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Food Chemistry 121 (2010) 996–1002

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Química de Alimentos

página inicial do jornal: www. el sev ier . com/ l oca te / f oodchem

Compostos bioativos e capacidades antioxidantes de 18 frutas tropicais não

tradicionais do Brasil
Maria do Socorro M. Rufinoa, Ricardo E. Alvesb,*, Edy S. de Britob, Jara Pérez-Jiménezc,
Fulgêncio Saura-Calixtoc, Jorge Mancini-Filhod
aUniversidade
Federal Rural do Semi-Árido (UFERSA), BR 110, Km 47, Presidente Costa e Silva, 59625-900 Mossoró, RN, Brasil
bLaboratório
de Fisiologia e Tecnologia Pós-colheita, Embrapa Agroindústria Tropical, R. Dra. Sara Mesquita, 2270, Pici, 60511-110 Fortaleza, CE, Brasil
cDepartamento de Metabolismo e Nutrição, Instituto de Ciência e Tecnologia Alimentar e Nutrição (ICTAN-CSIC), Calle José Antonio Novais, 10, 28040 Madrid, Espanha

dDepartamento de Alimentos e Nutrição Experimental, Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Universidade de São Paulo (FCF/USP), SP, Av. Prof. Lineu Prestes 580, Bl. 14, 05508-900 São Paulo, SP, Brasil

artigoinfo abstrato

Historia do artigo: Os compostos bioativos e as capacidades antioxidantes de extratos polifenólicos de 18 frutas nativas não
Recebido em 11 de abril de 2009 tradicionais frescas e secas do Brasil foram determinados usando ABTS, DDPH, FRAP eb-métodos de branqueamento
Recebido em forma revisada em 16 de novembro de
de caroteno. O estudo fornece uma adaptação desses métodos, juntamente com uma avaliação dos compostos
2009 Aceito em 21 de janeiro de 2010
relacionados ao potencial antioxidante. Os resultados mostram perspectivas promissoras para a exploração de
espécies frutíferas tropicais não tradicionais com teores consideráveis de nutrientes e capacidade antioxidante.
Embora os métodos de avaliação e os resultados relatados ainda não tenham sido suficientemente padronizados,
Palavras-chave:
dificultando comparações, nossos dados agregam informações valiosas ao conhecimento atual das propriedades
Frutas tropicais
nutricionais de frutas tropicais, como a considerável capacidade antioxidante encontrada para a acerola –Malpighia
fenólicos
Antioxidantes emarginata e camu-camu –Myrciaria dubia (ABTS, DPPH e FRAP) e para puçá-preto –Mouriri pusa (todos os
ABTS métodos).
DPPH - 2010 Elsevier Ltd. Todos os direitos reservados.
FRAP
b-branqueamento de caroteno

1. Introdução ter acesso a mercados especiais onde os consumidores valorizam o

A América Tropical abriga uma grande variedade de espécies
frutíferas e algumas delas foram domesticadas há muito tempo pelos
nativos ameríndios. A riqueza de espécies está associada às
características geográficas da região, especialmente a heterogeneidade
da flora das Américas do Norte e do Sul e a sobreposição parcial entre
a região amazônica e a baixa América Central. Uma lista de frutas dos
trópicos, incluindo América, Ásia, Austrália e África, menciona mais de
2000 espécies. Só na América, cerca de mil espécies, pertencentes a 80
famílias, foram identificadas; destes, pelo menos 400 ocorrem ou são
originários do Brasil (Alves, Brito, Rufino, & Sampaio, 2008; Donádio,
1993; Martin, Campbell e Ruberté, 1987).
O consumo de frutas tropicais vem aumentando no mercado nacional e
internacional devido ao crescente reconhecimento de seu valor nutricional e
terapêutico. O Brasil possui um grande número de espécies frutíferas
nativas e exóticas subexploradas, de potencial interesse para a
agroindústria e possível futura fonte de renda para a população local. Essas
frutas representam uma oportunidade para os produtores locais
* Autor correspondente. Tel.: +55 85 3391 7202; fax: +55 85 3391 7222. Endereço de
e-mail:elesbao@pq.cnpq.br,elesbao@cnpat.embrapa.br (RE Alves).
caráter exótico e a presença de nutrientes capazes de prevenir doenças
degenerativas (Alves, Brito e outros, 2008). O consumo de frutas não é
mais apenas resultado de gosto e preferência pessoal, mas tornou-se
uma preocupação de saúde devido ao conteúdo de nutrientes vitais da
fruta. Além dos nutrientes essenciais, a maioria das frutas apresenta
quantidades consideráveis de micronutrientes, como minerais, fibras,
vitaminas e compostos fenólicos secundários. Evidências crescentes
mostram a importância desses micronutrientes para a saúde humana. (
Vasco, Ruales, & Kamal-Eldin, 2008; Veer, Jansen, Klerk e Kok, 2000).
Ao longo do tempo, as diferentes metodologias empregadas para avaliar a
capacidade antioxidanteem vitroproduziram resultados conflitantes e não
comparáveis. Variações na preparação da amostra também podem ter afetado
muito os resultados e esse é um problema que merece atenção dos
pesquisadores. A capacidade antioxidante pode ser expressa usando vários
parâmetros diferentes, incluindo capacidade de eliminação do radical peroxil
(ORAC – capacidade de absorção do radical de oxigênio, TRAP – potencial
antioxidante reativo total), capacidade de redução de metais (FRAP – poder
antioxidante redutor férrico, CUPRAC – capacidade antioxidante redutora de íons
cúpricos ), capacidade de eliminação de radicais hidroxila (método da
desoxirribose), capacidade de eliminação de radicais orgânicos (ABTS

0308-8146/$ - ver matéria inicial - 2010 Elsevier Ltd. Todos os direitos reservados.
doi:10.1016/j.foodchem.2010.01.037
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– 2,20-azino-bis(ácido 3-etilbenztiazolina-6-sulfônico), DPPH –
2,2-difenil-1-picrilhidrazil) e quantidades de produtos de peroxidação
lipídica (TBARS, oxidação de LDL,b-co-oxidação de caroteno) (Aruoma,
2003; Sánchez-Moreno, 2002).
FRAP, ABTS, DPPH e ORAC são os métodos mais amplamente utilizados
para determinar a capacidade antioxidanteem vitro.Recomenda-se que pelo
menos dois (ou até mesmo todos) desses ensaios sejam combinados para
fornecer uma imagem confiável da capacidade antioxidante total de um
alimento, desde que os pontos fortes, fracos e aplicabilidade de cada tipo de
ensaio sejam levados em consideração.Pérez-Jiménez et al., 2008). Ob-
método de branqueamento de caroteno também é popular. Avalia o nível de
inibição dos radicais livres gerados durante a peroxidação do ácido linoléico
(Duarte-Almeida, Santos, Genovese, & Lajolo, 2008). O objetivo deste
trabalho foi caracterizar a capacidade antioxidante, juntamente com a
quantificação dos principais compostos bioativos, encontrados em algumas
frutas tropicais subutilizadas no Brasil.
2. Materiais e métodos
2.1. Reagentes químicos
Os reagentes utilizados foram 2,6-dicloroindofenol (DFI), 2,2-
difenil-1-picrilhidrazil (DPPH-), 2,20-azino-bis(ácido 3-etilbenztiazolina-6-
sulfônico) (ABTS-), ácido 6-hidroxi-2,5,7,8-tetrametil croman-2-
carboxílico (trolox) e 2,4,6-tris(2-piridil)-s-triazina (TPTZ) da Sigma
Chemical Co. , além de persulfato de potássio da Acrós Organics,
sulfato ferroso da Vetec e b-caroteno da Merck.
2.2. Preparação de amostra
Os frutos foram colhidos e encaminhados ao laboratório para extração
da polpa. Duas frutas (açaí e juçara) necessitaram de um processamento
especial devido ao epicarpo e endocarpo altamente fibrosos. A polpa e a
fibra foram separadas e pesadas mecanicamente e adicionada água
destilada (1:2). A massa foi homogeneizada e as partes não comestíveis
(fibra e caroço) foram descartadas. A polpa do bacuri foi extraída
manualmente com faca e tesoura, sendo a casca e a semente descartadas.
Para os outros 15 frutos, a polpa e a casca foram processadas e apenas as
sementes foram descartadas.
Os compostos bioativos foram determinados pelas seguintes
metodologias: vitamina C pelo método do 2,6-diclorofenol indofenol (
Strohecker & Henning, 1967), antocianinas totais e flavonóides
amarelos conforme descrito porFrancisco (1982), carotenóides totais
como porHigby (1962)e clorofila, seguindo o procedimento deBruinsma
(1963).
Na preparação para o ensaio antioxidante, parte da polpa foi
mantida fresca enquanto o restante foi liofilizado e armazenado em
- 80 -C antes da extração e análise. O teor de umidade foi determinado
para todos os frutos (mesa 2).
Devido às diferentes concentrações de bioativos entre as frutas,
realizamos pré-testes para polifenóis extraíveis e capacidade
antioxidante total para determinar o tamanho de amostra ideal (g) para
cada método. Os pesos frescos e secos finais para extração foram,
respectivamente, açaí: 5 g e 2 g; acerola: 2g e 0,2g; bacuri: 40g e 10g;
camu-camu: 1g e 0,2g; carnaúba: 20g e 10g; caju: 20g e 2g; gurguri: 5g
e 4g; jabuticaba: 3g e 0,5g; ameixa java: 5g e 2g; juçara: 2g e 2g;
mangaba: 10g e 2g; murta: 5g e 4g; puçá-coroa-de-frade: 5g e 2g; puçá-
preto: 5g e 2g; umbu: 20g e 2g; e uvaia: 6 g e 0,6 g; cajá amarelo: 30 g e
4 g. A capacidade antioxidante não pôde ser determinada para
amostras frescas de nance devido à interferência do teor de óleo. Por
isso,

tabela 1mostra as 18 frutas incluídas no estudo, juntamente com

suas respectivas identificações botânicas e origens geográficas.
2.3. Extração de antioxidantes
tabela 1
Lista das 18 frutas tropicais não tradicionais brasileiras incluídas no estudo.
O procedimento desenvolvido porLarrauri, Rupérez e Saura-Calixto
Nome comum Espécies Família Origem (Cidade, (1997)foi empregado e é brevemente descrito a seguir: amostras
Estado) frescas e liofilizadas da fase de pré-teste foram pesadas (g) em tubos
Açaí, açaí Euterpe oleracea Arecaceae Paraipaba, Ceará de centrífuga e extraídas sequencialmente com 40 ml de metanol/água
acerola Malpighia Malpighiaceae limoeiro do (50:50, v/v) à temperatura ambiente por 1 h . Os tubos foram
emarginata Norte, Ceará
centrifugados a 25.400gpor 15 min e o sobrenadante foi recuperado.
Bacuri Platonia insignis Clusiaceae Coelho Neto,
Maranhão Em seguida, 40 ml de acetona/água (70:30, v/v) foram adicionados ao
cajá, amarelo Spondias mombin Anacardiaceae limoeiro do resíduo à temperatura ambiente, extraído por 60 min e centrifugado.
mombim Norte, Ceará Os extratos de metanol e acetona foram combinados, completados
caju, caju Anacárdio Anacardiaceae Pacajús, Ceará para 100 ml com água destilada e usados para determinar a
maçã ocidental
camu-camu Myrciaria dubia Myrtaceae Belém, Pará
capacidade antioxidante e teores de polifenóis extraíveis (Figura 1).
carnaúba copérnica Arecaceae Maracanaú, Ceará
prunifera 2.4. Determinação de fenólicos totais
Gurguri Mouriri Melastomataceae Beberibe, Ceará
guianensis
Os polifenóis totais foram determinados pelo método de Folin-
jabuticaba Myrciaria Myrtaceae Serra de Ibiapaba,
cauliflora Ceará Ciocalteu.Obanda & Owuor, 1997) no sobrenadante. Os extratos (1,0
Jambolão, java Syzygium cumini Myrtaceae Trairi, Ceará ml) foram misturados com 1 ml de reagente Folin-Ciocalteu (1:3), 2 ml
ameixa de solução de carbonato de sódio 20% e 2 ml de água destilada. Após 1
Juçara, juçara Euterpe edulis Arecaceae São Paulo, São h, a absorbância a 700 nm foi lida no espectrofotômetro. Os resultados
Paulo
foram expressos em g de equivalentes de ácido gálico (GAE)/100 g.
mangaba Hancornia Apocináceas Ipiranga, Piauí
especiosa
Murici, nance Byrsonima Malpighiaceae Fortaleza, Ceará
acordo 2.5. ABTS-+ensaio
Murta Blefarocálice Myrtaceae Crato, Ceará
salicifolius
Puçá-coroa-de- Mouriri elíptica Melastomataceae Beberibe, Ceará A ABTS-+ensaio foi baseado em um método desenvolvido porMiller e
frade outros. (1993)com modificações. ABTS-+os cátions radicais foram produzidos
Puçá-preto Mouriri pusa Melastomataceae Ipiranga, Piauí pela reação da solução estoque de ABTS 7 mM com persulfato de potássio
umbu Spondias tuberosa Anacardiaceae Picos, Piauí 145 mM e permitindo que a mistura permanecesse no escuro à temperatura
Uvaia Eugênia Myrtaceae Paraipaba, Ceará
ambiente por 12 a 16 horas antes do uso. A ABTS-+solução foi diluída com
piriforme
etanol para uma absorção de 0,70 ± 0,02 a
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mesa 2
Compostos bioativos (mg/100 g de matéria frescaa) e umidade (%) em 18 frutas tropicais brasileiras não tradicionais.

frutas Vitamina C Total de antocianinas flavonóides amarelos Carotenóides totais Clorofila Umidade

Açaí, Açaí 84,0 ± 10 111 ± 30,4 91,3 ± 20,6 2,8 ± 0,4 20,8 ± 3,8 84,1 ± 2,8
acerola 1357 ± 9,5 18,9 ± 0,9 9,6 ± 1,4 1,4 ± 0,1 nd 91,0 ± 0,2
Bacuri 2,4 ± 0,3 0,3 ± 0,2 16,9 ± 1,7 – nd 73,7 ± 8,0
Cajá, mombim amarelo 26,5 ± 0,5 – 7,1 ± 0,7 0,7 ± 0,0 nd 86,4 ± 0,9
caju, caju 190 ± 5,7 9,5 ± 4,6 63,8 ± 26,5 0,4 ± 0,1 nd 86,9 ± 0,6
camu-camu 1882 ± 43,2 42,2 ± 17,0 20,1 ± 4,4 0,4 ± 0,0 nd 89,8 ± 0,5
carnaúba 78,1 ± 2,6 4,1 ± 0,1 66,4 ± 2,3 0,6 ± 0,2 4,2 ± 0,2 70,7 ± 0,6
Gurguri 27,5 ± 0,2 3,3 ± 0,2 41 ± 1,5 4,7 ± 0 nd 74,7 ± 3,7
jabuticaba 238 ± 2,2 58,1 ± 0,9 147 ± 42,5 0,32 ± 0,1 nd 85,9 ± 0,4
Jambolão, ameixa de java 112 ± 5,8 93,3 ± 3,4 70,9 ± 1,2 0,51 ± 0,1 0,9 ± 0,2 84,9 ± 0,3
Juçara, Juçara 186 ± 43,3 192 ± 43,2 375 ± 87,6 1,9 ± 0,5 21,5 ± 4,1 90,2 ± 1,3
mangaba 190 ± 1,91 0,4 ± 0,11 15 ± 1,1 0,3 ± 0,05 nd 90,8 ± 1,2
Murici, nance 148 ± 4,0 0,5 ± 0,1 13,8 ± 0,5 1,1 ± 0,1 nd 60,6 ± 0,7
Murta 181 ± 1,8 143 ± 0,5 207 ± 8,2 0,5 ± 0,1 5,0 ± 0,5 74,1 ± 2,2
Puçá-coroa-de-frade 41,1 ± 6,7 3,7 ± 0,8 17,7 ± 2,0 3,4 ± 0,1 nd 62,6 ± 0,2
Puçá-preto 28,9 ± 1,4 103 ± 21,6 143 ± 12,6 4,2 ± 0,4 5,6 ± 1,1 64,1 ± 0,8
umbu 18,4 ± 1,8 0,3 ± 0,2 6,9 ± 1,7 1,0 ± 0,2 nd 87,9 ± 0,1
Uvaia 39,3 ± 5,2 1,13 ± 0,1 17,5 ± 1,6 1,7 ± 0,1 nd 89,3 ± 1,2

aValor médio ± desvio padrão;n =3; nd = não determinado.

Frutas de amostra (g)

Metanol:água - 40 ml (50:50 v/v)

Resíduo

Sobrenadantes 1 e 2
Acetona:água - 40 ml (70:30 v/v)

metanólico e
100ml extratos acetônicos
Resíduo

capacidade antioxidante
Polifenóis extraíveis

Figura 1.Fluxograma mostrando a determinação da capacidade antioxidante de extratos aquosos-orgânicos.

734 milhas náuticas. Após a adição de 30eul de amostra ou padrão trolox para 3
ml de ABTS diluído-+solução, as absorbâncias foram registradas 6 minutos após a
mistura. Soluções etanólicas de concentrações conhecidas de trolox foram usadas
para calibração e os resultados foram expressos como
euM trolox/g fruta.
2.6. DPPH-(eliminação de radicais livres) ensaio
A capacidade antioxidante foi determinada pelo DPPH modificado-
método (Brand-Williams, Cuvelier & Berset, 1995) que se baseia na
quantificação da eliminação de radicais livres com modificações. Uma
solução de metanol contendo DPPH 0,06 mM-estava preparado. Após ajuste
do branco com metanol, uma alíquota de 100eul de extrato de fruta foi
adicionado a 3,9 ml desta solução. A diminuição da absorvância a 515 nm foi
medida em intervalos de 1 minuto durante os primeiros 10 minutos e depois
em intervalos de 5 minutos até à estabilização. Com base em estudo
preliminar, os tempos necessários para obter DPPH-
as leituras de cada fruta foram as seguintes: açaí, 120 min; acerola, 10
min; bacuri, 180 min; cajú, 30 min; camu-camu, 5 min; carnaúba, 120
min; gurguri, 60 min; jabuticaba, 60 min; java ameixa, 90 min; juçara, 60
min; mangaba, 30 min; murta, 30 min; nance, 240 min; puçá-coroa-de-
frade, 120 min; puçá-preto, 150 min;
umbu, 180 min; uvaia, 120 min; cajá amarelo, 180 min. A capacidade
antioxidante foi expressa como a concentração de antioxidante
necessária para reduzir a quantidade original de radicais livres em 50%
(EC50) e valores expressos em g fruto/g DPPH-.
2.7. Ensaio de poder antioxidante redutor férrico (FRAP)
A capacidade antioxidante de cada amostra foi estimada pelo ensaio
FRAP, seguindo o procedimento descrito na literatura (Benzie & Strain, 1996)
com modificações. Resumidamente, 2,7 ml de reagente FRAP recém-
preparado (TPTZ, FeCl3e tampão de acetato) a 37 -C foi misturado com 90eul
de extrato de fruta e 270eul de água destilada. Usando um branco
contendo reagente FRAP como referência, a absorbância em 595 nm foi
determinada em 30 min. Soluções aquosas de concentrações conhecidas de
Fe (II) na faixa de 100–1500euM (Fe2ENTÃO4) foram usados para
calibração.
2.8.b-Método de branqueamento de caroteno
A capacidade antioxidante de cada amostra foi estimada pelo b-
método de branqueamento caroteno, seguindo o procedimento
descrito na literatura (Marcos, 1968) com modificações. O espectrofo-
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ensaio tométrico é baseado emb-oxidação do caroteno (descoloração)
induzida pelos produtos da degradação oxidativa do ácido linoleico. As
soluções foram preparadas misturando 5 ml deb-solução do sistema
caroteno/ácido linoléico e 0,4 ml de soluções de extrato de frutas/trolox em
diferentes concentrações. A mistura foi mantida em banho-maria a 40 -C. As
leituras espectrofotométricas foram feitas a 470 nm 2 min após a mistura e
depois em intervalos de 15-120 min. Os resultados foram expressos como
porcentagens de inibição da oxidação, pois a absorbância de amostras
sucessivas diminuiu em relação ao trolox.
2.9. Análise estatística
Os ensaios foram realizados em triplicado para cada amostra. Os
resultados foram expressos como valores médios ± desvio padrão (DP). Para
determinar se os compostos bioativos contribuíram para a capacidade
antioxidante, foram calculados os coeficientes de correlação de Pearson, a
1% e 5% de probabilidade, usando o método de Studenttteste para todas as
variáveis.
3 Resultados e discussão
3.1. Quantificação de compostos bioativos
As frutas incluídas neste estudo desempenham um papel econômico
importante, seja no mercado internacional ou localmente em alguns países
da América tropical.
Os resultados para vitamina C, antocianinas totais, flavonóides
amarelos, carotenóides totais e clorofila obtidos nesta pesquisa são
mostrados emmesa 2e revelam que a maioria das frutas continha
quantidades consideráveis de vitamina C, destacando-se o camu-camu
(1882 mg/100 g) e a acerola (1357 mg/100 g).
O camu-camu é considerado um alimento altamente nutritivo.
Outros autores (Alves, Filgueiras, Moura, Araújo, & Almeida, 2002)
relataram teores de vitamina C (2.600 mg/100 g de polpa) para essa
fruta ainda superiores aos observados no presente estudo. A acerola é
quase tão rica em vitamina C quanto o camu-camu, pois o teor de
vitamina C pode variar de 0,8% a 3,5% (Alves, Chitarra, & Chitarra, 1995;
Alves, Filgueiras, Mosca, & Menezes, 1999; Alves, Filgueiras, Mosca,
Silva, & Menezes, 2008).
As antocianinas são compostos de cores vivas responsáveis por grande
parte da coloração vermelha, azul e roxa das frutas. Eles são espe-
abundante em bagas, como mirtilos e groselhas (Kähkönen, Hopia, &
Heinonen, 2001). O açaí e a juçara, às vezes chamados de baga da
palmeira, exibem uma característica coloração preto-arroxeada devido
ao grande conteúdo de antocianinas (111 e 192 mg/100 g), flavonoides
(91,3 e 375 mg/100 g) e clorofila (20,8 e 21,5 mg /100 g),
respectivamente.Pozo-Insfran, Brenes e Talcott (2004)concluíram que
as antocianinas eram o fator contribuinte predominante para a
capacidade antioxidante do açaí, que se mostrou superior à do suco de
uva moscatel e à de diversas frutas silvestres, como mirtilos, morangos,
framboesas, amoras e cranberries.
O Puçá-preto mostrou-se excelente fonte de antocianinas totais (103
mg/100 g), assim como os mirtáceos, murta (143 mg/ 100 g), ameixa
javali (93,3 mg/100 g), jabuticaba (58,1 mg/100 g g) e camu-camu (42,2
mg/100 g), com teores comparáveis aos de outras frutas conhecidas
como fontes de antocianinas. Esses valores estão na mesma faixa
daqueles relatados para frutas tropicais. Em comparação, morangos
contêm 21 mg/100 g, uvas vermelhas 27 mg/100 g, framboesas
vermelhas 92 mg/100 g, cerejas 122 mg/100 g, amoras 245 mg/100 g e
mirtilos cultivados 387 mg/100 g (Wu e outros, 2006).
Os carotenóides não são apenas importantes precursores da
vitamina A, mas exibem um nível considerável de atividade
antioxidante. As frutas incluídas neste estudo continham carotenóides
na faixa de 0,3 mg/100 g (mangaba) a 4,7 mg/100 g (gurguri). Este
último é, por qualquer padrão, uma rica fonte de carotenóides. A
exceção mais óbvia é talvez a palma do vinho (Mauritia vinifera;48,9
mg/100 g), um dos mais importantes precursores da vitamina A da
flora brasileira (Godoy & Rodriguez-Amaya, 1998).
3.2. Polifenóis e capacidade antioxidante
3.2.1. Polifenóis extraíveis
A quantidade de polifenóis extraíveis variou muito entre as espécies
de frutas (Tabelas 3 e 4). Seguindo o exemplo deVasco e cols. (2008),
que testou 17 frutas do Equador quanto ao teor de polifenóis,
classificamos nossas frutas em três categorias: baixo (<100 mg GAE/100
g), médio (100–500 mg GAE/100 g) e alto (>500 mg GAE/100 g) para
amostras baseadas em matéria fresca, e baixo (<1000 mg GAE/100 g),
médio (1000–5000 mg GAE/100 g) e alto (>5000 mg GAE/100 g) em
matéria seca.

Tabela 3
Polifenóis e capacidade antioxidante em extratos aquosos-orgânicos de 18 frutas tropicais brasileiras não tradicionais à base de matéria fresca.a

frutas Polifenóis extraíveis mg DPPH- ABTS-+ FRAP b-branqueamento de caroteno

GAE/100 g CE50(g/g DPPH-)b eumol trolox/g eumol Fe2ENTÃO4/g % OIc

Açaí, açaí 454 ± 44,6 4264 ± 1381 15,1 ± 4,1 32,1 ± 6,5 31,9 ± 3,2
acerola 1063 ± 53,1 670 ± 64,5 96,6 ± 6,1 148 ± 16 nd
Bacuri 23,8 ± 0,7 nd nd nd nd
Cajá, mombim amarelo 72,0 ± 4,4 9397 ± 64,8 7,8 ± 0,2 11,8 ± 0,2 92,7 ± 1,1
caju, caju 118 ± 3,7 7142 ± 205 11,2 ± 0,04 22,9 ± 0,7 25 ± 8,9
camu-camu 1176 ± 14,8 478 ± 1,2 153 ± 2,6 279 ± 1,5 nd
carnaúba 338 ± 36,4 3549 ± 184 10,7 ± 0,2 15,5 ± 0,4 87,7 ± 2,7
Gurguri 549 ± 22,2 1385 ± 102 35,5 ± 1,6 70,4 ± 7,8 69,7 ± 8,2
jabuticaba 440 ± 9,9 1472 ± 16,9 37,5 ± 1,4 87,9 ± 1,9 90,7 ± 0,1
Jambolão, ameixa de java 185 ± 3,8 3025 ± 65,4 29,7 ± 0,3 35,5 ± 1,4 67,6 ± 3,1
Juçara, juçara 755 ± 8,3 1711 ± 46 78,3 ± 13,3 84,9 ± 16,1 70,8 ± 7,9
mangaba 169 ± 21,5 3385 ± 349 14,6 ± 1,8 18,3 ± 1,6 nd
Murici, nance nd nd nd nd nd
Murta 610 ± 17,7 936 ± 33,3 49,1 ± 0,2 108 ± 2,3 74 ± 9,2
Puçá-coroa-de-frade 268 ± 4,8 1272 ± 51,4 38,5 ± 1,2 84,9 ± 1,3 77,3 ± 1,4
Puçá-preto 868 ± 51,0 414 ± 14,4 125 ± 9,7 208 ± 3,9 85,9 ± 7,4
umbu 90,4 ± 2,2 7074 ± 218 6,3 ± 0,2 17,2 ± 0,3 63,4 ± 8,4
Uvaia 127 ± 3,3 3247 ± 392 18 ± 0,8 38,4 ± 4,1 79,8 ± 5,9

aValor médio ± desvio padrão;n =3; nd = não detectado.

b
Concentração de antioxidante necessária para reduzir a quantidade original de radicais livres em 50%.
c
Inibição da oxidação.
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Tabela 4
Polifenóis e capacidade antioxidante em extratos aquosos-orgânicos de 18 frutas tropicais brasileiras não tradicionais (matéria seca).a

frutas Polifenóis extraíveis mg DPPH- ABTS-+ FRAP b-branqueamento de caroteno

GAE/100 g CE50(g/g DPPH-) eumol Trolox/g eumol Fe2ENTÃO4/g % OIb

Açaí, açaí 3268 ± 527 598 ± 164 64,5 ± 19,2 220 ± 32,9 76,1 ± 6
acerola 10.280 ± 77,7 49,2 ± 2,5 953 ± 34,1 1996 ± 47 nd
Bacuri 1365 ± 43,3 6980 ± 854 18,1 ± 3,7 16,1 ± 1,4 74,9 ± 0,7
Cajá, mombim amarelo 579 ± 12,9 1064 ± 162 40,7 ± 2,2 97,6 ± 0,6 84,9 ± 3,4
caju, caju 830 ± 26,5 906 ± 78,2 79,4 ± 15,7 154 ± 7,8 44,6 ± 11,7
camu-camu 11.615 ± 384 42,6 ± 1,4 1237 ± 33,8 2502 ± 74,5 nd
carnaúba 830 ± 28,3 4877 ± 24,3 16,4 ± 0,2 18,8 ± 0,1 94,2 ± 3,2
Gurguri 1364 ± 24,8 360 ± 32,7 136 ± 20,1 274 ± 15,7 97,5 ± 0,7
jabuticaba 3584 ± 90,9 138 ± 3,1 317 ± 2,7 635 ± 11,9 90,6 ± 0,6
Jambolão, ameixa de java 1117 ± 67,1 938 ± 46,9 125 ± 10,8 173 ± 10,8 88,4 ± 6,8
Juçara, juçara 5672 ± 55,9 70,1 ± 4,8 606 ± 142 834 ± 142 96,1 ± 2,5
mangaba 935 ± 37 890 ± 69,1 65,6 ± 7,4 163 ± 11,7 34,7 ± 12,3
Murici, nance 2380 ± 104 238 ± 17,7 412 ± 13 334 ± 3,9 61,5 ± 1,6
Murta 2055 ± 75,7 363 ± 27,4 166 ± 4 299 ± 22,4 92,5 ± 0,6
Puçá-coroa-de-frade 1047 ± 77 316 ± 2 161 ± 3 380 ± 0,4 95,9 ± 1,2
Puçá-preto 2638 ± 48,9 65,6 ± 2,4 346 ± 21,7 909 ± 28,4 99,1 ± 0,5
umbu 742 ± 19 933 ± 109 77 ± 15,4 143 ± 1,3 79,3 ± 14,6
Uvaia 1930 ± 129 276 ± 22,2 182 ± 14,2 408 ± 34,9 63,7 ± 5,3

aValor médio ± desvio padrão;n =3; nd = não detectado.

bInibição da oxidação.

As frutas frescas e secas mais ricas em polifenóis foram,
respectivamente, camu-camu (1176 mg GAE/100 g e 11.615 mg GAE/
100 g), acerola (1063 mg GAE/100 g e 10.280 mg GAE/100 g) e puçá-
preto (868 mg GAE/100 g e 2638 mg GAE/100 g), indicando que esses
frutos são excelentes fontes de polifenóis.
As frutas frescas e secas classificadas com teores intermediários de
polifenóis foram açaí (454 mg GAE/100 g e 3268 mg GAE/100 g) e
jabuticaba (440 mg GAE/100 g e 3584 mg GAE/100 g), respectivamente.
Por fim, as frutas frescas classificadas como pobres em polifenóis
foram umbu, cajá e bacuri; as frutas secas incluíam mangaba,
carnaúba, caju, umbu e cajá.
Um estudo recente produziu achados semelhantes para o conteúdo total
de fenóis em acerola fresca do Ceará, Brasil (1056 mg GAE/100 g) (Alves,
Brito e outros, 2008). Em outro estudo, envolvendo 14 mirtáceos (
Reynertson, Yang, Jiang, Basile e Kennelly, 2008), os resultados também
foram próximos aos nossos: 10,100 mg GAE/100 g, 3160 mg GAE/100 g e
995 mg GAE/100 g para camu-camu seco, jabuticaba e ameixeira,
respectivamente.
3.2.2. Medição da capacidade antioxidante
Capacidade antioxidante, conforme determinado por DPPH-, ABTS-+, FRAP e b-
métodos de caroteno, é mostrado emTabelas 3 e 4.
Ao testar matéria fresca e seca, respectivamente, pelo DPPH-
método, os frutos mais antioxidantes foram o puçá-preto (EC50= 414 e
65,6 g/g DPPH-), camu-camu (CE50= 478 e 42,6 g/g DPPH-) e acerola (CE
50= 670 e 49,2 g/g DPPH-), indicando uma associação entre a capacidade
antioxidante e os teores de fenóis e, no
caso da acerola e do camu-camu, entre a capacidade antioxidante e também
os teores de vitamina C (Tabela 5). Em outro estudo da capacidade
antioxidante de amostras frescas de acerola do Ceará, Brasil, os resultados
foram ligeiramente superiores aos nossos (839 g/g DPPH-) (Alves, Brito e
outros, 2008). A banana maracujá (Passiflora mollissima) produzido na
América tropical também possui uma grande capacidade antioxidante (407 g
fruta fresca/g DPPH-), não muito diferente das espécies avaliadas no
presente estudo (Vasco e outros, 2008).
Organizado em ordem decrescente de capacidade antioxidante,
medido na matéria fresca pelo DPPH-método, nossas frutas
classificadas da seguinte forma: cajá > caju > umbu > açaí > carnaúba >
mangaba > uvaia > jabuticaba > jussara > jabuticaba > gurguri >
puçácoroa-de-frade > murta > acerola > camu-camu > puçá-preto . Para
a matéria seca a ordem observada foi: bacuri > carnaúba > cajá > cajá >
umbu > caju > mangaba > açaí > murta > gurguri > puçá-coroa-de-frade
> uvaia > nance > jabuticaba > jussara > puçá-preto > acerola > camu-
camu.
Quando avaliado pela ABTS-método, nossos frutos variaram de
6,3 a 153eumol trolox/g (matéria fresca) e de 16,4 a 1237euM trolox/g
(matéria seca). Os números correspondentes para o método FRAP
foram 11,8–279 e 16,1–2502eumol Fe2ENTÃO4/g, respectivamente.
Quando organizado em ordem crescente de capacidade
antioxidante, medido pelo ABTS-método, a classificação foi: umbu <
cajá < carnaúba < caju < mangaba < assaí < uvaia < java ameixa <
gurguri < jaboticaba < puçá-coroa-de-frade < murta < jussara < acerola
< puçá-preto < camu-camu para matéria fresca. Para matéria seca foi:
carnaúba < bacuri < cajá <

Tabela 5
Coeficientes de correlação de Pearson (r)entre compostos bioativos e capacidade antioxidante (matéria fresca) de 18 frutas tropicais brasileiras não tradicionais.

R Vitamina C Antocianinas Flavonóides Carotenóides Clorofila Polifenóis DPPH- ABTS-+ FRAP

Antocianinas - 0,00
Flavonóides - 0,10 0,67**
Carotenóides - 0,23 - 0,06 - 0,14
Clorofila 0,17 0,57 0,55 0,93*
Polifenóis 0,70** 0,32 0,20 0,25 0,66
DPPH - 0,38 - 0,21 - 0,26 - 0,32 0,12 - 0,72**
ABTS 0,70** 0,13 0,03 0,14 0,36 0,92** - 0,68**
FRAP 0,70** 0,04 0,01 0,14 0,15 0,89** - 0,69** 0,97**
b-Caroteno - 0,45 - 0,10 0,20 0,07 - 0,60 - 0,16 - 0,13 - 0,11 - 0,12
*
Significativo emp <0,01.
**
Significativo emp <0,05.
 HSH Rufino et al. / Química Alimentar 121 (2010) 996–1002
assai < mangaba < umbu < caju < ameixa java < gurguri < puçá-coroa-
de-frade < murta < uvaia < jabuticaba < puçá-preto < nance < juçara <
acerola < camu-camu.
A sequência correspondente com base nos testes com o método
FRAP foi: cajá < carnaúba < umbu < mangaba < caju < açaí < java
ameixa < uvaia < gurguri < puçá-coroa-de-frade < jussara < jabuticaba <
murta < acerola < puçá -preto < camu-camu para matéria fresca, e
bacuri < carnaúba < cajá < umbu < caju < mangaba < java ameixa < açaí
< gurguri < murta < nance < puçá-coroa-de-frade < uvaia < jaboticaba <
jussara < puçápreto < acerola < camu-camu para matéria seca.
Pode-se concluir da ABTS-+, DPPH-e o FRAP avalia que acerola, camu-camu e
puçá-preto apresentam altos níveis de antioxidantes. As frutas em geral
apresentam grandes variações na capacidade antioxidante quando avaliadas
como amostras frescas pela ABTS-método. No entanto, em comparação com os
resultados publicados em outros lugares (Vasco e outros, 2008), as espécies não
tradicionais incluídas em nosso estudo tiveram uma classificação relativamente
alta.
Ob-método de branqueamento de caroteno é amplamente utilizado
em laboratórios em todo o mundo. Como não são necessárias altas
temperaturas, a capacidade antioxidante de extratos vegetais
termossensíveis pode ser determinada e avaliada qualitativamente. No
presente estudo, a capacidade antioxidante foi determinada a partir da
capacidade das amostras de inibirb-branqueamento de caroteno
causado por radicais livres gerados durante a peroxidação do ácido
linoléico. A capacidade antioxidante foi classificada como níveis altos
(>70%), intermediários (40-70%) ou baixos (<40%) de inibição da
oxidação (OI) (Hassimotto, Genovese & Lajolo, 2005). Amostras frescas
de cajá, carnaúba, gurguri, jabuticaba, jussara, murta, puçá-coroa-de-
frade, puçá-preto e uvaia apresentaram altos teores de OI. O grupo
intermediário incluiu java e umbu. Apenas duas frutas (açaí e caju)
apresentaram menos de 40% de OI
Na avaliação das amostras liofilizadas, 12 frutas apresentaram altos
teores de IO, enquanto apenas três (caju, nanceira e uvaia) apresentaram
teores intermediários. Nenhum fruto com IO inferior a 40% Acerola e camu-
camu não puderam ser testados por este método em nenhuma
concentração, possivelmente porque o alto teor de vitamina C nestes frutos
interferiu no sistema como fator pró-oxidante. Um estudo semelhante (
Alves, Brito e outros, 2008), usando ob-método de branqueamento
caroteno, da mesma forma não detectou capacidade antioxidante na
acerola.
A vitamina C é o antioxidante hidrossolúvel mais abundante nas
plantas. No entanto, o ácido ascórbico apresentou atividade pró-
oxidante nob-caroteno e assim pode ter influenciado nossos achados
para a acerola. A atividade pró-oxidante foi relatada anteriormente
para o ácido ascórbico ao usar ob-método de branqueamento de
caroteno ou o método de lipossomas (Hassimotto et al., 2005). O
comportamento pró-oxidante do ácido ascórbico foi descrito em outros
lugares (Kalt, Forney, Martin e Prior, 1999) e parece ser devido à
formação de radicais ascorbil durante a oxidação.
3.3. Correlação entre as variáveis do estudo
Coeficientes de correlação para vitamina C, antocianinas totais,
flavonóides amarelos, carotenóides totais, clorofila e polifenóis extraíveis,
medidos pelo ABTS-ensaio, DPPH-ensaio, ensaio FRAP e b-método de
branqueamento de caroteno são mostrados emTabela 5.
Uma correlação positiva e significativa foi encontrada neste estudo
entre polifenóis extraíveis de vitamina C (r =0,70), ABTS-
(r =0,70) e FRAP (r =0,70). Polifenóis e DPPH-foram negativamente e
significativamente correlacionados (r = -0,72;p <0,05); isso se deve ao
fato de que o DPPH-método produz resultados inversamente
proporcionais. Houve também uma correlação positiva e significativa
de polifenóis (p <0,05) e ABTS-(r =0,92) e FRAP (r =0,89) métodos.
1001
Não foi observada correlação entre ob-branqueamento caroteno e
qualquer uma das variáveis do estudo. Em outro estudo (Hassimotto et al.,
2005), a correlação entre a capacidade antioxidante e a vitamina C não pôde
ser estabelecida com ob-método do caroteno e método do lipossoma
porque a vitamina C foi um pró-oxidante em ambos os sistemas. Outros
autores (Kalt e outros, 1999) relataram uma influência negativa da vitamina
C, mostrando que o conteúdo de ascorbato e a capacidade antioxidante
estão negativamente correlacionados (r = -0,80) para morangos, framboesas
e mirtilos de arbustos altos e baixos.
Em conclusão, nem sempre é uma tarefa simples escolher o método
mais adequado para determinar a capacidade antioxidante. A FRAP e a
ABTS-+métodos são geralmente indicados para compostos hidrofílicos,
enquanto ob-método de branqueamento de caroteno é adequado para
compostos lipofílicos. O DPPH-método pode ser empregado
rotineiramente com extratos aquoso-orgânicos contendo compostos
hidrofílicos e lipofílicos. Em relação às quantidades consideráveis de
vitamina C (camu-camu e acerola), antocianinas (Myrtaceaes – murta,
jabuticaba e camu-camu), carotenóides (Melastomaceae – gurguri,
puçá-preto e puçá-coroa-de-frade) e compostos fenólicos, nossos
resultados indicam perspectivas promissoras para a exploração de
espécies frutíferas tropicais não tradicionais com níveis consideráveis
de nutrientes e capacidade antioxidante. As quantidades consideráveis
de antocianinas para várias das frutas não tradicionais incluídas neste
estudo provavelmente chamarão a atenção para essas espécies como
commodities potenciais. Embora os métodos de avaliação e os
resultados relatados ainda não tenham sido suficientemente
padronizados, dificultando as comparações,-+, DPPH-e FRAP) e para
puçá-preto (todos os métodos).
Reconhecimentos
Os autores agradecem à CAPES, CNPq, EMBRAPA, UFER-SA e União
Européia (INCO-CT-2005-015279) pelo apoio financeiro.
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