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Instituto de Cincias Biomdicas Abel Salazar
Microbiologia Geral
2008-2009
Autor(a) Desonhecido(a), passada a computador por Maria Morais
Bacteriologia
Estrutura da clula procaritica
Forma:
- Esfrica: cocos;
- Bastonete ou cilindro: bacilos;
- Espiral: espirilos (rgidos), espiroquetas (flexveis);
- Vrgula: vibries;
- Pleomrfica (varivel).
A forma da bactria determinada pela parede celular.
Diviso celular e forma:
Cocos: 1 plano de diviso diplococos Bacilos: diplobacilos
Estreptococos estreptobacilos
Palissadas
2 planos de diviso ttradas
3 planos de diviso Sarcina
Estafilococos
As bactrias variam em tamanho tanto quanto em forma: as mais pequenas tm

aproximadamente 0,3 m de (ex: Mycoplasma, nanobactrias e ultramicobactrias) e
as maiores podem chegar aos 500 m.
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2 Sebenta de Microbiologia
Geral
2008-2009
E. coli 1,1 a 1,5 m largura x 2 a 6 m comprimento
Poucas bactrias so maiores que a mdia das clulas eucariticas (10 a 15 m

).
Estrutura da clula bacteriana
- Invlucro celular: parede celular + membrana plasmtica.
- Citoplasma: nucleide (sem invlucro)
Ribossomas
Incluses
Estruturas membranares
- Apndices: flagelos e fmbrias
Cpsulas
Composio do citoplasma de Escherichia coli
- HO: 70%
- Massa seca: C (50%), O (20%), N (14%), H (8%), P (3%), K (2%), S (1%),

Ca, Mg e Cl (0,05% cada) e Fe (0,2%).
- 95% so macromolculas: RNA (20%), protenas (50%) peptidoglicano

(2,5%)
S eubactrias que o possuem:
Responsvel pela estrutura da

parede
Membrana
- Fosfolpidos:
- Fosfatidil-etanolamina;
- Fosfatidil-glicerol;
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Sebenta de Microbiologia Geral
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2008-2009
- Fosfatidil-serina;
- Cardiolipina.
- No tem:
- Fosfatidil-colina;
- Esfingomielina;
- Glicolpidos.
- Colesterol (no sintetizado pelas bactrias)
- Mycoplasma no tem parede adquiriu o colesterol do

hospedeiro.
- Hopanides So molculas semelhantes ao colesterol, sintetizados a

partir do mesmo precursor; provavelmente sintetizam a mesma bactria.
- Protenas Perifricas (20 a 30%) e integrais (70 a 80%).
Funes da membrana:
- Permeabilidade selectiva barreira fsica; sistemas de transporte;
- Respirao cadeia respiratria + ATPase;
- Transporte de nutrientes sistema simporte e antiporte;
- Secreo sistema secreo;
- Locomoo (quimiotaxia) motor do flagelo;
- Diviso ligao ao cromossoma;
- Sntese da parede celular PBP, bactoprenol (molcula carregadora de

precursores do peptidoglicano; altamente hidrofbica).
Normalmente as membranas plasmticas tm maior proporo de protenas do que

as membranas eucariticas.
Transporte
- Transporte com translocao de grupo;
- Transporte ABC (cassette que liga ATP).
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Geral
2008-2009
Respirao
Sistemas de secreo de protenas em bactrias:
- Tipo I, II, III, IV, V.
Mesossomas
So invaginaes da membrana plasmtica com forma de vesculas,

tbulos ou lamelas. Actualmente cr-se que os mesossomas so apenas artefactos
formados durante a fixao das bactrias para a microscopia electrnica.
Nucleide
- Local onde se encontra o cromossoma procaritico e cuja principal

caracterstica (que os difere dos eucariotas) a ausncia de invlucro nuclear.
- Constitudo por DNA circular (60%), RNA (30%), protenas (10%).
- As protenas do nucleide no so histonas.
- DNA girase a enzima que provoca o enrolamento do DNA,

enrolamento esse que necessrio para a replicao. A enzima inibida pelas
quinolonas.
- Plasmdeos - Molculas de DNA circulares mais pequenas que tambm

podem estar presentes.
Corpos de incluso grnulos de armazenamento de:
- Lpidos (grnulos de poli--hidroxibutirato. : 0,2 a 0,7 m) So

reservatrios de carbono,
- Polissacardeos (glicognio) providenciando material p/

energia e biossntese.
- Polifosfatos: grnulos de votulina ou metacromticos. So incluses

inorgnicas que funcionam como reservas de fosfatos, um importante
componente dos cidos nucleicos (ex: Corynebacterium
diphteriae).
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- Enxofre Outra incluso inorgnica, presente nas bactrias

fotossintticas.
- Pptidos Grnulos de cianoficinas: arginina + aspartato.

Carboxissomas: contm a enzima ribulose 1,5 difosfato carboxilase.
- Magnetossomas So incluses que contm ferro e magnetite. Servem

para algumas bactrias se orientarem no campo magntico da Terra.
Vesculas (vacolos) de gs
- Presente em muitas cianobactrias;
- So agregados de um grande nmero de pequenas vesculas de gs;
- As paredes das vesculas no possuem lpidos e so constitudas apenas

por uma pequena protena.
- As bactrias com estes vacolos podem regular o seu grau de

flutuamento e a profundidade necessria para terem intensidade de luz
apropriada, concentrao de O2 e nveis adequados de
nutrientes.
Ex: cianobactrias
Ribossomas:
- Podem localizar-se: Na matriz citoplasmtica sintetizam protenas

destinadas a ficarem na clula
Na membrana plasmtica Sintetizam protenas para

transportarem para o exterior.
Parede Celular
a camada, normalmente rgida, que se localiza por fora da membrana plasmtica.

uma das partes mais importantes das clulas procariticas por vrias razes: do
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Geral
2008-2009
forma, protegem da lise osmtica, protegem a clula das substncias txicas e so stio
de aco de vrios antibiticos.
Colorao de Gram - importante na prtica clnica
Fixador: calor
Corante primria (violeta de cristal)
Mordente (iodo)
Acetona
Contrastante
As bactrias Gram + coram com o 1 corante , ficando com uma colorao azul-
violeta. Enquanto que as bactrias Gram- coram com o 2 corante adquirindo uma
colorao rosa-avermelhada.
Essas diferenas devem-se presena do peptidoglicano, em diferentes

quantidades e disposies nas bactrias Gram+ e Gram-.
O peptidoglicano em sim no corado, no entanto, actua como uma barreira de

permeabilidade que impede a perda do corante violeta de cristal.
Durante o procedimento da colorao, as bactrias so primeiro coradas com o

violeta de cristal e depois tratadas com iodo para promover a reteno,
Quando as bactrias Gram+ so depois descoloridas com acetona, pensa-se que

esta diminui os poros da grossa camada de peptidoglicano. Como tal, o complexo do
corante + iodo retido durante a rpida descolorao e as bactrias permanecem
arroxeadas.
Em contraste, o peptidoglicano das Gram bastante fino, sem grandes ligaes e

tem poros largos. A acetona ainda aumenta mais a sua porosidade ao remover o
complexo corante iodo das bactrias Gram-.
Invlucro das bactrias Gram +
A sua parede celular consiste numa camada homognea de peptidoglicano ou

murena, de espessura entre 20 a 80 nm.
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Tambm contm grandes quantidades de cidos teicicos (polmeros de glicerol ou

ribitol juntos por grupos fosfato), estes encontram-se ligados ou ao peptidoglicano ou
aos lpidos da membrana plasmtica.
Como esto carregados negativamente, ajudam a dar parede celular Gram+ a

sua carga negativa. Ajudam a manter a estrutura da parede.
Os cidos teicicos no esto presentes nas Gram-.
Contm um polmero que forma uma rede: peptidoglicano ou murena. O invlucro

das bactrias Gram- possui membrana citoplasmtica, um polmero de peptidoglicano
(mas mais fino) e um folheto externo com lipopolissacardeo.
Invlucro de bactrias Gram-
A fina camada de peptidoglicano, nestas bactrias, apenas representa entre 5 a

10% do peso da parede.
Existe uma protena: lipoprotena de Brauns que liga firmemente a membrana

externa e o peptidoglicano.
A membrana externa constituda por lipopolissacardeos (cobrem todo o

exterior da bactria), largas e complexas molculas que contm lpidos e carbohidratos.
Uma das suas funes evitar as defesas do hospedeiro.
A membrana externa serve como barreira de proteco, ao prevenir ou demorar a

entrada de sais biliares, antibiticos ou outras substncias txicas. Apesar de tudo, a
membrana externa mais permevel que a membrana plasmtica.
O espao periplasmtico (quase no existe em meios de baixa osmolaridade,

porque a hipermolaridade do interior empurra a membrana plasmtica para junto da
parede celular) contm o periplasma, rico em protenas que participam na aquisio de
nutrientes, bem como em enzimas envolvidas na sntese do peptidoglicano.
As bactrias Gram+ podem no ter um espao periplasmtico visvel e no tm

tantas protenas periplsmicas.
Bactrias sem parede celular
Mycoplasma Pleomrficas; incapazes de sintetizar o peptidoglicano (resistentes

penicilina); contm colesterol obtido do organismo que infectam.
Formas L Bactrias que deixaram de sintetizar o peptidoglicano por presso

antibitica em meias hiper-osmolares.
Arquibactrias As suas paredes no tm peptidoglicano.

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Fmbrias ou pili No so estruturas de locomoo. Tm 3-10 nm de

dimetro e vrios m de comprimento.
Pili de conjugao passagem de material gentico de uma clula para

outra.
Fmbrias ou pili de ligao (adsoro)
Flagelos (completamente do flagelo eucaritico)
A maior parte das bactrias com motilidade move-se atravs do uso de flagelos: (o
flagelo procaritico muito diferente do eucaritico).
Filamento: 20 nm de dimetro
At 15-20m de comprimento
Constitudo por flagelina (protena)
Geralmente sem membrana
Ultra-estrutura flagelar:
1) Filamento
2) Corpo basal
3) Gancho
Gram -: no corpo basal existem anis que se associam a zonas diversas

do invlucro bacteriano: M (contacta com a membrana plasmtica), S (no espao
periplasmtico), P (contacta com o peptidoglicano), L (contacta com a membrana
externa ou LPS).
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Gram +: Antel interno (ligado membrana plasmtica) e anel externo

(ligado ao peptidoglicano)
Movimentao bacteriana
Sentido anti-horrio: empurram a bactria para a frente.
Sentido horrio: andam aos tombos (tumble).
Ex: Treponema pallidum (agente da sfilis) - grupo das espiroquetas
- O corpo celular envolve-se em torno dos flagelos;
- Movimento tipo saca-rolhas;
- Gram anaerbica facultativa.
Invlucros externos parede celular:
- Glicoclice: designao genrica para uma rede de polissacardeos que

se estendem a partir da superfcie da bactria e de outras clulas.
- Cpsula: estrutura bem definida envolvendo cada bactria.
- Slime layers (camada de limo) no associado a bactrias

individualmente importncia no estabelecimento de biofilmes (ex: placa dentria) ->
camada de limo + bactrias.
Cpsulas: muito HO e pouca molcula orgnica (Ex: Streptococcus, Enterobacter)
Composio: Quase sempre polissacardea, mas h excepes: Bacillus

anthracis, que polipeptdica.
Biofilmes e agentes bacterianos: aumentam a resistncia de agentes

bacterianos; dificultam a aco dos anti-spticos.
http://www.erc.montana.edu
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Protena M em Streptococcus pyogenes (amigdalites com pus). um dmero que

se estende para a periferia da clula. Este permite adeso da bactria a clulas e inibe
a fagocitose. Possui variao antignica e inibe a activao do complemento
Estrutura da parede celular e peptidoglicano
Gram-negativas
Todo o exterior da bactria coberto pelos lipopolissacardeos. OMP protenas da

membrana externa. O espao periplasmtico quase no existe em meios de
osmolaridade baixa, porque a membrana plasmtica fica muito junto parede.
Peptidoglicano
Rede/malha que envolve toda a bactria. Cadeias em 2D: num sentido constitudas
por acares e no outro sentido por pptidos (que variam entre as Gram- e as Gram+).
Possuem 2 derivados de acares; cido N-acetilmurmico e N-acetilglucosamina (NAM
e NAG) e vrios aminocidos, dos quais D- -glutamato, D-alanina e cido meso-
diaminopimlico. Estes aminocidos no so encontrados nas protenas.
Nas protenas s existem formas L, a presena de aminocidos D neste polmero

protege-o do ataque da maioria das peptidases.
O esqueleto deste polmero composto por NAG e NAM alternadamente. Depois

uma cadeia peptdica de 4 aminocidos D alternados est ligada ao grupo carboxlico
do cido N-acetilmurmico.
Cadeias de subunidades de peptidoglicanos ligados so unidas por ligaes

cruzadas entre os pptidos.
Substncias que actuam sobre o peptidoglicano:
-lactmicos (ex: penicilina) - Bloqueiam a ligao peptdica (inibem as

transpeptidases), falhando a formao da 2 dimenso. Tambm provocam o
descontrolo das autolisinas.
Autolisinas quebram as ligaes entre o NAM e o NAG permitindo a

insero de mais monmeros.
Transpepsinas - Fazem a ligao interpeptdica com a energia da

libertao da alanina extra.
Hidrolases do peptidoglicano Degradam o peptidoglicano.

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Autolisinas: amidases; glicosidases.
Lisozima (glicosidases) destri as ligaes entre o NAM e o

NAG.
Lisinas dos bacterifagos (utilidade teraputica ?).
Polmeros acessrios
cidos teicicos Polmeros de glicerol ou ribitol unidos por grupos fosfatos.

Regulam a actividade de vrias enzimas. No existem nas Gram- . Esto ligados ao
peptidoglicano. Aparentemente estendem a superfcie do peptidoglicano e uma vez que
esto carregados negativamente, conferem s bactrias Gram+ a sua carga negativa.
Mantm a estrutura da parede celular. cidos lipoteicoicos: ligados aos lpidos da
membrana plasmtica.
Lipopolissacardeo (ou endotoxina) Cobre todo o exterior da membrana externa

das bactrias Gram-. Tem carga negativa, e ajuda na defesa contra o sistema imune.
Participa na estabilizao da parede e tem resistncia aos sais biliares.
Consiste em 3 partes: Lpido A contm 2 derivados de acares glucosamicos,

cada um com 3 cidos gordos e 1 fosfato ligado a si; Polissacardeo central (core)
ligado ao lpido A, constituido por vrios acares; Antignio O cadeia polissacardea
que se estende para fora do core relacionado com a virulncia. Quanto maior for,
mais virulenta a bactria.
Micobactria no coram pelo mtodo de Gram (ex: M. tuberculosis, M. leprae).

Tm uma parede mais complexa: membrana plasmtica; peptidoglicano; polmero de
acares; cidos gordos (cidos miclicos + glicolpidos) formam camada espessa.
No so sensveis penicilina (?!).
Esporos (endosporos)
- Estruturas que no coram;
- Esporngio zona da clula onde se forma o esporo.
- Constitudo por membrana, parede celular (rodeia o protoplasma) ,

crtex (composto de peptidoglicano, mas menos cruzado), tnica externa (constituda
por vrias camadas de protenas impermevel), exosprio e ncleo germinativo.
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Um nmero de bactrias Gram+ formam uma estrutura especial, muito resistente

chamada de endosporo.
Esto presentes apenas nas bactrias Gram-positivas. Tm uma forma resistente a

factores qumicos e fsicos adversos. Esta deve-se ao cido dipicolnico que forma
complexos com o Ca, baixa concentrao de HO, protenas nucleares e enzimas
reparadoras.
O esporngio destri-se depois da libertao do esporo. Ao encontrar HO e

nutrientes, o esporo germina.
Respirao versus Fermentao
O metabolismo em microrganismos , portanto, muito varivel.
Respirao Rendimento energtico da oxidao da glucose: 38 ATP.
Fermentao Rendimento: 2 ATP.
O O tem algumas caractersticas que o tornam o aceitador final preferido de

muitos microrganismos:
- A sua abundncia, etc.
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Num meio onde haja O muito perigoso haver Fe, por isso que as clulas tm
uma maquinaria enzimtica especfica para degradar o HO (ex: catalase, glutationa).
Factores que afectam o crescimento
Radiaes
- Radiao ionizante: leso do DNA, mutagnese;
(h muitos microrganismos extremamente resistentes radiao)
- Ultravioleta: leso do DNA, mutagnese;
- Visvel: em alta intensidade, oxignio singleto (muito reactivo).
Nutrio: classificao
1- Fonte de energia:
Luz fototrofismo;
Substncia qumica quimiotrofismo.
2- Fontes de potencial redutor (H, e):
Substncias inorgnicas litotrofismo;
Substncias orgnicas organotropismo.

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3- Fontes de carbono:
CO - autotrofismo;
Substncias orgnicas heterotrofismo.
Metabolismo conjunto de todas as reaces qumicas que ocorrem na clula.

Catabolismo: quando as molculas maiores e mais complexas so degradadas a
molculas mais pequenas e simples com libertao de energia (esta energia vai ser
utilizada para produzir trabalho, ou dissipada como calor). Anabolismo: a sntese de
molculas complexas a partir de mais simples, com gasto de energia.
Os organismos usam 3 fontes de energia:
Os fosfatos capturam a radiao solar;
Os quimiorganotrofos oxidam molculas orgnicas para libertar

energia;
Os quimiolitotrofos utilizam nutrientes inorgnicos como fontes de

energia.
Os microrganismos variam no s nas fontes de energia, como tambm nos

aceitadores de electres usados pelos quimiotrofos. Trs grandes tipos de aceitadores
so utilizados.
Na fermentao a energia do substrato oxidada e degradada sem a

participao de aceitadores exgenos ou externos. Normalmente a via catablica
produz intermedirios, como o piruvato, que actua como aceitador de electres.
Na respirao utilizam-se aceitadores de electres exgenos. Na

respirao aerbia o aceitador final de electres o O2. Na respirao anaerbia o
aceitador final no o O2, mas sim outros aceitadores exgenos. Ex:
,...
Quimiotrofismo
Existe um grupo de bactrias com capacidade de obter energia atravs de

molculas inorgnicas (em vez de orgnicas).
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Cada espcie tem as suas preferncias especficas para os dadores e aceitadores

de electres.
O aceitador normalmente o O2, mas o e o tambm so

utilizados.
Os dadores mais comuns so o H2, o , Fe2+, etc.
Podem ser autotrficas ou heterotrficas.
Mas importante salientar que a oxidao de molculas inorgnicas liberta muito

menos energia que a oxidao de molculas orgnicas (como por exemplo a glucose).
No entanto, isto compensado com a oxidao de enormes quantidades de matria
inorgnica para o crescimento, reproduo, o que amplifica o seu impacto ambiental.
Ex: Bactrias nitrificantes que oxidam o azoto para obteno de

energia.
Fotossntese
Os microrganismos no s so capazes de obter energia atravs da oxidao de

compostos orgnicos e inorgnicos, como tambm so capazes de capturar a energia
luminosa e us-la para sintetizar APT, NADH, ou NADPH, num processo denominado de
fotossntese.
Normalmente um organismo fotossinttico reduz e incorpora CO2.
um processo muito importante porque a maior parte da nossa energia derivada

da energia solar, que fornece o ATP e o NADPH necessrio para o crescimento dos
microrganismos. responsvel pela produo de O2 (cerca de da fotossntese na
terra feita por microrganismos).
(Quimiorganoheterotrficos)
Fotossntese oxignica eucariotas e cianobactrias.
Fotossntese anoxignica todas as outras.
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Geral
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- Ciclo do azoto;
- Ciclo do enxofre;
Os microrganismos, durante o seu crescimento e metabolismo, interagem entre si,

originando ciclos de nutrientes como o azoto, enxofre, fsforo, etc.
Ciclo do azoto
- Ciclo do fsforo (muito pouco solvel)
Eutrofizao crescimento dos microrganismo quando se lhes dado um nutriente

que lhes faltava.
Mucosa Nasal
Staphylococcus epidermis
M. prototrficas:
- Auxotrficas muitas coisas para poder crescer;
- Fastidiosas;
- Que so parasitas intracelulares obrigatrios.
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Tipos de meios
- Meios complexos peptona.
Crescimento Bacteriano
O crescimento pode ser definido como um aumento dos constituintes celulares, o

que leva a um aumento no nmero de clulas quando os microrganismos se
reproduzem atravs de processos como:
Fisso binria Clulas individuais crescem e dividem-se originando

duas clulas-filhas com aproximadamente o mesmo tamanho.
Curva de crescimento (logaritmo do n de clulas viveis pelo tempo de

incubao)
O crescimento da populao estudado atravs da anlise da curva de crescimento

de uma cultura microbiana.
Normalmente, quando os organismos so cultivados em meios lquidos, crescem

em sistema fechado. Isto significa que, como no se vai acrescentando meio fresco,
durante a incubao, a concentrao de nutrientes diminui e a de resduos aumenta.
Esta curva tem 4 fases distintas:
Fase de latncia
Quando os microrganismos so introduzidos num meio de cultura fresco, no ocorre

um aumento imediato do nmero de clulas. No entanto, as clulas vo sintetizando
novos componentes.
Este perodo de latncia pode ser necessrio por vrias razes:
- A clulas podem ser velhas, sem ATP, cofactores e ribossomas, tendo estes
que ser sintetizados para que as clulas se possam dividir.
- O novo meio pode ser diferente daquele a que as clulas estavam habituadas
e precisam de algum tempo para se adaptarem.
Esta fase varia consideravelmente em durao, dependendo da condio dos

microrganismos e a natureza do meio.
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Geral
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Fase exponencial (ou de crescimento logartmico)
Os microrganismos dividem-se taxa mxima possvel tendo em conta o seu

potencial gentico, a natureza do meio e as condies a que se efectua o crescimento.
A taxa de crescimento constante: os microrganismos dividem-se e duplicam o seu

nmero em intervalos de tempo regulares.
A populao mais uniforme em termos de propriedades qumicas e fisiolgicas.
um crescimento balanceado, porque todos os componentes celulares so

produzidos a taxas constantes uns em relao aos outros.
Se as condies do meio mudam, nomeadamente os nveis de nutrientes, o

crescimento deixa de ser balanceado.
O crescimento microbiano est sob controlo preciso e coordenado, respondendo

rapidamente a alteraes nas condies ambientais.
Fase estacionria
Num determinado momento o crescimento da populao cessa e a curva de

crescimento torna-se horizontal (o que ocorre quando temos uma populao com
aproximadamente 109 clulas/mL.
O tamanho final da populao vai depender:
- Disponibilidade de nutrientes e outros factores;
- Tipo de microrganismos.
Nesta fase o nmero total de microrganismos viveis permanece constante porque:
- O nmero de nascimentos est balanceado com o nmero de mortes ou
- A populao pra de se dividir mas permanece metabolicamente activa.
Esta fase ocorre por vrios motivos:
- Limitao de nutrientes (ex: O2)
- Acumulao de produtos de excreo txicos (ex: cido lctico, etc.)
- Ou porque se atingiu um determinado nvel crtico
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Fase de morte
Caracteriza-se por um declnio do nmero de clulas viveis. A morte (define-se

como a perda irreversvel da capacidade reprodutiva), como o crescimento tambm
exponencial. A taxa de morte pode reduzir-se quando a populao diminuiu
drasticamente, o que se deve sobrevivncia de clulas particularmente resistentes.
H formao de esporos.
Ateno!
O crescimento bacteriano, numa escala aritmtica exponencial, se utilizarmos

uma escala logartmica representa-se como uma recta.
Quantificao do Crescimento Bacteriano
Directa a maneira mais bvia. A utilizao de uma cmara de contagem fcil,

barata e relativamente rpida. Cmara de Neubauer O nmero de microrganismos
numa amostra pode ser calculado tendo em conta o volume da cmara e o nmero de
diluies necessrias. Desvantagens: difcil distingui entre clulas vivas e mortas sem
recorrer a tcnicas especiais.
Contador de partculas utilizam-se instrumentos em que, de cada vez que um

microrganismo passa atravs de um orifcio a resistncia elctrica aumenta e a clula
contada.
Contagem de clulas viveis Especficas para clulas com capacidade de

crescimento e reproduo.
Plaqueamento de diluies Uma soluo diluda de bactrias

espalhada num meio slido de agar. Cada microrganismo ou grupo desenvolve-se
numa colnia distinta. O nmero original de clulas viveis na amostra pode ser
calculado atravs do nmero de colnias formadas e da diluio da amostra.
Filtrao em membranas Uma pequena amostra filtrada atravs de

um filtro membranar especial. O filtro depois colocado num meio de agar e incubado
at que cada clula origine uma colnia. O nmero de colnias d-nos o nmero de
microrganismos na amostra filtrada.
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Geral
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Medidas da massa celular Baseia-se no princpio de que o aumento da massa

total da clula, assim como do nmero de clulas, acompanha o crescimento da
populao.
Determinao do peso seco As clulas que crescem num meio lquido so

recolhidas por centrifugao, lavadas e secas e depois pesadas (no um mtodo
muito sensvel e bastante demorado).
Turbidimetria Utiliza a propriedade que as clulas microbianas apresentam

de reflectir a luz que sobre elas incide. Assim como numa populao as clulas
microbianas so todas aproximadamente do mesmo tamanho, a quantidade de reflexo
(medida num espectrofotmetro) directamente proporcional biomassa de clulas
presentes e indirectamente relacionada com o nmero de clulas.
ATP, DNA Se a quantidade de uma substncia em cada clula constante, a

quantidade total desse constituinte celular est directamente relacionada com a massa
celular microbiana total. Assim, por exemplo, a quantidade de ATP pode ser usada para
estimar a quantidade de massa microbiana viva.
Tempo de gerao ou de duplicao
Quanto maior o tempo de gerao, mais lentamente a bactria se replica e vice-

versa. Num meio muito diludo, estamos a diminuir a replicao das bactrias.
Aumentando a concentrao de nutrientes no meio, aumentamos a replicao das
bactrias mas s at um dado valor K, dado que as bactrias apresentam um limite
mximo a partir do qual deixam de se replicar nvel crtico.
Factores que afectam o crescimento bacteriano
A habilidade que alguns microrganismos apresentam de se adaptar a meios

externos e inspitos muito grande. Desta forma os procariotas esto presentes em
todos s stios onde exista vida.
Extremfilos microrganismos que crescem em condies terrivelmente

adversas.
Actividade da gua (aw) = gua disponvel
Uma vez que os microrganismos so rodeados por uma membrana plasmtica

selectivamente permevel, podem ser afectados por variaes nas concentraes
osmticas do meio envolvente.
Uma maneira de diminuir a concentrao osmtica do citoplasma foi o uso de

corpos de incluso. Os procariotas tambm tm canais sensveis presso que abrem
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permitindo a sada de soluto quando a osmolaridade do meio se torna muito menor que
a do citoplasma.
Muitos microrganismos mantm a sua concentrao osmtica acima da do seu

habitat atravs da utilizao de solutos compatveis (solutos que necessrio
acumular para manter o turgor quando a osmolaridade do meio aumenta; so solutos
que so compatveis com o metabolismo e crescimento quando em concentraes
intracelulares elevadas), de modo que a membrana celular est sempre firmemente
pressionada contra a parede celular.
A actividade da gua (aw) inversamente relacionada com a presso osmtica.
Se uma soluo tem uma presso osmtica elevada, a sua aw baixa.
Os microrganismos variam bastante na sua capacidade para se adaptarem a

habitats com baixo aw (hiperosmticos).
Num meio com baixo aw os microrganismos tm que despender um esforo extra

para manter uma concentrao de solutos interna elevada, de forma a conseguirem
reter a gua. Este tipo de microrganismos denominam-se osmotolerantes porque so
capazes de crescer em meios com grandes variaes de aw ou concentrao osmtica
(ex: estafilococos).
Haloflicos Esto completamente adaptados a condies salinas e hipertnicas

de modo que necessitam de altos nveis de NaCl para crescer.
pH
a medida da actividade do io hidrognio numa soluo. Os habitats nos quais os

microrganismos crescem variam grandemente no pH, da que este possa afectar
dramaticamente o crescimento microbiano.
Cada espcie tem a sua prpria gama de pH na qual se processa o crescimento,

bem como um valor de pH ptimo de crescimento.
Microrganismos: acidfilo (0 < pH < 5,5) fungos e algas; neutrfilos (5,5 <
pH < 8,0) a maior parte das bactrias e protozorios; alcalfilos (8,5 < pH < 11,5)
Em geral cada grupo microbiano tem preferncias de pH caractersticas.
Apesar dos microrganismos poderem crescer numa gama alargada de pH, afastada
do seu pH ptimo, existem limites para a sua tolerncia.
Variaes drsticas no pH citoplasmtico podem destruir a membrana celular, inibir

a actividade enzimtica e inibir as protenas de transporte da membrana.
Mecanismos para a manuteno de um pH citoplasmtico neutro:
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Geral
2008-2009
- A membrana citoplasmtica pode ser relativamente impermevel aos

protes;
- Possuem sistemas de antiporte K+/H+ e Na+/H+;
- Tambm modificam o pH do seu habitat ao produzirem produtos de excreo

metablica cidos ou bsicos.
Temperatura
Afecta os microrganismos tal como afecta os outros seres vivos.
Os microrganismos so at particularmente susceptveis porque so, a maioria,

unicelulares e a sua temperatura varia com a temperatura do meio externo.
A temperaturas baixas, um aumento de temperatura aumenta a taxa de

crescimento, porque a velocidade das reaces enzimticas tambm aumenta. A partir
de um certo ponto, no entanto, mais aumentos diminuem o crescimento e
temperaturas suficientemente altas so letais.
As altas temperaturas danificam as clulas ao:
Desnaturarem enzimas, transportadores e outras protenas;
Destroem membranas (desintegrao dos lpidos).
Normalmente provocam danos irreversveis e irrecuperveis.
A baixas temperaturas
As membranas gelificam;
O transporte e a actividade enzimtica muito lenta.
Afectam as funes celulares, mas no necessariamente a composio

qumica e a estrutura da clula.
O crescimento varia consoante a temperatura e tem um mximo, um mnimo e uma

temperatura ptima.
Claramente, os organismos procariticos conseguem crescer a temperaturas muito

mais elevadas que os eucariotas.
Concentrao de O2
Tempos vrios tipos de organismos consoante a sua relao com o O2:
Aerbios Organismos capazes de crescer na presena de O2 atmosfrico;
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23
2008-2009
Anaerbios Aqueles que so capazes de crescer na sua ausncia;
Aerbios obrigatrios Aqueles que so completamente dependentes do O 2

para crescerem (o O2 o aceitador final de e- na cadeia respiratria)
Anaerbios facultativos No necessitam de O2 para crescerem, mas

crescem melhor na sua presena (quando utilizam a respirao aerbica).
Anaerbios aerotolerantes* Ignoram o O2 e crescem igualmente quer na

sua presena, quer na sua ausncia.
Anaerbios obrigatrios* - No toleram o O2 e morrem na sua presena.
Microaerfilos So lesados pelo nvel atmosfrico normal de O2 (20%) e

necessitam de nveis mais baixos (2-10%) para crescerem.
*- No conseguem obter energia atravs da respirao, tendo que utilizar a

fermentao ou a respirao anaerbica para esse objectivo.
O O2 aceita electres e rapidamente reduzido porque tem 2 orbitais externas

desemparelhadas. Portanto, o O2 pode reagir com determinadas molculas que so
externamente txicas porque so poderosos agentes oxidantes e rapidamente
destroem os componentes celulares:
(radical superxido)
(perxido de hidrognio)
(radical hiroxilo)
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Geral
2008-2009
Portanto, um microrganismo tem que ser capaz de se proteger destes produtos do

O2 ou ento acaba por ser morto.
Assim, a maior parte dos microrganismos possui enzimas que os protegem dos
produtos, nomeadamente:
Superxido dismutase (SOD)
Catalase
Peroxidase
Radiao
O nosso mundo bombardeado com radiao electromagntica de vrios tipos.
medida que o comprimento de onda de uma radiao diminui, a sua energia

aumenta.
Muitas formas de radiao electromagntica so perigosas para os microrganismos.
Radiao ionizante: Raios X e raios gama. Tem um comprimento de onda

muito curto e muita energia. Provocam leses do DNA, mutagnese, podendo causar
morte directa ou indirectamente. Isto acontece ao quebrarem as ligaes de
hidrognio, oxidarem as duplas ligaes, destruirem estruturas em anel e
polimerizarem algumas molculas.
Radiao UV: Mata todos os tipos de microrganismos devido tambm ao seu

curto comprimento de onda e elevada energia. Actuam formando dmeros de timina no
DNA, que se unem por ligaes covalentes em cadeias adjacentes, impedindo a
replicao e funo do DNA leso do DNA.
Luz visvel: Apesar de ser fundamental porque a fonte de energia para a

fotossntese, quando presente em alta intensidade pode lesar ou matar clulas
microbianas, nomeadamente porque leva formao do oxignio singleto (1 O2:
um agente oxidante muito reactivo e poderoso que rapidamente destri a clula).
Metabolismo Bacteriano
Anabolismo
Catabolismo
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2008-2009
Diversidade de vias que as bactrias (quimiorganotrficas) tm para obter energias.
Biossntese sntese de compostos orgnicos
Ciclo de Calvin - fixao do carbono atmosfrico
6CO2 + 18ATP + 12NADPH + 12H + 12HO glucose + 18 ADP + 18 Pi

+ 12 NADP
Consome muita energia
Gasta poder redutor
Importante para os organismos autotrficos.
Para os organismos heterotrficos j no necessrio o ciclo de Calvin:
- Gluconeogenese Glucose
- Vias de assimilao da amnia sntese dos aminocidos
Enzima glutamato desidrogenase (muita amnia);
Enzima glutamina sintetase (pouca amnia);
Enzima glutamato sintetase. Gasto de ATP
Vias anaplerticas:
Fosfoenolpiruvato OAA
Ciclo do glioxilato Serve para repor os nveis de OAA. Evitam-se os

passos de descarboxilao do ciclo de Krebs.
- Isocitrato liase.
Permite a uma bactria sobreviver e crescer num

meio de cultura cujo nico meio de carbono o acetato ou cidos gordos.
As leveduras em contacto com macrfagos

estimulam o ciclo do glioxilato, o que significa que estas leveduras adaptam-se melhor
aos hospedeiros se este ciclo ocorrer (estudo importante).
Persistence of Mycobacterium tuberculosis in

macrophages and mice requires the glyoxylate shunt enzyme isocitrate lyase.
Regulao das vias metablicas
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Geral
2008-2009
Pode-se fazer a vrios nveis:
- Controlo alostrico: ex: retroinibio pelo produto;
- Controlo covalente: ex: fosforilao/desfosforilao;
- Regulao dos genes que codificam as enzimas transcrio.
Diferenas entre organizao dos genes entre procariotas e eucariotas:
- um processo mais simples
Em cada sequncia podem existir vrios genes que codificam varas protenas e no
apenas 1 (como nos eucariotas). A regulao das vrias enzimas faz-se em conjunto.
Opero Conjunto dos vrios genes + regio promotora.
Ex: Opero da lactose na E. coli: um opero indutivo que funciona no

catabolismo. induzido quando um determinado substrato est presente no meio
(lactose, neste caso). inibido por um repressor quando no existe lactose no meio.
Precisa tambm de uma protena CAP, que para estar activa precisa de AMPc. Quando
h pouca glicose h muito pouco AMPc, que activa a CAP e esta faz com que a RNA
polimerase se posa ligar ao promotor iniciando a transcrio.
- Envolvidos na biossntese so diferentes
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2008-2009
Operes repressveis reprimidos quando a molcula que vo

sintetizar est presente (ex: opero do triptofano).
No opero do triptofano existe outro tipo de regulao (apenas

presente nos procariotas).
- Mesmo que o mecanismo anterior (represso pelo produto) falhe, a

transcrio pra quando se formam ansas (entre as regies 3 e 4).
- Quando no existe triptofano no meio, forma-se outra ansa, entre 2 e 3

e a transcrio continua. S pode ocorrer nos procariotas porque a transcrio e a
traduo ocorrem simultaneamente.
Eclipse O fago injectou o seu DNA na bactria mas ainda no se replicou, portanto
deixa de existir.
Replicao fgica
Ciclo ltico (destruio das bactrias) replicao dos fagos
- Injeco do genoma.
- Replicao do DNA. Traduo dos mensageiros em protenas, formao de

nucleocpside.
- Lise da bactria e libertao de novos fagos.
Penetrao
- Landing;
- Attachment;
- Tail contraction;
- Penetrating and unplugging;
- DNA injection.
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Geral
2008-2009
- A cauda tem um mecanismo de contraco (diminui de tamanho) e de injeco.
- O fago PRD1 possui uma actividade muraltica (enzimas que destroem o

peptidoglicano)
Replicao
- Processos precoces:
- Sntese dos mRNA precoces e das enzimas de replicao e protenas

reguladoras.
- Processos tardios:
- Sntese da nucleocpside, etc.
Progenia
Ciclo lisognico (fagos temperados) fagos que no causam a lise da bactria.
O genoma pode integrar-se no genoma bacteriano e permanecer durante muito

tempo.
Profago fago que no est a replicar mas est inserido no cromossoma

bacteriano.
Virologia
1- Introduo
2- Bacterifagos
3- Virides e pries
Vrus
- Agentes infecciosos acelulares;

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2008-2009
- Filtrveis (filtros de Chamberland);
- Necessitam de uma clula hospedeira para se poderem replicar;
- Sem sistemas de gerao de energia.
Vrus: entidade biolgica.
Virio: partcula viral.
Cpside: invlucro proteico no interior do qual se encontra o genoma.
Nucleocpside: cpside + genoma.
Virio: uma partcula viral completa. Contem uma ou mais molculas de DNA ou
RNA. Pode possuir vrias camadas (ex: uma membrana).
Bacterifagos ou fagos (h muitos diferentes)
- Vrus que infectam bactrias.
Estrutura: nucleocpside no cimo de uma estrutura complexa.
Resultado da infeco: placas fgicas (muito variveis) locais onde no existem

bactrias porque foram destrudas.
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Geral
2008-2009
Morfologia:
- Estruturas filiformes;
- Estruturas cilndricas;
- Fagos de tamanhos variveis;
- Estrutura icosadrica.
A presena de nutrientes, etc. condiciona a utilizao do ciclo ltico ou do ciclo

lisognico.
Protenas CRO e C1 a taxa de transcrio do Cro e do C1 determinam a utilizao

do ciclo ltico ou lisognico.
Repressor produo do gene cl.
Protena Cro Implicada na regulao dos genes do ciclo ltico. Se est em muita
quantidade inibe o repressor levando ao ciclo ltico.
Transcrio precoce imediata
Transcrio precoce tardia
Transcrio tardia:
Deciso: lisogenia (c1 ganha).
Deciso: ciclo ltio (cro ganha bloqueia a produo do repressor,

promove a promoo da protena Q).
Ciclo lisognico
Fago Emparelhamento de bases permite que o DNA do fago se integre no

cromossoma bacteriano profago. Exciso do genoma do fago inicia o ciclo ltico.
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2008-2009
Consequncias da infeco fgica:
- Lise bacteriana;
- Alteraes do genoma bacteriano;
- Alteraes da virulncia bacteriana.
Traduo generalizada Algumas cpsides englobam bocados de cromossomas

bacterianos, o que depois pode levar alterao da bactria (se esse fago injectar o
seu material numa bactria da mesma espcie).
Traduo especializada Ocorre com fagos temperados. O DNA cromossmico

transferido localiza-se no local de insero do profago.
Fagos e virulncia
Factores de virulncia podem ser transferidos para transduo (ex: toxina de

Shiga).
- Toxinas codificadas por fagos lisognicos:
Toxinas diftricas, botulnica, pertssica, de Shiga, eritrognica, da

clera, enterotoxina, estafiloccica e TSST.
- Outros
Factores reguladores da virulncia, enzimas
Fagos abundam onde h bactrias (ex: no solo).
Vrus que infectam clulas eucariticas
Virides Agentes infecciosos (de plantas) constitudos apenas por RNA de cadeia
simples. No tm protenas.
So muito pequenos e contm muito pouca informao.
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Geral
2008-2009
Pries Agentes infecciosos constitudos apenas por uma protena (PrP) sem
cidos nucleicos.
- Scrapie doena das ovelhas;
- BSE;
- Doena de Kreutzfeldt-Jakob (DCJ)
- Kuru.
Sem genoma de cido nucleico.
PrPc Molcula homloga normal presente nos indivduos. A protena anormal

(resistente protease K), quando se liga protena anormal, altera a sua conformao
e esta vai, por sua vez, modificar a conformao de outras molculas normais.
Replicao Resumo
Vrus + receptor entra de vrias maneiras.
HIV libertado constantemente sem destruio da clula (budding).
Replicao do HIV (vrus de 2 cadeias de RNA ligadas por RNAt)
- Cpside com protenas;
- S infecta clulas especficas: CD4 Tropismo dos vrus. S existe nos

linfcitos T e macrfagos.
- Protena GP120 do vrus liga-se CD4 das clulas.
- Receptor CXCR4 e CCR5 Ligam quimiocinases e atraem

leuccitos. Tambm so importantes para a ligao do vrus e entrada na clula.
- cDNA transcrito do RNA do vrus. integrado no cromossoma

provrus.
Os vrus vo se libertando sem destruio da clula

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2008-2009
Leso da clula infectada (em geral)
- Inibio dos processos biossintticos.
- DNA, RNA, protenas.
- Leso dos lisossomas.
- Autlise.
- Alterao da membrana citoplasmtica.
- Alteraes antignicas; fuso celular.
- Acumulao de material viral.
- Corpos de incluso.
- Transformao neoplsica.
Tudo isto provoca doena.
Consequncias da infeco viral
- Lise celular (inflamao);
- Infeco crnica;
- Persistncia (ex: herpes, HIV);
- Latncia.
- Transformao neoplsica.
Efeito citoptico
Sinccios resultado da fuso de clulas infectadas.
Corpos de Incluso
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Geral
2008-2009
Oncognese viral
- Herpesvrus: EBV (linfoma de Bukitt; carcinoma nasofarngeo), HHV8

(Sarcoma de Kaposi);
- Adenovrus;
- Retrovrus: HTCV 1 e 2 (leucemias);
- Papovavrus: papilomavrus (carcinoma do colo do tero);
- Hepadnavrus: HBV (carcinoma heptico) hepatite B;
- Flavivrus: HVC (carcinoma heptico hepatite C.
Oncognese por papilomavrus
Normal: equilbrio entre protenas que promovem e inibem a replicao celular.
Anormal: mais protenas que promovem a replicao, que se torna descontrolada.
Oncogenes Virais
V. Sarcoma felino (fms, kit);
V. Sarcoma murino (fos, mos, raf);
V. Leucemia murino (abl);
V. Sarcoma rato (ras).
Oncogenes Celulares
- Receptores para factores de crescimento;
- Protenas que fazem transduo do sinal;
- Factores de crescimento.
Interferncia no Ciclo Celular

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2008-2009
Vrus podem produzir protenas que:
- levam a produo de factores de proliferao celular.
Infeces Crnicas (estratgia dos vrus para permanecerem nos hospedeiros)
Herpes: Latncia (replicao ) em neurnios, leuccitos, glndulas salivares, rim.
Sarampo: Pan-encefalite esclerosante sub-aguda.
Hepatite B: Infeco persistente (replicao contnua).
HIV: SIDA (exibe de fenmenos de persistncia e latncia).
Pries: Scrapie, s. de Kreutzfeldt-Jakob, BSE.
Infeces latentes
Vrus varicela-zoster (infeco neurotrpica).
Zona Apenas em determinados locais.
Frmacos anti-virais (tem que ser selectivo: ser antimicrobiano mas no atacar o
hospedeiro)
-Dificuldade de encontrar alvos selectivos;
- Toxicidade;
- Design molecular.
Alvos dos frmacos anti-virais
- Bloqueio dos receptores de entrada do vrus;
- Bloqueio da descorticao (ex: amantadina);
- Inibio da replicao (maior parte dos frmacos disponveis no

momento);
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Geral
2008-2009
- Inibio da traduo/modificaes ps-traducionais (ex: inibidores de

proteases);
- Bloqueio na montagem e libertao dos viries;
- Interferes.
Frmacos anti-influenza (gripe)
Frmacos anti-herpticos
Ex: aciclovir (anlogo da guanosina).
Frmacos antivirais de largo espectro
Alvos: Papovavrus;
Adenovrus;
Herpesvrus;
Iridovrus;
Poxvrus.
Inibidores da cadeia
Induzem uma terminao prematura da cadeia.
Ex: AZT (tem um N em vez de um OH).
Frmacos anti-HIV
Inibidores de proteases.
Ex: a poliprotena GAG no consegue ser clivada porque as proteases

esto inibidas.
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2008-2009
Gentica Bacteriana
Mecanismos de alterao gentica
Mutao
- Mutaes pontuais;
- Deleces;
- Inseres.
Transferncia gentica horizontal De um organismo para outro, entre

bactrias da mesma espcie ou de espcies diferentes.
- Transformao;
- Transduo;
- Conjugao
Transferncia de genes de um organismo (dador) a outro.
Exogenonte DNA que transferido ao receptor. (?)
Endogenonte genoma do receptor. (?)
Merozigoto clula receptora com exogenonte. (?)
Conjugao
1946, Lederberg and Tatum.
Bactrias auxotrficas (incapazes de sintetizar certos produtos)- tornaram-se

prototrficas.
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Geral
2008-2009
A mistura de duas bactrias pode levar sua recombinao.
U-tube experiment por isso que necessrio haver contacto fsico entre as
duas.
F clulas bacterianas capazes de transferir marcadores (possuem um factor de

fertilidade: factor F (plasmdeo).
F bactrias que no possuem factor F; aps o receberem o factor F tornam-se

elas prprias F.
O que acontece se o factor F se inserir no cromossoma?
O plasmdeo integra-se no cromossoma e transfere todos os marcadores do

cromossoma do dador.
F clulas bacterianas capazes de transferir marcadores preferenciais com uma

frequncia muito superior.
Plasmdeos
- F;
- R conferem resistncia a antibiticos;
Genes que conferem resistncia a muitos antibiticos;
- Colicinas conferem tambm resistncia a antibiticos;
- Virulncia codificam genes de produtos que permitem a aderncia,

internalizao, produo de substncias.
- Metablicos codificam genes de metabolismos estranhos.
Resistncia a metais pesados.
Integrao dos plasmdeos (por ex: factor F)
Regies (sequncias de insero IS) do plasmdeo semelhantes a regies do

cromossoma, permitindo o emparelhamento e recombinao.
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2008-2009
Capazes de promover a sua prpria replicao;
Codificam uma enzima de transposases (transposio de genes de um

genoma para outro).
Transposes transpem de um genoma para outro.
Plasmdeo R1
- RTF: resistance transfer factor;
- + alguns transposes.
Transformao
DNA libertado de bactrias mortas.
Bactrias vivas adquirem esse DNA ou plasmdeos e destroem-no, integram-no no

seu DNA (alterao do genoma dessa bactria).
1- ligao de protenas da parede ligando o DNA.
2- degradao de uma das cadeias de DNA por enzimas.
3- A outra das cadeias internalizada.
Ciclos Fgicos
- Ciclo ltico;
- Ciclo lisognico.
Transduo Generalizada (qualquer fragmento de cromossoma pode

ser traduzido)
- Durante a infeco h degradao do cromossoma;
- O genoma viral replica-se;
- O empacotamento do DNA pode no ser do fago, mas da bactria

esse bocado pode ser
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Geral
2008-2009
Transduo Especializada
Como os fagos se inserem sempre nos mesmos locais do cromossoma

so sempre as regies adjacentes que so integradas no genoma viral.
BQ de recombinao de DNA: recombinao geral.
Recombinao geral no recproca (transformao)
S uma cadeia entra na clula
Recombinao Site-specific
Recombinao site-specific versus homloga.
Fungos
- Caractersticas gerais dos fungos
- Classes importantes: Zygomycota, Ascomycota, Basidiomycota.
Basidiomicetes
- Considerada a classe dos fungos superiores tal como os ascomicetes;
- A estrutura somtica miceliana;
- Miclio bem desenvolvido, as hifas podem agregar-se e formar

cordes rizomorfas.
- O miclio septado com septos dolispricos (no existe continuidade

protplasmtica ao longo de todo o miclio);
- Existem espcies com estrutura somtica leveduriforme;
- O ciclo assexual leva produo de condios, artrosporos ou ;

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2008-2009
- O ciclo sexual conduz formao de uma clula onde ocorre a fuso de

dois ncleos haplides cariogamia - e a meiose com formao de basidisporos, em
geral em numero de 4, que ficam exteriores clula;
- Ausncia de diferenciao de rgos sexuais. A plasmogamia ocorre

entre hifas vegetativas;
- Podem ser saprbios ou parasitas. A maior parte so parasitas de

plantas;
- Grande importncia econmica (ex: cogumelos): espcies comestveis,

espcies parasitas de rvores em p e de madeiras.
Ex: Agaricus campestris.
Puccinia graminis (fungo das videiras).
Deuteromycetes
- Tambm so fungos superiores, no se conhece o ciclo sexual;
- Recebem a designao especfica baseada na sua forma assexual,

principalmente pelo tipo de condios que formam.
Ex: Algumas espcies de Penicillium e Aspergillus, Candida albicans.
Fungos como alimentos Das espcies comestveis, algumas dificilmente se

confundem com as txicas. Outras so facilmente confundveis.
Fungos em alimentos
- A aco dos fungos nos alimentos principalmente fermentadora.
- As espcies utilizadas, ou as variedades, dependem do tipo de aco

pretendida dos microrganismos e do sabor que se pretenda dar ao alimento.
- Outros alimentos em cuja preparao intervm fungos:
Sake aguardente de arroz;
Shyu molho de soja.
Toxicidade dos fungos
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Geral
2008-2009
- Os princpios txicos produzidos so de natureza diversa, conforme a espcie:

alcalides, resinas, pptidos.
- As espcies mais perigosas so amanitas (suas toxinas so ciclopptidos)
Fungos e metabolitos txicos
- H imensos fungos que produzem micotoxinas.
Fungos como agentes patognicos
- A maior parte existe na natureza como saprfito.
- Ciclo de vida da neurospora.
- A designao da espcie tem a ver com o tipo de esporos formados no ciclo

reprodutivo.
Ex: Basidiomicetes basidiosporos.
Fungos Agentes recompositores de matria orgnica.
Penicillium Miclio ramificado. Esporos do colorao cultura.
Aspergillus Agentes de contaminao. Frutificao (?): miclio eleva-se do

substrato.
Fungos: crescimento apical e centrfugo.
Quimioterpicos
Actuam sobre:
- Peptidoglicano (porque s existem nas bactrias);
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43
2008-2009
Penicilinas (-lactmicos);
Cefalosporinas (-lactmicos);
Vancomicina;
Cicloserina; Menos utilizados
Bacitracina.
-lactmicos grupo de antibiticos mais usados (anel -lactmico

fundamental para ter a aco param a produo de peptidoglicano e induzem
mecanismos auto-lticos).
Penicilina Anel extra de 5 tomos.
Cefalosporinas Anel extra de 6 tomos
Como que actuam?
- Actuam nos ltimos passos de sntese de peptidoglicano (ligaes peptdicas);
- Ligam-se s transpeptidases e evitam as ligaes peptdicas resistncia ao

peptidoglicano (inibem a sntese de peptidoglicano de novo);
- As bactrias tm que estar em crescimento para serem susceptveis aos -

lactmicos;
- No se pode combinar os -lactmicos com bacteriostticos (deixam de fazer

efeito);
- Penicillin-binding proteins (PBP) da membrana citoplasmtica;
- Os -lactmicos actuam na membrana interna atravessando os poros das

Gram-negativas e ligam--se s PBP e inibem a sntese de peptidoglicano bem como
activam enzimas auto-lticas; As primeiras bactrias com
resistncia a aparecer
Stafilococcus aureus.
- Resistncia penicilina:
1- Enzimas que destroem a penicilina -lactamases (cortam o anel).
- Evitar a resistncia:
- Adicionar inibidores de -lactamases (ex: cido clavulmico).
Augmentin 2 Partes antibitico;
1 Parte de cido clavulmico.
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Geral
2008-2009
2- Modificaes nas porinas fazem com que haja menos entrada dos
antibiticos;
3- As prprias PBP so modificadas pelas bactrias (no h forma de

ultrapassar esta resistncia), no se ligando aos -lactmicos.
- Desvantagem da primeira penicilina (protena G):
- Sensvel ao pH cido (da que a penicilina tem que se dar por via intravenosa
ou intramuscular para chegar rapidamente ao sangue);
Tm surgido vrios derivados de penicilina com vantagens, nomeadamente

poderem ser administrados por via oral e actuarem em Gram-negativas.
Antibiticos que actuam na sntese proteica (so bacteriostticas excepto a

estreptomicina)
- Os ribossomas dos procariontes so um bom alvo para antibiticos.
Ex: Cloranfenicol muito txico, evita a ligao dos aminocidos;
Eritromicina previne a adio de novos aminocidos;
Tetraciclina liga-se subunidade menor do ribossoma;
Estreptomicina (bactericidas) distorce a estrutura do ribossoma e

adiciona aminocidos errados protena no actua normamente; previne a adio de
novos aminocidos (?); faz parte da famlia dos aminoglicosdeos; actividade contra o
Mycobacterium tuberculosis.
Resistncia por:
- Modificao da molcula de aminoglicosdeos por adio de grupos

fosfato, acetilo, etc., deixando a molcula de ser activa.
Tetraciclinas (3 a ser descoberto)
- So antibiticos de largo espectro;
- Toxicidade baixa so muito usadas;
- Ligam o Ca (tornam o antibitico inactivo e pode provocar deficincia

do tecido sseo, especialmente em crianas) - No se pode tomar com alimentos ricos
em Ca (ex: leite).
- Resistncia:
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2008-2009
- As bactrias tm mecanismos de excretar o antibitico (bombeiam

activamente) e no s so resistentes s tetraciclinas, como tambm a outros
antibiticos.
Macrlitos (no so muito usados)
Eritromicina Legionella;
Claritromicina Legionella.
Outros alvos para os antibiticos
DNA Quinolonas (molculas sintticas) ligam-se girase e inibem o crescimento

das bactrias.
Sntese de cido flico (precursor da sntese de purinas e aminocidos importante

nos procariotas)
PABA precursor do cido flico. As sulfa inibem as enzimas envolvidas na

transformao de PABA em cido flico (inibem o crescimento bacteriano);
Resistncia s sulfa:
Internalizam cido flico (no precisam de o sintetizar).
Mecanismos de resistncia a antibiticos
- Reduzem a permeabilidade da membrana, causando menor penetrao do

antibitico;
- Inactivam o antibitico;
- Alteram o alvo de actuao dos antibiticos (ex: PBP);
- Desenvolvem mecanismos metablicos alternativos (ex: sulfas);
- Expulsam o antibitico activamente (ex: tetraciclinas)
Formas de desenvolver esses mecanismos
_______________________________________________________________________________________
Geral
2008-2009
- Mutaes;
- Internalizao de material gentico estranho (ex: conjugao transferncia de

material gentico entre bactrias).
Presso do antibitico que exercida sobre uma populao de microrganismos

para adquirir resistncia importante para o predomnio de estirpes resistentes sobre
as sensveis.
Causadores do desenvolvimento de mecanismos de resistncia
- Quando que se toma um antibitico quando no h infeco bacteriana pode levar

a resistncias;
- No tomar o antibitico at ao fim;
- Uso em animais.
NIB- Concentrao inibitria mnima (pode no ser bactericida).
MBC- Concentrao bacteriocitica mnima.
Quanto menor o halo (?) (mtodo de) maior a resistncia mtodo quantitativo.
Interaco Microganismo-Hospedeiro (IMP)
Mecanismos de defesa
Grande parte dos microrganismos no prolifera no nosso organismo, mas h

bastantes que o fazem.
Sistemas que controlam a infeco:
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47
2008-2009
- Barreiras fsicas;
- Sistemas de defesa Imunidade inata;
Imunidade adquirida/adaptativa sistema linftico.
Barreiras
Barreiras muco-cutneas
- Tudo o que est entre a pele e as mucosas;
- Lmen que est em contacto directo com o exterior;
- Mecanismos: secrees, enzimas, pH, outros microrganismos (comensalismo),

movimentos mecnicos (lacrimejar, movimentos peristlticos e de deglutio, etc).
Pele
- Epitlio queratinizado;
- Descamao;
- Secrees (suor e sebo cidos gordos ou triglicridos so importantes);
- Flora residente: baixam o pH da pele impedindo o desenvolvimento de outros

microrganismos;
Fermentao cido propinico baixam o pH, tambm so

antimicrobianos;
Como ultrapassar esta barreira?
- Leso (Clostridium perfringens gangrena);
- Picada de vector o prprio vector est infectado;
- Por injeco;
- Por entrada directa (raro): Schistosoma helminta que fura a pele.
_______________________________________________________________________________________
Geral
2008-2009
Mucosa Respiratria
- Epitlio com clios que batem no sentido de empurrar de dentro para fora;
- Destruio do epitlio ciliado durante a infeco por Mycoplasma pneumoniae;
- Ciliostase (paragem do batimento ciliar) por Bordetella pertussis Tosse

convulsa (somos vacinados).
- O epitlio produz muco apanha os microrganismos;
- Tem clios (o que faz com que o fluxo seja empurrado para fora do
organismo);
- Lisozima (existe em muitas secrees): Cliva as ligaes peptdicas no

peptidoglicano;
Actividade anti-bacteriana porque destri.
Mucosa Intestinal
- Clulas de Paneth que secretam pptidos no antimicrobianos;
- Bactrias resistem por:
- Proteases;
- Excreo activa;
- Neutralizao;
- Reduo da carga negativa;
- Modificao do LPS.;
- Flora intestinal comensal:
- Tem muitas bactrias inofensivas que protegem contra a invaso de

patognios;
- Estmago poucas bactrias porque muito cido;
- Intestino grosso Tem muitas enterobactrias anaerbias estritas,

etc.
Flora microbiana comensal
- Narinas.
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49
2008-2009
Papel protector da flora comensal
- Competio por nutrientes e receptores;
- Produo de bacteriocinas (colicina pela E. coli);
- Produo de metabolitos secundrios (AG, propionato).
Infeco
- Adeso s superfcies mucosas:
- Estruturas: adesinas (pili ou fmbrias).
- Invaso das mucosas:
- Ex: Helycobacter pylori destri a mucosa;
- Salmonella entrica injecta invasinas que promovem a sua entrada

nos entercitos por endocitose e replica-se em vesculas.
- Shigella sp Induzem a sua entrada e destroem o vacolo onde

estavam e replicam-se no citosol, destruindo toda a mucosa intestinal.
Factores Humorais e Celulares
Rapidamente recrutados (imunidade inata)
O sistema do complemento
Bactria com antigenes - anticorpos Ligao ao C1 enzimas que actuam em C4 -

clivado 1 fragmento maior que fica superfcie.
- Cb + Cb Convertase de C (cliva o C) a Cb liga-se superfcie activadora;
- Cb + Cb + C - Activa C (clivado) - Cb recruta C, C, C e C

polimerizao de C que faz um canal na membrana destruindo a capacidade
permevel selectiva da membrana.
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Geral
2008-2009
Activao do complemento via clssica
- So recrutados por anticorpos;
- Convertases de CS produzidas pela via clssica e pela via alternativa

(properdina) onde no intervm anticorpos;
- Formao do complexo de ataque da membrana (MAC);
- Tudo isto est regulado:
- Inibidores de C;
- Inibidores de Cb;
- O complemento:
- As clulas fagocticas tm receptores para clulas com fragmentos de

complementos opsoninas (substncias que favorecem a fagocitose);
- Fragmentos mais pequenos, ex: Ca Promove vasodilatao

inflamao;
- O complemento pode ser activado sem anticorpos.
- Activao por estruturas microbianas: cidos teicicos,

lipopolissacardeo, etc.;
- Ligao de lectinas.
Via comum:
- Produo de convertases Ataque membrana (formao de

poros)
Mecanismos dos micrbios para resistirem ao complemento:
- Resistncia ao complexo de ataque da membrana (s eficaz sobre uma

membrana biolgica):
Ex: Bactrias Gram-negativas: LPS com cadeia O longa, MAC liga OMP
(protenas da membrana externa) em vez da membrana;
Bactrias Gram-positivas: extensa parede de peptidoglicano,

activao do complemento em locais remotos da clula bacteriana evitam que o
complexo se ligue prpria membrana;
Inibio directa.
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51
2008-2009
- Estimulao ou mimetismo de inibidores endgenos do complemento:
Streptococcus: Activao dos factores H, I, FHL-I e C4BP;
E. coli e Neisseria meningitidis B: promovem a ligao de factor H ao

Cb;
Vrus: codifica homlogos (estruturais ou apenas funcionais) de

inibidores do complemento; incorporam inibidores endgenos no virio;
Candida albicans;
Trypanosoma cruzi;
Leishmania major.
- Destruio de factores do complemento:
Pseudomonas: elastase destri as anafilotoxinas Ca e Ca;
Streptococcus: peptidase.
- Bloqueio de receptores de complemento;
- Escape resposta humoral:
- Maior falta de activao do complemento;
- Cpsulas e mimetismo molecular;
- Variao antignica.
Sistema do complemento e entrada nas clulas
- Utilizam receptores para os factores do complemento, promovendo a sua

entrada nas clulas.
Deficincias no sistema do complemento e infeco
- Deficincia de C: infeces piognicas (infeces controladas por neutrfilos -

pus) ex: pneumonia;
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Geral
2008-2009
- Deficincia de MBL (lectinas) idem (?);
- Deficincia de C a C (ex: meningite bacteriana)
Interfero (outro dos factores humorais)
- Regulador do sistema imunolgico;
- Famlia de protenas agrupadas em tipo 1 e 2;
Tipo 1 produzido por todas as clulas nucleadas em resposta a

infeces virais;
Tipo 2 produzido por clulas do sistema imunolgico activador

celular.
O que faz o tipo 1?
- Infeco viral transcrio de genes produo de interfero que actua

nas clulas infectadas.
1 Sistema 2 Sistema
Oligoadenilato sintetase Activao de 1 protena cinase

Formao
Activao de PKR responde ao
DNA de prot.
Oligoadenilato
activa um RNA (?) Resposta da clula Fosforilaes em cadeia

Destruio do RNA viral
STOP sntese de protenas

virais.
Interferindo com o interfero
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53
2008-2009
- Inibem as cinases, etc.
Leuccitos (clulas brancas do sangue)
- Granulcitos Neutrfilos (fagcito profissional);
Eosinfilo;
Basfilo ( aos mastcitos no sangue)
- Moncitos e macrfagos (fagcitos profissionais);
- Linfcitos (T, B, NK);
- Clulas dendrticas (apresentadoras profissionais de antignios).
Os leuccitos tm origem na medula ssea.
Sistema fagoctico mononuclear
- SNC clulas da microglia;
- Pulmo macrfagos alveolares;
- Fgado clulas de Kupffer;
- Bao macrfagos;
- Sangue moncitos;
- Glomrulo renal tambm tem macrfagos (clulas mesangiais);
- rgos linfides;
- Articulaes clulas sinoviais tipo I;
- Osso osteoclastos.
Ontogenia
- Clulas pluripotenciais precursores mielides (clulas dendrticas)

moncitos.
Inflamao
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Geral
2008-2009
Leuccitos em movimento
- Uropdio (vo frente) Com molculas prprias do citosqueleto

(ex: plectina).
Adeso de neutrfilos ao endotlio via interaces entre selectinas endoteliais e

(?).
Selectinas (E, P e L) ligam-se a acares.
Ligao fraca = rolling (rolamento)
Inflamao:
Adeso (rolling) Adeso forte via integrinas (reconhecem as imunoglobulinas)

diapedese migrao.
Quimiotaxia Neutrfilos so atrados a produtos qumicos bacterianos como o

FMLP.
O sistema do complemento e a migrao leucocitria e fagocitose.
- Quimiotoxinas (C5a);
- Anafilotoxinas (C5a);
- Opsoninas (C3b).
Fagocitose
Inicia-se de diferentes maneiras, depois da emisso de pseudopodes (opsoninas)

vacolo internizado, amadurece, funde com lisossomas e h hidrlise dos
componentes.
Os mil patognicos interferem com este processo.
Mecanismo de zipper entre o pseudopode e o microrganismo (aderncia aos

receptores a toda a volta)
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55
2008-2009
A e B: modelo zipper (fecho de correr).
C: modelo coiling (por enrolamento) os pseudpodes enrolamse volta da

legionella.
1 Acidificao do fagossoma ( das coisas mais precoces que ocorrem)
(menor pH = menor intensidade luminosa a 485 nm, a partcula deixa de

brilhar).
2 Trnsito vacuolar
- Fagocitose formao de vacolo (fagossoma), mas a sua membrana

modifica-se quando interage com os endossomas (formados por pinocitose), fundindo-
se depois com os lisossomas (s possvel essa fuso depois de todas as alteraes
transitrias do fagossoma).
3 Fuso fagossoma lisossoma
(isto acontece com bactrias no patognicas)
Grnulos no neutrfilo ( a clula mais assassina que h)
- azurfilos (parecidos com os lisossomas, ex: mieloperoxidase,

hidrolases);
- especficos (lactofenilina).
Pptidos antimicrobianos: PMN;
Precursores de PMN;
Clulas de Paneth com criptidina.
Exploso respiratria (quando a clula ingere uma partcula estranha d-se uma
exploso respiratria elevada produo de radicais de O)
- Macrfagos e neutrfilos produzem muitos radicais de O;
_______________________________________________________________________________________
Geral
2008-2009
- Tm um sistema de cyt que produz HO (OH + OH), que utilizado para

matar as bactrias;
Cl
- Mieloperoxidase: HO HOCl (lixvia; utilizado para destruir os
microrganismos que so fagocitados).
- Catalase utilizada pelos microrganismos para se livrar do HO.
Os neutrfilos so muito mais armados que os macrfagos.
Escape aos fagcitos
- Escape ingesto (cpsulas, paralizao, escape psonizao);
- Invaso de clulas no fagocticas;
- Penetrao activa (Toxoplasma gondii);
- Utilizao de receptores do complemento;
- Subverso da fisiologia dos fagcitos (alterao do trnsito intracelular dos

vacolos);
- Lise do vacolo fagoctico;
- Resistncia aos mecanismos antimicrobianos.
Sobrevivncia intracelular
- Inibio da fuso fagossoma-lisossoma (ex: mycobacterium, legionella,

toxoplasma);
- Escape do fagossoma (listeria induz a polimerizao da actina, de forma a

passar de clula a clula sem passar pelo espao intersticial; cometas de actina ,
tripanossoma, shigella)
Toxoplasma
- Se entrar sem ser por fagocitose passa a residir num vacolo que no
acidifica.
M. tuberculosis
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57
2008-2009
- A clula fagoctica no controla a infeco.
M. avium (doente com SIDA)
Imunidade Adquirida
1- Imunidade humoral (anticorpos);
2- Imunidade celular.
Sistema linfide
Linfcitos B produzem anticorpos (so especficos por causa dos antignios);
Linfcitos T amadurecem no timo. Tm receptores das clulas T (da mesma

famlia das imunoglobulinas);
Diferenciam-se em CD4 ou CD8 reconhecem antignios ligados ao

MHC (complexo maior de histocompatibilidade que se liga a pptidos, processa-os e
entrega-os aos linfcitos T).
Funes principais - no produzem anticorpos, activam clulas fagocticas,
Anticorpos (Imunoglobulinas)
- 4 cadeias (2 leves unidas por pontes S S - e 2 pesadas)
- Fc fragmento cristalizado no varia dentro da mesma classe de

imunoglobulinas.
- Regio varivel reconhece que estranho.
Regies hipervariveis esto na zona de contacto com o antignio.
Produo de anticorpos
1 Expresso dos anticorpos superfcies: cada clula tem o seu anticorpo

especfico superfcie.
2 Interaco anticorpo-antignio * Clulas B de memria
Plasmcitos
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Geral
2008-2009
Diferenciao das clulas B
Linfcito em repouso grande ncleo que ocupa quase toda a clula.
Plasmcito (linfcito activado) rico em RER (para produzir muitas protenas).
Actividade dos anticorpos
1- Neutralizao de toxinas anticorpos ligam-se toxina e impedem que estas

se liguem clula-alvo.
2- Neutralizao de vrus o vrus tem molculas superfcie que ligam a

receptores das clulas, os antignios ligam-se a essas molculas e neutralizam o vrus.
3- Formao de complexos imunes.
4- Opsonizao anticorpo tem uma poro reconhecida por um receptor na

clula fagoctica e esta depois remove os microrganismos.
5- Activao do complemento e lise.
Escape imunidade humoral: estratgias anti-lg
Protenas A e G (estafilococos).
- ligam fragmento Fc das IgG.
Proteases de IgA (Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenza).
- destroem os anticorpos (IgA)
Escape : Tripanossomase africana (doena do sono)
- Muitos picos de parasita;
- A glicoprotena superfcie do microrganimo varia conforme a fase da doena,

por isso h vrias variantes mantm-se a infeco.
- Este glicoprotena VSG codificada no genoma do parasita e todas as

variantes j esto pr-codificadas (a sequncia de formas antignicas , no entanto,
sempre a mesma).
Vrus da gripe (influenza)
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59
2008-2009
- Todos os anos tempos gripe, mas apesar dos anticorpos ficarem l, j no

reconhecem os novos vrus.
- Os vrus em geral variam a expresso de molculas:
- Neuramidade contra estas protenas que se
- Hemaglutinina formam anticorpos.
No ano seguinte estas molculas j so diferentes

produo
de novos anticorpos.
Porque que isto acontece?:
- Recombinao de segmentos de RNA codificando

novas protenas: antigenic shift.
- Ou por mutaes mais subtis:: antigenic drift.
- As pandemias so provocadas por grandes

mutaes.
Mutaes ocorrem nas zonas mais distais, mais expostas

aos anticorpos, mas no ocorrem no seu interior.
O reconhecimento pelo linfcito T:
Tem superfcie receptores da clula T no ligam a tudo, s vm

peptdeos (MHC - major histocompatibility complex); reconhece peptdeos encaixados
no MHC de uma dada clula.
O MHC constitudo por 2 tipos de molculas: Classe I Cadeia

grande ( + pequena) e classe II 2 cadeias intermdias existem vrios genes a
codificar cadeias diferentes > combinao de MHC muito variada num mesmo indivduo
> Porqu? Importante para distinguir indivduos. A variabilidade existe porque MHC
foram seleccionadas por agentes infecciosos.
Imunidade Celular
- O que que os linfcitos T fazem?
- Gerem o sistema imunolgico:
MHC TH1 Ajudam a diferenciar outros linfcitos.
_______________________________________________________________________________________
Geral
2008-2009
Classe II TH2 Ajudam linfcitos B a produzir anticorpos.
- Activam macrfagos;
- Podem ser citotxicos MHC classe 1 sentinelas para o que se est a passar
no organismo.
Linfcitos T MHC classe I CD8
Linfcitos T MHC classe II CD4 so estas que so infectadas pelo HIV.
Citotoxidade
- Clulas com muitos grnulos que so libertados e formam poros nas

membranas da clula alvo morte programada da clula alvo.
Activao dos macrfagos (pelos linfcitos T organiza os macrfagos num

conjunto de clulas granuloma (com clulas infectadas no interior) impedindo o
crescimento do microrganismo).
Interfero gama: a citocina Th1 - muito importante, sem ele o animal morre
mesmo se inoculado com microrganismos incuos.
TH (CD4) TH1 As citoquinas (ex: interfero gama) que libertam so diferentes;

Regulam-se e inibem-
- TH2 -se mutuamente. As citoquinas so Importantes para activar

linfcitos B, macrfagos, ou Tc.
As citoquinas so diferentes:
Linfcitos B
Mastcitos
Eosinfilos
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61
2008-2009
TH1 actividade TH2 actividade
IL2 IL4
IFN IL5
TNF IL10
Schistosomase
Cercariae (alojam-se no plexo nervoso) Formas mais pequenas do schistosoma

cobrem-se com protenas do prprio hospedeiro e o sistema imunolgico no o
reconhece; os seus ovos ficam nos tecidos e provocam sua volta a fibrose do tecido. A
fibrose leva estenose/compresso dos vasos, que por sua vez leva a insuficincia
biliar.
Estratgias de Escape aos Mecanismos

de Defesa Antimicrobianos
- Factores de virulncia;
- Toxinas;
- Imuno-modulao.
Toxinas Bacterianas
- Quase sempre protenas secretadas pelos microrganismos.
Exotoxinas so secretadas;
Endotoxinas lipopolissacardeo (pertencem prpria bactria).

_______________________________________________________________________________________
Geral
2008-2009
- Actuam ao ligar a um receptor resposta celular;
- Destruir a membrana celular (formam poros);
- Sistemas enzimticos que ligam a receptores, entram na clula e actuam em

diferentes alvos;
- Sistemas de injeco de substncias no citoplasma celular.
Toxinas que actuam em reconhecimento de superfcie:
1- LPS
2- Superantignios.
Toxicidade do LPS
- Liga a receptores nos macrfagos e este secreta muitas citoquinas que induzem
resposta nas clulas, se esta for um neutrfilo e este liberta o contedo lisossomal.
- Porque que o hospedeiro tem um receptor para o LPS:
- Porque em quantidades pequenas este pode provocar respostas

protectoras (ex: coagulao, activao do complemento, etc.);
- Mas quantidades grandes de LPS induzem uma resposta txica;
- As respostas, que eram dantes protectoras, em grande quantidade

provocam uma grande coagulao e leses no endotlio dos vasos sanguneos
choque sptico (as respostas so as mesmas, mas neste caso muito exageradas, o que
perigoso).
(O LPS em si no txico!)
Superantignios
- H microrganismos que produzem estas protenas que ligam o TCR e MHC

juntando as 2 clulas produo de quantidade exagerada de citoquinas.
Toxinas que destroem as membranas
1- Formadoras de poros Lise celular.
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63
2008-2009
- A Poros grandes
- B Poros pequenos
2- Fosfolipase
Destroem a membrana Lise celular.
Toxinas que destroem as clulas fagocticas
- Leucocidina de Panlon e Valentine:
- Destri neutrfilos (produzida por S. aureus)
- Factor letal:
- Induz apoptose de macrfagos;
- Produzida por B. anthracis.
Hemolisinas estreptoccicas
- So toxinas;
- Hemlise ;
- Hemlise - causa a amigdalite.
Toxinas A/B
B liga a 1 receptor na clula (acidifica o endossoma) e permite a entrada na

clula e depois faz com que entre o componente A no citoplasma alteram diferentes
funes celulares.
Neurotoxinas botulnica e tetnica
- Actuam no sistema nervoso;
- Fazem ambas a mesma coisa: so proteases que clivam as protena

responsveis pela fuso das vesculas com a membrana no terminal pr-sinptico.
- Ttano: por contraco contnua dos msculos (impedindo por isso a

respirao);
- Botulismo: paralisia flcida.
_______________________________________________________________________________________
Geral
2008-2009
Botulismo
- A toxina entra no motoneurnio, impede a fuso das vesculas no h

contraco muscular. Paralisia flcida.
Ttano
- A toxina bloqueia a libertao do neurnio inibitrio est sempre excitado a

libertar acetilcolina contraco contnua; paralisia espstica.
Escarlatina (devida toxina eritrognica de S. pyogenes)
Antraz (carbnculo)
- A sua toxina do grupo A/B;
- Factor letal;
- Factor de edema.
Neutralizao das toxinas
- Os anticorpos evitam que estas toxinas se liguem ao receptor.
Sistemas de secreo
- Sistemas 3 e 4 so como agulhas (parecida com flagelos) que injectam no

citoplasma da clula protenas.
- Shigella flexneri (disenteria bacteriana)
- Secreo de protenas para o citoplasma de clulas do hospedeiro;
- Essas protenas alteram funes celulares diversas nas clulas do hospedeiro;
- S presentes em bactrias de Gram- patognicas;
- Patogneos intestinais;
________________________________________________________________________________________________________
65
2008-2009
- Outros patogneos.
Sistema tipo III
Yersinia inibe a fagocitose por sistemas de secreo do tipo III.
E. coli enteropatognica (EPEC)
No entram dentro da clula; substituiu a ausncia de receptores da clula

hospedeira por uma protena por ela produzida.
Ilhas de patogenicidade
- Zonas do genoma de grande dimenso;
- Possuem contedos em G + C S do resto do genoma;
- Codificam factores de virulncia, nomeadamente os sistemas de secreo de

tipo III;
- Resultam da transferncia horizontal de genes entre espcies diferentes.
Cpsulas (no s em bactrias, como tambm em fungos (ex: Cryptococcus

neoformans)
- Inibe a fagocitose porque esconde os fragmentos de complemento que fariam a

opsonizao;
- Inibe a produo de anticorpos.
Mecanismos de controlo da infeco pelo

Streptococcus pyogenes (amigdalites)
- Activao do complemento;
- Produo de anticorpos e activao do complemento;
- Recrutamento de PMN;
- Opsonizao e fagocitose por PMN;
- Morte por mecanismos oxidativos? Por defensinas?

_______________________________________________________________________________________
Geral
2008-2009
Adesinas: Termo genrico
- Fmbrias ou pili ligao de bactrias s clulas epiteliais;
- Protenas do invlucro interagem com receptores;
- cidos lipoteicicos dos Gram+.
Parasitismo intracelular
Os microrganismos tm que se adaptar ao ambiente intracelular e impedir a

morte dessa clula.
- Capacidade de invadir clulas no fagocticas.
Bactrias Estrutura parede; nomenclatura bsica.
Vrus Formas; DNA, RNA.
IMP
Herpes latncia
HIV
Plasmdio Aspectos fundamentais
Malria
Metabolismo (aulas prticas)
Ciclos de vida no preciso detalhar dos fungos e

protozorios (Nutrio, sexualidade, etc.
Microbiologia
Estudo dos organismos demasiado pequenos para serem claramente visualizados

a olho nu.
Inclui: Vrus, bactrias, protozorios, algas, fungos.
Existem 2 tipos fundamentais de clulas:
________________________________________________________________________________________________________
67
2008-2009
Procariticas Com uma morfologia mais simples que as eucariotas e

sem membrana a delimitar o ncleo. Todas as bactrias so procariticas.
Eucariticas - Tm um ncleo delimitado por membrana.
Como tal o Mundo Microbiano tambm constitudo por esses dois tipos de clulas:
- Procariticas Bactrias
Arqueobactrias
- Eucariticas Protozorios
Algas
Fungos
Plantas
Animais
Actualmente os organismos esto divididos em 3 domnios:
- BACTERIA (verdadeiras bactrias ou eubactrias)
- ARCHAE
- EUCARIA (todos os organismos eucariticos)
_______________________________________________________________________________________
Geral

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Instituto de Cincias Biomdicas Abel Salazar

Autor(a) Desonhecido(a), passada a computador por Maria Morais

Estrutura da clula procaritica

- Bastonete ou cilindro: bacilos;

- Espiral: espirilos (rgidos), espiroquetas (flexveis);

A forma da bactria determinada pela parede celular.

Diviso celular e forma:

Cocos: 1 plano de diviso diplococos Bacilos: diplobacilos

2 planos de diviso ttradas

3 planos de diviso Sarcina

As bactrias variam em tamanho tanto quanto em forma: as mais pequenas tm

E. coli 1,1 a 1,5 m largura x 2 a 6 m comprimento

Poucas bactrias so maiores que a mdia das clulas eucariticas (10 a 15 m

Estrutura da clula bacteriana

- Invlucro celular: parede celular + membrana plasmtica.

- Citoplasma: nucleide (sem invlucro)

- Apndices: flagelos e fmbrias

Composio do citoplasma de Escherichia coli

- Massa seca: C (50%), O (20%), N (14%), H (8%), P (3%), K (2%), S (1%),

- 95% so macromolculas: RNA (20%), protenas (50%) peptidoglicano

S eubactrias que o possuem:

Responsvel pela estrutura da

- Colesterol (no sintetizado pelas bactrias)

- Mycoplasma no tem parede adquiriu o colesterol do

- Hopanides So molculas semelhantes ao colesterol, sintetizados a

- Protenas Perifricas (20 a 30%) e integrais (70 a 80%).

- Permeabilidade selectiva barreira fsica; sistemas de transporte;

- Respirao cadeia respiratria + ATPase;

- Transporte de nutrientes sistema simporte e antiporte;

- Secreo sistema secreo;

- Locomoo (quimiotaxia) motor do flagelo;

- Diviso ligao ao cromossoma;

- Sntese da parede celular PBP, bactoprenol (molcula carregadora de

Normalmente as membranas plasmticas tm maior proporo de protenas do que

- Transporte com translocao de grupo;

- Transporte ABC (cassette que liga ATP).

Sistemas de secreo de protenas em bactrias:

- Tipo I, II, III, IV, V.

So invaginaes da membrana plasmtica com forma de vesculas,

- Local onde se encontra o cromossoma procaritico e cuja principal

- Constitudo por DNA circular (60%), RNA (30%), protenas (10%).

- As protenas do nucleide no so histonas.

- DNA girase a enzima que provoca o enrolamento do DNA,

- Plasmdeos - Molculas de DNA circulares mais pequenas que tambm

Corpos de incluso grnulos de armazenamento de:

- Lpidos (grnulos de poli--hidroxibutirato. : 0,2 a 0,7 m) So

- Polissacardeos (glicognio) providenciando material p/

- Polifosfatos: grnulos de votulina ou metacromticos. So incluses

- Enxofre Outra incluso inorgnica, presente nas bactrias

- Pptidos Grnulos de cianoficinas: arginina + aspartato.

- Magnetossomas So incluses que contm ferro e magnetite. Servem

- Presente em muitas cianobactrias;

- So agregados de um grande nmero de pequenas vesculas de gs;

- As paredes das vesculas no possuem lpidos e so constitudas apenas

- As bactrias com estes vacolos podem regular o seu grau de

- Podem localizar-se: Na matriz citoplasmtica sintetizam protenas

Na membrana plasmtica Sintetizam protenas para

a camada, normalmente rgida, que se localiza por fora da membrana plasmtica.

Colorao de Gram - importante na prtica clnica

Corante primria (violeta de cristal)

Essas diferenas devem-se presena do peptidoglicano, em diferentes

O peptidoglicano em sim no corado, no entanto, actua como uma barreira de

Durante o procedimento da colorao, as bactrias so primeiro coradas com o