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Biologia Farmacêutica

ISSN: 1388-0209 (Impresso) 1744-5116 (Online) Página inicial da revista:https://www.tandfonline.com/loi/iphb20

Composição química, atividade antioxidante e

antibacteriana de doisEspondiasespécies do
Nordeste do Brasil

Ana Raquel Araújo da Silva, Selene Maia de Morais, Márcia Maria Mendes
Marques, Danielle Ferreira de Oliveira, Caroline Costa Barros, Raimundo
Rafael de Almeida, Ícaro Gusmão Pinto Vieira & Maria Izabel Florindo Guedes

Para citar este artigo:Ana Raquel Araújo da Silva, Selene Maia de Morais, Márcia Maria Mendes
Marques, Danielle Ferreira de Oliveira, Caroline Costa Barros, Raimundo Rafael de Almeida, Ícaro
Gusmão Pinto Vieira & Maria Izabel Florindo Guedes (2012) Composição química, atividade antioxidante
e antibacteriana de doisEspondiasespécies do Nordeste do Brasil, Biologia Farmacêutica, 50:6, 740-746,
DOI:10.3109/13880209.2011.627347

Para vincular a este artigo:https://doi.org/10.3109/13880209.2011.627347

Publicado online: 10 de abril de 2012.

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Biologia Farmacêutica, 2012; 50(6): 740–746
© 2012 Informa Healthcare USA, Inc.
ISSN 1388-0209 impresso/ISSN 1744-5116 online
DOI: 10.3109/13880209.2011.627347

Artigo de Pesquisa

Composição química, atividade antioxidante e antibacteriana

de doisEspondiasespécies do Nordeste do Brasil

Ana Raquel Araújo da Silva1, Selene Maia de Morais1, Márcia Maria Mendes Marques1,
Danielle Ferreira de Oliveira2, Carolina Costa Barros2, Raimundo Rafael de Almeida3, Ícaro
Gusmão Pinto Vieira3, e Maria Izabel Florindo Guedes1

1Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, Universidade Estadual do Ceará, Fortaleza, CE, Brasil,2Laboratório de Química de Produtos
Naturais, Centro de Tecnologia, Universidade Estadual do Ceará, Fortaleza, CE, Brasil, e3Parque de Desenvolvimento Tecnológico (PADETEC),
Fortaleza, Ceará, Brasil

abstrato
Contexto: As folhas deSpondias tuberosaArr. Cam. (Anacardiaceae) eSpondias mombinL. têm sido tradicionalmente utilizadas para
fins medicinais. Alguns estudos revelam suas propriedades antibacterianas, antimicrobianas e antivirais.
Objetivo: Determinar a composição química, antioxidante e atividades antimicrobianas deEspondiasespécie para justificar
seu uso etnofarmacológico.
Materiais e métodos:Espondiasos extratos das espécies foram preparados com metanol:água 80:20 e analisados por
cromatografia em coluna de sílica gel e cromatografia líquida de fase reversa (HPLC). A atividade antioxidante foi avaliada
pela captura dos radicais 1,1-difenil-2-picrilhidrazil (DPPH) e 2,2-azino-bis(ácido 3-etilbenztiazolina-6-sulfônico) (ABTS•+) e
medindo a atividade antimicrobiana ( método de difusão em poço de ágar, concentração inibitória mínima e
concentrações bactericidas mínimas).
Resultados: A análise de HPLC deEspondiasextratos demonstraram a ocorrência de alto rendimento de flavonoides. Encontrado em
S. mombinforam quercetina (2,36 ± 0,01mg/g) e ácido elágico (41,56 ± 0,01mg/g) e emS. tuberosaespécies rutina (53,38 ± 1,71mg/
g), quercetina (24,46 ± 0,87mg/g) e ácido elágico (169,76 ± 0,17mg/g). A atividade antibacteriana dos extratos contra as várias cepas
de bactérias variou de 8,8 a 20,1mm. Os valores de MIC de 62,5 a 125 µg/mL foram satisfatórios quando comparados com outros
produtos vegetais. Atividade de eliminação de DPPH média IC paraEspondiasos extratos variaram de 0,042 50
a 0,558mg/mL e para
ABTS de 0,089 a 0,465mg/mL. Atividade de eliminação de DPPH para ácido elágico constituinte IC
50
= 0,042mg/mL e para quercetina IC50= 0,081mg/mL.
Discussão e conclusão: O estudo químico deEspondiasos extratos das folhas apresentaram a ocorrência de quercetina, rutina e
ácido elágico, substâncias com relevante atividade antioxidante e antimicrobiana.
Palavras-chave:Compostos fenólicos, efeito antibacteriano, atividade antioxidante,Espondiassp.

Introdução
o generoEspondias(Anacardiaceae) consiste em cerca de 8 a
12 espécies distribuídas em regiões tropicais do mundo
(Narain et al., 2004), incluindo as espécies Spondias mombin
L., conhecida como cajazeira, eSpondias tuberosaArr. Cam.,
conhecido como umbuzeiro.S. mombiné nativa da região
amazônica do Peru, Brasil, Venezuela, Bolívia, Colômbia, das
três Guianas, bem como do sul do México, Belize, Costa Rica
e Índias Ocidentais (Adedokun et al., 2010) eS. tuberosaé
uma planta tropical
que desempenha um papel importante no bioma Caatinga
do Nordeste do Brasil, uma vez que floresce mesmo no
período seco para fornecer frutos comestíveis, muito
apreciados pela população (Braga, 2001). Na medicina
popular, oS. mombin o chá das folhas é utilizado para
cicatrização de feridas, demonstrando ação antiinflamatória
(Villegas et al., 1997), contra diarreia aguda (Gonçalves et al.,
2005), no tratamento dediabetes melito(Fred-Jaiyesimi et al.,
2009) e anemia (Morais et al., 2005). As folhas e ramos deS.
mombincontêm elagitaninos (geraniina e

Endereço de correspondência: Selene Maia de Morais, Laboratório de Química de Produtos Naturais, Universidade Estadual do Ceará,
60740-000, Fortaleza, CE, Brasil. Tel: +85-31019789. E-mail: selene.morais@uece.br

(Recebido em 12 de abril de 2011; revisado em 20 de setembro de 2011; aceito em 23 de setembro de 2011)

740

galoilgeraniina) com atividade antiviral contra Coxsachie
B2 e Herpes simplex tipo 1 (Corthout et al., 1991, 1992),
bem como ácidos fenólicos antimicrobianos (Corthout et
al., 1994). O gado aprecia o sabor ácido da
S. tuberosafolhas, que são popularmente utilizadas como
antiinflamatório, no combate à diarreia, disenteria e verminoses
(Matos, 1999; Braga, 2001). A cicatrização de feridas e
propriedades anti-inflamatórias destesEspondiasespécies
poderiam ser correlacionadas com a atividade antimicrobiana e
de eliminação de radicais de seus extratos e constituintes.
As espécies reativas de oxigênio (ROS) são deletérias ao processo
de cicatrização de feridas devido aos efeitos deletérios sobre células
e tecidos. O reparo dos tecidos lesados ocorre como uma
sequência de eventos, que inclui inflamação, proliferação e
migração de diferentes tipos de células. Aplicações tópicas de
compostos com propriedades de eliminação de radicais livres em
pacientes demonstraram melhorar significativamente a cicatrização
de feridas e proteger os tecidos contra danos oxidativos (Umachigi
et al., 2007). Por exemplo, extratos polares de várias plantas usadas
para cicatrização de feridas em Omã foram examinados quanto a
propriedades antioxidantes e antimicrobianas e os mais
promissores foram aqueles que combinam ambas as ações
(Marwah et al., 2007).
Compostos fenólicos como flavonoides, taninos e
antocianinas são considerados importantes
antioxidantes e agentes antimicrobianos (Nascimento et
al., 2000; Elzaawely et al., 2005). Nesse sentido, os
objetivos deste estudo foram avaliar as atividades
antioxidante e antibacteriana de extratos de duas
Espondiasespécies nativas do Nordeste do Brasil para
validar seu uso popular e analisar a composição química
para investigar possíveis princípios ativos.
material e métodos
Reagentes
DPPH (1,1-difenil-2-picrilhidrazil), ABTS+•[2,2-azinobis-
(ácido 3-etilbenzotiazolin-6-sulfônico)], BHT, ácido
elágico, quercetina e rutina foram adquiridos da Sigma
Chemical Co. Outros produtos químicos como
dimetilsulfóxido (DMSO) e solventes foram obtidos da
Vetec (Brasil ). Todos os solventes usados para extração
eram de grau analítico.
Material vegetal
Folhas de plantas foram coletadas em maio de 2008 em
seus habitats naturais no estado do Ceará (Nordeste do
Brasil). Exemplares testemunhas foram depositados no
Herbário Prisco Bezerra do Departamento de Biologia da
Universidade Federal do Ceará (UFC) e identificados pela
botânica Ligia Queiroz Matias, com os números 34.826 para
S. mombin e 34.887 paraS. tuberosa.
Preparação de extratos
folhas deS. mombin(3,59 kg) eS. tuberosa(3,23 kg) foram
macerados em metanol:água (80:20) à temperatura
ambiente (25–28°C) por 7 dias. A solução foi filtrada em
filtro de papel e evaporada em rotatório.
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Compostos fenólicos e efeitos antibacterianos 741
evaporador. O extrato foi concentrado em banho-maria com
temperatura mantida abaixo de 60°C.S. tuberosae
S. mombinrendimentos de extrato foram de 1,5 e 5,0%, respectivamente.
Análise química das principais classes de metabólitos
secundários
Os testes químicos foram realizados com reagentes específicos,
observando mudanças de cor ou formação de precipitado, seguindo
os protocolos descritos por Matos (1997).
Análise fitoquímica de extratos vegetais
O extrato metanol:água (80:20) foi submetido a cromatografia
em coluna de sílica gel e eluído com hexano, clorofórmio e
acetato de etila em misturas de polaridade crescente. Várias
frações de 10 mL foram coletadas e, após a evaporação do
solvente, o material resultante foi comparado por placas de
cromatografia em camada delgada (TLC) de sílica gel. Amostras
semelhantes foram unidas, purificadas por recristalização e
analisadas por infravermelho (IR) e ressonância magnética
nuclear (RMN). TLC também comparou os principais compostos
purificados com compostos padrão. Os espectros de IR foram
registrados em um espectro PerkinElmer FTIR 100 Spectrometer
e os valores são expressos em cm−1. Os espectros de NMR
foram registrados em um espectrômetro Brucker Avance
DRX-500 em MeOD.
Quantificação por HPLC de compostos principais de extratos
Em geral
A análise de HPLC foi realizada em um sistema de bomba Shimadzu
LC-10AD equipado com um detector de matriz de fotodiodos Shimadzu
SPD-M10A com o comprimento de onda de detecção definido em 350
nm. Uma impressão digital dos principais compostos contidos no extrato
de metanol:água (80:20) deS. mombine
S. tuberosafoi obtido.
Preparação de amostra
Análise quantitativa de rutina e quercetina no Espondias
espécie foi realizada por análise HPLC. Os extratos
concentrados deS. mombin(60mg) eS. tuberosa(30mg)
foram diluídos com metanol para 10mL. As soluções
fornecidas foram filtradas através de um filtro de seringa
de 0,45 μm antes do uso de HPLC.
Sistema cromatográfico
A análise por HPLC foi realizada usando uma coluna de fase
reversa (Hibar Lichrosopher 100RP18 4,6mm × 25 cm − partícula
5 mm) eluída a uma taxa de 1,25mL/min com uma mistura de
solventes I:II (I: solução aquosa de H PO (pH 2.8);3 II: acetonitrila)
4
iniciando com 20% II em I até 12min, depois instalando
gradiente até atingir 40% II aos 17min, mantendo essa
concentração até 23min, seguindo com gradiente até atingir
80% II aos 25min, com detecção comprimento de onda definido
em 350 nm e injeção de 20mL. Um padrão de rutina foi usado
para obter as curvas de calibração. Este composto foi dissolvido
em metanol em diferentes concentrações (1,14, 0,57, 0,228,
0,114 e 0,0456mg/mL). O ácido elágico (padrão) também é
usado para obter curvas de calibração e foi dissolvido em
metanol para obter diferentes concentrações
742 AR Araújo da Silva et al.
(0,46, 0,92 e 1,84mg/mL). As extrações de acompanhamento
e análise de HPLC foram realizadas com o mesmo
procedimento da rutina. A recuperação foi determinada da
seguinte forma: recuperação (%) = (A − B)/C × 100% onde, A
é a quantidade de detecções, B é a quantidade de amostra
sem padrão adicionado, C é a quantidade adicionada do
padrão. O desvio padrão relativo (RSD) das recuperações do
ácido elágico foi de 2,1 (n=5; média = 98). A identificação de
rutina, ácido elágico e quercetina (Figura 1) em Espondiasos
extratos foram avaliados por HPLC-PDA, observando-se o
tempo de retenção (Rt) e os espectros UV-VIS. Os padrões
foram preparados em metanol na concentração de 0,1mg/
mL.
Determinação da atividade anti-radicais livres deEspondias
extratos e constituintes
Atividade de eliminação contra 1,1-difenil-2-picrilhidrazil
(DPPH): A capacidade de eliminação do radical livre
DPPH, técnicas padrão, foi monitorada de acordo com
um método relatado por Yepez et al. (2002). O extrato
diluído (0,1mL) foi misturado com 3,9mL de solução de
metanol contendo radicais DPPH (6,5 × 10−5mol/L) por 1
hora. A redução do radical DPPH foi medida
monitorando continuamente a diminuição da absorção a
515 nm. O IC (concentração
50
efetiva média) foi calculado.
Atividade de eliminação contra ácido 2,2-azinobis-(3-
etilbenzotiazolin-6-sulfônico (ABTS+•): A ABTS é técnica
padrão. A ABTS+•solução (7mM, 5mL) foi misturada com
88 µL de persulfato de potássio (140mM). A mistura foi
agitada e mantida no escuro em temperatura ambiente
por 16 h. Em seguida, 1mL dessa solução foi adicionado
a 99mL de etanol. A absorbância é lida em 734 nm e
deve ser aproximadamente 0,715. Várias soluções de
concentrações decrescentes de extratos vegetais foram
preparadas e 3,0mL de ABTS+•solução foi adicionada a 30
µL dessas soluções após 6min, as leituras foram feitas a
734 nm (Re et al., 1999). O IC (concentração
50
efetiva
média) foi calculado.
Actividade antimicrobiana
cepas microbianas
Oem vitroatividade antimicrobiana deS. mombineS. tuberosa
extratos foi avaliada por meio de cepas de isolamento obtidas
do Hospital Universitário Walter Cantidio, Ceará, Brasil e
fornecidas pelo Laboratório de Microbiologia da
Figura 1. Estruturas químicas da quercetina, rutina e ácido elágico.
o UFC: Bactérias Gram negativasSerratia marcescens,
Serratia liquefaciens, Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella
pneumoniae,Proteus mirabilis, Morganella morganii e
Enterobacter cloacae. As culturas dessas bactérias foram
cultivadas em caldo de infusão de cérebro e coração (BHI) a
37°C e mantidas em ágar Mueller-Hinton (MHA) a 4°C.
Triagem antibacteriana
Dois métodos diferentes foram empregados para determinar as
atividades antibacterianas: método de difusão em poços de
ágar (Celiktas et al., 2007) e concentrações inibitórias mínimas
(CIM) com protocolo estabelecido pelo CLSI (2009). Também
foram determinadas as concentrações bactericidas mínimas
(MBCs). Todos os testes foram realizados em triplicata. Todos os
extratos foram pesados e dissolvidos em dimetilsulfóxido
(125mg/mL), seguido de esterilização em filtro de membrana de
0,45 µm. Cada microrganismo foi coletado em solução salina
estéril em uma densidade ajustada para um padrão de turbidez
de 0,5 McFarland [108unidades formadoras de colônias (UFC)/
mL].
Ensaio de difusão em poço de ágar
Placas de ágar nutriente de vinte mL foram invertidas e secas a
37°C por 30 minutos. Uma cultura noturna de bactérias (0,5mL)
foi espalhada sobre a superfície da placa de ágar usando um
espalhador de vidro estéril. As placas inoculadas foram
invertidas e incubadas a 37°C por mais 30 minutos. Poços (6mm
de diâmetro) foram feitos no centro de cada placa de ágar em
que 0,2mL de cada extrato foi adicionado. As placas de ágar
foram incubadas por 24 h a 37°C e o diâmetro (em mm) das
zonas de inibição bacteriana (ID) foi registrado usando um
paquímetro. Todos os testes foram realizados em triplicata.
Ensaio de diluição em caldo: determinação da
concentração inibitória mínima (MIC) e das
concentrações bactericidas mínimas (MBC)
A concentração inibitória mínima (MIC) e a concentração
bactericida mínima (MBC) deEspondias extrato contra cepas
bacterianas foi medido pelo método de diluição em caldo
usando Mueller Hinton Broth. Uma cultura de caldo noturno
de cada cepa foi preparada e a concentração final em cada
poço foi ajustada para 108
UFC/mL. As placas de 96 poços foram preparadas com 95 µL de
Müeller-Hinton (MH) e 5 µL do inóculo em cada poço. Cem µL de
Espondiasextratos inicialmente preparados na concentração de
500 µg/mL foram adicionados aos primeiros poços. Em seguida,
100 µL de suas diluições seriadas foram transferidos para 10
poços consecutivos. O último poço contendo 195 µL de
nutriente sem composto e 5 µL de inóculo em cada tira foi
usado como controle negativo. O volume final em cada poço foi
de 200 µL. A ciprofloxacina (CIP) em uma faixa de concentração
de 500–7,8 µg/mL foi preparada em meio nutriente e usada
como droga padrão. O conteúdo de cada poço foi misturado em
um agitador de placas por 20 minutos e depois incubado em
temperaturas apropriadas por 24 horas. O crescimento
microbiano foi determinado por absorbância a 620 nm usando
um instrumento ELISA (Ozturk & Ercisli, 2006) e confirmado por
plaqueamento de 5 µL de amostras de poços transparentes em
ágar nutriente
Biologia Farmacêutica

médio para determinar como concentração bactericida
mínima (MBC).
Análise estatística
Todos os experimentos sobre o efeito antioxidante foram
calculados como média ± desvio padrão (DP). O teste de análise
de variância de uma via (ANOVA) foi usado para determinar as
diferenças estatísticas seguidas pela Comparação Múltipla de
Tukey no GraphPad Prism 3.0. O nível de significância foi
estabelecido emp<0,05.
Resultados e discussão
Estudo químico deS. mombineS. tuberosafolhas:S. tuberosa
eS. mombinrendimentos de extrato foram de 1,5 e 5,0%,
respectivamente. Ambos os extratos contêm fenóis, taninos
hidrolisáveis, flavonas, flavonóides, leucoantocianidinas e
saponinas. Esses resultados estão de acordo com Corthout
et al. (1992) que demonstraram a presença de taninos
hidrolisáveis emS. mombin. Satpathy et al. (2011)
demonstraram a presença de alcaloides, taninos e
saponinas emSpondias pinnataK. A presença de flavonóides
e taninos emEspondiasespécies nos levaram a investigar
suas estruturas químicas por HPLC-PDA, comparando o
tempo de retenção (Rt) e os espectros UV-VIS. A identidade
dos constituintes foi estabelecida pela sobreposição
Figura 2. Cromatogramas de HPLC dos extratos de metanol:água deS. tuberosa(A) eS. mombin(B). Compostos 1. rutina, 2. ácido elágico, 3.
quercetina.
Tabela 1. Teor de flavonoides (quercetina e rutina) e ácido elágico
em extratos deEspondiasespécies do Nordeste do Brasil
determinadas por HPLC.
Cajá (S. mombin) Umbu (S. tuberosa)
Compostos (mg/g extrato) (mg/g extrato)
rutina – 53,38 ± 1,71ª
Ácido elágico 41,56 ± 0,01ª 169,76 ± 0,17b
quercetina 2,36 ± 0,01b 24,46 ± 0,87c
ANOVA e Comparação Múltipla de Tukey; letras sobrescritas
indicam as diferenças de significância estatística emp<0,05,
comparando dados na mesma coluna.
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Compostos fenólicos e efeitos antibacterianos 743
seus picos (tempo de retenção) e espectros de absorção com os
da rutina (1), ácido elágico (2) e quercetina (3) padrões.
Cromatogramas de impressão digital deS. tuberosae
S. mombinextratos de folhas são mostrados na Figura 2. Os
tempos de retenção de rutina, ácido elágico e quercetina foram
5,11, 6,24 e 23,46 min, respectivamente. A ocorrência desses
compostos emS. mombin e S. tuberosaespécie não foi descrita
anteriormente.
A equação de regressão para rutina é Y = 25.150.017,88X
+ 203.139,00 (R2= 1,000); limite de quantificação 0,1 μg/mL;
limite de detecção 0,04 μg/mL; desvios padrão relativos
(RSD) inferiores a 2%. A equação de regressão para o ácido
elágico é: Y = 25.916.407,45X + 309.482,00 (R2= 0,9998);
limite de quantificação 0,1 μg/mL; limite de detecção 0,04
μg/mL; desvios padrão relativos inferiores a 2%. Cada pico
de flavonoide foi quantificado usando as equações de
regressão linear de rutina e ácido elágico. NessesEspondias
espécies, rutina, ácido elágico e quercetina foram
detectados em diferentes rendimentos (Tabela 1). Foi
encontrado emS. mombin,quercetina (2,36 ± 0,01 mg/g) e
ácido elágico (41,56 ± 0,01 mg/g) e emS. tuberosaespécies
rutina (53,38 ± 1,71 mg/g), quercetina (24,46 ± 0,87 mg/g) e
ácido elágico (169,76 ± 0,17 mg/g). As diferenças na ação
antioxidante e antimicrobiana das duas espécies podem
estar relacionadas à concentração de compostos ativos em
cada planta.
ácidos fenólicos eO-glicosídeos flavonóis foram extraídos
das cascas de frutas jocote (Spondias purpureaL.,) colhidas
na Costa Rica e caracterizadas usando cromatografia líquida
de ultra alta performance acoplada com arranjo de diodos e
detecção por espectrometria de massa por ionização por
eletrospray (UHPLC-DAD-ESIMSn). O sistema analítico
permitiu a separação de 21 compostos fenólicos. Além dos
ácidos fenólicos, vários O-glicosídeos de quercetina,
kaempferol, kaempferide e ramnetina foram detectados
(Engels et al., 2011).
744 AR Araújo da Silva et al.
Atividade antioxidante medida pelo DPPH e ABTS+•
sistema de eliminação de radicais: O DPPH é usado como
um radical livre para avaliar a atividade antioxidante de
extratos de plantas, e o grau de sua descoloração é
atribuído à capacidade de doação de hidrogênio desses
produtos, o que é indicativo de seu potencial de eliminação
(Shimada et al., 1992 ). A Tabela 2 mostra os resultados dos
testes antirradicais, onde IC 50
é definida como a concentração
necessária para inibir 50% do radical DPPH presente na
solução. AmbosEspondiasexibiram alto potencial de
eliminação de DPPH com IC = 0,417 ± 0,01 50
mg/mL para S.
mombine IC = 0,558 ± 0,008 mg/mL 50
para
S. tuberosa. Quando a atividade antioxidante foi avaliada usando o
radical ABTS+•os resultados foram estatisticamente iguais,
S. mombin0,451 ± 0,029 eS. tuberosa0,465 ± 0,029. Rufino e
outros. (2010) comentam que nem sempre é uma tarefa
simples escolher o método mais adequado para determinar
a capacidade antioxidante e o ABTS+•método é geralmente
indicado para compostos hidrofílicos. O método DPPH pode
ser empregado rotineiramente com extratos aquoso-
orgânicos contendo compostos hidrofílicos e lipofílicos. Na
avaliação das atividades antioxidantes dos extratos aquoso,
metanol e alcaloide deMitragyna speciosafolhas, os valores
de DPPH IC foram 0,213, 0,104 e 0,037 mg/mL, 50
respectivamente (Parthasarathy et al., 2009). Um estudo
realizado em outros Espondiasespécies indicam a presença
de antioxidantes, mas falharam em fornecer informações
sobre o perfil de compostos fenólicos (Hazra et al., 2008).
Atividade antioxidante de diferentesSpondias pinnataK., a
atividade de eliminação de DPPH expressa como IC variou
de 0,73 a 0,59 mg/mL (Satpathy et al., 2011). 50
Os valores encontrados de DPPH IC50paraEspondiasos
extratos da espécie são considerados leves em relação ao BHT
(DPPH
50
IC = 0,165mg/mL). No entanto, a atividade de eliminação
de DPPH para o constituinte ácido elágico com IC50
= 0,042mg/mL
e para a quercetina com IC = 0,081mg/mL,
50
mostram que ambos
os constituintes deEspondiasextratos são melhores
antioxidantes do que o BHT. Portanto, a presença de compostos
com boa atividade antioxidante deve contribuir para a atividade
geral dos extratos.
O estilo de vida atual dos indivíduos causa superprodução de
radicais livres e espécies reativas de oxigênio.
Tabela 2. Capacidades antioxidantes medidas pela atividade de eliminação
de radicais livres de DPPH e ABTS expressa como IC (mg/mL ± SD) de
50
extratos de metanol:água (80:20) e constituintes deEspondias espécies.
Extrato/padrão CE de eliminação de DPPH 50 CE de eliminação de ABTS 50
S. mombin 0,417 ± 0,01a 0,451 ± 0,029a
S. tuberosa 0,558 ± 0,008b 0,465 ± 0,029a
BHT 0,165 ± 0,01c 0,308 ± 0,01b
quercetina 0,081 ± 0,03d 0,171 ± 0,01c
rutina 0,295 ± 0,01e 0,413 ± 0,02d
Ácido elágico 0,042 ± 0,05f 0,089 ± 0,01e
IC 50
= concentração efetiva média.
As letras sobrescritas indicam diferenças estatisticamente significativas
entre os dados nas linhas emp<0,05.
Nosso corpo tem um mecanismo de defesa natural para
lidar com esse estresse oxidativo, mas o problema surge
quando os radicais livres superam o mecanismo de defesa,
danificando biomoléculas essenciais, como proteínas, DNA e
lipídios. Os antioxidantes naturais desempenham um papel
importante nos cuidados de saúde, pois fornecem proteção
contra o estresse oxidativo e doenças associadas (Lopez et
al., 2007). Compostos fenólicos amplamente distribuídos em
plantas medicinais, especiarias, vegetais, frutas, grãos e
sementes constituem um importante grupo de
antioxidantes naturais com possíveis efeitos benéficos à
saúde humana. Turkmen et al. (2005) demonstraram que
extratos de plantas ricas em fenólicos apresentam forte
atividade antioxidante. A quercetina e seu glicosídeo rutina
demonstraramem vitroação antioxidante (Soares et al.,
2005). Nos últimos anos, tanto a quercetina quanto a rutina
ganharam grande interesse por causa de suas atividades de
eliminação de radicais livres (Teresita et al., 2001), seus
efeitos protetores sobre danos ao DNA (Undeger et al.,
2004) e seus efeitos fisiológicos, como potencial antitumoral
(Ren et al., 2003) e antibacteriano (Dall'Agnol et al., 2003). O
ácido elágico é um polifenol antioxidante conhecido
(Hassoun et al., 1997, 2004; Hayes et al., 2010) encontrado
em inúmeras frutas e vegetais e tem uma variedade de
atividades biológicas, incluindo anticancerígena (Whitley et
al., 2003), antiproliferativa (Seeram et al., 2005) e atividades
antimutagênicas (Loarca-Piña et al., 1998). A presença
desses três compostos fenólicos emEspondiasextratos de
espécies garante suas propriedades medicinais, incluindo
atividades antioxidantes e antibacterianas.
A atividade antibacteriana deS. mombineS. tuberosa
extratos foram testadosem vitropelo método de difusão em
poço de ágar contra oito bactérias Gram negativas. A Tabela
3 resume a inibição do crescimento microbiano deEspondias
extratos de espécies. De acordo com os resultados, oS.
mombin extrato foi considerado ativo contra três cepas de
bactérias Gram negativas e oS. tuberosaO extrato mostrou-
se ativo contra sete cepas de bactérias Gram negativas.
Os valores de MIC foram estudados para as cepas
bacterianas, sendo sensíveis aos extratos na difusão em ágar
Tabela 3. Atividades antibacterianas de extratos de metanol:água
(80:20) deEspondiasespécies.
S. mombin S. tuberosa
microrganismos ID MIC MBC EU IA microfone MBC
Klebsiella pneumonia ––R 19.1 125 R
Serratia marcescens 11,0 125R 11,8 62,5 R
Pseudomonas aeruginosa ––R 20,1 125R
Proteus mirabilis 9,6 125R 8,8 62,5 R
Morganella morganii ––R 10,2 125R
Serratia liquefaciens ––R 11,2 62,5R
Enterobacter cloacae 20,0 125 R 15,0 62,5 R
* Unidade de concentração: µg/mL; (–) Sem inibição ou inativa com
zonas de inibição inferiores a 7mm; ID, diâmetro da zona de inibição
expresso em mm; MIC, concentrações inibitórias mínimas (µg/mL);
MBC, concentrações bactericidas mínimas; R, inibição na maior
concentração utilizada (500 µg/mL); atividade moderada: zonas de
inibição na faixa de 7–13mm; alta atividade: zonas de inibição
maiores que 14mm.
Biologia Farmacêutica

método. O antibiótico padrão foi a ciprofloxacina (CIP) que
apresentou valores de MIC de 7,8 µg/mL.S. mombin extrato
apresentou MIC = 125 µg/mL paraSerratia marcescens,
Proteus mirabiliseEnterobacter cloacae. S. tuberosaextrato
apresentou MIC = 62,5 µg/mL contraSerratia marcescens,
Serratia liquefaciens, Proteus mirabilise Enterobacter
cloacae.ContraKlebsiella pneumoniae, Pseudomonas
aeruginosae paraMorganella morganii a MIC foi de 125 µg/
mL (Tabela 3). Meot-Duros et al. (2008) testaram frações
polares e apolares deCrithmum maritimumEU.,Eryngium
maritimumTerracaquile maritimaScop sai e encontrou
valores MIC de cerca de 100 µg/mL. A atividade
antimicrobiana é relevante em concentrações abaixo de 100
µg/mL para extratos e 10 µg/mL para compostos isolados
(Ríos & Recio, 2005). Satpathy et al. (2011) mostraram
atividade antimicrobiana contra Gram negativos e Gram
positivos com MIC variando entre 1,8 e 2,9mg/mL de
Spondias pinnataextratos.
Segundo Natarajan et al. (2005) o método MIC é o mais
adequado para avaliar a atividade antibacteriana de
produtos naturais. Embora as atividades encontradas de
Espondiasespécies foram menores quando comparadas ao
antibiótico padrão, o aumento da resistência dos
microrganismos aos antibióticos estimula a busca por novos
fármacos. Nikaido e Vaara (1985) apontam que a maior
resistência de bactérias Gram negativas a agentes externos
foi relatada anteriormente, e é atribuída à presença de
lipopolissacarídeos em suas membranas externas, o que as
torna inerentemente resistentes a antibióticos, detergentes
e corantes hidrofílicos . A atividade antibacteriana da
quercetina e da rutina já foi demonstrada (Cushnie & Lamb,
2005) e provavelmente contribui paraEspondiasespécie
extrai ação antimicrobiana.
conclusão
O estudo químico de extratos de folhas deEspondiasespécie mostra
a ocorrência de quercetina, rutina e ácido elágico. As atividades
antioxidante e antimicrobiana dos extratos e constituintes foram
avaliadas apresentando resultados relevantes. As atividades dos
constituintes podem estar diretamente correlacionadas com a
cicatrização de feridas e propriedades anti-inflamatórias das
plantas, então este estudo confirma o uso etnofarmacológico de
doisEspondiasespécies.
Declaração de interesse
Os autores agradecem às agências governamentais brasileiras
CAPES e FUNCAP (Financiamento à Pesquisa do Estado do Ceará)
pelo apoio financeiro.
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