Determinação dos Parâmetros Cinéticos

Prof. Álvaro Silva Lima

1
Equação

O que ocorre quando

v=vmax/2

onde Vmax é a velocidade máxima e Km é a constante

de Michaelis-mentem, e representam conjuntamente
os parâmetros cinéticos. [S] é a concentração do
substrato.
Curva v x [S]

A determinação de vmax e Km diretamente do

gráfico é imprecisa, portanto metodologias
devem ser aplicadas, basicamente a
linearização.
 A- Método de Lineweaver-Burk
Método dos recíprocos
Baseia-se na separação das variáveis
independentes e linearização da equação de
Michaelis-Mentem.
Os valores mais precisos de velocidade de
Eleva-se ambos os lados da equação a -1
reação são os mais elevados e tendem a se
concentrar próximo do eixo das ordenadas,
enquanto os menos precisos estão próximos do
eixo das abcissas. Estes últimos influenciam o
coeficiente angular.
 A- Método de Lineweaver-Burk

Y X
b a
 B- Método de Hanes-Woolf
Baseia-se na separação das variáveis
independentes em termos de (S)/v em função de (S).

Eleva-se ambos os lados da equação a -1

 B- Método de Hanes-Woolf

Y X
b a
 C- Método de Eadie-Satchard
Baseia-se na separação das variáveis
independentes em termos de v/(S) em função de v.
 C- Método de Eadie-Satchard

Y X
b a
 D- Método de Wolf-Augustinisson-Hofstee
A linearização ocorre em termos da construção
do gráfico v em função de v/(S).
D- Método de Wolf-Augustinisson-Hofstee

Y X
b a
 Exercício -03
Determine os parâmetros cinéticos para a reação abaixo:

ureia + urease ↔ ureia-urease → 2NH3 + CO2 + urease

Os dados cinéticos estão relacionados no quadro abaixo:

(S) (μmol/m3) v (μmol/m3.s)

0,002 0,09
0,005 0,2
0,01 0,38
0,02 0,55
0,2 1,08
 Exercício -04
Determine os parâmetros cinéticos da enzima cujas velocidades iniciais em função da concentração de substrato
são dados na Tabela abaixo:

Os dados cinéticos estão relacionados no quadro abaixo:

(S) (μmol/L) v (μmol/L. min) Ainda sobre os dados responda

10-7 4 1- Qual a velocidade inicial quando a concentração de

substrato for 2 x 10-3 e 1,5 x 10-3
10-6 60
10-5 70 2- Se a concentração do substrato for 0.003 qual a
10-4 82,3 concentração do produto após 5 min
10-3 84