UNIVERSIDADE FEDERAL DO PARAN

PRISCILA SCHULTZ MLLER

MICROENCAPSULAO DO LEO ESSENCIAL DE LARANJA

CURITIBA 2011

PRISCILA SCHULTZ MLLER

MICROENCAPSULAO DO LEO ESSENCIAL DE LARANJA

Dissertao apresentada ao Programa de Ps Graduao em Tecnologia de Alimentos do Setor de Tecnologia da Universidade Federal do Paran, como requisito parcial obteno do ttulo de Mestre em Tecnologia de Alimentos. Orientadora: Prof. Dra. Agnes de Paula Scheer Co-orientadora: Prof. Dra. Snia Faria Zawadzki .

CURITIBA 2011

Mller, Priscila Schultz Microencapsulao de leo essencial de laranja / Priscila Schultz Mller. Curitiba, 2011. 99 f. : il.; graf., tab. Dissertao (mestrado) Universidade Federal do Paran, Setor de Tecnologia, Programa de Ps-Graduao em Tecnologia de Alimentos. Orientadora: Agnes de Paula Scheer Co-orientadora: Snia Faria Zawadzki 1. Essncias e leos essenciais - Laranja. 2. Secagem em spray. 3. Microencapsulao. I. Scheer, Agnes de Paula. II. Zawadzki, Snia Faria. III. Ttulo. CDD 660.28426

Aos meus pais Hellmuth e Clia, ao meu irmo Guilherme, ao meu amor Gustavo. Por estarem sempre ao meu lado, me incentivando e apoiando... Com amor Dedico.

AGRADECIMENTOS

Deus por estar sempre presente em minha vida, e tornar tudo possvel. Aos meus pais Hellmuth e Clia que, com muito carinho, dedicao e apoio, no mediram esforos para que eu chegasse at esta etapa de minha vida, por me incentivarem com muito amor para que meus desejos e planos se realizassem e por sempre terem acreditado em mim. Ao meu irmo Guilherme, pelo carinho, apoio, incentivo e por tantos momentos compartilhados juntos. Ao Gustavo pelo amor, carinho, pacincia, companheirismo, por sempre estar me incentivando e ajudando. minha orientadora professora Dr Agnes de Paula Scheer pela dedicao, suporte e oportunidade de crescimento pessoal e profissional. minha co-orientadora professora Dr Snia Faria Zawadzki pelas trocas de idias, pacincia, grande colaborao no desenvolvimento deste trabalho. A Llian Cocco pela amizade, pelo apoio e pela enorme contribuio com sugestes relevantes no desenvolvimento deste trabalho. A Mitsuco pelas sugestes nas anlises junto ao Laboratrio de Anlise de Combustveis Automotivos LACAUTets. A Rosngela pela ajuda e pacincia durante as anlises no microscpio eletrnico junto ao Centro de Microscopia Eletrnica da UFPR. A prof. Dra. Maria Rita por disponibilizar o spray dryer e ao Clayton pelo suporte e auxlio no incio do trabalho junto ao Laboratrio de Biopolmeros BIOPOL. Ao prof. Dr. Marco Aurlio por disponibilizar o DSC e o TG e ao doutorando Rafael pelo apoio e sugestes nas anlises trmicas, junto a Universidade Positivo. Elisiane e ao Rodrigo pela ajuda nas anlises no Laboratrio de Minerais e Rochas LAMIR. Ao estudante de graduao Caio Fernandez Cordeiro e a estagiria do EMULTEC (Laboratrio experimentais. A colega Grece (Labpol Laboratrio de polmeros sintticos) pela ateno e ensinamentos sobre coacervao. de Emulses) Caroline pela ajuda nos trabalhos

Aos fornecedores das matrias-primas para realizao deste trabalho: Cutrale; National Starch; Cargill e Nutrimental. Aos demais colegas da POSALIM pela amizade e companhia ao longo do desenvolvimento do trabalho. As grandes amizades que sempre me acompanham. Em especial, a Tatiane Akemi J, que me incentivou a fazer o mestrado. Aos professores Dr. Marcos Lcio Corazza e Dr. Itamar Francisco Andreazza por aceitarem participar da banca de qualificao e por avaliarem o trabalho contribuindo para melhor-lo. Aos professores Dr. Roberto Pontarolo e Dra. Lys Mary Bileski Cndido pela participao na banca de defesa com contribuies e sugestes para o trabalho. CAPES pelo suporte financeiro. A todos que de maneira direta ou indireta me auxiliaram neste trabalho, muito obrigada.

A maior recompensa do nosso trabalho no o que pagam por ele, mas aquilo em que ele nos transforma. John Ruskin

"Melhor que tudo aprender; o dinheiro pode ser perdido ou roubado, a sade e a fora podem faltar, mas aquilo que voc coloca na sua mente ser para sempre seu. Louis L'amou

MLLER, P.S.

RESUMO

RESUMO

A grande produo de laranjas no mundo e particularmente no Brasil faz com que os subprodutos do seu processamento tenham alto valor comercial. Dentre eles, tem-se, por exemplo, o leo de casca de laranja obtido por prensagem a frio, que constitui matria prima de grande valor na indstria de aromatizantes, podendo ser utilizado para reforar o aroma de laranja em sucos. O leo essencial de laranja apresenta alta volatilidade e sensibilidade oxidao pelo efeito de temperatura, luz e oxignio. A tcnica de microencapsulao permite o aumento do tempo de vida til de compostos volteis presentes durante o processamento e a estocagem de produtos alimentcios e cosmticos. No presente trabalho foi estudada a viabilidade do uso da microencapsulao de leo essencial de laranja atravs de dois mtodos. Um deles pela secagem por spray dryer, utilizando a maltodextrina e amido modificado e o segundo pelo mtodo de microencapsulao por coacervao, o qual foi realizado com alginato de sdio. Pelas anlises morfolgicas as micropartculas de OE com maltodextrina e amido modificado obtidas por spray dryer e com alginato de sdio obtidas por coacervao apresentaram superfcie lisa e homognea. As de maltodextrina e amido modificado por spray dryer apresentaram granulometria mdia de 1,02 m e as de alginato de sdio por coacervao de 780m. Pela anlise termogravimtrica verificou-se um aumento da estabilidade termo-oxidativa do leo pela presena da microcpsula polimrica. Pela anlise calorimtrica exploratria diferencial (DSC) observou-se um evento endotrmico por volta de 183C para o leo essencial de laranja puro. Pela difrao de raios-X observou-se que as amostras no cristalizaram. A determinao do teor do leo essencial de laranja microencapsulado foi obtida por mtodo adaptado por extrao em headspace acoplada a cromatgrafo a gs. As eficincias de encapsulao foram superiores a 99 % para ambos os mtodos. As micropartculas com amido modificado e maltodextrina, mesmo aps 10 meses armazenados, mantiveram as concentraes de leo essencial estveis. As microcpsulas de alginato de sdio coacervadas e reticuladas com CaCl2 na concentrao de 1% e secas em estufa aps 5 meses mantiveram o teor de leo essencial retido. Palavras-chave: coacervao simples, spray drying, maltodextrina, amido

modificado, alginato de sdio, estabilidade termo-oxidativa, micropartculas.

MLLER, P.S.

ABSTRACT

ABSTRACT

The great orange production worldwide turns the byproducts of the orange processing industry to be of high commercial value. One of the greatest technological hurdles regarding the orange essential oil is its preservation during processing and storage, since the majority of its components are sensitive to oxidation due to temperature, light and oxygen, besides being highly volatile. Microencapsulation allows the protection of volatile compounds during processing and storage of foods and cosmetics. In this study, the orange essential oil was micro-encapsulated by spray drying, using maltodextrin and modified starch as carriers, and also by coacervation, using sodium alginate. The influence of the different methods and different carriers on the microparticles characteristics was investigated. Results show that the microparticles presented a flat and homogeneous surface. The microparticles of spray drying process using maltodextrin and modified starch as carriers showed an average size of 1.02 m and the microparticles by coacervation, using sodium alginate, showed an average size of 780 m. An increase in the thermo-oxidative oil stability was observed. By the Differential Scanning Calorimetry curve was observed a thermal endotermic event about 183C for the essential oil. For quantifying the micro-encapsulated orange essential oil, a method based on headspace extraction coupled with a gas chromatograph was used. The encapsulation efficiencies were above 99% for both methods and the stability of the oil remained the same after ten and five months for the microparticles of spray drying process using maltodextrin and modified starch and microparticles by coacervation using sodium alginate and CaCl2 1 %, respectively. Keywords: simple coacervation, spray drying, maltodextrin, modified starch, sodium alginate, thermo-oxidative stability, microparticles.

MLLER, P.S.

LISTA DE ILUSTRAES

LISTA DE ILUSTRAES

Figura 1- Estrutura do d-limoneno (FERRARINI, 2008). ........................................... 23 Figura 2 - Decomposio do d-limoneno (FILHO, 1999). .......................................... 23 Figura 3 Representao esquemtica da estrutura dos diferentes tipos de micropartculas (SILVA et al., 2003). ......................................................................... 25 Figura 4 Representao esquemtica das etapas do processo de microencapsulao por coacervao (SUAVE et al.,2006). ...................................... 31 Figura 5 - Reao de obteno do amido de milho modificado com octenilsuccinato. .................................................................................................................................. 34 Figura 6 - Estrutura qumica do alginato de sdio (HORST, 2009). .......................... 36 Figura 7 - Representao da estrutura dos meros dos cidos -D-manurnico (a), L-gulurnico (b) e do polmero natural alginato (c) (ERTESVG; VALLA, 1998). ..... 36 Figura 8 - Modelo caixa de ovo para a formao do gel de alginato com ons clcio (ERTESVG; VALLA, 1998). ................................................................................... 37 Figura 9 - Esquema da instalao de secagem por atomizao (VALDUGA et al.,2003). ................................................................................................................... 45 Figura 10 - Diagrama do sistema de preparao de microcpsulas (YOO et al., 2006). ........................................................................................................................ 46 Figura 11 Aspectos morfolgicos, obtidos por MEV, das microesferas com leo essencial de laranja, de amido modificado e maltodextrina por spray drying (amostra A1), (a) 600x e (b) 1500x........................................................................................... 53 Figura 12 Aspectos morfolgicos, obtidos por MEV, das micropartculas de alginato de sdio obtidas por spray dryer (amostra A2) (a) 250X, (b) 800X, (c) 1500X. ......... 54 Figura 13 Aspectos morfolgicos, obtidos por MEV, das micropartculas de alginato de sdio obtidas por atomizao, 1500X (amostra B). .............................................. 54 Figura 14- Aspectos morfolgicos, obtidos por MEV, das microcpsulas de alginato de sdio com leo essencial de laranja pelo processo de coacervao (a) com 0,5% (amostra C1), (b) 1% de CaCl2 (amostra C2). .......................................................... 55 Figura 15 Aspectos morfolgicos, obtidos por MEV, das microcpsulas de alginato de sdio com leo essencial de laranja pelo processo de coacervao com 1% CaCl2 e secas em estufa a 30C (amostra C3) (a) 142x, (b) 110x . ......................... 56 Figura 16 Aspectos morfolgicos, obtidos por MEV, da face interna das microcpsulas do leo essencial de laranja com alginato de sdio, por coacervao com 1% CaCl2 e secas em estufa a 30C (amostra C3), (a) 1500x e (b) 3000x....... 57 Figura 17 Aspectos morfolgicos, obtidos por MEV, das micropartculas de alginato de sdio secas no liofilizador (amostra C4). .............................................................. 57 Figura 18 Aspectos morfolgicos, obtidos por MEV, das micropartculas de alginato de sdio secas no dessecador a vcuo (amostra C5) (a) 600X, (b) 800X. ............... 58 Figura 19 Aspectos morfolgicos, obtidos por MEV, da face interna da micropartcula de alginato de sdio, coberta com uma pelcula de amido modificado e seca no dessecador a vcuo (amostra C6) (a) 60X, (b) 800X, (c) face interna, 30X. .................................................................................................................................. 58 Figura 20 Distribuio granulomtrica obtida para as microesferas de maltodextrina e amido modificado com leo essencial de laranja, por spray dryer. ........................ 59 Figura 21 - Microscopia ptica das microcpsulas de leo essencial de laranja com alginato de sdio coacervadas, reticuladas com CaCl2 1,0% e secas em estufa (amostra C3). ............................................................................................................ 60

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LISTA DE ILUSTRAES

Figura 22 - Microscopia ptica das microcpsulas de leo essencial de laranja com alginato de sdio coacervadas, reticuladas com CaCl2 1,0% e secas em liofilizador (amostra C4). ............................................................................................................ 61 Figura 23 - Microscopia ptica das microesferas de leo essencial de laranja com maltodextrina e amido modificado obtido por spray dryer (amostra A1). .................. 61 Figura 24 - Curva termogravimtrica de leo essencial de laranja puro em atmosfera de ar sinttico. ........................................................................................................... 63 Figura 25 - Curva termogravimtrica de amido modificado puro em atmosfera de ar sinttico. .................................................................................................................... 64 Figura 26 - Curva termogravimtrica de maltodextrina pura em atmosfera de ar sinttico. .................................................................................................................... 65 Figura 27 - Curva termogravimtrica de alginato de sdio puro em atmosfera de ar sinttico. .................................................................................................................... 66 Figura 28 - Curva termogravimtrica de microesferas de leo essencial de laranja com maltodextrina e amido modificado obtida por spray dryer(amostra A1) em atmosfera de ar sinttico. .......................................................................................... 67 Figura 29 - Curva termogravimtrica de microesferas de maltodextrina e amido modificado obtida por spray dryer (amostra A1B) em atmosfera de ar sinttico. ...... 68 Figura 30 - Curva termogravimtrica de microesferas de leo essencial de laranja com alginato de sdio obtida por spray dryer (amostra A2) em atmosfera de ar sinttico. .................................................................................................................... 69 Figura 31 - Curva termogravimtrica de microesferas de alginato de sdio obtida por spray dryer. ............................................................................................................... 70 Figura 32 - Curva termogravimtrica de microcpsulas de leo essencial de laranja com alginato de sdio obtida por coacervao reticulada com CaCl2 0,5% (amostra C1) em atmosfera de ar sinttico. ............................................................................. 71 Figura 33 - Curva termogravimtrica de microcpsulas de alginato de sdio obtida por coacervao reticulada com CaCl2 0,5% (amostra C1B) em atmosfera de ar sinttico. .................................................................................................................... 72 Figura 34 - Curva termogravimtrica de microcpsulas de leo essencial de laranja com alginato de sdio obtida por coacervao reticulada com CaCl2 2,0% . ........... 73 Figura 35 - Curva termogravimtrica de microcpsulas de alginato de sdio obtida por coacervao reticulada com CaCl2 2,0% (amostra C2B) em atmosfera de ar sinttico. .................................................................................................................... 74 Figura 36 - Curva termogravimtrica de microcpsulas de leo essencial de laranja com alginato de sdio obtida por coacervao reticulada com CaCl2 1,0% . ........... 75 Figura 37 - Curva termogravimtrica de microcpsulas de alginato de sdio obtida por coacervao reticulada com CaCl2 1,0% (amostra C3B) em atmosfera de ar sinttico. .................................................................................................................... 76 Figura 38 - Curva termogravimtrica de microcpsulas de leo essencial de laranja com alginato de sdio obtida por coacervao reticulada com CaCl2 1,0% in natura (sem secagem).......................................................................................................... 77 Figura 39- Curva calorimtrica de leo essencial de laranja puro em atmosfera de nitrognio................................................................................................................... 80 Figura 40- Curva calorimtrica de (a) microesferas de leo essencial de laranja com amido modificado e maltodextrina obtidas pelo mtodo de spray dryer (amostra A1) em atmosfera de nitrognio, (b) microesferas de amido modificado e maltodextrina obtidas pelo mtodo de spray dryer (amostra A1B) em atmosfera de nitrognio e (c) mistura fsica de amido modificado e maltodextrina em atmosfera de nitrognio. .... 81

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LISTA DE ILUSTRAES

Figura 41 - Curva calorimtrica de microesferas de leo essencial de laranja com alginato de sdio obtidas pelo mtodo de spray dryer (amostra A2) em atmosfera de (a) ar sinttico, (b) nitrognio..................................................................................... 82 Figura 42 - Curva calorimtrica de microesferas de alginato de sdio obtidas pelo mtodo de spray dryer (amostra A2B) em atmosfera de (a) ar sinttico, (b) nitrognio................................................................................................................... 83 Figura 43 - Curva calorimtrica de microcpsulas de alginato de sdio obtidas pelo mtodo de coacervao adaptada com atomizao em atmosfera de nitrognio (a) com leo essencial de laranja (amostra B), (b) sem leo essencial de laranja (amostra BB). ............................................................................................................ 84 Figura 44 - Curva calorimtrica de microcpsulas de leo essencial de laranja com alginato de sdio obtidas pelo mtodo de coacervao e reticulada com CaCl2 1,0% (amostra C3) em atmosfera de (a) ar sinttico, (b) nitrognio. .................................. 85 Figura 45 Curva calorimtrica de microcpsulas de alginato de sdio obtidas pelo mtodo de coacervao e reticulada com CaCl2 1,0% (amostra C3B) em atmosfera de (a) ar sinttico, (b) nitrognio................................................................................ 86 Figura 46 Curva calorimtrica de (a) microcpsulas de leo essencial de laranja com alginato de sdio obtidas pelo mtodo de coacervao e reticulada com CaCl2 1,0% e colocadas em banho de amido modificado (amostra C6) em atmosfera de nitrognio e (b) mistura fsica de leo essencial de laranja, alginato de sdio e amido modificado em atmosfera de nitrognio. ................................................................... 87 Figura 47 Difratogramas para amostras obtidas por: spray drying com amido modificado e maltodextrina - (a) microcpsulas com OE (amostra A1), (b) microcpsulas controle (amostra A1B) - e por coacervao com alginato de sdio (c) microcpsulas controle (C3B) e (d) microcpsulas com OE (C3). ....................... 88 Figura 48 Curvas analticas preparadas a partir de solues padro de leo essencial de laranja. (a) Na faixa de concentrao entre 1,0 e 17,0 g L-1 analisados por CG. Para doseamento do teor do OE microencapsulado com maltodextrina e amido modificado por spray dryer. (b) Na faixa de concentrao de 28,0 a 51,0 g L1 analisados por CG. Para doseamento do teor de OE microencapsulado com alginato de sdio por coacervao. ........................................................................... 89

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LISTA DE TABELAS

LISTA DE TABELAS Tabela 1 Propriedades do limoneno ....................................................................... 24 Tabela 2 - Etapas dos mtodos de encapsulao ..................................................... 26 Tabela 3 Vantagens e desvantagens do uso da tcnica de spray drying. .............. 29 Tabela 4 Mtodos para obteno das micropartculas ........................................... 43 Tabela 5 Principais componentes do leo essencial de laranja. ............................ 52 Tabela 6 - Parmetros termogravimtricos do leo essencial de laranja puro, dos polmeros puros e das micropartculas ...................................................................... 62 Tabela 7 Temperatura de pico para as anlises de DSC do leo essencial de laranja puro, das micropartculas e das misturas fsicas dos polmeros .................... 79 Tabela 8 Teor do leo essencial nas micropartculas. ........................................... 90

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LISTA DE ABREVIATURAS

LISTA DE ABREVIATURAS

CG: cromatografia a gs

DSC: calorimetria exploratria diferencial

DTG: anlise termogravimtrica diferencial

ED: equivalente de dextrose

MEV: microscopia eletrnica de varredura

OE: leo essencial

TG: anlise termogravimtrica

m/m: massa do soluto pela massa da soluo

m/V: massa do soluto pelo volume da soluo

V/V: volume do soluto pelo volume da soluo

INMETRO: Instituto Nacional de Metrologia, Normalizao e Qualidade Industrial

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SUMRIO

SUMRIO

1. INTRODUO ...................................................................................................... 18 1.1 OBJETIVO GERAL ............................................................................................. 20 1.2 OBJETIVOS ESPECFICOS ............................................................................... 20 2. ESTADO DA ARTE .............................................................................................. 21 2.1 LEO ESSENCIAL DE LARANJA ...................................................................... 21 2.2 MICROENCAPSULAO ................................................................................... 24 2.2.1 Tecnologias de Microencapsulao ................................................................. 26 2.2.1.1 Spray drying .................................................................................................. 27 2.2.1.2 Coacervao ................................................................................................. 29 2.2.2 Encapsulantes .................................................................................................. 32 2.2.2.1 Maltodextrina ................................................................................................. 32 2.2.2.2 Amido modificado .......................................................................................... 33 2.2.2.3 Alginato de sdio ........................................................................................... 35 2.3 TERMOGRAVIMETRIA (TG) E ANLISE TRMICA DIFERENCIAL (DTA) ....... 38 2.4 CALORIMETRIA EXPLORATRIA DIFERENCIAL (DSC) ................................. 39 2.5 DISTRIBUIO DO TAMANHO DAS PARTCULAS .......................................... 40 2.6 DIFRAO DE RAIOS-X .................................................................................... 40 3. MATERIAL E MTODOS ..................................................................................... 41 3.1. MATERIAL ......................................................................................................... 41 3.2 MTODOS .......................................................................................................... 42 3.2.1 Anlise do OE de laranja por cromatografia a gs ........................................... 42 3.3 MICROENCAPSULAO DO LEO ESSENCIAL DE LARANJA...................... 42 3.3.1 Microencapsulao do OE de laranja atravs do mtodo de spray drying ....... 44 3.3.2 Microencapsulao do OE de laranja atravs do mtodo de coacervao empregando alginato de sdio .................................................................................. 45 3.4 CARACTERIZAO DAS MICROPARTCULAS ................................................ 47 3.4.1 Estudo morfolgico e de superfcie por microscopia eletrnica de varredura (MEV) ........................................................................................................................ 47 3.4.2 Anlise granulomtrica das micropartculas ..................................................... 47 3.4.3 Estudo da estabilidade termo-oxidativa pela tcnica de anlise trmica .......... 48 3.4.3.1 Anlise termogravimtrica (TG-DTG) ............................................................ 48 3.4.3.2 Calorimetria exploratria diferencial (DSC) ................................................... 48

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SUMRIO

3.4.4 Difrao de Raios-X ......................................................................................... 49 3.4.5 Determinao do teor de OE microencapsulado .............................................. 49 3.4.5.1 Parmetros do headspace ............................................................................ 49 3.4.5.2 Preparo da amostra ....................................................................................... 50 3.4.5.3 Cromatografia a gs (CG) com o espectmetro de massa acoplado ............ 50 3.4.5.4 Curva analtica pelo mtodo da padronizao externa ................................. 50 3.4.5.5 Determinao da Eficincia da Encapsulao (%EE) ................................... 51 4. RESULTADOS E DISCUSSES .......................................................................... 52 4.1 DETERMINAO DOS CONSTITUINTES DO LEO ESSENCIAL ................... 52 4.2 MICROSCOPIA ELETRNICA DE VARREDURA (MEV)................................... 53 4.3 GRANULOMETRIA LASER ............................................................................. 59 4.4 ANLISES TRMICAS ....................................................................................... 62 4.4.1 Termogravimetria (TG) e Anlise Trmica Diferencial (DTA) ........................... 62 4.4.2 Calorimetria Exploratria Diferencial DSC..................................................... 79 4.5 DIFRATOMETRIA DE RAIOSX (DRX) .............................................................. 88 4.6 QUANTIFICAO DE LEO ESSENCIAL NAS MICROPARTCULAS ............. 89 5. CONCLUSES ..................................................................................................... 92 6. SUGESTES PARA TRABALHOS FUTUROS ................................................... 93 REFERNCIAS ......................................................................................................... 94

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INTRODUO

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1. INTRODUO

O Brasil se destaca como grande produtor mundial de leos essenciais (OE). A posio do Brasil deve-se produo de OE de ctricos, que so subprodutos da indstria de sucos. As frutas ctricas so as mais cultivadas no mundo, e a laranja a principal delas. A produo de laranjas e a industrializao do suco esto concentradas em quatro pases, sendo o Brasil o primeiro deles, respondendo por um tero da produo mundial da fruta e quase 50% do suco fabricado (BIZZO et al., 2009). Os leos essenciais, tambm conhecidos como leos volteis, leos etreos ou simplesmente essncias, so definidos pela International Standart Organization (ISO) como produtos obtidos de vrias partes das plantas e por espresso dos pericarpos de frutos ctricos. So misturas complexas lquidas de substncias volteis, lipoflicas, odorferas (BRITO; VITTI, 2003). Na indstria alimentcia so utilizados para aromatizar os produtos e se configuram como uma das maiores preocupaes e um grande desafio, devido sua essencial importncia, na aceitao dos produtos pelos consumidores. O mercado mundial de OE gira em torno de US$ 15 milhes/ano, apresentando crescimento aproximado de 11% ao ano. O Brasil aparece entre os principais pases fornecedores, para a Unio Europia, dos leos essenciais de laranja e encontra-se entre os grandes exportadores internacionais. Considerando apenas o leo de laranja, dos US$ 62 milhes importados, 38% foram do Brasil. A exportao de OE de ctricos pelo Brasil, no perodo de janeiro de 2005 a outubro de 2008, foi de aproximadamente 200.000 t. O OE de laranja foi responsvel por 86% das exportaes, sendo que o valor aproximado naquele perodo foi de US$ 2/kg (BIZZO et al., 2009). O leo essencial de laranja contm comprovadamente compostos com propriedades teraputicas importantes, que pode aumentar ainda mais o interesse por parte dos consumidores (VALE et al., 1999 e 2002). Uma das grandes dificuldades tecnolgicas em relao a este ingrediente a sua preservao durante o processamento e a estocagem, pois grande parte dos componentes sensvel ao calor e oxidao, e altamente voltil. O leo pode apresentar uso limitado para algumas aplicaes pelas condies encontradas no

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INTRODUO

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meio. Estes leos podem reagir com outros componentes da formulao alterando suas propriedades (GARGANO, 2007). Entre as vrias estratgias empregadas para prolongar a estabilidade dos leos essenciais, destaca-se a microencapsulao. Esta estratgia tem por objetivo encapsular slidos ou lquidos dentro de matrizes ou sistemas reservatrios polimricos (WATTS et al., 1990). Apesar da grande variedade de produtos encapsulados disponveis no mercado de produtos farmacuticos e cosmticos, a encapsulao tem encontrado, at o momento, relativamente pouco espao na indstria de alimentos. No entanto, deve-se considerar que muitos compostos de grande impacto mercadolgico na indstria de alimentos, como os aromas e corantes naturais, so altamente degradveis, perdendo suas propriedades de interesse e, consequentemente, seu valor de mercado. Com base nos resultados dos trabalhos de Reineccius (1995) e Bertolini et al. (2001) indicando que as tcnicas de encapsulao podem proteger esses compostos, aumentando consideravelmente sua estabilidade, consider-se que a encapsulao tem alto potencial para expandir mercados destes produtos de altos valores agregados. Neste trabalho, o leo essencial de laranja foi microencapsulado pelos processos de coacervao e spray drying, visando aumentar a estabilidade oxidativa durante o processamento e a estocagem. Determinou-se a composio deste leo e para avaliar a eficincia do encapsulamento adaptou-se um mtodo de extrao e de determinao do teor do leo microencapsulado. Comparou-se as caractersticas morfolgicas do material de parede, a granulometria e as propriedades de cristalinidade das micropartculas com amido modificado e maltodextrina e com alginato de sdio. Atravs da anlise trmica determinou-se a decomposio trmica e a estabilidade termo-oxidativa das amostras. Neste trabalho, conforme a literatura, para a caracterizao das

micropartculas as seguintes propriedades e as respectivas tcnicas foram utilizadas: estrutura geral externa (microscopia eletrnica); estrutura fina (raios-X e anlise trmica); tamanho e distribuio do tamanho das partculas (microscopia eletrnica e granulometria a laser); composio do agente encapsulante e do encapsulado (anlise trmica e cromatografia). O presente trabalho est estruturado da seguinte forma: objetivos geral e especficos para a realizao deste trabalho; no estado da arte tem-se um

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INTRODUO

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levantamento bibliogrfico sobre a composio do leo essencial de laranja, as tecnologias de microencapsulao e os agentes encapsulantes aplicados; relacionase os materiais e equipamentos utilizados; descreve-se as metodologias desenvolvidas; observa-se os resultados obtidos e discusses analisadas e

apresenta-se as referncias consultadas.

1.1 OBJETIVO GERAL

Microencapsular,

pelos

processos

de

coacervao

spray drying, o leo essencial de laranja, visando o aumento da estabilidade oxidativa deste produto.

1.2 OBJETIVOS ESPECFICOS

Determinar a composio do leo essencial de laranja por cromatografia a gs acoplada ao espectrmetro de massa. Obter as micropartculas polimricas contendo leo essencial de laranja pelo mtodo do spray drying e pelo mtodo de coacervao, comparando a eficincia do encapsulamento com a adaptao de um mtodo de extrao e de determinao do teor do leo microencapsulado.

Atravs da anlise trmica determinar a decomposio trmica e a estabilidade termo-oxidativa das amostras. Verificar as propriedades de cristalinidade das micropartculas. Realizar um estudo granulomtrico, morfolgico e de superfcie das micropartculas.

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ESTADO DA ARTE

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2. ESTADO DA ARTE

2.1 LEO ESSENCIAL DE LARANJA

Os leos essenciais de ctricos so encontrados em glndulas localizadas na superfcie da casca de frutas e os processos de extrao mais comuns so: destilao por arraste a vapor e prensagem a frio (SANTOS et al., 2003). A destilao por arraste a vapor apresenta vrios inconvenientes, entre eles a degradao trmica, facilidade de oxidao e o alto consumo de energia. O processo de prensagem a frio o processo mais utilizado pela indstria de leos essenciais. As cascas das laranjas so prensadas para extrao do leo essencial, a seguir efetuada uma centrifugao para separao e obteno de leo puro e se apresenta lmpido, de cor amarelo-escura, com um aroma forte caracterstico e amargo. O leo essencial de laranja, extrado do pericarpo do fruto, um subproduto da indstria do suco e seu rendimento na extrao de 0,4% (SANTOS et al., 2003; BIZZO et al., 2009). O Brasil responsvel por um tero da produo mundial de laranja, quase 50% do suco fabricado e um dos principais exportadores internacionais dos leos essenciais de laranja. Com tamanha produo, mesmo seus subprodutos, como o leo, a pectina e as cascas secas, tm um grande mercado nas indstrias de alimentos e de bebidas (BIZZO et al., 2009). Portanto de grande interesse cientfico e comercial, este leo tem grande aplicao nas indstrias alimentcia e farmacutica. Pode ser usado diretamente para dar sabor em bebidas, balas, sorvetes e outros alimentos, e na fabricao de medicamentos e cosmticos. H, ainda, subprodutos deste leo essencial, que so obtidos com a remoo de compostos oxidveis, como o d-limoneno, e mediante a concentrao das fraes aromticas (SANTOS et al., 2003). O leo de laranja uma mistura complexa que pode conter at 300 diferentes compostos qumicos que se dividem em duas fraes, a no voltil composta principalmente por carotenides, flavonides e coumarinas; e a voltil composta por aldedos; cetonas; hidrocarbonetos terpnicos, como limoneno, mirceno e

valenceno; lcoois, como linalol, e steres. Devido composio do leo essencial de laranja, este apresenta baixa solubilidade em gua e alta tendncia autoxidao. A frao voltil dos leos ctricos, em geral, representa de 94 a 98% do

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leo total e consiste de mais de 100 compostos, muitos dos quais esto presentes somente em traos. A poca e o local de coleta, a forma de cultivo, as condies climticas, a idade do material vegetal, o perodo e as condies de armazenamento podem influenciar na composio do leo essencial (SANTOS et al., 2003). O d-limoneno o componente majoritrio dos leos das cascas de laranja, sendo a preveno da desidratao e a inibio de crescimento microbiano suas funes naturais nos vegetais. Atingindo concentraes de 90 a 96% (m/m). Alm das suas propriedades inseticidas reconhecidas, do efeito sedativo, miorrelaxante e ansioltico (VALE et al., 1999 e 2002; GARGANO, 2007) o d-limoneno usado como componente aromtico e para dar sabor, sendo usado na obteno de sabores artificiais como menta e hortel, na fabricao de doces, balas e gomas de mascar (SANTOS et al., 2003). O d-Limoneno, 4-isoprenil-1-metil-ciclo-hexeno, ou 1-metil-4-prop-1-en-2-ilcyclohexeno (nomenclatura IUPAC), cuja massa molecular de 138 g/gmol e frmula molecular mdia C10H16 (Figura 1), um hidrocarboneto, pertence classe dos monoterpenos monocclicos, oligmeros do isopreno (C5H8). uma molcula quiral, e sua ocorrncia biolgica natural se d sempre sob uma das formas enantiomricas. As frutas ctricas fornecem o d-limoneno ((+)-limoneno), que tambm conhecido quimicamente como o enantimero-(R). (+)-limoneno, o sinal + refere-se ao comportamento que esse enantimero do limoneno apresenta quando exposto luz plano-polarizada, desvia a luz polarizada no sentido horrio, por isso o smbolo (+). D-limoneno, a letra "d" significa o mesmo que o smbolo (+), vem da palavra "dextrgiro", que significa "desvia a luz polarizada para a direita". Por possuir um centro quiral, ou seja, um carbono assimtrico, apresenta isomeria ptica. Portanto, existem dois ismeros pticos:o D-limoneno e o L-limoneno. A nomenclatura IUPAC correta R-limoneno e S-limoneno, porm se emprega com mais frequncia os prefixos D e L ou e (PAKDELA et al., 2001).

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Figura 1- Estrutura do d-limoneno (FERRARINI, et al., 2008). Pela elevada quantidade de d-limoneno no leo, a sua oxidao um fenmeno que no se deve desprezar, uma vez que pode afetar em muito a qualidade do produto. A decomposio do d-limoneno leva formao de subprodutos terpnicos que inviabilizam o uso do leo como aromatizante (FILHO, 1999). A reao pode ser representada de acordo com a Figura 2.

Figura 2 - Decomposio do d-limoneno (FILHO, 1999). A determinao se o leo est ou no oxidado pode ser por anlise sensorial e/ou combinada com a anlise instrumental, sendo que os produtos da oxidao so descritos muitas vezes como sendo de sabor mentolado ou lenhoso (MELO et.al., 1997). Propriedades adicionais do limoneno esto relacionadas na Tabela 1.

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Tabela 1 Propriedades do limoneno Ponto de ebulio (a 763 mmHg) a 14 C Presso de vapor Densidade
Imon

175,5 - 176 C 1 mm Hg 2 mmHg 5 mmHg 0,84 kg/litro

o o

a 20 C a 40,4 C
o

FONTE: FILHO, 1999.

Recomenda-se no expor o limoneno ao calor excessivo ou ao fogo, sendo que este composto pode ainda reagir com agentes oxidantes fortes, gerando calor (MELO et al., 1997).

2.2 MICROENCAPSULAO

A microencapsulao transforma um lquido em slido, de modo a facilitar sua manipulao, transporte e adio em formulaes; solucionando limitaes no emprego de ingredientes alimentcios, visto que pode suprimir ou atenuar aromas indesejveis, reduzir a volatilidade e a reatividade alm de aumentar a estabilidade destes em condies ambientais adversas, como na presena de luz, oxignio e pH extremos (TRINDADE et al., 2008). A encapsulao baseia-se na preparao de uma emulso entre o composto a ser encapsulado e o agente de encapsulao, seguido da secagem da emulso. As micropartculas, compostas por um polmero como material de parede e um material ativo chamado de ncleo, so geralmente empregadas para melhorar a eficincia do material ou criar novas aplicaes. Elas tm a capacidade de modificar e melhorar a aparncia e as propriedades de uma substncia (SANTOS et al., 2003). De acordo com o seu tamanho, as cpsulas so classificadas como micropartculas entre 1 e 1000 m, ou nanopartculas entre 10 a 1000 nm. Apresentam diversas formas, dependendo dos materiais e mtodos usados para sua obteno (SILVA et al., 2003). As micropartculas podem ser microcpsulas ou microesferas. As

microcpsulas (Figura 3) mononucleares so formadas por um ncleo, enquanto que as polinucleares so formadas por vrios ncleos contendo o ingrediente ativo e uma parede polimrica que confina o ingrediente ativo, controla sua liberao e

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protege o material de efeitos nocivos. As microsferas so sistemas matriciais nos quais o ingrediente ativo se encontra uniformemente disperso e/ou dissolvido numa rede polimrica. As microesferas podem ser homogneas ou heterogneas conforme a substncia ativa se encontre no estado molecular (dissolvido) ou na forma de partculas (suspenso).

Figura 3 Representao esquemtica da estrutura dos diferentes tipos de micropartculas (SILVA et al., 2003). A disposio do ncleo (nico ou mltiplo) depende, principalmente, da natureza do material de recheio e do mtodo escolhido para a fabricao das micropartculas (SILVA et al., 2003). Em geral, pelo processo por spray drying obtm-se microesferas e pelo mtodo da coacervao obtm microcpsulas, portanto foram estes os termos adotados para cada uma destas metodologias no decorrer deste trabalho e quando tratado de forma genrica, referiu-se como micropartculas. Os principais fatores que justificam o potencial de uso da microencapsulao na indstria alimentcia so: (i) reduzir a reatividade do material de ncleo com o ambiente; (ii) diminuir a velocidade de evaporao ou de transferncia do material de ncleo para o meio; (iii) facilitar a manipulao do OE; (iv) mascarar sabores; (v) converter lquidos em slidos; (vi) proteo em relao aos agentes atmosfricos (umidade, luz, calor e/ou oxidao); (vii) promover a diluio homognea do material encapsulado em uma formulao alimentcia e (viii) auxiliar a disperso de substncias insolveis em gua em meios aquosos (SHAHIDI; HAN,1993). Os aromatizantes e/ou leos essenciais normalmente so encapsulados com a finalidade de aumentar significativamente a sua vida de prateleira, uma vez que a

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encapsulao pode prevenir a oxidao, a volatilizao e a aglomerao destes, alm de possibilitar a liberao controlada e a converso de aromatizantes lquidos em slidos (JACKSON; LEE, 1991).

2.2.1 Tecnologias de Microencapsulao

Vrias tcnicas tm sido empregadas na elaborao de micropartculas, tais como: spray drying, spray cooling, coacervao, extruso, extruso centrfuga, recobrimento em leito fluidizado, lipossomas, complexao por incluso e nanoprecipitao (TRINDADE et al., 2008). A escolha do mtodo de microencapsulao orientada pelas propriedades (fsicas e qumicas) do material encapsulado, do encapsulante e pelo propsito da aplicao do ingrediente (DESAI; PARK, 2005; MADENE et al., 2006). Na Tabela 2 so apresentadas as principais etapas envolvidas nos diferentes mtodos de encapsulao.

Tabela 2 - Etapas dos mtodos de encapsulao

Processo de Encapsulao Spray Drying Principais etapas na Encapsulao a. Preparao de uma emulso; b. Homogeneizao do material ativo na emulso; c. Atomizao da emulso; d. Desidratao da emulso atomizada. Spray Cooling/ Spray Chilling/ a. Preparao da emulso; Atomizao b. Homogeneizao da emulso; c. Atomizao da emulso. Leito Fluidilizado a. Preparao da soluo de recobrimento; b. Fluidizao das partculas do ativo; c. Recobrimento das partculas do ncleo. Extruso a. Preparao da soluo fundida de recobrimento; b. Disperso do material ativo na soluo fundida; c. Resfriamento da mistura Liofilizao/ Freeze-drying a. Mistura do material ativo em uma soluo de recobrimento; b. Resfriamento da soluo; c. Secagem a vcuo da mistura congelada. Coacervao a. Formao de trs fases qumicas imiscveis; b. Deposio do coacervado; c. Solidificao do coacervado. Incluso molecular Preparao de complexos pela mistura ou moagem ou spray drying. Fonte: adaptado de GOUIN, 2004; DESAI e PARK, 2005; MADENE et al., 2006.

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O mtodo ideal de microencapsulao deve ser simples, reprodutvel, rpido, fcil de transpor escala industrial e pouco dependente das caractersticas de solubilidade da substncia ativa a encapsular e do polmero a ser utilizado (SILVA et al., 2003).

2.2.1.1 Spray drying

O spray-drying uma operao unitria atravs da qual uma soluo ou emulso pulverizada numa corrente de gs quente para, instantaneamente, obter um p. O gs habitualmente utilizado o ar ou, mais raramente, um gs inerte como o nitrognio. O lquido de alimentao pode ser uma soluo, uma emulso ou uma suspenso. Dependendo do material utilizado na alimentao e das condies da operao, a produo do p pode atingir dimenses desde muito finas (10-50 m) a partculas de grande dimenso (2-3 mm) (MARTNEZ, et al., 2004). O objetivo da atomizao o de criar uma superfcie maior de transferncia de calor entre o ar quente e o lquido, de forma a otimizar a transferncia de calor e de massa. Quanto maior a temperatura, menor a dimenso das partculas. Para a mesma temperatura, o tamanho aumenta com o aumento da alimentao da amostra. No entanto, o tamanho das partculas aumenta quando tanto a viscosidade como a tenso superficial do lquido so elevadas (RISH,1995). O contato das partculas com o ar quente acontece com a atomizao. Esta pode ser em co-corrente ou em contracorrente dependendo do atomizador. Em cocorrente a soluo ou emulso alimentada na mesma direo da corrente de ar quente. A temperatura de alimentao varia geralmente entre 150-220C, a evaporao acontece instantaneamente e as partculas secas so expostas a temperaturas moderadas (50-80C) o que limita degradaes trmicas

(ROSENBERG et al.,1990). Existem diferentes tipos de atomizadores, diferindo na dimenso, forma de atomizao e geometria do atomizador. Este , normalmente, constitudo por um orifcio de descarga por onde o fluido escoa a alta presso ou um disco animado de movimento rotativo originando uma fora centrfuga; o orifcio de descarga pode, ainda, ser de duplo fluxo embora no seja comum a sua utilizao (REINECCIUS, 1988).

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Quanto maior o teor de slidos da emulso a ser atomizada, menor o tempo necessrio para formao das cpsulas, o que favorece a reteno dos volteis. Outros fatores que afetam: teor de slidos na alimentao ao atomizador; massa molar e concentrao do leo essencial; tipo e massa molar do encapsulante; velocidade e temperatura do ar de secagem e dimenso das gotculas atomizadas (REINECCIUS, 1988).

Condies de secagem

Os principais fatores que devem ser otimizados so: temperatura de alimentao, temperatura de entrada de ar, e temperatura de sada de ar. De fato, a temperatura de alimentao modifica a viscosidade da emulso e, assim, a sua capacidade de secar homogeneamente. Quando a temperatura de alimentao baixa, a viscosidade aumenta e o tamanho das cpsulas deve diminuir, mas altas temperaturas podem causar volatilizaes ou degradaes de alguns ingredientes sensveis ao calor. A alimentao ajustada para assegurar que cada partcula atinja o nvel de secagem desejado antes de entrar em contato com a cmara de secagem (R, 1998). A maior perda de volteis durante a microencapsulao por spray-dryer ocorre nas primeiras etapas, antes da formao da crosta de secagem na superfcie das partculas. No entanto, o uso de emulsificantes ou amidos modificados, com propriedades emulsificantes pode modificar as propriedades de secagem das microesferas, diminuindo essas perdas (REINECCIUS, 1995). Coumans et al. (1994) elaboraram uma extensa reviso dos resultados disponveis sobre as perdas de aromas durante a secagem por atomizao e estabeleceram um conjunto de prevenes: aumento das temperaturas do ar de entrada e da alimentao, aumento da concentrao de slidos dissolvidos na alimentao, adio de ligantes (como, por exemplo, a carboximetilcelulose) e de uma fase de leo a alimentao. Este mtodo tem sido utilizado na encapsulao de ingredientes alimentcios como aromas, lipdios e corantes. A atomizao, sendo um processo de secagem, utilizada como tcnica de encapsulao pelo aprisionamento do material ativo numa matriz. Durante o processo de secagem, a evaporao do solvente, o qual, na

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maioria das vezes gua, muito rpido e o aprisionamento do composto em questo quase instantneo (HORST, 2009). Na encapsulao de aromas por spray drying, a relao tpica entre o agente encapsulante e o material encapsulado de 4:1. A alta relao rea de superfcie/volume das partculas promove rpida evaporao da gua. Com isso, o tempo de exposio das partculas ao calor curto (geralmente poucos segundos), e a temperatura do ncleo no ultrapassa os 100C, o que reduz a ocorrncia de alteraes indesejveis em compostos termossensveis, aumentando a reteno dos volteis (AZEREDO, 2005). A microencapsulao de um leo essencial envolve as seguintes etapas: escolha de material de parede adequado ao leo essencial a encapsular, preparo da emulso, constituda pela soluo do material de parede e do leo e homogeneizao da emulso. Finalmente, a secagem da emulso por atomizao em secador formar as micropartculas. A Tabela 3 mostra as vantagens e desvantagens deste mtodo (AZEREDO, 2005). Tabela 3 Vantagens e desvantagens do uso da tcnica de spray drying.
VANTAGENS Baixo custo de operao Alta qualidade das partculas obtidas Bom rendimento de processo Produo de matria com boa solubilidade Tamanho pequeno de partcula Alta estabilidade dos materiais obtidos Fonte: GOUIN, 2004, DESAI e PARK, 2005; MADENE et al., 2006; SANTOS et. al. 2003. DESVANTAGENS No produz materiais com tamanho uniforme Limita a escolha do encapsulante (baixa viscosidade em altas concentraes) No uma boa tcnica para materiais sensveis ao calor (enzimas) Custo do equipamento

2.2.1.2 Coacervao

A tcnica da coacervao consiste em emulsificar uma soluo orgnica do polmero e aroma (fase interna) em uma soluo aquosa contendo agente emulsificante (fase externa), levando formao de partculas esfricas. Estas, por sua vez, so separadas por filtrao ou centrifugao, lavadas com solvente apropriado e secas (WATTS et al., 1990).

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O mtodo da coacervao (ou separao de fases) tem sido empregado face simplicidade dos procedimentos envolvidos na obteno das partculas e possibilidade de modulao das caractersticas fsicas e fsico-qumicas das mesmas. Esta tcnica foi escolhida para comparar com o spray drying com intuito de trabalhar com encapsulante mais viscoso e obter materiais de tamanho mais uniforme (JACKSON; LEE, 1991). Coacervao um fenmeno coloidal referente a uma separao de fases, em que uma fase lquida rica em um colide separa-se de uma soluo macromolecular, como resultado de uma reduo da solubilidade por meios qumicos ou fsicos (ex: alterao de temperatura ou de pH, adio de uma soluo inica concentrada, entre outros). A nova fase, rica em colides, apresenta-se na forma de gotculas lquidas, que acabam por coalescer, formando uma camada contnua, que se deposita, para formar a parede da cpsula. A etapa final o endurecimento da parede e o isolamento das cpsulas (AZEREDO, 2005). A coacervao pode ser simples ou complexa. No sistema simples empregase apenas uma substncia como agente encapsulante enquanto que, na coacervao complexa, ocorre que dois polmeros de cargas opostas formam um complexo solvel e as microcpsulas so formadas pela interao interinica entre os polmeros. O ingrediente a ser encapsulado pode estar presente na mistura de polmeros que vai ser coacervada, em uma das fases polimricas ou pode ser adicionada durante ou depois da separao de fases. Em todos os casos, deve ser mantida a agitao continuamente (HAMESTER et al., 2006). De forma geral, o processo de microencapsulao segue as seguintes etapas (AZEREDO, 2005; SILVA et al., 2003): Disperso do agente ativo a ser encapsulado em uma soluo do polmero; Induo da coacervao por algum mtodo descrito anteriormente, formando gotculas de coacervado; Deposio das gotculas de coacervado em torno dos ncleos contendo o princpio ativo; Coalescncia das gotculas de coacervado para formar uma camada polimrica; Endurecimento da camada polimrica por meio da difuso do solvente, adio de um agente reticulante, mudana de temperatura.

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Finalmente,

as microcpsulas

obtidas

so

separadas

do

sistema

por

centrifugao ou filtrao. A Figura 4 representa as etapas do processo de microencapsulao por coacervao (SUAVE et al.,2006).

Figura 4 Representao esquemtica das etapas microencapsulao por coacervao (SUAVE et al.,2006).

do

processo

de

Geralmente, o material a ser encapsulado usado na coacervao deve ser compatvel com o polmero encapsulante e ser insolvel (ou pouco solvel) no meio de coacervao (SUAVE et al., 2006).

Fatores importantes na obteno de microcpsulas A distribuio de tamanho das microcpsulas um fator importante no desempenho e no controle da liberao e tambm na proteo do ativo encapsulado. Quanto maior a rea superficial das microcpsulas, ou seja quanto menores forem seus dimetros, mais rapidamente o ativo ser liberado. O tamanho das microcpsulas no processo de coacervao simples pode ser controlado atravs da taxa de agitao mantida durante o processo, da viscosidade e da frao volumtrica de material encapsulado e das caractersticas do material formador da parede polimrica das microcpsulas (HSIEH et al., 2006). Bachtsi et al. (1996) observaram que, com o aumento da taxa de agitao, a distribuio de tamanho se desloca para dimetros menores devido associao da energia cintica turbulenta com o aumento no processo de quebra de gotas.

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2.2.2 Encapsulantes

Na

microencapsulao

so

utilizados

polmeros,

como

quitosana,

maltodextrina, amidos, alginatos e outros. A proteo proporcionada pela parede polimrica evita que, durante o armazenamento prolongado, ocorram alteraes qumicas e organolpticas no material encapsulado. Na forma de micropartculas hidroflicas, aumentam a solubilidade de ingredientes e facilitam a sua incorporao como aditivos em alimentos (GOUIN, 2004; SOUZA et al., 2005). A escolha do agente encapsulante depende de uma srie de fatores, entre eles a no reatividade com o material a ser encapsulado, o processo utilizado para a formao da microcpsula e o mecanismo de liberao ideal (REINECCIUS, 1988). Para atuar como emulsificante, um composto deve conter grupamentos hidroflicos e hidrofbicos; quanto maior a capacidade emulsificante do

encapsulante, melhor a reteno de compostos. Os encapsulantes devem atender ainda aos seguintes requisitos: boas propriedades de formao de filme; baixa higroscopicidade; baixa viscosidade a altas concentraes de slidos; sabor e odor suaves; e baixo custo. Na prtica, muitas vezes, pelo fato de um mesmo composto no englobar todas essas propriedades, usam-se misturas (TRINDADE et al., 2008). Muitos materiais podem ser utilizados nessas misturas para obteno da cobertura para as microcpsulas, dentre eles: goma arbica, gar, alginato, quitosana, carragena, amido, amidos modificados, dextrinas, sacarose,

carboximetilcelulose, acetilcelulose, nitrocelulose; mono e diacilgliceris, leos e gorduras, sulfato de clcio e silicatos, casena, gelatina, albumina e polmeros sintticos. (JACKSON; LEE, 1991).

2.2.2.1 Maltodextrina

Os carboidratos so os materiais mais utilizados para encapsulao, graas sua capacidade de se ligar aos compostos aromticos, alm de sua diversidade e baixo custo (AZEREDO, 2005). A maltodextrina, [(C6 H12 O5)n H2O], polmero sacardeco nutritivo, no doce que consiste de unidades D-glicose ligadas por cadeia 1-4 e que tem dextrose equivalente menor que 20 so mais adequadas, j que so menos higroscpicas evitando a aglomerao das partculas (REINECCIUS et al.,1988).

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Apresenta-se como p branco ou soluo concentrada pela hidrlise parcial do amido de milho com cidos e/ou enzimas. No possui propriedade emulsificante (hidroflica e lipoflica), por isso usada combinada com amidos modificados para estabilizar emulses. Na encapsulao forma uma pelcula protegendo o material voltil; tem efeito antioxidante e mostra reteno de volteis na faixa de 65 a 80% (ASCHERI et al., 2003). Devido sua baixa viscosidade a altas concentraes, as maltodextrinas tm sido estudadas como possveis substitutos para a goma arbica em emulses atomizadas. Os resultados obtidos por Thevenet (1988) indicaram que uma mistura 1:1 de goma arbica e maltodextrina foi quase to eficiente quanto goma arbica pura para estabilizao oxidativa de leo essencial de laranja. A maltodextrina escolhida para este trabalho possui equivalente de dextrose (ED) igual a 20, pois com o aumento do ED, aumenta a barreira ao oxignio e, portanto, a estabilidade oxidativa (ANANDARAMAN; REINECCIUS, 1986). Existe alta correlao entre o valor de equivalente de dextrose ED de um amido hidrolisado e a estabilidade oxidativa conferida ao ncleo. De fato, Wagner e Warthesen (1995) observaram que, quanto maior o ED de um amido hidrolisado, maior a eficincia da cpsula em proteger caroteno contra oxidao (QI; XU, 1999).

2.2.2.2 Amido modificado

O amido um material abundante e barato. Por outro lado, a viscosidade das solues de amido geralmente alta demais para a maior parte dos processos de encapsulao. Alm disso, o amido no possui grupos hidrofbicos, no exercendo, portanto, praticamente nenhum efeito estabilizante nas emulses, a no ser pelo aumento da viscosidade (REINECCIUS,1991). O amido representa um polmero com habilidade para o aprisionamento de molculas em tecnologias de liberao controlada de substncias bioativas. Esta habilidade encontrada no carboidrato ocorre devido a sua frao amilose que capaz de formar estruturas helicoidais e, com isso, complexos muito estveis. Entretanto, devido a sua natureza hidroflica, o amido e seus hidrolisados no oferecem propriedades emulsificantes quanto aos ingredientes aprisionados em sistemas de liberao controlada (SHAHIDI; HAN, 1993).

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A produo de amidos modificados uma alternativa que vem sendo desenvolvida h algum tempo com o objetivo de superar uma ou mais limitaes dos amidos nativos e assim aumentar a utilidade e aplicabilidade deste polmero pelas indstrias. As razes que levam modificao do amido incluem: modificar as caractersticas de gelatinizao, diminuir a retrogradao e a tendncia das pastas em formarem gis; aumentar a estabilidade das pastas ao resfriamento e descongelamento, a transparncia das pastas ou gis e a adesividade; melhorar a textura das pastas ou gis e a formao de filmes; adicionar grupamentos hidrofbicos e introduzir poder emulsificante (SILVA et al., 2006). O amido pode ser modificado quimicamente por meio de hidrlise parcial seguida da reao com um componente hidrofbico. Com isso, o amido atrado para a interface leo-gua de uma emulso, podendo assim ser utilizado como encapsulante. Um composto comumente utilizado para ligao ao amido o octenilsuccinato. O polmero assim produzido tem boa solubilidade em gua e excelente reteno do material voltil de aroma aps a secagem. (REINECCIUS, 1988). Esta modificao obtida pela esterificao do amido de milho com o cido octenilsuccinato anidro resultando, com isso, num amido hidrofobicamente modificado, cujo nome comercial Capsul. O octenilsuccinato um componente lipoflico, o qual, nas formulaes, aumenta a capacidade e a estabilidade de emulses. A Figura 5 exemplifica a reao de obteno deste amido (ABURTO et al., 1998; FINOTELLI, 2002; MAIA, 2004).

Figura 5 - Reao de obteno do amido de milho modificado com octenilsuccinato. Segundo Trubiano e Lacourse (1988) a utilizao de amido modificado com octenilsuccinato como material de parede resultou em uma perda de leo essencial cerca de 20 vezes inferior ao registrado com a goma arbica. O amido modificado um agente encapsulante muito usado pela excelente reteno de volteis (acima de

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93%), pela estabilizao da emulso e baixa viscosidade. Por outro lado, os amidos modificados exercem pouca proteo contra oxidao durante a estocagem, por isso a importncia de utilizar este amido associado a maltodextrina. Este amido modificado tem a capacidade de oferecer excelente propriedade emulsificante para leos essenciais ctricos, leos vegetais e uma grande variedade de mistura com volteis, estabilizando-os para a secagem por atomizao. O amido de milho modificado por incluso de grupamento Iipoflico tem se tornado um substituto de protenas e da goma arbica por custar, em mdia, trs vezes menos, ser usado em menor quantidade (em peso), alm de estar prontamente disponvel (FINOTELLI, 2002; ABURTO et al., 1998). A presena de grupos hidrofbicos na estrutura do Capsul torna este amido menos sensvel gua. Alm disso, a habilidade de formao de pontes de hidrognio entre as cadeias deste amido reduzida, resultando assim na formao de um filme mais flexvel e, apesar de constituir-se em um amido modificado, a biodegradabilidade do amido mantida (MAIA, 2004). O Capsul utilizado pelas indstrias farmacuticas e alimentcias com aprovao do FDA como um aditivo alimentar desde que o contedo de octenilsuccinato no exceda 3% (MAIA, 2004). Na encapsulao de leo essencial de laranja, o amido modificado apresentou maior reteno do leo quando comparado goma arbica (ABURTO et al.,1998; ASCHERI et al., 2003). Soottitantawat et al. (2005) encapsularam limoneno por atomizao e a maior estabilidade foi obtida utilizando-se amido modificado como agente encapsulante, em comparao com goma arbica e maltodextrina.

2.2.2.3 Alginato de sdio

O alginato de sdio um polmero de ocorrncia natural encontrado em algumas bactrias e nas paredes celulares e intracelulares de algas marrons, principalmente Laminaria hyperborea, Ascophyllum nodosum e Macrocystis pyrifera (GOMBOTZ; WEE, 1998), sendo delas extrado com lcalis diludos (GACESA, 1988). Os alginatos (Figura 6) pertencem a uma extensa classe de polmeros polissacardeos que formam suspenses hidrocolides em gua. Alginato de sdio um sal de sdio de cido algnico e um polmero aninico solvel em gua. O cido algnico formado de resduos de cido -D-manurnico (M) e cido -L-

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gulurnico (G) unidos por ligao (14), de composio e seqncia variada (KING, 1988 e 1995; HORST, 2009).

Figura 6 - Estrutura qumica do alginato de sdio (HORST, 2009). Estes monmeros so organizados em blocos ao longo da cadeia, que podem ser compostos por blocos de homopolmeros (GG e MM) associados aos blocos alternados (MG) na mesma molcula, como pode ser visto na Figura 7 (SMIDSROD, 1974).

Figura 7 - Representao da estrutura dos meros dos cidos -D-manurnico (a), L-gulurnico (b) e do polmero natural alginato (c) (ERTESVG; VALLA, 1998). A diferena na sequncia e no contedo de blocos determinar a flexibilidade da cadeia, influenciando na solubilidade e na estabilidade do gel que ser formado. Blocos MG, por exemplo, formam cadeias mais flexveis e mais solveis em pHs baixos e a estabilidade do gel est diretamente relacionada ao contedo de blocos G (ERTESVG; VALLA, 1998).

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Alginatos ricos em blocos G formam gis rgidos e quebradios na presena de ons Ca2+ enquanto a predominncia de M (em bloco) ou MG resultam em gis elsticos. A quantidade e a distribuio de cada monmero dependem da espcie, da seo e da idade da alga a partir da qual o alginato foi isolado. As ligaes glicosdicas resultantes nas posies 1 e 4 so equatoriais no -D-manuronato e axiais no -L-guluronato (GACESA, 1988). Na presena de clcio ou outros ctions divalentes, o alginato possui a propriedade de formar gel, pois o clcio induz a um efeito cooperativo entre os blocos G formando uma estrutura tridimensional de acordo com o modelo caixa de ovo (Figura 8) (AMICI et al., 2008).

Figura 8 - Modelo caixa de ovo para a formao do gel de alginato com ons clcio (ERTESVG; VALLA, 1998). Segundo Peniche et al. (2004), a reticulao do alginato com ons clcio estabelecida pelas unidades gulurnicas, sendo que a fora e a porosidade das partculas formadas dependem da origem e da massa molar do polmero, da concentrao do cloreto de clcio e da disperso do alginato. Dependendo da quantidade de clcio presente no sistema, a associao intercadeias pode ser temporria ou permanente, ou seja, nveis reduzidos de clcio induzem a um aumento na viscosidade e uma associao temporria. Por outro lado, nveis altos de clcio resultam em precipitao, favorecendo uma associao permanente (GEORGE; ABRAHAM, 2006).

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A principal aplicao comercial do alginato na forma de sal, sendo largamente utilizado nas indstrias de alimentos, de frmacos, de tecidos e de papel. Derivados de alginato tambm so usados na indstria de processamento de alimentos para a produo de produtos de carnes, anis de cebola, recheios de azeitona, sticks de caranguejo e na indstria de biotecnologia para produo de prolas para imobilizao de clulas e enzimas. Tambm tem sido utilizado com freqncia na encapsulao de protenas para a sua distribuio controlada dentro do corpo humano (GOMBOTZ; WEE, 1998).

2.3 TERMOGRAVIMETRIA (TG) E ANLISE TRMICA DIFERENCIAL (DTA)

Trata-se de um sistema capaz de medir continuamente a massa de um material enquanto este submetido a uma programao controlada de temperatura. A termogravimetria um mtodo termoanaltico empregado para avaliar mudanas de massa permitindo determinaes especficas, bem como analisar a

decomposio trmica das amostras (GIRON, 2002). Segundo Ionashiro (2005) as curvas TG permitem obter concluses sobre a estabilidade trmica da amostra, sendo, entre as tcnicas termoanalticas,a mais utilizada. A termogravimetria permite conhecer detalhadamente as alteraes que o aquecimento pode causar na massa das substncias, como modificaes da estrutura molecular e ainda estabelecer a faixa de temperatura em que as mesmas sofrem processos de decomposio, como por exemplo o amido que sofre degradao na faixa de temperatura entre 30 C a 300C 2000; CEREDA;VILPOUX, 2003). A termogravimetria um mtodo basicamente quantitativo, uma vez que a variao de massa pode ser exatamente determinada. Entretanto, o intervalo de temperatura onde essa variao de massa ocorre, qualitativo, tendo em vista que esse parmetro depende de fatores instrumentais e caractersticas da amostra (IONASHIRO, 2005). A termogravimetria derivada (DTG) um recurso matemtico que fornece a derivada primeira da curva TG em funo do tempo ou da temperatura. O registro a curva termogravimtrica derivada ou curva DTG. A rea dos picos sob a curva DTG proporcional perda de massa naquele evento trmico (WENDLANT, 1986). (CARVALHO FILHO,

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J a anlise trmica diferencial (DTA), geralmente plotada em conjunto com a curva TG, uma tcnica de medio contnua das temperaturas da amostra e de um material de referncia termicamente inerte, medida que ambos vo sendo aquecidos ou resfriados em um forno. Estas medies de temperatura so diferenciais, pois registra-se a diferena entre a temperatura da referncia e a da amostra, em funo da temperatura ou do tempo, dado que o aquecimento ou resfriamento so sempre feitos em ritmo linear (IONASHIRO, 2005). Neste trabalho, a propriedade estudada foi a estabilidade termo-oxidativa das amostras, em funo da temperatura, enquanto ela foi aquecida, em uma atmosfera de ar sinttico, numa proporo fixa de mudana de temperatura. A tcnica de anlise trmica demonstra ser eficaz, de alta reprodutibilidade e versatilidade, que pode ser aplicada tanto aos leos de baixa e alta estabilidade oxidativa. Alm disso, utiliza pequenas quantidades de amostra e o tempo de anlise relativamente reduzido, o que passar a beneficiar as indstrias alimentcias (GIRON, 2002).

2.4 CALORIMETRIA EXPLORATRIA DIFERENCIAL (DSC)

A Calorimetria Exploratria Diferencial (DSC) permite avaliar as variaes entlpicas que ocorrem com uma dada substncia e um material de referncia em funo da temperatura, enquanto essas so submetidas a uma programao controlada de temperatura (IONASHIRO,2005). O DSC tem sido bastante utilizada para estudo de transio de fase de polmeros, atravs desse obtm-se temperaturas e entalpias caractersticas da transio (BELLO-PRE et al., 2006). No DSC com fluxo de calor a amostra e a referncia so colocadas sobre um disco termoeltrico e aquecidas por uma nica fonte de calor. O calor transferido atravs do disco para a amostra e a referncia e o fluxo de calor diferencial entre os dois controlado por termopares conectados abaixo do cadinho

(IONASHIRO,2005). Segundo Carvalho Filho (2000), qualquer fenmeno fsico ou qumico que por ocasio de sua ocorrncia provoque variaes de entalpia pode ser detectado atravs do DSC. Para evento exotrmico a deteco representada graficamente em um pico ascendente.

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Nos ltimos anos, a calorimetria exploratria diferencial (DSC) vem sendo utilizada para o estudo do comportamento trmico de polmeros (como amidos e alginato de sdio), permitindo monitorar as propriedades trmicas e as transies de fase dos mesmos e auxiliando o desenvolvimento dos processos alimentcios (JI et al., 2004).

2.5 DISTRIBUIO DO TAMANHO DAS PARTCULAS A anlise de tamanho de partculas por difrao a laser fcil de operar, rpida e de ampla de leitura. Por este mtodo, as partculas so dispersas num fluido em movimento causando descontinuidades no fluxo do fluido, que so detectadas por uma luz incidente, e correlacionadas com o tamanho de partcula. Ao atingir uma quantidade de partculas, a luz incidente sofre uma interao segundo quatro diferentes fenmenos (difrao, refrao, reflexo e absoro) formando um invlucro tridimensional de luz (PAPINI; LEAL NETO, 2006). O formato e o tamanho deste invlucro so afetados pelo ndice de refrao relativo da partcula no meio dispersante, pelo comprimento de onda da luz, e pelo tamanho e formato da partcula. Detectores estrategicamente posicionados medem a intensidade e o ngulo da luz espalhada. O sinal dos detectores ento convertido para a distribuio de tamanho de partcula atravs de algoritmos matemticos (ALLEN, 1993).

2.6 DIFRAO DE RAIOS-X

A anlise de difrao de raios-X muito utilizada no estudo da estrutura dos polmeros. Um feixe de raios-X incide em um material e parcialmente absorvido, outra parte se espalha e o restante transmitido sem qualquer modificao. O espalhamento dos raios-X ocorre como um resultado da interao do feixe com os eltrons no material. Os raios-X espalhados sofrem interferncia entre si e produzem um padro de difrao que varia com o ngulo de espalhamento. A variao da intensidade espalhada e difratada com o ngulo d informaes sobre a distribuio de densidade eletrnica e, portanto, das posies atmicas dentro do material, caracterizando se o mesmo amorfo ou cristalino (FARAGO et al., 2008; PARIZE, 2009).

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MATERIAL E MTODOS

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3. MATERIAL E MTODOS 3.1. MATERIAL Alginato de sdio Cargill; Maltodextrina Nutrimental; Amido de milho modificado com octenilsuccinato National Starch; leo essencial de laranja pra, Citrus sinensis L. Osbeck, extrado por prensagem a frio, lote: 160/10, data de fabricao: 15/06/2010 Cutrale; Tween 80 Synth; Cloreto de clcio Synth.

Equipamentos: Balana analtica (Toledo, modelo: AdventurerTM, AR2140); Homogeneizador de alta velocidade (Silverson, modelo: L4RT); Torre para secagem por asperso (Spray dryer LABMAQ, modelo: MSD 1.0); Metalizador (Balzers Sputtering, modelo: SCD-030); Microscpico eletrnico de varredura (Jeol, modelo: JSM 6360 LV); Microscpio ptico (Carl Zeiss, modelo: Axio Observer D1); Granulmetro (Cilas, modelo: 1064); Difratmetro de raios-X (Philips , modelo: PW 1830); Balana termogravimtrica (Shimadzu, modelo: TGA-60); Sistema de calorimetria exploratria diferencial (Shimadzu, modelo: DSC60); Sistema de calorimetria exploratria diferencial (Netzsch, modelo: DSC 200 F3 MAIA); Headspace (CTC Analytics, modelo: Combi Pal); Cromatgrafo a gs acoplado ao espectrmetro de massa (Varian, com ion trap, modelo: CG/MS Saturn 2000); Cromatgrafo a gs (Varian, modelo: CG-450 com detector FID).

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MATERIAL E MTODOS

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3.2 MTODOS

3.2.1 Anlise do OE de laranja por cromatografia a gs

A anlise qualitativa e quantitativa por cromatografia a gs do leo essencial de laranja antes das tcnicas de encapsulao foi realizada no Laboratrio de Anlise de Combustveis Automotivos (LACAUT) UFPR. A anlise da composio do leo foi realizada mediante emprego de leo essencial de laranja padro e comparao de seus tempos de reteno por cromatografia a gs de alta resoluo e pela anlise dos espectros de massas com auxlio do Banco de Espectros (de padres sintticos ou isolados de leos essenciais) em CD-ROM do National Institute of Standards and Technology (NIST). A temperatura do injetor foi de 250C (split 1:300), injetando-se 0,5L; uma coluna capilar Chrompack de slica fundida CP-SIL 8 CB, 0.25mm de dimetro interno, 30 m de comprimento e 0,25 m de filme lquido, o gs de arraste utilizado foi o Hlio (1,0 mL/min constante). Temperatura do transfer line: 250C; temperatura do manifold: 80C; temperatura do ion trap: 150C; modulao axial: 4V; intensidade de ionizao: 70 eV, modo de ionizao por impacto de eltrons. Programao de temperatura do forno: temperatura inicial de 40C com elevao de temperatura a 300C na razo de 20C permanecendo por 45 minutos, totalizando 65 minutos de experimento.

3.3 MICROENCAPSULAO DO LEO ESSENCIAL DE LARANJA

Foram realizados os testes preliminares que esto descritos na Tabela 4 e atravs da caracterizao das micropartculas definiu-se quais procedimentos obtiveram os melhores resultados.

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MATERIAL E MTODOS

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Tabela 4 Mtodos para obteno das micropartculas

Mtodo Spray Drying Material Amido/ Maltodextrina Alginato de sdio Coacervao Atomizao Coacervao Bomba peristltica Alginato de sdio Alginato de sdio Reticulante sem Secagem spray dryer A1 A1B Amostra com OE sem OE

sem

spray dryer

A2 A2B B BB C1 C1B C2 C2B C3 C3B C4 C4B C5 C5B C6 C6B

com OE sem OE com OE sem OE com OE sem OE com OE sem OE com OE sem OE com OE sem OE com OE sem OE com OE sem OE

CaCl2 2% CaCl2 0,5% CaCl2 2% CaCl2 1%*

Estufa 30C

Estufa 30C Estufa 30C Estufa 30C Liofilizador Dessecador a vcuo Aps repouso em amido modificado, seca em dessecador a vcuo In natura Sem secagem

C7 C7B

com OE sem OE

*NOTA: As microcpsulas obtidas por coacervao adaptadas com bomba peristltica e reticuladas com CaCl2 1% foram divididas em cinco partes iguais e cada parte passou pelo processo de secagem citado acima.

Todos os mtodos, descritos acima, foram realizados em triplicata. As micropartculas contendo leo essencial de laranja foram chamadas de

micropartculas com OE e as micropartculas desenvolvidas na ausncia deste leo essencial, tambm obtidas para cada mtodo, foram chamadas de controle e acrescidas da letra B. As microcpsulas coacervadas por concentrao de 1% de CaCl2 foi escolhida para passar por diferentes mtodos de secagem por ser a concentrao intermediria em relao a 0,5% e 2,0% e que nas anlises microscpicas preliminares tiveram as melhores configuraes.

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3.3.1 Microencapsulao do OE de laranja atravs do mtodo de spray drying

A Formulao 1 (amostra A1) foi obtida com a seguinte composio: uma soluo de 6,5% (V/V) de leo essencial de laranja, 23% (m/V) de maltodextrina, 6,5% (m/V) de amido modificado, 64% (V/V) de gua destilada. A maltodextrina foi dissolvida a 40C e o amido modificado foi dissolvido a 82C antes de serem incorporados. Aps a mistura dos componentes da formulao, em temperatura ambiente, foi adicionado o leo essencial de laranja e homogeneizada a emulso durante 40min, a 10.000 rpm no homogeneizador Silverson. A Formulao 2 (amostra A2) foi obtida com a seguinte composio: uma soluo de alginato em gua destilada 1,25% (m/V) contendo Tween 80 a 1% (m/V) foi previamente preparada e 1% (V/V) do leo essencial de laranja, foi adicionado sobre a soluo aquosa do polmero, sob agitao mecnica de 10.000 rpm por 2 minutos, temperatura ambiente. As condies de secagem para a formao das microesferas foram baseadas em testes preliminares do equipamento utilizando a mesma matria-prima: dimetro do atomizador: 0,70 mm, presso de atomizao:4,75 kgf.cm-2, fluxo do ar de secagem: 50 L.min-1, fluxo de alimentao da formulao na secagem: 0,44 L.h-1, temperatura de entrada: 150 5 C e temperatura de sada: 80 5 C. As micropartculas foram obtidas em triplicata. A micropartcula controle foi

desenvolvida na ausncia do leo essencial. Os produtos microparticulados foram armazenados em temperatura ambiente. O spray dryer utilizado para a secagem est esquematizado na Figura 9, onde podem ser visualizados seus principais componentes: sistema de entrada da amostra e do ar, cmera de secagem, ciclone e sistema coletor da amostra.

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Figura 9 - Esquema da instalao de secagem por atomizao (VALDUGA et al.,2003).

3.3.2 Microencapsulao do OE de laranja atravs do mtodo de coacervao empregando alginato de sdio

O preparo da emulso foi adaptado seguindo a metodologia utilizada por LERTSUTTHIWONG et al., 2008; PENICHE et al., 2004, GONSALVES et al., 2009. A soluo de alginato em gua destilada 1,25% (m/V) contendo Tween 80 a 1% (m/V) foi previamente preparada e 10% (V/V) do leo essencial de laranja foi

adicionado sobre a soluo aquosa do polmero, sob agitao mecnica de 10.000 rpm por 2 minutos, temperatura ambiente. Primeiro mtodo para a coacervao (amostra B e BB): a emulso de alginato de sdio e leo essencial de laranja foi lentamente aspergida, na vazo de um mL.min-1 utilizando uma bomba peristltica atravs de uma mangueira de silicone at um bico de atomizao com abertura de 0,70 mm e vazo do ar de 50 L.min-1,

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com a utilizao de um atomizador de bancada em um litro de uma soluo aquosa de cloreto de clcio (CaCl2) na concentrao de 2% (m/V) para promover a reticulao (endurecimento) das microcpsulas formadas (adaptado de GONSALVES et al., 2009). Este mtodo est representado na Figura 10.

Figura 10 - Diagrama do sistema de preparao de microcpsulas (YOO et al., 2006).

As microcpsulas de alginato preparadas foram lavadas trs vezes com gua destilada para retirada do Tween 80 e do cloreto de clcio residuais. Aps cada lavagem, as amostras foram filtradas, com posterior eliminao da gua residual. As microcpsulas com e sem OE foram secas em estufa a uma temperatura de 30C por 24 horas, para a posterior caracterizao (LERTSUTTHIWONG et al., 2008; PENICHE et al., 2004, GONSALVES et al., 2009). Segundo mtodo para a coacervao (amostras C, de C1 a C7 incluindo os controles sem leo): a emulso de alginato de sdio e leo essencial de laranja foi aspergida, na vazo de 3,5 mL.min-1 utilizando uma bomba peristltica atravs de uma mangueira de silicone at uma agulha com abertura de 1,20 mm em volume de um litro de solues aquosas de cloreto de clcio (CaCl2) nas concentraes de 0,5% (m/V) (amostra C1) ou de 2,0% (amostra C2) ou de 1,0% (m/V) (amostra C3) para promover a reticulao (endurecimento) das microcpsulas formadas. Em seguida as microcpsulas com e sem OE foram secas em estufa a 30C (adaptado de GONSALVES et al., 2009).

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As microcpsulas obtidas na concentrao intermediria de CaCl2 (1%) foram as amostras escolhidas para variaes de processo de secagem, por liofilizao (amostra C4) e por dessecador a vcuo (amostra C5); e sem secagem, in natura (amostra C7). E as amostras C6 e controle foram obtidas com adio de pelcula de amido modificado. As microcpsulas coacervadas com CaCl2 1% foram deixada em repouso por 10 minutos em soluo 10%(m/V) de amido modificado com octenilsuccinato, aps esse repouso foram secas em dessecador a vcuo.

3.4 CARACTERIZAO DAS MICROPARTCULAS

3.4.1 Estudo morfolgico e de superfcie por microscopia eletrnica de varredura (MEV) O estudo morfolgico e de superfcie das micropartculas contendo o leo essencial de laranja foi realizado por microscopia eletrnica de varredura (ASCHERI et al., 2003; HORST, 2009). As micropartculas foram fixadas em suporte de alumnio e em seguida, foram submetidas metalizao com ouro at a espessura de 350 sob vcuo no equipamento Balzers Sputtering SCD-030. Para visualizao das amostras, obtidas em vrios aumentos (de 110 a 12000 vezes), foi utilizado um microscpio eletrnico de varredura Jeol JSM 6360 LV, com voltagens de acelerao de 15 kV.

3.4.2 Anlise granulomtrica das micropartculas

Para as anlises da distribuio de tamanho dos grnulos, 5g de micropartculas contendo leo essencial de laranja e o controle, obtidas pelo mtodo do spray drying (amostra A1), foram homogenizadas em gua destilada no ultrasom por 60 segundos e aps a soluo estar turva foram medidas no granulmetro a laser, CILAS 1064, do Laboratrio de Anlise de Minerais e Rochas (LAMIR) UFPR. As micropartculas passaram por malhas com abertura de 0,425mm 0,020mm. As micropartculas obtidas com alginato de sdio (amostra A2, B, C1, C2, C3, C4, C5, C6 e C7) e com amido modificado e maltodextrina (amostra A1) foram medidas pelo microscpio ptico Carl Zeiss, modelo: Axio Observer D1.

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3.4.3 Estudo da estabilidade termo-oxidativa pela tcnica de anlise trmica

3.4.3.1 Anlise termogravimtrica (TG-DTG)

As anlises termogravimtricas (TG) e trmica diferencial (DTG) leo essencial de laranja, dos polmeros puros, das micropartculas contendo leo essencial de laranja e dos controles, foram realizadas no laboratrio de anlise trmica da Universidade Positivo UP. As curvas termogravimtricas foram obtidas em um TGA 60 Shimadzu. Cada amostra foi pesada numa balana analtica AY 220 Shimadzu e acondicionadas em micro-cadinhos de alfa-alumina pr-tarados na termobalana. As condies de anlise foram as seguintes (AGGARWALL; DOLLIMORE, 1998): massa da amostra aproximadamente 5,0 mg; atmosfera da cmara, ar sinttico na vazo de 100 mL/min, razo de aquecimento 10C/min, com faixa de temperatura de 30 a 600C.

3.4.3.2 Calorimetria exploratria diferencial (DSC)

As anlises por calorimetria exploratria diferencial em atmosfera de nitrognio do leo essencial de laranja puro, das misturas fsicas dos polmeros puros, das amostras de micropartculas contendo o leo essencial de laranja, os controles, foram realizadas no laboratrio de anlise trmica do Programa de Psgraduao em Qumica UFPR. As curvas DSC foram obtidas em um equipamento Netzsch, modelo DSC 200 F3 MAIA calibrado com padro referncia de ndio puro (99,99%) (IONASHIRO, 2004). Cada amostra foi pesada numa balana analtica Shimadzu AY 220 e acondicionadas em micro-cadinhos de alumnio pr-tarados na termobalana, os quais foram selados. Antes do incio do processo, foi acondicionado no calormetro um micro-cadinho vazio, idntico ao da amostra que foi utilizado como referncia (AGGARWALL; DOLLIMORE, 1998; YU; CHRISTIE, 2001). Nesta anlise a massa foi de aproximadamente 7 mg de amostra, atmosfera de nitrognio lquido com vazo de 50 mL/min e razo de aquecimento 10C/mim. Para o leo essencial de laranja resfriou-se de 20C at -100C, aqueceu-se a 200C. Para a amostra A1, A1B e misturas fsicas dos polmeros aqueceu-se de

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30C a 250C. Para as amostras A2, A2B, B, BB, C3, C3B e C6 aqueceu-se de 30C a 300C. As anlises por calorimetria exploratria diferencial em atmosfera de ar sinttico das amostras de micropartculas contendo o leo essencial de laranja (A2 e C3) e controles (A2B e C3B) foram realizadas no laboratrio de anlise trmica da Universidade Positivo UP. As curvas DSC foram obtidas em um equipamento DSC 60 Shimadzu calibrado com padro de ndio puro (99,99%) (IONASHIRO, 2004). Cada amostra foi pesada numa balana analtica Shimadzu AY 220. Antes do incio do processo, foi acondicionado no calormetro um micro-cadinho vazio, idntico ao da amostra que foi utilizado como referncia (AGGARWALL; DOLLIMORE, 1998; YU; CHRISTIE, 2001). Nesta anlise a massa foi de aproximadamente 2 mg de amostra, atmosfera de ar sinttico com vazo de 100 mL/min, razo de aquecimento 10C/mim com faixa de temperatura entre 30 e 300C.

3.4.4 Difrao de Raios-X

As anlises das micropartculas polimricas contendo o leo essencial de laranja, controle e dos polmeros puros foram realizadas no Laboratrio de Anlise de Minerais e Rochas (LAMIR) UFPR, em difratmetro de raios-X Shimadzu, modelo: XRD-6000. Os difratogramas das amostras atomizadas foram obtidos em equipamento Philips (fonte de radiao Cu-K, varredura angular 2) modelo PW 1830, nas seguintes condies: tubo com nodo de cobre, voltagem 40kV, corrente de 30mA.

3.4.5 Determinao do teor de OE microencapsulado

3.4.5.1 Parmetros do headspace

As anlises foram realizadas no extrator/amostrador headspace, CTC Analytics, modelo: Combi Pal, acoplado ao Cromatgrafo a gs Varian, modelo GC450 com detector FID.

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MATERIAL E MTODOS

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3.4.5.2 Preparo da amostra

O material (1g) foi colocado em 2,4g de etanol, em vial de 20 mL, a temperatura da seringa e da amostra foram de 35C e o tempo de incubao de 10 minutos com agitao a 500 rpm de 20 em 20 segundos.

3.4.5.3 Cromatografia a gs (CG) com o espectmetro de massa acoplado

Para a obteno dos cromatogramas para quantificao do leo essencial nas micropartculas utilizou-se o cromatgrafo a gs Varian, modelo GC-450 com detector FID, com coluna capilar Chrompack de slica fundida CP-SIL 8 CB, 0.32mm de dimetro interno, 60 m de comprimento e 0,5 m de filme lquido A temperatura do injetor foi de 250C (split 1:300), injetando-se 200,0 L;, o gs de arraste utilizado foi o Hlio (2,0 mL/min constante), gs de make up: nitrognio 28 mL/min e temperatura do detector FID: 300C. Fluxo de gs de arraste: 2 mL/min constante, de Hlio alto grau de pureza. Programao de temperatura do forno: temperatura inicial de 40 C, elevao de temperatura a 300C na razo de 20 C/min. Tempo total da corrida: 12 minutos.

3.4.5.4 Curva analtica pelo mtodo da padronizao externa

A determinao do teor do leo essencial de laranja microencapsulado foram feitas pela comparao das reas atribudas aos mesmos com as reas de uma curva analtica. Solues padro de concentraes crescentes do leo essencial de laranja (1,0; 2,0; 3,0; 5,0; 11,0 e 17,0 g L-1 e 28,0; 38,0; 45,0 e 51,0 g L-1) foram analisadas no cromatgrafo a gs nas condies analticas pr-estabelecidas. Aps anlise dessas solues, construram-se curvas analticas, para cada faixa de concentrao, relacionando as reas dos picos atribudas ao limoneno (composto majoritrio do leo essencial de laranja) com a concentrao varivel do leo essencial de laranja. Por regresso linear foram obtidas as equaes das retas, as quais foram utilizadas no clculo das concetraes do OE nos extratos (headspace) das amostras.

MLLER, P.S.

MATERIAL E MTODOS

51

3.4.5.5 Determinao da Eficincia da Encapsulao (%EE)

Aplicando a Equao 1 calculou-se a porcentagem do OE nas formulaes.

%m

OE inicial

m OE formulao m MC formulao

100

(Equao 1)

OE onde, %minicial a porcentagem da massa inicial do OE, m MC formulao a massa seca da

formulao da microcpsula e mOE formulao a massa de OE na formulao inicial.

Microcpsulas (MC) = 72g maltodextrina + 20g amido modificado + 18g OE = 110g

110g MC 18g OE

100% MC
OE 16,36 %minicial

Microcpsulas (MC) = 1,25g alginato de sdio + 9g OE + 1g tween 80 = 11,25g

11,25g MC 9g OE

100% MC
OE 80 %minicial

Aplicando a Equao 2, calculou-se a porcentagem de leo nas amostras.

MC mamostra 0,1636 100 EtOH mamostra

OE %mamostra

(Equao 2)

OE MC onde, % mamostra porcentagem da massa do OE na amostra, mamostra a massa da EtOH amostra de microcpsula e mamostra a massa do solvente etanol na amostra.

A eficincia da encapsulao foi calculada por meio da porcentagem da relao entre a massa de leo essencial final obtida por CG e a massa do leo essencial utilizado na formulao das amostras, usando a Equao 3:

% EE

m OE final
OE mamostra

100

(Equao 3)

MLLER, P.S.

RESULTADOS E DISCUSSES

52

4. RESULTADOS E DISCUSSES

4.1 DETERMINAO DOS CONSTITUINTES DO LEO ESSENCIAL

Os resultados da anlise da composio do leo essencial de laranja por cromatografia a gs, encontrados neste trabalho e os resultados citados em literatura - BERTOLINI, 1999, esto apresentados na Tabela 5. Tabela 5 Principais componentes do leo essencial de laranja.
COMPONENTE CONCENTRAO REFERENCIADA EM LITERATURA* Etanol Acetato de Etila Acetal Hexanal Butirato de Etila Trans-2-hexenal Alfa-pineno Beta-pineno Trans isolimoneno Sabineno Mirceno Octanal Pseudo-limoneno d-limoneno Linalol Alfa-terpineol Decanal 1-dodeceno Neral Geranial Valenceno *FONTE: BERTOLINI, 1999. 0,1% 50ppm 20ppm 200ppm 0,1% 50ppm 0,4% NQ NQ 0,4% 1,8% 0,5% NQ 93,6% 0,5% NQ 0,6% NQ 0,2% 0,1% 1,7% CONCENTRAO ENCONTRADA NESTE TRABALHO NQ NQ NQ NQ NQ NQ 0,447% 0,461% 0,046% NQ 1,767% 0,291% 0,087% 95,930% 0,325% 0,048% NQ 0,265% NQ 0,103% NQ NQ = no quantificado.

O alfa-pineno, o mirceno e o geranial apresentaram valores prximos aos referenciados. O d-limoneno apresentou valor acima do citado, sendo o composto

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majoritrio e os demais componentes apresentaram-se em quantidades menores do que as citadas em literatura. As quantidades dos componentes do leo essencial de laranja, no entanto, podem variar devido poca de coleita, solo, clima, mtodo de extrao e outros.

4.2 MICROSCOPIA ELETRNICA DE VARREDURA (MEV)

A morfologia interna e externa, porosidade e tamanho mdio das micropartculas foram analisados empregando-se a tcnica de Microscopia Eletrnica de Varredura. As imagens de MEV de uma populao mista de microesferas de OE com amido modificado e maltodextrina obtida por spray dryer, amostra A1 (Figura 11), revelam ausncia de fissuras, indicando a formao de um filme contnuo na parede externa das microesferas, com tamanho em torno de 15m. Esse tamanho reduzido devido ao processo e no foi possvel visualizar a face interna das microcpsulas.

Figura 11 Aspectos morfolgicos, obtidos por MEV, das microesferas com leo essencial de laranja, de amido modificado e maltodextrina por spray drying (amostra A1), (a) 600x e (b) 1500x.

A morfologia das micropartculas de alginato de sdio obtidas por spray dryer, Figura 12, observadas por MEV, indicaram um alto grau de aglomerao, promovendo a perda das formas das partculas, formando uma massa nica e no homognea. Portanto, concluiu-se que o mtodo por spray drying indicado para

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obteno de micropartculas de maltodextrina e amido modificado e no para alginato de sdio, para este os melhores resultados foram obtidos por coacervao reticuladas com CaCl2 1% e secas na estufa a 30C, que sero discutidas a seguir.

Figura 12 Aspectos morfolgicos, obtidos por MEV, das micropartculas de alginato de sdio obtidas por spray dryer (amostra A2) (a) 250X, (b) 800X, (c) 1500X. Pela Figura 13, observa-se que as micropartculas de alginato de sdio quando obtidas por atomizao apresentaram-se com superfcie rugosa e rachada.

Figura 13 Aspectos morfolgicos, obtidos por MEV, das micropartculas de alginato de sdio obtidas por atomizao, 1500X (amostra B). Observou-se na Figura 14 que as microcpsulas de alginato de sdio quando reticuladas em concentrao 0,5% de CaCl2 apresentam fissuras na superfcie

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polimrica e na reticulao com 2% de CaCl2 verificou-se uma superfcie rugosa. Portanto, essas concentraes no foram consideradas adequadas para a coacervao.

Figura 14- Aspectos morfolgicos, obtidos por MEV, das microcpsulas de alginato de sdio com leo essencial de laranja pelo processo de coacervao (a) com 0,5% (amostra C1), (b) 1% de CaCl2 (amostra C2). As estruturas externas das microcpsulas, Figura 15, apresentaram-se esfrica, a ponta achatada foi devido pina no preparo da lmina. O coacervado da esquerda foi obtido em bomba peristltica sem agulha, por isso o tamanho maior, em torno de 1750 m. Para o preparo da amostra da direita foi utilizado bomba peristltica e agulha de 1,2mm, por isso o dimetro destas microcpsulas foram da ordem de 780m, revelando boa esfericidade e ausncia de fissuras, indicando a formao de um filme contnuo na parede externa das microcpsulas.

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Figura 15 Aspectos morfolgicos, obtidos por MEV, das microcpsulas de alginato de sdio com leo essencial de laranja pelo processo de coacervao com 1% CaCl2 e secas em estufa a 30C (amostra C3) (a) 142x, (b) 110x . Com o uso de seces transversais, da amostra da Figura 15, pode-se observar na Figura 16 a morfologia do interior das microcpsulas, evidenciando a presena de poros, apresentando uma estrutura porosa na qual provvel haver a presena de leo essencial nas microcpsulas, sugerindo que o mesmo aparentemente apresenta-se encapsulado pela microcpsula. Nesta amostra, utilizou-se a ampliao de 1500x (Figura 16a) e 3000x (Figura 16b), para visualizar as seces transversais, obtidas com auxlio de uma lmina, para observar a estrutura interna.

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Figura 16 Aspectos morfolgicos, obtidos por MEV, da face interna das microcpsulas do leo essencial de laranja com alginato de sdio, por coacervao com 1% CaCl2 e secas em estufa a 30C (amostra C3), (a) 1500x e (b) 3000x. Para as micropartculas de alginato de sdio secas no liofilizador, Figura 17, vericou-se superfcie com aspecto rugoso e com rachaduras.

Figura 17 Aspectos morfolgicos, obtidos por MEV, das micropartculas de alginato de sdio secas no liofilizador (amostra C4). Na Figura 18 observa-se que as micropartculas de alginato de sdio quando secas no dessecador a vcuo, murcharam e a superfcie ficou rugosa.

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Figura 18 Aspectos morfolgicos, obtidos por MEV, das micropartculas de alginato de sdio secas no dessecador a vcuo (amostra C5) (a) 600X, (b) 800X. A Figura 19 apresenta as micropartculas de alginato de sdio que foram recobertas com amido modificado. Estas como as da Figura 18, tambm murcharam, mas a superfcie externa e interna se apresentou mais lisa e uniforme.

Figura 19 Aspectos morfolgicos, obtidos por MEV, da face interna da micropartcula de alginato de sdio, coberta com uma pelcula de amido modificado e seca no dessecador a vcuo (amostra C6) (a) 60X, (b) 800X, (c) face interna, 30X.

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Em ambos os processos, spray drying e coacervao no visualiza-se cavidades na superfcie das micropartculas, o que pode ser um indicativo de ausncia de leo essencial presente na superfcie destas, pois sob vcuo, este leo evapora, e no lugar deste visualizaria-se, atravs do MEV, cavidades na superfcie das micropartculas. Portanto, a boa esfericidade e ausncia destas cavidades (ou fissuras) indicam a formao de um filme contnuo na parede externa das micropartculas (LEIMANN,2008). 4.3 GRANULOMETRIA LASER e podem justificar a maior eficincia de encapsulao

A anlise granulomtrica para as microesferas de leo essencial de laranja com maltodextrina e amido modificado obtidas por spray dryer apresentou uma distribuio de tamanho uniforme (Figura 20), sem presena de aglomerados e com tamanho mdio de 1,02m. Segundo R, 2006, com condies do spray dryer como: fluxo de secagem, temperatura, vazo da amostra foram mantidas constantes, era esperado amostras com tamanho mdio regular.

Figura 20 Distribuio granulomtrica obtida para as microesferas de maltodextrina e amido modificado com leo essencial de laranja, por spray dryer. A anlise granulomtrica das micropartculas por granulometria a laser no foi possvel de ser realizada para as microcpsulas com alginato de sdio, pois h

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necessidade que a amostra turve uma soluo quando dissolvida em gua, e o alginato forma um gel quando dissolvido em gua, no turvando a soluo. Portanto para determinar a granulometria das amostras com alginato de sdio utilizou-se o microscpio ptico Carl Zeiss, modelo Axio Observer D1. Nesta anlise as microcpsulas de leo essencial de laranja com alginato de sdio coacervadas, reticuladas com CaCl2 (0,5%, 1,0% e 2,0%) e secas em estufa apresentaram

tamanho mdio de 919m. possvel visualizar na Figura 21 a microscopia para as microcpsulas com CaCl2 1,0% e secas em estufa. Observou-se tambm que tanto a de 0,5% (amostra C1) como a de 2,0% (amostra C2) apresentaram a mesma faixa de granulometria apresentada na Figura 21.

Figura 21 - Microscopia ptica das microcpsulas de leo essencial de laranja com alginato de sdio coacervadas, reticuladas com CaCl2 1,0% e secas em estufa (amostra C3). As microcpsulas de leo essencial de laranja com alginato de sdio coacervadas e secas por liofilizador, amostra C4, dessecador a vcuo, amostra C5) e cobertas com uma pelcula de amido modificado e secas em dessecador a vcuo (amostra C6), apresentaram granulometria mdia de 646m. Na Figura 22 ilustra-se essa microscopia para as microcpsulas secas em liofilizador e reticuladas CaCl2 1%.

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Figura 22 - Microscopia ptica das microcpsulas de leo essencial de laranja com alginato de sdio coacervadas, reticuladas com CaCl2 1,0% e secas em liofilizador (amostra C4). As microesferas de leo essencial de laranja com maltodextrina e amido modificado, apresentaram no microscpio ptico granulometria mdia de 0,98m (Figura 23). Portanto, prxima da distribuio da granulometria a laser.

Figura 23 - Microscopia ptica das microesferas de leo essencial de laranja com maltodextrina e amido modificado obtido por spray dryer (amostra A1).

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4.4 ANLISES TRMICAS 4.4.1 Termogravimetria (TG) e Anlise Trmica Diferencial (DTA)

A Tabela 6 fornece dados referentes ao comportamento trmico durante o aumento gradativo de temperatura do leo essencial de laranja, dos polmeros (amido modificado com octenilsuccinato, maltodextrina e alginato de sdio) puros, e das microesferas com amido modificado e maltodextrina obtidas por spray dryer (amostras A1, A1B) e com alginato de sdio por spray dryer (A2 e A2B); e das microcpsulas de alginato de sdio obtidas por coacervao variando as concentraes de CaCl2 0,5%, 1% e 2% (C1, C1B, C3, C3B, C2, C2B respectivamente) e microcpsulas de alginato de sdio coacervada CaCl2 1% sem secagem (C7). As amostras com a letra B como j mencionado, so os controles, sem o leo.

Tabela 6 - Parmetros termogravimtricos do leo essencial de laranja puro, dos polmeros puros e das micropartculas

Figuras 24 a 38 ilustram as perdas de massa, do leo essencial de laranja puro, dos polmeros puros, das microesferas obtidas por spray dryer e das microcpsulas obtidas por coacervao, na sequncia da Tabela 6, que sero discutidas a seguir. Ilustram ainda, as variaes nas capacidades calorficas (mV) e as mudanas de fase registradas nas formas de picos endotrmicos e exotrmicos (Anlise Trmica Diferencial -DTA).

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Na Figura 24 pode-se observar que o leo essencial de laranja puro apresenta apenas uma etapa de decomposio trmica que pode ser atribuda ao processo de volatilizao e/ou decomposio entre 30C e 100C (m = 99%) mostrada pela curva TG e por um pico endotrmico de 100C pela curva DTA. O restante (1,0%) volatilizou at a temperatura final de anlise (300C).

Figura 24 - Curva termogravimtrica de leo essencial de laranja puro em atmosfera de ar sinttico (10C/ min, 100 mL/min, 30 - 300C, variao da massa versus temperatura).

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Na Figura 25 pode-se observar que o amido modificado puro apresenta trs eventos de decomposio trmica. Um evento entre 30C e 100C (m = 2%) caracterstico de perda de umidade, correspondente ao pico endotrmico de 88C, um segundo evento trmico entre 250C e 410C (m = 75%), correspondente a pico exotrmico de 357C e um terceiro evento relativo etapa de decomposio do material carbonceo do amido modificado observado na faixa de temperatura entre 410 e 500C (m = 23%) correspondente ao pico exotrmico de 459C (DTA). De acordo com Aggarwall e Dollimore (1998), o tratamento trmico em amidos normalmente leva sua despolimerizao quando a temperatura aplicada excede os 300C. O amido passa por uma srie de alteraes irreversveis: num primeiro momento a alterao estrutural leva o polmero formao de pirodextrinas. Em temperaturas mais elevadas ainda, a despolimerizao das macromolculas levam formao de levoglucosana, furfural, produtos de baixa massa molecular e volteis, enfim, produtos carbonceos (cinzas).

Figura 25 - Curva termogravimtrica de amido modificado puro em atmosfera de ar sinttico (10C/ min, 100 mL/min, 30 - 600C, variao da massa versus temperatura).

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Na Figura 26 pode-se observar que a maltodextrina pura apresenta trs eventos de decomposio trmica. Um evento entre 30C e 100C (m = 2%) caracterstico de perda de umidade, correspondente ao pico endotrmico de 80C, um evento entre 200C e 440C (m = 72%), correspondente ao pico exotrmico de 358C e um terceiro evento, relativo etapa de decomposio do material carbonceo da maltodextrina observado na faixa de temperatura entre 440C e 520C (m = 26%), correspondente ao pico exotrmico de 494C (DTA).

Figura 26 - Curva termogravimtrica de maltodextrina pura em atmosfera de ar sinttico (10C/ min, 100 mL/min, 30 - 600C, variao da massa versus temperatura).

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Na Figura 27 pode-se observar que o alginato de sdio puro apresenta trs eventos de decomposio trmica. Um evento entre 30C e 100C (m = 15%) caracterstico da eliminao de umidade, correspondente ao pico endotrmico de 70C, um segundo evento entre 200C e 300C (m= 35%), correspondente ao pico exotrmico de 258C atribudo a primeira etapa de decomposio trmica e um terceiro evento relativo etapa de decomposio do material carbonceo do alginato de sdio observado na faixa de temperatura entre 300 e 500C (m = 15%), correspondente ao pico exotrmico de 354C (DTA). O restante (35 %) resultado de materiais que no conseguiram volatilizar na temperatura final de anlise (600 C), tais como as cinzas.

Figura 27 - Curva termogravimtrica de alginato de sdio puro em atmosfera de ar sinttico (10C/ min, 100 mL/min, 30 - 500C, variao da massa versus temperatura).

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Na Figura 28 pode-se observar que a amostra A1 apresenta trs eventos de decomposio trmica. Um evento entre 30C e 100C (m = 10%) caracterstico da eliminao de umidade, correspondente ao pico endotrmico (desidratao) de 66C, um segundo evento entre 208C e 435C (m = 75%), correspondente ao pico exotrmico de 352C, e um terceiro evento relativo etapa de decomposio do material carbonceo da amostra A1 observado na faixa de temperatura entre 435 e 496C (m = 15%), correspondente ao pico exotrmico de 480C (DTA). O restante (15 %) resultado de materiais que no conseguiram volatilizar na temperatura final de anlise (600 C), tais como as cinzas.

Figura 28 - Curva termogravimtrica de microesferas de leo essencial de laranja com maltodextrina e amido modificado obtida por spray dryer(amostra A1) em atmosfera de ar sinttico (10C/ min, 100 mL/min, 30 - 600C, variao da massa versus temperatura).

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Na Figura 29 pode-se observar que a amostra A1B apresenta trs eventos de decomposio trmica. Um evento entre 30C e 100C (m = 10%) caracterstico da eliminao de umidade, correspondente ao pico endotrmico (desidratao) de 91C, um segundo evento entre 208C e 435C (m = 75%), correspondente ao pico exotrmico de 362C, e um terceiro evento relativo etapa de decomposio do material carbonceo da amostra A1 observado na faixa de temperatura entre 435C e 496C (m = 15%), correspondente ao pico exotrmico de 478C (DTA).

Figura 29 - Curva termogravimtrica de microesferas de maltodextrina e amido modificado obtida por spray dryer (amostra A1B) em atmosfera de ar sinttico (10C/ min, 100 mL/min, 30 - 600C, variao da massa versus temperatura).

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Na Figura 30 pode-se observar que a amostra A2 apresenta quatro eventos de decomposio trmica. Um evento entre 30C e 100C (m = 3%) caracterstico da eliminao de umidade, correspondente ao pico endotrmico (desidratao) de 75C, um evento entre 149C e 219C (m = 19%), correspondente ao pico exotrmico (degradao) de 184C, um terceiro evento entre 219C e 273C (m = 33%), correspondente ao pico exotrmico de 239C, e um quarto evento relativo etapa de decomposio do material carbonceo da amostra A2 observado na faixa de temperatura entre 273 e 380C (m = 19%), correspondente ao pico exotrmico de 316C (DTA). O restante (26%) resultado de materiais que no conseguiram volatilizar na temperatura final de anlise (600 C), tais como as cinzas.

Figura 30 - Curva termogravimtrica de microesferas de leo essencial de laranja com alginato de sdio obtida por spray dryer (amostra A2) em atmosfera de ar sinttico (10C/ min, 100 mL/min, 30 - 600C, variao da massa versus temperatura).

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Na Figura 31 pode-se observar que a amostra A2B apresenta quatro eventos de decomposio trmica. Um evento entre 30C e 100C (m = 3%) caracterstico da eliminao de umidade, correspondente ao pico endotrmico (desidratao) de 72C, um evento entre 157C e 224C (m = 12%), correspondente ao pico exotrmico (degradao) de 191C, um terceiro evento entre 224C e 286C (m = 26%), correspondente ao pico exotrmico de 245C, e um quarto evento relativo etapa de decomposio do material carbonceo da amostra A2B observado na faixa de temperatura entre 286C e 380C (m = 13%), correspondente ao pico exotrmico de 320C (DTA). O restante (46%) resultado de materiais que no conseguiram volatilizar na temperatura final de anlise (600 C), tais como as cinzas.

Figura 31 - Curva termogravimtrica de microesferas de alginato de sdio obtida por spray dryer (amostra A2B) em atmosfera de ar sinttico (10C/ min, 100 mL/min, 30 600C, variao da massa versus temperatura).

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Na Figura 32 pode-se observar que a amostra C1 apresenta quatro eventos de decomposio trmica. Um evento entre 30C e 100C (m = 6%) caracterstico da eliminao de umidade, correspondente ao pico endotrmico (desidratao) de 69C, um evento entre 100C e 290C (m = 32%), correspondente ao pico exotrmico (degradao) de 280C, um terceiro evento entre 290C e 500C (m = 34%), correspondente ao pico exotrmico de 492C e um quarto evento entre 500C e 600C (m = 9%), correspondente ao pico exotrmico de 597C (DTA). O restante (19%) resultado de materiais que no conseguiram volatilizar na temperatura final de anlise (600 C), tais como as cinzas.

Figura 32 - Curva termogravimtrica de microcpsulas de leo essencial de laranja com alginato de sdio obtida por coacervao reticulada com CaCl2 0,5% (amostra C1) em atmosfera de ar sinttico (10C/ min, 100 mL/min, 30 - 600C, variao da massa versus temperatura).

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Na Figura 33 pode-se observar que a amostra C1B apresenta quatro eventos de decomposio trmica. Um evento entre 30C e 100C (m = 3%) caracterstico da eliminao de umidade, correspondente ao pico endotrmico (desidratao) de 85C, um evento entre 108C e 209C (m = 5%), correspondente ao pico exotrmico (degradao) de 209C, um terceiro evento entre 209C e 437C (m = 41%), correspondente ao pico exotrmico de 284C e um quarto evento entre 437C e 541C (m = 51%), correspondente ao pico exotrmico de 514C (DTA).

Figura 33 - Curva termogravimtrica de microcpsulas de alginato de sdio obtida por coacervao reticulada com CaCl2 0,5% (amostra C1B) em atmosfera de ar sinttico (10C/ min, 100 mL/min, 30 - 600C, variao da massa versus temperatura).

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Na Figura 34 pode-se observar que a amostra C2 apresenta quatro eventos de decomposio trmica. Um evento entre 30C e 100C (m = 13%) caracterstico da eliminao de umidade, correspondente ao pico endotrmico (desidratao) de 68C, um evento entre 100C e 290C (m = 27%), correspondente ao pico exotrmico (degradao) de 190C, um terceiro evento entre 290C e 458C (m = 16%), correspondente ao pico exotrmico de 414C e um quarto evento entre 458C e 600C (m = 10%), correspondente ao pico exotrmico de 499C (DTA). O restante (34%) resultado de materiais que no conseguiram volatilizar na temperatura final de anlise (600 C), tais como as cinzas.

Figura 34 - Curva termogravimtrica de microcpsulas de leo essencial de laranja com alginato de sdio obtida por coacervao reticulada com CaCl2 2,0% (amostra C2) em atmosfera de ar sinttico (10C/ min, 100 mL/min, 30 - 600C, variao da massa versus temperatura).

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Na Figura 35 pode-se observar que a amostra C2B apresenta quatro eventos de decomposio trmica. Um evento entre 30C e 100C (m = 14%) caracterstico da eliminao de umidade, correspondente ao pico endotrmico (desidratao) de 69C, um evento entre 100C e 292C (m = 26%), correspondente ao pico exotrmico (degradao) de 196C, um terceiro evento entre 292C e 444C (m = 18%), correspondente ao pico exotrmico de 408C e um quarto evento entre 444C e 600C (m = 16%), correspondente ao pico exotrmico de 463C (DTA). O restante (26%) resultado de materiais que no conseguiram volatilizar na temperatura final de anlise (600 C), tais como as cinzas.

Figura 35 - Curva termogravimtrica de microcpsulas de alginato de sdio obtida por coacervao reticulada com CaCl2 2,0% (amostra C2B) em atmosfera de ar sinttico (10C/ min, 100 mL/min, 30 - 600C, variao da massa versus temperatura).

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Na Figura 36 pode-se observar que a amostra C3 apresenta quatro eventos de decomposio trmica. Um evento entre 30C e 100C (m = 4%) caracterstico da eliminao de umidade, correspondente ao pico endotrmico (desidratao) de 84C, um evento entre 100C e 377C (m = 39%), correspondente ao pico exotrmico (degradao) de 283C, um terceiro evento entre 377C e 527C (m = 13%), correspondente ao pico exotrmico de 378C e um quarto evento entre 563C e 600C (m = 10%), correspondente ao pico exotrmico de 594C (DTA). O restante (34%) resultado de materiais que no conseguiram volatilizar na temperatura final de anlise (600 C), tais como as cinzas.

Figura 36 - Curva termogravimtrica de microcpsulas de leo essencial de laranja com alginato de sdio obtida por coacervao reticulada com CaCl2 1,0% (amostra C3) em atmosfera de ar sinttico (10C/ min, 100 mL/min, 30 - 600C, variao da massa versus temperatura).

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Na Figura 37 pode-se observar que a amostra C3B apresenta quatro eventos de decomposio trmica. Um evento entre 30C e 100C (m = 8%), correspondente ao pico exotrmico (degradao) de 68C, um segundo evento entre 100C e 308C (m = 39%), correspondente ao pico exotrmico de 292C, um terceiro evento entre 308C e 538C(m = 12%), correspondente ao pico exotrmico de 539C e um quarto evento relativo etapa de decomposio do material carbonceo da amostra C3B observado na faixa de temperatura entre 532C e 600C (m = 13%), correspondente ao pico exotrmico de 563C (DTA).

Figura 37 - Curva termogravimtrica de microcpsulas de alginato de sdio obtida por coacervao reticulada com CaCl2 1,0% (amostra C3B) em atmosfera de ar sinttico (10C/ min, 100 mL/min, 30 - 600C, variao da massa versus temperatura).

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Na Figura 38 pode-se observar que a amostra C7 apresenta trs eventos de decomposio trmica. Um evento entre 30C e 100C (m = 60%) caracterstico da eliminao de umidade, correspondente ao pico endotrmico (desidratao) de 86C, um evento entre 200C e 479C (m = 32%), correspondente ao pico exotrmico (degradao) de 326C e um terceiro evento entre 534C e 600C (m = 8%), correspondente ao pico exotrmico de 547C (DTA).

Figura 38 - Curva termogravimtrica de microcpsulas de leo essencial de laranja com alginato de sdio obtida por coacervao reticulada com CaCl2 1,0% in natura (sem secagem) (amostra C7) em atmosfera de ar sinttico (10C/ min, 100 mL/min, 30 - 600C, variao da massa versus temperatura). Aps anlise da Tabela 6 e das curvas termogravimtricas obtidas pode-se verificar que na anlise trmica para o OE puro, a sua decomposio foi na faixa de 30 a 100C. Quando microencapsulado com maltodextrina e amido modificado por spray dryer, a temperatura de decomposio aumentou para a faixa de 208 a 480C, para a microencapsulao com alginato de sdio por coacervao e seco em estufa tambm aumentou a faixa de temperatura para 100 a 600C, indicando que as microcsulas aumentaram a estabilidade trmica do OE J para as micropartculas sem processo de secagem, a faixa de temperatura de degradao manteve seu incio em 30C, apenas estendendo o final para 600C (Figura 38). O mtodo de obteno das microesferas por spray dryer no influenciou na estabilidade trmica dos polmeros puros: amido modificado (Figura 25) e maltodextrina (Figura 26). Comparando-se com a Figura 28, microesferas de OE

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com amido modificado, maltodextrina por spray dryer amostra A1 no houve diferena nos eventos trmicos observados nas curvas termogravimtricas. Comparando-se as Figuras 28 (amostra A1, microesferas de OE com amido modificado e maltodextrina por spray dryer) e Figura 29 (amostra A1B, microesferas de amido modificado e maltodextrina por spray dryer) no houve alterao da estabilidade trmica. No entanto, quando foi utilizado alginato de sdio por spray dryer, amostra A2B (Figura 31) houve modificao em relao ao alginato de sdio puro (Figura 27). Observou-se um evento a mais na faixa de temperatura entre 160C e 210C quando da formao da microesfera. No mtodo de coacervao adaptado por bomba peristltica com

concentrao variando de CaCl2 (0,5%; 1,0% e 2,0%) (Figuras 32, 36 e 34, respectivamente) observou-se que com o aumento da concentrao manteve-se o perfil da curva termogravimtrica mas, diminuiu a intensidade do evento trmico. As degradaes ocorreram em faixas de temperatura prximas. Comparando as microcpsulas com leo essencial de laranja e sem leo por coacervao e com variao de CaCl2, as concentraes de 0,5% apresentaram um evento trmico a mais quando o leo estava presente. As demais curvas termogravimtricas com outras concentraes de CaCl2 (1,0% e 2,0%) no apresentaram alterao de estabilidade trmica. Observando-se as Figuras 24 (OE), Figura 38 (amostra C7, microcpsulas de OE com alginato de sdio coacervadas com CaCl2 1,0% sem secagem) e Figura 36 (amostra C3, microcpsulas de OE com alginato de sdio coacervadas com CaCl2 1,0% seca em estufa) verifica-se que o processo de secagem deslocou o evento trmico (de degradao) da temperatura de 100C para uma faixa acima de 200C. O processo de secagem uma etapa importante para proteger termicamente o leo essencial de laranja.

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4.4.2 Calorimetria Exploratria Diferencial DSC

As temperaturas dos eventos trmicos, obtidos das curvas de DSC, so definidas como as temperaturas de pico (Tp). As curvas tpicas so mostradas nas Figuras 39 a 46. A Tabela 7 contm os valores obtidos para temperatura de pico (T p) para as anlises de DSC do leo essencial de laranja, das microesferas com maltodextrina e amido modificado obtidas por spray dryer (A1, A1B), das microesferas com alginato de sdio obtidas por spray dryer (A2, A2B), das microcpsulas com alginato de sdio coacervadas adaptadas com atomizao (B, BB), das microcpsulas coacervadas adaptadas com bomba peristltica, reticuladas com CaCl2 1% seca em estufa (C3, C3B), das microcpsulas coacervadas adaptadas com bomba peristltica, reticuladas com CaCl2 1% cobertas com uma pelcula de amido modificado e secas em dessecador a vcuo (C6) e das misturas fsicas: amido modificado e maltodextrina; alginato de sdio, amido modificado e leo essencial de laranja. As amostras A2, A2B, C3 e C3B foram realizadas em atmosfera de ar sinttico e de nitrognio. As amostras com a letra B no contm leo essencial de laranja, so os controles, como j mencionado. Tabela 7 Temperatura de pico para as anlises de DSC do leo essencial de laranja puro, das micropartculas e das misturas fsicas dos polmeros

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RESULTADOS E DISCUSSES

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Na Figura 39 pode-se observar que o leo essencial de laranja apresenta um pico endotrmico a 183,9C, correspondente ao processo de evaporao. No trabalho de Martins et al. (2011) o leo essencial de laranja na anlise por

calorimetria exploratria diferencial apresentou um pico endotrmico a 179C, apresentando tambm apenas uma fase de mudana (evaporao).

Figura 39- Curva calorimtrica de leo essencial de laranja puro em atmosfera de nitrognio (10C/ min, 50 mL/min, -100C a 200C, variao do fluxo de calor (u.a.) versus temperatura). . Comparando a curva calorimtrica de microesferas de amido modificado e maltodextrina obtida por spray dryer com leo (Figura 40a), sem leo (Figura 40b) e com a mistura fsica de amido modificado e maltodextrina (Figura 40c) observa-se que a presena do leo essencial de laranja interferiu no comportamento trmico das microesferas (amostra A1). A amostra A1B (Figura 40b) apresentou um evento endotrmico em 121,9C e a mistura fsica (Figura 40c), um evento endotrmico em 125,1C com comportamento trmico semelhante, enquanto para a amostra A1 (Figura 40a), o evento endotrmico mais significativo foi em 182C com alterao do perfil calorimtrico. Comparando a Figura 40b e 40c verifica-se que o processo de obteno das microesferas por spray dryer no interfere no comportamento trmico dos polmeros.

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Figura 40- Curva calorimtrica de (a) microesferas de leo essencial de laranja com amido modificado e maltodextrina obtidas pelo mtodo de spray dryer (amostra A1) em atmosfera de nitrognio, (b) microesferas de amido modificado e maltodextrina obtidas pelo mtodo de spray dryer (amostra A1B) em atmosfera de nitrognio e (c) mistura fsica de amido modificado e maltodextrina em atmosfera de nitrognio (10C/ min, 50 mL/min, 30 a 250C, variao do fluxo de calor (u.a.) versus temperatura).

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Observando-se a Figura 41 e a Figura 42 verifica-se que para as microesferas de alginato obtidas de sdio por spray dryer com leo essencial de laranja (Figura 41a e 41b) e sem leo (Figura 42a e 42b) e em ambas as atmosferas: ar sinttico (Figura 41a e 42a) e nitrognio (Figura 41b e 42b), no houve alterao do comportamento trmico.

Figura 41 - Curva calorimtrica de microesferas de leo essencial de laranja com alginato de sdio obtidas pelo mtodo de spray dryer (amostra A2) em atmosfera de (a) ar sinttico, (b) nitrognio (10C/ min, 50 mL/min, 30 a 300C, variao do fluxo de calor (u.a.) versus temperatura).

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Figura 42 - Curva calorimtrica de microesferas de alginato de sdio obtidas pelo mtodo de spray dryer (amostra A2B) em atmosfera de (a) ar sinttico, (b) nitrognio (10C/ min, 50 mL/min, 30 - 300C, variao do fluxo de calor (u.a.) versus temperatura).

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Observando-se a Figura 43a e a Figura 43b verifica-se que o comportamento trmico foi semelhante para as microcpsulas de alginato de sdio obtidas por coacervao adaptada com atomizao tanto para as amostras com leo essencial de laranja quanto para as amostras controle.

Figura 43 - Curva calorimtrica de microcpsulas de alginato de sdio obtidas pelo mtodo de coacervao adaptada com atomizao em atmosfera de nitrognio (a) com leo essencial de laranja (amostra B), (b) sem leo essencial de laranja (amostra BB) (10C/ min, 50 mL/min, 30 - 300C, variao do fluxo de calor (u.a.) versus temperatura).

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Observando-se a Figura 44 e a Figura 45 verifica-se que o comportamento trmico foi igual para as microcpsulas de alginato de sdio coacervadas e reticuladas com CaCl2 1% com leo essencial de laranja e sem leo, tanto em atmosfera de ar sinttico (Figura 44a e 45a) bem como em atmosfera de nitrognio (Figura 44b e 45b).

Figura 44 - Curva calorimtrica de microcpsulas de leo essencial de laranja com alginato de sdio obtidas pelo mtodo de coacervao e reticulada com CaCl2 1,0% (amostra C3) em atmosfera de (a) ar sinttico, (b) nitrognio (10C/ min, 50 mL/min, 30 - 300C, variao do fluxo de calor (u.a.) versus temperatura).

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Figura 45 Curva calorimtrica de microcpsulas de alginato de sdio obtidas pelo mtodo de coacervao e reticulada com CaCl2 1,0% (amostra C3B) em atmosfera de (a) ar sinttico, (b) nitrognio (10C/ min, 50 mL/min, 30 - 300C, variao do fluxo de calor (u.a.) versus temperatura).

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Comparando-se as microcpsulas de leo essencial de laranja com alginato de sdio coacervadas e reticuladas com CaCl2 1,0% e colocadas em banho de amido modificado (Figura 46a) com a mistura fsica de leo, alginato de sdio e amido modificado (Figura 46b) observa-se que o comportamento trmico foi alterado para a amostra C6 (Figura 46a) observa-se um evento endotrmico em 95C e segundo evento, exotrmico, em 265C e 295C e para a mistura fsica (Figura 46b), um evento endotrmico em 153C e um evento exotrmico em 240C. Portanto, como as amostras C3 e C3B (Figuras 44 e 45 respectivamente) no apresentaram alterao, conclui-se que na amostra C6 h alterao do comportamento trmico aps secagem em estufa est relacionada com a presena do amido modificado.

Figura 46 Curva calorimtrica de (a) microcpsulas de leo essencial de laranja com alginato de sdio obtidas pelo mtodo de coacervao e reticulada com CaCl 2 1,0% e colocadas em banho de amido modificado (amostra C6) em atmosfera de nitrognio e (b) mistura fsica de leo essencial de laranja, alginato de sdio e amido modificado em atmosfera de nitrognio (10C/ min, 50 mL/min, 30 - 300C, variao do fluxo de calor (u.a.) versus temperatura).

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Observando-se as curvas calorimtricas verificou-se que os resultados no foram conclusivos em relao as alteraes do comportamento trmico tanto do OE como dos polmeros e das micropartculas obtidas.

4.5 DIFRATOMETRIA DE RAIOSX (DRX) A anlise por difrao de raios-x foi realizada com o objetivo de verificar as propriedades de cristanilidade dos polissacardeos utilizados e das micropartculas que poderiam afetar a cintica de liberao do OE e a velocidade de degradao da matriz polissacardica (CANEVAROLO JR., 2004). A partir das anlises de difrao de raios-X, observou-se que as micropartculas apresentaram-se amorfas, ou seja, nenhuma regio cristalina foi definida. Acredita-se que, como a secagem da amostra rpida, no h tempo suficiente para que o leo essencial presente nas amostras defina caractersticas cristalinas (Figura 47).

Figura 47 Difratogramas para amostras obtidas por: spray drying com amido modificado e maltodextrina - (a) microcpsulas com OE (amostra A1), (b) microcpsulas controle (amostra A1B) - e por coacervao com alginato de sdio (c) microcpsulas controle (C3B) e (d) microcpsulas com OE (C3). Obs: o pequeno pico observado nos grficos deve-se a difrao do suporte da amostra.

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RESULTADOS E DISCUSSES

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4.6 QUANTIFICAO DE LEO ESSENCIAL NAS MICROPARTCULAS

A linearidade de resposta do detector foi verificada pelas curvas analticas preparadas conforme descritas no item 3.4.5.4. Na Figura 48a e 48b esto representadas as curvas analticas quando solues padro de leo essencial de laranja foram analisadas por CG. A linearidade foi avaliada pelo coeficiente correlao determinado pela regresso linear. Os valores dos coeficientes de correlao (R2) obtidos da regresso linear dos dados experimentais esto de acordo com as normas estabelecidas pelo INMETRO que recomenda valores superiores a 0,90, indicando que existe uma resposta linear dos detectores na faixa de concentrao trabalhada para o leo essencial de laranja (INMETRO, 2003).

Figura 48 Curvas analticas preparadas a partir de solues padro de leo essencial de laranja. (a) Na faixa de concentrao entre 1,0 e 17,0 g L-1 analisados por CG. Para doseamento do teor do OE microencapsulado com maltodextrina e amido modificado por spray dryer. (b) Na faixa de concentrao de 28,0 a 51,0 g L1 analisados por CG. Para doseamento do teor de OE microencapsulado com alginato de sdio por coacervao.

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RESULTADOS E DISCUSSES

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Com a concentrao do OE final encontrado (por anlise CG) e a concentrao inicial nas micropartculas foi calculada a eficincia de encapsulao (E.E.), conforme item 3.4.5.5. A Tabela 8 fornece dados referentes concentrao inicial e a concentrao final de OE nas anlises por cromatografia a gs, bem como a eficincia de encapsulao calculado para as microesferas de leo essencial de laranja com amido modificado e maltodextrina obtidas por spray dryer (amostra A1), essas foram armazenadas em temperatura ambiente (30C) por 10 meses; das microcpsulas de OE com alginato de sdio obtidas por coacervao e reticulada com CaCl2 1% secas em estufa (C3), essas foram armazenadas em temperatura ambiente (30C) por 3 meses; das microcpsulas de OE com alginato de sdio obtidas por coacervao e reticulada com CaCl2 1% sem secagem (C7), essas foram armazenadas em duas formas distintas, em etanol e sem etanol, por 40 dias a -10C.

Tabela 8 Teor do leo essencial nas micropartculas.

Amostra Concentrao OE Final % 8,9704 8,9388 Concentrao OE Amostra (inicial) % 9,0291 9,0000 Eficincia de Encapsulao OE (E.E.) % 99,35% 99,32%

A1 A1 armazenada por 10 meses em temperatura de 30C

C3
C3 armazenada por 5 meses em temperatura de 30C C7 C7 armazenada por 40 dias em temperatura de -10C C7 armazenada por 40 dias em etanol em temperatura de -10C

41,4922 41,4882

41,7040 41,7176

99,49% 99,45%

41,4962 8,6010

41,7000 34,1205

99,51% 25,21%

10,4032

32,4897

32,02%

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RESULTADOS E DISCUSSES

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As microesferas de amido modificado e maltodextrina (amostra A1) aps 10 meses mantiveram o teor de leo essencial retido. As microcpsulas de alginato de sdio coacervadas e reticuladas com CaCl 2 na concentrao de 1% e secas em estufa (amostra C3) aps 5 meses mantiveram o teor de leo essencial retido. As microcpsulas de alginato de sdio coacervadas e reticuladas com CaCl2 na concentrao de 1% in natura, ou seja, sem secagem (amostra C7), aps 40 dias de armazenagem tiveram uma queda no teor em torno de 70%. A metodologia do headspace possibilitou utilizar uma quantidade reduzida de amostra (1g) e evitou perdas dos compostos volteis, pois este processo esta acoplado ao cromatgrafo a gs, viabilizando a quantificao do teor de leo essencial retido nas micropartculas.

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CONCLUSES

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5. CONCLUSES

O leo essencial de laranja teve sua composio determinada por cromatografia a gs acoplada ao espectrmetro de massa. Apresentando 96% de dlimoneno. Para a determinao do teor do leo essencial de laranja microencapsulado adaptou-se uma metodologia efetiva por extrao em headspace acoplada ao cromatgrafo a gs. As micropartculas de maltodextrina e amido modificado preparadas por spray dryer, resultaram em materiais esfricos ou quase esfricos, com baixa disperso granulomtrica, com granulometria mdia de 1,02 m. A eficincia de encapsulao verificada, para esse sistema, foi de 99,32%. Mesmo aps 10 meses armazenados, essas mantiveram as concentraes de leo essencial estveis. As micropartculas elaboradas com alginato de sdio por coacervao (reticuladas com CaCl2 na concentrao de 1% e secas em estufa a 30C) revelaram partculas esfricas, com superfcie lisa e homognea, com dimetro mdio elevado, quando comparada a metodologia acima, em torno de 780m, devido ao calibre da agulha utilizada. Tambm foi observado valores elevados para a eficincia da encapsulao do ativo de 99,49%. Pela anlise termogravimtrica verificou-se o aumento da estabilidade termooxidativa do leo pela presena da microcpsula polimrica indepente do processo e do polmero utilizado. Essas anlises, tambm, mostraram que o processo de secagem uma etapa importante para proteger termicamente o leo essencial de laranja. Pela anlise calorimtrica exploratria diferencial (DSC) observou-se um evento endotrmico por volta de 183C para o OE. Pela difrao de raios-X verificou-se que as amostras no cristalizaram. Atravs deste trabalho observou-se que, para obteno de micropartculas de alginato de sdio para encapsulao do leo essencial de laranja, os mtodos por spray drying com atomizao no so indicados.

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SUGESTES PARA TRABALHOS FUTUROS

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6. SUGESTES PARA TRABALHOS FUTUROS

Trabalhar com outros polmeros (como quitosana, por exemplo) e outras metodologias de microencapsulao ou nanoencapsulao (como incluso em lipossomas, por exemplo) para o leo essencial de laranja. Usar as mesmas matrizes polimricas e mtodos de encapsulao deste trabalho para outros princpios ativos, menos volteis, utilizando a liofilizao como mtodo de secagem. Determinar a granulometria das micropartculas de alginato com

granulometria a laser em equipamento que opera a seco, para no haver necessidade de turvar a amostra. Definir metodologia para visualizar a microscopia da parede interna das microcpsulas de amido e maltodextrina obtidas por spray dryer. Aperfeioar as anlises trmicas das micropartculas, definindo por simulao a vida de prateleira das mesmas e comparar com a metodologia de shelf life convencional. Aprofundar o estudo pelo TG/DTA para determinar a presena e quantidade de leo nas micropartculas.

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REFERNCIAS

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