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L-Pix
EX
Manual de Instruções
INDICE
1 INFORMAÇÕES GERAIS............................................................... 5
1.1 Introdução ............................................................................ 5
1.2 Aviso ..................................................................................... 5
1.3 Informações de segurança................................................... 5
1.4 Apresentação ....................................................................... 6
1.5 Componentes do sistema ..................................................... 6
2 ESPECIFICAÇÕES TÉCNICAS ...................................................... 9
2.1 Condições ambientais para operação .................................. 9
2.2 Características do software ............................................... 10
2.3 Requisitos do sistema ........................................................ 10
2.3.1 Configuração de hardware mínima: ........................ 10
2.3.2 Configuração de hardware recomendada: .............. 10
3 INSTALAÇÃO ............................................................................. 11
3.1 Recomendações ................................................................. 11
3.2 Instalação do Equipamento ................................................ 11
3.3 Instalação dos Filtros......................................................... 12
3.4 Instalação do L-PIX Image EX ............................................ 12
4 OPERAÇÃO ................................................................................ 14
4.1 Apresentação ..................................................................... 14
4.2 Modo de Captura de Imagens............................................. 14
4.3 Modo de Captura Normal ................................................... 17
4.3.1 Captura de Géis Fluorescentes................................ 18
4.3.2 Captura Colorimétrica ............................................. 18
4.3.3 Recurso Brilho e Contraste ..................................... 19
4.4 Desligando o equipamento................................................. 20
4.5 Barra de ferramentas ........................................................ 21
4.9.1 Menu arquivo ........................................................... 22
4.9.2 Menu editar .............................................................. 23
4.9.3 Menu exibir .............................................................. 25
4.9.4 Menu imagem .......................................................... 26
4.9.5 Menu filtros.............................................................. 29
4.9.6 Menu janela.............................................................. 32
Manual de Instruções - L-Pix EX 3
4.9.7 Menu ajuda............................................................... 33
4.9.8 3D ............................................................................. 33
4.6 Desinstalação do L-Pix Image............................................ 33
5 LIMPEZA, CUIDADOS E MANUTENÇÃO ..................................... 34
5.1 Limpeza .............................................................................. 34
5.2 Cuidados e Manutenção ..................................................... 34
5.3 Troca de fusível .................................................................. 34
5.4 Troca de lâmpadas ............................................................. 34
5.4.1 Abrir o equipamento ................................................ 34
5.4.2 Fechar o equipamento ............................................. 35
5.5 Peças de reposição ............................................................ 36
6 GARANTIA ................................................................................. 37
1.2 Aviso
No ato de recebimento, desembale o equipamento e certifique-se da entrega dos itens abaixo
relacionados. Verifique se há algum tipo de avaria decorrente do transporte. Sendo constatado
qualquer problema, comunique imediatamente a Loccus ou ao seu representante local.
• Fotodocumentador L-Pix EX;
• Transiluminador LBT HE;
• Software de tratamento de imagem L-Pix Image;
• 2 cabos de força;
• Bandeja UVT;
• Filtro Sybr (535nm) ou Brometo (605nm);
• 2 fusíveis (3A e 6A);
• 2 cabos de força);
• Gabarito;
• Manual de Instruções.
As instruções contidas neste manual devem ser rigorosamente observadas para o uso seguro
e adequado do equipamento.
1.4 Apresentação
Cabine Epi-iluminação
branca e UV
Compar�mento
de filtros
Led indicador
porta aberta
Câmara escura
(Hood)
Chave
geral
Porta frontal Barra de
deslizante tomadas
Entrada
de força
Transiluminador
DISCO DE FILTROS
Compartimento com 6 posições para armazenamento de filtros de interferência. Item
opcional.
CÂMARA ESCURA
Impede a entrada de luz externa que possa interferir na excitação e intensifica a luz interna,
expondo a amostra a condição propícia à máxima sensibilidade. A porta frontal deslizante permite
que o usuário posicione a amostra no interior da câmara com facilidade. Apresenta sensor de
abertura, que desativa qualquer fonte de luz UV, proporcionando segurança. Tomadas de energia
estão disponíveis atrás do equipamento, evitando que o usuário utilize vários pontos de energia da
bancada para ligar todo o sistema e acessórios (1 tomada para transiluminador e 1 adicional).
TRANSILUMINADOR
Para excitação de diversas amostras fluorescentes. Filtro disponível nos formatos 20x20cm,
21x26cm e 25x30cm, conforme opção do usuário. Emite luz UV-B com pico na região de 302nm
a 312nm, ideal para excitação de corantes para DNA/RNA. Outros comprimentos de onda, como
luz UV-A (365nm) e UV-C (265nm), estão disponíveis. Possui ventilação interna nos bulbos para
minimizar aquecimento, refletor para uniformidade de luz. Item incluso.
TRANSILUMINADOR DE LUZ AZUL LT BLUE
Transiluminador de luz azul para visualização de géis corados com substâncias fluorescentes
verdes, como Sybr Green. O LT-Blue possui área de 10x20cm, e pode ser utilizado fora do
equipamento. Item opcional.
PLACA TRANSILUMINADORA DE LUZ BRANCA
Utilizada para amostras colorimétricas translúcidas, isto é, que permitem a passagem de luz.
Exemplo são géis corados com Azul de Coomassie, Nitrato de Prata, placa de colônias e demais
aplicações de transiluminação de luz branca. Item opcional.
Por fim, ligue o plugue do cabo de força conectado à Câmara Escura na rede elétrica. Observe
atentamente as especificações elétricas do equipamento antes de ligá-lo à rede. Em caso de dúvidas,
essas informações podem ser consultadas na etiqueta de número de série do equipamento.
Os filtros devem ser mantidos no equipamento mesmo após o uso, para evitar perdas ou
danos na sua superfície.
NOTA: Para trocar os filtros, sempre apoie a gaveta em uma bancada segura antes de retirar o
filtro. Evite sempre retirar ou recolocar os filtros enquanto segura a gaveta para evitar
quedas.
Nota: Caso o software solicite autorização para instalar os drivers, marque a caixa de seleção e continue
a instalação.
Nota2: Para instalação e configuração do software é necessário que o usuário tenha permissões de
administrador.
Após a instalação do software será criado um atalho na área de trabalho chamado “L-Pix EX”.
Utilize este atalho para iniciar o software.
Para iniciar a captura das imagens, pressione a tecla F9 em seu teclado ou pressione o ícone
da câmera ( ). A janela de captura de imagem também pode ser acessada através do botão
ARQUIVO>CAPTURAR IMAGENS (F9) localizado na barra de ferramentas. Isso irá exibir o Modo de
Captura. Através desta tela é possível visualizar a imagem do gel em tempo real (Preview) ajustando
o foco, tempo de exposição, resolução, e cor da imagem antes de efetivamente salvar a imagem da
captura. Este recurso visa a aquisição da melhor imagem possível de um gel.
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1. PREVIEW
Exibe a imgem em tempo real. Utilize as funções complementares para alterar a visualização.
14 Manual de Instruções - L-Pix EX
2. SATURAÇÃO
Exibe a saturação em tempo real durante a captura. Permite ao usuário fazer ajustes na
imagem sem prejudicar um possível processo de quantificação. Maiores detalhes no item Guia
Ajuste da Imagem neste capítulo.
3. GRADE
Exibe a grade, para facilitar o alinhamento da imagem. Acione a grade e em seguida alinhe seu gel.
4. DESENHO
Permite o desenho livre, basta tocar e arrastar pela tela. Assim como os ajustes de contraste
e brilho, a ferramenta de desenho foi desenvolvida para trazer facilidades para o usuário. Permite
desenho livre para destacar pontos de interesse na imagem. Para utilizá-la, basta ativar o botão
Desenho. Ao desativar o botão, o desenho é apagado.
5. NEGATIVO
Inverte a escala de cinza, de acordo com a preferência do usuário.
6. CONTROLE DA LENTE
Abre e/ou fecha o painel de controle da lente. Ao abrir o painel, o usuário tem acesso ao
controle do zoom, foco e abertura da íris da lente.
a. Zoom
Ajusta a magnificação da imagem. A ampliação da imagem é feita de forma analógica, ou seja,
a aproximação não é digital, e pode ampliar até 10x a imagem original.
b. Foco
Ajusta a nitidez e foco da imagem. O Ajuste de foco é sempre necessário após alterar o zoom,
o tipo de amostra (devido à diferentes espessuras de géis ou outras matrizes, como membranas), a
posição da amostra (retirar do transiluminador e posicionar na plataforma para membranas) e ao
o tipo de luz. Todos os parâmetros são digitais e armazenados na eletrônica controladora da lente.
c. Íris
Ajusta a abertura do diafragma da lente, permitindo a entrada e mais ou menos luz. A abertura
da íris está ligada diretamente à quantidade de luz que será captada pelo sensor e, portando deve
ser ajustada de acordo com o tipo de amostra.
Para capturas fluorescentes, a íris pode ser levemente fechada (2 a 3 toques) para aumentar
a nitidez e reduzir o efeito “halo” produzido pela luz emitida pela amostra.
Para capturas colorimétricas, a intensidade de luz é alta, portanto, será necessário fechar a íris
para reduzir a quantidade de luz para visualizar as amostras.
7. GUIA AJUSTE DA IMAGEM
Permite monitoração de pontos de saturação, tornando possível melhorar a imagem através
dos ajustes de Brilho e Contraste em tempo real.
Com o contraste e o brilho, é possível, por exemplo, diminuir ou até mesmo neutralizar o
fundo de géis (background) carregados por corantes fluorescentes intercalantes de biomoléculas.
Para tanto, proceda da seguinte forma:
Ative o alerta de saturação (botão da Saturação) e execute a Auto-Exposição. Faça o ajuste
fino da exposição se necessário, observando a quantidade de pixels saturados na tela, para não
cometer excessos.
Aumente gradativamente o contraste até que as bandas comecem a ficar vermelhas, isto é,
saturadas. Nesse momento, diminua gradativamente o brilho até que as bandas deixem de estar
saturadas. Repita novamente o contraste e o brilho até que o fundo do gel comece a ficar na cor azul,
indicando que o fundo está totalmente apagado. Assim, em poucos passos, podemos neutralizar o
fundo e realçar ainda mais as bandas.
9. CONFIGURAÇÕES
Armazena as configurações para uso padronizado posterior
a. Salvar
Salva as configurações atuais de Zoom, Foco, Cores e Modo Negativo.
Ao pressionar o botão “Salvar”, é exibida uma janela para incluir o nome do perfil e selecionar
se esse perfil deve ser bloqueado ou não. Ao bloquear, este perfil não pode ser mais excluído.
b. Excluir
Para excluir um perfil, basta selecioná-lo na lista e pressionar o botão Excluir.
10. MODO DE CAPTURA NORMAL
O modo de captura normal permite ajustar manualmente os parâmetros de sensibilidade
para captura da imagem, sendo suficiente para capturar a grande maioria das imagens de géis
fluorescentes e colorimétricos
a. Exposição (ms e s)
Ajusta o tempo de exposição do sensor da câmera. Quanto maior é o tempo de exposição,
maior é a sensibilidade de captura. Para a grande maioria das aplicações de captura de géis, a
sensibilidade pode ser ajustada somente com a exposição em ms (milisegundos). Para preview de
capturas de membranas de Western Blotting, pode ser utilizada a exposição superior a 1s. O limite
de exposição neste modo é de 60s.
b. Auto-Exposição
Ajusta o tempo de exposição automaticamente, apenas com um toque. Proporciona grande
facilidade. Durante a auto-exposição é exibida uma janela com o progresso. Após a auto-exposição,
o usuário pode fazer ainda um ajuste fino através do ajuste de ms.
c. Capturar
Captura e armazena a imagem e transfere para o L-PIX-Image EX. Ao capturar, o arquivo é
nomeado da seguinte forma:
Nota: Para facilitar o posicionamento correto da amostra, ligue a epi-iluminação de luz branca (White).
Em seguida, ainda com a porta frontal aberta, pressione o botão AUTO-EXPOSIÇÃO para
ajustar a sensibilidade da câmera e permitir melhor visualização do gel. Movimente a barra de
exposição (ms) para melhorar a visualização do gel, e utilize a função Zoom para aproximar a imagem
de forma que todo o gel seja visível. Opcionalmente, utilize a ferramenta GRADE para auxiliar no
posicionamento/centralização e desative-a após concluir.
Por fim, é possível armazenar as configurações atuais para pré-configurar o próximo uso
utilizando a função Perfil. Para isso, clique no botão “Salvar”, o qual irá armazenar as posições
de zoom e foco, o tempo de exposição, o filtro e o acionamento da função Negativo. Durante o
armazenamento do perfil, insira um nome para o arquivo e marque a caixa de seleção “Proteger
Perfil” para restringi-lo e bloquear alterações futuras do perfil.
Por fim, é possível armazenar as configurações atuais para pré-configurar o próximo uso
utilizando a função Perfil. Para isso, clique no botão “Salvar”, o qual irá armazenar as posições
de zoom e foco, o tempo de exposição, o filtro e o acionamento da função Negativo. Durante o
armazenamento do perfil, insira um nome para o arquivo e marque a caixa de seleção “Proteger
Perfil” para restringi-lo e bloquear alterações futuras do perfil.
Quando a imagem estiver ajustada conforme desejado, clique no botão Capturar e aguarde
enquanto a imagem é capturada. A imagem capturada será exibida na área de trabalho do L-Pix
Image EX e será salva automaticamente na pasta C:/Arquivo de Programas/Loccus Biotecnologia/L-
Pix Ex/Imagens/*. O nome do arquivo será composto pela data e a hora de sua criação e um índice
numérico que representa o número de capturas desde o início do programa. O nome do arquivo
pode ser alterado e o mesmo pode ser remanejado para outra pasta posteriormente.
Nota: Recomendamos que os arquivos capturados sejam *copiados* para outra pasta após serem salvos
de forma que a pasta Imagens seja mantida como o backup original das imagens. Então, renomeie
e organize os arquivos novos da forma que for mais conveniente.
3D
Novo Refazer Texto Ajuda
Abrir Copiar Desfazer Mover Crop Histograma
Salvar Colar Mais zoom Selecionar retângulo
Imprimir Menos zoom
Capturar imagem Escala normal Selecionar livre
Ferramenta Função
Novo Criar um novo arquivo.
Abrir Abrir uma imagem armazenada.
Salvar Salvar a imagem atual.
Imprimir Imprimir imagem atual.
Capturar imagem Capturar imagem.
Copiar imagem selecionada para a área de
Copiar
transferência.
Colar Colar imagem da área de transferência.
Desfazer Desfazer a última ação executada.
Refazer Refazer ação que foi desfeita.
Mais zoom Aproximar imagem.
Escala normal (1:1) Visualizar imagem com tamanho real.
Menos zoom Ampliar campo de visão da imagem.
Mover Mover a imagem.
Selecionar livre Selecionar livremente áreas da imagem.
Selecionar retângulo Selecionar área retangular da imagem.
Texto Inserir texto na imagem.
Crop Recortar imagem nos limites da seleção.
Saturação Exibir os pontos de saturação da imagem
Histograma Exibir histograma da imagem.
Ajuda Sobre o L-Pix Image
3D Exibe o gráfico 3D da imagem
A) NOVO
Utilizado para criar um novo arquivo.
Alternativamente utilize o botão de atalho na barra de ferramentas.
B) ABRIR
Utilizado para abrir uma imagem.
Ao final do menu Arquivo é exibida uma lista com os arquivos abertos recentemente. Para
abri-los, basta clicar sobre o nome.
Alternativamente utilize o botão de atalho na barra de ferramentas.
C) FECHAR
Utilizado para fechar uma imagem.
D) SALVAR
Utilizado para salvar a imagem e as últimas modificações realizadas.
Alternativamente utilize o botão de atalho na barra de ferramentas.
E) SALVAR COMO
Utilizado para salvar a imagem e as últimas modificações realizadas em um novo arquivo, sem
alterar a imagem inicial.
F) IMPRIMIR
Utilizado para imprimir uma imagem. Ao clicar neste item, a tela de configuração de
impressora será apresentada. Selecione a impressora e ajuste as configurações de impressão. O
tamanho da impressão depende da impressora, do tamanho do papel utilizado e da resolução
da imagem. Imagens com alta resolução exigem formatos de papel superiores para comportar a
imagem impressa.
A) DESFAZER (UNDO)
Desfaz a última ação realizada.
Alternativamente utilize o botão de atalho na barra de ferramentas.
B) REFAZER (REDO)
Refaz a ação que foi desfeita.
Alternativamente utilize o botão de atalho na barra de ferramentas.
C) COPIAR
Copia imagem selecionada para a área de transferência.
Alternativamente utilize o botão de atalho na barra de ferramentas.
D) COLAR
Cola imagem da área de transferência numa nova janela.
1. Mover
Quando o tamanho da imagem for maior do que o campo de visualização, a ferramenta Mover
permite que se percorra a imagem de forma a visualizar todos os pontos da imagem.
Selecione a ferramenta, clique em qualquer ponto da imagem e arraste o mouse. A imagem
irá deslizar no campo de visualização.
Alternativamente utilize o botão de atalho na barra de ferramentas.
2. Selecionar Livre
Aciona a ferramenta Selecionar Livre, que permite selecionar livremente áreas da imagem.
Selecione a ferramenta, clique em qualquer ponto da imagem e, sem soltar o botão, arraste o
mouse, determinando a área de seleção. Após selecionar uma área, todas as aplicações de filtros e
modificações serão aplicadas apenas à área selecionada.
Alternativamente utilize o botão de atalho na barra de ferramentas.
3. Selecionar Retângulo
Aciona a ferramenta Selecionar Retângulo, que permite criar seleções retangulares na
imagem.
Selecione a ferramenta, clique em qualquer ponto da imagem e, sem soltar o botão, arraste o
mouse. Ao soltar o mouse, será criada uma área retangular de seleção. Após selecionar uma área,
todas as aplicações de filtros e modificações serão aplicadas apenas à área selecionada.
Alternativamente utilize o botão de atalho na barra de ferramentas.
4. Texto
Permite adicionar texto à imagem.
G) MOSTRAR SATURAÇÃO
Apresenta a saturação da imagem.
Alternativamente utilize o botão de atalho na barra de ferramentas.
A) BARRA DE FERRAMENTAS
Exibe e oculta a barra de ferramentas no ambiente de operação.
B) BARRA DE STATUS
Exibe e oculta a barra de status no ambiente de operação.
D) TELA INTEIRA
Ao acionar essa ferramenta, a imagem passa a ocupar toda a extensão da tela do computador.
Para retornar à visualização inicial da imagem, pressione a tecla ESC.
E) ZOOM +
Aproxima a imagem, permitindo a visualização de detalhes.
Alternativamente utilize o botão de atalho na barra de ferramentas.
F) ZOOM -
Afasta a imagem, ampliando sua área de visualização.
Alternativamente utilize o botão de atalho na barra de ferramentas.
G) ESCALA NORMAL
Exibe a imagem em seu tamanho real.
Alternativamente utilize o botão de atalho na barra de ferramentas.
A) ESPELHO HORIZONTAL
Rotaciona a imagem em relação ao eixo horizontal.
C) NEGATIVO
Inverte as cores da imagem.
D) ROTACIONAR À ESQUERDA
Gira a imagem 90° no sentido anti-horário.
F) ROTACIONAR
Abre janela de opções de ângulos de rotação. É possível definir exatamente qual será a rotação
da imagem, digitando o valor no campo Ângulo.
A) BRILHO E CONTRASTE
Permite ajustar o brilho, o contraste e a nitidez da imagem.
Ao selecionar essa ferramenta, a janela de Filtros Básicos se abrirá. Então, você poderá alterar
o brilho, o contraste e o sharpness (nitidez). A qualquer momento, pode-se fazer a imagem voltar
ao seu estado anterior, clicando no botão Retornar ao Original. Quando a imagem estiver ajustada
como desejado, clique em OK. A janela se fechará e as alterações serão aplicadas à imagem.
B) UNSHARP MASK
Aumento do contraste nas regiões de diferença de cor, dando destaque para as bandas.
C) BINARIZAR
Transforma os pixels da imagem em pixels pretos e brancos.
Ao selecionar essa ferramenta, a janela Binarizar se abrirá. Escolha um valor numérico para
o Nível. Os tons da imagem que estiverem abaixo desse valor serão convertidos em brancos; os
valores que estiverem acima serão convertidos em preto. Quando a imagem estiver ajustada como
desejado, clique em OK. A janela se fechará e as alterações serão aplicadas à imagem.
E) PSEUDO CORES
Substitui as cores atuais para facilitar a diferenciação entre objetos de uma imagem.
Ao selecionar essa ferramenta, automaticamente alteram-se as cores da imagem.
F) MEDIANA
Função para redução de ruído.
G) REMOVER OUTLIERS
Esta ferramenta permite substituir pontos brancos ou pretos que representam ruído numa
imagem, a fim de melhorar sua qualidade. O usuário controla esta alteração ao selecionar um limite
na escala.
H) LINEAR
1. BLUR
Esta função serve para filtrar a imagem, eliminando ruídos; porém, a nitidez da imagem será
prejudicada.
3. EFEITO 3D
Aplica efeito de volume na imagem.
Ao selecionar essa ferramenta, o efeito de volume será aplicado automaticamente.
F) FUNÇÕES DE HISTOGRAMA
As funções do histograma alteram simultaneamente valores de contraste e luminosidade.
Experimente as diversas opções disponíveis para verificar qual delas proporciona um melhor
resultado para sua imagem.
As funções disponíveis são:
• Estender
• Estender 1
• Estender 2
• Normalizar
• Log
• Raiz
A) CASCATA
Esta função organiza as janelas abertas no formato de sobreposição.
B) LADO A LADO
Esta função organiza as várias janelas abertas horizontal e verticalmente.
C) FECHAR TODAS
Ao ser selecionada, essa opção fecha todas as janelas abertas.
D) DUPLICAR
Ao ser selecionada, essa opção cria uma cópia da imagem ativa em uma nova janela.
Quando clicado, esse menu exibe informações sobre o software L-Pix Image (versão e
copyright).
4.9.8 3D
Clicando no botão 3D, é exibida a imagem em gráfico 3D. Esta ferramenta permite avaliação
rápida da amplificação, saturação e outras características da imagem. Após projetar a imagem em 3D,
o gráfico pode ser movimentado através de toque e arraste na tela. O gráfico pode ser armazenado
e impresso, além de permitir a quantificação visual comparativa entre os picos e intensidades das
bandas.
• Gire a lâmpada a ser trocada em suas duas extremidades para que seja destravada, como
na primeira figura abaixo. Retire a lâmpada como mostrado na segunda imagem.
• Encaixe a nova lâmpada no mesmo lugar, seguindo o encaixe pelas extremidades, como na
imagem abaixo.
• Gire a lâmpada em sua base até que seja travada, como indica a figura abaixo.