Sede: Escola Secundária de Mem Martins

Escola Básica Maria Alberta Menéres; EB1/JI de Mem Martins 2; EB1/JI Serra das Minas 1

Curso Profissional de Técnico de Análises Laboratoriais

Relatório do Trabalho Experimental

Determinação dos parâmetros analíticos do alaranjarado de metilo

por espetrofotometria UV-VIS

Nome: Fábia Almeida____________________________________________ Ano letivo: 2021/2022

Data de entrega: 26/01/2022

 Índice

I. Objetivos 2

II. Introdução Teórica 3

Espetros de absorção 4
Lei de Lambert-Beer 5
Espetrofotômetro 6
Alaranjado de metilo 7

III. Materiais e Reagentes 8

IV. Procedimento 9
V. Pré-cálculos 10
VI. Resultados Experimentais 12
VII. Cálculos 13
VIII. Conclusão 14
IX. Discussão 15
X. Referências Bibliográficas 16

Nome: Fábia Almeida, 12ºCPTAL

Nome: Fábia Almeida, 12ºCPTAL
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I. Objetivos

Determinar os parâmetros analíticos do alaranjado de metilo utilizando o espetrofotómetro UV-

VIS.

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II. Introdução Teórica

A espetrofotometria é uma técnica de análise ótica quantitativa que se fundamenta na interação

de absorbância da radiação eletromagnética com a matéria. É um método utilizado para medir o
quanto uma substância química absorve a luz, medindo a intensidade quando um feixe de luz
atravessa a solução da amostra. Sendo possível identificar os compostos químicos e/ou
determinar a concentração de uma solução. Este método é muito utilizado nas áreas de biologia,
físico-química, nas indústrias e nas análises clínicas.

Se no percurso de luz incidente for interposta uma amostra, parte da radiação pode ser absorvida
e convertida em energia térmica e outra parte pode ser reemitida com ou sem variação de
comprimento. Ao fazer incidir na amostra em estudo um feixe de radiação paralela num dado
comprimento de onda de intensidade I0, acontece que ao atravessar a espessura da amostra a
intensidade da radiação é reduzida para o valor I devido à absorção da radiação.

Esta medição pode ser feita numa gama muito larga do espetro eletromagnético, se for no
espetro visível trata-se da fotometria de absorção na zona do visível, caso não seja trata-se da
fotometria de absorção fora da zona do visível.

Figura 1 - Espetro eletromagnético

Figura 2 - Cubeta

Em todos os casos são sempre fornecidas informações qualitativas e dados quantitativos numa
vasta zona de concentrações.

Quando a luz branca, ou também designada luz composta, passa

por um prisma ótico, observa-se a dispersão da luz que consiste
na separação das diferentes cores que a formam, dando origem
ao espetro de luz visível, e assim aparecendo colorido ao olho
humano.
Determinados comprimentos de onda são absorvidos e ao olho
humano chega a fração de luz transmitida que é complementar
da que é absorvida.
Figura 3 – Cores primárias da luz
branca
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Espetros de absorção:
Depois de a solução ser submetida a várias leituras de absorvância ao longo de vários
comprimentos de onda, passamos a ter informações referentes à capacidade do composto em

absorver a luz. A representação gráfica dos valores de contra a absorvância é denominada de

espetro de absorção.

Estes espetros resultam da interposição de uma

determinada substância entre uma fonte de luz e um
prisma. Também é uma forma de permitir a
verificação de qual a faixa de comprimento de onda
em que um dado composto apresenta sua maior
afinidade de absorção.
Figura 4 - Exemplos de espetros de absorção

 Espetro de absorção contínuo: obtém-se quando se intercala uma amostra de uma

substância entre o foco de radiação e o prisma.

 Espetro de absorção descontínuo: obtém-se quando se intercala uma substância

elementar, no estado gasoso, entre a fonte de radiação e o prisma.

Transmitância:
A transmitância (T) é a quantidade de energia radiante transmitida pela solução. Quando um raio
de luz de intensidade inicial incide sobre uma solução corada, a intensidade da luz emergente é
menor que a luz incidente, pois parte da luz foi absorvida. Sendo o quociente entre a intensidade
da radiação transmitida (I) e a intensidade da radiação incidente (I0).
I
T=
Io
Absorvância:
A absorvância (A) é a quantidade de energia radiante absorvida pela solução. Mede-se a
intensidade de luz absorvida por uma solução corada pela redução da medida da intensidade da
luz transmitida.

Como a absorvância não é uma quantidade medida diretamente, vejamos que:

 A absorvância de uma solução é inversamente proporcional à transmitância.
Quando a absorvância aumenta, a transmitância diminui.

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 Além disso, é diretamente proporcional à concentração da amostra e é o simétrico do

logaritmo de transmitância.
A = -log T

Transmitância e Absorvância:
Estas tendem a ser grandezas complementares, sua soma, com a mesma energia e comprimento
de onda incidente, será sempre igual a 1 ou 100%.

Uma solução que não absorva qualquer radiação apresenta valores:

T = 1(100% T) e A = 0 (0% A)

Uma solução que absorva completamente a radiação apresenta valores:

T = 0(0% T) e A = 1(100% A)

Deste modo, quanto maior for a fração de um determinado comprimento de onda que é
absorvido, menor será a percentagem de luz transmitida, sendo essa percentagem medida pela
grandeza transmitância (T).
I
T(%) = x 100
Io

Lei de Lambert-Beer:
A lei de Lambert-Beer afirma que a concentração de uma substância é diretamente proporcional
à quantidade de luz absorvida ou inversamente proporcional ao logaritmo de transmitância,
existindo uma expressão matemática:
A = 𝓵c
Onde:
A – Absorvância
 - Absortividade molar (L mol-1 cm-1)
𝓵 – Espessura da amostra (cm)
c – Concentração (mol L-1)

Na prática laboratorial, a aplicação desta lei é feita pelos espetrofotômetros, onde são lidas as
absorvâncias de uma solução teste e de uma solução padrão de concentração conhecida.

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Espetrofotômetro:
O espetrofotômetro é um instrumento de análise, utilizado
em laboratórios, capaz de medir e comparar a quantidade
de luz absorvida, transmitida ou refletida por uma
determinada amostra, seja solução, sólido transparente ou
sólido opaco. Ou seja, ele é usado para identificar e
determinar a concentração de substâncias.

Figura 5 – Espetrofotômetro
Existe dois tipos de espetrofotômetros, o de feixe simples
e o de duplo feixe, e eles são constituídos por algumas componentes principais:
 Fontes de radiação
 Monocromador
 Porta-amostras
 Detetores
 Indicador de sinal

Figura 6 - Esquema do funcionamento de um espetrofotômetro UV-VIS

O resultado da espetrofotometria é dado por um gráfico chamado espetro e fornece informações

de intensidade por comprimento de onda da fonte de luz. Essa faixa de comprimentos de onda
pode ser selecionada antes da realização das medidas, assim torna a medida mais específica e
eficaz evitando números excessivos de dados para obter o resultado esperado.

Os espetrofotômetros mais sofisticados cobrem uma gama de luz entre 200 nm e 2500 nm, que
são raios ultravioleta a infravermelho. Porém, a faixa de comprimentos de onda da radiação
eletromagnética mais utilizada é, aproximadamente, entre 350 nm e 750 nm, ou seja, o espetro
de luz visível. Para que não haja nenhum erro nos resultados obtidos e que as medidas feitas no
espetrofotômetro sejam precisas, devemos sempre fazer a calibração do instrumento utilizando
padrões conhecidos, por exemplo, o da água.

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Alaranjado de metilo:
O alaranjado de metilo é um indicador de pH principalmente usado em titulações de ácidos. Ele é
escolhido devido à sua clara mudança de cor na faixa de pH mediamente ácido. Este indicador
não tem um largo espetro de mudança de cores, mas tem um bom definido ponto final, diferente
do indicador universal.

Fórmula química: C 14 H 14 N 3 NaO 3 S

Figura 8 - Estrutura química do indicador

Figura 7 - Alaranjado de metilo no estado sólido

III. Material e Reagentes

Materiais:

 Espetrofotómetro UV-VIS

 Pipeta volumétrica de 10 mL;

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 Balão volumétrico de 100 mL;

 6 Balões volumétrico de 25 mL;

 Funil;

 Pipetas de beral;

 Esguicho;

Reagentes:

 Alaranjado de metilo 0,1%

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IV. Procedimento

1. Procedimento da preparação da solução mãe de alaranjado de metilo 100 mg/L:

Retirar 10 mL da solução original de 0,1% e diluir em 100 mL.

2. Preparação das 6 diluições de diferentes concentrações a partir da solução mãe:

Foram feitas seis diluições de concentrações desde 7 a 12 mg/L em 25mL. Retirando uma certa

quantidade de volume da solução-mãe já anteriormente calculada.

3. Realização da varredura das soluções no espetrofotómetro:

A varredura de todas as soluções foram deitas num comprimento de onda máximo de 464 nm,

encontrado no protocolo experimental.

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V – Pré-cálculos:

Preparação da solução-mãe de corante 100 mg/L:

c = 100 mg/L  100 x 10−3 g/L

−3
100 x 10 g ------- 1000 mL
x ------- 100 mL

−3
x=
100 x 10 x 100
= 0,01 g
1000

c = 0,1% (corante)

0,1g -------- 100 mL

0,01g -------- x

0,01 x 100
x= = 10 mL
0,1

Preparação das diluições:

1ºDiluição  c = 7 mg/L 2ºDiluição  c = 8 mg/L

v = 25 mL v = 25 mL

7 mg -------- 1000 mL 8 mg -------- 1000 mL

x --------- 25 mL x --------- 25 mL

7 x 25 8 x 25
x= = 0,175 mg x= = 0,2 mg
1000 1000

100 mg -------- 1000 mL 100 mg -------- 1000 mL

0,175 mg ------ x = 1,75 mL 0,2 mg --------- x = 2,0 mL

3ºDiluição  c = 9 mg/L 4ºDiluição  c = 10 mg/L

v = 25 mL v = 25 mL

9 mg -------- 1000 mL 10 mg -------- 1000 mL

x --------- 25 mL x --------- 25 mL

9 x 25 10 x 25
x= = 0,225 mg x= = 0,250 mg
1000 1000

100 mg -------- 1000 mL 100 mg -------- 1000 mL

0,225 mg ------ x = 2,25 mL 0,250 mg ------ x = 2,5 mL

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5ºDiluição  c = 11 mg/L 6ºDiluição  c = 12 mg/L

v = 25 mL v = 25 mL

11 mg -------- 1000 mL 12 mg -------- 1000 mL

x --------- 25 mL x --------- 25 mL

11 x 25 12 x 25
x= = 0,275 mg x= = 0,3 mg
1000 1000

100 mg -------- 1000 mL 100 mg -------- 1000 mL

0,275 mg ------ x = 2,75 mL 0,3 mg --------- x = 3,0 mL

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VI – Resultados experimentais

Após medir a absorvância de cada diluição num comprimento de onde de 464 nm, fizemos a
tabela e um gráfico com os valores obtidos. *A absorvância da diluição 3 foi retirada do gráfico
por ficar muito distante da reta de calibração.

A equação obtida foi y = 0,0405x - 0,02 e o R² = 0,9766.

Volume Solução-
Diluições Concentração mg/L Absorvância
mãe
1 7 1,75 mL 0,268
2 8 2,0 mL 0,292
3* 9 2,25 mL 0,385
4 10 2,5 mL 0,388
5 11 2,75 mL 0,443
6 12 3,00 mL 0,452
Total   14,25 mL  
Tabela I. Absorvância obtido pelo espetrofotômetro

Reta de calibração
0.5

0.45 f(x) = 0.0404767441860465 x − 0.0199767441860466

R² = 0.976597261579389

0.4
Absorvância

0.35

0.3

0.25
6 7 8 9 10 11 12 13
Concentração (mg/L)

Gráfico 1. Regressão Linear em relação ao alaranjado de metilo

Absorvância da solução problema:

Diluição Absorvância
Solução
0,354
Problem

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 13

a
Tabela II. Absorvância obtido pelo espetrofotômetro da solução problema

VII – Cálculos

Cálculo da solução problema:

Equação da reta: y = 0,0405x - 0,02 (y = ax + b)

0,354 = 0,0405x - 0,02

 0,0405x = 0,354 + 0,02
0,374
x= = 9,235 mg/L
0,0405

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VIII. Conclusão

Depois da análise espetrofotométrica das diluições, foi nos dado uma solução mistério de corante
alaranjado de metilo onde tínhamos de determinar a sua concentração. Para a calcular usou-se a
equação da reta de calibração do gráfico 1, que nos deu uma concentração de c = 9,235 mg/L.

Figura 1 - Diluições utilizadas

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IX. Discussão

Antes de utilizar um espetrofotômetro deve-se sempre fazer uma calibração, pois é importante
para que obtenhamos medidas precisas no aparelho.

Também é muito importante ao colocar a amostra, não tocar na parte transparente da cubeta
para que as manchas dos dedos não alterem a leitura do equipamento. O ideal é pegar na parte
superior e opaca da cubeta. Para que um espetrofotômetro funcione corretamente, deve ser
aquecido antes de usar e dependendo do dispositivo demora cerca de 10 a 30 minutos para
aquecer.

Nas diluições para efetuarmos uma medição correta, devemos colocar o olho ao nível da
superfície do líquido no menisco dos balões volumétricos e podemos ainda acertar com a ajuda de
uma pipeta de beral.

Devemos usar aparelhos para medições rigorosas com uma boa exatidão e precisão, como a
balança analítica, pipetas volumétricas e balões volumétricos, para que coincide com o valor
verdadeiro da grandeza a medir, mesmo assim pode ser difícil porque muitas vezes
desconhecemos o valor verdadeiro.

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X. Referências bibliográficas

Protocolo Original: http://www.abq.org.br/entequi/2011/trabalhos/1/1-18-10940.htm

https://kasvi.com.br/espectrofotometria-analise-concentracao-solucoes/

https://pt.wikipedia.org/wiki/Espectrofot%C3%B4metro

https://pt.wikipedia.org/wiki/Alaranjado_de_metila

E apontamentos fornecidos no ano passado.

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