Ciência

AVALIAÇÃO DOAnimal
SUCO Brasileira
RUMINAL v. 3, n. 2, DE
p. 57-63, jul./dez. 2002
BOVINOS “A FRESCO” 57
E APÓS 12 HORAS DE CONSERVAÇÃO

NAIDA CRISTINA BORGES1, LUIZ ANTÔNIO FRANCO SILVA2, MARIA CLORINDA SOARES FIORAVANTI2, PAULO
HENRIQUE JORGE DA CUNHA2, ROSANA REZENDE MORAES3, PATRÍCIA LORENA GUIMARÃES4 E MÁRCIO
EDUARDO PEREIRA MARTINS5

1. Médica Veterinária, Professora MSc., Diretora do Hospital Veterinário da Escola de Veterinária da Universidade Federal de Goiás. Caixa
Postal 131, CEP 74001 – 970. Goiânia – Go. naida@vet.ufg.br
2. Médicos Veterinários, Professores Doutores do Departamento de Medicina Veterinária da Escola de Veterinária da Universidade Federal
de Goiás.
3. Médica Veterinária, MSc, Ministério da Agricultura. Brasília, DF.
4. Médica Veterinária, MSc. Hospital Veterinário da Escola de Veterinária da Universidade Federal de Goiás.
5. Aluno de Graduação do Curso de Medicina Veterinária da Universidade Federal de Goiás.

RESUMO

Avaliaram-se no presente estudo os parâmetros físi-
cos (cor, odor, consistência e tempo de sedimentação e
flotação), químicos (pH, e tempo de redução do azul de
metileno) e biológicos (avaliação dos protozoários in vitro,
contagem de infusórios e percentagem de protozoários viá-
veis) do suco ruminal de 50 fêmeas bovinas adultas clinica-
mente saudáveis, imediatamente após a colheita e ao final
de 12 horas de armazenamento em garrafas térmicas comuns.
Utilizaram-se animais em lactação, da raça Girolando, e ali-
mentados a pasto de Brachiaria decumbens. As análises
foram realizadas em uma amostra individual de, aproximada-
mente, 400 ml de suco ruminal, colhida com sonda
oroesofágica do tipo Schambye e Sorensen. Os resultados
foram avaliados por meio de estatística descritiva e teste “t”
PALAVRAS-CHAVE: Bovinos, fluido ruminal, métodos de conservação, pH, protozoários.
de student para amostras pareadas (P<0,05). Os aspectos
físicos, a avaliação in vitro dos infusórios e o número de
protozoários por mililitro encontravam-se dentro dos padrões
de normalidade na primeira avaliação, porém, após 12 horas
de conservação, foram observadas alterações sugestivas
de modificações na microbiota do suco ruminal. Constata-
ram-se, após conservação, reduções estatísticas significati-
vas em relação ao pH, percentual de protozoários viáveis e
aumento no tempo de redução do azul de metileno (PRAM).
Conclui-se que a garrafa térmica comum pode ser usada como
opção na conservação de suco ruminal de bovinos em situ-
ações de clínica de campo, porém a análise no momento da
colheita apresenta resultados mais fidedignos.

SUMMARY

BOVINE RUMINAL FLUID ANALYSIS “IN FRESH” AND AFTER 12 HOURS OF CONSERVATION

This research had as objective to analyze the physical
(color, smell, consistance and sedimentation/flotation test -
TAS), chemicals (pH and methylene blue reduction test) and
biological aspects (in vitro protozoa examination, infusoria
counts and percentual of living protozoa) of ruminal fluid
from 50 adult and healthy females Girolando cows imediately
after and 12 hours after collection and storage in vacuum
bottle. The animals were in lactation period and grazing
Brachiaria decumbens. The samples of ruminal fluid
contained nearly 400 ml and were collected through
Schambye and Sorensen esophageal probe. The results were
statiscally analyzed through descriptive statistic and “t” test
(P<0.05). Although the first evaluation of ruminal fluid was
normal for physical aspects, in vitro evalution of infusoria
counts, and for the number of protozoa per ml after 12 hours,
some alterations were verified. Significant differences were
observed in decreasing of pH, percentual of live protozoa
and increasing in the time of methylene blue reduction test.
Therefore the thermal bottle is a good option to conserve
ruminal fluid but betler results can be found when the ruminal
fluid is analyzed immediately after the collection.

KEY WORDS: Bovine, conservation methods, pH, protozoa, ruminal fluid.

INTRODUÇÃO estabelecida para cada refeição foi modificada e, de

A explosão demográfica dos bovídeos ocor-
reu, concomitantemente, com mudanças significati-
vas na forma de arraçoamento desses animais. Sur-
giram novas variedades de forrageiras, a quantidade
uma maneira geral, maiores volumes são oferecidos
objetivando uma maior produtividade.
Apesar de menos freqüentes, não é incomum
diagnosticar distúrbios gástricos em bovinos criados
em regime de criação extensiva. Esses problemas
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geralmente ocorrem quando os animais são
suplementados em períodos de estiagem ou
entressafra, em conseqüência da ingestão acidental
de plantas tóxicas ou em bovinos manejados em la-
vouras de milho, soja, arroz ou sorgo após a colhei-
ta. De acordo com Russell & Rychlik (2001), os ru-
minantes criados nos países em desenvolvimento são,
em sua maioria, alimentados com rações deficientes
em fibra, gerando transtornos nos mecanismos fisio-
lógicos e homeostáticos do rúmen, declínios no pH e
alterações de microbiota, o que torna esses animais
susceptíveis a desordens metabólicas e doenças in-
fecciosas.
A análise do fluido ruminal é de indiscutível
valor no diagnóstico de enfermidades ligadas ao apa-
relho digestivo dos ruminantes, especialmente aque-
las dos compartimentos pré-gástricos, pois a
microbiota do rúmen é altamente sensível às altera-
ções externas e internas às quais rotineiramente es-
tão submetidos os animais. De acordo com Costa
(1992), o conhecimento dos aspectos relacionados
ao conteúdo ruminal de bovinos tem sido limitado,
em especial no que se refere às alterações clínicas,
químicas e biológicas. Esse autor acrescenta que o
conhecimento desses valores é de fundamental im-
portância na elucidação diagnóstica dos transtornos
digestivos, freqüentemente encontrados também na
clínica bovina realizada a campo.
A análise do suco ruminal é um procedimento
relativamente simples e fornece ao veterinário infor-
mações importantes sobre o trato digestivo superior
dos bovinos. Várias técnicas foram desenvolvidas para
se proceder a uma avaliação precisa e segura. Se-
gundo Souza (1990), Costa (1992), Rings & Rings
(1993) e Dirksen (1993), o conteúdo do rúmen pode
ser verificado quanto aos aspectos físicos (cor, odor,
consistência e tempo de sedimentação e flotação);
quanto às características químicas (o pH, a fermen-
tação de glicose, a redução de nitritos e o tempo de
redução do azul de metileno); e quanto aos
parâmetros biológicos (avaliação de bactérias e de
protozoários).
De acordo com Souza (1990), o suco ruminal
pode ser utilizado na terapêutica dos problemas
digestivos e o recomendam nas indigestões primárias
de origem alimentar e como auxiliar no tratamento de
doenças metabólicas que alterem as funções dos pré-
estômagos. O autor descreve ainda que observaram
que a administração oral de três a cinco litros de suco
de rúmen, em três a quatro aplicações, foi decisiva
para a melhora de 31 bovinos que apresentaram
inatividades crônicas da microbiota ruminal.
A conservação do suco ruminal, quando existe
a necessidade de transportá-lo por certas distâncias
para ser administrado e/ou analisado, ainda constitui
um desafio. Souza (1990) adicionou água de coco,
solução de açúcar e ovo integral a diferentes amostras
de fluido ruminal e submeteu-as às temperaturas
ambiente, de geladeira e de freezer, na tentativa de
verificar o melhor método de conservação.
No Brasil, especialmente na Região Centro-
Oeste, as grandes distâncias entre as propriedades
rurais e destas com os centros urbanos, aliado ao
tipo de bovinocultura que vem sendo implantado na
região, exigem do médico veterinário, que exerce suas
atividades a campo, cada vez mais conhecimento e
criatividade. Um desses desafios são a conservação
e o transporte adequados do suco de rúmen para
fins diagnósticos e terapêuticos. Acrescenta-se a ca-
rência de parâmetros analíticos das atividades ruminais
para a região, em bovinos mestiços e alimentados a
pasto.
Este trabalho propõe-se a avaliar os parâmetros
físicos, químicos e biológicos do suco de rúmen
imediatamente após a colheita e após 12 horas de
armazenamento em garrafas térmicas comuns.
MATERIAL E MÉTODOS
O trabalho foi realizado em cinco propriedades
rurais do Estado de Goiás distando em média 60 km
de Goiânia. As fazendas foram selecionadas
aleatoriamente e levou-se em consideração o fato de
possuírem um rebanho médio de 100 vacas em
lactação. Estabeleceu-se que seriam escolhidas
amostras aleatórias de 10% do rebanho perfazendo
um total de 50 fêmeas bovinas adultas clinicamente
saudáveis, da raça Girolando, submetidas
exclusivamente ao regime de pasto (Brachiaria
decumbens) e sal mineral ad libitum, durante o
período de abril a maio de 1998.
 Ciência Animal Brasileira v. 3, n. 2, p. 57-63, jul./dez. 2002 59

Colheu-se uma amostra de, aproximadamen-
te, 400 ml de suco ruminal de cada bovino por meio
de sonda oroesofágica tipos Schambye e Sorensen
e, imediatamente, avaliaram-se os seguintes
parâmetros: aspectos organolépticos (cor, odor, con-
sistência), avaliação in vitro dos infusórios (densida-
de, motilidade e tamanho dos protozoários), pH, tem-
po de sedimentação e flotação (TAS), prova de re-
dução do azul de metileno (PRAM), contagem de
infusórios e percentual de protozoários viáveis, de
acordo com metodologia descrita por Dirksen
(1993).
Aproximadamente 250 ml do fluido foram
acondicionados em garrafas térmicas de igual volume
e reavaliados após 12 horas de conservação, no
Laboratório de Patologia Clínica da Escola de
Veterinária da Universidade Federal de Goiás. Nas
duas avaliações, o pH foi medido com potenciômetro,
e a contagem de protozoários foi feita em câmara de
Fuchs-Roshental.
Os resultados referentes às duas primeiras
provas foram analisados por meio de estatística
descritiva, e os dados referentes ao pH, TAS, PRAM,
número de infusórios e percentual de protozoários
viáveis foram comparados estatisticamente pelo teste
“t” de student para amostras pareadas, a um nível de
significância de 5% de acordo com Sampaio (1998).
RESULTADOS E DISCUSSÃO
A análise organoléptica do suco ruminal a fresco
(Tabela 1) apresentou em sua maioria padrões de
normalidade quanto à cor, odor e consistência, o que
está de acordo com as citações de Dirksen (1981),
Garry (1990), Souza (1990), Costa (1992) e Dirksen
(1993), para animais que têm como única fonte de
alimentação as gramíneas. Após 12 horas de
conservação esses parâmetros sofreram alterações
significativas; a cor tornou-se verde-escura, o odor
levemente ácido e a consistência densa, sugerindo
modificações na microbiota ruminal. Variações na cor,
odor e consistência do líquido ruminal também foram
constatadas por Souza (1990) quando manteve o
fluido ruminal à temperatura ambiente. De acordo com
Campos Neto (1977) e Dirksen (1993), o odor torna-
se ácido por causa do aumento de produtos finais
ácidos. Garry (1993) afirma que o aumento de
viscosidade do fluido ruminal ocorre à medida que a
flora ruminal perde sua atividade.

TABELA 1. Avaliação organoléptica do fluido ruminal a fresco e após 12 horas de conservação em garrafa térmica, obtido
de fêmeas bovinas adultas, da raça Girolando, submetidas exclusivamente ao regime de pasto (Brachiaria decumbens) e sal
mineral ad libitum, no período de abril a maio de 1998.

Caracteres A fresco Após 12 horas de conservação em garrafa térmica

Nº de animais % Nº de animais %

Cor
Verde-oliva 34 68 7 14
Verde-escuro-acastanhado 14 28 43 86
Verde-claro-amarelado 2 4 0 0
Odor
Aromático 50 100 3 6
Levemente ácido 0 0 47 94
Consistência
Fluida 2 4 0 0
Normal 39 78 2 4
Viscosa 9 18 0 0
Densa 0 0 48 96
60 BORGES, N. C. et al. – Avaliação do suco ruminal de bovinos “a fresco” e ...

Nota-se na Tabela 2 que no exame a fresco os
protozoários apresentaram densidade e motilidade
muito boas, ocorrendo redução nesses parâmetros
após 12 horas de conservação. Esses achados são
corroborados por Souza (1990), que observou
excelente motilidade dos infusórios no primeiro
momento e uma tendência clara e progressiva de
diminuição com o tempo de conservação. Verifica-
se também que na primeira análise houve
predominância dos médios e grandes. Entretanto,
ocorre o inverso após a conservação, com morte
principalmente dos grandes e médios protozoários,
como cita Dirksen (1981 e 1993).

TABELA 2. Avaliação in vitro dos infusórios do fluido ruminal, a fresco e após 12 horas de conservação em garrafa térmica,
em fêmeas bovinas adultas, da raça Girolando, submetidas exclusivamente ao regime de pasto (Brachiaria decumbens) e sal
mineral ad libitum, no período de abril a maio de 1998.

Caracteres A fresco Após 12 horas de conservação

em garrafa térmica

Nº de animais % Nº de animais %

Densidade
Reduzida (+) 4 8 26 52
Moderada (++) 21 42 20 40
Abundante (+++) 25 50 4 8
Motilidade
Reduzida (+) 1 2 19 38
Moderada (++) 18 36 16 32
Abundante (+++) 31 62 2 4
Ausente 0 0 13 26
Distribuição
P* 0 0 25 50
PM ** 26 52 16 32
PMG *** 24 48 9 18

* protozoários pequenos ** protozoários pequenos e médios *** protozoários pequenos, médios e grandes

A variação média do pH ruminal foi de 7,05
na avaliação a fresco e de 6,86 após a conservação,
sendo esses resultados estatisticamente significativos
(Tabela 3), porém estão dentro dos limites de nor-
malidade considerados por Campos Neto et al.
(1976), Ortolani et al. (1982), Garry (1990), Costa
(1992), Dirksen (1993), Rings & Rings (1993) e
Moraes (2000).
Acredita-se que uma provável contaminação
pela saliva no momento da colheita tenha sido res-
ponsável pelo maior valor de pH no momento da
colheita. Hofirek & Haas (2001), comparando dois
métodos de colheita de suco ruminal, por sonda oro-
esofágica e por punção per cutânea, encontrou valo-
res de pH mais elevados no primeiro método e rela-
cionou tal achado ao fato de o tubo oral alcançar
apenas o saco cranial do rúmen, mais rico em saliva
e soluções tamponantes. Em relação aos menores va-
lores obtidos para o pH por ocasião da segunda ava-
liação, argumenta-se que foram devidos à excessiva
produção de ácido lático e como resultado da possí-
vel putrefação e decomposição de proteínas, como
citam Campos Neto (1977) e Rosemberger (1963).
Com a conservação do suco ruminal houve uma
redução significativa no percentual de protozoários
viáveis, de 75,60% para 16,88%, concordando com
 Ciência Animal Brasileira v. 3, n. 2, p. 57-63, jul./dez. 2002 61

Souza (1990), que encontrou valores oscilando de
30% a 100%. Houve ainda uma tendência clara de
diminuição no número desses microrganismos, já que
inicialmente era de 281.688 a fresco, e reduzindo
para 254.900 após conservação (Tabela 3). Tais
achados são compatíveis com os resultados obtidos
por Dirksen & Wolf (1963) e Souza (1990), que tam-
bém verificaram uma relação indireta entre a ativida-
de dos infusórios e o período de conservação.
A prova de redução do azul de metileno
(PRAM) aplicada ao suco ruminal a fresco apresentou
resultado, significativamente, menor do que o obtido
após a conservação (Tabela 3), sendo respectivamen-
te de 173,30 segundos (2,89 minutos) e 361,30
segundos (6,02 minutos). Achados equivalentes
também foram obtidos por Souza (1990), 2,6 minutos
no momento da colheita, diferindo no período de 24
horas, em que verificou 3,4 minutos. Apesar de os
valores obtidos neste estudo encontrarem-se dentro
dos padrões de normalidade, conforme Garry (1990),
Dirksen (1993) e Rings & Rings (1993), eles, no
entanto, indicam uma perda de atividade bacteriana
com o passar do tempo de colheita.
Ainda na Tabela 3, verifica-se que o tempo de
sedimentação e flotação (TAS) foi ligeiramente menor
após a conservação do fluido ruminal, porém não
houve diferença significativa. Tais valores estão de
acordo com os citados por Garry (1990) e Dirksen
(1993), porém estiveram abaixo dos achados de
Garry (1993) e Moraes (2000) em animais recebendo
apenas algum tipo de alimentação volumosa. A
redução no TAS em relação ao tempo de colheita
também foi observada por Souza (1990) e Garry
(1993) e deveu-se provavelmente à diminuição da
atividade microbiana.

TABELA 3. Valores médios e desvio-padrão da avaliação do fluido ruminal a fresco e após 12 horas de conservação em
garrafa térmica, em fêmeas bovinas adultas, da raça Girolanda, submetidas ao regime de pasto (Brachiaria decumbens) e sal
mineral ad libitum, no período de abril a maio de 1998, quanto aos aspectos pH, percentual de protozoários viáveis, número
de infusórios, PRAM (prova de redução do azul de metileno) e TAS (tempo de sedimentação e flotação).

Grupos pH - Protozoário Número de PRAM TAS

viável infusórios (seg) (seg)
(%) (cel/ml)

A fresco 7,05a* 75,60 a 281688 a 173,30 a 331,98 a

±043 ±24,07 ±2008,75 ±108,32 ±146,99

Após 12 horas de conservação 6,86b 16,88 b 254900 a 361,30 b 279,80 a

±0,43 ±22,14 ±1938,94 ±165,23 ±174,12

* Letras diferentes na mesma coluna diferem significativamente a nível de 5%

Avaliando-se as provas funcionais em conjun-
to e comparativamente notaram-se pequenas altera-
ções nos aspectos organolépticos e na qualidade dos
protozoários além de uma leve acidificação do fluido
com redução no TAS, morte de protozoários e alte-
ração da atividade bacteriana. Mudanças semelhan-
tes foram observadas por Souza (1990), quando uti-
lizou diferentes formas de conservação do fluido
ruminal. O autor aponta a necessidade de descartar
o material após três dias de conservação, pois não
mais responde às provas funcionais, provavelmente,
devido à invasão do meio por bactérias proteolíticas.
Garry (1993) argumenta que mudanças na viscosi-
dade do líquido ruminal e no tempo de sedimentação
e flotação são originados de fatores como inativida-
de da flora microbiana, acidose e anorexia prolonga-
da.
É pertinente sugerir o uso da garrafa térmica
por um período de até 12 horas, porque, apesar do
leve declínio da atividade microbiana constatada, os
resultados obtidos encontram-se dentro dos padrões
citados por Dirksen (1981), Garry (1990), Dirksen
(1993), Rings & Rings (1993) e Moraes (2000).
Além disso, a garrafa térmica é de fácil obtenção e
62 BORGES, N. C. et al. – Avaliação do suco ruminal de bovinos “a fresco” e ...
apresenta pequeno volume, o que facilita o seu trans-
porte. Por essas vantagens, pode ser utilizada como
uma opção não apenas para conduzir suco ruminal
para exames laboratoriais mas também para otimizar
a transfaunação. É possível inferir ainda algumas ou-
tras vantagens para o uso da garrafa térmica na con-
servação e transporte de suco ruminal de bovinos,
como a manutenção do material em anaerobiose e a
uma temperatura próxima da encontrada no ambien-
te de origem. Como resultado haverá a preservação
de dois importantes elementos do nicho retículo-
ruminal, considerados por Hungate (1966), Acuri &
Matos (1992) e Russell & Rychlik (2001) como fun-
damentais para os ruminantes.
Considerando-se que na literatura consultada
(Campos Neto, 1977; Ortolani et al., 1982; Souza,
1990; Costa, 1992) não foram encontradas
informações relativas aos vasilhames utilizados no
transporte de suco ruminal, apenas descrição da forma
de conservação, deduz-se que os resultados obtidos
neste estudo sirvam como incremento importante nas
soluções dos problemas de clínica assistidas a
distância. Apesar de não constar dos objetivos
propostos por esse estudo, acredita-se que os valores
obtidos possam ter contribuído no estabelecimento
de parâmetros para bovinos alimentados a pasto dessa
região.
CONCLUSÕES
Os testes organolépticos (cor, odor e consis-
tência), a avaliação in vitro dos infusórios (densida-
de, motilidade e tamanho dos protozoários) e as pro-
vas funcionais do suco ruminal variaram com o tem-
po de conservação de 12 horas em garrafa térmica,
porém mantiveram-se dentro dos padrões de nor-
malidade.
A análise do fluido ruminal com fins diagnósti-
cos deve ser efetuada no momento da colheita para
que se tenham resultados mais fiéis.
A garrafa térmica é uma boa opção no
armazenamento e transporte do fluido ruminal em si-
tuações de clínica de campo.
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