escherichia coli na amostra examinada.
Caso a amostra permanea transparente, o resultado
negativo, tanto para Coliformes Totais como para E. coli.
Expressar o resultado como: Presena ou Ausncia de
Coliformes Totais ou Escherichia coli.
Nota: A fluorescncia azul ocorre somente na presena da luz
ultravioleta, ao tirar o frasco da frente da luz ele volta a
ficar amarelo.
33
Esterilizao
Os seguintes materiais devem ser esterilizados: frascos de
coleta de amostra, pipetas, placas de Petri de vidro, frascos
e tubos com gua de diluio e meios de cultura.
Procedimentos para a esterilizao

a) preparar todo o material;
b) verificar o nvel da gua dentro da autoclave est acima
das resistncias. Completar se necessrio;
c) colocar todo o material dentro do depsito metlico e
tampar a autoclave;
d) apertar as travas da tampa duas a duas para no permitir
sada de vapor pela borda do aparelho. Ligar o aparelho
na tomada;
e) ligar a chave seletora de temperatura na posio
Mximo;
f) abrir imediatamente a vlvula de escape de vapor;
g) quando comear sair vapor por esta vlvula, esperar trs
minutos e fech-la;
h) neste instante, o ponteiro do manmetro comear a
subir;
i) quando o ponteiro atingir a marca de 1Kg/cm de presso,
a temperatura dever estar em 121C. Deixar nesta
posio durante 15 minutos;
j) se a presso continuar subindo, coloque a chave seletora
de temperatura da autoclave, na posio "mdia e fique
observando;
k) depois de 15 minutos, o material j estar esterilizado;
34
Observao:
Normalmente as autoclaves possuem uma chave

seletora de temperatura que indica trs posies
Mnima, Mdia e Mxima, justamente para manter
a presso e temperatura dentro da faixa utilizada.
Serve, tambm, para ligar e desligar o aparelho.
l) desligar o aparelho e esperar que o ponteiro do manmetro

atinja a posio 0. Este procedimento poder ser
acelerado abrindo-se lentamente a vlvula de escape de
vapor;
Ateno: No abrir esta vlvula de uma vez!
m) quando o ponteiro do manmetro atingir a posio zero
e no estiver mais saindo vapor pela vlvula, abrir a tampa
do aparelho e retirar o material.
Nota: Existem vrios modelos de autoclaves no mercado.
importante seguir sempre as instrues do fabricante.
35
Anlises fsico-qumica da gua

Titulomtricas
Colorimtricas
Alcalinidade total
A alcalinidade total de uma gua dada pelo somatrio
das diferentes formas de alcalinidade existentes, ou seja,
a concentrao de hidrxidos, carbonatos e bicarbonatos,
expressa em termos de Carbonato de Clcio. Pode-se dizer
que a alcalinidade mede a capacidade da gua em neutralizar
os cidos.
A medida da alcalinidade de fundamental importncia
durante o processo de tratamento de gua, pois, em
funo do seu teor que se estabelece a dosagem dos produtos
qumicos utilizados.
Normalmente as guas superficiais possuem alcalinidade
natural em concentrao suficiente para reagir com o
sulfato de alumnio nos processos de tratamento. Quando a
alcalinidade muito baixa ou inexistente h a necessidade
de se provocar uma alcalinidade artificial com aplicao
de substncias alcalinas tal como cal hidratada ou Barrilha
(carbonato de sdio) para que o objetivo seja alcanado.
Quando a alcalinidade muito elevada, procede-se ao
contrrio, acidificando-se a gua at que se obtenha um
teor de alcalinidade suficiente para reagir com o sulfato
de alumnio ou outro produto utilizado no tratamento da
gua.
Mtodo de determinao
Titulao com cido Sulfrico
Material necessrio:
a) pipeta volumtrica de 50 ml;
b) frasco Erlenmeyer de 250 ml;
38
c) bureta de 50 ml;
d) fenolftalena;
e) indicador metilorange;
f)
mistura Indicadora de Verde de Bromocresol/Vermelho

de Metila;
g) soluo de cido Sulfrico 0,02 N;

h) soluo de Tiossulfato de Sdio 0,1 N.
Tcnica
a) tomar 50 ml da amostra e colocar no Erlenmeyer;
b) adicionar 3 gotas da soluo indicadora de verde de
bromocresol/vermelho de metila;
c) titular com a Soluo de cido Sulfrico 0,02 N at a
mudana da cor azul-esverdeada para rseo;
d) anotar o volume total de H2SO4 gasto (V) em ml.
Clculo
Alcalinidade total em mg/l de CaCO3 = V x 20
Notas: 1. Usar 0,05 ml (1 gota) da soluo de Tiossulfato
de Sdio 0,1 N, caso a amostra apresente cloro

residual livre;
2. Utilizar esta tcnica na ausncia de alcalinidade
fenolftaleina;
3. Caso haja alcalinidade Fenolftaleina, adicionar,
antes da mistura indicadora de verde de bromocresol/
vermelho de metila 3 gotas de Fenolftaleina e titule
com H2SO4 0,02N at desaparecer a cor rsea
39
formada. Em seguida continuar no passo b da

tcnica;
4. A alcalinidade Fenolftalena s poder ocorrer
se o pH da amostra for maior que 8,2;
5. Na impossibilidade de conseguir a mistura
indicadora de verde de bromocresol/vermelho de
metila, usar o indicador de metilorange. Nesse caso
o ponto de viragem no passo 3 da tcnica ser de
amarelo para alaranjado;
6. O ponto de viragem quando se usa o indicador
verde de bromocresol/vermelho de metila mais
ntido do que quando se usa metilorange;
7. A frmula acima para ser utilizada quando se
usa uma amostra de 50 ml. Quando for usado 100 ml
de amostra, o volume (V) passar a ser multiplicado
por 10;
8. Fc Fator de correo da soluo titulante.
40
Fluxograma da anlise
Gs carbnico livre
O gs carbnico livre existente em guas superficiais
normalmente est em concentrao menor do que 10 mg/L,
enquanto que em guas subterrneas pode existir em maior
concentrao.
O gs carbnico contido na gua pode contribuir
significativamente para a corroso das estruturas metlicas
e de materiais base de cimento (tubos de fibro-cimento)
de um sistema de abastecimento de gua e por essa razo o
seu teor deve ser conhecido e controlado.
41
Mtodo de determinao
Titulao com Hidrxido de Sdio
Material necessrio:
a) bureta de 50 ml;
c) pipeta volumtrica de 100 ml;
d) rolha de borracha;
e) hidrxido de Sdio 0,02N;
f)
fenolftaleina.
Tcnica
a) tomar 100 ml de amostra (sem agitar) em um
Erlenmeyer;
b) adicionar 10 gotas de fenolftaleina, se colorir, no
contm CO2, se no colorir, prosseguir;
c) titular com a soluo de Hidrxido de Sdio (NaOH)
0,02 N gota a gota at o aparecimento de leve colorao
rsea persistente por pelo menos 30 segundos;
d) anotar o volume (ml) de NaOH gasto ( V ).
Clculo
V x 10 x Fc = mg/L de CO2 livre
Onde:
Fc = fator de correo.
42
Para calcular o CO2 total aplicar a seguinte frmula:

mg/LCO2 total =A + 0,44(2B + C)
Onde:
A = mg/l CO2 livre
B = Alcalinidade devida a bicarbonato
C = Alcalinidade devida a carbonato.
Fluxograma da anlise de CO2
43
Cloretos
Geralmente os cloretos esto presentes em guas brutas e
tratadas em concentraes que podem variar de pequenos
traos at centenas de mg/l. Esto presentes na forma de
cloretos de sdio, clcio e magnsio. A gua do mar possui
concentrao elevada de cloretos que est em torno de
26.000 mg/l. Concentraes altas de cloretos podem
restringir o uso da gua em razo do sabor que eles
conferem e pelo efeito laxativo que eles podem provocar.
A portaria n 518/2004 do Ministrio da Sade estabelece
o teor de 250 mg/l como o valor mximo permitido para
gua potvel. Os mtodos convencionais de tratamento de
gua no removem cloretos. A sua remoo pode ser feita
por desmineralizao (deionizao) ou evaporao.
Mtodo de determinao:
Titulao com nitrato de prata.
Material necessrio:
a) bureta de 50 ml;
b) becker de 250 ml;
c) frasco Erlenmeyer de 250 ml;
d) medidor de pH;
e) proveta de 100 ml;
f)
soluo Padro de Nitrato de Prata 0,0141N;
g) soluo Indicadora de Cromato de Potssio K2CrO4;

h) hidrxido de Sdio 1N;
i)
cido Sulfrico 1N;
j)
cloreto de Sdio 0,0141 N.

44
Tcnica
a) colocar 100 ml de amostra no Erlenmeyer;
b) ajustar o pH entre 7 e 10, se necessrio, com NaOH
ou H2SO4;
c) adicionar 1 ml da soluo indicadora de K2CrO4;
d) titular com a Soluo Padro de Nitrato de Prata
0,0141 N at a viragem para amarelo avermelhado
que o ponto final da titulao;
e) fazer um branco da mesma maneira que a amostra.
Clculo
mg/l Cl = (A - B) x N x 35.450
ml da amostra
Onde:
A = ml do titulante gasto na amostra;
B = ml do titulante gasto no branco;
N = Normalidade do titulante;
45
Fluxograma da anlise de cloretos
Dureza total
A dureza total calculada como sendo a soma das
concentraes de ons clcio e magnsio na gua, expressos
como carbonato de clcio.
A dureza de uma gua pode ser temporria ou
permanente.
A dureza temporria, tambm chamada de dureza de
carbonatos, causada pela presena de bicarbonatos de
clcio e magnsio. Esse tipo de dureza resiste ao dos
sabes e provoca incrustaes. denominada de temporria
porque os bicarbonatos, pela ao do calor, se decompem
em gs carbnico, gua e carbonatos insolveis que se
precipitam.
46
A dureza permanente, tambm chamada de dureza de no

carbonatos, devida presena de sulfatos, cloretos e nitratos
de clcio e magnsio, resiste tambm ao dos sabes, mas
no produz incrustaes por serem seus sais muito solveis
na gua. No se decompe pela ao do calor.
A portaria n 518/2004 do Ministrio da Sade estabelece
para dureza o teor de 500 mg/L em termos de CaCO3 como
o valor mximo permitido para gua potvel.
Mtodo de determinao
Titulao com EDTA
Material necessrio:
a) bureta de 50 ml;
b) pipeta volumtrica de 25 ml;
c) balo volumtrico de 50 ml;
d) beaker de 100 ml;
e) frasco erlenmeyer de 250 ml;
f)
soluo padro de EDTA 0,01 M;
g) soluo tampo;
h) indicador eriochrome Black T;
i)
inibidor I - cianeto de sdio P.A em p;
j)
inibidor II - sulfeto de sdio.
Tcnica
a) tomar 25 ml da amostra e diluir para 50 ml com gua
destilada em balo volumtrico;
47
b) transferir para um becker de 100 mL e adicionar 1 a 2

ml da soluo tampo para elevar o pH a 10 0,1;
c) transferir para um frasco Erlenmeyer de 250 ml e
adicionar aproximadamente 0,05 gramas do Indicador
Eriochrome Black T;
d) titular com EDTA 0,01M agitando continuamente at
o desaparecimento da cor prpura avermelhada e o
aparecimento da cor azul (final da titulao);
e) anotar o volume de EDTA gasto (ml);
f)
fazer um branco com gua destilada;
g) subtrair o volume de EDTA gasto na titulao do branco

do volume de EDTA gasto na titulao da amostra. A
diferena o volume que ser aplicado no clculo
abaixo.
Clculo
ml de EDTA x 1000 x Fc
Dureza Total em mg/lCaCO3 =
ml de amostra
Notas: 1. A ausncia de um ponto de viragem definido,
geralmente, indica a necessidade de adio de um

inibidor ou que o indicador est deteriorado;
2. No leve mais do que 5 minutos para a titulao,
medido aps a adio da soluo tampo;
3. Caso a dureza da gua seja muito baixa, use amostra
maior, 50 a 250 ml adicionando proporcionalmente
maior quantidade de soluo tampo, do inibidor e
indicador;
4. Se precisar usar o inibidor adicionar 20 gotas do
inibidor II;
5. Fc = Fator de correo do EDTA quando houver e
for diferente de 1.
48
Fluxograma da anlise
pH
O termo pH representa a concentrao de ons hidrognio
em uma soluo. Na gua, este fator de excepcional
importncia, principalmente nos processos de tratamento.
Na rotina dos laboratrios das estaes de tratamento ele
medido e ajustado sempre que necessrio para melhorar
o processo de coagulao/floculao da gua e tambm o
controle da desinfeco. O valor do pH varia de 0 a 14.
Abaixo de 7 a gua considerada cida e acima de 7,
alcalina. gua com pH 7 neutra.
A Portaria n 518/2004 do Ministrio da Sade recomenda
que o pH da gua seja mantido na faixa de 6,0 a 9,5 no
sistema de distribuio.
Existem no mercado vrios aparelhos para determinao do
pH. So denominados de potencimetros ou colormetros.
Neste manual, descreve-se o funcionamento bsico de um
49
potencimetro, embora as instrues dos fabricantes devam

ser seguidas.
Material necessrio:
a) potencimetro;
b) cubetas;
c) frasco lavador;
d) papel absorvente;
e) solues tampo de pH conhecido;
Tcnica
a) ligar o aparelho e esperar a sua estabilizao;
b) lavar os eletrodos com gua destilada e enxug-los com
papel absorvente;
c) calibrar o aparelho com as solues padro (pH 4 - 7
ou 9);
d) lavar novamente os eletrodos com gua destilada e
enxug-los;
e) introduzir os eletrodos na amostra a ser examinada e
fazer a leitura;
f)
lavar novamente e deix-los imersos em gua

destilada;
g) desligar o aparelho.
50
Fluxograma do teste
Anlises colorimtricas
Cloro residual livre
O cloro um produto qumico utilizado na desinfeco
da gua. Sua medida importante e serve para controlar a
dosagem que est sendo aplicada e tambm para acompanhar
sua evoluo durante o tratamento.
A portaria n 518/2004 do Ministrio da Sade determina a
obrigatoriedade de se manter em qualquer ponto na rede de
distribuio a concentrao mnima de cloro residual livre
de 0,2 mg/l. Recomenda, ainda, que o teor mximo seja de
2,0 mg/l de cloro residual livre em qualquer ponto do sistema
de abastecimento.
Os principais produtos utilizados so: hipoclorito de clcio,
cal clorada, hipoclorito de sdio e cloro gasoso.
51
Mtodo de determinao
Comparao visual
Material necessrio:
a) comparador colorimtrico;
b) cubetas de vidro ou de acrlico;
c) DPD para cloro livre em cpsula;
Tcnica
a) Encher a cubeta com gua da amostra at a marca de
5,0 ml;
b) Coloc-la na abertura do lado esquerdo do aparelho;
c) Encher outra cubeta at a marca de 5,0 ml com a
amostra a ser testada;
d) Adicionar uma cpsula do reagente DPD na segunda
amostra e misturar;
e) Colocar a cubeta no compartimento no aparelho;
f)
Antes de 1 minuto fazer a leitura do teor de cloro.
Nota: Quando fizer a leitura posicionar o comparador
(equipamento) contra uma fonte de luz como, por

exemplo, uma janela, o cu ou uma lmpada.
Rotacione o disco at que se obtenha a mesma
tonalidade nos dois tubos.
Resultado
O resultado expresso em mg/l de Cloro Residual Livre.
52
Observao: Existem no mercado vrios tipos de comparadores

colorimtricos para medir o cloro residual, tanto
com o uso de ortotolidina quanto o DPD. O uso
da ortotolidina est sendo evitado por tratar-se de
substncia cancergena e no recomendado pelo
Standard Methods.
Cor
A cor da gua proveniente da matria orgnica como,
por exemplo, substncias hmicas, taninos e tambm por
metais como o ferro e o mangans e resduos industriais
fortemente coloridos. A cor, em sistemas pblicos de
abastecimento de gua, esteticamente indesejvel. A sua
medida de fundamental importncia, visto que, gua de
cor elevada provoca a sua rejeio por parte do consumidor
e o leva a procurar outras fontes de suprimento muitas vezes
inseguras.
A Portaria n 518/2004 do Ministrio da Sade estabelece
para cor aparente o Valor Mximo Permitido de 15 (quinze)
uH como padro de aceitao para consumo humano.
Mtodo de determinao
Comparao visual
Material necessrio:
a) tubos de Nessler forma alta de 50 ml;
b) suporte de madeira;
c) soluo-Padro de Cloroplatinato de Potssio (500
Unidades de Cor);
53
Tcnica
a) preparar Padres de Cor na faixa de 5 a 50 unidades
de cor, medindo 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5; 3,0; 3,5; 4,0;
4,5; 5,0; 6,0 e 7,0 ml da soluo padro (500 Unidades
de Cor) e colocar em tubos de Nessler de 50 ml;
b) diluir com gua destilada at a marca de 50 ml;
c) medir 50 ml da amostra em outro tubo de Nessler e
comparar com os padres.
Resultado
O resultado expresso em Unidades de Cor ou unidade
Hazen (uH).
Notas: 1. A comparao dever ser feita olhando os tubos
verticalmente contra um fundo branco;

2. Proteger os Padres contra evaporao e poeira;
3. Quando a cor da amostra for maior do que 70
unidades, fazer diluio at que se obtenha resultado
dentro da faixa coberta pelos padres. Neste caso,
o resultado deve ser multiplicado pelo fator de
diluio;
4.uH a unidade de escala de Hazen (platinacobalto).
Alumnio
O teste de alumnio indicado para estaes de tratamento
onde o sulfato de alumnio usado como coagulante.
A dosagem incorreta desse coagulante denotada pela
quantidade significativa de alumnio que persiste na gua
tratada.
54
O hidrxido de alumnio Al(OH)3 - formado na reao

anftero. Sua ionizao se processa em pH cido ou bsico,
segundo as equaes:
Em pH cido:
Al(OH)3
[ H +]
Al+++ + nH2O
Em pH bsico:
Al(OH)3
[OH-]
AlO3--- + nH2O
Nas duas formas ele pode se solubilizar e atravessar os

decantadores e filtros. A solubilizao acontece com a
correo do pH.
Quando o pH timo de floculao no est correto, o teor
de alumnio da gua tratada aumenta.
A Portaria n 518/2004 do Ministrio da Sade estabelece
que o padro de aceitao para consumo humano de
0,2 mg/l.
Mtodo de determinao
A determinao do alumnio pode ser feita atravs dos
mtodos de Absoro Atmica, Eriocromo Cianina R
utilizando um fotmetro de filtro ou espectrofotmetro e
tambm pelo mtodo de Comparao Visual, utilizando-se
tubos de Nessler.
Neste manual, descreveremos o mtodo de Comparao
Visual, considerando que a maioria dos laboratrios dos
servios de abastecimento de gua nem sempre possuem
equipamentos como Espectrofotmetro de Absoro Atmica
ou outro.
55
Material necessrio
a) tubo de Nessler forma alta, de 50 ml;
b) pipeta graduada de 1 ml;
c) pipeta graduada de 5 ml;
d) pipeta graduada de 10 ml;
e) suporte para tubos de Nessler.
Reagentes
a) cido sulfrico 0,02N;
b) reagente tampo de acetato de sdio;
c) eriocromo cianina-R - (corante);
d) soluo de trabalho do corante.
Tcnica
a) medir 25 ml de amostra ou uma poro diluda para
25 ml em um frasco Erlenmeyer de 125 ml;
b) adicionar 3 gotas de metilorange e titular com cido
sulfrico (H2SO4) 0,02N at ligeira colorao rosa
plido;
c) anotar o volume gasto de cido e descartar a
amostra;
d) medir novamente 25 ml de amostra ou uma alquota
diluda a 25 ml e transferir para um tubo de Nessler de
50 ml;
e) adicionar amostra o mesmo volume de cido
sulfrico gasto no passo 2, acrescentando 1 ml em
excesso;
f)
adicionar 1,0 ml de cido ascrbico e misturar;

56
g) adicionar 10,0 ml do reagente tampo e misturar;

h) adicionar 5,0 ml da soluo de trabalho do corante e
misturar;
i)
imediatamente, diluir at a marca de 50 ml, com gua

destilada;
j)
misturar e deixar em repouso por 5 a 10 minutos e

comparar a cor desenvolvida pela amostra com os
padres preparados da mesma maneira e na mesma
hora.
Resultado
O resultado expresso em mg/l de alumnio.
Observao: Neste mtodo no necessrio preparar o branco
da amostra e ele tambm no recomendado para
amostras que contm cor e turbidez porque pode
levar a erros considerveis.
Preparo dos Padres

Material necessrio
a) tubo de nessler forma alta, de 50 ml;
b) pipeta graduada de 1 ml;
c) pipeta graduada de 5 ml;
d) pipeta graduada de 10 ml;
e) suporte para tubos de Nessler.
Reagentes:
a) cido sulfrico 0,02N;
b) reagente tampo de acetato de sdio;
57
c) eriocromo cianina-R - (corante);

d) soluo de trabalho do corante;
e) soluo padro de alumnio (1 ml = 5 g Al).
Tcnica
Preparar os padres na faixa de 0 a 0,5 mg/l, pipetando:
0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 e 2,5 ml da soluo padro
(1 ml = 5 g) e diluindo para 25 ml com gua destilada
em tubos de nessler (ver quadro abaixo).
Tratar esses padres do seguinte modo:
a) adicionar 1,0 ml de cido sulfrico 0,02N e misturar;
b) adicionar 1,0 ml de cido ascrbico e misturar;
c) adicionar 10 ml do reagente tampo e misturar;
d) adicionar 5 ml da soluo de trabalho do corante e
misturar;
e) levar o volume para 50 ml com gua destilada e misturar;
f) deixar em repouso por 5 a 10 minutos.
ml da soluo
padro
g Al/ml
Volume de
Amostra
mg/l Al
0,0
0,5
1,0
1,5
2,0
2,5
0,0
2,5
5,0
7,5
10,0
12,5
25
25
25
25
25
25
0,0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
58
Notas: 1. Para o padro 0,0 mg/l, tomar 25 ml de gua
destilada e proceder igual aos outros;

2. Preparar os padres toda vez que for examinar
a amostra;
3. Caso o laboratrio possua espectrofotmetro,
fazer a leitura dos padres a 535 nm e traar a
curva de calibrao em papel semi-logaritmo (% de
transmitncia x concentrao). Nesse caso, no
necessria a preparao de todos os padres quando
examinar a amostra. Fazer apenas um ou dois para
checar a curva de calibrao do aparelho.
Turbidez
A turbidez da gua devida presena de materiais slidos
em suspenso, que reduzem a sua transparncia. Pode ser
provocada tambm pela presena de algas, plncton, matria
orgnica e muitas outras substncias como o zinco, ferro,
mangans e areia, resultantes do processo natural de eroso
ou de despejos domsticos e industriais.
A turbidez tem sua importncia no processo de tratamento
da gua. gua com turbidez elevada e dependendo de
sua natureza, forma flocos pesados que decantam mais
rapidamente do que gua com baixa turbidez. Tambm tem
suas desvantagens como no caso da desinfeco que pode ser
dificultada pela proteo que pode dar aos microorganismos no
contato direto com os desinfetantes. um indicador sanitrio
e padro de aceitao da gua de consumo humano.
A Portaria n 518/2004 do Ministrio da Sade estabelece que
o Valor Mximo Permitido de 1,0 uT para gua subterrnea
desinfectada e gua filtrada aps tratamento completo ou
filtrao direta, e 5,0 uT como padro de aceitao para
consumo humano. Para gua resultante de filtrao lenta o
Valor Mximo Permitido 2,0 uT.
59
Existem equipamentos especficos para determinao da

turbidez na gua.
Neste manual, apresenta-se a tcnica de determinao da
turbidez utilizando a metodologia nefelometrica.
Mtodo Nefelomtrico
Material necessrio:
a) turbidmetro com nefelmetro;
b) clulas de amostras de vidro incolor (quartzo),
c) balo volumtrico de 100 ml;
d) pipeta volumtrica de 5 ml;
e) conjunto de filtrao;
f)
filtros de membrana de 0,2 m.
Reagentes:
a) gua isenta de turbidez:
-
passar gua destilada atravs de um filtro de membrana

de 0,02 m de porosidade. Enxaguar o frasco de coleta
pelo menos duas vezes com gua filtrada e desprezar
os primeiros 200 ml;
b) Suspenso estoque de turbidez padro primrio.

Soluo I
-
Dissolver 1,0 g de Sulfato de Hidrazina (NH2).H2SO4

em gua destilada e diluir a 100 ml em balo
volumtrico;
60
Advertncia: Sulfato de Hidrazina carcinognico.

Evitar inalao, ingesto e contato com a pele.
Soluo II
-
Dissolver 10,0 gramas de Hexametilenotetramina

(CH2)6N4 em gua destilada e diluir a 100 mL em balo
volumtrico;
Mistura 5,0 ml da soluo I e 5,0 ml da soluo II.

Deixar em repouso por 24 horas a 25 3 C. A turbidez
desta suspenso de 4000 UTN. Transferir a soluo
estoque para um frasco de cor mbar ou outro frasco
protegido da luz ultravioleta, para armazenagem.
Fazer diluio desta suspenso estoque. A suspenso
estoque estvel por um ano quando corretamente
armazenada;
c) Suspenso padro de turbidez:

-
Diluir 1, 0 ml da soluo estoque para 100 ml com

gua isenta de turbidez. A turbidez desta suspenso
de 40 UTN. Preparar diariamente
d) Padres de turbidez diludos:

-
Diluir pores da suspenso padro de turbidez com

gua livre de turbidez de acordo com a faixa de interesse. Preparar diariamente.
Procedimento:
a) Calibrar o turbidmetro de acordo com as instrues
do fabricante;
b) Medida de turbidez menor que 40 UTN: Agitar a
amostra suavemente e esperar at que as bolhas de
ar desapaream e coloc-la na clula de amostra do
61
turbidmetro; Fazer a leitura da turbidez diretamente

na escala do instrumento ou na curva de calibrao
apropriada
c) Medida de turbidez acima de 40 UTN: Diluir a amostra
com um ou mais volumes de gua isenta de turbidez
at que a turbidez da amostra diluda fique entre 30 e
40 NTU. Fazer a leitura e multiplicar o resultado pelo
fator de diluio.
Clculo
A x (B+ C)
UTN = _______________
C
Onde:
UTN = Unidade de Turbidez Nefelomtrica;
A = Turbidez da amostra diluda;
B = Volume da diluio (ml);
C = Volume da amostra tomado para a diluio.
Exemplo: Uma poro de 10 ml da amostra foi diluda para 50 ml
com gua isenta de turbidez. Feita a leitura dessa amostra
diluda obteve-se 20 UTN, ento o resultado ser :
20 x (40 + 10)
UTN =
______________________
10
62
UTN = 100
Temperatura
A temperatura est relacionada com o aumento do
consumo de gua, com a fluoretao, com a solubilidade
e ionizao das substncias coagulantes, com a mudana
do pH, com a desinfeco, etc.
Procedimento para determinao na gua.
Material necessrio:
a) termmetro;
b) becker de 250 ml.
Tcnica
a) coletar um pouco de gua em um becker de 250 ml;
b) mergulhar o termmetro na gua;
c) esperar at que o material dilatante (mercrio) se
estabilize;
d) fazer a leitura com o bulbo do termmetro ainda dentro
da gua.
Fluoretos
A aplicao de flor na gua para consumo humano tem a
finalidade de prevenir a crie dental. Hoje, esse procedimento
considerado um processo normal de tratamento de gua e
o teor timo de flor parte essencial de sua qualidade.
Em razo disso e outros fatores, que o seu controle se faz
necessrio na estao de tratamento de gua.
Existem vrios mtodos para determinao de flor na
gua. Os trs mais conhecidos so: O mtodo Spadns, o
63
Scott-Sanchis e o mtodo do eletrodo especfico para ons

fluoretos.
Neste manual, descreve-se apenas o mtodo Scott-Sanchis,
que embora no seja o que d maior grau de exatido, atende
s expectativas e o de custo mais barato. um mtodo de
comparao visual de cor feito em tubos de Nessler.
Procedimentos para anlise de fluoretos

Mtodo Scott-Sanchis
Material necessrio
a) tubo de Nessler de 100 ml;
b) suporte para tubo de Nessler;
c) termmetro;
d) pipeta volumtrica de 5 ml;
e) pipeta graduada de 10 ml.
Reagentes:
a) soluo padro de fluoretos (1ml = 10 gF-);
b) reagente Scott-Sanchis;
c) arsenito de sdio (0,5%).
Preparo dos padres e da amostra:
a) tomar 7 tubos de Nessler de 100 ml;
b) encher o 1 tubo com gua destilada (branco);
c) pipetar no 2 tubo 2 ml da soluo padro,
d) pipetar no 3 tubo 4 ml da soluo padro,
64
e) pipetar no 4 tubo 6 ml da soluo padro,

f)
pipetar no 5 tubo 8 ml da soluo padro,
g) pipetar no 6 tubo 10 ml da soluo padro,

h) encher o 7 tubo com 100 ml de amostra ou uma
alquota diluda a 100 ml. Caso haja cloro na amostra,
remov-lo pela adio de 0,1ml (2 gotas) da soluo
de arsenito de sdio para cada mg/l de cloro;
i)
diluir os padres de 2 a 6 a 100 ml com gua

destilada;
j)
ajustar a temperatura dos padres e da amostra;
k) adicionar a cada tubo, inclusive no branco (1 tubo) 5

ml do reagente Scott-Sanchis;
l)
misturar e deixar em repouso por uma hora;
m) decorrido uma hora da adio do reagente ScottSanchis, comparar a amostra com os padres e
expressar o resultado em mg/l F-.
Exemplo: Se a colorao desenvolvida pela amostra for
semelhante ao padro do tubo n 5 essa amostra ter
0,8 mg/l de on fluoreto. Caso a amostra desenvolva
uma colorao que se situe entre dois padres poder
ser feita a interpolao dos resultados. Ex.: leitura entre
0,6 e 0,8 expressar como 0,7 mg/l.
65
Fluxograma do teste
Depois de medir os padres,
completar para 100 ml com gua
destilada.
Adicionar em cada tubo 5 ml

do Reagente Scott-Sanchis
Esperar 1 hora para

fazer a leitura
Notas: 1. A concentrao dos padres preparados (tubos de 2 a

6) correspondem a 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 mg/l de
on fluoreto, respectivamente;
2. Podero ser analisadas vrias amostras simultaneamente com os padres;

3. Caso haja interferentes nas amostras em concentraes que possam alterar os resultados, essas
amostras devero ser destiladas;
66
Tabela de interferentes
Substncias
interferentes
Alcalinidade (CaCO3)
Alumnio (AL+++)
Cloreto (Cl-)
Ferro (Fe+++)
Hexametafosfato (NaPO3)6
Fosfato (PO4---)
Sulfato (SO4--)
Mtodo
Scott-Sanchis
Tipo de erro
400 mg/l
0,25 mg/l
2000 mg/l
2,0 mg/l
1,0 mg/l
5,0 mg/l
300 mg/l
+
+
+
+
Fonte: Adaptado de Mayer, 1971
Procedimentos para destilao:

Equipamento para destilao
67
Fazer primeiro uma destilao preliminar para remover

qualquer contaminao de fluoreto e ajustar a reao
cido/gua para as destilaes subseqentes, do seguinte
modo:
a) colocar 400 ml de gua destilada no balo de
destilao;
b) adicionar lentamente e com agitao 200 ml de cido
sulfrico concentrado (H2SO4);
c) adicionar algumas prolas de vidro;
d) conectar o balo ao condensador e comear a
destilao;
e) quando a temperatura atingir 180 C, parar a destilao
e eliminar o destilado. O conjunto est pronto para a
destilao da amostra.
Destilao da amostra
Adicionar mistura de cido que sobrou da destilao
preliminar 300 ml de amostra, misturar cuidadosamente e
destilar como anteriormente, at que a temperatura atinja
180 C. Nesse momento o destilado ser igual a 300 ml.
Notas: 1. No deixar que a temperatura ultrapasse 180 C, assim
se evita que haja arraste de sulfato para o destilado.
2. Quando amostras de alto contedo de cloretos so
analisadas, adicionar ao balo de destilao 5 mg de
sulfato de prata para cada mg de cloreto presente na
amostra.
3. Usar a soluo de cido sulfrico vrias vezes at que
os contaminantes das amostras de gua acumulados no
frasco de destilao, comecem a interferir no destilado.
Quando isso acontecer, o melhor desprezar o cido e
comear tudo novamente.
68
Importante:
A dosagem de flor na gua para consumo humano
estabelecida em funo da mdia das temperaturas mximas
dirias da localidade observadas durante um determinado
perodo. A Portaria n 518/2004 do Ministrio da Sade
estabelece como Valor Mximo Permitido 1,5 mg/l de on
fluoreto.
Coleta e preservao de amostras para anlise

fsico-qumicas deste manual
Volume
Mnimo (ml)
Preservao
Tempo
Mximo
Vidro ou
polietileno
200
Refrigerar
24h/14d
CO2
100
Anlise
imediata
Dureza
100
HNO3 pH < 2
6 meses
Cloretos
100
No requer
7 dias
Alumnio
HNO3 pH < 2
6 meses
Fluoretos
Polietileno
300
No requer
28 dias
Anlise
imediata
Turbidez
Vidro ou
polietileno
200
Proteger da luz
24h
Cloro
Residual
Vidro ou
polietileno
500
Anlise
imediata
30min/2h
pH
200
Cor
500
Anlise
imediata
Refrigerar
Parmetros
Recipientes
Alcalinidade
Temperatura
24h
Fonte: Adaptado de APHA, 1985

69
Notas: 1. Os volumes aqui descritos so estimados. Na prtica,

deve-se coletar o volume necessrio para realizao das
anlises, at porque existem repeties de anlises muitas
vezes necessrias.
2. Quando preservar com cido ntrico, usar 2 ml do cido
para cada litro de amostra.
3. Normalmente, nas ETAs, as anlises devem ser efetuadas
imediatamente aps a coleta. No de boa prtica deixar
as amostras por muito tempo para serem analisadas.
Ensaio de coagulao (Jar-test )

O ensaio de coagulao um procedimento de rotina em
estaes de tratamento de gua para determinar a dosagem
dos produtos qumicos utilizados no tratamento.
Podemos dizer, que uma simulao do que ocorre na
ETA.
Para realizar este ensaio, necessrio que se conhea
previamente as seguintes caractersticas da gua bruta: cor,
turbidez, alcalinidade, pH e temperatura; alm de parmetros
hidrulicos da estao de tratamento, tais como: vazo, tempo
de deteno no floculador, velocidade de sedimentao no
decantador, etc.
O ensaio de coagulao no uma operao muito simples,
pois devem ser consideradas algumas variveis do processo,
como a cor e turbidez da gua bruta; se a alcalinidade natural
da gua suficiente, se o pH est dentro da faixa tima de
floculao, o tipo de coagulante empregado, etc.
Neste exemplo prtico, vamos apenas considerar os
parmetros: cor, turbidez, pH e alcalinidade total, j que o
objetivo principal do teste a remoo da cor e turbidez da
gua, aplicando-se uma menor quantidade de coagulante.
O produto qumico utilizado o sulfato de alumnio, sendo
o mais comum.
70
Etapas do teste de coagulao que

devem ser observados
a) fazer anlise da amostra bruta cor, pH, turbidez e
alcalinidade total, temperatura;
b) descobrir o pH timo de floculao;
c) verificar a menor dosagem do coagulante no pH timo;
d) observar a velocidade de sedimentao dos flocos;
e) analisar o sobrenadante, verificando, principalmente, a
remoo de cor e turbidez.
Material necessrio:
a) aparelho de Jar-test conforme o da figura;
b) becker forma baixa de 1000 ml;
c) soluo de sulfato de alumnio a 1%;
d) soluo de cal a 0,5%;
e) Pipetas graduadas de 5 e 10 ml.
Fonte: Adaptado de Cetesb, 1973

71
Procedimento 1
Considerando que a gua bruta tenha alcalinidade natural
suficiente e tenha, tambm, um pH timo de floculao).
a) colocar 6 beckers de 1 litro na plataforma do aparelho
de Jar-Test;
b) ench-los com gua bruta at a marca de 1000 ml;
c) ligar o aparelho na velocidade mxima 100 r.p.m;
d) adicionar simultaneamente nos beckers a quantidade de
coagulante (sulfato de alumnio) que foi calculada para
cada becker;
e) deixar agitar nessa velocidade por 2 a 3 minutos (tempo
de deteno na cmara de mistura rpida);
f) reduzir a velocidade de agitao para 50 r.p.m durante
10 a 30 minutos (tempo de deteno nos floculadores);
g) deixar as amostras decantar por algum tempo(esse tempo
seria o correspondente velocidade de sedimentao
no decantador 10 a 30 minutos);
h) coletar o sobrenadante de todos os beckers e analisar
os parmetros necessrios para verificar qual deles
apresentou melhor resultado;
i) normalmente o melhor resultado aquele que apresentou
maior reduo de cor e turbidez e essa dosagem dever
ser a escolhida.
Procedimento 2
Quando a gua no tem alcalinidade natural suficiente e
desconhece-se o pH timo de floculao.
a) colocar 6 beckers de 1 litro na plataforma do aparelho
de Jar-Test;
72
b) ench-los com gua bruta at a marca de 1000 ml;

c) ligar o aparelho na velocidade mxima 100 r.p.m;
d) estabelecer diferentes pH nos beckers usando lcali (cal
hidratada);
e) aplicar uma quantidade fixa de sulfato de alumnio em
todos os beckers e proceder de acordo com os passos (e)
e (i) do procedimento 1;
f) medir o pH do frasco que apresentou melhor resultado;
g) executar novo ensaio, fixando em todos os beckers o pH
timo encontrado no item anterior;
h) adicionar sulfato de alumnio em cada becker, variando
a concentrao em valores prximos (menor e maior) da
dosagem utilizada na letra c;
i) proceder de acordo com os passos de (e) e (i) do
procedimento 1.
Notas: 1. dependendo das alteraes que a gua bruta
possa sofrer, conseqncia de enchentes, estiagens,

alteraes climticas, etc., recomendado sempre
fazer novos testes para ajustar as dosagens dos
coagulantes.
2. Quando a gua bruta no tiver alcalinidade natural

suficiente para reagir com o sulfato de alumnio, usar cal
hidratada ou outro lcali para promover uma alcalinidade
artificial.
3. Quando a gua bruta no tiver um pH timo de
floculao, criar essa condio, utilizando cidos ou bases
(lcalis).
4. O lcali mais usado a cal hidratada.
5. Normalmente se usa sulfato de alumnio a 1% e cal
a 0,5% para fazer os ensaios, pois facilita a medio de
volumes utilizados no processo.
73
6. Para dosagens de sulfato de alumnio de 10 15 20

25 30 e 35 mg/L de uma soluo a 1% so necessrios
os seguintes volumes: 1,0 ml, 1,5 ml, 2,0 mL, 2,5 ml, 3,0
ml e 3,5 ml, respectivamente. Para dosagem de cal, usa-se
metade desses volumes em ml.
7. Consultar a tabela abaixo para estabelecer a quantidade
de cal necessria em funo do consumo de sulfato de
alumnio.
Consumo de
sulfato de alumnio
mg/l. (Al2(SO4)3
Alcalinidade
teoricamente
necessria
mg/l (CaCO3)
Alcalinidade
natural
desejada
mg/l (CaCO3)
Quantidade
terica de
cal
mg/l *
Quantidade
de cal
desejvel
mg/l *
10
15
20
25
30
40
50
5
7
9
12
14
18
25
7
10
14
17
20
27
34
3
4
5
7
8
10
13
4
6
8
10
12
15
19
Fonte: Tcnicas de Abastecimento e Tratamento de gua - vol. II

Cetesb SP
* se no houver alcalinidade natural.
Teoricamente, cada mg/l de sulfato de alumnio requer:

O,45 mg/l de alcalinidade natural;
0,25 mg/l de cal (CaO);
0,33 mg/l de cal como Ca(OH)2;
0,48 mg/l de carbonato de sdio Na2CO3 (barrilha).
Correo do pH da gua tratada

A correo do pH da gua tratada um procedimento
utilizado nas ETAs com a finalidade de prevenir o processo de
corroso das estruturas metlicas do sistema de distribuio
que provocado pela acidez da gua, conseqncia da
presena de gs carbnico dissolvido.
74
As guas superficiais possuem gs carbnico dissolvido.

Esse gs carbnico pode ser proveniente da atmosfera, da
respirao dos seres aquticos e at da reao do sulfato de
alumnio quando este reage com a alcalinidade natural da
gua.
A correo do pH significa elevar o pH da gua tratada at
o pH de saturao que o ponto onde no acontece mais o
processo de corroso. Esse pH no igual para todas as guas
e sua determinao pode ser feita no laboratrio.
Mtodo de determinao
Ensaio do mrmore
Material necessrio:
a) balo volumtrico de 1000 mL;
b) medidor de pH;
c) balana;
Reagente
Carbonato de clcio
Tcnica
a) colocar 750 ml de gua filtrada em um balo
volumtrico de 1000 ml;
b) determinar o pH e a alcalinidade (I) dessa gua;
c) adicionar 10 gramas de Carbonato de clcio ao
balo;
d) agitar por hora e deixar decantar e filtrar;
75
d) determinar o pH;
e) agitar novamente o balo por mais hora;
f)
deixar decantar e filtrar;
g) determinar novamente o pH.

Repetir a operao iniciada no item 6 at pH constante.
O pH de saturao ser o pH constante encontrado.
Determinar na ltima operao a alcalinidade (II).
Concluso
Se a alcalinidade II > alcalinidade I gua corrosiva
Se a alcalinidade II=alcalinidade I gua no corrosiva
Se a alcalinidade II < alcalinidade I gua incrustante
Determinao do teor de cloro ativo em

uma soluo de cloro (hipoclorito de sdio e
hipoclorito de clcio)
Material necessrio:
a) frasco Erlenmeyer de 250 ou 500 ml;
b) bureta de 50 ml;
c) pipeta volumtrica de 1; 5 e 10 ml;
d) balana de preciso.
Reagentes:
a) tiossulfato de sdio 0,1N (Na2S2O3. 5H2O);
b) iodeto de potssio (KI);
c) cido actico P.A;
76
d) indicador de amido.
Tcnica
a) medir 1,0 ml da soluo;
b) Dissolver em 50 ml de gua destilada;
c) Adicionar 5,0 ml de cido actico concentrado
(glacial);
d) Adicionar 1, 0 g de Iodeto de potssio;
e) Titular com a soluo de tiossulfato de sdio 0,1 N;
f)
Anotar os ml de tiossulfato gastos.
Clculo
(A-B) x N x 35,45
% de cloro =
___________________________
P x 10
onde:
A = ml de tiossulfato gasto na titulao da amostra;
B = ml de tiossulfato gasto no branco;
N = Normalidade do tiossulfato;
P = Peso ou volume do produto.
Observao: Dependendo da concentrao da soluo a ser
analisada usar um peso ou volume que no gaste
mais do que a capacidade da bureta utilizada, de
tiossulfato de sdio 0,1 N.
Fazer um branco com gua destilada.
77
Preparao dos reagentes para anlise do Teor

de Cloro ativo:
Tiossulfato de sdio 0,1 N Dissolver 25 gramas de tiossulfato
de sdio Na2S2O3.5H2O em 1 litro de gua destilada fervida
recentemente. Armazenar durante duas semanas e padronizar
com Dicromato de potssio K2Cr2O7 0,1 N.
Notas: 1. Usar gua destilada fervida na preparao do
tiossulfato
2. Adicionar alguns mililitros de clorofrmio (5 ml) para

minimizar a decomposio bacteriana da soluo de
tiossulfato.
Dicromato de potssio 0,1 N Pesar 4,904 gramas de

dicromato de potssio (K2Cr2O7.) e dissolver em um pouco
de gua destilada e em seguida diluir para 1 litro. Armazenar
em frasco de vidro com tampa de vidro.
Soluo indicadora de amido Pesar 5,0 gramas de amido.
Adicionar um pouco de gua destilada at formar uma
pasta. Em seguida dissolver essa pasta em um litro de gua
destilada fervente. Deixar em repouso durante uma noite.
Usar o lquido sobrenadante preservando-o pela adio de
1,25 gramas de cido saliclico
Padronizao da soluo de tiossulfato

de sdio 0,1N.
Material necessrio:
a) bureta de 50 ml;
c) Pipeta graduada de 1 ml;
78
d) Pipeta volumtrica de 10 ml.

Procedimento:
a) colocar 80 ml de gua destilada no Erlenmeyer;
b) adicionar, com agitao constante, 1 ml de H2SO4
concentrado e 10 ml de dicromato de potssio 0,1 N;
c) adicionar 1,0 grama de Iodeto de potssio;
d) deixar a mistura reagir durante 6 minutos no escuro;
e) titular com a soluo de Tiossulfato de sdio at o
aparecimento da colorao amarelo claro;
f)
adicione 1,0 ml da soluo de amido e continue a

titulao at o desaparecimento da cor azul formada.
Clculo
1
Normalidade =
____________________________________________
ml de tiossulfato consumido
79
Preparao dos Reagentes

Utilizados nas Anlises
Constantes neste Manual
Reagentes para alcalinidade

Soluo de cido sulfrico 0,02 N
Para preparar esta soluo, faz-se primeiro uma soluo 0,1N
do seguinte modo:
a) transferir, com pipeta, lentamente, 2,8 ml de acido
sulfrico concentrado (96% d=1,84) para um balo
volumtrico de 1000 ml contendo cerca de 500 ml de
gua destilada;
b) completar o volume, at a marca, com gua destilada e
agitar;
c) desta soluo, medir, com pipeta volumtrica, 200 ml
e transferir para um balo volumtrico de 1000 ml e
completar o volume com gua destilada. Esta soluo
aproximadamente 0,02 N.
Soluo de carbonato de sdio 0,02 N

Para preparar a soluo de carbonato de sdio 0,02 N secar
1,5 a 2,0 gramas de Na2Co3 grau padro primrio, a 2500C
por quatro horas. Esfriar em dessecador. Em seguida, pesar
1,060 gramas e dissolver em 250 ml de gua destilada e
completar o volume para 1000 ml com gua destilada em
balo volumtrico.
Padronizao da soluo
Colocar 50 ml de uma soluo de carbonato de Sdio 0,02
N em um frasco Erlenmeyer de 250 ml e adicionar 4 gotas
do indicador metilorange. Titular com H2SO4 0,02N at a
viragem do indicador para leve colorao avermelhada.
Anotar o volume do cido gasto.
82
Para calcular a normalidade correta, use a seguinte

frmula:
N = NV/V
onde:
N = normalidade do H2SO4 desejada;
V = volume do cido gasto na titulao;
N = normalidade do carbonato de sdio;
V = volume do carbonato de sdio usado.
1 ml de H2SO4 0,02 N = 1,0 mg de CaCO3
Soluo de tiossulfato de sdio 0,1 N

Pesar exatamente 25,0 gramas de Na2S2O3.5H2O e dissolver
em um pouco de gua destilada e completar o volume para
1000 ml em balo volumtrico.
Indicador metilorange
Pesar 0,100 gramas de metilorange e dissolver em 200 ml
de gua destilada.
Fenolftaleina
a) dissolver 1 grama de fenolftalena em um pouco de gua
destilada e diluir a 200 ml.
b) adicionar gotas de NaOH 0,02 N at o aparecimento de
leve colorao cor-de-rosa.
83
Mistura indicadora de verde de bromocresol/

vermelho de metila
Pesar 20 mg de vermelho de metila e 100 mg e verde de
bromocresol e dissolver em 100 ml de gua destilada ou
lcool etlico a 95%.
Reagentes para CO2

Hidrxido de sdio 0,02 N
a) Para preparar esta soluo, faz-se primeiro uma soluo
0,1N do seguinte modo;
b) Pesar rapidamente 4,2 gramas de Hidrxido de sdio
em lentilhas e transferir para um becker de 500 ml e
dissolver em gua destilada isenta de gs carbnico;
c) Transferir esta soluo para um balo volumtrico de
1 litro e completar o volume at a marca. Esta soluo
aproximadamente 0,1 Normal.
Padronizar com uma soluo de cido Sulfrico 0,1 normal
do seguinte modo:
a) Tomar 100 ml de gua destilada em um frasco
Erlenmeyer de 250 ml;
b) Medir, com pipeta volumtrica ou bureta 10 ml da
Soluo de NaOH 0,1 Normal e transferir para o
Erlenmeyer acima;
c) Juntar 3 a 4 gotas do Indicador de Metilorange;
d) Titular com a Soluo de cido Sulfrico 0,1
Normal;
e) Anotar os ml de H2SO4 gastos que devem ser 10 ou
prximo de 10.
84
Se o volume de H2SO4 0,1 N gastos na titulao forem maior

ou menor que 10 ml, calcular o Fator de Correo (Fc) da
soluo de NaOH utilizando a seguinte frmula:
Fc (NaOH) = ml H2SO4 x Fc / ml de NaOH
Anotar o Fc no rtulo do frasco.
Preparao da soluo de hidrxido de sdio N/50:
a) Transferir 200 ml da soluo estoque de NaOH 0,1 N para
um balo volumtrico de 1 litro e completar com gua
destilada. Esta nova soluo aproximadamente N/50
(0,02 N).
Padronizao da soluo de NaOH 0,02 N:
a) Tomar 100 ml de gua destilada em um frasco Erlenmeyer
de 250 ml;
b) Medir, com pipeta volumtrica ou bureta 10 ml da Soluo
de NaOH 0,02 N, e transferir para o Erlenmeyer acima;
c) Juntar 3 a 4 gotas do Indicador de Metilorange;
d) Titular com a Soluo de cido Sulfrico 0,02 N at a
viragem do indicador;
e) Anotar o volume de H2SO4 gastos que devem ser em
torno de 10 ml .
Clculo do fator de correo do NaOH
ml de H2SO4 0,02 N x Fc
= Fc NaOH 0,02N
ml de NaOH
Notas: 1. A viragem do indicador no muito fcil de se visualizar.

Fazer um branco com 100 mL de gua destilada para a
comparao de cor no momento da viragem do indicador;
85
2. Ao adicionar o indicador, a soluo fica amarelada e no

final da titulao a soluo fica levemente avermelhada;
3. gua isenta de CO2 pode ser obtida pela fervura da gua
destilada durante 15 minutos e resfriada rapidamente at a
temperatura ambiente.
Fenolftaleina
a) Dissolver 1 grama de fenolftalena em um pouco de gua
destilada e diluir a 200 ml;
b) Adicionar gotas de NaOH 0,02N at o aparecimento de
leve colorao cor-de-rosa.
Reagentes para anlise de cloretos

Soluo-Padro de Nitrato de Prata 0,0141 N
a) pesar 2,395 gramas de AgNO3 e dissolver em um pouco
de gua destilada. Completar para 1 litro em balo
volumtrico; 1,00 ml = 500 g Cl
b) padronizar contra uma soluo de Cloreto de Sdio
0,0141N;
c) guardar a soluo em frasco escuro.
Cloreto de sdio 0,0141 N
a)
dissolver 824,1 mg de Cloreto de Sdio seco a 140

C em gua livre de cloretos e diluir para 1000 ml.
1,00 ml = 500 g Cl.
Padronizao da soluo de nitrato de prata 0,0141 N

a) usar 100 ml de amostra (NaCl 0,0141 N) ou uma poro
diluda a 100 ml;
b) ajustar o pH entre 7 e 10 com NaOH ou H2SO4 1 N;
86
c) adicionar 1 ml de K2CrO4 (Cromato de Potssio);

d) titular com a soluo de Nitrato de Prata 0,0141 N at
o aparecimento da cor amarelo avermelhado;
e) anotar o volume de Nitrato de Prata gasto na
titulao;
f)
calcular o fator de correo do AgNO3 0,0141 N

usando a seguinte frmula:
Fc =100/Vp
onde:
Fc = Fator de correo.
Vp = Volume de AgNO3 gasto na titulao.
Soluo indicadora de cromato de potssio (K2CrO4)

a) pesar 50 gramas de K2CrO4 e dissolver em um pouco
de gua destilada;
b) adicionar soluo de AgNO3 0,0141 N at formar um
precipitado vermelho;
c) deixar em repouso por 12 horas;
d) filtrar e completar o volume para 1000 ml com gua
destilada.
Hidrxido de sdio (NaOH) 1N
a) pesar 40 gramas de Hidrxido de Sdio e dissolver em
um pouco de gua destilada e diluir a 1 litro;
b) guardar em frasco de polietileno ou vidro-pirex.
87
cido sulfrico (H2SO4) 1N

a) em um becker de 1000 ml colocar cerca de 500 ml de
gua destilada;
b) Em seguida medir 28 ml de cido sulfrico concentrado
e adicionar lentamente no becker acima, com agitao
constante;
c) Deixar esfriar;
d) Transferir para um balo volumtrico de 1000
ml e completar o volume com gua destilada,
homogeneizando a seguir;
e) Armazenar em frasco de polietileno ou vidro pirex.
Notas: 1. Agitar com basto de vidro;
2. Nunca adicionar gua no cido, e sim cido na gua.
Reagentes para anlise de dureza

Soluo padro de EDTA 0,01 M
a) pesar 3,723 gramas de EDTA (sal di-sdio do cido
etilenodiamino tetraactico), dissolver em gua
destilada e diluir a 1000 ml;
b) padronizar contra uma soluo-padro de Carbonato
de Clcio;
c) guardar esta soluo em frasco de polietileno.
Soluo padro de clcio
a) pesar 1,0 grama de Carbonato de Clcio anidro (CaCO3)
padro primrio e colocar em um frasco Erlenmeyer
de 250 ml;
88
b) adicionar aos poucos, com auxlio de um funil HCl 1:

1 at dissolver todo CaCO3;
c) adicionar 200 mL de gua destilada e ferver por alguns
minutos para eliminar o CO2;
d) esfriar e adicionar algumas gotas de vermelho de metila
e ajustar para a cor laranja intermediria por adio de
NH4OH 3N ou HCl 1:1;
e) transferir toda a mistura para um balo volumtrico de
1000 ml e completar o volume at a marca com gua
destilada (1 ml desta soluo = 1,0 mg de CaCO3).
Padronizao da soluo de EDTA 0,01 M
a) medir 25 ml da soluo padro de clcio e diluir para
50 ml com gua destilada em frasco Erlenmeyer de 125
ml;
b) adicionar 1 a 2 ml da soluo tampo para obter o pH
em torno de 10 0,1;
c) adicionar 0,05 gramas do indicador Eriochrome
Black T;
d) titular com EDTA 0,01 M gota a gota at desaparecer
a ltima colorao violcea e aparecer a cor azul
indicadora do ponto final da titulao.
Clculo:
25
Fc=
Vp
onde:
Fc = Fator de Correo;
89
Vp = Volume de EDTA gasto na titulao.

Soluo tampo para dureza
a) pesar 16,9 gramas de Cloreto de Amnia (NH4Cl)
e dissolver em 143 ml de Hidrxido de Amnia
concentrado (NH4OH);
b) adicionar 1,25 gramas do sal de magnsio do EDTA e
diluir a 250 ml com gua destilada.
Observao: Caso no disponha do sal de magnsio do EDTA,
dissolver 1,179 gramas do sal sdico do EDTA e 780
mg do MgSO4 .7H2O ou 644 mg do MgCl2.6H2O
em 50 ml de gua destilada e juntar soluo do
item 1, completando o volume para 250 ml com
gua destilada.
Indicador Eriocrome Black T

a) pesar 0,5 gramas de Eriocrome Black T em um vidro
de relgio;
b) pesar 100 gramas de Cloreto de Sdio P. A. em um
Becker;
c) transferir os dois reagentes para um almofariz e triturar
a mistura at se transformar em p;
d) armazenar em frasco de boca larga, bem fechado.
Inibidor I - cianeto de sdio P.A.
Usar 250 mg na soluo a ser titulada.
Inibidor II - sulfeto de sdio
a) pesar 5 gramas de Sulfeto de Sdio ( Na2S.9H2O) ou
3,7 gramas de Na2S.5H2O;
90
b) dissolver em 100 ml de gua destilada;

c) guardar em frasco de vidro bem fechado a fim de evitar
sua deteriorao por contato com o ar.
Soluo padro de cor
a) pesar 1,246 gramas de Cloroplatinato de Potssio
(K2PtCl6) e 1,0 grama de Cloreto Cobaltoso cristalizado
( CoCl2.6H2O);
b) dissolver em gua destilada;
c) acrescentar 100 ml de cido clordrico concentrado e
diluir para 1000 ml com gua destilada. (Esta soluo
equivale a 500 Unidades de Cor).
Reagentes para anlise de alumnio
- cido sulfrico (H2SO4) 0,02N
a) preparar igual ao utilizado para alcalinidade total.
- cido ascrbico
a) pesar 0,1g de cido ascrbico e dissolver em um pouco
de gua destilada e completar o volume para 100 ml.
Esta soluo dever ser preparada diariamente.
- Reagente tampo
a) pesar 136 g de acetato de sdio - NaC2H3O2.3H2O
e dissolver em gua destilada. Adicionar 40 ml de
soluo de cido actico 1N e diluir para 1000 ml
com gua destilada.
91
- Soluo de cido actico 1N

a) medir 58 ml de cido actico concentrado e diluir
para 1000 ml com gua destilada.
- Soluo de Eriocromo Cianina-R (estoque)
a) pesar e dissolver 150 mg do corante em cerca de 50
ml de gua destilada. Ajustar o pH para 2,9 com cido
actico 1:1 (so requeridos aproximadamente 2 ml de
cido). Diluir para 100 ml com gua destilada.
- Soluo de trabalho (Eriocromo Cianina-R)
a) medir 10 ml da soluo-estoque e diluir para 100
ml com gua destilada. Esta soluo estvel por 6
meses.
- Soluo indicadora de Metilorange.
a) pesar e dissolver 100 mg de metilorange em 200 ml
de gua destilada.
- Soluo Estoque de Alumnio (1ml=500 g Al)
a) pesar 8,791 g de Sulfato duplo de alumnio e potssio
- AlK(SO4)2.12H2O e dissolver em um pouco de gua

destilada. Completar o volume para 1000 ml em balo
volumtrico.
- Soluo Padro (1ml = 5 g)
a) diluir 10 ml da soluo estoque para 1000 ml com
gua destilada, em balo volumtrico.
Preparar diariamente.
92
Observao: a) todos os reagentes devem ser preparados com

gua destilada isenta de alumnio.
b) todos os procedimentos que determinam diluir ou
completar para x ml, fazer em balo volumtrico.
- Soluo de EDTA 0,01M

a) (3,7 gramas de EDTA em 1000 ml de gua destilada).
Reagentes para anlise de fluoretos
- Soluo padro de fluoretos
a) preparar uma soluo-estoque, dissolvendo 221,0 mg
de Fluoreto de Sdio anidro (NaF) em gua destilada
e diluir a 1000 ml (1 ml desta soluo equivale a 100
gF-);
b) diluir 100 ml da soluo estoque acima, para 1000 ml
com gua destilada (1 ml = 10 gF-).
Reagente zirconio-alizarina
a) pesar e dissolver 300 mg de Oxicloreto de Zircnio
(ZrOCl2.8H2O), em 50 ml de gua destilada e transferir
para um frasco volumtrico de 1000 ml com tampa;
b) pesar e dissolver 70 mg de Monosulfato de Alizarina
em 50 ml de gua destilada;
c) colocar a soluo 2 na soluo 1, lentamente e com
agitao;
d) a soluo resultante dever ficar em repouso por alguns minutos.
93
Mistura cida
a) medir 101 ml de cido Clordrico concentrado (HCl)
e diluir para aproximadamente 400 ml com gua
destilada;
b) adicionar cuidadosamente 33,3 ml de cido Sulfrico
concentrado (H2SO4) em aproximadamente 400 ml de
gua destilada;
c) aps esfriar, misturar as duas solues cidas.
Reagentes Scott-Sanchis
a) adicionar a mistura cida soluo reagente Zirconilalizarina;
b) completar o volume para 1000 ml com gua destilada
e misturar;
c) guardar em frasco de cor mbar e em lugar protegido
da incidncia de luz direta. Este reagente estvel por
6 meses.
Arsenito de sdio
a) pesar 5 g de Arsenito de Sdio (NaAsO3) e dissolver
em um pouco de gua, diluir para 1 litro com gua
destilada (usar 1 gota para cada 0,1mg de cloro
existente na amostra).
Observao: esta soluo txica - evitar ingesto.
Regras gerais para corrigir as solues tituladas

A correo das solues tituladas um procedimento muito
utilizado em laboratrio. Serve para aferir o grau de exatido
das solues padronizadas. Periodicamente, o tcnico deve
94
verificar a exatido dessas solues para que os resultados

das anlises sejam os mais corretos possveis.
Regra 1
Quando o volume consumido de soluo a titular for igual
ao volume da soluo-padro tomado para a titulao,
significa que aquela est exata. Ex.: 10 ml de HCl 0,1N foram
consumidos para titular 10 ml de Na2CO3 0,1N.
Regra 2
Quando o volume consumido da soluo a titular for menor
que o volume do padro tomado, significa que a soluo a
titular encontra-se mais concentrada. Nesse caso, faz-se a
correo do seguinte modo: Ex.: Foram gastos na titulao de
10 ml de Na2CO3 0,1N; 8,3 ml de HCl 0,1 N. Aplicando-se
a seguinte equao, temos: 8,3 : 10 :: x : 1000.
Efetuando-se os clculos tem-se:
10x = 8,3 x 1000
x = 8300/10
x = 830 ml
Logo, mede-se 830 ml da soluo a titular e completa-se
a 1000 ml com gua destilada. Fazer nova titulao para
verificar o rigor da dosagem, que no deve ficar abaixo de
9,9 e acima de 10,1 ml.
Regra 3
No caso em que o volume da soluo a titular for maior do
que o da soluo padro, significa que a soluo a titular
95
encontra-se mais diluda. Nesse caso, calcula-se o fator de

correo da seguinte forma:
Exemplo: 10,5 ml de uma soluo de HCl 0,1N foram consumidos
para titular 10 ml de uma soluo padro de Carbonato
de Sdio. Aplicando-se a seguinte equao, temos:
10,5 : 10 :: 1 : x
Efetuando-se os clculos temos:
10 = 10,5x
x = 10/10,5
x = 0,9524
Logo o Fator de correo da soluo 0,9524.
Limpeza de material de vidro no laboratrio

A preciso e exatido das anlises esto, alm de outros
fatores, tambm, ligadas ao uso do material de vidro no
laboratrio.
Faz-se, portanto, necessrio que toda a vidraria esteja
perfeitamente limpa, livre de impurezas, tais como sabes,
detergentes e outros produtos que podem ficar aderidos s
paredes dos recipientes.
A vidraria em geral pode ser lavada simplesmente com gua,
gua e sabo neutro ou por meio de solues especiais, como
a soluo sulfo-crmica, por exemplo.
Procedimento de lavagem
Para vidraria nova:
a)
a maioria dos materiais de vidros novos levemente

alcalina, portanto esses materiais devem ser colocados
de molho por algumas horas em soluo de cido
clordrico ou ntrico a 1% antes de serem lavadas.
96
Para vidraria usada:

a) os materiais de vidro j utilizados com meio de
cultura (placas de Petri, tubos de cultura), devem
ser esterilizados antes de serem lavados. Depois
devem ser colocados em um recipiente grande, com
gua contendo 1 a 2 % de sabo ou detergente,
deixando ferver por 30 minutos. Em seguida devem
ser enxaguados com gua corrente, esfregados com
detergentes neutros e enxaguados novamente;
b) em determinadas situaes em que os materiais de vidro
no puderem ser limpos com os detergentes comuns
ou outros produtos de limpeza, faz necessrio o uso de
uma mistura constituda de acido sulfrico e soluo
saturada de dicromato de sdio, preparada do seguinte
modo: misturar 1 litro de cido sulfrico concentrado
com 35 ml da soluo saturada de dicromato de
sdio. Esta soluo no deve ser usada para lavagem
de vidrarias utilizadas para anlise de cromo.
Notas: 1. a soluo acima cida e ataca a pele;
2. no permitir contato da mo com a soluo;
3. a soluo ataca os tecidos. Evitar contato com a roupa;
4. no lavar com a esta soluo vidros colados como cubetas
utilizadas em espectrofotmetros, cubetas de turbidez, etc.;
5. depois de passar esta soluo na vidraria, enxagu-la
com bastante gua e em seguida com gua destilada.
Relao de materiais de laboratrio

de anlise de gua
Equipamentos
a) autoclave vertical, capacidade para 18, 24,48 ou 72 litros,
110/220 volts;
97
b) estufa para cultura bacteriolgica, com termostato regulvel

na faixa de 30 a 65 C, tamanho 45x45x40 cm de largura,
profundidade e altura, respectivamente, equipada com
bandeja regulvel para trs posies;
c) balana analtica, eltrica, capacidade para 160 g,
sensibilidade de 1/100 mg, cinco casas decimais, 110/
220 volts;
d) balana de preciso, com dupla escala, pesagem mxima
200 gramas, sensibilidade de 0,1 g;
e) destilador de gua, capacidade para 2 litros/hora, 110/220
volts;
f) banho-maria capacidade para 50 tubos de ensaio, com
termostato regulvel na faixa de 35 a 65 C, 110/220
volts;
g) banho de vapor, para 6 provas simultneas, construdo
em chapa metlica, com termostato regulvel em at 6
posies, 110/220 volts;
h) capela para exausto forada de gases, com motor eltrico
de 1/3 de HP, 110/220 volts;
i) chapa aquecedora com termostato regulvel, tamanho
x, 110/220 volts;
j) estufa para esterilizao e secagem, tamanho 50x40x50
cm de largura, profundidade e altura, respectivamente,
com termostato regulvel at 300 C, e bandeja regulvel
para 3 posies, 110/220 volts;
k) aparelho de Jar-Test para 6 provas simultneas, com
regulador de velocidade de 0 a 100 rpm, com base de
vidro ou acrlico iluminada, 110/220 volts;
l) medidor de cloro residual, porttil, com disco de cor,
escala de 0 a 3,5 mg/L, para uso com reagente DPD;
98
m) termmetro bacteriolgico, com escala de 0 a 60 C, com

divises de 1C;
n) termmetro qumico com escala de 0 a 300 C, com
diviso de 1 C;
o) turbidmetro , completo;
p) medidor de pH digital, de bancada, faixa de medio de
0 a 14, com eletrodo, 110/220 volts;
q) medidor de pH, digital, porttil, faixa de medio de 0 a
14, com eletrodo, funcionamento bateria de 9 volts;
r) lanterna para identificao de E.coli, com lmpada
fluorescente ultravioleta, 6 watts, 365 nm, recarregvel,
porttil, 110 volts;
s) bico de Bunsen;
t) deionizador capacidade para 50 litros/hora - 110/220
volts.
Vidraria
a) tubo para cultura, sem borda, tamanho 150 x 16 mm;
b) tubo para cultura, sem borda, tamanho 180 x 18 mm;
c) tubo para cultura, sem borda, tamanho 125 x 15 mm;
d) tubo de Nessler, forma alta, capacidade de 50 e 100 ml;
e) tubo de Durhan, tamanho 40 x 5 mm;
f) balo volumtrico, fundo chato, com tampa de teflon ou
vidro esmerilhado, classe A capacidade de 50, 100,
250, 500 e 1000 ml;
g) becker forma baixa, graduado, capacidade de 50, 100,
250, 500 e 1000 ml;
99
h) bureta com torneira de vidro ou teflon, gravao

permanente, classe A capacidade de 10, 25, e 50 ml;
i) pipeta sorolgica, codificada por cores, com bocal para
algodo, gravao permanente, capacidade de 1, 2, 5 e
10 ml;
j) pipeta de MOHR, codificada por cores, bocal e bico
temperados, gravao permanente, capacidade de 1, 2,
5 e 10 ml;
k) pipeta volumtrica, codificada por cores, bocal e bicos
temperados, gravao permanente, classe A, capacidade
de 10, 25, 50 e 100 ml;
l) frasco de vidro para reagentes, boca larga, cor branca, com
rolha de vidro esmerilhada intercambivel, capacidade
de 125 ml;
m) proveta graduada a conter, com base hexagonal de vidro,
gravao permanente, classe A , capacidade de 10, 25,
50, 100, 250, 500 e 1000 ml;
n) frasco Erlenmeyer, boca larga, reforada, graduado,
capacidade de 125, 250 e 500 ml;
o) funil analtico, ngulo de 60, liso, haste curta, com
dimetro de 50, 75 e 100 mm;
p) funil analtico, ngulo de 60, raiado, haste longa, com
q) funil analtico, ngulo de 60, raiado, haste curta, com
r) Placa de Petri de vidro, transparente, tamanho 100 x
15 mm;
s) conjunto de destilao para fluoretos, constitudo de
balo de fundo chato de 1000 ml com sada lateral para
condensador Grahan, com juntas esmerilhadas;
100
t) basto de vidro de 30 cm de comprimento x 5 mm de

dimetro;
Materiais diversos
a) ala de platina calibrada com 3 mm de dimetro;
b) cabo de Kolle para ala de platina;
c) algodo em rama para bacteriologia;
d) lpis dermogrfico;
e) caldo lactosado, desidratado, embalagem de 100 ou 500
gramas;
f) caldo lactosado, verde brilhante bile a 2%, desidratado,
embalagem de 100 ou 500 gramas;
g) Meio ENDO MF, para coli total, embalagem de 100 ou
500 gramas;
h) Meio EC MF, para coli fecal, embalagem de 100 ou 500
gramas;
i) prpura de bromocresol, embalagem de 5 gramas;
j) estante para tubo de ensaio, com capacidade para 15 tubos
de 180 x 18 mm, de madeira ou plstico resistente.
k) estante para tubo de ensaio com capacidade para 40 tubos
de 180 x 18 mm, em arame resistente a autoclavao;
l) caldo lauril triptose, desidratado, embalagem de 100 ou
500 gramas;
m) Meio EC, desidratado, embalagem de 100 ou 500 gramas.
n) Plate Count Agar, desidratado, embalagem de 100 ou
500 gramas;
101
o) substrato cromognico para determinao enzimtica

qualitativa de coliformes totais e E.coli em amostras de
100 ml de gua, caixa com 20 ampolas;
p) cesto de arame com capacidade para 50 tubos de ensaio
de 180 x 18 mm, resistente a autoclavao;
q) suporte para tubo de Nessler de 50 e 100 ml, em madeira
ou alumnio, capacidade para 8 tubos;
r) papel de alumnio, medindo 7,5 m de comprimento x
30 cm de largura;
s) algodo hidrfilo, pacote de 500 gramas;
t) Placa de Petri, de plstico, esterilizada, de 47 mm de
dimetro;
u) filtros estries de 47 mm de dimetro, 0,45m de
porosidade, com carto absorvente, embalagem com
100 unidades;
v) conjunto porta-filtro de membrana, construdo em
ao inoxidvel, com dispositivo para esterilizao no
campo;
w) pina de ao inoxidvel, de 10 cm de comprimento.
Biossegurana em laboratrio
Neste manual, constam apenas os principais procedimentos
relacionados a Biossegurana em laboratrio que devero ser
observados pelos tcnicos que atuam na rea.
Procedimentos de ordem pessoal:

a) no pipetar nenhum tipo de lquido com a boca;
b) usar culos de proteo nos ambientes do laboratrio
onde o uso obrigatrio;
102
c) no levar as mos boca ou aos olhos quando estiver

manuseando produtos qumicos;
d) no guardar alimentos na geladeira do laboratrio;
e) no fazer refeies dentro do laboratrio;
f) no fumar no interior do laboratrio;
g) lavar cuidadosamente as mos com bastante gua e sabo,
antes de fazer qualquer refeio;
h) usar avental, sempre;
i) no manipular produtos txicos sem antes se certificar de
sua toxicidade.
Procedimentos relacionados ao laboratrio

a) manter as bancadas do laboratrio sempre limpas e livres
de materiais estranhos ao trabalho;
b) retirar da bancada os materiais, amostras e reagentes
empregados no trabalho, logo aps utiliz-los;
c) limpar imediatamente qualquer derramamento de
produtos e reagentes com os cuidados necessrios;
d) ao esvaziar um frasco de reagente, fazer a limpeza prvia
com gua, antes de coloc-lo para lavagem;
e) rotular imediatamente qualquer reagente ou soluo
preparada e as amostras coletadas;
f) no jogar produtos corrosivos concentrados na pia;
descart-los somente aps serem diludos;
g) na preparao de solues cidas nunca adicionar gua
no cido e sim cido na gua;
h) no jogar na pia lquidos inflamveis e/ou volteis; estoclos em recipientes adequados;
103
i) dispor os cilindros com gases em ambiente externo ao

laboratrio, devidamente acondicionados;
j) usar capela de exausto de gases para trabalhos com
lquidos inflamveis e/ou volteis.
Procedimentos para o uso de vidrarias:

a) no utilizar materiais de vidro trincados;
b) usar luvas de amianto para manusear peas de vidro que
estejam quentes;
c) no deixar frascos quentes sem proteo sobre as bancadas
do laboratrio, coloc-los sobre placas de amianto;
d) no aquecer recipiente de vidro em chama direta, usar
tela de amianto;
e) no pressurizar recipientes de vidro;
f) no esquecer vidraria em aquecimento - usar despertador,
sempre;
g) no usar frascos para amostras que no estejam
perfeitamente limpos e sem certificar-se de sua adequao
aos servios a serem executados;
h) usar luvas de pelica e culos de segurana, sempre que:
atravessar ou remover rolhas de borracha ou cortia, de
tubos de vidro ou termmetros;
i) remover tampas de vidro emperradas;
j) remover cacos de vidro - usar p de lixo e escova;
k) usar protetor facial e luvas de pelica quando agitar
solventes volteis em frascos fechados.
104
Procedimento para uso de equipamentos em geral

a) antes de utilizar qualquer equipamento ler antes as
instrues de operao fornecidas pelo fabricante;
b) nunca ligar equipamentos eltricos sem antes verificar a
voltagem;
c) no instalar nem operar equipamentos eltricos sobre
superfcies midas;
d) no deixar equipamentos eltricos ligados no laboratrio
fora do expediente, exceto os de energia constante como
geladeiras, estufas, etc.;
e) combater fogo em equipamentos eltricos somente com
extintor de CO2;
f) manter os equipamentos de segurana em locais de
fcil acesso e ao alcance de todos os funcionrios do
laboratrio, tais como:
- extintor de incndio;
- chuveiro de emergncia;
- lavador de olhos;
- cobertor de segurana;
- mscara contra gases;
- mscaras e culos de segurana, etc.
105
Portaria
Portaria n 518, de 25 de maro de 2004
(DOU n 59 de 26 de maro de 2004, Seo 1
Estabelece os procedimentos e responsabilidades relativos ao controle e
vigilncia da qualidade da gua para
consumo humano e seu padro de
potabilidade, e d outras providncias.
O Ministro de Estado da Sade, Interino, no uso das
atribuies que lhe confere o artigo 2 do Decreto n
79.367, de 9 de maro de 1977, resolve:
Art. 1 Aprovar a Norma de Qualidade da gua para
Consumo Humano, na forma do Anexo desta Portaria, de
uso obrigatrio em todo territrio nacional.
Art. 2 Fica estabelecido o prazo mximo de 12 meses,
contados a partir da publicao desta Portaria, para que
as instituies ou rgos aos quais esta Norma se aplica,
promovam as adequaes necessrias a seu cumprimento,
no que se refere ao tratamento por filtrao de gua
para consumo humano suprida por manancial superficial
e distribuda por meio de canalizao e da obrigao do
monitoramento de cianobactrias e cianotoxinas.
Art. 3 de responsabilidade da Unio, dos estados, do
Distrito Federal e dos municpios a adoo das medidas
necessrias para o fiel cumprimento desta Portaria.
Art. 4 O Ministrio da Sade promover, por intermdio
da Secretaria de Vigilncia em Sade (SVS), a reviso da
Norma de Qualidade da gua para Consumo Humano
estabelecida nesta Portaria, no prazo de cinco anos ou
106
a qualquer tempo, mediante solicitao devidamente

justificada de rgos governamentais ou no governamentais
de reconhecida capacidade tcnica nos setores objeto desta
regulamentao.
Art. 5 Fica delegada competncia ao Secretrio de
Vigilncia em Sade para editar, quando necessrio, normas
regulamentadoras desta Portaria.
Art. 6 Esta Portaria entra em vigor na data de sua
publicao.
Art. 7 Fica revogada a portaria n 1469, de 29 de dezembro
de 2000,publicada no DOU n 1-E de 2 de janeiro de 2001,
Seo 1, pgina n 19.
Gasto Wagner de Sousa Campos
Anexo a Portaria n 518 de 25 de maro de 2004
Norma de Qualidade da gua para Consumo Humano
Captulo I
Das disposies preliminares
Art. 1 Esta Norma dispe sobre procedimentos e
responsabilidades inerentes ao controle e vigilncia da
qualidade da gua para consumo humano e estabelece seu
padro de potabilidade e d outras providncias.
Art. 2 Toda a gua destinada ao consumo humano deve
obedecer ao padro de potabilidade e est sujeita vigilncia
da qualidade da gua.
Art. 3 Esta Norma no se aplica s guas envasadas e a
outras, cujos usos e padres de qualidade so estabelecidos
em legislao especfica.
107
Captulo II
Das definies
Art. 4 Para os fins a que se destina esta Norma, so adotadas
as seguintes definies:
I - gua potvel gua para consumo humano cujos parmetros
microbiolgicos, fsicos, qumicos e radioativos atendam ao
padro de potabilidade e que no oferea riscos sade;
II - sistema de abastecimento de gua para consumo
humano instalao composta por conjunto de obras
civis, materiais e equipamentos, destinada produo e
distribuio canalizada de gua potvel para populaes,
sob a responsabilidade do poder pblico, mesmo que
administrada em regime de concesso ou permisso;
III - soluo alternativa de abastecimento de gua para
consumo humano toda modalidade de abastecimento
coletivo de gua distinta do sistema de abastecimento de
gua, incluindo, entre outras, fonte, poo comunitrio,
distribuio por veculo transportador, instalaes
condominiais horizontal e vertical;
IV - controle da qualidade da gua para consumo humano
conjunto de atividades, exercidas de forma contnua
pelo(s) responsvel(is) pela operao de sistema ou soluo
alternativa de abastecimento de gua, destinadas a verificar
se a gua fornecida populao potvel, assegurando a
manuteno desta condio;
V - vigilncia da qualidade da gua para consumo humano
conjunto de aes adotadas continuamente pela autoridade
de sade pblica para verificar se a gua consumida pela
populao atende esta Norma e para avaliar os riscos que
os sistemas e as solues alternativas de abastecimento de
gua representam para a sade humana;
108
VI - coliformes totais (bactrias do grupo coliforme) - bacilos

gram-negativos, aerbios ou anaerbios facultativos,
no formadores de esporos, oxidase-negativos, capazes
de desenvolver na presena de sais biliares ou agentes
tensoativos que fermentam a lactose com produo de cido,
gs e aldedo a 35,0 0,5 oC em 24-48 horas, e que podem
apresentar atividade da enzima - galactosidase. A maioria
das bactrias do grupo coliforme pertence aos gneros
Escherichia, Citrobacter, Klebsiella e Enterobacter, embora
vrios outros gneros e espcies pertenam ao grupo;
VII - coliformes termotolerantes - subgrupo das bactrias do
grupo coliforme que fermentam a lactose a 44,5 0,2C em
24 horas; tendo como principal representante a Escherichia
coli, de origem exclusivamente fecal;
VIII - Escherichia Coli - bactria do grupo coliforme que
fermenta a lactose e manitol, com produo de cido e
gs a 44,5 0,2oC em 24 horas, produz indol a partir do
triptofano, oxidase negativa, no hidroliza a uria e apresenta
atividade das enzimas galactosidase e glucoronidase,
sendo considerada o mais especfico indicador de
contaminao fecal recente e de eventual presena de
organismos patognicos;
IX - contagem de bactrias heterotrficas - determinao da
densidade de bactrias que so capazes de produzir unidades
formadoras de colnias (UFC), na presena de compostos
orgnicos contidos em meio de cultura apropriada, sob condies
pr-estabelecidas de incubao: 35,0, 0,5C por 48 horas;
X - cianobactrias - microorganismos procariticos autotrficos, tambm denominados como cianofceas (algas azuis),
capazes de ocorrer em qualquer manancial superficial
especialmente naqueles com elevados nveis de nutrientes
(nitrognio e fsforo), podendo produzir toxinas com efeitos
adversos sade; e
109
XI - cianotoxinas toxinas produzidas por cianobactrias

que apresentam efeitos adversos sade por ingesto oral,
incluindo:
a) microcistinas - hepatotoxinas heptapeptdicas cclicas
produzidas por cianobactrias, com efeito potente de
inibio de protenas fosfatases dos tipos 1 e 2A e
promotoras de tumores;
b) cilindrospermopsina - alcalide guanidnico cclico
produzido por cianobactrias, inibidor de sntese protica,
predominantemente hepatotxico, apresentando tambm
efeitos citotxicos nos rins, bao, corao e outros rgos; e
c) saxitoxinas - grupo de alcalides carbamatos neurotxicos
produzido por cianobactrias, no sulfatados (saxitoxinas)
ou sulfatados (goniautoxinas e C-toxinas) e derivados
decarbamil, apresentando efeitos de inibio da conduo
nervosa por bloqueio dos canais de sdio.
Captulo III
Dos deveres e das responsabilidade
Seo I
Do nvel federal
Art. 5 So deveres e obrigaes do Ministrio da Sade, por
intermdio da Secretaria de Vigilncia em Sade (SVS):
I - promover e acompanhar a vigilncia da qualidade da gua, em
articulao com as Secretarias de Sade dos Estados e do Distrito
Federal e com os responsveis pelo controle de qualidade da
gua, nos termos da legislao que regulamenta o SUS;
II - estabelecer as referncias laboratoriais nacionais e
regionais, para dar suporte s aes de maior complexidade na
vigilncia da qualidade da gua para consumo humano;
110
III - aprovar e registrar as metodologias no contempladas

nas referncias citadas no artigo 17 deste Anexo;
IV - definir diretrizes especficas para o estabelecimento de
um plano de amostragem a ser implementado pelos Estados,
Distrito Federal ou Municpios, no exerccio das atividades
de vigilncia da qualidade da gua, no mbito do Sistema
nico de Sade (SUS); e
V - executar aes de vigilncia da qualidade da gua,
de forma complementar, em carter excepcional, quando
constatada, tecnicamente, insuficincia da ao estadual,
nos termos da regulamentao do SUS.
Seo II
Do nvel estadual e Distrito Federal
Art. 6 So deveres e obrigaes das Secretarias de Sade
dos Estados e do Distrito Federal:
I - promover e acompanhar a vigilncia da qualidade da gua
em sua rea de competncia, em articulao com o nvel
municipal e os responsveis pelo controle de qualidade da
gua, nos termos da legislao que regulamenta o SUS;
II - garantir, nas atividades de vigilncia da qualidade da
gua, a implementao de um plano de amostragem pelos
municpios, observadas as diretrizes especficas a serem
elaboradas pela SVS/MS;
III - estabelecer as referncias laboratoriais estaduais e do
Distrito Federal para dar suporte s aes de vigilncia da
qualidade da gua para consumo humano; e
IV - executar aes de vigilncia da qualidade da gua,
de forma complementar, em carter excepcional, quando
constatada, tecnicamente, insuficincia da ao municipal,
nos termos da regulamentao do SUS.
111
Seo III
Do nvel municipal
Art. 7 So deveres e obrigaes das Secretarias Municipais
de Sade:
I - exercer a vigilncia da qualidade da gua em sua rea
de competncia, em articulao com os responsveis pelo
controle de qualidade da gua, de acordo com as diretrizes
do SUS;
II - sistematizar e interpretar os dados gerados pelo
responsvel pela operao do sistema ou soluo alternativa
de abastecimento de gua, assim como, pelos rgos
ambientais e gestores de recursos hdricos, em relao s
caractersticas da gua nos mananciais, sob a perspectiva da
vulnerabilidade do abastecimento de gua quanto aos riscos
sade da populao;
III - estabelecer as referncias laboratoriais municipais para
dar suporte s aes de vigilncia da qualidade da gua para
consumo humano;
IV - efetuar, sistemtica e permanentemente, avaliao de
risco sade humana de cada sistema de abastecimento ou
soluo alternativa, por meio de informaes sobre:
a) a ocupao da bacia contribuinte ao manancial e o
histrico das caractersticas de suas guas;
b) as caractersticas fsicas dos sistemas, prticas operacionais
e de controle da qualidade da gua;
c) o histrico da qualidade da gua produzida e distribuda; e
d) a associao entre agravos sade e situaes de
vulnerabilidade do sistema.
112
V - auditar o controle da qualidade da gua produzida e

distribuda e as prticas operacionais adotadas;
VI - garantir populao informaes sobre a qualidade da
gua e riscos sade associados, nos termos do inciso VI
do artigo 9 deste Anexo;
VII - manter registros atualizados sobre as caractersticas da gua
distribuda, sistematizado de forma compreensvel populao
e disponibilizados para pronto acesso e consulta pblica;
VIII - manter mecanismos para recebimento de queixas
referentes s caractersticas da gua e para a adoo das
providncias pertinentes;
IX - informar ao responsvel pelo fornecimento de gua para
consumo humano sobre anomalias e no conformidades
detectadas, exigindo as providncias para as correes que
se fizerem necessrias;
X - aprovar o plano de amostragem apresentado pelos
responsveis pelo controle da qualidade da gua de
sistema ou soluo alternativa de abastecimento de gua, que
deve respeitar os planos mnimos de amostragem expressos
nas Tabelas 6, 7, 8 e 9;
XI - implementar um plano prprio de amostragem de
vigilncia da qualidade da gua, consoante diretrizes
especficas elaboradas pela SVS; e
XII - definir o responsvel pelo controle da qualidade da gua
de soluo alternativa.
113
Seo IV
Do responsvel pela operao de sistema
e/ou soluo alternativa
Art. 8 Cabe ao(s) responsvel(is) pela operao de sistema
ou soluo alternativa de abastecimento de gua exercer o
controle da qualidade da gua.
Pargrafo nico. Em caso de administrao, em regime de
concesso ou permisso, do sistema de abastecimento de
gua, a concessionria ou a permissionria a responsvel
pelo controle da qualidade da gua.
Art. 9 Ao(s) responsvel(is) pela operao de sistema de
abastecimento de gua incumbe:
I - operar e manter sistema de abastecimento de gua potvel
para a populao consumidora em conformidade com as
normas tcnicas aplicveis publicadas pela Associao
Brasileira de Normas Tcnicas (ABNT) e com outras normas
e legislaes pertinentes;
II - manter e controlar a qualidade da gua produzida e
distribuda, por meio de:
a) controle operacional das unidades de captao, aduo,
tratamento, reservao e distribuio;
b) exigncia do controle de qualidade, por parte dos
fabricantes de produtos qumicos utilizados no tratamento
da gua e de materiais empregados na produo e
distribuio que tenham contato com a gua;
c) capacitao e atualizao tcnica dos profissionais
encarregados da operao do sistema e do controle da
qualidade da gua; e
114
d) anlises laboratoriais da gua, em amostras provenientes

das diversas partes que compem o sistema de
abastecimento.
III - manter avaliao sistemtica do sistema de abastecimento de gua, sob a perspectiva dos riscos sade, com
base na ocupao da bacia contribuinte ao manancial, no
histrico das caractersticas de suas guas, nas caractersticas
fsicas do sistema, nas prticas operacionais e na qualidade
da gua distribuda;
IV - encaminhar autoridade de sade pblica, para fins
de comprovao do atendimento a esta Norma, relatrios
mensais com informaes sobre o controle da qualidade
da gua, segundo modelo estabelecido pela referida
autoridade;
V - promover, em conjunto com os rgos ambientais e
gestores de recursos hdricos, as aes cabveis para a proteo
do manancial de abastecimento e de sua bacia contribuinte,
assim como efetuar controle das caractersticas das suas
guas, nos termos do artigo 19 deste Anexo, notificando
imediatamente a autoridade de sade pblica sempre que
houver indcios de risco sade ou sempre que amostras
coletadas apresentarem resultados em desacordo com os
limites ou condies da respectiva classe de enquadramento,
conforme definido na legislao especfica vigente;
VI - fornecer a todos os consumidores, nos termos do Cdigo
de Defesa do Consumidor, informaes sobre a qualidade da
gua distribuda, mediante envio de relatrio, dentre outros
mecanismos, com periodicidade mnima anual e contendo,
pelo menos as seguintes informaes:
a) descrio dos mananciais de abastecimento, incluindo
informaes sobre sua proteo, disponibilidade e
qualidade da gua;
115
b) estatstica descritiva dos valores de parmetros de

qualidade detectados na gua, seu significado, origem e
efeitos sobre a sade; e
c) ocorrncia de no conformidades com o padro de
potabilidade e as medidas corretivas providenciadas.
VII - manter registros atualizados sobre as caractersticas da
gua distribuda, sistematizados de forma compreensvel
aos consumidores e disponibilizados para pronto acesso e
consulta pblica;
VIII - comunicar, imediatamente, autoridade de sade
pblica e informar, adequadamente, populao a deteco
de qualquer anomalia operacional no sistema ou no
conformidade na qualidade da gua tratada, identificada
como de risco sade, adotando-se as medidas previstas
no artigo 29 deste Anexo; e
IX - manter mecanismos para recebimento de queixas
providncias pertinentes.
Art. 10. Ao responsvel por soluo alternativa de
abastecimento de gua, nos termos do inciso XIII do artigo
7 deste Anexo, incumbe:
I - requerer, junto autoridade de sade pblica, autorizao
para o fornecimento de gua apresentando laudo sobre a
anlise da gua a ser fornecida, incluindo os parmetros de
qualidade previstos nesta Portaria, definidos por critrio da
referida autoridade;
II - operar e manter soluo alternativa que fornea gua
potvel em conformidade com as normas tcnicas aplicveis,
publicadas pela Associao Brasileira de Normas Tcnicas
(ABNT), e com outras normas e legislaes pertinentes;
116
III - manter e controlar a qualidade da gua produzida e

distribuda, por meio de anlises laboratoriais, nos termos
desta Portaria e, a critrio da autoridade de sade pblica,
de outras medidas conforme inciso II do artigo anterior;
IV - encaminhar autoridade de sade pblica, para fins de
comprovao, relatrios com informaes sobre o controle
da qualidade da gua, segundo modelo e periodicidade
estabelecidos pela referida autoridade, sendo no mnimo
trimestral;
V - efetuar controle das caractersticas da gua da fonte
de abastecimento, nos termos do artigo 19 deste Anexo,
notificando, imediatamente, autoridade de sade pblica
sempre que houver indcios de risco sade ou sempre que
amostras coletadas apresentarem resultados em desacordo
com os limites ou condies da respectiva classe de
enquadramento, conforme definido na legislao especfica
vigente;
VI - manter registros atualizados sobre as caractersticas da
gua distribuda, sistematizados de forma compreensvel
aos consumidores e disponibilizados para pronto acesso e
consulta pblica;
VII - comunicar, imediatamente, autoridade de sade
pblica competente e informar, adequadamente, populao
a deteco de qualquer anomalia identificada como de
risco sade, adotando-se as medidas previstas no artigo
29; e
VIII - manter mecanismos para recebimento de queixas
providncias pertinentes.
117
Captulo IV
Do padro de potabilidade
Art.11. A gua potvel deve estar em conformidade com o
padro microbiolgico conforme Tabela 1, a seguir:
Tabela 1 - Padro microbiolgico de potabilidade da

gua para consumo humano
Parmetro
VMP1
gua para consumo humano2
Escherichia coli ou coliformes
Ausncia em 100 ml
termotolerantes(3)
gua na sada do tratamento
Coliformes totais
Ausncia em 100 ml
gua tratada no sistema de distribuio (reservatrios e rede)
Escherichia coli ou coliformes
Ausncia em 100 ml
termotolerantes(3)
Coliformes totais
Sistemas que analisam 40 ou mais

amostras por ms: Ausncia em
100 ml em 95% das amostras
examinadas no ms
Sistemas que analisam menos de 40
amostras por ms: Apenas uma amostra
poder
apresentar
mensalmente
resultado positivo em 100 ml
Notas: (1) Valor Mximo Permitido.

(2) gua para consumo humano em toda e qualquer
situao, incluindo fontes individuais como poos, minas,
nascentes, dentre outras.
(3) a deteco de Escherichia coli deve ser preferencialmente
adotada.
1 No controle da qualidade da gua, quando forem

detectadas amostras com resultado positivo para coliformes
totais, mesmo em ensaios presuntivos, novas amostras devem
ser coletadas em dias imediatamente sucessivos at que as
novas amostras revelem resultado satisfatrio. Nos sistemas
118
de distribuio, a recoleta deve incluir, no mnimo, trs

amostras simultneas, sendo uma no mesmo ponto e duas
outras localizadas a montante e a jusante.
2 Amostras com resultados positivos para coliformes totais
devem ser analisadas para Escherichia coli e, ou, coliformes
termotolerantes, devendo, neste caso, ser efetuada a
verificao e confirmao dos resultados positivos.
3 O percentual de amostras com resultado positivo de
coliformes totais em relao ao total de amostras coletadas
nos sistemas de distribuio deve ser calculado mensalmente,
excluindo as amostras extras (recoleta).
4 O resultado negativo para coliformes totais das amostras
extras (recoletas) no anula o resultado originalmente positivo
no clculo dos percentuais de amostras com resultado
positivo.
5 Na proporo de amostras com resultado positivo
admitidas mensalmente para coliformes totais no sistema
de distribuio, expressa na Tabela 1, no so tolerados
resultados positivos que ocorram em recoleta, nos termos
do 1 deste artigo.
6 Em 20% das amostras mensais para anlise de coliformes
totais nos sistemas de distribuio, deve ser efetuada a
contagem de bactrias heterotrficas e, uma vez excedidas
500 unidades formadoras de colnia (UFC) por ml, devem
ser providenciadas imediata recoleta, inspeo local e, se
constatada irregularidade, outras providncias cabveis.
7 Em complementao, recomenda-se a incluso de
pesquisa de organismos patognicos, com o objetivo
de atingir, como meta, um padro de ausncia, dentre
outros, de enterovrus, cistos de Giardia spp e oocistos de
Cryptosporidium sp.
119
8 Em amostras individuais procedentes de poos,

fontes, nascentes e outras formas de abastecimento sem
distribuio canalizada, tolera-se a presena de coliformes
totais, na ausncia de Escherichia coli e, ou, coliformes
termotolerantes, nesta situao devendo ser investigada a
origem da ocorrncia, tomadas providncias imediatas de
carter corretivo e preventivo e realizada nova anlise de
coliformes.
Art. 12. Para a garantia da qualidade microbiolgica da gua,
em complementao s exigncias relativas aos indicadores
microbiolgicos, deve ser observado o padro de turbidez
expresso na Tabela 2, abaixo:
Tabela 2 - Padro de turbidez para gua ps-filtrao

ou pr-desinfeco
Tratamento da gua
VMP(1)
Desinfeco(gua subterrnea)
1,0 UT(2) em 95% das amostras
Filtrao rpida (tratamento completo ou filtrao direta)
1,0 UT(2)
Filtrao lenta
2,0 UT(2) em 95% das amostras
Notas: (1) Valor mximo permitido.

(2) Unidade de turbidez.
1 Dentre os 5% dos valores permitidos de turbidez

superiores aos VMP estabelecidos na Tabela 2, o limite
mximo para qualquer amostra pontual deve ser de 5,0 uT,
assegurado, simultaneamente, o atendimento ao VMP de 5,0
UT em qualquer ponto da rede no sistema de distribuio.
2 Com vistas a assegurar a adequada eficincia de
remoo de enterovrus, cistos de Giardia spp e oocistos de
Cryptosporidium sp., recomenda-se, enfaticamente, que, para
120
a filtrao rpida, se estabelea como meta a obteno de

efluente filtrado com valores de turbidez inferiores a 0,5 uT
em 95% dos dados mensais e nunca superiores a 5,0 uT.
3 O atendimento ao percentual de aceitao do limite
de turbidez, expresso na Tabela 2, deve ser verificado,
mensalmente, com base em amostras no mnimo dirias
para desinfeco ou filtrao lenta e a cada quatro horas
para filtrao rpida, preferivelmente, em qualquer caso, no
efluente individual de cada unidade de filtrao.
Art. 13. Aps a desinfeco, a gua deve conter um teor
mnimo de cloro residual livre de 0,5 mg/l, sendo obrigatria
a manuteno de, no mnimo, 0,2 mg/L em qualquer ponto da
rede de distribuio, recomendando-se que a clorao seja
realizada em pH inferior a 8,0 e tempo de contato mnimo
de 30 minutos.
Pargrafo nico. Admite-se a utilizao de outro agente
desinfetante ou outra condio de operao do processo de
desinfeco, desde que fique demonstrado pelo responsvel
pelo sistema de tratamento uma eficincia de inativao
microbiolgica equivalente obtida com a condio definida
neste artigo.
Art.14. A gua potvel deve estar em conformidade com o
padro de substncias qumicas que representam risco para
a sade expresso na Tabela 3, a seguir:
121
Tabela 3 - Padro de potabilidade para substncias

qumicas que representam risco sade
Parmetro
Antimnio
Arsnio
Brio
Cdmio
Cianeto
Chumbo
Cobre
Cromo
Fluoreto(2)
Mercrio
Nitrato (como N)
Nitrito (como N)
Selnio
Acrilamida
Benzeno
Benzoalpireno
Cloreto de metila
1,2 Dicloroetano
1,1 Dicloroetano
Diclorometano
Estireno
Tetracloreto de carbono
Tetracloroeteno
Triclorobenzenos
Tricloroeteno
Alaclor
Aldrin e Dieldrin
Atrazina
Bentazona
Clordano (Ismeros)
2,4 D
DDT (Ismeros)
Endosulfan
Endrin
122
Unidade
VMP(1)
Inorgnicas
mg/l
mg/l
mg/l
mg/l
mg/l
mg/l
mg/l
mg/l
mg/l
mg/l
mg/l
mg/l
mg/l
0,005
0,01
0,7
0,005
0,07
0,01
2
0,05
1,5
0,001
10
1
0,01
Orgnicas
g/l
g/l
g/l
g/l
g/l
g/l
g/l
g/l
g/l
g/l
g/l
g/l
0,5
5
0,7
5
10
30
20
20
2
40
20
70
Agrotxicos
g/l
g/l
g/l
g/l
g/l
g/l
g/l
g/l
g/l
20,0
0,03
2
300
0,2
30
2
20
0,6
Continuao
Parmetro
Unidade
VMP(1)
Agrotxicos
Glifosato
g/l
Heptacloro e Heptacloro
epxido
Hexaclorobenzeno
Lindano -BHC
Metolacloro
]Metoxicloro
Molinato
Pendimetalina
Pentaclorofenol
Permetrina
Propanil
Simazina
Triuralina
Microcistina(3)
g/l
g/l
g/l
g/l
g/l
g/l
g/l
g/l
g/l
g/l
g/l
g/l
Cianotoxinas
g/l
500
0,03
1
2
10
20
6
20
9
20
20
2
20
1,0
Desinfetantes e produtos secundrios da desinfeco(4)

Bromato
mg/l
0,025
Clorito
mg/l
0,2
Cloro livre (4)
mg/l
5
Monocloroamina
mg/l
3
2,4,6 triclorofenol
mg/l
0,2
Trihalometanos Total
mg/l
0,1
Notas: (1) Valor Mximo Permitido.

(2) Os valores recomendados para a concentrao de on
fluoreto devem observar legislao especfica vigente
relativa fluoretao da gua, em qualquer caso devendo
ser respeitado o VMP desta Tabela
(3) aceitvel a concentrao de at 10 g/l de
microcistinas em at 3 (trs) amostras, consecutivas ou
no, nas anlises realizadas nos ltimos 12 (doze) meses.
(4) Anlise exigida de acordo com o desinfetante
utilizado.
123
1 Recomenda-se que as anlises para cianotoxinas incluam

a determinao de cilindrospermopsina e saxitoxinas (STX),
observando, respectivamente, os valores limites de 15,0 g/l
e 3,0 g/l de equivalentes STX/l.
2 Para avaliar a presena dos inseticidas organofosforados
e carbamatos na gua, recomenda-se a determinao da
atividade da enzima acetilcolinesterase, observando os
limites mximos de 15% ou 20% de inibio enzimtica,
quando a enzima utilizada for proveniente de insetos ou
mamferos, respectivamente.
Art. 15. A gua potvel deve estar em conformidade com o
padro de radioatividade expresso na Tabela 4, a seguir:
Tabela 4 - padro de radioatividade para gua potvel
Parmetro
Unidade
VMP(1)
Radioatividade alfa global
Bq/L
0,1(2)
Radioatividade beta global
Bq/L
1,0(2)

(2) Se os valores encontrados forem superiores aos VMP,
dever ser feita a identificao dos radionucldeos presentes
e a medida das concentraes respectivas. Nesses casos,
devero ser aplicados, para os radionucldeos encontrados,
os valores estabelecidos pela legislao pertinente da
Comisso Nacional de Energia Nuclear (CNEN), para se
concluir sobre a potabilidade da gua.
Art. 16. A gua potvel deve estar em conformidade com

o padro de aceitao de consumo expresso na Tabela 5,
a seguir:
124
Tabela 5 - padro de aceitao para consumo humano

Parmetro
Alumnio
Amnia (como NH3)
Cloreto
Cor Aparente
Dureza
Etilbenzeno
Ferro
Gosto
Mangans
Monoclorobenzeno
Odor
Sdio
Slidos dissolvidos totais
Sulfato
Sulfeto de Hidrognio
Surfactantes
Tolueno
Turbidez
Zinco
Xileno
Unidade
VMP(1)
mg/l
mg/l
mg/l
uH(2)
mg/l
mg/l
mg/l
mg/l
mg/l
mg/l
mg/l
mg/l
mg/l
mg/l
mg/L
uT(4)
mg/l
mg/l
0,2
1,5
250
15
500
0,2
0,3
No objetvel(3)
0,1
0,12
No objetvel(3)
200
1000
250
0,05
0,5
0,17
5
5
0,3

(2) Unidade Hazen (mg Pt-Co/L).
(3) critrio de referncia
(4) Unidade de turbidez.
1 Recomenda-se que, no sistema de distribuio, o pH da

gua seja mantido na faixa de 6,0 a 9,5.
2 Recomenda-se que o teor mximo de cloro residual
livre, em qualquer ponto do sistema de abastecimento, seja
de 2,0 mg/l.
3 Recomenda-se a realizao de testes para deteco de
odor e gosto em amostras de gua coletadas na sada do
tratamento e na rede de distribuio de acordo com o plano
mnimo de amostragem estabelecido para cor e turbidez nas
Tabelas 6 e 7.
125
Art. 17. As metodologias analticas para determinao

dos parmetros fsicos, qumicos, microbiolgicos e de
radioatividade devem atender s especificaes das normas
nacionais que disciplinem a matria, da edio mais recente
da publicao Standard Methods for the Examination of
Water and Wastewater, de autoria das instituies American
Public Health Association (APHA), American Water Works
Association (AWWA) e Water Environment Federation
(WEF), ou das normas publicadas pela ISO (International
Standartization Organization).
1 Para anlise de cianobactrias e cianotoxinas
e comprovao de toxicidade por bioensaios em
camundongos, at o estabelecimento de especificaes
em normas nacionais ou internacionais que disciplinem a
matria, devem ser adotadas as metodologias propostas pela
Organizao Mundial da Sade (OMS) em sua publicao
Toxic cyanobacteria in water: a guide to their public health
consequences, monitoring and management.
2 Metodologias no contempladas nas referncias citadas
no 1 e caput deste artigo, aplicveis aos parmetros
estabelecidos nesta Norma, devem, para ter validade, receber
aprovao e registro pela SVS.
3 As anlises laboratoriais para o controle e a vigilncia
da qualidade da gua podem ser realizadas em laboratrio
prprio ou no que, em qualquer caso, deve manter programa
de controle de qualidade interna ou externa ou ainda ser
acreditado ou certificado por rgos competentes para esse
fim.
126
Captulo V
Dos planos de amostragem
At. 18. Os responsveis pelo controle da qualidade da
gua de sistema ou soluo alternativa de abastecimento
de gua devem elaborar e aprovar, junto a autoridade de
sade pblica, o plano de amostragem de cada sistema,
respeitando os planos mnimos de amostragem expressos nas
Tabelas 6, 7, 8 e 9.
Tabela 6 - Nmero mnimo de amostras para o controle da
qualidade da gua de sistema de abastecimento, para fins
de anlises fsicas, qumicas e de radioatividade, em funo
do ponto de amostragem, da populao abastecida e do
tipo de manancial.
Parmetro
Tipo de
manancial
Sada do
trata-mento
(nmero de
amostra por
unidade de
tra-tamento)
Sistema de distribuio (reservatrios e

rede)
Populao abastecida
< 50.000
hab
Superficial
10
Subterrneo
Superficial
Subterrneo
Fluoreto
Superficial ou
Subterrneo
Cianotoxinas
Superficial
Trihalometanos
Superficial
Subterrneo
1
-
D e m a i s
parme-tros (3)
Superficial ou
Subterrneo
Cor
Turbidez
pH
Cl (1)
50.000 a
250.000
hab
> 250.000
hab
40 + (1 para
1 para cada
cada 25.000
5.000 hab
hab)
20 +(1 para
1 para cada
cada 50.000
10.000 hab
hab)
(Conforme 3 do artigo 18)
1 para
cada
10.000
hab
1
(2)
1
4(2)
1(2)
1(2)
1(4)
1(4)
20 +(1 para
cada 50.000
hab)
4(2)
1(2)
1(4)
Notas: (1) Cloro residual livre.

(2) As amostras devem ser coletadas, preferencialmente,
em pontos de maior tempo de deteno da gua no sistema
de distribuio.
127
(3) Apenas ser exigida obrigatoriedade de investigao

dos parmetros radioativos quando da evidncia de causas
de radiao natural ou artificial.
(4) Dispensada anlise na rede de distribuio quando
o parmetro no for detectado na sada do tratamento
e, ou, no manancial, exceo de substncias que
potencialmente possam ser introduzidas no sistema ao
longo da distribuio.
Tabela 7 - Freqncia mnima de amostragem para o controle

da qualidade da gua de sistema de abastecimento, para fins
de anlises fsicas, qumicas e de radioatividade, em funo
do ponto de amostragem, da populao abastecida e do tipo
de manancial.
Tipo de
manancial
Parmetro
Cor
Turbidez
pH
Fluoreto
Superficial
Subterrneo
Superficial
Cl (1)
Subterrneo
Sada do tratamento (nmero

de amostra por
unidade de
trata-mento)
A cada duas
horas
Diria
A cada duas
horas
Diria
Sistema de distribuio (reservatrios e rede)
< 50.000 hab
50.000 a
250.000
hab
> 250.000 hab
Mensal
mensal
mensal
Semanal
Cianotoxinas
Superficial
(Conforme 5
do artigo 18)
Superficial
Trihalometanos
Subterrneo
Demais parmetros (2)
Trimestral
Trimestral
Trimestral
Trimestral
Anual
Semestral
Semestral
Semestral
Semestral(3)
Semestral(3)
Semestral(3)
Superficial
ou
Subterrneo
Notas: (1) Cloro residual livre.

(2) Apenas ser exigida obrigatoriedade de investigao
dos parmetros radioativos quando da evidncia de causas
de radiao natural ou artificial.
(3) Dispensada anlise na rede de distribuio quando o
parmetro no for detectado na sada do tratamento e, ou,
no manancial, exceo de substncias que potencialmente
possam ser introduzidas no sistema ao longo da distribuio.
128
Tabela 8 - Nmero mnimo de amostras mensais para o controle da qualidade da gua de sistema de abastecimento, para
fins de anlises microbiolgicas, em funo da populao
abastecida.
Sistema de distribuio (reservatrios e rede)
Populao abastecida
Parmetro
< 5.000 hab
Coliformes
totais
10
5.000 a
20.000 hab
20.000 a
250.000 hab
>250.000 hab
1 para cada
500 hab
30 + (1 para
cada
2.000 hab.)
105 + (1 para
cada 5.000
hab.)
Mximo de
1.000
Nota: na sada de cada unidade de tratamento devem ser

coletadas, no mnimo, 2 (duas) amostra semanais,
recomendando-se a coleta de, pelo menos, 4 (quatro)
amostras semanais.
Tabela 9 - Nmero mnimo de amostras e freqncia mnima

de amostragem para o controle da qualidade da gua de
soluo alternativa, para fins de anlises fsicas, qumicas e
microbiolgicas, em funo do tipo de manancial e do ponto
de amostragem.
Parmetro
Tipo de
manancial
Cor
Superficial
Turbidez
pH e
Coliformes
Subterrneo
totais(2)
CRL (2)(3)
Superficial
ou
Subterrneo
Nmero de
Sada do amostras retiraFreqncia
tratamento das no ponto de
de
( para gua consumo para
amostragem
canalizada) cada 500 hab.
(1)
1
Semanal
Mensal
Dirio
129
Notas: (1) Devem ser retiradas amostras em, no mnimo, 3 pontos

de consumo de gua.
(2) Para veculos transportadores de gua para consumo
humano, deve ser realizada 1 (uma) anlise de CRL em
cada carga e 1 (uma) anlise, na fonte de fornecimento,
de cor, turbidez, PH e coliformes totais com freqncia
mensal, ou outra amostragem determinada pela autoridade
de sade pblica.
(3) Cloro residual livre.
1 A amostragem deve obedecer aos seguintes requisitos:

I - distribuio uniforme das coletas ao longo do perodo; e
II - representatividade dos pontos de coleta no sistema
de distribuio (reservatrios e rede), combinando critrios
de abrangncia espacial e pontos estratgicos, entendidos
como aqueles prximos a grande circulao de pessoas
terminais rodovirios, terminais ferrovirios, etc.) ou edifcios
que alberguem grupos populacionais de risco (hospitais,
creches, asilos, etc.), aqueles localizados em trechos
vulnerveis do sistema de distribuio (pontas de rede, pontos
de queda de presso, locais afetados por manobras, sujeitos
intermitncia de abastecimento, reservatrios, etc.) e locais
com sistemticas notificaes de agravos sade tendo como
possveis causas agentes de veiculao hdrica.
2 No nmero mnimo de amostras coletadas na rede de
distribuio, previsto na Tabela 8, no se incluem as amostras
extras (recoletas).
3 Em todas as amostras coletadas para anlises
microbiolgicas deve ser efetuada, no momento da coleta,
medio de cloro residual livre ou de outro composto residual
ativo, caso o agente desinfetante utilizado no seja o cloro.
4 Para uma melhor avaliao da qualidade da gua
distribuda, recomenda-se que, em todas as amostras
130
referidas no 3 deste artigo, seja efetuada a determinao

de turbidez.
5 Sempre que o nmero de cianobactrias na gua do
manancial, no ponto de captao, exceder 20.000 clulas/ml
(2mm3/l de biovolume), durante o monitoramento que trata
o 3 do artigo 19, ser exigida a anlise semanal de
cianotoxinas na gua na sada do tratamento e nas entradas
(hidrmetros) das clnicas de hemodilise e indstrias de
injetveis, sendo que esta anlise pode ser dispensada
quando no houver comprovao de toxicidade na gua
bruta por meio da realizao semanal de bioensaios em
camundongos.
Art. 19. Os responsveis pelo controle da qualidade da gua de
sistemas e de solues alternativas de abastecimento supridos
por manancial superficial devem coletar amostras semestrais
da gua bruta, junto do ponto de captao, para anlise de
acordo com os parmetros exigidos na legislao vigente
de classificao e enquadramento de guas superficiais,
avaliando a compatibilidade entre as caractersticas da gua
bruta e o tipo de tratamento existente.
1 O monitoramento de cianobactrias na gua do
manancial, no ponto de captao, deve obedecer freqncia
mensal, quando o nmero de cianobactrias no exceder
10.000 clulas/ml (ou 1mm3/l de biovolume), e semanal,
quando o nmero de cianobactrias exceder este valor.
2 vedado o uso de algicidas para o controle do
crescimento de cianobactrias ou qualquer interveno
no manancial que provoque a lise das clulas desses
microrganismos, quando a densidade das cianobactrias
exceder 20.000 clulas/ml (ou 2mm3/l de biovolume), sob
pena de comprometimento da avaliao de riscos sade
associados s cianotoxinas.
131
Art. 20. A autoridade de sade pblica, no exerccio

das atividades de vigilncia da qualidade da gua, deve
implementar um plano prprio de amostragem, consoante
diretrizes especficas elaboradas no mbito do Sistema nico
de Sade - SUS.
Captulo VI
Das exigncias aplicveis aos sistemas e solues
alternativas de abastecimento de gua
Art. 21. O sistema de abastecimento de gua deve contar com
responsvel tcnico, profissionalmente habilitado.
Art. 22. Toda gua fornecida coletivamente deve ser
submetida a processo de desinfeco, concebido e operado
de forma a garantir o atendimento ao padro microbiolgico
desta Norma.
Art. 23. Toda gua para consumo humano suprida por
manancial superficial e distribuda por meio de canalizao
deve incluir tratamento por filtrao.
Art. 24. Em todos os momentos e em toda sua extenso, a
rede de distribuio de gua deve ser operada com presso
superior atmosfrica.
1 Caso esta situao no seja observada, fica o responsvel
pela operao do servio de abastecimento de gua obrigado
a notificar a autoridade de sade pblica e informar
populao, identificando perodos e locais de ocorrncia de
presso inferior atmosfrica.
2 Excepcionalmente, caso o servio de abastecimento de
gua necessite realizar programa de manobras na rede de
distribuio, que possa submeter trechos a presso inferior
atmosfrica, o referido programa deve ser previamente
comunicado autoridade de sade pblica.
132
Art. 25. O responsvel pelo fornecimento de gua por meio

de veculos deve:
I - garantir o uso exclusivo do veculo para este fim;
II - manter registro com dados atualizados sobre o fornecedor
e, ou, sobre a fonte de gua; e
III - manter registro atualizado das anlises de controle da
qualidade da gua.
1 A gua fornecida para consumo humano por meio de
veculos deve conter um teor mnimo de cloro residual livre
de 0,5 mg/l.
2 O veculo utilizado para fornecimento de gua deve
conter, de forma visvel, em sua carroceria, a inscrio:
gua potvel.
Captulo VII
Das penalidades
Art. 26. Sero aplicadas as sanes administrativas cabveis,
aos responsveis pela operao dos sistemas ou solues
alternativas de abastecimento de gua, que no observarem
as determinaes constantes desta Portaria.
Art. 27. As Secretarias de Sade dos Estados, do Distrito
Federal e dos municpios estaro sujeitas a suspenso de
repasse de recursos do Ministrio da Sade e rgos ligados,
diante da inobservncia do contido nesta Portaria.
Art. 28. Cabe ao Ministrio da Sade, por intermdio da SVS/
MS, e s autoridades de sade pblica dos Estados, do Distrito
Federal e dos Municpios, representadas pelas respectivas
Secretarias de Sade ou rgos equivalentes, fazer observar
o fiel cumprimento desta Norma, nos termos da legislao
que regulamenta o Sistema nico de Sade (SUS).
133
Captulo VIII
Das disposies finais
Art. 29. Sempre que forem identificadas situaes de risco
sade, o responsvel pela operao do sistema ou soluo
alternativa de abastecimento de gua e as autoridades de
sade pblica devem estabelecer entendimentos para a
elaborao de um plano de ao e tomada das medidas
cabveis, incluindo a eficaz comunicao populao,
sem prejuzo das providncias imediatas para a correo
da anormalidade.
Art. 30. O responsvel pela operao do sistema ou
soluo alternativa de abastecimento de gua pode solicitar
autoridade de sade pblica a alterao na freqncia
mnima de amostragem de determinados parmetros
estabelecidos nesta Norma.
Pargrafo nico. Aps avaliao criteriosa, fundamentada
em inspees sanitrias e, ou, em histrico mnimo de
dois anos do controle e da vigilncia da qualidade da
gua, a autoridade de sade pblica decidir quanto ao
deferimento da solicitao, mediante emisso de documento
especfico.
Art. 31. Em funo de caractersticas no conformes com
o padro de potabilidade da gua ou de outros fatores
de risco, a autoridade de sade pblica competente,
com fundamento em relatrio tcnico, determinar ao
responsvel pela operao do sistema ou soluo alternativa
de abastecimento de gua que amplie o nmero mnimo
de amostras, aumente a freqncia de amostragem ou
realize anlises laboratoriais de parmetros adicionais ao
estabelecido na presente Norma.
Art. 32. Quando no existir na estrutura administrativa
do estado a unidade da Secretaria de Sade, os deveres e
responsabilidades previstos no artigo 6 deste Anexo sero
cumpridos pelo rgo equivalente.
134
Apndice
No final da elaborao deste manual, j revisado e

adaptado para a atual legislao sobre qualidade de gua
para consumo humano, foram includos os procedimentos
bsicos de coleta de amostras de gua para a quantificao
das cianobactrias e anlise das cianotoxinas em mananciais
de abastecimento. A finalidade da incluso deste tpico
orientar os operadores de ETAs a se familiarizarem com
o procedimento para tomada de posio quando o fato
ocorrer ou houver necessidade de atuao.
O estudo das cianobactrias, atualmente, tem sido a
coqueluche do momento. Depois do acidente ocorrido
em uma clnica de hemodilise na cidade de Caruar-PE, as
autoridades sanitrias do pas, passaram a dar mais ateno
questo que se tornou um grande problema para a sade
pblica, culminando com a sua incluso na legislao
que trata da potabilidade da gua, como parmetro de
controle.
A Fundao Nacional de Sade, entidade ligada
ao Ministrio da Sade, patrocinou a realizao de dois
eventos que tratam do estudo das Cianobactrias txicas: o
primeiro foi realizado na cidade do Rio de Janeiro no ano de
2001 e o segundo durante o 1 Seminrio Internacional de
Sade Pblica realizado na cidade de Recife-PE em 2002.
Neste ltimo evento, foi ministrado um curso sobre
Diagnstico Preliminar da Ocorrncia de Cianobactrias
em Mananciais de gua para Consumo Humano tendo
como instrutoras as Professoras Sandra M. F. O. Azevedo e
Vera L. M. Huszar, ambas especialistas no assunto.
Durante o curso, foram abordados a ocorrncia de
Cianobactrias em mananciais de abastecimento, os perigos
que representam para a sade dos animais, principalmente
do homem, as formas de preveno das floraes, os
limites tolerveis, tanto de clulas quanto de toxinas e os
procedimentos de coleta para anlise de cianobactrias
em gua bruta e cianotoxinas em amostras de gua bruta
136
e tratada. Com o material fornecido pelas instrutoras, foi

possvel incluir neste manual os procedimentos de coleta.
Procedimento de coleta de amostras para

quantificao de cianobactrias em gua bruta
Material necessrio
a) Frasco de vidro cor mbar de 100 ml.
b) Garrafa de van Dorn ou Similar.
c) Soluo de lugol (fixador).
Local da coleta
a) Ponto de captao (tomada dgua);
b) Amostras de superfcie;
c) Amostras de vrias profundidades(estratificadas).
Tcnica
Amostra de superfcie
a) Encher o recipiente (frasco de 100 mL) com gua da
superfcie ou do ponto de captao;
b) Adicionar 1 mL da soluo de lugol;
c) A amostra preservada dura 10 semanas (aprox. 3
meses).
Amostras de profundidade
a) Mergulhar a garrafa de van Dorn at a profundidade
desejada;
b) Ench-la e retornar superfcie;
137
c) Desconectar a parte superior da mangueira que fica

na lateral da garrafa e encher o frasco de 100 ml;
d) Adicionar ao frasco de coleta (100 ml), 1 ml da soluo
de lugol;
e) A amostra preservada com lugol dura aproximadamente
3 meses.
Identificao das amostras
a) Identificar as amostras anotando o local da coleta,
as profundidades (se forem coletadas a vrias
profundidades), a data e hora da coleta, o nome do
coletador, etc.
Destino das amostras

a) As amostras podem ser analisadas no prprio laboratrio
da ETA, caso haja condies, ou serem enviadas para
laboratrios especializados.
Procedimento de coleta de amostras de gua

brutra para anlise de cianotoxinas
Frao Particulada
Material necessrio
a) Frasco de plstico;
b) Filtro de fibra de vidro;
c) Conjunto de filtrao;
d) Garrafa de van Dorn ou similar.
138
Tcnica
a) Coletar 1 litro de gua bruta a 10 cm da superfcie ou
na profundidade do ponto de captao de gua;
b) Filtrar a amostra utilizando quantos filtros forem
necessrios;
c) Secar os filtros a uma temperatura no superior a
50C;
d) Pesar os filtros e determinar o peso do material
retido;
e) Enviar os filtros secos (50C) o mais rapidamente
possvel para o laboratrio, sem a necessidade de
refrigerao, identificando o local e data da coleta e
o peso do material retido.
Nota: O material retido calculado pela diferena de peso entre
o filtro virgem e o peso seco obtido aps filtrao.
Frao dissolvida
a)
Coletar 1 litro de gua bruta a 10 cm da superfcie ou

na profundidade do ponto de captao de gua;
b) Filtrar a amostra utilizando quantos filtros forem

necessrios;
c) Recolher a poro filtrada em um frasco plstico;
d) Refrigerar ou congelar a poro filtrada;
e) Enviar para o laboratrio, em caixa de isopor,
informando a origem da amostra, local e data da
coleta.
139
Procedimento de coleta de amostras de gua

tratada para anlise de cianotoxinas
a) Coletar 1 litro de gua tratada no reservatrio a 10 cm da
superfcie;
b) Congelar ou resfriar a amostra
c) Enviar para o laboratrio, em caixa de isopor, informando
a origem da amostra, local e data da coleta.
Lavagem dos frascos:

a) Sugere-se para lavar os frascos de coleta e acondicionamento
de amostras para anlise de cianotoxinas o seguinte
procedimento: deix-los previamente imersos em sabo
neutro por 12 horas, depois lavar exaustivamente com
gua e colocar em soluo de HCl a 5% durante 12 horas,
lavar novamente e exaustivamente com gua destilada e
140
secar. Caso o frasco j tenha sido utilizado anteriormente

para coleta de amostras contendo cianobactrias, deix-lo
em uma soluo de gua sanitria por 30 minutos antes
de passar pelo sabo neutro.
b) A garrafa de van Dorn (fig.) consiste de um tubo de PVC
com volume de 2; 5 e 7 litros ou mais. O funcionamento
consiste em mergulhar a garrafa aberta em ambas as
extremidades e aps atingir o ponto desejado, deixa-se
cair o mensageiro que fecha hermeticamente as duas
extremidades. A amostra retirada pela mangueira que
fica na parte lateral da garrafa desconectando a parte
superior.
141
Bibliografia
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144
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SILVA, M.O.S.A. Anlises fsico-qumicas para controle de
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wastewater. 16th ed. Washington: APHA, 1985.
TCNICAS de abastecimento e tratamento de gua. 2 ed.
So Paulo: Cetesb, 1977. V.2.
TCNICAS de anlises microbiolgicas da gua; membrana
filtrante, 1 ed. So Paulo: Cetesb, 1997.
145
Elaborao
Marinaldo da Silva Valente/Core/AM/Funasa
Colaboradores
Osman de Oliveira Lira/Core/PE/Funasa
Nilce Bazzoli/Core/MG/Funasa
Jlio Csar Reis da Silva/Core/MA/Funasa
Raimundo Rodrigues dos Santos Filho/Core/MA/Funasa
Miguel Crisstomo Leite Brito/Densp/Funasa
Coordenao
Maria Fernanda Bittencourt/Densp/Funasa
Reviso tcnica
Felizana M.M. da S. Palhano/Densp/Funasa
Girlene Rodrigues Leite/Densp/Funasa
Ilustrao
Leonardo Ribeiro da Silva Terra/Ascom/Presi/Funasa
Projeto grfico e capa
Glacia Elizabeth de Oliveira/Ascom/Presi/Funasa
Diagramao
Maria Clia de Souza/Ascom/Presi/Funasa
Reviso Ortogrfica e Gramatical
Olinda Myrtes Bayma S. Melo/Ascom/Presi/Funasa/MS
Reviso bibliogrfica
Raquel Machado Santos/Ascom/Presi/Funasa
146

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esterilizar a 121 C (1 Kg/cm2 de presso) em autoclave

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Pesar 81,1 gramas de Cloreto de Magnsio

Adicionar 1,25 ml da soluo 1 e 5 ml da soluo 2 a

Esterilizar em autoclave a 121 C (1Kg/cm2 de presso)

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Fonte: OMS, 1998

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g) caldo Lactosado de concentrao dupla.

caldo Lactosado Verde Brilhante Bile a 2%.

k) ala de platina com cabo de Kolle.

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se no final de 24/48 horas, houver a formao de

Observao: No lugar do caldo Lactosado pode ser usado o

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b) tomar igual nmero de tubos contendo o meio de

se no final do perodo de 24/48 horas houver a

Nota: CL = Caldo lactosado

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Expresso dos resultados

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Tabela 1 do NMP com limite de confiana de 95% para

Fundao Nacional de Sade

Fonte: APHA, 1985

Tabela 2 do NMP com limite de confiana de 95% para

Fonte: APHA, 1985

calcular o N.M.P consultando a tabela 1.

Nota: Este ensaio deve ser realizado simultaneamente com o

Contagem padro de bactrias

Fundao Nacional de Sade

d) plate Count Agar;

d) o Tiossulfato de Sdio a 10% colocado nos frascos de

fazer a Contagem Padro de Bactrias, sempre em

bomba de vcuo (Seringa);

Fundao Nacional de Sade

b) com pipeta esterilizada colocar 1,8 ml do meio de

g) ligar a bomba de vcuo (seringa) e fazer a suco;