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Biomedicina e Farmacoterapia 70 (2015) 12–18

Disponível on-line em

Ciência Direta
www.sciencedirect.com

Artigo original

Ação imunomoduladora de oleorresinas de Copaifera spp sobre citocinas

produção por monócitos humanos
a
Karina Basso Santiago , Bruno José Conti a , Bruna Fernanda Murbach Teles Andrade a
,
b
Jonas Joaquim Mangabeira da Silva d , Hervé' Louis Ghislain Rogez , Eduardo José Crevelin d ,
c

Luiz Alberto Beraldo de Moraes e

, Rodrigo Veneziani , Sérgio Ricardo Ambrósio
e
,
b
Jairo Kenupp Bastos , José´ Maurício Sforcin a, *
aDepartamento de Microbiologia e Imunologia, Instituto de Biociências, UNESP, 18618-970, Botucatu, SP, Brasil bDepartamento de Ciências
Farmacêuticas, Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Universidade de São Paulo, 14040-903, Ribeirão Preto, SP, Brasil
c
Faculdade de Engenharia de Alimentos, Instituto de Tecnologia, Universidade Federal do Pará, 66095-780, Belém, PA, Brasil
d
Chemistry Department, School of Phylosophy, Sciences and Languages, University of Sa˜o Paulo, 14040-901, Ribeira˜o Preto, SP, Brazil eUniversity of Franca, Av. Dr.
Armando Salles Oliveira, 201-Parque Universita´rio, 14404-600, Franca, SP, Brazil

INFORMAÇÕES DO ARTIGO ABSTRATO

Historia do artigo: As oleorresinas de Copaifera spp têm sido utilizadas na medicina popular há séculos; no entanto, a sua
Recebido em 1º de dezembro de 2014 a ação imunomoduladora não foi investigada. Assim, o objetivo deste estudo foi caracterizar
Aceito em 30 de dezembro de 2014 diferentes oleorresinas e verificar sua ação sobre monócitos humanos na produção de citocinas pró e anti-inflamatórias (TNF-
a e IL-10, respectivamente). A composição química de
Palavras-chave: As oleorresinas brasileiras Copaifera reticulata, Copaifera duckey e Copaifera multijuga foram analisadas por HPLC-MS. A
Oleorresinas de Copaifera viabilidade celular foi avaliada pelo método MTT após incubação das células com Copaifera spp. Não citotóxico
Citocinas
concentrações de oleorresinas foram incubadas com monócitos humanos de doadores saudáveis, e citocinas
Monócitos
a produção foi determinada por ELISA. A análise HPLC-MS para terpenos permitiu a identificação de seis
ácidos diterpênicos e um ácido sesquiterpênico. As oleorresinas não exerceram efeitos citotóxicos em humanos
monócitos. Todas as oleorresinas tiveram um perfil semelhante: a produção de TNF-a induzida por LPS foi mantida por
oleorresinas, enquanto foi observada uma ação inibitória significativa na produção de IL-10. Oleorresinas de Copaifera
pareceu exercer um perfil ativador em monócitos humanos sem afetar a viabilidade celular. Tal efeito
pode ser devido à presença de ácidos diterpênicos ou sesquiterpênicos; no entanto, mais estudos são
necessário determinar o envolvimento de tais compostos nos efeitos imunomoduladores da Copaifera.
2015 Elsevier Masson SAS. Todos os direitos reservados.

1. Introdução a-copaeno e a-humuleno são os principais compostos da oleorresina

Espécies de Copaifera (Leguminoseae) são encontradas nas regiões Norte e
Nordeste do Brasil, e receitas anti-inflamatórias têm sido
prescrito por médicos tradicionais amazônicos [1]. O
a oleorresina obtida do tronco dessas espécies é uma substância transparente
líquido cuja cor varia do amarelo ao marrom claro, composto por
ácidos resínicos e compostos voláteis e amplamente comercializados no Brasil na
forma de cápsulas ou petróleo bruto para o tratamento de diversos
distúrbios [2–4].
As oleorresinas de Copaifera são caracterizadas pelo seu conteúdo terpênico,
e os principais constituintes desses óleos são os sesquiterpenos
e diterpenos. Sesquiterpenos voláteis como b-cariofileno,
* pesquisadores investigaram as propriedades biológicas de Cofaifera spp,
Autor correspondente. Tel.: +55 14 38800445; fax: +55 14 38153744.
E-mail: sforcin@ibb.unesp.br (JM Sforcin).
composição [5,6]. Os ácidos diterpênicos são os principais constituintes do
fração não volátil de oleorresinas e ácido (-)-copálico é apontado
apontado como o único diterpeno encontrado na maioria das oleorresinas de Copaifera spp.
Embora as oleorresinas de Copaifera sejam amplamente comercializadas no Brasil e
exportados para o exterior para preparações farmacêuticas e cosméticas
como xampus, sabonetes e espumas de banho [5–7], a diferenciação morfológica
entre essas espécies não é fácil e pode
frequentemente levam à coleta de oleorresinas com diferentes
composição química.
A oleorresina tem sido amplamente utilizada na medicina popular como
antiinflamatório, antinociceptivo, anticancerígeno, antioxidante, anti-helmíntico,
antimicrobiano, antiúlcera, antitetânico e como urinário
agente antisséptico, entre outras aplicações [3,4,7]. Diversos
como cicatrização de feridas, antibacteriano, quimiopreventivo, para prevenir

http://dx.doi.org/10.1016/j.biopha.2014.12.035
0753-3322/ 2015 Elsevier Masson SAS. Todos os direitos reservados.
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formação de cálculos renais, em creme vaginal no desempenho reprodutivo de ratas,
entre outros [6,8–12]. No entanto, não existem dados relativos ao seu efeito nas
células imunitárias humanas.
O efeito imunomodulador dos produtos naturais sobre as células mononucleares
do sangue periférico humano (PBMC) pode ocorrer principalmente devido à ação
sobre os monócitos e seus receptores que reconhecem patógenos. Após a ativação
celular, as proteínas adaptadoras podem ativar o fator nuclear de transcrição kB (NF-
kB), que por sua vez leva à expressão gênica de citocinas, quimiocinas, peptídeos
antimicrobianos e moléculas coestimuladoras [13]. Aqui, foram avaliados os efeitos
de Copaifera reticulata, Copaifera duckey e Copaifera multijuga (de três árvores
diferentes) na viabilidade de monócitos e na produção de citocinas pró e anti-
inflamatórias (TNF-a e IL-10, respectivamente).
2. Materiais e Métodos
2.1. Oleorresinas de Copaifera
As oleorresinas brasileiras foram obtidas de C. reticulata Ducke,
C. duckey Dwyer e C. multijuga Hayne, como segue.
C. multijuga foi coletada em Manacapuru', Amazonas, Brasil, em agosto de
2013. C. reticulata foi coletada em Brasil Novo, Pará, em janeiro de 2013, e C.
duckey foi coletada em Mosqueiro, Pará, Brasil.
Os materiais vegetais foram identificados por Silvane Tavares Rodrigues no Herbário
da Embrapa de Belém, onde estavam armazenados os exemplares voucher NID:
62/2013 NID: 03/2013 e NID: 96/2012.
Foi feito um pequeno furo no tronco da árvore a 1 m do solo com auxílio de um
perfurador, para alcançar os dutos. Em seguida, um tubo foi inserido no furo para
retirar a oleorresina, que escoou para um recipiente. Após esse procedimento, o
orifício foi selado com parafuso e permaneceu no tronco para promover futuras
extrações.
2.2. Análise de oleorresina por HPLC-MS
A análise das oleorresinas por HPLC-MS foi baseada nos tempos de retenção
em comparação aos padrões autênticos disponíveis em nosso laboratório, e aos
respectivos espectros de produtos iônicos (MS/MS). O HPLC-MS e HPLC-MS/MS
foram realizados utilizando o sistema ACQUITY UPLC H-Class acoplado a um
espectrômetro de massa tandem quadrupolo Xevo1 TQ-S (Waters Corporation,
Milford, MS, EUA) equipado com uma fonte de ionização Z-spray operando em um
modo negativo de análise. Volumes de amostra de 5 mL foram injetados em um
Ascentis1 Express C18 (100 4,6 mm, 2,7 mm – diâmetro de partícula) – Supelco. O
sistema móvel isocrático consistia em 15% de A (solução aquosa de acetato de
amônio 0,1) e 85% de B (metanol). A taxa de fluxo foi de 0,5 mL/min durante 20 min.
Os parâmetros operacionais para a fonte de ionização Z-spray foram: tensão capilar
de 2,5 kV, tensão de cone de 40 V, deslocamento da fonte de 60 V, temperatura da
fonte de spray Z = 150 8C, temperatura de dessolvatação de N2 de 300 8C e fluxo
monitorado a partir de 600 L/h. A faixa de massa usada na análise do modo de
varredura completa foi de 150 a 600 unidades de massa (u). Experimentos de LC-
MS/MS foram realizados por colisão induzida (CID) usando argônio como gás de
colisão para os íons precursores de interesse ([M - H]-).
As energias de colisão foram otimizadas para todos os padrões.
2.3. Preparação de oleorresina para cultura celular
As oleorresinas foram diluídas em dimetilsulfóxido (DMSO) a 0,02% e depois em
meio de cultura RPMI 1640 (Gibco Laboratories, Grand Island, NY, EUA) contendo
L-glutamina (0,1 g/L), bicarbonato de sódio (2,2 g/L) , aminoácidos não essenciais
(10 mL/L) e suplementado com 10% de soro fetal bovino. Diluições específicas
foram preparadas para cada ensaio a fim de atingir diferentes concentrações de
oleorresina: 5, 10 e 20 mg/mL. O mesmo procedimento foi realizado com 0,02% de
DMSO (solvente de oleorresina), embora esta concentração tenha sido maior
13
do que as respectivas concentrações encontradas nas concentrações de oleorresina
(0,002, 0,004 e 0,008% DMSO, respectivamente).
2.4. Doadores de sangue saudáveis e isolamento de monócitos humanos
Dez doadores de sangue saudáveis (20 a 40 anos) do Hospital Universitário da
Faculdade de Medicina de Botucatu, UNESP, foram incluídos no presente trabalho,
que foi aprovado pelo Comitê de Ética da Faculdade de Medicina de Botucatu (CEP
4077-2011). Um consentimento informado foi assinado por todos os doadores de
sangue.
Células mononucleares do sangue periférico (PBMC) foram isoladas de sangue
venoso heparinizado (50 U/mL de heparina) usando Ficoll-Hypaque (densidade =
1,077) (Sigma Chemical Co., St Louis, MO, EUA). Resumidamente, 20 mL de sangue
heparinizado foram adicionados a um volume igual de meio de cultura RPMI 1640
contendo L-glutamina 2 mM, 10% de soro fetal de vitelo inactivado pelo calor,
HEPES 20 mM e 40 mg/L de gentamicina. As amostras foram adicionadas a 4 mL
de Ficoll-Hypaque e centrifugadas a 400 g por 30 min em temperatura ambiente. A
camada de interface do PBMC foi aspirada e lavada duas vezes com solução salina
tampão fosfato (PBS) 0,1 M, pH = 7 contendo ácido etilenodiaminotetracético (EDTA)
0,05 mM e uma vez com meio RPMI a 300 g por 10 min. A viabilidade celular,
determinada pela coloração com vermelho neutro (0,02%), foi> 95% em todos os
experimentos. As células foram ressuspensas a uma concentração final de 1.106
monócitos/mL em meio RPMI suplementado com soro fetal de vitelo.
2.5. Viabilidade celular por ensaio MTT
A viabilidade celular foi realizada utilizando ensaio colorimétrico de brometo de
3-(4,5-dimetil-tiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazólio (MTT – Sigma-Aldrich Brasil, 106 células/
incubados com diferentes concentrações de oleorresinas mL) [14]. Monócitos (1
(5, 10 e 20 mg/mL) ou 0,02% de DMSO por 18 h a 37 8C e 5% de CO2, em um
volume final de 500 mL. As células controle foram incubadas apenas com meio de
cultura . O meio de cultura foi removido e 300 mL de MTT (1 mg/mL) em RPMI
completo foram adicionados às células de cultura por 3 h.
Em seguida, foi tomado o MTT e adicionados 200 mL de DMSO para dissolver o sal
formazan. As densidades ópticas (DO) foram lidas a 540 nm em um leitor de ELISA
e a porcentagem de viabilidade celular foi calculada usando a fórmula: [teste de DO/
controle de DO]
100. Os ensaios foram realizados em duplicado.
2.6. Determinação de citocinas por ensaio imunoenzimático (ELISA)
Para avaliar a produção de citocinas, monócitos (1 foram 106 células/mL)
distribuídos em placas de fundo plano de 24 poços (Nunc, Life Tech.
Inc., MD, EUA) e incubados com diferentes concentrações de oleorresinas
simultaneamente com LPS (10 mg/mL); 0,02% de DMSO ou LPS sozinho por 18
horas a 37°C e 5% de CO2. Posteriormente, os sobrenadantes foram colhidos para
dosagem de TNF-a e IL-10 por ELISA, conforme instruções do fabricante (R&D
Systems-Minneapolis, MN, EUA). Resumidamente, um Maxisorp de fundo plano de
96 poços (Nunc Maxisorp, EUA) foi revestido com anticorpo de captura específico
para cada citocina. A placa foi lavada e bloqueada antes de 100 mL dos
sobrenadantes e padrões específicos diluídos em série serem adicionados aos
respectivos poços. Após uma série de lavagens, a citocina foi detectada utilizando o
anticorpo de detecção conjugado específico. O reagente substrato foi adicionado em
cada poço e, após o desenvolvimento da cor, a placa foi lida a 450 nm, utilizando um
leitor de placas ELISA.
2.7. Análise estatística
Os dados foram analisados com o software estatístico Graph Pad (Graph Pad
Software, Inc., San Diego, CA, EUA). Análise de variação
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(ANOVA) e método de Tukey-Kramer foram empregados. Valor de AP inferior a 0,05
foi considerado significativo.
3. Resultados
3.1. Composição química das oleorresinas
Conforme mostrado nos cromatogramas de HPLC (Fig. 1) e nos espectros e
estruturas químicas de HPLC-MS (Fig. 2), a análise de HPLC-MS das oleorresinas de
Copaifera permitiu a identificação dos seguintes ácidos terpênicos:
C. duckey: [éster ent-agático-15-metílico (1), ácido ent-agático (2) e ácido ent-
poliáltico (6)]; C. multijuga: [(2), ácido
ent-3b-copálico (3), ácido ent-copálico (4) e ácido ent-3b-acetoxi copálico (5)]; C.
reticulata: [(1), (4), (6) e ácido 3-(metil)-5-
(2,2,6-trimetil-6-hidroxi-1-ciclohexil)-pentanóico (7)].
3.2. Viabilidade de monócitos
O efeito das oleorresinas de Copaifera na viabilidade dos monócitos humanos foi
expresso em comparação ao controle (células não tratadas). Todas as concentrações
(5, 10 e 20 mg/mL) não afetaram a viabilidade celular (> 85%) (Tabela 1). 0,02% de
DMSO não teve efeitos citotóxicos nos monócitos (dados não mostrados).
3.3. Produção de citocinas
LPS (controle positivo) estimulou a produção de TNF-a por monócitos humanos
(P <0,0001). Todas as oleorresinas mantiveram a produção de TNF-a induzida por
LPS por essas células usando 5, 10 e 20 mg/mL (Fig. 3).
O LPS também estimulou a produção de IL-10, mas as oleorresinas das cinco
espécies de Copaifera exerceram ação inibitória significativa sobre sua produção nas
seguintes concentrações: C. retitulata e C. duckey = 10 e 20 mg/mL; C. multijuga (A)
= 5 mg/mL; C. multijuga (B e C) = 5, 10 e 20 mg/mL (Fig. 4).
Figura 1. Cromatogramas de HPLC-MS das oleorresinas de Copaifera duckey,
Copaifera multijuga e Copaifera reticulata usando uma coluna Ascentis1 Express C18.
4. Discussão
Nosso grupo de pesquisa vem investigando o efeito imunomodulador de produtos
naturais e seus principais compostos na produção de citocinas em camundongos. A
superprodução de citocinas pró-inflamatórias, como o TNF-a, pode causar
imunopatologias, enquanto a produção defeituosa de citocinas resulta em infecção
descontrolada.
A superprodução de citocinas pró-inflamatórias pode ser controlada por citocinas anti-
inflamatórias, como a IL-10, que pode inibir a transcrição de uma variedade de
citocinas, reduzir a apresentação de antígenos e inibir a ativação de células T.
O capim-limão e seu composto isolado citral estimularam a produção de IL-1b e
IL-6, sem efeitos na produção de IL-10 [15]. A própolis, os ácidos p-cumárico e
cinâmico estimularam a produção de IL-1b e inibiram a geração de IL-6 e IL-10 pelos
macrófagos peritoneais [16]. O cravo inibiu a produção de IL-1b, IL-6 e IL-10, enquanto
o eugenol não afetou a produção de IL-1b, mas inibiu a produção de IL-6 e IL-10 [17].
Baccharis dracunculifolia e ácido caféico estimularam a banda de IL-1 inibindo a
produção de IL-6 e IL-10 [18]. Estas descobertas indicaram que os produtos naturais
podem atuar diferencialmente nos macrófagos e ativar diferentes fatores de transcrição,
que por sua vez podem afetar a produção de citocinas. Além disso, os produtos
naturais podem exercer ações pró ou anti-inflamatórias, modulando a resposta imune/
inflamatória, dependendo da concentração.
Diferentes modelos experimentais, tipos de extratos, concentração e período de
incubação (in vitro) ou administração (in vivo) podem influenciar a ação de produtos
ou compostos naturais em ensaios imunológicos.
Dando continuidade à nossa investigação, novos ensaios foram realizados
utilizando monócitos humanos de doadores de sangue saudáveis, e os efeitos de
Copaifera spp foram avaliados na viabilidade celular e na produção de citocinas pró e
anti-inflamatórias (TNF-a e IL-10, respectivamente).
As oleorresinas de Copaifera e DMSO 0,02% não afetaram a viabilidade dos
monócitos. Quanto à produção de citocinas, pode-se observar que todas as
oleorresinas mantiveram a produção de TNF-a induzida por LPS pelas células. Por
outro lado, as oleorresinas das cinco espécies de Copaifera exerceram ação inibitória
significativa na produção de IL-10 dependendo da concentração. No geral, todas as
oleorresinas apresentaram perfil semelhante em relação à produção de TNF-a e IL-10.
Como o TNF-a é importante para ativar fagócitos enquanto a IL-10 pode suprimir
essas células, pode-se especular que a Copaifera exerceu um perfil ativador nessas
células. Entretanto, esses dados são preliminares e outros mecanismos efetores,
como os intermediários reativos de oxigênio, devem ser mais investigados, bem como
a expressão de receptores celulares e a atividade microbicida de monócitos, a fim de
avaliar os efeitos de Copaifera spp nos eventos iniciais da resposta imune. . Além
disso, os mecanismos de ação das oleorresinas nos monócitos humanos ainda
permanecem obscuros.
As oleorresinas de diferentes espécies de Copaifera têm sido amplamente
utilizadas na medicina popular e na indústria farmacêutica devido às suas propriedades
biológicas independentemente das diferenças entre elas, enquanto a variação química
pode ocorrer não apenas entre espécies, mas também dentro de uma determinada
espécie [19]. Assim, a falta de padronização destes óleos tem sido uma barreira à sua
comercialização mais ampla. A composição química de 22 amostras de óleo coletadas
da espécie C. multijuga Hayne foi investigada e sesquiterpenos foram detectados em
todas as amostras em diferentes concentrações [20].
Os compostos identificados em nossas oleorresinas foram éster ent-agático-15-
metílico (1), ácido ent-agático (2), ácido ent-3b-copálico (3), ácido ent-copálico (4),
ent-3b-acetoxi ácido copálico (5), ácido ent-poliáltico (6), ácido 3-(metil)-5-(2,2,6-
trimetil-6-hidroxi-1-ciclohexil)-pentanóico (7). É interessante notar que os compostos 1
e 6 ocorreram em C. duckey e C. reticulata, o composto 2 ocorreu em C. duckey e C.
multijuga e o composto 4 ocorreu em C. multijuga
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2. Estruturas químicas, tempos de retenção e espectros MS dos compostos identificados: éster ent-agático-15-metílico (1), ácido ent-agático (2), ácido ent-3b-copálico (3), ent-
copálico ácido (4), ácido ent-3b-acetoxi copálico (5), ácido ent-poliáltico (6), 3-(metil)-5-(2,2,6-trimetil-6-hidroxi-1-ciclohexil)- ácido pentanóico (7).

e C. reticulata. Surpreendentemente, as três amostras de C. multiguga Barbosa et al. analisaram 22 oleorresinas coletadas de C. multijuga
coletadas em locais diferentes apresentaram perfil cromatográfico no Amazonas, Brasil, e 35 constituintes foram identificados [20]. Esses
semelhante, bem como efeito semelhante na produção de citocinas por óleos, comumente caracterizados pela presença de sesquiterpenos e
monócitos humanos. diterpenos, continham sete compostos que foram detectados em
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tabela 1
todas as amostras analisadas (a-copaeno, a-humuleno, a-amorfeno,
Efeitos de Copaifera reticulata, Copaifera duckey e Copaifera multijuga (de
b-cariofileno, óxido de cariofileno, ácido copálico e pinifólico
3 árvores diferentes – A, B, C) oleorresinas na viabilidade de monócitos humanos (%).
ácido). Embora os sesquiterpenos e diterpenos ocorressem em
Oleorresina Concentração (mg/mL) proporção semelhante em todos os óleos, diferentes perfis qualitativos foram
5 10 20 observado, o que sugere uma possível variação da composição química
composição das amostras da mesma espécie.
Copaífera reticulata 96,38 6,76 97,13 4,70 93,00 13,55
Patinho Copaÿ´fera 88,63 17,94 90,38 14,18 93,13 10,74 Entre os diterpenos, o ácido copálico foi o principal componente
Copa Multijogador A 96,75 6,56 95,38 9,05 95,88 11,67 de C. multijuga Hayne [1]. O ácido Ent-copálico foi ativo no
Multiplayer Copaÿ´fera B 88,88 14,33 85,00 11,14 93,75 7,96 controle de diversas bactérias Gram-positivas relacionadas à mastite bovina
Copaÿ´fera multijuga C 94,88 5,89 93,63 8,82 91,63 7,27
[21].
Monócitos humanos de doadores saudáveis foram incubados com 5, 10 e 20mg/mL de Atividade antileishmania dos ácidos diterpênicos do óleo de copaíba
5 oleorresinas diferentes obtidas de Copaifera spp. A viabilidade celular foi avaliada por foi investigado [22]. Copalato de metila e o seguinte diterpeno
Método MTT. Os dados representam o desvio padrão médio (n = 10). P > 0,05.
ácidos: agático, hidroxicopálico, caurenóico, pinifólico e poliáltico,
isolado de oleorresinas de Copaifera officinales, exerceu algum nível de
atividade contra Leishmania amazonensis. Ácido Hidroxicopálico e
metil copalato foram os compostos mais ativos contra

3. Produção de TNF-a (pg/mL) por monócitos humanos incubados com oleorresinas (5, 10 e 20 mg/mL) de Copaifera reticulata, Copaifera duckey, Copaifera multijuga
(3 árvores diferentes – A, B e C), controle ou DMSO (0,02%) por 18 h. Os dados representam média e desvio padrão (n = 10). *** significativamente diferente do LPS (P < 0,0001).
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4. Produção de IL-10 (pg/mL) por monócitos humanos incubados com oleorresinas (5, 10 e 20 mg/mL) de Copaifera reticulata, Copaifera duckey, Copaifera multijuga (3 árvores
diferentes – A, B e C) , controle ou DMSO (0,02%) por 18 h. Os dados representam média e desvio padrão (n = 10). * significativamente diferente do LPS (P < 0,01), **
significativamente diferente do LPS (P < 0,001), *** significativamente diferente do LPS (P < 0,0001).

promastigotas, enquanto os ácidos pinifólico e caurenóico foram os mais ativos
contra amastigotas axênicas.
Embora vários autores tenham investigado as propriedades biológicas e
terapêuticas de Copaifera spp, como antifúngica, antileishmania, cicatrização de
feridas alveolares após extração dentária em ratos, anti-inflamatória, antioxidante,
antimutagênica e outras [23–26], nossos dados exibiram a ação imunomoduladora
de oleorresinas de Copaifera.
Concluindo, as oleorresinas de Copaifera exerceram perfil ativador em monócitos
humanos, sem afetar a viabilidade celular, e os ácidos diterpênicos ou
sesquiterpênicos podem estar envolvidos em seus mecanismos de ação. Novos
ensaios deverão investigar a produção de outros mediadores inflamatórios após a
incubação de monócitos com oleorresinas, a atividade microbicida destas células e
o envolvimento de receptores celulares, a fim de proporcionar uma melhor
compreensão dos mecanismos de ação de tais oleorresinas.
Divulgação de interesse
Os autores declaram não ter conflitos de interesse em relação a este artigo.
Reconhecimento
Este trabalho foi financiado pela Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de
São Paulo (FAPESP – 2011/13630-7). Somos gratos ao Dr.
Silvane Tavares Rodrigues pela identificação das espécies de Copaifera.
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