Disciplina: Microbiologia

Mdulo de Virologia
Prof. Claudia Vitral

2 avaliaes tericas: 3a VA 9 de maio

4a VA 30 de maio

Programa de Virologia
Curso terico: Parte geral
Introduo ao curso de virologia e multiplicao viral Resposta imune e patogenia das viroses Preveno e controle de viroses Diagnstico laboratorial de viroses

Programa de Virologia
Curso terico: Parte especfica
Viroses respiratrias Viroses ambientais Viroses sexualmente transmissveis Arboviroses Virologia marinha Virologia vegetal

Programa de Virologia
Curso prtico
ELISA Isolamento viral e cultivos celulares PCR Fagos

Importncia das viroses

Podem ser fatais:
raiva, AIDS, febres hemorrgicas, encefalites

Podem causar cncer:

papilomavrus, vrus da hepatite B, vrus EpstainBarr

Podem afetar grandes populaes:

diarrias virais, gripe, resfriados

OS VRUS

Podem causar infeces congnitas:

rubola, citomegalovrus, HIV, vrus da hepatite B

Podem causar grande desconforto:

cachumba, infeces por herpesvrus

Mas podem tambm, como acontece na maioria das vezes, .....

nada causar em seus hospedeiros.

A maior parte dos vrus causa infeco assintomtica ou permanece no hospedeiro sem causar danos por longos perodos replicando-se em taxas lentas e estveis e escapando da resposta imunolgica.

Na verdade, o corpo humano habitado por inmeros microorganismos no s intra e extracelularmente como inseridos no genoma humano

VRUS ENDGENOS:
Diferentes retrovrus que se integraram a cromossomas humanos e de animais tornando-se parte deles (> 8% nosso genoma) Benefcios para o homem (hipteses): poderia facilitar a funo placentria e proporcionar a imunossupresso durante a gravidez

E alm disso, os vrus tambm pode ser importantes vetores de cura ou preveno de doenas !

Terapia gnica: vrus como vetores de instrues genticas levando mensagens a clulas especficas
Terapia oncolgica: capacidade que alguns vrus tm de destruir preferencialmente clulas cancerosas e de poupar clulas normais. Desenvolvimento de vacinas Vetores de clonagem de genes

Terapia gnica
Uso do vrus para carregar medicamentos ao invs de doenas Modifica-se o vrus removendo seu genoma ou inserindo o gene de interesse Aplicao: vacinas e tratamento de cncer Somente o capsdeo viral usado: estrutura aperfeioada pela natureza ao longo de milhes de anos para funcionar como um veculo de entrega biolgico.

Uso da nanotecnologia para construir modelos em 3-D de vrus: permite observar como as protenas virais se juntam e interagem

Descrio de doenas virais na antiguidade

Desenho ilustrando um co com raiva (1500 a.C)

Mmia do fara Ramss V (1196 a.C): leses de varola na face

Entalhe, 18a dinastria egpcia (370 a.C): indivduo com paralisia

Sculo 19: microscpio tico confirmando a teoria dos germes tornando obsoleta a gerao espontnea
Louis Pasteur (1822-1895)

Robert Koch (1843-1910)

A descoberta dos vrus: a descoberta de um mundo novo e fascinante

Inicialmente, os vrus foram associados a doenas

Ivanovski: estudo da doena do mosaico do tabaco (etapa fundamental na descoberta dos vrus)

1892, Dimitri

Beijerinck: diluio seriada da seiva princpio infeccioso VIVO mas FLUIDO Contagium vivum fluidum.
1899, Martinus

Identificao dos primeiros vrus

1898,

Loeffler e Frosh: vrus da febre aftosa

1900-1902,

Walter Reed: vrus da febre amarela

1917-1926,

Twort e dHerelle: bacterifagos

Ao final da Primeira Guerra, novos vrus foram identificados ... sem contudo terem sido VISTOS !

Novos progressos na virologia

Dcada de 30: primeiros estudos de inoculao em sistemas hospedeiros (animais de laboratrio e ovos embrionados) 1935, Stanley e cols: cristalizaram pela 1a vez um vrus. Acoplamento de substncias qumicas complexas sem funo metablica (Vrus foram rebaixados a categoria de substncias qumicas !!!) 1939, construo do ME: vrus puderam ser finalmente vistos.

Novos progressos na virologia

1949, Enders e cols: primeiros cultivos celulares: isolamento de novos vrus e produo de vacinas

Dcada de 60: incio da era do diagnstico laboratorial de viroses: aplicao do cultivo celular, da ME e dos testes sorolgicos para um diagnstico confivel.

Maturidade de uma cincia: outros eventos importantes

1962, uso dos primeiros antivirais
1965, descoberta do vrus da hepatite B

1976, emergncia do vrus bola no Sudo e no Zaira

1977, erradicao da varola

1981, primeiros casos de AIDS nos EUA

Dec. 90: rpido progresso da biologia molecular possibilitando a amplificao e o sequenciamento do genoma viral e a identificao de novos vrus

Os vrus no sculo 21
Considerados os organismos mais abundantes do planeta Amostras de ambientes aquticos revelaram que os genes virais constituem a maior parte da genosfera Desempenharam provavelmente um papel fundamental na evoluo da vida: origem do DNA e do ncleo celular

Existem atualmente uma proposta da incluso dos vrus na rvore da vida

rvore da vida

... Mas nesta rvore da vida, onde se situam os vrus ? ... E os vrus, seriam afinal SERES VIVOS ??

Principais diferenas entre os vrus e os microorganismos celulares

Tamanho relativo de vrus e bactrias: bactrias so medidas em micrmetros (10-6 m) e vrus em nanmetros (10-9 m)

Principais diferenas entre os vrus e os microorganismos celulares

Vrus: definio
Parasitas intracelulares obrigatrios Pequenos: medidos na ordem de grandeza de nanmetros (20 -250 nm) Possuem um nico tipo de cido nucleico: DNA ou RNA

Entretanto ....

.... Esta definio tradicionalmente atribuda aos vrus foi recentemente desafiada pela descoberta de um vrus gigante em amebas aquticas chamado de Mimivirus.

Visveis a MO (800 nm) Genoma DNA 1,2 milhes de bases (codifica > 900 ptns) Apresentam RNA

Estrutura da partcula viral

cido nucleico: genoma (DNA ou RNA) Capsdeo: capa proteica que envolve o genoma Nucleocapsdeo: cido nucleico + capsdeo
Envelope: presente em alguns vrus, origem da membrana da clula hospedeira

O genoma viral

Vrus com genoma DNA

Vrus com genoma RNA

AS CONFORMAES DO CIDO NUCLEICO VIRAL

RNA
FITA SIMPLES

DNA
FITA SIMPLES

LINEAR
Ex : Picornavrus, Paramixovrus

LINEAR
Ex : Parvovrus FITA DUPLA LINEAR

SEGMENTADO

Ex : Ortomixovrus FITA DUPLA SEGMENTADO

Ex: Adenovrus, Herpesvrus CIRCULAR

Ex : Reovirus

Ex: Papovavirus

Polaridade do genoma RNA

Capsdeo viral: simetrias

Protenas virais

capsmeros Icosadrica

capsdeo: simetrias

Helicoidal
Complexa

Simetria icosadrica
20 faces idnticas, cada face um tringulo equiltero

Adenovrus
Adenovirus HIV

Vrus da hepatite A

Simetria helicoidal

Vrus do mosaico do tabaco (no envelopado)

Vrus da raiva (envelopado)

Simetria complexa

Poxvirus (vrus da varola)

Envelope viral
Originado da membrana da clula hospedeira: bicamada fosfolipdica Associado com protenas codificadas pelo vrus Protena matriz: forma uma camada na superfcie interna do envelope glicoprotenas de superfcie: projetam-se da estrutura do envelope

Sensibilidade a agentes qumicos e fsicos

De um forma geral, os vrus so sensveis inativao fsica e qumica, especialmente os vrus envelopados
Agentes fsicos: calor e radiao ionizante Agentes qumicos: formaldedo, cloro. No caso de vrus envelopados, solventes orgnicos e detergentes.

Classificao internacional de vrus (ICTV)

Famlias de vrus DNA

Famlias de vrus RNA

Multiplicao viral

1. -

Iniciao adsoro entrada na clula descapsidao

3. Montagem da prognie viral e sada da clula hospedeira

2. Expresso e replicao do genoma viral sntese de protenas replicao do cido nucleico

Adsoro viral clula hospedeira

Unio especfica entre receptores presentes na superfcie da partcula viral e da clula hospedeira

Adsoro do HIV a superfcie do Linfcito T

Bacterifago adsorvido na bactria E. coli

Vias de entrada de vrus nas clulas

Vrus envelopados Vrus no envelopados

Processo de fuso: possibilidades

Fuso do envelope viral com a membrana plasmtica aps ligao ao receptor celular

Fuso do envelope viral com a membrana do endossoma aps endocitose

Expresso e replicao do genoma viral

Expresso e replicao do genoma viral

Montagem das partculas virais

Brotamento de vrus envelopados

Brotamento de partculas virais da clula hospedeira

HIV

Inmeras partculas do HIV brotando da superfcie do linfcito T Vrus do sarampo

Fases da replicao viral:

1. Adsoro 2. Penetrao 6. Liberao

5. Maturao

3. Desnudamento

4. Replicao

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