UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA - UFBA

QUIA44 – QUÍMICA ORGÂNICA EXPERIMENTAL II

Docente: Paulo Ribeiro
Discente: Tiago Rabelo

Lista de Exercícios 2 –
Cromatografia em camada delgada e Cromatografia em coluna

1. Defina: Cromatografia, Rf, Série eluotrópica, Fase móvel e fase estacionaria.

 Cromatografia - É um processo de separação e identificação de componentes de uma
mistura, essa técnica é baseada na migração dos compostos da mistura, os quais
apresentam diferentes interações através de duas fases (móvel e estacionária), sendo
separados pela diferença de afinidade através das duas fases.
 RF – É um parâmetro usado em cromatografia, chamado de fator de retenção de dado
composto. Ele é definido como a razão entre a distância percorrida pela mancha do
componente e a distância percorrida pelo solvente (fase móvel) chamado também de
eluente. Assim, Rf = dc / ds, sendo dc = distância percorrida pelos componentes da
mistura. ds = distância percorrida pelo eluente.
 Série Eluotrópica – Ou escala eluotrópica é uma lista de diversas ordenada segundo
seu poder de eluição para um determinado adsorvente (fase estacionária). Essas séries
são úteis para auxiliar a escolha do solvente a serem usados no processo de
cromatografia de uma mistura, geralmente começando com os solventes apolares (ex:
hexano) e finalizando com os solventes polares (água ou metanol).
 Fase móvel - fase em que os componentes a serem isolados "correm" por um solvente
fluido, que pode ser líquido (Eluente) ou gasoso (Gás de Arraste).
 Fase estacionária: fase fixa em que o componente que está sendo separado ou
identificado irá se fixar na superfície de outro material líquido ou sólido. Cada um dos
componentes da mistura é seletivamente retido pela fase estacionária, resultando em
migrações diferenciais destes componentes.

2. Indique os principais fenômenos envolvidos num processo cromatográfico.

A cromatografia é uma técnica de partição entre duas fases (podendo ser sólido, líquido
e gasoso), basicamente associada a capacidade de adsorção e solubilidade dos componentes
(isso abrangendo as mais diversas técnicas de cromatografia).
 Nas técnicas de cromatografia aqui trabalhadas (CCD e cromatografia em coluna) os
fenômenos mais evidenciados são a adsorção, polaridade, efeitos indutivos e interações
intermoleculares:
A adsorção é uma propriedade físico-química das moléculas de substâncias líquidas,
gasosas e sólidas. Que ocorre quando as partículas (liquidas ou gasosas) ficam retidas na
superfície de sólidos, conforme maior a porosidade desses sólidos, maior a capacidade de
adsorção, os componentes numa adsorção são: Os chamados adsorvados, que é a substância
líquida ou gasosa que fica retida na superfície de um sólido adsorvente; e os adsorventes, que
é a substância sólida que promove a retenção de outras substâncias.
A adsorção está diretamente relacionada as interações intermoleculares que ocorrem
entre as misturas a serem separados (adsorvados), arrastados pela fase móvel, e a fase
estacionária (adsorvente). Quanto mais fortes essas interações mais uma dada substância
ficará retida no adsorvente (por mais tempo) enquanto as substâncias com interações mais
fracas passam mais rapidamente pelo adsorvente, possibilitando a separação.
Para facilitar esse processo de separação e garantir que seja possível separar todas as
substâncias de interesse na mistura, geralmente é utilizado vários solventes (eluentes) com
polaridades diferentes, partindo do mais apolar, até o mais polar. Assim, o poder de arraste da
da fase móvel irá variando gradativamente, possibilitando que componentes diferentes (com
afinidades com o absorvente diferentes), já que geralmente grupos polares interagem melhor
com o adsorvente enquanto os apolares menos.
A polaridade de uma substância está relacionada a transmissão da carga através da
cadeia em uma molécula, chamado de efeito indutivo, no qual esse "trânsito" de eletros ao
longo da cadeia é provocado pela diferença de eletronegatividade entre os átomos envolvidos,
esse deslocamento da "nuvem eletrônica" é deslocada sempre no sentido do átomo mais
eletronegativo, causando um estado de polarização permanente, cujo átomo mais
eletronegativo tem carga parcial negativa e o outro tem carga parcial positiva.
Quando levamos em consideração a geometria molecular da molécula, podemos
observar esse deslocamento da carga elétrica parcial através do calculo do momento dipolo.
Quando o valor do momento dipolo for igual a zero, significa que não há diferença de
eletronegatividade na molécula, logo ela será apolar, quando for diferente de zero, significa que
a nuvem eletrônica está sendo deslocada devido a eletronegatividade de algum átomo
presente ou por conta da geometria da molécula mesmo, então a molécula é polar.
Compostos polares possuem forças intermoleculares mais fortes (ligações de
hidrogênio), devido a terem hidrogênios ligados a átomos muito eletronegativos. Assim, quanto
mais polares maior será a interação com a fase estacionaria retendo por mais tempo os
compostos mais polares da mistura. Ao variar a polaridade do solvente, se varia a interação
com as demais substâncias, possibilitando a separação.
3. Cite os critérios utilizados para a escolha de um solvente para cromatografia.
Os solventes escolhidos devem ser capazes de separar (ou eluir) as substâncias
presentes na mistura na qual se deseja separar de forma eficiente. Sendo assim é necessário
escolher um solvente, misturas de solventes ou variações de solventes, capazes de interagir
com cada componente da mistura de forma particular. Caso o componente for mais polar,
deve-se escolher um solvente com polaridade capaz de elui-lo; caso o componente seja apolar,
o ideal seria escolher solventes menos polares; caso deseje se separar mais de um
componente, com diferentes polaridades, deve-se realizar testes através de CCD, para verificar
quais solventes ou misturas de solventes são capazes de efetuar a separação da melhor forma,
se possível com valores de rf distantes.

4. Liste os solventes mais utilizados de acordo com a escala eluotrópica.

Uma sequência de eluentes normalmente utilizada é: Éter de petróleo; hexano,
clorofórmio; éter etílico; acetato de etila; acetona; etanol; metanol; água e ácido acético.

5. O que pode acontecer se o nível do solvente estiver mais alto que o ponto de
aplicação da amostra, na cromatografia em camada delgada?
Caso o nível do solvente estiver igual ou superior ao ponto de aplicação da amostra,
significa que ao colocar a placa, sua amostra ficará em contato direto ao solvente, isso
inviabilizará o processo de eluição da amostra e comprometeria o rf do mesmo.

6. Preveja a ordem de eluição dos componentes da mistura bifenil, ácido benzóico e

benzoato de metila em alumina.

A alumina é um adsorvente polar, logo interage melhor com compostos polares, os

retendo por mais tempo, sendo assim permite uma passagem mais rápida a compostos cada
vez menos polares. Considerando isso, presumo que a ordem de eluição seria: 1 – Ácido
Benzoico; 2 – Benzoato de metila; 3 – Bifenil.

7. Que fatores influenciam a reprodutibilidade do Rf?

Os fatores que influenciam a rf, são as interações que o componente da mistura terá com
a fase móvel e a fase estacionária. Componentes polares, eluirão mais lentamente em
solventes mais polares e com adsorventes também mais polares, percorrendo uma distância
menor; enquanto componentes mais apolares eluirão de forma mais rápida percorrendo uma
distância maior. Assim, a distância de eluição dos componentes ficarão mais próximos da
distância percorrida pelo eluente, obtendo um rf maior, os que percorreram uma distância
menor, terão um rf menor.

8. Se os componentes de uma mistura, após a corrida cromatográfica, apresentam

manchas incolores, qual o processo empregado para visualizar estas manchas na
placa?
Caso após a realização de uma CCD, não seja possível visualizar as manchas referentes
a distância percorrida pelos componentes da mistura, basta levar a placa até uma câmara com
luz UV ou para uma Câmara fechada contendo cristais de iodo por cerca de 5 minutos, que
será possível visualiza-las.

9. Cite algumas aplicações da cromatografia em camada delgada.

A CCD é uma técnica qualitativa que tem finalidade de separar e identificar compostos
presentes em uma mistura, monitorar o progresso de uma reação química e até determinar a
pureza de uma substância.

10. Cite algumas aplicações da cromatografia em coluna clássica.

A cromatografia em coluna é comumente utilizada para purificação de substâncias
orgânica ou, para remover o material de partida ou isolar o produto desejado de uma reação.

11. Quais os critérios utilizados na escolha de um adsorvente para cromatografia em

camada delgada?
Deve-se observar a interação que o adsorvente terá com a fase móvel, assim como com
os componentes da mistura, referindo ao quanto ou a o quê se deseja ser eluido, assim será
possível determinar o rf da substância de forma mais eficiente.

12. Qual a quantidade de adsorvente utilizada para empacotar uma coluna

cromatográfica?
No experimento em questão, será utilizado 25 gramas de sílica será colocado
inicialmente, seguindo de areia.

13. O valor de Rf pode ser considerado absoluto na caracterização de uma amostra?

Em determinadas condições pré definidas e com amostras no qual se conheça os
compostos presentes assim como suas concentrações, sim. Caso contrário, a variação na
composição da fase móvel e da fase estacionária pode provocar variações da rf do composto.
14. Calcule o Rf das substancias no vídeo:

dc = distância percorrida pelos componentes da mistura;

ds = distância percorrida pelo eluente;
dc
Rf =
𝑑𝑠

 Rf1 do paracetamol padrão:

dc 2,4
Rf1 = 𝑑𝑠 Rf1 = 6
Rf1 = 0,400

 Rf2 da cafeína:
dc 0,4
Rf2 = Rf2 = Rf2 = 0,067
𝑑𝑠 6

 Rf3 da substância:
dc 3,1
Rf3 = 𝑑𝑠 Rf3 = 6
Rf3 = 0,516