UNIVERSIDADE COMUNITÁRIA DA REGIÃO DE CHAPECÓ - UNOCHAPECÓ

ANÁLISE INSTRUMENTAL

ACADÊMICOS:

Vinícius David, João Gerando, Tiago, Gabriel Fante, Rodrigo.

Determinação do comprimento de onda de máxima absorção do alaranjado

de metila e do azul de metileno

Chapecó - SC, Julho de 2022

 1. INTRODUÇÃO

A espectrofotometria define-se como absorção ao processo de transição eletrônica de

um nível mais baixo para um nível mais alto envolvendo a transferência de energia de um
campo de radiação para o átomo ou molécula. O átomo ou molécula ao absorver esta energia
fica excitado, passando de seu estado energético fundamental para estados energéticos
superiores (SKOOG, 2009).
Ademais, a espectrofotometria UV-Vis é uma técnica analítica utilizada em larga
escala para a determinação das concentrações de analitos. Visando a determinação de analitos
em solução aquosa, é frequentemente explorada a capacidade que algumas substâncias
possuem de absorver radiação na faixa espectral compreendida entre 400-800 nm (BARROS,
2013).
Dessa maneira, o objetivo do presente trabalho foi a determinação do comprimento de
onda de máxima absorção do alaranjado de metila e do azul de metila, ademais tem-se como
objetivo a determinação de uma amostra desconhecida através do método de
espectrofotometria, método este utilizado para tais determinações pré-estabelecidos nos
padrões.
 2. MATERIAIS E MÉTODOS

2.1 Materiais

Nas presentes práticas foram usados os seguintes materiais:

● Balão volumétrico de 25mL;

● Pipeta graduada de 10 mL;
● Micropipetador 1000µL, 100µL;
● Pipeta conta gotas e cubetas de vidro ou plástico, caminho óptico 1 cm;

Usando como reagente solução de alaranjado de metila na concentração de 0,001

mol/L e solução de azul de metileno na concentração de 0,001 mol/, para determinarmos o
comprimento de onda e absorção do alaranjado de metila e do azul de metileno.
Para a determinação da amostra desconhecida por espectrofotometria de ultravioleta e
visível foi utilizado os seguinte materiais e reagentes:

● Balão volumétrico e Béquer de 50ml ;

● Micropipetadores de vários volumes;
● Microplacas e Espectrofotômetro;

2.2 Preparo das soluções padrão estoque para alaranjado de metila e azul de metileno

Inicialmente se calculou a massa de alaranjado de metila necessária para preparar

100ml de solução 0,001mol/L sendo de … [valor], posteriormente sendo feita a solução. Da
mesma forma foi feito para calcular a massa do azul de metileno necessária para preparar
100ml de solução 0,001mol/L sendo de …[valor].
A partir da solução padrão estoque de alaranjado de metila (0,001mol/L), preparou-se
uma série de 5 soluções padrões, sendo depositadas em balões de 25 mL, alíquotas de: 0,25;
0,35; 0,50; 0,65 e 0,75 mL,onde se adicionou água destilada até o menisco dos balões para
completar o seu volume posteriormente sendo homogeneizada e identificada.
O espectro de absorbância para alaranjado foi medido a partir da solução padrão 3 que
foi adicionada em uma cubeta, sendo medido para os seguintes valores de comprimento de
onda:400, 410, 420, 430, 440, 450, 455, 460, 465, 470, 475, 480, 490, 500, 510, 520, 530
nm.
Dessa forma, utilizando água destilada como branco, foi possível medir a absorbância
das soluções padrões 1, 2, 3, 4 e 5, permitindo assim calcular a absortividade molar do
analito, da mesma forma para curva de calibração medida.

2.3 Preparo das soluções padrão de azul de metileno

Da mesma forma que foi feito para o alaranjado, se preparou uma solução padrão
estoque azul de metileno nas respectivas concentrações de 0,10; 0,20; 0,3; 0,4 e 0,5 ml
adicionada em balões de 25 mL, onde novamente foi completado seu volume com água
destilada, homogeneizado e identificado.
O espectro de absorbância para azul foi medido a partir da solução 3 anteriormente
preparada, utilizando o branco como referência. Em seguida, mediu o comprimento de onda
para os seguintes valores: 500, 510, 520, 530, 540, 560, 600, 620, 640, 650, 660, 665, 670,
680 nm.
Novamente foi utilizado água destilada, como branco, para medir a absorbância das
soluções padrões 1, 2, 3, 4 e 5, permitindo assim calcular a absortividade molar do analito, da
mesma forma para a curva de calibração.
 3. RESULTADOS E DISCUSSÕES

3.1 Análise do Alaranjado de metila

A curva analítica do alaranjado de metila é dada pela relação entre: o comprimento de

onda utilizado para a leitura do espectrofotômetro e a absortividade molar da amostra em
análise. Os dados obtidos são expressos na tabela abaixo:
Comprimento de onda (nm) Absortividade molar

400 0,291

410 0,328

420 0,366

430 0,397

440 0,438

450 0,463

455 0,476

460 0,476

465 0,478

470 0,470

475 0,450

480 0,432

490 0,378

500 0,293

510 0,218

520 0,145

530 0,084
Tabela 1 - Absortividade molar
Alaranjado de metila
 A partir da tabela apresentada anteriormente, obteve-se a seguinte curva analitica:

Figura 1 - Curva analitica

Alaranjado de metila

Considerando a curva analítica obtida pode-se concluir que a precisão da análise foi
mediana, contendo algumas variações em determinados pontos da curva.

3.2 Análise para o Azul de metileno

A curva analítica do azul de metileno é dada pela relação entre: o comprimento de

onda utilizado para a leitura do espectrofotômetro e a absortividade molar da amostra em
análise. Os dados obtidos são expressos na tabela abaixo:
Comprimento de onda (nm) Absortividade molar

700 0,112

685 0,381

670 1,106

655 1,177

640 0,830

625 0,699

610 0,627

595 0,472

580 0,304

565 0,194

550 0,130

535 0,084

520 0,062

505 0,06

490 0,055

475 0,048

460 0,035

450 0,030
Tabela 2 - Absortividade molar
Azul de metileno
 A partir da tabela apresentada anteriormente, obteve-se a seguinte curva analitica:

Figura 2 - Curva analitica

Azul de metileno

Considerando a curva analítica obtida pode-se concluir que a precisão da análise foi
consideravelmente alta, com poucas variações na curva, resultando em um ótimo modelo.

3.3 Análise da substância desconhecida (verde de metileno)

A curva analítica do verde de metileno é dada pela relação entre: o comprimento de

onda utilizado para a leitura do espectrofotômetro e a absortividade molar da amostra em
análise. Os dados obtidos são expressos na tabela abaixo:
Comprimento de onda (nm) Absortividade molar

440 0,322

455 0,328

470 0,337

485 0,310

500 0,249

515 0,180

530 0,118

555 0,109

560 0,124

575 0,172

590 0,256

605 0,394

620 0,427

635 0,485

650 0,677

665 0,839

680 0,48

690 0,222

700 0,106
Tabela 3 - Absortividade molar
verde de metileno
 A partir da tabela apresentada anteriormente, obteve-se a seguinte curva analitica:

Figura 3 - Curva analitica

Verde de metileno

Considerando a curva analítica obtida pode-se concluir que a precisão da análise foi
mediana, contendo algumas variações em determinados pontos da curva.

3.4 Análises complementares

A tabela a seguir apresenta a absortividade molar e comprimento de onda de máxima

absorção para cada amostra analisada.

Componente analisado Comprimento de onda de Absortividade molar

máxima absorção

Alaranjado de metila 465nm 0,669

Azul de metileno 665nm 1,029

Verde de metileno 665nm 0,839

Tabela 4 - Análise das soluções analisadas

A tabela a seguir apresentará a absortividade molar para cinco soluções do alaranjado

de metila em diferentes concentrações para um mesmo comprimento de onda (465nm).
 ml de solução por 100ml de água Absortividade molar

1 0,421

1,4 0,466

2 0,669

2,4 0,824

3 0,920
Tabela 5 - Absortividade molar
Alaranjado de metila

A tabela a seguir apresentará a absortividade molar para cinco soluções do azul de

metileno em diferentes concentrações para um mesmo comprimento de onda (665nm) .

ml de solução por 25ml de água Absortividade molar

0,1 0,241

0,2 0,561

0,3 1,029

0,4 1,093

0,5 1,414
Tabela 6 - Absortividade molar
azul de metileno
 4. CONCLUSÃO
A partir das práticas realizadas, pode-se comparar a absorbância de diferentes
amostras utilizando-se de um mesmo método (Espectrofotometria UV-Vis). Este método
mostrou-se apropriado para tais medições, entretanto a falta de experiência com o mesmo ou
uma possível mal calibração de equipamentos resultaram em alguns dados experimentais
insatisfatórios.
É notório como os dados experimentais obtiveram uma boa precisão na medição para
o Azul de Metileno e Para o verde de metileno e o alaranjado de metila os dados obtidos
aparentam estar em um meio termo, apresentando uma precisão mediana, com algumas
variações em certos valores.
 5. REFERÊNCIAS

BARROS, Juan A. V. de A. Uso de imagens digitais para a determinação da concentração e

do comprimento de onda de analitos de interesse ambiental. Universidade Federal de Alfenas.
Alfenas Minas Gerais, 2013.

SKOOG, D.A. Princípios de Análise Instrumental, Porto Alegre: Bookman, 2009.