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com
 CAPÍTULO
Potencial de Membrana
e Potencial de Ação
A comunicação de informações entre neurônios e
entre neurônios e músculos ou órgãos periféricos requer
que os sinais percorram distâncias consideráveis. Vários
cientistas notáveis contemplaram a natureza dessa
comunicação através dos tempos. No segundo séculode
Anúncios,o grande médico grego Cláudio Galeno propôs
que os “humores” fluíam do cérebro para os músculos ao
longo de nervos ocos. Uma verdadeira compreensão
eletrofisiológica de nervos e músculos, no entanto,
dependia da descoberta e compreensão da própria
eletricidade. A natureza precisa da ação nervosa e
muscular tornou-se mais clara com o advento de novas
técnicas experimentais por vários cientistas europeus,
incluindo Luigi Galvini, Emil Du Bois-Reymond, Carlo
Matteucci e Hermann von Helmholtz, para citar alguns
(Brazier, 1988). ). Através da aplicação de estimulação
elétrica em nervos e músculos, esses primeiros
eletrofisiologistas demonstraram que a condução de
comandos do cérebro para o músculo para a geração de
movimento era mediada pelo fluxo de eletricidade ao
longo das fibras nervosas.
Com o avanço das técnicas eletrofisiológicas, a atividade
elétrica registrada dos nervos revelou que a condução da
informação ao longo do axônio era mediada pela geração
ativa de um potencial elétrico, denominado potencial de
ação. Mas qual era precisamente a natureza desses
potenciais de ação? Conhecer isso em detalhes exigia não
apenas uma preparação para obter registros intracelulares,
mas também uma que pudesse sobreviverem vitro. O
axônio gigante da lula forneceu exatamente essa
preparação. Muitos invertebrados contêm axônios
extraordinariamente grandes para a geração de reflexos de
fuga; axônios grandes conduzem mais rapidamente do que
os pequenos e, portanto, o tempo de resposta para fuga é
Neurociência Fundamental, Terceira Edição
6
reduzido (ver Capítulo 5). A lula possui um axônio de
aproximadamente 0,5 mm de diâmetro, grande o suficiente
para ser empalado até mesmo por uma micropipeta (Fig. 6.1).
Ao inserir uma micropipeta de vidro preenchida com uma
solução salina no axônio gigante da lula, Alan Hodgkin e
Andrew Huxley demonstraram em 1939 que os axônios em
repouso são eletricamente polarizados, exibindo um potencial
de membrana em repouso de aproximadamente -60mV dentro
versus fora. Na geração de um potencial de ação, a polarização
da membrana é removida (referida como despolarização) e
exibe uma rápida oscilação em direção a 0 mV e até mesmo
além (Fig. 6.1). Essa despolarização é seguida por uma rápida
oscilação do potencial de membrana para valores mais
negativos, um processo conhecido como hiperpolarização. O
potencial de membrana após um potencial de ação
normalmente se torna ainda mais negativo do que o valor
original de aproximadamente -60mV. Este período de
polarização aumentada é referido como pós-hiperpolarização
ou undershoot.
O desenvolvimento de técnicas eletrofisiológicas a
ponto de se obter registros intracelulares de
pequenas células do sistema nervoso de mamíferos
revelou que os potenciais de ação nesses neurônios
são gerados por meio de mecanismos semelhantes
ao do axônio gigante da lula.
Sabe-se agora que a geração de potencial de ação em
quase todos os tipos de neurônios e células musculares é
realizada por meio de mecanismos semelhantes aos
descritos pela primeira vez no axônio gigante da lula por
Hodgkin e Huxley. Este capítulo considera os mecanismos
celulares pelos quais neurônios e axônios geram um
potencial de membrana em repouso e como esse potencial
de membrana é brevemente interrompido com o propósito
de propagação de um sinal elétrico, o potencial de ação.
111 © 2008, 2003, 1999 Elsevier Inc.
112 6. POTENCIAL DE MEMBRANA E POTENCIAL DE AÇÃO

UMA B

FIGURA 6.1Registro intracelular do potencial de membrana e geração de potencial de ação no axônio gigante da lula. (A) Uma micropipeta de vidro,
cerca de 100mm de diâmetro, foi preenchido com água do mar e baixado no axônio gigante da lula depois de ter sido dissecado. O axônio tem cerca de 1
mm de diâmetro e é transiluminado por trás. (B) Um potencial de ação registrado entre o interior e o exterior do axônio. Os picos de uma onda senoidal
na parte inferior forneceram uma escala de temporização, com 2ms entre os picos. De Hodgkin e Huxley (1939).

POTENCIAL DE MEMBRANA K+Os íons movem-se a favor de seu gradiente de

Potencial de membrana é gerado pela
distribuição diferencial de íons
Através da operação de bombas iônicas e mecanismos
especiais de tamponamento iônico, os neurônios mantêm
ativamente concentrações internas precisas de vários íons
importantes, incluindo Na+, K+, Cl−, e Ca2+. Os mecanismos
pelos quais eles fazem isso são ilustrados nas Figuras 6.2 e
6.3. As concentrações intracelulares e extracelulares de Na+,
K+, Cl−, e Ca2+diferem marcadamente (Fig. 6.2); K+está
ativamente concentrado dentro da célula, e Na+, Cl−, e Ca2+
são ativamente extrudados para o espaço extracelular. No
entanto, isso não significa que a célula esteja preenchida
apenas com carga positiva; ânions aos quais a membrana
plasmática é impermeável também estão presentes no
interior da célula e quase equilibram a alta concentração de
K+. A osmolaridade dentro da célula é aproximadamente
igual à fora da célula.
Forças elétricas e termodinâmicas
determinam a distribuição passiva de íons
Os íons tendem a se mover para baixo de seus gradientes de
concentração através de poros iônicos especializados, conhecidos
como canais iônicos, na membrana plasmática. Através de leis
simples da termodinâmica, a alta concentração de K+
dentro das células gliais, neurônios e axônios resulta em uma
tendência para K+íons se difundam a favor de seu gradiente de
concentração e deixem a célula ou o processo celular (Fig. 6.3).
No entanto, o movimento de íons através da membrana
também resulta em uma redistribuição de carga elétrica. Como
concentração, a voltagem intracelular torna-se mais
negativa, e este aumento da negatividade resulta em uma
atração elétrica entre o potencial negativo dentro da célula
e a carga positiva, K+íons, compensando assim o fluxo de
saída desses íons. A membrana é seletivamente permeável;
isto é, é impermeável aos grandes ânions dentro da célula,
que não podem seguir os íons de potássio através da
membrana. Em algum potencial de membrana, a “força” da
atração eletrostática entre o potencial negativo de
membrana dentro da célula e o K carregado positivamente+
íons irão equilibrar exatamente as “forças” térmicas pelas
quais K+os íons tendem a fluir a favor de seu gradiente de
concentração (Fig. 6.3). Nesta circunstância, é igualmente
provável que um K+O íon sai da célula por movimento a
favor do gradiente de concentração, uma vez que um K+O
íon entra na célula devido à atração entre o potencial
negativo de membrana e a carga positiva desse íon. Neste
potencial de membrana, não há fluxo líquido de K+(o mesmo
número de K+
íons entram na célula como saem da célula por unidade
de tempo) e esses íons estão em equilíbrio. O potencial
de membrana no qual isso ocorre é conhecido como
potencial de equilíbrio. (Ver Caixa 6.1 para cálculo do
potencial de equilíbrio.)
Para ilustrar, vamos considerar a distribuição passiva de
K+íons no axônio gigante da lula como estudado por
Hodgkin e Huxley. O K+concentração [K+] dentro do axônio
gigante da lula é de cerca de 400mM, enquanto o [K+] fora
do axônio é de cerca de 20 mM. Porque [K+]eué maior que [K+
]o, os íons de potássio tenderão a fluir a favor de seu
gradiente de concentração, levando consigo cargas
positivas. O potencial de equilíbrio (no qual a tendência para

II. NEUROCIÊNCIA CELULAR E MOLECULAR

 POTENCIAL DE MEMBRANA 113

- 60 a -75 mV Extracelular
+
- Intracelular
- K +
N / D+(150) EN / D= +56
- K
K +
N / D+(18)
- K

- K K +
K+(3) EK =-102
- K Gradiente de Concentração
Gradiente de tensão
K+(135)
- K
K
+
Intracelular Extracelular
- K
- K +
Cl-(7)
-
Cl-(120) ECl= -76
K

- +
+
Ca2+(1.2)E
Ca2+= +125

- 102mV

FIGURA 6.3 O potencial de equilíbrio é influenciado pela con-

i
+P
P

Bicamada lipídica gradiente de centralização e a diferença de voltagem através da

AD

membrana. Neurônios concentram ativamente K+dentro da célula. Estes

P

N / D+ K+os íons tendem a fluir a favor de seu gradiente de concentração de

AT

dentro para fora da célula. No entanto, o potencial negativo de

membrana dentro da célula fornece uma atração para K+íons entrem ou
Bomba iônica
permaneçam na célula. Esses dois fatores se equilibram no potencial de
equilíbrio, que em um neurônio típico de mamífero é -102mV para K+.
K+

FIGURA 6.2Distribuição diferencial de íons dentro e fora da membrana
plasmática de neurônios e processos neuronais, mostrando canais
iônicos para Na+, K+, Cl−, e Ca2+, bem como um Na eletrogênico+–K+bomba
iônica (também conhecida como Na+, K+-ATPase). Concentrações (em
milimoles, exceto para Ca intracelular2+) dos íons são dados entre
parênteses; seus potenciais de equilíbrio (E) para um neurônio de
mamífero típico são indicados.
e as células gliais diferem consideravelmente daquelas do
axônio gigante da lula, que é adaptado para viver na água
do mar. Ao substituir 3,1 mM por [K+]oe 140mM para [K+]eu
na equação de Nernst, com temperatura corporal de
mamíferos, T = 37°C, obtemos
EK= 61,5 log10(3,1/140) = -102mV

Movimentos de íons podem causar

K+íons a fluir a favor de seu gradiente de concentração será
exatamente compensado pela atração por K+íons para entrar na
célula por causa da carga negativa dentro da célula) a uma
temperatura ambiente de 20°C pode ser calculada pela equação
de Nernst como tal:
EK= 58,2 log10(20/400) = -76mV
Portanto, em um potencial de membrana de -76mV, K+os íons
têm a mesma tendência de fluir para dentro ou para fora do
axônio. As concentraes de K+em neurônios de mamíferos
hiperpolarização ou despolarização
Em células de mamíferos, em potenciais de membrana
positivos para -102mV, K+íons tendem a fluir para fora da
célula. Aumentando a capacidade de K+íons para fluir
através da membrana (ou seja, aumentando a condutância
da membrana para K+(gK)) faz com que o potencial de
membrana se torne mais negativo, ou hiperpolarizado,
devido à saída de íons carregados positivamente de dentro
da célula (Fig. 6.4).

II. NEUROCIÊNCIA CELULAR E MOLECULAR

114 6. POTENCIAL DE MEMBRANA E POTENCIAL DE AÇÃO
CAIXA 6.1
NERNSTEQUATION
O potencial de equilíbrio é determinado por (1) a
concentração do íon dentro e fora da célula, (2) a
temperatura da solução, (3) a valência do íon e (4) a
quantidade de trabalho necessária para separar um
determinada quantidade de carga. A equação que descreve
o potencial de equilíbrio foi formulada por um físico-químico
alemão chamado Walter Nernst em 1888:
Eíon=RT/zF⋅ln([íon]o/[íon]eu)
Aqui,Eíoné o potencial de membrana no qual a espécie
iônica está em equilíbrio,Ré a constante do gás [8,315 J
por Kelvin por mol (JK−1mol−1)],Té a temperatura em
Kelvins (TKelvin= 273,16 + TCelsius),Fé a constante de Faraday
Em potenciais de membrana negativos para -102mV, K+
íons tendem a fluir para dentro da célula; aumentando a
condutância da membrana para K+faz com que o potencial
de membrana se torne mais positivo, ou despolarizado,
devido ao fluxo de carga positiva para dentro da célula. O
potencial de membrana no qual a corrente líquida “inverte”
a direção é chamado de potencial de reversão. Se os canais
conduzem apenas um tipo de íon (por exemplo, K+íons),
então o potencial de reversão e o potencial de equilíbrio de
Nernst para aquele íon coincidem (Fig. 6.4A). Aumentando a
condutância da membrana para K+íons enquanto o
potencial de membrana está no potencial de equilíbrio para
K+(EK) não altera o potencial de membrana porque nenhuma
força motriz resultante causa K+íons para sair ou entrar na
célula. No entanto, este aumento na condutância da
membrana ao K+diminui a capacidade de outras espécies de
íons de alterar o potencial de membrana porque qualquer
desvio do potencial deEKaumenta o impulso para K+íons
para sair ou entrar na célula, atraindo assim o potencial de
membrana de volta paraEK(Fig. 6.4B). Esse efeito é
conhecido como “shunt” e é importante para alguns efeitos
da transmissão sináptica inibitória.
A saída e entrada da célula por K+íons durante a
geração do potencial de membrana dá origem a um
problema curioso. Quando K+íons deixam a célula para
gerar um potencial de membrana, a concentração de K+
mudanças dentro e fora da célula. Por que essa
mudança na concentração não altera o potencial de
equilíbrio, alterando assim a tendência de K+íons fluam a
favor de seu gradiente de concentração? A razão é que o
número de K+íons necessários para deixar a célula
II. NEUROCIÊNCIA CELULAR E MOLECULAR
[96.485 coulombs por mol (C mol−1)],zé a valência do íon,
e [íon]oe [íon]eusão as concentrações do íon fora e dentro
da célula, respectivamente. Para um íon monovalente
carregado positivamente (cátion) à temperatura
ambiente (20°C), substituindo os números apropriados e
convertendo log natural (ln) em log base 10 (log10) resulta
em
Eíon= 58,2 log10([íon]o/[íon]eu);
a uma temperatura corporal de 37°C, a equação de Nernst é
Eíon= 61,5 log10([íon]o/[íon]eu).
David A. McCormick
atingir o potencial de equilíbrio é muito pequeno. Por
exemplo, se uma célula estivesse em 0mV e a membrana de
repente se tornasse permeável ao K+íons, apenas cerca de
10−12mol de K+íons por centímetro quadrado de membrana
se moveriam de dentro para fora da célula trazendo o
potencial de membrana para o potencial de equilíbrio para
K+. Em uma célula esférica de 25mm de diâmetro, isso
equivaleria a uma diminuição média no K intracelular+
de apenas cerca de 4mM(por exemplo, de 140 a 139,996mM
). No entanto, há casos em que mudanças significativas nas
concentrações de K+pode ocorrer, particularmente durante
a geração de atividade pronunciada, como uma crise
epiléptica. Durante a ocorrência de uma crise tônicoclônica
generalizada (grande mal), um grande número de
neurônios descarrega em todo o córtex cerebral de maneira
sincronizada. Esta descarga síncrona de um grande número
de neurônios aumenta significativamente o K extracelular+
concentração, tanto quanto um par de milimoles,
resultando em um deslocamento positivo proporcional no
potencial de equilíbrio para K+. Essa mudança no potencial
de equilíbrio pode aumentar a excitabilidade dos neurônios
afetados e dos processos neuronais e, assim, promover a
disseminação da atividade convulsiva. Felizmente, a
concentração extracelular de K+é fortemente regulado e é
mantido em níveis normais através da captação pelas
células gliais, bem como pela difusão através do fluido do
espaço extracelular.
Como é verdade para K+íons, cada uma das espécies de
íons permeáveis à membrana possui um potencial de
equilíbrio que depende da concentração desse íon dentro e
fora da célula. Assim, os potenciais de equilíbrio podem
 POTENCIAL DE MEMBRANA
UMA
Positivo paraEK
gK K+sai da célula
Potencial de reversão
EK
(Nenhum movimento líquido de K+
Negativo paraEK
gK K+move-se para a célula
Tempo
B Normal AumentougK
injeção de corrente
Resposta de tensão K+sai da célula
EK
- 102
gK K+move-se para a célula
Tempo
FIGURA 6.4 Aumentos em K+condutância pode resultar em hiperpo-
larização, despolarização ou nenhuma alteração no potencial de
membrana. (A) Abertura K+canais aumenta a condutância da membrana
para K+, denotadogK.Seo potencial de membrana é positivo para o
potencial de equilíbrio (também conhecido como potencial de reversão)
para K+, então aumentandogK causará algum K+íons saiam da célula, e a
célula se tornará hiperpolarizada. Se o potencial de membrana for
negativo paraEKquandogK é aumentado, então K+íons entrarão na célula,
tornando o interior mais positivo (mais despolarizado). Se o potencial de
membrana for exatamenteEKquandogK é aumentado, então não haverá
movimento líquido de K+íons. (B) Abertura K+canais quando o potencial
de membranaEKnão altera o potencial de membrana; no entanto, reduz a
capacidade de outras correntes iônicas de afastar o potencial de
membrana doEK. Por exemplo, uma comparação da capacidade da
injeção de dois pulsos de corrente, um despolarizante e outro
hiperpolarizante, de alterar o potencial de membrana antes e depois de
abrir K+canais revela que o aumentogK diminui visivelmente as respostas
da célula.
variam entre diferentes tipos de células, como aquelas
encontradas em animais adaptados para viver em água salgada
versus neurônios de mamíferos. Em neurônios de mamíferos, o
potencial de equilíbrio é de aproximadamente 56mV para Na+,
aproximadamente -76mV para Cl−, e cerca de 125mV para Ca2+
(Fig. 6.2). Assim, aumentando a condutância da membrana ao
Na+(gNa) através da abertura de Na+os canais despolarizam o
potencial de membrana em direção a 56mV; aumentando a
condutância da membrana para Cl−
aproxima o potencial de membrana de -76mV; e finalmente
aumentando a condutância da membrana para Ca2+
despolariza a célula em direção a 125mV.
II. NEUROCIÊNCIA CELULAR E MOLECULAR
115
N / D+, K+, e Cl-Contribuir para a
Determinação do Potencial de
Membrana em Repouso
Se uma membrana é permeável a apenas um íon e nenhuma
bomba iônica eletrogênica está operando (veja a próxima
seção), então o potencial de membrana está necessariamente
)
no potencial de equilíbrio para aquele íon. Em repouso, a
membrana plasmática da maioria dos tipos de células não está
no potencial de equilíbrio para K+íons, indicando que a
membrana também é permeável a outros tipos de íons. Por
exemplo, a membrana de repouso do axônio gigante da lula é
permeável ao Cl−e Na+, assim como K+, devido à presença de
canais iônicos que não apenas permitem a passagem desses
íons, mas também estão abertos no potencial de repouso da
membrana. Como a membrana é permeável ao K+, Cl−, e Na+, o
potencial de repouso do axônio gigante da lula não é igual aEK,E
N / D, ouECl, mas está em algum lugar entre esses três. Uma
membrana permeável a mais de um íon tem um potencial de
membrana em estado estacionário cujo valor está entre aqueles
dos potenciais de equilíbrio para cada um dos íons permeantes
(Quadro 6.2).
Diferentes tipos de neurônios têm diferentes
potenciais de repouso
Registros intracelulares de neurônios no sistema nervoso central (SNC) de
mamíferos revelam que diferentes tipos de neurônios exibem diferentes potenciais
de membrana em repouso. De fato, alguns tipos de neurônios nem mesmo exibem
um verdadeiro potencial de membrana de “repouso”; eles geram de forma
espontânea e contínua potenciais de ação mesmo na total falta de entrada sináptica.
No sistema visual, registros intracelulares mostraram que as células fotorreceptoras
da retina – os bastonetes e cones – têm um potencial de membrana de
aproximadamente -40mV em repouso e são hiperpolarizadas quando ativadas pela
luz. As células do núcleo geniculado lateral dorsal, que recebem estímulos axonais da
retina e se projetam para o córtex visual, têm um potencial de membrana de repouso
de aproximadamente -70mV durante o sono e -55mV durante a vigília. enquanto os
neurônios piramidais do córtex visual têm um potencial de membrana de repouso de
cerca de -75mV. Presumivelmente, os potenciais de membrana em repouso de
diferentes tipos de células no sistema nervoso central e periférico são altamente
regulados e são funcionalmente importantes. Por exemplo, o potencial de membrana
despolarizado dos fotorreceptores presumivelmente permite que o potencial de
membrana se mova em direções negativas e positivas em resposta a mudanças na
intensidade da luz. O potencial de membrana hiperpolarizado dos neurônios
talâmicos durante o sono o potencial de membrana despolarizado dos
fotorreceptores presumivelmente permite que o potencial de membrana se mova em
ambas as direções negativa e positiva em resposta a mudanças na intensidade da
luz. O potencial de membrana hiperpolarizado dos neurônios talâmicos durante o
sono o potencial de membrana despolarizado dos fotorreceptores presumivelmente
permite que o potencial de membrana se mova em ambas as direções negativa e
positiva em resposta a mudanças na intensidade da luz. O potencial de membrana
hiperpolarizado dos neurônios talâmicos durante o sono (-70mV) diminui
drasticamente o fluxo de informação da periferia sensorial para o córtex cerebral,
116 6. POTENCIAL DE MEMBRANA E POTENCIAL DE AÇÃO
GOLDMAN - HODGKIN - KATZEQUATION
Uma equação desenvolvida por Goldman e posteriormente
usada por Alan Hodgkin e Bernard Katz descreve o potencial de
membrana em estado estacionário para um determinado
conjunto de concentrações iônicas dentro e fora da célula e as
permeabilidades relativas da membrana para cada um desses
íons:
RT ⎛(p[KK+]+po [N / D+o]+p Cl [Cl−])eu⎞
⋅ ln
N/D
VmF
⎝⎜(pK[K+]+p
euN / D[ N / D+]+eup Cl[Cl−] o) ⎠⎟
A contribuição relativa de cada íon é determinada por
suas diferenças de concentração através da membrana e
pela permeabilidade relativa.pK,pN / D,pCl) da membrana para
cada tipo de íon. Se uma membrana é permeável a apenas
um íon, então a equação de Goldman-Hodgkin-Katz se reduz
à equação de Nernst. No axônio gigante da lula, em
potencial de membrana em repouso, as razões de
permeabilidade são
pK:pN / D:pCl= 1,00 : 0,04 : 0,45.
Presumivelmente, para permitir que o córtex seja
relativamente inalterado durante o sono, e o potencial de
membrana de 20 mV entre o potencial de repouso e o limiar
do potencial de ação nas células piramidais corticais permite
que essas células sejam fortemente influenciadas por
barragens subliminares de potenciais sinápticos de outros
neurônios corticais. ver Capítulos 5 e 12).
As bombas iônicas mantêm ativamente os
gradientes iônicos
Como o potencial de membrana em repouso de um
neurônio não está no potencial de equilíbrio para nenhum íon
em particular, os íons fluem constantemente a favor de seus
gradientes de concentração. Esse fluxo torna-se
consideravelmente maior com a geração de potenciais elétricos
e sinápticos, pois os canais iônicos são abertos por esses
eventos. Embora o número absoluto de íons que atravessam a
membrana plasmática durante cada potencial de ação ou
potencial sináptico possa ser pequeno em células individuais, a
influência coletiva de uma grande rede neural de células, como
no cérebro, e a presença de fluxos de íons mesmo em repouso
pode alterar substancialmente a distribuição de íons dentro e
fora dos neurônios. As células resolveram esse problema com o
uso do transporte ativo de íons contra seus gradientes de
concentração. As proteínas que transportam ativamente íons
são chamadas de bombas iônicas,
II. NEUROCIÊNCIA CELULAR E MOLECULAR
CAIXA 6.2
A membrana do axônio gigante da lula, em repouso, é mais
permeável ao K+íons, menos para Cl−, e menos permeável ao Na+. (O
cloreto parece contribuir consideravelmente menos para a
determinação do potencial de repouso de neurônios de mamíferos.)
Esses resultados indicam que o potencial de repouso da membrana é
determinado pela permeabilidade de repouso da membrana ao K+,
N / D+, e Cl−. Em teoria, esse potencial de membrana em repouso
pode estar em qualquer lugar entreEK(por exemplo,
.
- 76mV) eEN / D(55mV). Para os três íons a 20°C, a equação
é
58,2 registro10{(1⋅20 + 0,04⋅440 + 0,45⋅40)
Vm= = −62mV.
(1⋅400 + 0,04⋅50 + 0,45⋅560)}
Isso sugere que o axônio gigante da lula deve ter um
potencial de membrana de repouso de -62mV. De fato, o
potencial de membrana em repouso pode ser de alguns
milivolts hiperpolarizado a esse valor pela operação do Na
eletrogênico.+–K+bombear.
David A. McCormick
então uma+–K+bomba é talvez o mais completamente
compreendido (Lauger, 1991). Então uma+–K+bomba é
estimulada por aumentos na concentração intracelular
de Na+e move Na+para fora da célula enquanto move K+
nele, realizando esta tarefa através da hidrólise de
ATP (Fig. 6.2). Três Na+íons são extrudados a cada dois
K+íons transportados para dentro da célula. Devido ao
transporte desigual de íons, a operação desta bomba
gera um potencial elétrico hiperpolarizante e é dito
eletrogênico. Então uma+–K+bomba normalmente
resulta no potencial de membrana da célula sendo
alguns milivolts mais negativo do que seria de outra
forma.
Então uma+–K+bomba consiste em duas subunidades,umae
b,dispostos em um tetrâmero (ab)2. Então uma+–K+
Acredita-se que a bomba opere por meio de mudanças
conformacionais que, alternativamente, expõem um Na+
local de ligação para o interior da célula (seguido pela
liberação de Na+) e K+local de ligação ao líquido
extracelular (Fig. 6.2). Tal mudança de conformação pode
ser devida à fosforilação e desfosforilação da proteína.
As membranas dos neurônios e da glia contêm vários tipos
de bombas iônicas, usadas para manter a distribuição
adequada de cada espécie iônica importante para a sinalização
celular. Muitas dessas bombas são operadas pela Na+gradiente
através da célula, enquanto outros operam através de um
mecanismo semelhante ao do Na+–K+
 POTENCIAL DE ACÇÃO
bomba (ou seja, a hidrólise de ATP). Por exemplo, a
concentração de cálcio dentro dos neurônios é mantida em
níveis muito baixos (tipicamente 50-100 nM) através da
operação de ambos os tipos de bombas iônicas, bem como
de Ca intracelular especial.2+mecanismos de buffer. Ca2+é
extrudado dos neurônios através de um Ca2+, Mg2+-ATPase e
Na+–Ca2+permutador. Então uma+–Ca2+trocador é acionado
pelo Na+gradiente através da membrana e extrude um Ca2+
íon para cada Na+íon permitido entrar na célula.
O Cl−A concentração nos neurônios é mantida ativamente
em um nível baixo através da operação de um trocador de
cloreto-bicarbonato, que traz um íon de Na+
e um íon de HCO− 3para cada íon de Cl−extrudado.
O pH intracelular também pode afetar marcadamente a
excitabilidade neuronal e, portanto, é fortemente regulado, em
parte por um Na+–H+trocador que expulsa um próton para cada
Na+permissão para entrar na célula.
Resumo
O potencial de membrana é gerado pela distribuição
desigual de íons, particularmente K+, N / D+, e Cl−, através da
membrana plasmática. Essa distribuição desigual de íons é
mantida por bombas e trocadores iônicos. K+os íons estão
concentrados dentro do neurônio e tendem a fluir a favor
de seu gradiente de concentração, levando a uma
hiperpolarização da célula. No potencial de equilíbrio, a
tendência de K+íons a fluir para fora da célula será
exatamente compensado pela tendência de K+íons para
entrar na célula devido à atração do potencial negativo
dentro da célula. A membrana de repouso também é
permeável ao Na+e Cl−e, portanto, o potencial de membrana
em repouso é aproximadamente -75 a -40mV, em outras
palavras, substancialmente positivo para EK.
POTENCIAL DE ACÇÃO
Um aumento de Na+e K+A Condutância
Gera Potenciais de Ação
Hodgkin e Huxley não apenas registraram o potencial de
ação com um microeletrodo intracelular (Fig. 6.1), mas
também realizaram uma série notável de experimentos que
explicaram qualitativa e quantitativamente os mecanismos
iônicos pelos quais o potencial de ação é gerado (Hodgkin e
Huxley, 1952a,b). Como mencionado anteriormente, esses
pesquisadores descobriram que durante o potencial de
ação, o potencial de membrana da célula rapidamente
ultrapassa 0mV e se aproxima do potencial de equilíbrio
para Na+. Após a geração do potencial de ação, o potencial
de membrana se repolariza.
II. NEUROCIÊNCIA CELULAR E MOLECULAR
117
se torna mais negativo do que antes, gerando uma pós-
hiperpolarização. Essas mudanças no potencial de
membrana durante a geração do potencial de ação
foram associadas a um grande aumento na condutância
da membrana plasmática, mas para que a membrana se
torna condutora para gerar o potencial de ação? A
hipótese predominante era que havia um aumento não
seletivo na condutância fazendo com que o potencial de
repouso negativo aumentasse em direção a 0mV. Desde
a publicação dos experimentos de E. Overton em 1902,
sabe-se que o potencial de ação depende da presença de
Na extracelular+. Reduzindo a concentração de Na+no
banho artificial de água do mar o axônio resultou em
acentuada redução na amplitude do potencial de ação.
Com base nesses e em outros dados, Hodgkin e Katz
propuseram que o potencial de ação é gerado através de
um rápido aumento na condutância da membrana ao Na
+íons. Faltava uma prova quantitativa dessa teoria, no
entanto, porque as correntes iônicas não podiam ser
observadas diretamente. O desenvolvimento da técnica
de voltage-clamp por Kenneth Cole no Marine Biological
Laboratory em Massachusetts resolveu este problema e
permitiu a medição quantitativa do Na+e K+correntes
subjacentes ao potencial de ação (Cole, 1949; Quadro
6.3).
Hodgkin e Huxley (1952) utilizaram a técnica de voltage-
clamp para investigar os mecanismos de geração do
potencial de ação no axônio gigante da lula. Axônios e
neurônios têm um limiar para a inicialização de um
potencial de ação de cerca de -45 a -55mV. Aumentar a
voltagem de -60 para 0mV produz um grande, mas
transitório, fluxo de carga positiva na célula (conhecido
como corrente interna). Essa corrente transitória de entrada
é seguida por um fluxo sustentado de carga positiva para
fora da célula (a corrente de saída). Pela tensão de fixação
da célula e substituição de diferentes íons dentro ou fora do
axônio ou ambos, Hodgkin, Huxley e colegas demonstraram
que a corrente transitória interna é transportada pelo Na+
íons fluindo para dentro da célula e a corrente de saída
sustentada é mediada por um fluxo sustentado de K+íons
saindo da célula (Fig. 6.6) (Hodgkin e Huxley, 1952a, 1952b;
Hille, 1977).
N / D+e K+correntes (euN / DeeuK, respectivamente) podem ser
bloqueados, permitindo que cada corrente seja examinada
isoladamente (Fig. 6.6B). Tetrodotoxina (TTX), um poderoso
veneno encontrado no baiacuSpheroides rubripes, bloqueia
seletivamente Na dependente de voltagem+correntes (o baiacu
continua sendo uma iguaria no Japão e deve ser preparado com
o máximo cuidado pelo chef). Usando TTX, pode-se isolar
seletivamenteeuKe examine sua dependência de tensão e curso
de tempo (Fig. 6.6B).
Outro composto, tetraetilamônio (TEA), é uma
ferramenta farmacológica útil para bloquear seletivamente
118 6. POTENCIAL DE MEMBRANA E POTENCIAL DE AÇÃO
CAIXA 6.3
TENSÃO - TÉCNICA DE FIXAÇÃO
Na técnica de voltagem-clamp, dois eletrodos
independentes são inseridos no axônio gigante da lula: um
para registrar a diferença de voltagem através da membrana
e outro para injetar a corrente intracelularmente (Fig. 6.5).
Esses eletrodos são então conectados a um circuito de
feedback que compara a tensão medida através da
membrana com a tensão desejada pelo experimentador. Se
esses dois valores forem diferentes, então a corrente é
injetada no axônio para compensar essa diferença. Este ciclo
de feedback contínuo, no qual a voltagem é medida e a
corrente é injetada, efetivamente “grampeia” a membrana
em uma voltagem particular. Se os canais iônicos se abrirem,
o fluxo resultante de íons para dentro ou para fora do
axônio seria compensado pela injeção de corrente positiva
ou negativa no axônio através do eletrodo de injeção de
corrente.
+ Comando
potencial
UMAFB
Eletrodo de corrente -
Injeção de corrente
Registro de tensão
Axônio
Eletrodo de tensão
+ ao nome “retificador retardado” para este K+
UMAv Vm
-
Atual
monitor
FIGURA 6.5A técnica de voltagem-clamp mantém a voltagem através da
membrana constante, de modo que a amplitude e o curso de tempo das
correntes iônicas possam ser medidos. Na técnica do grampo de
voltagem de dois eletrodos, um eletrodo mede a voltagem através da
membrana enquanto o outro injeta corrente na célula para manter a
voltagem constante. O experimentador define uma voltagem para a qual
o axônio ou neurônio deve ser escalonado (o potencial de comando). A
corrente é então injetada na célula em proporção à diferença entre o
potencial de membrana presente e o potencial de comando. Esse ciclo de
feedback ocorre continuamente, prendendo assim o potencial de
membrana ao potencial de comando. Ao medir a quantidade de corrente
injetada, o experimentador pode determinar a amplitude e o curso de
tempo das correntes iônicas que fluem através da membrana.
II. NEUROCIÊNCIA CELULAR E MOLECULAR
necessariamente igual à corrente que flui através dos canais
iônicos. É esta corrente injetada que é medida pelo
experimentador. Os benefícios da técnica de tensão-clamp são
duplos. Primeiro, a corrente injetada no axônio para manter o
potencial de membrana “fixado” é necessariamente igual à
corrente que flui através dos canais iônicos na membrana,
fornecendo assim uma medida direta dessa corrente. Em
segundo lugar, as correntes iônicas são dependentes da tensão
e do tempo; eles se tornam ativos em certos potenciais de
membrana e o fazem em uma taxa particular. Manter a tensão
constante no alicate de tensão permite separar essas duas
variáveis; a dependência da voltagem e a cinética das correntes
iônicas que fluem através da membrana plasmática podem ser
medidas diretamente.
David A. McCormick
euK(Fig. 6.6B). O uso de TEA para examinar a
dependência de tensão e o curso de tempo do Na+atual
geração de potencial de ação subjacente (Fig. 6.6B)
revela algumas diferenças fundamentais entre Na+e K+
correntes. Primeiro, o Na interno+A corrente ativa, ou “liga”,
muito mais rapidamente do que o K+corrente (dando origem
atual). Em segundo lugar, o Na+a corrente é transitória; ele se
inativa, mesmo que o potencial de membrana seja mantido em
0 mV (Fig. 6.6A). Em contraste, o K externo+a corrente, uma vez
ativada, permanece “ligada” enquanto o potencial de
membrana for fixado em níveis positivos; ou seja, K+
a corrente não se desativa, é sustentada.
Notavelmente, de um experimento, vemos que o Na+
A corrente ativa e inativa rapidamente, enquanto a K+
corrente só ativa lentamente. Essas propriedades
fundamentais do Na subjacente+e K+canais permitem
a geração de potenciais de ação.
Hodgkin e Huxley propuseram que K+Os canais possuem
um “portão” sensível à voltagem que se abre por
despolarização e se fecha pela repolarização subsequente
do potencial de membrana. Este processo de “ligar” e
“desligar” o K+A corrente passou a ser conhecida como
ativação e desativação. Então uma+A corrente também exibe
ativação e desativação dependentes de voltagem (Fig. 6.6),
mas o Na+os canais também se tornam inativos apesar da
despolarização mantida. Assim, o Na+
A corrente não apenas ativa e desativa, mas também
exibe um processo separado conhecido como inativação,
pelo qual os canais ficam bloqueados mesmo que
 POTENCIAL DE ACÇÃO 119

UMA Substituição de íons B Bloqueio farmacológico

Ao controle
(1)
em
0 5 10
0 mV 75mV
60
Vm 10
45
30
15
- 60 0
nA 0
- 15

- 10 - 45
- 30

TTX: corrente K+ (euk) 75mV

(2) 60
euK(Na+ – água do mar livre) 45
30
15
0
Corrente de membrana (mA/cm2)

- 15
Para dentro para fora

(3) TEA: corrente de Na+ (euN / D)

eupequeno(água do mar)
75
60
45
30
15 - 45
- 30
0
euN / D(eutot -euK) - 15

FIGURA 6.6A análise de tensão-grampo revela correntes iônicas subjacentes à geração de potencial de ação. (A) Aumentar o potencial de -60
para 0mV através da membrana do axônio gigante da lula ativa uma corrente interna seguida por uma corrente externa. Se o Na+na água do
mar é substituída por colina (que não passa pelo Na+canais), aumentando o potencial de membrana de -60 para 0mV resulta apenas na
corrente de saída, que corresponde aeuK. SubtraçãoeuKda gravação em água do mar normal ilustra o curso amplitude-tempo da entrada de Na
+atual,euN / D. Observe queeuKativa mais lentamente do queeuN / De essaeuN / Dinativa com o tempo. De Hodgkin e Huxley (1952). (B) Essas duas

correntes iônicas também podem ser isoladas uma da outra através do uso de bloqueadores farmacológicos. (1) Aumentar o potencial de
membrana de -45 para 75mV em passos de 15mV revela o curso amplitude-tempo da entrada de Na+e para fora K+correntes. (2) Após o bloco
de euN / Dcom a tetrodotoxina venenosa (TTX), aumentando o potencial de membrana para níveis positivoseuKsó. (3) Após o bloco deeuKcom
tetraetilamônio (TEA), aumentando o potencial de membrana para níveis positivoseuN / Dsó. De Hille (1977).

eles são ativados. A remoção dessa inativação é obtida pela a célula despolariza ainda mais o potencial de
remoção da despolarização e é um processo conhecido membrana e mais Na+canais são ativados, formando um
como desinativação. Assim, Na+Os canais possuem dois ciclo de feedback positivo que rapidamente (dentro de
processos sensíveis à voltagem: ativação-desativação e 100ms ou mais) traz o potencial de membrana paraEN / D.
inativação-desativação. A cinética dessas duas propriedades No entanto, a despolarização associada à geração do
do Na+os canais são diferentes: a inativação ocorre a uma potencial de ação também inativa o Na+canais e, como
taxa mais lenta do que a ativação. A consequência funcional uma porcentagem cada vez maior de Na+
dos dois mecanismos é que o Na+os íons podem fluir canais tornam-se inativados, a corrida de Na+na célula
através da membrana somente quando a corrente é diminui. Essa inativação de Na+canais e a ativação de
ativada, mas não inativada. Assim, Na+os íons não fluem nos K+canais resultam na repolarização do potencial de
potenciais de membrana em repouso porque a porta de ação. Essa repolarização desativa o Na+canais. Então,
ativação está fechada (mesmo que a porta de inativação não a inativação do canal é removida lentamente, e os
esteja). Após a despolarização, o portão de ativação se abre, canais ficam prontos, mais uma vez, para a geração
permitindo que o Na+íons fluírem para dentro da célula. No de outro potencial de ação (Fig. 6.7).
entanto, essa despolarização também resulta no
fechamento (em uma taxa mais lenta) do portão de Ao medir a sensibilidade à voltagem e a cinética
inativação, que então bloqueia o fluxo de Na+íons. Após a desses dois processos, ativação-desativação e
repolarização do potencial de membrana, o portão de inativação-desativação do Na+corrente, bem como a
ativação novamente se fecha e o portão de inativação se ativação-desativação do retificador atrasado K+atual,
abre novamente, preparando o axônio para a geração do Hodgkin e Huxley geraram uma série de equações
próximo potencial de ação (Fig. 6.7). A despolarização matemáticas que descreviam quantitativamente a
permite que a corrente iônica flua em virtude da ativação do geração do potencial de ação (cálculo da propagação
canal. A corrida de Na+íons em de um único potencial de ação necessário

II. NEUROCIÊNCIA CELULAR E MOLECULAR

120 6. POTENCIAL DE MEMBRANA E POTENCIAL DE AÇÃO

20 íons. Além disso, o retificador retardado K+os canais também

Potencial de membrana
0 estão se abrindo, devido à despolarização do potencial de
membrana, e permitindo que a carga positiva saia da célula. Em
Voltagem - 20
algum ponto, próximo ao pico do potencial de ação, o
- 40 movimento para dentro do Na+íons para dentro da célula é
gN/D - 60 exatamente compensado pelo movimento para fora de K+
Condutância - 80 íons para fora da célula. Após este ponto, o
gK
500 ns movimento para fora de K+os íons dominam, e o
potencial de membrana é repolarizado,
euK correspondendo à queda do potencial de ação. A
Atual
20 nA
persistência do K+corrente por alguns milissegundos
eu após o potencial de ação gera a pós-hiperpolarização.
Durante essa pós-hiperpolarização, que é alongada
N/D

Ativação
AproximandoEN / D pela constante de tempo da membrana, a inativação
N / D+ canais
do Na+canais é removido, preparando o axônio para a
Inativação geração do próximo potencial de ação (Fig. 6.7).
K+canais A ocorrência de um potencial de ação não está
associada a mudanças substanciais nas concentrações
-3-2 - 1 0 1 2 3 4 5 6 Tempo (ms) intra ou extracelulares de Na+ou K+, como mostrado
anteriormente para a geração do potencial de
FIGURA 6.7 A geração do potencial de ação está associada a membrana em repouso. Por exemplo, a geração de um
aumento da membrana Na+condutância e Na+corrente seguida por único potencial de ação em um 25-mcélula esférica
um aumento em K+condutância e K+atual. Antes da geração do
hipotética de diâmetro m deve aumentar a concentração
potencial de ação, Na+os canais não são ativados nem desativados
(ilustrado na parte inferior da figura). Ativação de Na+ intracelular de Na+por apenas cerca de 6mM(de cerca de
canais permite Na+íons entrem na célula, despolarizando o potencial 18 a 18.006mM). Assim, o potencial de ação é um evento
de membrana. Essa despolarização também ativa K+canais. Após a elétrico gerado por uma mudança na distribuição de
ativação e despolarização, a partícula de inativação no Na+ carga através da membrana e não por uma mudança
os canais se fecham e o potencial de membrana se repolariza. A
acentuada na concentração intra ou extracelular de Na+.
persistência da ativação de K+canais (e outras propriedades da
+ou K+.
membrana) gera uma pós-hiperpolarização. Durante este período, a
partícula de inativação do Na+canal é removido e o K+canais fecham.
Potenciais de ação normalmente iniciam no
segmento inicial do axônio e se propagam para baixo
no axônio e para trás através dos dendritos
uma semana inteira de acionamento de uma calculadora
mecânica). De acordo com esses primeiros Os neurônios têm morfologias complexas,
neurocientistas experimentais e computacionais, o incluindo mandris dendríticos, um corpo celular e,
potencial de ação é gerado da seguinte forma. A tipicamente, uma saída axonal, que se ramifica
despolarização do potencial de membrana aumenta a extensivamente. Em muitas células, todas essas
probabilidade de Na+canais no estado ativado, mas ainda partes do neurônio são capazes de gerar
não desativado. Em um potencial de membrana independentemente potenciais de ação. A atividade
particular, o influxo resultante de Na+íons altera o da maioria dos neurônios é ditada por barragens de
equilíbrio da corrente iônica líquida de fora para dentro potenciais sinápticos gerados a cada momento por
(lembre-se de que a despolarização também aumentará um subconjunto variável de milhares de sinapses que
K+e Cl−correntes, afastando o potencial de membranaEKe atingem os dendritos e o soma da célula. Onde então
ECl). Neste potencial de membrana, conhecido como o potencial de ação é iniciado? Na maioria das células,
limiar do potencial de ação (tipicamente cerca de -55mV), cada potencial de ação é iniciado na porção inicial do
o movimento de Na+íons na célula despolariza o axônio e axônio, conhecida como segmento inicial do axônio
abre mais Na+canais, causando ainda mais (Coombse outros., 1957; Stuarte outros., 1997; Shue
despolarização da membrana; A repetição desse outros., 2007). O segmento inicial do axônio tem o
processo produz um ciclo de retroalimentação rápido e limiar mais baixo para geração de potencial de ação
positivo que aproxima o axônio doEN / D. porque normalmente contém uma densidade
No entanto, mesmo que mais e mais Na+canais estão se moderadamente alta de Na+canais e é um pequeno
tornando ativados, alguns desses canais também estão se compartimento que é facilmente despolarizado pelo
inativando e, portanto, não conduzindo mais Na+ in-rush de Na+íons. Uma vez que um pico é iniciado (p.

II. NEUROCIÊNCIA CELULAR E MOLECULAR

 POTENCIAL DE ACÇÃO 121

dromicamente para baixo do axônio para os terminais
sinápticos, onde causa a liberação do transmissor, bem
como antidrômica de volta através do corpo celular e nos
dendritos das células, onde pode modular os processos
intracelulares.
Períodos refratários impedem a “reverberação”
A capacidade da despolarização para ativar um
potencial de ação varia em função do tempo desde a
última geração de um potencial de ação, devido à
inativação do Na+canais e a ativação de K+canais.
Imediatamente após a geração de um potencial de ação,
outro potencial de ação geralmente não pode ser
gerado, independentemente da quantidade de corrente
injetada no axônio. Este período corresponde ao período
refratário absoluto e em grande parte é mediado pela
inativação do Na+canais. O período refratário relativo
ocorre durante a pós-hiperpolarização do potencial de
ação e segue o período refratário absoluto. O período
refratário relativo é caracterizado por um requisito para
o aumento da injeção de corrente iônica na célula para
gerar outro potencial de ação e resulta da persistência
da saída de K+atual. A implicação prática dos períodos
refratários é que os potenciais de ação não podem
“reverberar” entre o segmento inicial do axônio e os
terminais do axônio.
A velocidade de propagação potencial de ação é
afetada pela mielinização
Os axônios podem ser mielinizados ou não mielinizados. Os
axônios de invertebrados ou pequenos axônios de vertebrados são
tipicamente não mielinizados, enquanto os axônios de vertebrados
maiores são frequentemente mielinizados. Conforme descrito no
Capítulo 4, os axônios sensoriais e motores do sistema nervoso
periférico são mielinizados por células especializadas (células de
Schwann) que formam um envoltório espiral de múltiplas camadas
de mielina ao redor do axônio (Fig. 6.8). Várias células de Schwann
envolvem um axônio ao longo de seu comprimento; entre as
extremidades de sucessivas células de Schwann existem pequenas
lacunas (nós de Ranvier). No sistema nervoso central, um único
oligodendrócito, um tipo especial de célula glial, normalmente
envolve vários processos axonais.
Em axônios não mielinizados, o Na+e K+os canais que
participam da geração do potencial de ação são distribuídos
ao longo do axônio, e o potencial de ação se propaga ao
longo do comprimento do axônio através da despolarização
local de cada pedaço de membrana vizinho, fazendo com
que esse pedaço de membrana também gere um potencial
de ação (Fig. 6.8) . Em axônios mielinizados, no entanto, o
Na+canais estão concentrados nos nós de Ranvier. A
geração de um potencial de ação em cada nó resulta na
despolarização do próximo nó e subsequente geração de
um potencial de ação

UMA B células de Schwann

Direção de propagação
+ 50
Mielina
Axônio
Nó
Vm (mV)

0
2m

Mielina
1 - 20 m
- 60 C
Distância Nó Nó

++++++––––––––++++++ Entrenó
–––––++++++++++––––
300 - 2000 m

1 2 3

FIGURA 6.8Propagação do potencial de ação em axônios não mielinizados e mielinizados. (A) Os potenciais de ação se propagam em axônios não
mielinizados através da despolarização de regiões adjacentes da membrana. No axônio ilustrado, a região 2 está sofrendo despolarização durante a
geração do potencial de ação, enquanto a região 3 já gerou o potencial de ação e agora está hiperpolarizada. O potencial de ação se propagará ainda
mais pela despolarização da região 1. (B) Os axônios mielinizados dos vertebrados têm uma célula de Schwann especializada que os envolve em muitas
voltas espirais. O axônio é exposto ao meio externo nos nós de Ranvier (Nó). (C) Os potenciais de ação em fibras mielinizadas são regenerados nos nodos
de Ranvier, onde há uma alta densidade de Na+canais. Os potenciais de ação são induzidos em cada nó através da influência despolarizante da geração
de um potencial de ação em um nó adjacente, aumentando assim a velocidade de condução.

II. NEUROCIÊNCIA CELULAR E MOLECULAR

122 6. POTENCIAL DE MEMBRANA E POTENCIAL DE AÇÃO
com um atraso entre nós de apenas cerca de 20ms (ver
Capítulo 5), referido como condução saltatória (do latim
saltar, “saltar”). Evidências crescentes indicam que, próximo
aos nódulos de Ranvier e sob a cobertura de mielina, K+Os
canais podem desempenhar um papel na determinação do
potencial de membrana em repouso e na repolarização do
potencial de ação. Uma causa de alguns distúrbios
neurológicos, como a esclerose múltipla e a síndrome de
Guillain-Barré, é a desmielinização dos axônios, resultando
em um bloqueio da condução dos potenciais de ação.
Os canais iônicos são proteínas que atravessam a
membrana com poros cheios de água
A geração de correntes iônicas úteis para a propagação
do potencial de ação requer o movimento de
CAIXA 6.4
CANAIS DE ÍON E DOENÇA
As células não podem sobreviver sem canais iônicos
funcionais. Portanto, não é surpreendente que um
número cada vez maior de doenças esteja associado à
função defeituosa do canal iônico. Existem vários
mecanismos diferentes pelos quais isso pode ocorrer.
1. Mutações na região de codificação dos genes do canal iônico
pode levar ao ganho ou perda da função do canal, qualquer um
dos quais pode ter consequências deletérias. Por exemplo,
mutações que produzem atividade aumentada do Na epitelial+
são responsáveis pela síndrome de Liddle, uma forma
hereditária de hipertensão, enquanto outras mutações na
mesma proteína que causam redução da atividade do canal dão
origem à hipotensão. A doença hereditária mais comum em
caucasianos é também uma mutação do canal iônico. Essa
doença é a fibrose cística (FC), que resulta de mutações no canal
de cloreto epitelial, conhecido como CFTR. A mutação mais
comum, a deleção de uma fenilalanina na posição 508, resulta
em processamento defeituoso da proteína e impede que ela
atinja a membrana superficial. A CFTR regula os fluxos de cloreto
através das membranas das células epiteliais, e essa perda de
atividade da CFTR leva à redução da secreção de fluido no
pulmão, resultando em infecções pulmonares potencialmente
fatais.
2. Mutações na região promotora do gene podem
causar sub ou superexpressão de um determinado canal iônico.
3. Outras doenças resultam de regulação defeituosa de
atividade do canal por constituintes celulares ou extracelulares
II. NEUROCIÊNCIA CELULAR E MOLECULAR
um número significativo de íons através da membrana
em um tempo relativamente curto. A taxa de fluxo iônico
durante a geração de um potencial de ação é muito alta
para ser alcançada por um mecanismo de transporte
ativo e resulta, em vez disso, da abertura de canais
iônicos. Embora a existência de canais iônicos na
membrana tenha sido postulada por décadas, suas
propriedades e estrutura só recentemente se tornaram
conhecidas em detalhes. A poderosa combinação de
técnicas eletrofisiológicas e moleculares aumentou
muito nosso conhecimento das relações estrutura-
função dos canais iônicos (Quadro 6.4).
Várias toxinas neurais foram particularmente úteis no
isolamento inicial de canais iônicos. Por exemplo, três
subunidades (a, b1,b2) do Na dependente de voltagem+
canal foram isolados com o uso de um derivado de uma
toxina de escorpião. Oumasubunidade do Na+canal é um
ligantes. Essa regulação defeituosa pode ser causada por
mutações nos genes que codificam as próprias moléculas
reguladoras ou defeitos nas vias que levam à sua produção.
Algumas formas de diabetes do início da maturidade dos jovens
(MODY) podem ser atribuídas a esse mecanismo. Os canais de
potássio sensíveis ao ATP (K-ATP) desempenham um papel
fundamental na secreção de insulina induzida pela glicose do
pâncreas.bcélulas, e sua regulação defeituosa é responsável por
uma forma de MODY.
4. Autoanticorpos para canalizar proteínas podem causar
doença pela regulação negativa da função do canal - muitas
vezes causando a internalização da própria proteína do canal.
Exemplos bem conhecidos são a miastenia gravis, que resulta de
anticorpos contra os canais de acetilcolina do músculo
esquelético, e a síndrome miastênica de Lambert-Eaton, na qual
os pacientes produzem anticorpos contra o Ca pré-sináptico.2+
canais.
5. Finalmente, vários canais iônicos são secretados por
células como agentes tóxicos. Eles se inserem na membrana
da célula-alvo e formam grandes poros não seletivos,
levando à lise e morte celular. A toxina hemolítica produzida
pela bactériaStaphylococcus aureuse a toxina secretada pelo
protozoárioEntamoeba histolytica, que causa disenteria
amebiana, são exemplos.
Mutações naturais em canais iônicos têm sido
inestimáveis para estudar a relação entre estrutura e
função do canal. Em muitos casos, a análise genética de um
 POTENCIAL DE ACÇÃO
CAIXA 6.4(continuação)
doença levou à clonagem do canal iônico relevante. O primeiro K
+canal a ser identificado (Shaker), por exemplo, veio da clonagem
do gene que fazia a Drosophila tremer quando exposta ao éter.
Da mesma forma, o gene que codifica a subunidade primária de
um canal de potássio cardíaco (KCNQ1) foi identificado por
clonagem posicional em famílias portadoras de mutações que
causaram um distúrbio cardíaco conhecido como síndrome do
QT longo (ver adiante). Por outro lado, o grande número de
estudos sobre a relação entre Na+
estrutura e função do canal tem ajudado muito nossa
compreensão de como as mutações em Na+canais produzem
seus fenótipos clínicos.
Muitas doenças são geneticamente heterogêneas e o
mesmo fenótipo clínico pode ser causado por mutações em
diferentes genes. A síndrome do QT longo é um distúrbio
cardíaco hereditário relativamente raro que causa perda
abrupta de consciência, convulsões e morte súbita por
arritmia ventricular em jovens. Mutações em cinco genes
diferentes, dois tipos de músculo cardíaco K+(HERG, KCNQ1,
KCNE1, KCNE2) e o canal de sódio do músculo cardíaco
(SCN1A), dão origem à síndrome do QT longo. O distúrbio é
caracterizado por um intervalo QT longo no
eletrocardiograma, que reflete o atraso na repolarização do
potencial de ação cardíaco. Como, portanto, poderia ser
esperado, mutações no Na cardíaco+gene do canal que
causa a síndrome do QT longo aumenta o Na+corrente
(reduzindo Na+inativação do canal), enquanto aqueles em
grande glicoproteína com massa molecular de 270 kDa,
enquanto ab1 eb2 subunidades são polipeptídeos menores
de massas moleculares de 39 e 37 kDa, respectivamente
(Fig. 6.9). Oumasubunidade, da qual existem pelo menos
nove isoformas diferentes, é o bloco de construção do poro
cheio de água do canal iônico, enquanto a subunidadeb
subunidades têm algum outro papel, como na regulação ou
estrutura do canal nativo (Catterall, 2000a).
Oumasubunidade do Na+canal contém quatro repetições
internas (Fig. 6.9B). A análise de hidrofobicidade desses
quatro componentes revela que cada um contém seis
domínios hidrofóbicos que podem atravessar a membrana
como umuma-hélice. Destes seis componentes que
atravessam a membrana, o quarto (S4) foi proposto como
crítico para a sensibilidade à voltagem do Na+canais. Gatilho
sensível à voltagem de Na+canais é realizado pela
redistribuição de carga iônica (“carga de porta”) no canal.
Cargas positivas na região S4 podem atuar como sensores
de tensão de tal forma que um aumento
II. NEUROCIÊNCIA CELULAR E MOLECULAR
123
genes de canais de potássio causam perda de função e
reduzem o K+atual.
Mutações em muitos tipos diferentes de canais iônicos
demonstraram causar doenças humanas. Além dos exemplos
listados anteriormente, mutações nos canais de água causam
diabetes insípido nefrogênico; mutações nos canais das junções
comunicantes causam a doença de Charcot-Marie-Tooth (uma
forma de neuropatia periférica) e surdez hereditária; mutações
no músculo esquelético Na+canal causa uma série de distúrbios
conhecidos como paralisias periódicas; mutações no Ca
intracelular2+-canais de liberação causam hipertermia maligna
(uma doença na qual os anestésicos inalatórios desencadeiam
um aumento potencialmente fatal da temperatura corporal); e
mutações em Ca neuronal dependente de voltagem2+
canais causam enxaqueca e ataxia episódica. A lista aumenta
diariamente. Como é o caso de todos os distúrbios de um
único gene, a frequência dessas doenças na população em
geral é muito baixa. No entanto, o conhecimento que eles
forneceram sobre a relação entre a estrutura e a função do
canal iônico e sobre o papel fisiológico dos diferentes canais
iônicos foi inestimável. Como William Harvey disse em 1657
“nem há melhor maneira de promover a prática adequada
da medicina do que dedicar nossas mentes à descoberta da
forma usual da natureza, por uma investigação cuidadosa
das formas mais raras de doença”.
Frances M. Ashcroft
na positividade do interior da célula resulta em uma
mudança conformacional do canal iônico. Em apoio a
esta hipótese, a mutagênese sítio-dirigida da região
S4 do Na+canal para reduzir a carga positiva desta
porção do poro também reduz a sensibilidade da
voltagem de ativação do canal iônico.
Os mecanismos de inativação de canais iônicos foram
analisados com uma combinação de técnicas moleculares e
eletrofisiológicas. A hipótese mais convincente é que a
inativação é alcançada por um bloqueio da boca interna do
poro aquoso. Os canais iônicos são inativados sem
movimento detectável de corrente iônica através da
membrana; assim, a inativação provavelmente não é
controlada diretamente apenas por mudanças no potencial
de membrana. Em vez disso, a inativação é desencadeada
ou facilitada como consequência secundária da ativação. A
mutagênese direcionada ao local ou o uso de anticorpos
mostrou que a parte da molécula entre as regiões III e IV
pode se mover para
124 6. POTENCIAL DE MEMBRANA E POTENCIAL DE AÇÃO

TTX
UMA
ScTX

s–s Extracelular

–
β1 α α β2

ica
íd
lip
a
ad
m
ca
Bi
Intracelular
Canal iônico

B
1
+ NH Extracelular
3

ScTX

– –
– – ––
––

345
12 6
- CO
2

H CO 2-
+ NH
3 P Intracelular

P
P P P
FIGURA 6.9Estrutura do canal de sódio. (A) Corte transversal de um canal de sódio hipotético consistindo de uma única membrana transmembranauma subunidade
em associação com umb1 subunidade e umab2 subunidades. Oumasubunidade tem sítios receptores parauma-toxinas de escorpião (ScTX) e tetrodotoxina (TTX). (B)
Estruturas primárias deumaeb1 subunidades do canal de sódio ilustradas como diagramas de dobramento transmembrana. Cilindros representam provável
transmembranauma-hélices.

bloquear o lado citoplasmático do poro iônico após a Leagues revelou uma notável semelhança com os do axônio
mudança conformacional associada à ativação. gigante da lula e deu origem à suposição de que a
eletrofisiologia dos neurônios no SNC era realmente bastante
simples: quando os potenciais sinápticos trouxeram o potencial
Neurônios do sistema nervoso central
de membrana positivo para o limiar do potencial de ação, os
exibem uma grande variedade de
potenciais de ação foram produzidos através de um aumento
propriedades eletrofisiológicas
de Na+condutância seguido por um aumento em K+condutância,
As primeiras gravações intracelulares de potenciais de ação em como no axônio gigante da lula. A suposição, portanto, era que
neurônios de mamíferos por Sir John Eccles e colaboradores o complicado padrão

II. NEUROCIÊNCIA CELULAR E MOLECULAR

 POTENCIAL DE ACÇÃO
Os termos de atividade gerados pelo cérebro durante os
estados de repouso, sono ou atividade foram provocados como
uma interação do grande número de neurônios presentes no
SNC dos mamíferos. No entanto, gravações intracelulares de
neurônios de invertebrados revelaram que diferentes tipos de
células exibem uma ampla variedade de diferentes
comportamentos eletrofisiológicos, indicando que os neurônios
podem ser significativamente mais complicados do que o
axônio gigante da lula.
A elucidação da eletrofisiologia básica e fisiologia
sináptica de diferentes tipos de neurônios e vias neuronais
dentro do SNC de mamíferos foi facilitada pelaem vitro
técnica de fatias, na qual finas (∼0,5 mm) fatias de cérebro
podem ser mantidas por várias horas. Registros
intracelulares de células identificadas revelaram que
neurônios do sistema nervoso de mamíferos, como os de
redes de invertebrados, podem gerar padrões complexos de
potenciais de ação inteiramente por meio de mecanismos
iônicos intrínsecos e sem interação sináptica com outros
tipos de células. Por exemplo, Rodolfo Llinás e colegas
descobriram que as células de Purkinje do cerebelo podem
gerar trens de alta frequência (> 200Hz) de Na+- e K+
potenciais de ação mediados interrompidos por Ca2+picos
nos dendritos, enquanto um aferente principal desses
neurônios, a célula olivar inferior, pode gerar sequências
rítmicas de amplos potenciais de ação apenas em baixas
frequências. (<15Hz) através de uma interação entre vários
Ca2+, N / D+, e K+condutâncias (Fig. 6.10). Essesem vitro
gravações confirmaram um achado importante obtido com
gravações intracelulares anterioresna Vivo: cada classe
morfologicamente distinta de neurônio no cérebro exibe
características eletrofisiológicas distintas. Assim como as
células piramidais corticais são morfologicamente distintas
das células cerebelares de Purkinje, que são distintas das
células retransmissoras talâmicas, as propriedades
eletrofisiológicas de cada um desses diferentes tipos de
células também são marcadamente distintas (Llinás, 1988).
Embora nenhum esquema de classificação
uniforme tenha sido formulado no qual todos os
diferentes tipos de neurônios do cérebro possam ser
classificados, alguns padrões característicos de
atividade parecem se repetir. A primeira classe geral
de geração de potencial de ação é caracterizada por
aquelas células que geram trens de potenciais de
ação um pico de cada vez. Quanto mais prolongada
for a despolarização dessas células, mais prolongada
será sua descarga. Quanto mais intensamente essas
células forem despolarizadas, maior será a frequência
de geração do potencial de ação. Esse tipo de
comportamento relativamente linear é típico para
neurônios motores do tronco cerebral e da medula
espinhal funcionando na contração muscular.
II. NEUROCIÊNCIA CELULAR E MOLECULAR
125
conhecido como adaptação de frequência de pico. Exemplos de
células que descarregam dessa maneira são as células corticais
e piramidais do hipocampo.
Além dessas células de disparo regulares, muitos
neurônios no sistema nervoso central exibem a propensão
intrínseca de gerar explosões rítmicas de potenciais de ação
(Fig. 6.10). Exemplos de tais neurônios são neurônios de
retransmissão talâmicos, neurônios olivares inferiores e
alguns tipos de células piramidais corticais e hipocampais.
Nessas células, aglomerados de potenciais de ação podem
ocorrer juntos quando a membrana é trazida acima do
limiar de disparo. Esses grupos de potenciais de ação
normalmente são gerados através da ativação de Ca2+
correntes que, por meio de sua cinética mais lenta,
permitem que o potencial de membrana seja despolarizado
por um período suficiente para resultar na geração de uma
explosão regular de Na+- e K+potenciais de ação
dependentes (discutidos na próxima seção).
Ainda outra categoria geral de neurônios no cérebro
compreende células que geram células de duração
relativamente curta. (<1ms) potenciais de ação e podem
descarregar em frequências relativamente altas (>300Hz). Tais
propriedades eletrofisiológicas são frequentemente
encontradas em neurônios que liberam o aminoácido inibitório.
g-ácido aminobutírico (Fig. 6.10), incluindo alguns tipos de
interneurônios no córtex cerebral, tálamo e hipocampo.
Finalmente, a última categoria geral de neurônios consiste
naqueles que geram espontaneamente potenciais de ação em
frequências relativamente lentas (por exemplo, 1-10Hz). Esse
tipo de comportamento eletrofisiológico muitas vezes está
associado a neurônios que liberam transmissores
neuromoduladores, como acetilcolina, norepinefrina,
serotonina e histamina. Os neurônios que liberam essas
substâncias neuromoduladoras muitas vezes inervam amplas
regiões do cérebro e parecem definir o “estado” das diferentes
redes neurais do SNC de maneira semelhante à modulação dos
diferentes órgãos do corpo pelos sistemas nervosos simpático e
parassimpático. .
Cada um desses padrões intrínsecos únicos de
atividade no sistema nervoso é devido à presença de
uma mistura distinta e distribuição de diferentes
correntes iônicas nas células. Como nos estudos
clássicos do axônio gigante da lula, essas diferentes
correntes iônicas foram caracterizadas, pelo menos em
parte, com voltage-clamp e técnicas farmacológicas, e as
propriedades eletrofisiológicas básicas foram replicadas
com simulações computacionais (Figs. 6.7 e 6.12).
Neurônios Têm Múltiplas Condutâncias Ativas
A busca pela base eletrofisiológica das propriedades
intrínsecas variáveis de diferentes tipos de neurônios
de vertebrados e invertebrados revelou uma grande
variedade de correntes iônicas. Cada tipo de iônico
126 6. POTENCIAL DE MEMBRANA E POTENCIAL DE AÇÃO

Célula piramidal cortical Célula Cerebelar de Purkinje

UMA B C

Disparo regular Disparo rápido

200 ms
Córtex cerebral
Hipocampo
Estriado
Cerebelo

tálamo
Olfativo
lâmpada
Retransmissão
MHb
nRT

SN-VTA

Célula de relé talâmica Célula habenular medial

D E F
Modo de rajada Modo de transferência

- 65
25 mV
- 75
50 ms 1 segundo

FIGURA 6.10 Neurônios no cérebro de mamíferos exibem propriedades eletrofisiológicas amplamente variadas. (A) Injeção intracelular de um
pulso de corrente despolarizante em uma célula piramidal cortical resulta em um trem de potenciais de ação que diminuem a frequência. Esse padrão de atividade é
conhecido como “disparo regular”. (B) Algumas células corticais geraram rajadas de três ou mais potenciais de ação, mesmo quando despolarizadas apenas por um
curto período de tempo. (C) As células de Purkinje cerebelares geram trens de alta frequência de potenciais de ação em seus corpos celulares que são interrompidos
pela geração de Ca2+picos em seus dendritos. Essas células também podem gerar “potenciais de platô” a partir da ativação persistente de Na+condutâncias (pontas
de seta). As células retransmissoras talâmicas podem gerar potenciais de ação como rajadas (D) ou como trens tônicos de potenciais de ação (E) devido à presença de
um grande Ca de baixo limiar2+atual. (F) Células habenulares mediais geram potenciais de ação em uma taxa constante e lenta de forma “marca-passo”.

II. NEUROCIÊNCIA CELULAR E MOLECULAR


A corrente é caracterizada por várias características: (1) o tipo
de íons conduzidos pelos canais iônicos subjacentes (por
exemplo, Na+, K+, Ca2+, Cl−, ou catiões mistos), (2) a sua voltagem
e dependência do tempo, e (3) a sua sensibilidade aos segundos
mensageiros. Em neurônios de vertebrados, duas moléculas
distintas de Na+correntes foram identificadas e seis diferentes
Ca2+correntes e mais de sete K distintos+correntes são
conhecidas (Fig. 6.11). Este é um número mínimo, pois essas
correntes são formadas a partir de um conjunto muito maior de
subunidades de canal. As seções a seguir revisam brevemente
essas classes de correntes iônicas e seus canais iônicos,
relacionando-as com os diferentes padrões de comportamento
mencionados anteriormente para neurônios no SNC de
mamíferos.
N / D+As correntes são transitórias e
persistentes
A despolarização de muitos tipos diferentes de
neurônios de vertebrados resulta não apenas na
ativação do Na+atual (euNat) geração de potencial de
ação subjacente, mas também na ativação rápida de
um Na+corrente que não inativa e, portanto, é
conhecida como Na “persistente”+atual (euSesta). O
limiar para ativação do Na persistente+
a corrente é tipicamente cerca de -65mV; isto é, abaixo do
limiar para a geração de potenciais de ação. Essa
propriedade dá a essa corrente a interessante capacidade
de aumentar ou facilitar a resposta do neurônio a entradas
despolarizantes, ainda que subliminares. Por exemplo,
eventos sinápticos que despolarizam a célula irão ativar eu
Sesta, resultando em um influxo extra de carga positiva e
Correntes internas Correntes de saída
- 10
- 100
Voltagem
N / D+
euNat
euK
euSesta
euC
eueu Ca2+
euT
euUMA
euN euM
- 10
- 100
euh
N / D+/K+
FIGURA 6.11 Dependência de tensão e cinética de diferentes
correntes no cérebro dos mamíferos. A despolarização do potencial de
membrana de -100 a -10mV resulta na ativação de correntes que entram
ou saem dos neurônios.
II. NEUROCIÊNCIA CELULAR E MOLECULAR
POTENCIAL DE ACÇÃO 127
portanto, uma despolarização maior do que ocorreria de
outra forma. Da mesma forma, hiperpolarizações podem
resultar na desativação deeuSesta, novamente resultando em
hiperpolarizações maiores do que ocorreria de outra forma.
Desta forma, o Na persistente+A corrente pode
desempenhar uma importante função reguladora no
controle da responsividade funcional do neurônio às
entradas sinápticas e pode contribuir para o acoplamento
dinâmico dos dendritos ao soma.
Ativação persistente deeuSestatambém pode contribuir para
outra característica eletrofisiológica dos neurônios: a geração
de potenciais de platô. Um potencial de platô refere-se à
capacidade de muitos tipos diferentes de neurônios de gerar,
por meio de mecanismos iônicos intrínsecos, uma
despolarização prolongada (de dezenas de milissegundos a
segundos) e uma descarga de potencial de ação em resposta a
uma despolarização de curta duração (Fig. 6.10C) . Pode-se
perguntar se esses potenciais de platô contribuem para o
disparo persistente em neurônios durante a execução de
tarefas de memória de trabalho, onde grupos de neurônios
precisam reter informações por breves (segundos) períodos de
tempo.
K+As correntes variam em sua sensibilidade de
tensão e cinética
As correntes de potássio que contribuem para as
propriedades eletrofisiológicas dos neurônios são
numerosas e exibem uma ampla gama de propriedades
cinéticas e dependentes de voltagem.e outros., 1999). Talvez
o K mais simples+atual é aquela caracterizada por Hodgkin e
Huxley: este K+atual,euK, ativa-se rapidamente na
despolarização e não se inativa (Fig. 6.11). Outros K+as
correntes se ativam com a despolarização, mas também se
inativam com o tempo. Por exemplo, a rápida ativação e
inativação deeuUMAdar a esta corrente uma aparência
transitória (Fig. 6.11), eeuUMAacredita-se ser importante no
K+ controle da taxa de geração de potencial de ação,
particularmente em baixas frequências (Fig. 6.12). Como o
Na+canal,euUMAos canais são inativados pelo tamponamento
da boca interna do poro através do movimento de uma
partícula de inativação.
Outra ampla classe de K+canais consiste naqueles que
são sensíveis a mudanças na concentração intracelular
de Ca2+. Estes K+correntes coletivamente são referidas
comoeuKCa(Fig. 6.11). Ainda outro K+canais não são
ativados apenas pela voltagem, mas também são
modulados pela ativação de vários receptores de
neurotransmissores moduladores (p.euM; Fig. 6.11).
Entre esses exemplos clássicos de K+correntes são uma
variedade de outros tipos que não foram totalmente
caracterizados, incluindo K+correntes que variam entre si
em sua sensibilidade de voltagem, cinética e resposta a
vários segundos mensageiros.
128 6. POTENCIAL DE MEMBRANA E POTENCIAL DE AÇÃO

B Repolarização aprimorada C Disparo retardado

- 70mV

+ euC + euUMA

DDiminuição da resposta à despolarização UMA E Taxa de disparo lenta

euN / D+euK

Pós-hiperpolarização

euN / D

+ euM
+ euAHP
30 ms euK

F Disparo rápido G Sem estouro

- 85mV - 60mV

despolarizar
+ eu
T
(Inativa I T)
+ euT

FIGURA 6.12Simulação dos efeitos da adição de várias correntes iônicas ao padrão de atividade gerado por neurônios no SNC de mamíferos. (A) A
resposta ao impulso repetitivo do modelo clássico de Hodgkin-Huxley (registros de tensão acima, traços de corrente abaixo). Com apenaseuN / DeeuK, o
neurônio gera um trem de cinco potenciais de ação em resposta à despolarização. Adição deeuC(B) aumenta a repolarização do potencial de ação. Adição
deeuUMA(C) retarda o início da geração do potencial de ação. Adição deeuM(D) diminui a capacidade da célula de gerar um trem de potenciais de ação.
Adição deeuAHP(E) diminui a taxa de disparo e gera uma pós-hiperpolarização lenta. Finalmente, a adição do transiente Ca2+atualeuTresulta em dois
estados de disparo do potencial de ação: (F) disparo em rajada em -85mV e (G) disparo tônico em -60mV. De Huguenard e McCormick (1994).

Estudos biológicos moleculares de K sensível à voltagem+
canais, feito pela primeira vez emDrosophilae posteriormente
em mamíferos, revelaram a presença de um grande número de
genes que geram K+canais. O K dependente de voltagem+
subunidades de canal estão contidas em nove subfamílias
distintas: Kv1-9 (revisado em Coetzeee outros., 1999). Esses
genes geram uma grande variedade de K+
canais, não apenas devido ao grande número de genes
envolvidos, mas também devido ao splicing alternativo de
RNA, duplicação de genes e outros mecanismos pós-
traducionais. Expressão funcional de diferentes K+revela
notável variação na taxa de inativação, de modo que alguns
são rapidamente inativados (como corrente A), enquanto
outros inativam mais lentamente e, finalmente, alguns K+
canais não são desativados, comoeuK.
Uma das maiores subfamílias de K+canais são aqueles que dão
origem ao potencial de membrana em repouso, os chamados
“canais de vazamento”. Curiosamente, esses canais parecem ser
abertos por anestésicos gasosos, indicando que a
hiperpolarização dos neurônios centrais é um componente
importante da anestesia geral. Agora está claro que cada tipo
de neurônio no sistema nervoso contém um conjunto único de
K funcionais sensíveis à voltagem.+canais, selecionados,
modificados e colocados em locais espaciais particulares na
célula de uma maneira que facilita o papel exclusivo desse tipo
de célula no processamento neuronal.
Uma corrente adicional que também regula a capacidade
de resposta dos neurônios às entradas despolarizantes é a
K, sensível à voltagem.+corrente conhecida como corrente M
(Figs. 6.11 e 6.12D). Ao investigar o mecanismo iônico

II. NEUROCIÊNCIA CELULAR E MOLECULAR

 POTENCIAL DE ACÇÃO
anismos pelos quais a liberação de acetilcolina de neurônios
pré-ganglionares no cérebro resulta em mudanças
prolongadas na excitabilidade dos neurônios dos gânglios
simpáticos, Brown e Adams (1980) descobriram um único K+
corrente que se liga lentamente (mais de dezenas de
milissegundos) com a despolarização do neurônio (Fig.
6.12D). A ativação lenta deste K+A corrente resulta em uma
diminuição na capacidade de resposta da célula à
despolarização e, portanto, regula como a célula responde à
excitação. Este K+atual, comoeuahp, é reduzido pela ativação
de uma ampla variedade de receptores, incluindo os
receptores muscarínicos, pelos quais é nomeado. Redução
deeuMresulta em um aumento acentuado na capacidade de
resposta da célula afetada às entradas despolarizantes e
novamente pode contribuir para os mecanismos pelos quais
os sistemas neuromoduladores controlam o estado de
atividade nas redes corticais e hipocampais (revisado em
McCormick, 1992).
Ca2+Correntes Controlam Propriedades
Eletrofisiológicas e Ca2+-Sistemas de Segundo
Mensageiro Dependentes
Canais iônicos que conduzem Ca2+estão presentes em
todos os neurônios. Esses canais são especiais porque
cumprem duas funções importantes. Primeiro, Ca2+os canais
estão presentes em todas as partes do neurônio (dendritos,
soma, terminais sinápticos) e contribuem muito para as
propriedades eletrofisiológicas desses processos. Segundo,
Ca2+canais são únicos em que Ca2+é um importante segundo
mensageiro nos neurônios, e a entrada de Ca2+na célula
pode afetar inúmeras funções fisiológicas, incluindo
liberação de neurotransmissores, plasticidade sináptica,
crescimento de neuritos durante o desenvolvimento e até
mesmo expressão gênica. Com base em sua sensibilidade à
voltagem, sua cinética de ativação e inativação e sua
capacidade de ser bloqueado por vários agentes
farmacológicos, o Ca2+correntes podem ser separadas em
pelo menos seis categorias separadas, três das quais são eu
T(“transitório”),eueu(“longa duração”), eeuN(“nenhum”),
ilustrado na Fig. 6.11A. Um quarto,euP, é encontrado nas
células de Purkinje do cerebelo, bem como em muitos tipos
diferentes de células do SNC. Estes Ca2+canais são formados
a partir de pelo menos 10umasubunidades, bem como uma
variedade debegsubunidades, indicando que há um número
ainda maior de Ca2+correntes ainda a serem caracterizadas.
Os neurônios possuem vários subtipos de
Ca de alto limiar2+Correntes
Ca ativado por alta tensão2+canais são ativados em
potenciais de membrana positivos a aproximadamente
II. NEUROCIÊNCIA CELULAR E MOLECULAR
129
− 40mV e incluem as correnteseueu,euN, eeuP. As
correntes de cálcio do tipo L exibem um alto limiar para
ativação (cerca de -10mV) e dão origem a correntes
iônicas bastante persistentes ou de longa duração (Fig.
6.11A). Dihidropiridinas, Ca2+antagonistas de canal, são
clinicamente úteis por seus efeitos no coração e no
músculo liso vascular (por exemplo, para o tratamento
de arritmias, angina e enxaquecas) e bloqueiam
seletivamente o Ca do tipo L2+canais. Em contraste com
eueu,euNnão é bloqueado por diidropiridinas: é
bloqueado seletivamente por uma toxina encontrada em
conchas de cone do Pacífico (C-conotoxina-GVIA). N-tipo
Ca2+os canais têm um limiar de ativação de cerca de -20
mV, inativam com a despolarização mantida e são
modulados por uma variedade de neurotransmissores.
Em alguns tipos de células,euNtem um papel no Ca2+
liberação dependente de neurotransmissores nos
terminais pré-sinápticos. O canal de cálcio do tipo P é
distinto dos tipos N e L, pois não é bloqueado por
diidropiridinas ouC-conotoxina-GVIA, mas é bloqueado
por uma toxina (C-agatoxina-IVA) presente no veneno da
aranha teia de funil. Este tipo de canal de cálcio é ativado
em limiares relativamente altos e não inativa. Prevalente
em células de Purkinje, bem como em outros tipos de
células, como mencionado anteriormente, o tipo P Ca2+
canal participa da geração de Ca dendrítico2+picos, que
podem modular fortemente o padrão de disparo do
neurônio em que reside (Fig. 6.10C; Llinás, 1988).
Coletivamente, Ca ativado por alto limiar2+Os canais
contribuem para a geração de potenciais de ação em
neurônios de mamíferos. A ativação do Ca2+correntes
aumenta um pouco a parte despolarizante do potencial
de ação, mas, mais importante, esses canais permitem
Ca2+para entrar na célula, o que tem como consequência
secundária a ativação de vários Ca2+-K ativado+correntes
e proteínas quinases (ver Capítulo 10). Como
mencionado anteriormente, a ativação desses K+
correntes modifica o padrão de potenciais de ação
gerados na célula (Figs. 6.10 e 6.12).
Alto limiar Ca2+canais são semelhantes ao Na+
canal na medida em que são compostos por uma central
uma1 subunidade que forma o poro aquoso e várias
subunidades reguladoras ou auxiliares. Como no Na+
canal, a estrutura primária douma1 subunidade do Ca2+O
canal consiste em quatro domínios homólogos (I-IV),
cada um contendo seis regiões (S1-S6) que podem gerar
uma-hélices. Genes para pelo menos 10 Ca diferentes2+
canalumasubunidades foram clonadas e estão
separadas em três subfamílias (Cav1, Cav2 e Cav3). As
propriedades dos produtos desses genes indicam queeu
euprovavelmente corresponde à subfamília Cav1,
enquantoeuNcorresponde a Cav2.2 eeuT
é formado a partir da subfamília Cav3 (ver Catterall,
2000b).
130 6. POTENCIAL DE MEMBRANA E POTENCIAL DE AÇÃO

Baixo Limiar Ca2+Correntes Geram Explosões de sono, o potencial de membrana desses neurônios
Potenciais de Ação retransmissores é relativamente hiperpolarizado,
resultando na remoção da inativação (desinativação) do Ca
Baixo limiar Ca2+correntes (Fig. 6.11A) frequentemente de baixo limiar2+atual. Essa desativação permite que essas
participam da geração de explosões rítmicas de células gerem espontaneamente Ca de baixo limiar2+picos e
potenciais de ação (Figs. 6.10 e 6.12). O baixo limiar Ca2+A rajadas de dois a cinco potenciais de ação (Fig. 6.13). O
corrente é caracterizada por um limiar para ativação de grande número de células de retransmissão talâmicas que
cerca de -65mV, que está abaixo do limiar para geração estouram durante o sono, em parte, dá origem à atividade
de Na típico+-K+potenciais de ação dependentes (-55mV). sincronizada espontânea que os primeiros pesquisadores
Essa corrente se inativa com a despolarização mantida. ficaram tão surpresos ao encontrar durante as gravações
Por causa dessas propriedades, o papel do Ca de baixo dos cérebros de animais adormecidos. Foi até mesmo
limiar2+correntes difere marcadamente daquela do alto possível manter intacto um dos ritmos cerebrais
limiar Ca2+correntes. Através da ativação e inativação do relacionados ao sono (ondas de fuso) em fatias de tecido
baixo limiar de Ca2+corrente, os neurônios podem gerar talâmico mantidasem vitro, devido à geração desse ritmo
Ca lento (cerca de 100ms)2+picos, que podem resultar, pela interação de uma rede local de células talâmicas e suas
devido à sua duração prolongada, na geração de uma propriedades eletrofisiológicas.
“explosão” de alta frequência de Na de curta duração+-K+ A transição para a vigília ou o período de sono em que os
potenciais de ação (Fig. 6.10). sonhos são predominantes (sono com movimentos oculares
rápidos) está associada a uma despolarização mantida das
No cérebro dos mamíferos, esse padrão é especialmente bem células retransmissoras talâmicas para potenciais de membrana
exemplificado pela atividade dos neurônios de retransmissão que variam de cerca de -60 a -55mV. O baixo limiar Ca2+a
talâmicos; no sistema visual, esses neurônios recebem informações corrente é inativada e, portanto, as descargas de ruptura são
diretas da retina e transmitem essas informações ao córtex visual. abolidas. Desta forma, as propriedades de uma única corrente
Durante os períodos de ondas lentas iônica (euT) ajudam a explicar em parte as mudanças notáveis

UMA
Modo oscilatório Modo tônico (pico único) Modo oscilatório

Despolarizando
injeção de corrente

- 58mV

- 65mV

C 2 segundos

B N / D+/K+
C
potenciais de ação

Eh
eu Tin

Ca2+
eu
hd at
euTativar

es iva

Espigão
- 65mV 20 mV
at r
iva
r

200 ms
ar
tiv
ha
eu Marcapasso
potencial
Remoção de
euT inativação

FIGURA 6.13 Dois padrões diferentes de atividade gerados no mesmo neurônio, dependendo do potencial de membrana. (A) O neurônio talâmico
gera espontaneamente explosões rítmicas de potenciais de ação devido à interação do Ca2+atualeuTe a corrente “marca-passo” interna euh. A
despolarização do neurônio altera o modo de disparo de disparo de explosão rítmica para geração de potencial de ação tônico em que os picos são
gerados um de cada vez. A remoção dessa despolarização restabelece o disparo de explosão rítmica. Essa transição da explosão rítmica para a atividade
tônica é semelhante à que ocorre na transição do sono para a vigília. (B) Expansão do detalhe do disparo de explosão rítmica. (C) Expansão do detalhe da
queima tônica. De McCormick e Pape (1990).

II. NEUROCIÊNCIA CELULAR E MOLECULAR

 POTENCIAL DE ACÇÃO
na atividade cerebral que ocorre na transição do sono
para a vigília (Fig. 6.13).
As correntes iônicas ativadas por hiperpolarização
estão envolvidas na atividade rítmica
Na maioria dos tipos de neurônios, a hiperpolarização
negativa a aproximadamente -60mV ativa uma corrente iônica,
conhecida comoeuh, que conduz tanto Na+e K+íons (Fig. 6.11).
Essa corrente normalmente tem uma cinética muito lenta,
ligando com uma constante de tempo da ordem de dezenas de
milissegundos a segundos. Como os canais subjacentes a essa
corrente permitem a passagem de Na+e K+íons, o potencial de
reversão deeuhé tipicamente sobre
− 35mV—entreEN / DeEK. Como essa corrente é ativada
por hiperpolarização abaixo de aproximadamente
− 60mV, é tipicamente dominado pelo movimento para
dentro do Na+íons e, portanto, despolariza. Para que
propósito os neurônios poderiam usar uma corrente
despolarizante que se ativa quando a célula é
hiperpolarizada? Uma pista vem das células cardíacas em
que essa corrente, conhecida comoeufpara “engraçado”, é
importante para determinar a frequência cardíaca. Ativação
deeufresulta em uma despolarização lenta do potencial de
membrana entre potenciais de ação cardíacos adjacentes.
Quanto mais issoeufé ativado, mais rápido a membrana se
despolariza entre os batimentos e, portanto, mais cedo o
limiar para o próximo potencial de ação é atingido e o
próximo batimento é gerado. Desta forma, a amplitude, ou
sensibilidade à voltagem, deeufpode modificar a frequência
cardíaca. Curiosamente, a sensibilidadeeufa voltagem é
ajustada pela liberação de noradrenalina e acetilcolina; a
ativação dos adrenoceptores pela noradrenalina aumentaeu
fe, portanto, aumenta a frequência cardíaca, enquanto a
ativação dos receptores muscarínicos diminuieuf,
diminuindo assim a frequência cardíaca (ver DiFrancesco,
2005). Esse ajuste contínuo deeufresulta de um arranjo
push-pull entreb-receptores colinérgicos adrenérgicos e
muscarínicos e é mediada pelo ajuste dos níveis
intracelulares de AMP cíclico. De fato, a recente clonagem
de canais h revela que sua estrutura é semelhante à dos
canais cíclicos controlados por nucleotídeos.
Poderiaeuhdesempenham um papel em neurônios semelhante ao deeuf
no coração? Possivelmente. As oscilações rítmicas sincronizadas
no potencial de membrana de um grande número de
neurônios, em alguns aspectos semelhantes às do coração, são
características do cérebro dos mamíferos. As oscilações desse
tipo são particularmente prevalentes em neurônios de
retransmissão talâmicos durante alguns períodos de sono,
como mencionado anteriormente. Os registros intracelulares
desses neurônios talâmicos revelam que eles geralmente
geram “explosões” rítmicas de potenciais de ação mediados
pela ativação de um pico lento que é gerado através da ativação
do baixo limiar, ou transiente, Ca2+atual,
II. NEUROCIÊNCIA CELULAR E MOLECULAR
131
euT(Fig. 6.13). Entre a ocorrência de cada baixo limiar Ca
2+spike é um potencial de membrana de despolarização
lenta gerado pela ativação da mistura de Na+-K+atualeuh,
como comeufno coração. A amplitude, ou sensibilidade
de voltagem, deeuhajusta a taxa de oscilação das células
talâmicas e, como no coração, essa sensibilidade é
ajustada pela liberação de neurotransmissores
moduladores. De certa forma, os neurônios talâmicos
estão “batendo” de maneira semelhante à do coração.
Resumo
Um potencial de ação é gerado pelo influxo rápido de Na+
íons seguidos por um efluxo ligeiramente mais lento de K+
íons. Embora a geração de um potencial de ação não
interrompa os gradientes de concentração desses íons
através da membrana, o movimento da carga é suficiente
para gerar um grande e breve desvio no potencial de
membrana. Os potenciais de ação normalmente são
iniciados no segmento inicial do axônio e a propagação do
potencial de ação ao longo do axônio permite a
comunicação da saída da célula para suas sinapses
distantes. Os neurônios possuem muitos tipos diferentes de
canais iônicos em suas membranas, permitindo que
padrões complexos de potenciais de ação sejam gerados e
computações sinápticas complexas ocorram dentro de
neurônios únicos.
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David A. McCormick