XIII Congresso Brasileiro de Parasitologia Veterinária & I Simpósio Latino-Americano de Ricketisioses, Ouro Preto, MG, 2004.
EPIDEMIOLOGIA DE Neospora caninum
Maria Angela Ornelas de Almeida
Universidade Federal da Bahia, Escola de Medicina Veterinária, Laboratório de Diagnóstico das Parasitoses dos Animais/LDPA.
E-mail: aornelas@ufba.br
A neosporose esta amplamente distribuída em vários
estados brasileiros, sendo relatada a ocorrência do parasito ou de
anticorpos séricos anti-Neospora caninum nos bovinos, caprinos,
ovinos, caninos. O N. caninum é um protozoário apicomplexa que
causa infecções associadas com perda fetal e mortalidade neonatal
nestes animais (Dubey e Lindsay 1996). No Rio Grande do Sul, a
estimativa de casos de aborto em rebanhos bovinos por este proto-
zoário correspondeu a 10% (Corbellini et al., 2000).
Duas espécies do gênero Neospora já foram descritas, o
N. caninum que infecta uma variedade de mamíferos e o N. hu-
ghesi isolada de eqüinos. Pela sua similaridade com outros coccí-
dios, como Toxoplasma gondii e Hammondia heydorni, a caracte-
rização molecular vem sendo realizada com o seqüenciamento dos
espaços internos transcritos (ITS1) do DNA, permitindo discrimi-
nar a variabilidade inter e intra-espécie. A seqüência de ITS1 das
cepas de N. caninum NC-2, NC-Liverpool, NCSweB1, NC-beef e
NC-Illinois apresentaram 100% de similaridade, enquanto a cepa
NC-Bahia, isolada do cérebro do cão do município de Salvador, Bahia
(Gondim et al., 2001), diferiu em vários pares de bases das cepas da
América do Norte e Europa, demonstrando que a variação intracepa
para a região ITS1 parece ser comum em N. caninum, ao contrário do
que ocorre com T. gondii, no qual esta seqüência é altamente conser-
vada (Gondim et al., 2004). Este estudo mostra que o seqüencia-
mento dos ITSs pode ser aplicado como uma ferramenta comple-
mentar na identificação das espécies e cepas de Neospora.
O N. caninum tem como hospedeiros definitivos o cão e
coiote (Gondim et al., 2004) que eliminam oocistos após ingestão
de tecidos ou órgãos dos hospedeiros intermediários. O ciclo de
vida apresenta três estágios infecciosos: bradzoítos, taquizoítos e
esporozoítos. Os bradzoítos representam o estágio de proliferação
lenta, no qual os parasitas formam cistos teciduais, principalmente
no sistema nervoso central. Sob certas circunstâncias, como pre-
nhes e imunodeficiência, os bradzoítos podem converter-se em
taquizoítos, que proliferam assexuadamente, promovendo a infec-
ção fetal ou causar lesões nestes animais imunossuprimidos. Os
taquizoítos e bradzoítos são os estágios intracelulares encontrados
nos hospedeiros intermédios (Dubey, 2003).
A ingestão oral de cisto que contêm bradzoítos por hos-
pedeiros carnívoros promove a diferenciação sexual do parasito
nos tecidos intestinais, com formação de oocistos que são excreta-
dos nas fezes. No ambiente, nestes oocistos se desenvolvem os
esporozoítos, por um processo chamado esporulação. Pouco é
conhecido sobre o desenvolvimento e sobrevivências dos oocistos
no meio ambiente. Os oocistos esporulados são, oralmente, infec-
tantes para ambos carnívoros e herbívoros, sendo de importância
principal na epidemiologia da neosporose devido à contaminação
ambiental. Os oocistos de N. caninum são morfologicamente se-
melhantes ao de T. gondii e Hammondia hammondi encontrados
em fezes de gato, e se assemelha a oocisto de H. heydorni elimina-
dos nas fezes de canídeos (Dubey et al., 2002).
Nos últimos anos a neosporose tem sido reconhecida
como uma doença importante economicamente com considerável
impacto sobre a pecuária, e um estudo retrospectivo realizado por
Dubey et al. (1990), demonstrou que não é uma doença nova sen-
do observada em caninos nos Estados Unidos desde 1957.
O primeiro inquérito sorológico para N. caninum, no
Brasil, foi relatado por Brautigam et al. (1996) em bovinos criados
no Mato Grosso do Sul e São Paulo. Uma indicação que a neospo-
rose poderia ser uma significativa causa de abortos em bovinos no
país foi obtido no estudo de soroprevalência em vacas leiteiras
com histórico de abortamento por Gondim e Sartor (1997) em São
Paulo, e o primeiro caso confirmado da infecção por N. caninum
foi publicado por Gondim et al. (1999) em bovinos no Estado da
Bahia. Neste mesmo ano, ocorreu o primeiro isolamento de N.
Rev. Bras. Parasitol.Vet., v.13, suplemento 1, 2004
caninum no país (Gondim et al., 2000), em um cão da raça Collie,
com sete anos de idade, que apresentava neuropatia, com incoor-
denação e paresia de membros posteriores. O título sérico de
1:1600 para N. caninum foi encontrado pela imunofluorescência
indireta, usando-se taquizoítos da cepa japonesa JPA-1 (Yamane
et al., 1997), mantida na Escola de Medicina Veterinária/UFBA.
Para o isolamento foi utilizado cérebro do cão para ino-
cular gerbil da Mongólia (Gondim et al., 2001), que foram sacrifi-
cados entre três e quatro meses após a inoculação, para obtenção
de amostras de cérebros. Estas amostras foram usadas na infecção
de cultura de células renais de macaco COS-1, observando-se a
presença de taquizoítos entre 7° e 15° dias de inoculação. O isola-
do de N. caninum obtido foi denominada NC-Bahia.
As taxas de prevalência da neosporose em bovinos va-
riaram de 7,6 a 30,13% nas diferentes regiões brasileiras, sendo de
30,0% em Pernambuco, entre 10,49 e 14,09% na Bahia, 7,7 a 8%
no Mato Grosso do Sul, 7,7% em Minas Gerais, 7,6 a 30,13% em
São Paulo, 11,69% no Paraná e 23,8% no Rio de Janeiro.
Em um recente levantamento realizado por Ragozo et
al. (2003) sobre a ocorrência de anticorpos para N. caninum em
soros bovinos de seis Estados brasileiros, documentou-se a soropo-
sitividade de 23,6%, com aumento deste índice nos bovinos com
idade superior a 24 meses, e dentre os Estados, o Rio de Janeiro
apresentou a menor (14,7%) e Minas Gerais a maior (29,0%) por-
centagem de animais reagentes. Com relação à aptidão animal,
observou-se maior ocorrência nos bovinos de leite (26,2%) quando
comparados com os de corte (19,1%), e os Estados do Paraná,
Mato Grosso do Sul e Rio Grande do Sul apresentaram os maiores
valores de ocorrência nos bovinos de corte e Minas Gerais nos de
leite.
Melo et al. (2001) analisaram, por um teste ELISA,
amostras de soros de bovinos pertencentes a 18 rebanhos que fo-
ram agrupados em duas categorias, de acordo com o tipo de leite
produzido nas propriedades: 1) rebanhos produtores de leite tipo
A/B e 2) rebanhos produtores de leite tipo C, constatando freqüên-
cias diferentes de infecção por N. caninum, de 27,31% (65/238)
para o sistema leiteiro do tipo A/B e de 12,72% (44/346) para o
sistema leiteiro do tipo C. Também houve diferença entre as mes-
mas faixas etárias quando comparados os dois sistemas leiteiros,
mas a idade não diferiu dentro de um mesmo sistema produtivo.
Em búfalos, anticorpos para N. caninum foram reporta-
dos em dois estudos na Bahia e São Paulo, observando-se, respec-
tivamente, 36,52% e 64,0% de animais sororeagentes.
Em ovinos, a prevalência de 0,45% foi observada num
dos poucos estudos com infecção natural (Helmick et al., 2002). O
primeiro relato de neosporose ovina ocorrida naturalmente foi em
um cordeiro, nascido a termo, com sintomatologia nervosa (Dubey
et al, 1990). No Brasil, Socorras et al. (2002), demonstraram que
ovelhas deslanadas são susceptíveis à infecção experimental com
N. caninum, e a infecção intra-uterina dos fetos resulta no nasci-
mento de cordeiros clinicamente normais, porém congenitamente
infectados.
Na Bahia, a ocorrência de anticorpos IgG anti-N. cani-
num foi documentada em 282 amostras séricas de ovinos de 10
rebanhos, pelo teste de Imunofluorescência Indireta, observando-se
7,4% (21/282) de reações positivas com ponto de corte de 1:50 e
títulos variando de 1:50 a 1:800. Dos rebanhos examinados, seis
apresentaram ovinos sororeagentes, com positividade variando de
2,5 a 32,0%. No Immunoblotting, foram selecionados soros positi-
vos e negativos para anticorpos anti-N. caninum, no qual os posi-
tivos reconheceram determinantes antigênicos de 10 a 18 polipep-
tídios, da cepa NC-Bahia de N. caninum, entre 11 e 93 kDa, sendo
observada maior reatividade com as proteínas 27-31 kDa e 36-41
kDa, relatadas como Nc-SAG-1 e Nc-SRS-2, respectivamente. Os
1
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anticorpos IgG presentes no soro negativo reconheceram peptídeos
de 21, 23, 67, 83 e 110 kDa, não relacionadas com proteínas
importantes do parasito.
Neste Estado foi também avaliados vinte borregos, pro-
dutos F1 do cruzamento de matrizes das raças Santa Inês, Morada
Nova e Rabo Largo cruzadas com reprodutores Dorper, que foram
acompanhados do nascimento até o 7o mês de idade, observando-
se a soropositividade para N. caninum de 3,2% (títulos de 1:50 a
1:1600) e 5,5% (1:25 a 1:200) para matrizes e borregos Morada
Nova, respectivamente, enquanto as matrizes e borregos Rabo
Largo e matrizes Santa Inês foram soronegativos, e apenas um
borrego Santa Inês (3,4%) apresentou título 1:25. As médias de
peso ao nascer, ganho de peso diário e peso ao abate foram de 3,2;
0,13 e 22 nos borregos positivos para N. caninum, respectivamen-
te.
Com relação a neosporose caprina existem poucos es-
tudos, sendo o primeiro realizado por Dubey et al. (1992), quando
detectaram, por análise histológica, a presença do protozoário em
um feto abortado. Neste mesmo ano, BARR et al. (1992) associa-
ram dois casos de abortamentos caprinos à infecção por N. cani-
num. No Brasil, Corbellini et al. (2001) descreveram um caso de
neosporose congênita nesta espécie animal.
No Estado da Bahia, estudos têm sido realizados para
avaliar anticorpos séricos anti-N. caninum em rebanhos capri-
nos, sendo
Tabela 1. Variáveis relacionadas com uma possível infecção dos caprinos leiteiros por Neospora caninum e seus respectivos riscos relativos
amostrais (RR>1,00).
Variáveis
Não comprar animais para reposição do rebanho
Presença de bovinos
Presença de cães
Instalações de chão batido
Sistema de criação em confinamento
Condições inapropriadas de armazenamento de ração
Riachos como fonte de água de bebida
Higiene inadequada
Distancia de até 10 m do capril a casa do tratador e/ou do proprietário
Presença de ovinos
Mão de obra familiar
Tabela 2. Variáveis relacionadas com uma possível proteção dos caprinos leiteiros por Neospora caninum e seus respectivos riscos relativos
amostrais (RR<1,00).
Variáveis
Compra de animais para reposição do rebanho
Acesso dos cães às instalações dos caprinos
Presença de roedores
Apesar da presença da infecção do N. caninum em vários
animais de produção, muito pouco foi documentado na espécie
suína. O primeiro estudo experimental por Jensen et al. (1998), com
inoculação de taquizoítos do protozoário em fêmeas prenhes, resul-
tou em endometrite necrosante, hepatite, esplenite e miocardite
nestes animais, enquanto nos fetos os achados patológicos foram
miocardite, pneumonite, nefrite, hepatite não supurativas. O outro
estudo descrito por Helmick et al. (2002), na Inglaterra, demonstrou
a ocorrência da infecção natural por N. caninum em suínos apresen-
tando uma soroprevalência de 8,8% (40/454).
A presença de anticorpos IgG anti-N. caninum em amos-
tras sorológicas de 130 suínos criados intensivamente e 106 exten-
sivamente no Estado Bahia foi investigada pela técnica de
Imunofluorescência Indireta (IFI), com ponto de corte de 1:40, não
sendo detectados anticorpos nos soros de animais procedentes de
sistema intensivo, enquanto 7,5% (8/106) de soropositividade foi
encontrada nos suínos criados extensivamente, contudo na
avaliação por Western Immunobloting, não houve reconhecimento
2 Rev. Bras. Parasitol.Vet., v.13, suplemento 1, 2004
encontrado de 15,10% (58/384) soropositividade pela técnica de
IFI. A presença de anticorpos IgG anti-N. caninum foram detecta-
dos em caprinos, de quase todas as faixas etárias, especialmente
entre quatro a seis anos, e a raça Pardo Alpino foi a que apresentou
a maior freqüência de positividade, seguida das raças Saanem e Anglo
Nubiano. Em relação à categoria zootécnica, a maior freqüência de
anticorpos foi encontrada nas fêmeas em lactação, seguida de fêmeas
secas e gestantes.
Um estudo epidemiológico transversal em rebanhos de
caprinos leiteiros, criados próximos ao município de Salvador, foi
elaborado para estabelecer associações entre a prevalência de anti-
corpos IgG anti-Neospora caninum e as variáveis que possam
contribuir para a infecção destes animais. Os resultados obtidos
estão registrados nas tabelas 1 e 2.
R.R
1,50
1,50
1,50
1,33
1,25
1,20
1,20
1,20
1,17
1,17
1,17
R.R
0,67
0,67
0,86
Western Immunobloting, não houve reconhecimento antigênico de
anticorpos específicos para o parasito pelas amostras reagentes no
IFI.
No levantamento da neosporose eqüina no Brasil não
houve detecção de anticorpos para N. caninum.
Em animais silvestres como lobos-guará (Chrysocyon
brachyurus), provenientes de zoológicos e de vida livre e cachor-
ros-do-mato (Cerdocyon thous) não foram detectados anticorpos
para N. caninum. Em cervídeos, do Mato Grosso do Sul, foi obser-
vado 18,75% de positividade nas amostras séricas.
As taxas de prevalência da neosporose em caninos varia-
ram de 6,7 % a 73,37%, entre os estados de Bahia (11,2 a 13,3%),
Minas Gerais (6,7%), São Paulo (21,92 a 35,57%) e Sergipe
(63,37% e 73,37%).
A freqüência de anticorpos IgG anti-Neospora caninum
foi estudada em 415 amostras séricas de cães domiciliados e erran-
tes, procedentes dos municípios baianos de Salvador e Lauro de
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Freitas, utilizando-se a técnica de imunofluorescência indireta, com
ponto de corte igual a 1:50. Anticorpos IgG anti-N. caninum foram
detectados em 13,3% (22/165) dos cães domiciliados e em 11,2%
(28/250) dos errantes. As freqüências de soropositivos para os ma-
chos e fêmeas foram 8,0% (6/75) e 18,4% (14/76) nos cães domici-
liados e 12,6% (17/135) e 9,6% (11/115) nos errantes, respectiva-
mente. A maioria dos cães sororeagentes (28,6%) apresentava idade
entre dois e três anos e eram das raças Boxer, Rotweiller e Fila
Brasileiro, com soroprevalência igual a 27,3% (3/11), 20,0% (2/10)
e 19,4% (6/31), respectivamente. Entre os distritos sanitários as
maiores prevalências ocorreram em São Caetano/Valéria (23,1%) e
Boca do Rio (20,0%). Não houve diferenças estatisticamente signi-
ficativas entre sexo, idade, raça, distrito e o parasitismo dos cães
pelo N. caninum.
Apesar das altas prevalências de anticorpos nos animais,
a freqüência da neosporose clínica tem sido pouco registrada, pro-
vavelmente devido à doença apresentar sinais clínicos comuns a
outras enfermidades.
Os trabalhos brasileiros de ocorrência da neosporose
permitem afirmar que não há evidências de qualquer distribuição
localizada do parasito, e atualmente é possível definir uma visão
nacional da presença deste protozoário no nosso território. Os fato-
res de natureza epidemiológica ainda precisam ser estudados, como
o papel do cão e de outros possíveis reservatórios na causalidade da
doença nos animais domésticos no meio rural e urbano. Um outro
aspecto a ser investigado é o potencial zoonótico deste protozoário.
Em Salvador foi verificado 5% e 3,8% de soropositividade para
anticorpos IgG anti-N. caninum em mulheres gestantes com ou sem
história de aborto espontâneo recorrente, respectivamente, e 15% de
sororeagentes entre os indivíduos com AIDS.
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