Escola Superior de Tecnologia – EST

Programa de Pós Graduação em Clima e Ambiente (PPG-CLIAMB)

Química Analítica Aplicada ao Monitoramento Ambiental

RELATÓRIO DA EXPERIÊNCIA 1: USO DE ESPECTROSCOPIA NA

REGIÃO DO ULTRAVIOLETA E VISÍVEL PARA DETERMINAÇÃO
QUANTITATIVA DE COMPOSTOS ORGÂNICOS

Manaus, 2023

Apresentação
 A aula prática para uso de Espectroscopia na Região do Ultravioleta E Visível
para Determinação Quantitativa de Compostos Orgânicos ocorreu no dia 01 de
novembro de 2023 no laboratório C-34 da Escola Superior de Tecnologia (EST). Os
objetivos da aula foram: determinar quantitativamente uma mistura de dois
componentes através de técnicas espectroscópicas na faixa do UV-Vis; compreender o
funcionamento do espectrofotômetro UV-Vis e aprimorar a técnica de padronização
externa.

1. Metodologia

1.1 Varredura

Inicialmente, precisou-se realizar a varredura na faixa dos comprimentos de

onda de 340 nm a 750 nm em espectrofotômetro (Tabela 1), com os corantes azul e
amarelo, sendo anotado o valor de absorbância de cada um, separadamente a fim de
descobrir o comprimento de onda ideal que cada um absorve para leitura posterior.

Fonte: Manual do Experimento 1

 Após a varredura, foi realizada a leitura do corante problema nos comprimentos
de onda ideia para identificação do amarelo e azul na mistura. Em caso de o valor da
absorbância ultrapassar a faixa de 0,900 abs, necessitou-se fazer a diluição da amostra e
os valores foram anotados.

1.2 Curva Analítica

Com os resultados da varredura anotados, foram calculados os valores para a

curva, com uma concentração conhecida, para estipular os valores na amostra problema,
os valores para referência foram em XμL/100mL. Para calcular os valores da curva,
utilizou-se a concentração conhecida de 50μL/50mL para ambos os corantes:

20 𝑎𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏â𝑛𝑐𝑖𝑎 1
=
𝑥 𝑎𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏â𝑛𝑐𝑖𝑎 2

Onde:

20 = concentração inicial preparada do corante em 100mL;

x = concentração do meio da curva analítica
absorbância 1: valor da absorbância da concentração inicial conhecida;
absorbância 2: valor da absorbância da amostra problema

Após a obtenção do valor do meio da curva, foi estipulado dois valores menores
e dois maiores, com intervalo no valor de 5. A tabela com os números correspondentes a
concentração da curva serão submetidos a novo cálculo:

[ ]𝜇𝐿 ÷ 50 = 𝑋

Os valores de concentração da curva serão divididos pela quantidade de

mililitros finais da solução mãe. No caso da equação acima demonstrada, o valor foi de
50 mL de solução mãe. Em seguida, o resultado (X) será multiplicado pela quantidade
em mL do balão volumétrico em que será medida a curva (neste caso, foi de 10 mL):

𝑋 × 10 = 𝑞𝑢𝑎𝑛𝑡𝑖𝑑𝑎𝑑𝑒 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑙𝑢çã𝑜 𝑚ã𝑒 𝑝𝑎𝑟𝑎 𝑜 𝑝𝑟𝑒𝑝𝑎𝑟𝑜 𝑑𝑎 𝑐𝑢𝑟𝑣𝑎

Ao final dos cálculos para a curva, utilizou-se uma bureta para medir os valores
de solução mãe encontrados e foram diluídos no balão de 10 mL.
 Após a leitura dos valores de referência na curva, os dados foram plotados em
Excel e obteve-se a curva e a fórmula, pela qual foi possível calcular o valor do corante
presente na solução.

2. Resultados
2.1 Varredura

Os valores de varredura para o corante amarelo pode ser visualizado na tabela

abaixo:

Tabela 2: Varredura do corante amarelo

Onda T% A Onda T% A
340 0,036 550 -0,008
350 0,064 560 -0,008
360 0,099 570 -0,007
370 0,142 580 -0,007
380 0,187 590 -0,007
390 0,228 600 -0,007
400 0,264 610 -0,007
410 0,292 620 -0,007
420 0,308 630 -0,007
430 0,312 640 -0,006
440 0,301 650 -0,006
450 0,271 660 -0,006
460 0,216 670 -0,006
470 0,161 680 -0,006
480 0,102 690 -0,006
490 0,041 700 -0,006
500 0,008 710 -0,005
510 0,004 720 -0,005
520 -0,007 730 -0,005
530 -0,008 740 -0,005
540 -0,008 750 -0,005

Com a obtenção desses resultados foi possível gerar o gráfico de absorbância do

corante amarelo:

Gráfico 1: Absorção do Amarelo

 Gráfico de absorção Amarelo
0,4

0,3
Absorbância
0,2

0,1 Absorbância

0
0 200 400 600 800
-0,1
Comprimento de onda (λ)

Ao analisar estes valores, encontra-se o comprimento de onda de 430 nm como

de melhor absorção de luz para o corante amarelo.

Para o corante azul, foram encontrados os valores:

Tabela 3: Varredura do corante Azul

Onda Absorbância Onda Absorbância

340 0,006 550 0,04
350 0,005 560 0,061
360 0,006 570 0,09
370 0,008 580 0,121
380 0,016 590 0,15
390 0,023 600 0,191
400 0,03 610 0,262
410 0,037 620 0,356
420 0,02 630 0,401
430 0,004 640 0,317
440 -0,002 650 0,182
450 -0,003 660 0,079
460 -0,003 670 0,03
470 -0,002 680 0,009
480 -0,001 690 0
490 0 700 -0,003
500 0,002 710 -0,004
510 0,005 720 -0,005
520 0,01 730 -0,005
530 0,017 740 -0,005
540 0,026 750 -0,005

Esta tabela gerou o gráfico de absorção do corante azul:

 Gráfico 2: Absorção do corante Azul

Gráfico de absorção Azul

0,45
0,4
0,35
0,3
Absorbância

0,25
0,2
0,15 Absorbância
0,1
0,05
0
-0,05 0 200 400 600 800
Comprimento de onda (λ)

Este resultado indica que para o corante azul, o comprimento de onda ideal para
leitura é de 630 nm.

A leitura do corante problema nos comprimentos de onda ideal de cada corante

resultou em:

Onda Abs diluição

430 A 0,203 1:3

630 B 0,750 1:3

2.2 Curva Analítica Corante Amarelo

Através do cálculo para curva analítica do corante amarelo, obteve-se os

resultados:

20 0,312
= → 𝑥 = 13
𝑥 0,203

O valor 13 representa o meio da curva, foram especulados valores no intervalo

de 5 em 5 para mais e para menos, após isso, foram aplicados os cálculos descritos no
item 1.2, considerando que o valor da amostra problema estava na proporção para 100
mL, as concentrações da curva foram multiplicadas por 2, visto que a proporção estava
para 50 mL. Obteve-se os resultados da Tabela 4.

Tabela 4: valores calculados e absorbância da curva Amarelo

 [ ] μL / Qtd balão
Abs
50mL de 10 mL
6 0,6 0,081
16 1,6 0,239
26 2,6 0,390
32 3,6 0,537
46 4,6 0,690

Os valores da terceira coluna (Qtd balão de 10 mL) foi a quantidade de solução

mãe medida na bureta adicionada no balão de 10 mL e em seguida foi avolumado, de
forma a preparar-se a curva (Figura 1).

Figura 1: concentrações da curva analítica do corante amarelo

Após este preparo, foi realizada a leitura em espectrofotômetro, no comprimento

de onda encontrado de melhor absorção: 430 nm e os valores foram anotados para
obtenção da curva e equação.

Gráfico 3: Curva Analítica do Amarelo

 0,8
y = 0,0154x - 0,0065
0,7
R² = 0,9972
0,6
0,5
Absorbância
0,4
Série1
0,3
Linear (Série1)
0,2
0,1
0
0 10 20 30 40 50
Concentração

Para encontrar o valor da concentração do corante amarelo, utilizando-se dessas

informações, faz-se a substituição do Y pelo valor da absorbância encontrado da
solução problema.

𝑦 = 0,0154𝑥 − 0,0065

0,203 − 0,0065 = 0,1965

0,1965
= 12,7597
0,0154

12,7597 × 4 = 51,0388

Através deste cálculo, encontrou-se que na amostra problema há

aproximadamente 51 μL/100mL de corante amarelo.

2.3 Curva analítica Corante Azul

Para o corante azul, a fim de encontrar o valor central da curva, utilizou-se o

mesmo cálculo considerando a absorbância da solução azul e da solução problema em
630 nm:

20 0,401
= → 𝑥 = 37
𝑥 0,750

Encontrou-se o meio da curva, o mesmo procedimento de 5 valores acima e 5

valores abaixo foi aplicado para os cálculos de concentração.
 Tabela 5: Valores calculados curva corante azul

[ ] μL/50mL 10ml Abs

27 5,4 0,032
32 6,4 0,038
37 7,4 0,11
42 8,4 0,113
47 9,4 0,119

A partir desses valores foi elaborada a curva e a equação:

0,14
y = 0,005x - 0,1019
0,12 R² = 0,8213

0,1

0,08
Série1
0,06 Linear (Série1)

0,04

0,02

0
0 10 20 30 40 50

Os valores desta curva, assim como as diluições não foram satisfatórias para
estipular o valor aproximado da concentração do azul na solução problema.