UNIVERSIDADE COMUNITÁRIADA REGIÃO DE CHAPECÓ-UNOCHAPECÓ

Curso de Engenharia Química

Disciplina: Análise Instrumental
Docente: Jacir Dal Magro

Validação de Método por Espectrofotometria UV-Vis - Determinação de conservadores

em alimentos por espectrometria de absorção ultra-violeta.

Gabriel Fante
João Grando
Rodrigo Filho
Tiago Barreto
Vinicius David

CHAPECÓ, 2020
 1. INTRODUÇÃO

A Espectrofotometria UV-VIS é definida como uma técnica analítica capaz de

determinar a presença ou concentração de um analito de interesse, baseando-se em medidas
de absorção e transmissão de radiação eletromagnética, nas regiões ultravioleta e visível do
espectro eletromagnético.

Figura 1 – Frequência de cada onda.

Fonte: Adenilson Giovani, 2014.

Espectrofotômetros UV-VIS são instrumentos capazes de registrar dados de

absorbância ou transmitância em função do comprimento de onda emitidos pelo elemento
de interesse. Este registro é chamado de “espectro de absorção” ou “espectro de
transmissão”. A capacidade (ou não) de absorção é diferente para cada espécie química
dentro de um específico comprimento de onda, sendo assim, possível a identificação de
um composto químico através de seu “espectro de absorção”.
Espectrofotometria na região do ultravioleta-visível (UV-Vis) A absorção de energia
depende da estrutura eletrônica da molécula, e por isso, a espectroscopia de absorção na
região do UV-Vis tem ampla aplicação na caracterização de uma série de propriedades
de diversas espécies orgânicas e inorgânicas. Como a energia absorvida é quantizada, o
espectro de uma única transição eletrônica deveria corresponder a uma linha discreta. Esta
previsão não se confirma, uma vez que a absorção eletrônica se sobrepõe a subníveis
rotacionais e vibracionais; assim, um espectro de UV-Vis tem o aspecto de uma banda
larga. (Harris, 2008).
Para a maioria das técnicas analíticas cromatográficas, utiliza-se uma relação linear
representada pela função

y = ax ± b
 onde:
y = variável dependente, corresponde a resposta do detector, no gráfico está nas
ordenadas
(eixo y).
x = variável independente, corresponde no gráfico a concentração da amostra em
estudo;
a = coeficiente angular, expressa a inclinação do gráfico em relação aos eixos;
b = coeficiente linear, expressa a intersecção do gráfico com o eixo y.

Uma expressão mais conveniente para a intensidade da luz, neste caso, é obtida
através da lei de Lambert-Beer, que diz que a fração de luz absorvida por cada camada da
amostra é a mesma. Ou seja, estabelece que absorbância é diretamente proporcional ao
caminho (b) que a luz percorre na amostra, à concentração (c) e à absortividade (ε):

2. OBJETIVO.
Este trabalho tem como objetivo determinar o ácido benzóico pelo método de
Espectrofotometria UV, que por sua propriedade antimicrobiana é muito utilizado na
indústria alimentícia como conservante.

3. METODOLOGIA.

3.1 Preparo da amostra

Pesou-se 50 g de suco(Tampico) para a amostra 1 e 50g de isotônico(Power Ade)
para a mostra 2, as amostras seguiram os mesmos passos a partir daí, transferiu-se para
um funil de separação, adicionando 25 mL da mistura de éter etílico(50%) éter de
petróleo(50%) e 4 mL de ácido fosfórico 4N, após separar as 2 partes retirou-se a inferior
para uma segunda extração com 25ml da solução estérea.
Em seguida obteve-se uma solução estérea para cada amostra, estas foram
transferidas para beckers de 100 ml e adicionado sulfato de sódio anidro até o mesmo se
desprender do fundo do becker. Prontamente passou-se as soluções para seus balões de
evaporação devidamente identificados e levou-se para evaporar no rotaevaporador até
secar toda a solução a uma temperatura controlada não superior a 40°C. Obtendo o ácido
benzóico nas paredes do balão adicionou-se 50 ml álcool etílico para retirar o resíduo em
seguida diluiu-se uma alíquota de 1:25 com a ajuda de um balão volumétrico de 25 ml.
Utilizou-se uma microplaca de quartzo de 98 poços para fazer o espectro UV no
espectrofotômetro nas frequências de 210 a 320 nm da solução padrão de 0,5mg/100ml,
determinou-se o comprimento de onda de máxima absorção e realizou-se a leitura de
todas as outras soluções, confirmou-se a linearidade da curva de concentração e
prosseguiu-se com a análise das demais amostras.
4. RESULTADO E DISCUSSÕES.
 5. CONCLUSÃO.

A espectrofotometria é um importante mecanismo usado nos dias de hoje e facilita a

leitura de substâncias para descobrirmos de qual substancia se trata e sua precisão. É
importante perceber de que forma essas substâncias se comportam no aparelho para
compararmos e verificarmos erros. Nos testes feitos verificamos que é possível calcularmos
a partir da absorbância da amostra sua concentração ou vice versa, para termos noção se a
amostra está dentro de uma concentração razoável ou do indicado no rótulo.

6. REFERÊNCIAS.
Adenilson Giovani, 2014 em https://adenilsongiovanini.com.br/blog/espectro-
eletromagnetico/espectro-eletromagnetico/

Daniel C. Harris, Análise química quantitativa; LTC, 2008, ISBN 8-521-61625-2

SKOOG, D.A., 2009. Princípios de Analise Instrumental, Porto Alegre:Bookman.