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Soluções
Soluções
Volume : 1 litro
Tris base: 121,11g
Ajustar pH /,65 c/ HCl (= 4 ml).
q.s.p. 1000 ml c/ ddH2O.
Autoclavar.
2- TRIS 1M pH 8,0
Volume: 1 litro
Tris base: 121,11g
Ajustar pH 8,0 c/ HCl (=42 ml).
q.s.p. 1000 ml c/ ddH2O.
3- TRIS 1M pH 7,5
Volume: 100 ml
Tris base: 12,11g
Ajustar pH 7,5 c/ HCl (= 5,0 ml).
q.s.p. 100 ml c/ H2O.
Autoclavar e estocar em alíquotas.
6- NaCl 5,0M
Volume: 100 ml
NaCl: 29,22g
q.s.p. 100 ml com ddH2O.
Autoclavar.
7- MgCl 5,0M
Volume: 100 ml
MgCl2.6H2O: 20,33g
q.s.p. 100 ml.
Autoclavar.
8- DTT - DITHIOTHREITOL
Volume: 5 ml
DTT: 0,773g
q.s.p. 5 ml com água estéril.
Aliquotar em microtubos e estocar a -20ºC.
15- NaOH 1M
Volume: 100 ml
NaOH: 4g
q.s.p. 100 ml c0m ddH2O estéril.
* Estocar em frasco plástico.
17- NaOH 3M
Volume: 100 ml
NaOH: 12 g
q.s.p. 100 ml com ddH2O.
Estocar em frasco de plástico.
22- CaCl2 1M
Volume: 50 ml
CaCl2: 7.35g
q.s.p. 50 ml ddH2O.
Autoclavar.
31- STE ( TRIS HCl pH 8,0 10 mM/NaCl 100 mM/ 1mM EDTA pH
8,0 )
Volume: 50 ml
0,5 ml Tris HCl 1M pH 8,0
0,1 ml EDTA 0,5M pH 8,0
1,0 ml NaCl 5M
q.s.p. com ddH2O 50 ml.
32- SALINA 0,85%
Volume: 100 ml
10 ml salina 10X conc.
90 ml ddH2O estéril.
43- X-GAL 4%
Volume: 100 l
(5-BROMO-4-CLORO-3-INDOLYL-D-GALACTOSIDEO)
4 mg X-gal.
0,10 ml DMF (DIMETILFORMAMIDA).
Preparar pouco tempo antes de usar. Usar no escuro.
47- PEG/NaCl
(20% Polyethylene Glycol 6000 / NaCl 2,5 M)
Volume: 50 ml
10 g de Polyethylene Glycol 6000
25 ml NaCl 5M
q.s.p. com ddH2O estéril 50 ml.
Autoclavar e estocar a 4ºC.
48- TAE 50 X
Volume: 1 litro
242 g de TRIS BASE
57,1 ml Ácido Acético Glacial
100 ml de EDTA 0,5M pH 8,0
q.s.p. com ddH2O 1000 ml.
Autoclavar.
50- BCIP
50 mg BCIP
1 ml de DIMETILFORMAMIDA (DMF)
Armazenar a 4ºC.
51- NBT
75 mg NBT
1 ml DMF 70% em ddH2O.
53- DENHARDT'S 20 X
( BSA 0,2% / PVP 0,2% / FICOLL 400 0,2% )
Volume: 50 ml
0,2 g BSA (ALBUMINA DE SORO BOVINO)
0,2 g PVP (POLIVINILPERROLIDONA)
0,2 g FICOLL 400
q.s.p. com ddH2O estéril 50 ml.
Estocar a -20ºC.
54- 10 X SSPE
(NaCl 1,8M / NaHPO4.2H2O 50 mM / NaH2PO4.H2O 50mM / EDTA pH 8,0 10
mM)
10,52 g NaCl
0,89 g NaHPO4.2H2O
0,69 g NaH2PO4.H2O
2,0 ml EDTA 0,5M pH 8,0
Ajustar pH 8,0 com HCl ou NaOH.
q.s.p. com ddH2O 100 ml.
Autoclavar.