UNIVERSIDADE FEDERAL DE MATO GROSSO DO SUL DEPARTAMENTO DE TECNOLOGIA DE AUMENTOS E SAUDE PUBLICA DISCIPUNA: BROMATOLOGIA I

METODa DA FIBRA DETERGENTE NEUTRO (F.D.N.)

Henneberg e Stohman (1885) propuseram um metodo empirico para calcular fA fra~ao tida como indigerivel de um alimenta. Este metoda, durante mais de meio seculo, satisfez as exigencias analiticas, simulando in vitro a digestao in vivo. 0 processo classica de HennebE.;rgi (1), entretanto, oferece baixo rendimento e, para muitos alimentos, valores nao representabvos dos teores de nao digerlveis, efetivamente neles presentes. Varios metodos quimicos e enzimaticos tem sido sugeridos para melhorar a analise:de fragao "fibra da dieta". Os metodos quimicos mais importantes sac os desenvolvidos por Southgate e Van metodo de Southgate (3) determina varios componentes da fragao.fibra, contudo e um metoda tao complexo, levando aproximadamente cinco dias para completar a analise de uma amostra. Esse metoda e utilizado principalmente em laborat6rios de pesquisa. Van Soest desenvolveu varias metodologias para a determinagao da fragao da dieta". A metodologia mais pratica para alimentos e 0 metoda da "fibra detergente neutro" (4), baseando-se na insolubilidade de algumas frayoes da fibra, em detergente neutro; e fornece uma rapida determinagao da soma de celulose (polimero da D-glicose), hemicelulose (polimero formado de pentoses e hexoses) e lignina (polimero aromatico). Todas as pectinas, mucitagens e gomas sac perdidas e tem que ser analisadas separadamente. Tem-se procurado atualmente padronizar 0 metodo enzimatico (2) para determina9ao da fibra da dieta uma vez que por este processo e possivel avaliar 0 conteudo de fibra soluvel e insoluvel da dieta de maneira simples, predsa e rapida que possa ser utilizado na rotulagem de alimentos, tabela de composigao de alimentos e em dietoterapia.

1. Material 1.1. Reagentes Solugao detergente neutro: adicionar a um litro de agua destilada, 30g de lauril sulfato de s6dio, 18,61g de sal diss6dico do acido tetracetico diaminoetileno diidratado (EDTA) p.a., 6,81g de borato de s6dio decahidratado, p.a., 4,56g de fosfato acido de sodio anidro, p.a. e 10 ml de etilenoglicol, p.a. Agitar ate dissolver todos os sais e verificar 0 pH que devera estar em torno de 6,9 a 7,1; Decaidronaftaleno (Decalin), p.a.; Acetona, p.a.; Sulfito de s6dio anidro. 1.2. Aparelhos e vidrarias aparelho de refluxo para Fibra, bequer ( 600ml); cadinho de vidro com placa de vidro sinterizado: porosidade grossa, diametro da placa 40mm e volume aproximadamente 45ml.

2. Metodo 2.1. Amostra com alto teor de amido Esquema para obteny80 do residuo detergente neutro de alimentos com alto teor de amido, processados ou nao. AMOSTRA COM ALTO TEOR DE AMIDO 0,5 9 - integral, crua ou cozida Adicionar 15 ml de NaOH O,5N, 15 min. sob agitaC;;:80 temp. de3JOC a Neutralizar com 15 ml de acido acetico 0,5N.

t
[ TRA TAMENTO ENZIMATICO Adicionar 1ml de amiloglicosidase (sol. 2,5 g% em tampao acetato 0,2M pH 4.8), sob agitaC;;:80/1 ora a temperatura. de h

3rC.
Adicionar 100 ml de sol. detergente neutro. Deixar em ebuliC;;:80 durante uma hora. Filtrar, sob vacuo, em cadinho previamente tarado . RESIDUa FDN + MINERAL Lavar com agua quenta e acetona Secar em estufa a 105C e pesar (peso constante)

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t

FIBRA DETERGENTE

NEUTRO (TOTAL au BRUTA)

Incinerar a 550C. Pesar (peso constante) RESIDUO MINERAL DA FDN

2.2. Amostra com baixo teor de ami do Pesar cerca de 0,5 a 1,Og da amostra desengordurada e dessecada. Transferir quantitativamente para um bequer de aOOm!. Adicionar na seguinte ordem: 100ml de detergente neutro temperatura ambiente, 2ml de decalin e 0,5g de sulfito de sodio. Aquecer com agitaC;;:80ate a fervura em bico de Bunsen. Continuar agitando apos ebulic;;:aoate parar fazer espuma. Levar 0 bequer para 0 aparelho de refluxo e aquecer durante 60 min. ap6s entrar em ebuliC;;:80(controlar a temperatura para que 0 nivel do Iiquido se mantenha constante). 60 min., agitar 0 bequer e filtrar sobre um cadinho tarado de placa de vidro sinterizado e mont~Klo em Kitasato. Aplicar, inicialmente, vacuo lento e ir aumentando conforme as necessidades. 0 bequer e em seguida 0 material contido no cadinho, com um minimo de agua quente (80 a 90C). Remover 0 vacuo, desmanchar a camada de solidos formada no cadinho e enche-Io corn Eigua quente mexendo ate dissolver os grumos formados e filtrar com auxilio de vacuo. Repetir esse procedimento mais uma vez. Lavar em seguida com acetona da mesma forma que a lav2l0em anterior. Aplicar finalmente vacuo ate a secura. Atenc;;:ao: Retirar 0 filtrado existente no Kitasato antes de lavar 0 material com acetona. Dessecar 0 cadinho em estufa regulada a 105C, por 8h. Esfriar em dessecador e pesar. A diferenc;;:a desse peso com a tara do cadinho nos dara a frac;;:ao"fibra detergente neutro". Para calcular a frac;;:aocinza da fra<;ao "fibra detergente neutro" basta incinerar 0 cadinho a 550"C., por 3h, resfriar e pesar.

3. Referemcias Bibliograficas 1. ASSOCIATION OF OFFICIAL ANALYTICAL CHEMISTS. Official methods of analysis. 13 ed. Washington, 1980. p. 132-135. 2. ASP, N. et alii. Rapid enzymatic assay of insoluble and soluble dietary fiber. J. Agric. F()od Chern., Lund, v.31, p. 476-482,1983. 3. SPILLER, G.A. & SHIPLEY, E.A. Perspective in dietary fiber in human nutrition. Wid. Rev. Nutr. Diet., v.27, p. 105-131, 1977. 4. VAN SO EST, P.J. & WINE, R.H. Use of detergents in the analysis of fibrous foods IV. Determination of plant wall constituints. Journal of the AOAC, v.50, n.1, p. 50-55,1967.